用於治療銀屑病的方法

2023-05-28 06:44:46 3

專利名稱：：用於治療銀屑病的方法用於治療銀屑病的方法相關申請本申請要求2007年1月16日提交的美國臨時申請第60/880,767號、2007年2月27日提交的美國臨時申請第60/904,022號、2007年4月24日提交的美國臨時申請第60/925，960號、2007年7月24日提交的美國臨時申請第60/961,764號和2007年9月28日才是交的美國臨時申^"第60/997,012號的權益，上述每篇臨時申請的全文均在此併入作為參考。
背景技術：
：銀屑病是一種T細胞介導的炎性疾病，被認為是最常見的自身免疫性疾病之一，儘管全球發病率變化很大，但仍感染大約2%-3%的成人(StemR.S.,等，JInvestigDe畫to1SympProc2004,9:136-39;DavidsonA和DiamondB.NEnglJMed2001,345:340-50;LangleyR.G.B.,等,AnnRheumDis2005,64(S叩plII):iil8-23)。銀屑病對生活質量有著較大的影響(deKorteJ,等，JInvestigDermatolSympProc2004,9:140-7;KmegerG,等，ArchDermatol2001,137:280-4;FinlayAY和ColesEC,BrJDermatol1995,132:236-44)並與諸多心理和社會心理問題有關(KimballAB,等，AmJClinDermatol2005,6:383-92;RussoPA,等,AustralasJDermatol2004,45:155-9)。許多傳統的銀屑病療法具有毒副作用；因此，它們的長期使用受限(LebwohlM.和AliS.,JAmAcadDermatol2001,45:487-98;LebwohlM.和AliS.,JAmAcadDermatol2001,45:649-61)。此外，許多銀屑病患者對傳統療法並不滿意(SternRS,等，JInvestigDermatolSympProc2004,9:136-39;FinlayAY和OrtonneJP,JCutanMedSurg2004,8:310-20);因此，確實需要更安全且更容易使用並能長期採用的療法。白介素-12(IL-12)和相關的細胞因子IL-23是享有共同的p40亞基的IL-12細胞因子超家族的成員(AndersonEJR,等，SpringerSeminImmunopathol2006,27:425-42)。這兩種細胞因子都有助於銀屑病中II型輔助細胞(Thl)免疫應答的發展，但各自作用截然不同(RosmarinD和StroberBE,JDrugsDermatol2005,4:318-25;HongK,等，JImmunol7YawalkarN,等，JInvestDermatol1998,111:1053-57)。IL-12主要刺激Thl細胞分化並隨後分泌幹擾素-y,而IL-23則優先刺激幼稚T細胞分化成分泌IL-17(—種促炎症介質)的效應T輔助細月包(Th17)(RosmarinD和StroberBE,JDrugsDermatol2005,4:318-25;HarringtonLe,等，NatureImmunol2005,6:1123-32;ParkH,等NatureImmunol2005,6:1132-41)。在銀屑病皮損中IL-12p40和IL-23p40信使RNA過表達暗示用針對IL-12/23p40亞基蛋白的中和抗體抑制IL-12和IL-23可提供一種用於治療銀屑病的有效的醫療方法(YawalkarN,等，JInvestDermatol1998,111:1053-57;LeeE,等，JExpMed2004,199:125-30;ShakerOG，等，ClinBiochem2006,39:119-25;PiskinG,等，JImmunol2006,176:1908-15)。在本領域中顯然需要這樣的用於治療銀屑病的醫療方法。發明概述本發明提供了使用結合人IL-12和/或人IL-23的抗體或其抗原結合部分，用於銀屑病如慢性銀屑病的治療方法和組合物。在一個方面，本發明提供了一種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括每兩周一次、每周一次或單次劑量給予個體針對人IL-12和/或人IL-23的抗體或其抗原結合部分。在一個實施方案中，個體對每兩周一次、每周一次或單次劑量的抗體或其抗原結合部分維持一段持續時間，如至少約12周或至少約24周的應答。在另一個實施方案中，在每兩周一次、每周一次或單次劑量給予個體針對人IL-12和人IL-23的抗體或其抗原結合部分後，個體維持至少PASI75應答一段持續時間。在又一個實施方案中，在每兩周一次、每周一次或單次劑量給予個體針對人IL-12和人IL-23的抗體或其抗原結合部分後，個體維持至少PASI90應答一段持續時間。在再一個實施方案中，在每兩周一次、每周一次或單次劑量給予個體針對人IL-12和人IL-23的抗體或其抗原結合部分後，個體維持至少PASI100應答一l殳持續時間。在一個實施方案中，針對人IL-12和/或人IL-23的抗體的劑量為約200mg或約100mg。在一個實施方案中，銀屑病是斑塊型銀屑病(plaquepsoriasis)，如慢性斑塊型銀屑病。在另一個實施方案中，銀屑病是慢性銀屑病，如慢性斑塊型銀屑病。在又一個實施方案中，銀屑病是中重度銀屑病，如中重度斑塊型銀屑病、中重度慢性銀屑病或中重度慢性斑塊型銀屑病。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分經皮下給藥施用。