降血壓藥物3-烷氧基-芒果苷、合成及應用的製作方法

2023-05-27 21:59:31

專利名稱：降血壓藥物3-烷氧基-芒果苷、合成及應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一類新化合物及其醫藥用途，具體涉及一類新的化學物質，3-烷氧基-芒果苷
衍生物。
背景技術：
芒果苷(mangiferin)，又稱莞知母寧，是從芒果葉，以及知母的根莖、地上部分等中提取 出來的一種雙苯吡酮類化合物。臨床上主要用於慢性支氣管炎，肝炎等疾病的治療用藥。近年 來的藥理研究發現，芒果苷及其某些結構衍生物具有平川止咳祛痰、免疫、抗菌、抗炎、保肝 利膽、抗氧化、降血壓、降血糖、降血脂、延緩衰老等多重藥理活性(BiolPharmBull，2001，24(9): 1009- 10")。天然化合物經過結構修飾後，其生物活性往往會發生較大的變化。對芒果苷的構 效關係研究結果表明，在芒果苷分子的三個酚羥基上引入烷基後，形成3,6, 7-^三取代芒果苷 衍生物，部分化合物的活性增強(華西藥學雜誌，2008， 23(4): 3S5 387);在分子的三位引入鈉 離子，形成芒果苷一3-鈉鹽，其生理活性也增加(吋珍國醫國藥，2008， 19 (4) : 816)。但是， 到y前為止，在分子的3位引入垸基，以及引入垸基後的生理活性方面的研究工作，尚未見報 道。

發明內容
本發明的目的在於提出3-垸氧基-芒果苷衍生物，公開其抑制血管緊張素轉化酶(ACE)方 面的用途，該類化合物的降向.壓效果明顯高於芒果苷。
本發明涉及一類新的化學物質，3-烷氧基-芒果苷，其分子結構式如下formula see original document page 3
其中，]^C,、H2n+l， n=l~18 。 3-烷氧基-芒果苷的合成方法如下
(1)、以一甲基甲醯胺(DMF)為反應溶劑，將芒果苷加入到20倍量m/V的DMF中,升溫溶解後，將與芒果苷等摩爾比的碳酸氫鈉與滷代垸，在1小時內攪拌下分批次的加入到上 述二甲基甲醯胺與芒果苷的反應溶液中，混合均勻後，回流反應1 8小時；
(2)、反應完成後，冷卻到室溫，加入5%的碳酸鈉溶液析出沉澱，沉澱為3-垸氧基-芒果 苷粗品，過濾，沉澱依次用水、石油醚、三氯甲烷洗滌，得到較純的3-垸氧基-芒果苷；最後 將較純的3-烷氧基-芒果苷過矽膠柱，用二氯甲烷和甲醇洗脫，減壓蒸餾得3-烷氧基-芒果苷純品。
上述合成工藝獲得的3-十二烷氧基-芒果苷的結構表徵結果如下
黃色粉末狀固體，微溶於稀甲醇，R產0.34，收率:64.0%。 m.p.二 143-147 t ; UV (CH3OH) Xmax: 438,350,243 ;IR(KBr)v: 3071(CH&)、 2929 and 2856(CH)、 1605(Ar)、 1520(C=N)、
1463andl352 (CH) 、 1283--1016(C-O)、 730((-CH2-)n， n^4)cm";'H蘭RS (ppm) : 13.6 (s， H)、 10.79 (s， 11)、 9.74 (s， H)、 7.41 (s, H)、 7.14 (s， H)、 6.47 (s， H)、 4.86 (s，2H)、 4.60( s, H); 4.22 (s， H， )、 4.11 (s，2H)、 3.90 (s， H)、 2.73 (s， 4H)、 1.98 (s， 2H)、 1.62-1.43 (m， 19H)、 0.85 (s， 4H)、 13CNMRS(ppm) : .178.889、 174.852、 162駕、157.427、 152.122、 149.338、 143.028、 113.053、 109.122、 108.288、 100.412、 96.809、 96.097、 80.586、 79.357、 74.708、 70.392、 70.166、 68.531、 60.740、 31.336、 29.059、 28.753、 28.545、 25.492、 22.130、
13.993。
對比芒果苷和3-十二烷氧基-芒果苷的結構表徵數據發現，修飾後的芒果苷分子中，3 —十 二垸氧基芒果苷分子中3位質子消失，新出現烷基相應的峰。表明合成的確實是3-十二烷氧基-
芒果苷。
利用同樣的光譜數據，可以證明按照上述方法可以合成其他的3-烷氧基-芒果苷。
該類化合物具有以下幾個特點
1、 3-烷氧基-芒果苷為第一次合成的新物質。
2、 對3-烷氧基-芒果苷，隨著衍生物的垸基鏈長度增加，其對ACE酶的抑制活性先增加， 然後下降，到3-十烷氧基-芒果苷時活性最高。
3、 本化合物收率高，價格低，具有極好的開發利用價值。 芒果苷是芒果葉和知母的主要降血壓活性成分。本發明發現，3-垸氧基-芒果苷的降糖活
性明顯卨於芒果苷，因此，將3-垸氧基-芒果苷做成降血壓的藥物片劑等劑型爭獨使用(後面 實施例中具體談比例，此處為宏觀表述，是否不用詳細？)，或者與其他降血壓藥物同時使用， 或者與其他屮藥和中成藥同時使用，其治療高血壓的效果將更好。因此3-烷氧基-芒果苷可以 作為一種治療高血壓的新原料藥開發利用。木發明化合物可以組合物的形式通過口服、注射或外用等給藥的方式用於相關疾病的患 者。用於口服時，可將其製成常規的固體製劑如片劑、粉劑、粒劑、膠囊等，製成液體製劑如 水油懸浮劑或糖漿等；用丁注射給藥時，可將其製成注射用溶液或油懸浮劑等；用於外用可以 製成貼膏或擦劑。以上各種劑型可以按照藥學領域的常規生產方法製備。
本發明化合物的施用量可根據用藥途徑、患者的年齡、體重、所治療疾病的類型和嚴重
程度等變化。
具體實施例方式
以下的實施例可以使本專業技術人員更全面地理解本發明，但不以此限制本發明。 實施例l: 3-十—烷氧基-芒果苷
製備方法如下
(1) 、以DMF為反應溶劑，將O.l摩爾芒果苷加入到2摩爾的DMF中，升溫到60。C溶 解後，在攪拌的條件下將0.1摩爾的碳酸氫鈉及0.1摩爾的溴代十二烷，在1小時內分批次的 加入到DMF與將芒果苷的反應溶液中，混合均勻後，回流反應5小時；
(2) 、反應完成後，冷卻到室溫，加入5°/。的碳酸鈉溶液析出沉澱，沉澱為3-十二烷氧基-芒果苷粗品，過濾，沉澱用水洗滌、離心，去掉上清液。逐滴加入二甲亞碸至沉澱剛好溶解， 然後依次用石油醚、三氯甲烷洗滌，得到較純的3-十一-烷氧基-芒果昔；最後將較純的3-十二烷 氧基-芒果苷過矽膠柱，用二氯甲烷和甲醇洗脫，收集洗脫液，減壓蒸餾得3-十二烷氧基-芒果 苷純品。
實施例2: 3 —辛氧基-芒果苷
formula see original document page 5製備方法如下
(1) 、以DMF為反應溶劑，將0.1摩爾芒果苷加入到100毫升DMF中，升溫到6(TC溶 解後，在攪拌的條件下將0.1摩爾的碳酸氫鈉及0.1摩爾的溴代十二烷，在I小時內分批次的 加入到DMF與將芒果苷的反應溶液中，混合均勻後，回流反應8小時；
(2) 、反應完成後，冷卻到室溫，加入體積百分比5%的碳酸鈉溶液析出沉澱，沉澱為3-辛氧基-芒果苷粗品，過濾，沉澱用水洗滌、離心，去掉上清液。逐滴加入二甲亞碸至沉澱剛 好溶解，然後依次用石油醚、三氯甲烷洗滌，得到較純的3-辛氧基-芒果苷；最後將較純的3-辛氧基-芒果苷過矽膠柱，用二氯甲垸和甲醇洗脫，收集洗脫液，減壓蒸餾得3-辛氧基-芒果苷 純品。
實施例3: 3—甲氧基-芒果苷HO.