在另一個方面，本發明提供了一種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括步驟(i)選擇患慢性銀屑病的個體；和(ii)給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體或其抗原結合部分；從而治療個體中的慢性銀屑病。在一個實施方案中，個體已具有至少6個月的銀屑病臨床診斷。在另一個實施方案中，個體已已患有至少2個月的穩定性斑塊型銀屑病。在又一個方面，本發明提供了一種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括步驟(i)選擇不具有選自下列的情況的個體之前經歷系統性或生物學抗-IL-12治療；非斑塊型銀屑病；在治療前不能停止局部銀屑病治療至少2周；在治療前紫外線B光療至少2周；在治療前補骨脂素-紫外線光療至少4周；在治療前系統性治療至少4周；在治療前生物治療至少12周；在治療過程中需要攝入口服或可注射的皮質激素類；在篩選前10年間需要住院的哮喘病情惡化；嚴重感染的感染或危險因素；除成功治療的基底細胞癌之外的惡性腫瘤史，如鱗狀細胞癌、或原位宮頸癌史；和對含免疫球蛋白G藥物如靜脈注射丙種球蛋白、融合蛋白或單克隆抗體的主要免疫反應史，如血清病或過敏樣反應；和(ii)給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體或其抗原結合部分；從而治療個體中的銀屑病。在又一個方面，本發明提供了一種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括步驟(i)選擇在1個月內沒有接種活病毒劑的個體；和(ii)給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體或其抗原結合部分；從而治療個體中的銀屑病。在再一個方面，本發明提供了一種治療個體中銀屑病的方法,所述方法包括步驟(i)給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體或其抗原結合部分；(ii)監測個體選自下列的臨床上顯著的異常實驗室結果天冬氨酸轉氨酶或丙氨酸轉氨酶>5倍正常值上限；血清總膽紅素>3倍正常值上限；血清肌酸酐〉3倍正常值上限；肌酸磷酸激酶>5倍正常值上限；血紅蛋白〈8g/dL;白細胞計數<2xio9/L;和血小板計數<75x109/L;和(iii)停止給予其中檢測到臨床上顯著的異常實驗室結果的個體抗體或其抗原結合部分；從而治療個體中的銀屑病。在一個實施方案中，每兩周一次給予抗體或其抗原結合部分。在另一個實施方案中，每周一次或以單次劑量給予抗體或其抗原結合部分。在一個實施方案中，以約100mg、110mg、120mg、130mg、140mg、150mg、160mg、170mg、180mg、190mg、200mg、210mg或220mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。在一個實施方案中，當p40亞基結合IL-12的p35亞基時，抗體或其抗原結合部分能結合該p40亞基的表位。在另一個實施方案中，當p40亞基結合IL-23的p19亞基時，抗體或其抗原結合部分能結合該p40亞基的表位。在又一個實施方案中，當p40亞基結合IL-12的p35亞基以及當p40亞基結合IL-23的p19亞基時，抗體或其抗原結合部分能結合該p40亞基的表位。在一個實施方案中，銀屑病是慢性銀屑病，如慢性斑塊型銀屑病，如中重度慢性斑塊型銀屑病。在另一個方面，本發明提供了一種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體或少PASI90應答一段持續時間，從而治療個體中的銀屑病.在一個實施方案中，持續時間為至少約12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23或24周。在一個實施方案中，每兩周一次給予抗體或其抗原結合部分。在另一個實施方案中，每周一次給予抗體或其抗原結合部分。在又一個實施方案中，以單次劑量給予抗體。在一個實施方案中，以約100mg、110mg、120mg、130mg、140mg、150mg、160mg、170mg、180mg、190mg、200mg、210mg或220mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。在一個實施方案中，銀屑病是慢性銀屑病，如慢性斑塊型銀屑病，如中重度慢性斑塊型銀屑病。在又一個方面，本發明提供了一種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體或10其抗原結合部分，其中個體在初次給予抗體或其抗原結合部分後維持歸零或最小的PGA等級一段持續時間，從而治療個體中的銀屑病。在一個實施方案中，持續時間位至少約12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23或24周。在一個實施方案中，每兩周一次給予抗體或其抗原結合部分。在另一個實施方案中，每周一次給予抗體或其抗原結合部分。在又一個實施方案中，以單次劑量給予抗體。在一個實施方案中，以約100mg、110mg、120mg、130mg、140mg、150mg、160mg、170mg、180mg、190mg、200mg、210mg或220mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。在一個實施方案中，銀屑病是慢性銀屑病，如慢性斑塊型銀屑病，如中重度慢性斑塊型銀屑病。在又一個方面中，本發明提供了一種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體8周顯示改善的PASI得分，從而治療個體中的銀屑病。