H，O
製備方法如下
(1 )、以DMF為反應溶劑，將0.1摩爾芒果苷加入到100毫升DMF中，升溫到58'C溶 解後，在攪拌的條件下將O.l摩爾的碳酸氫鈉及O.l摩爾的溴代十二烷，在1小時內分批次的 加入到DMF與將芒果苷的反應溶液中，混合均勻後，回流反應l小時；
(2)、反應完成後，冷卻到室溫，加入體積百分比5%的碳酸鈉溶液析出沉澱，沉澱為3-甲氧基-芒果苷粗品，過濾，沉澱用水洗滌、離心，去掉上清液。逐滴加入二甲亞碸至沉澱剛 好溶解，然後依次用石油醚、二氯甲烷洗滌，得到較純的3-甲氧基-芒果苷；最後將較純的3-屮氧基-芒果—ff過矽膠柱，用二氯甲烷和甲醇洗脫，收集洗脫液，減壓蒸餾得3-甲氧基-芒果苷純;。
實施例4、 3-十二烷氧基-芒果苷片的製備
6稱取3-十二垸氧基-芒果苷10 g、球粒狀乳糖70 g、硬脂酸鎂15 g和微晶纖維素5 g，按照 片劑常規製備方法製得3-十二烷氧基-芒果苷片200片，每片含3-十二垸氧基-芒果苷50 mg。
實施例5、 3-十二垸氧基-芒果苷口服液的製備
稱取3-十二垸氧基-芒果苷10 g、吐溫-80 5 g和甜菊糖1 g，加水溶解並稀釋至1000 mL， 按照口服液常規製備方法製得3-十二垸氧基-芒果苷口服液200支，每支含3-十二烷氧基-芒 果苷50 mg。
下面將用3-十一烷氧基-芒果苷體外抑制ACE活性實驗及結果來說明其在製備降血壓藥物
屮的應用。
ACE酶活力研究方法
試劑與藥品馬尿醯-組氨醯-亮氨酸(HHL)，購自Sigma公司；血管緊張素轉化酶(ACE)， 購自Sigma公司；800/mg。 lmol/L硼酸緩衝液(pH8.3):硼酸6.18 g溶解於蒸餾水中，(硼 酸難溶，"r採用在超聲中溶解)，再稱取NaCl， 17.53 g溶解與硼酸一起溶解，加入NaOH調 節pH8.3定溶至1000 mL待用。HHL溶液取HHL適量，以0.1 mol/L硼酸緩衝液(pH8.3， 含0.3 mol/LNaCl)溶解配置成0.8 m mol/L的HHL溶液。酸標準液製備取馬尿酸標準品適 呆，用雙蒸水配黃不同濃度的馬尿酸標準液待用。抑制劑配置準確稱取合成抑制劑，加入 以上配製的0.1 mol/L硼酸緩衝液，配製1 mg/mL的樣品溶液。HPLC分析:流動相A相: 雙蒸水+0.1%二氟乙酸，B相甲醇+0.1%二氟乙酸(TFA);流速lml/min，檢測波長228 nm， 進樣量20nL。洗脫條件八相40%， B相60。/0。
抑制試驗
馬尿酸標準曲線的製作稱取馬尿酸溶於0.1 mol/L硼酸緩衝鹽溶液中配置成不同濃度的 馬尿酸標準品，並採用上述高效液相色譜法測定其峰面積值。每個濃度測定值均做三次重複， 並取得其平均值。採用馬尿酸濃度(叫/mL)做橫坐標，峰面積值(mAU.S)為縱坐標，進行 線性回歸併得到回歸方程。ACE抑制活性的測定加液方式
反應液PH 8.3硼酸緩衝液10uI+HHL 25ul+抑制藥20ul 陽性對照PH 8.3硼酸緩衝液50ul+HHL 25ul 以此加入上述試劑後加入ACE酶20ul，反應總體積為75 pL，在37'C恆溫水浴加熱50 min 後取出，加入200 的1M HC1終止反應，在微量高速離心機巾採用10 000 r/min離心10min，
7得到上清液採用20 進樣，測定ACE的活性。表4-1 ACE體外抑制活性測定方法試劑對照空白樣品HHL2525250.1M硼酸緩衝液503010(pL)Peptide0020在37'C水浴中預熱5:minACE粗提物(nL)02020在37'C水浴中反應50minlmol/LHCl (pL)200200200抑制劑對ACE活性的抑制率計算公式為R= (A-B) /Axl00%式中，R為ACE抑制劑樣品對ACE的抑制率(％); A為空白對照組中馬尿酸的峰面積 (mAU.S); B為添加ACE抑制劑樣品中馬尿酸的峰面積(mAU.S)。結果見表l，由表可知，3-烷氧基-芒果苷對ACE活力抑制率均明顯高於芒果苷，且隨 著烷基鏈長度增加，ACE活力抑制率逐漸增加，至癸基時達到最高值，之後隨著垸基鏈長度繼 續增加，ACE活力抑制率又逐漸降低。表2、部分3-烷氧基-芒果苷體外抑制ACE活性實驗結果化合物 ACE活力抑制率(％)芒果苷03-甲氧基-芒果苷3-乙氧基-芒果苷103-丁氧基-芒果苷303-己氧基-芒果苷503-辛氧基-芒果苷703-十烷氧基-芒果苷803-十二烷氧基-芒果苷703-十四烷氧基-芒果苷603-十六烷氧基-芒果苷523-十八烷氧基-芒果苷40基於上述實驗結果，可得出如下結論與芒果苷相比，本發明的3-烷氧基-芒果苷具有更 強的抑制ACE活性，可以作為活性成分，單獨使用或與其它具有藥理活性的化合物和/或提取 物組成複方使用，並與藥學上可接受的載體按照藥學領域的常規製劑方法製成各種劑型(如片 劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、口服液、糖漿或注射液等)的降血壓藥物，再通過適當的途徑施 用，以達到高效、安全地治療高血壓的目的。最後說明的是，以上實施例僅用以說明本發明的技術方案而非限制，儘管通過參照本發 明的優選實施例已經對本發明進行了描述，但本領域的普通技術人員應當理解，可以在形式上 和細節上對其作出各種各樣的改變，而不偏離所附權利要求書所限定的本發明的精神和範圍。
權利要求
1、3-烷氧基-芒果苷，其分子結構式如下其中，R＝CnH2n+1，n＝1～18。
2、 合成權利要求1所述的3-垸氧基-芒果苷的方法，其特徵在於步驟如下(1) 、以二甲基甲醯胺為反應溶劑，將芒果苷加入到20倍量m/V的二甲基甲醯胺中，升溫到6(TC溶解後，加入與芒果苷等摩爾比的碳酸氫鈉與滷代烷，在1小時內攪拌下分批次的 加入到二甲基甲醯胺與芒果苷的反應溶液中，混合均勻後，回流反應1 8小時；(2) 、反應完成後，冷卻到室溫，加入休積百分比5%的碳酸鈉溶液析出沉澱，沉澱為3-烷氧基-芒果苷粗品，過濾，沉澱依次用水、石油醚、三氯甲烷洗滌，得到較純的3-烷氧基-芒 果苷；最後將較純的3-垸氧基-芒果苷過矽膠柱，用二氯甲垸和甲醇洗脫，減壓蒸餾得3-垸氧基 -芒果苷純品。
3、 權利要求1所述的3-垸氧基-芒果苷在抑制血管緊張素轉化酶及降血壓方面的應用。
全文摘要
本發明公開了具有如下通式的3-烷氧基-芒果苷，其中R為碳原子數為1-18的烷基；還公開了該3-烷氧基-芒果苷的製備方法和應用，由芒果苷、碳酸氫鈉和滷代烷在溶劑中回流反應製得，操作簡便易行，收率高，成本低；體外抑制血管緊張素轉化酶(ACE)活性實驗結果顯示，與芒果苷相比，3-烷氧基-芒果苷具有更強的抑制ACE酶活性，可以用於製備高效、安全的降血壓藥物，有著良好的應用前景。
文檔編號C07D407/04GK101648948SQ20091010418
公開日2010年2月17日 申請日期2009年6月26日 優先權日2009年6月26日
發明者葉小利, 李學剛 申請人:西南大學