在一個實施方案中，個體在初次給予抗體或其抗原結合部分後經約7周、約6周、約5周、約4周、約3周、約2周或約1周顯示改善的PASI得分。在一個實施方案中，每兩周一次給予抗體或其抗原結合部分。在另一個實施方案中，每周一次給予抗體或其抗原結合部分。在又一個實施方案中，以單次劑量給予抗體。在一個實施方案中，以約100mg、110mg、120mg、130mg、140mg、150mg、160mg、170mg、180mg、190mg、200mg、210mg或220mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。在一個實施方案中，銀屑病是慢性銀屑病，如慢性斑塊型銀屑病，如中重度慢性斑塊型銀屑病。在另一個方面，本發明提供了一種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體或其抗原結合部分，其中個體在停止給予抗體或其抗原結合部分後維持至少PASI50應答一段持續時間，從而治療個體中的銀屑病。在一個相關的方面中，本發明提供了一種治療個體中銀屑病的方或IL-23的p40亞基的表位的抗體或其抗原結合部分，其中個體在停止給予抗體或其抗原結合部分後維持至少PASI75應答一段持續時間，從而治療個體中的銀屑病。在又一個相關的方面中，本發明提供了一種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體或其抗原結合部分，其中個體在停止給予抗體或其抗原結合部分後維持至少PASI90應答一段持續時間，從而治療個體中的銀屑病。在一個實施方案中，停止給予抗體後的持續時間為至少約12周。在一個實施方案中，給予抗體至少約12周。在一個實施方案中，每兩周一次給予抗體或其抗原結合部分。在另一個實施方案中，每周一次給予抗體或其抗原結合部分。在另一個實施方案中，以單次劑量給予抗體或其抗原結合部分。在一個實施方案中，以約100mg、110mg、120mg、130mg、140mg、150mg、160mg、170mg、180mg、190mg、200mg、210mg或220mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。在一個實施方案中，銀屑病是慢性銀屑病，如慢性斑塊型銀屑病，如中重度慢性斑塊型銀屑病。在一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分能結合IL-12的p40亞基的表位。在另一個實施方案中，當p40亞基結合IL-12的p35亞基時，抗體或其抗原結合部分能結合該p40亞基的表位。在又一個實施方案中，當p40亞基結合p19亞基時，抗體或其抗原結合部分能結合該p40亞基的表位。在一個實施方案中，當p40亞基結合IL-12的p35亞基以及當p40亞基結合pl9亞基時，抗體或其抗原結合部分能結合該p40亞基的表位。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分結合選自Y61和J695的抗體結合的il-12的p40亞基的表位。在另一個實施方案中，抗體能進一步結合第一異二聚體，並且還能結合第二異二聚體，其中第一異二聚體包含11-12的p40亞基和11-12的p35亞基，以及其中第二異二聚體包含IL-12的p40亞基和p19亞基。在另一個實施方案中，抗體中和第一異二聚體的活性。在另一個實施方案中，抗體中和第二異二聚體的活性。在又一個實施方案中，抗體中和第一異二聚體和第二異二聚體的活性。在另一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分以1x10力M或更小的IC5o在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖，或以1x10^M或更小的IC5o抑制人IFNy產生。在一個實施方案中，如通過表面等離振子共振所測定的，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分以1xi(r1GM或更小的Kd或以1xl(T3s"或更小的k。ff速率常數(rateconstant)從IL-12的p40亞基上解離。在一個實施方案中，分離的用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分是嵌合抗體、人源化抗體或人抗體。在另一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分具有包含胺基酸序列SEQIDNO:25的重鏈CDR3和包含胺基酸序列SEQIDNO:26的輕鏈CDR3;在另一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分具有包含胺基酸序列SEQIDNO:27的重鏈CDR2和包含胺基酸序列SEQIDNO:28的輕鏈CDR2。在一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分具有包含胺基酸序列SEQIDNO:29的重鏈CDR1和包含胺基酸序列SEQIDNO:30的輕鏈CDR1。在另一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分能結合包含p40亞基的白介素。在一個實施方案中，白介素包含p40亞基和p35亞基，如該白介素為IL-12。在另一個實施方案中，白介素包含p40亞基和p19亞基。在又一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分中和白介素的活性。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分結合p40亞基的表位。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以包含該抗體或其抗原結合部分和藥學上可接受的載體的藥物組合物給予個體。藥物組合物還可包含另外的藥物，例如治療劑，如布地奈德，表皮生長因子，皮質激素類，環孢菌素，柳氮磺胺吡啶，氨基水楊酸鹽，6-巰基噪呤，硝基咪唑硫嘌呤，甲硝噠唑，脂氧合酶抑制劑，美沙拉。秦，奧沙拉。秦，巴柳氮，抗氧化劑，血栓烷抑制劑，IL-1受體拮抗劑，抗-IL-l(3單克隆抗體，抗-IL-6單克隆抗體，生長因子，彈性蛋白酶抑制劑，吡啶基-咪唑化合物，TNF、LT、IL-1、IL-2、IL-6、IL-7、IL-8、IL-15、IL-16、IL-18、EMAP-II、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD90的抗體或它們的配體，氨甲蝶呤，環孢菌素，FK506,雷帕黴素，嗎替麥考酚酉旨，來氟米特，NSAIDs,布洛芬，皮質激素類，氫化潑尼松，磷酸二酯酶抑制劑，腺普激動劑，抗血栓藥，補體抑制物，類腎上腺素能藥物，IRAK,NIK，IKK,p38，MAP激酶抑制劑，IL-1(3轉化酶抑制劑，TNFa轉化酶抑制劑，T-細胞信號傳導抑制劑，金屬蛋白酶抑制劑，柳氮磺胺吡啶，硝基咪唑疏噤呤，6-巰基嘌呤，血管緊張素轉化酶抑制劑，可溶性細胞因子受體，可溶性p55TNF受體，可溶性p75TNF受體，sIL-lRI,sIL-lRII,sIL-6R,抗炎細胞因子，IL-4,IL-10,IL-ll,IL-13和TGF(3。在另一個實施方案中，給予個體的藥物組合物中的治療劑可選自抗-TNF抗體及其抗體片段、TNFR-Ig構建物、TACE抑制劑、PDE4抑制劑、皮質激素類、布地奈德、地塞米松、柳氮磺胺吡啶、5-對氨基水楊酸、奧沙拉嗪、IL-lp轉化酶抑制劑、IL-lra、酪氨酸激酶抑制劑、6-巰基噤呤和IL-ll。在另一個實施方案中，治療劑可選自皮質激素類，氫化潑尼松，曱基氫化潑尼松，硝基咪唑硫。票呤，環磷醯胺，環孢菌素，氨甲蝶呤，4-氨基吡啶，替扎尼定，幹擾素-(31a,幹擾素-(31b，Copolymer1，高壓氧，靜脈滴注免疫球蛋白，克拉屈濱，TNF、LT、IL-1、IL-2、IL-6、IL-7、IL曙8、IL-15、IL-16、IL-18、EMAP-II、GM-CSF、FGF、PDGF的抗體或激動劑，CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD80、CD86、CD90的抗體或它們的配體，氨曱蝶呤，環孢菌素，FK506，雷帕黴素，嗎替麥考酚酯，來氟米特，NSAID，布洛芬，皮質激素類，氫化潑尼松，磷酸二酯酶抑制劑，腺苷激動劑，抗血栓藥，補體抑制物，類腎上腺素能藥物，IRAK,NIK，IKK,p38或MAP激酶抑制劑，IL-ip轉化酶抑制劑，TACE抑制劑，T-細胞信號傳導抑制劑，激酶抑制劑，金屬蛋白酶抑制劑，柳氮磺胺吡啶，硝基咪唑硫嘌呤，6-巰基噪呤，血管緊張素轉化酶抑制劑，可溶性細胞因子受體，可溶性p55TNF受體，可溶性p75TNF受體，sIL畫lRI，sIL曙腦,sIL-6R,sIL-13R,抗-P7s,p-選擇蛋白金屬蛋白配體(PSGL),抗炎細胞因子，IL-4,IL-IO，IL-13和TGF(3。在一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分分別結合人IL-12和/或人IL-23,並如通過表面等離振子共振所測定的，以lxlO"。M或更小的Kd和以WO-3s"或更小的k。ff速率常數從人IL-12和/或人IL-23上解離。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以lxl(T4s"或更小的k。ff速率常數從人IL-12和/或人IL-23上解離。在另一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以lxl(rY1或更小的k。ff速率常數從人IL-12和/或人IL-23上解離。在另一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分分別結合人IL-12和/或人IL-23,並如通過表面等離振子共振所測定的，以lxl(T2s"或更小的k。ff速率常數從人IL-12和/或人IL-23上解離。在又一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以1x10—3s"或更小的k。ff速率常數從人IL-12和/或人IL-23上解離。在再一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以lxlO-、"或更小的k。ff速率常數從人IL-12和/或人IL-23上解離。在另一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以lxl(TY1或更小的k。ff速率常數從人IL-12和/或人IL-23上解離。在又一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分結合人IL-12和/或人IL-23,並以1.34xl(T^M或更小的Kd分別從人IL-12和/或人IL-23上解離。在又一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分結合人IL-12和/或人IL-23，並以9.74xl(T11M或更小的Kd分別從人IL-12和/或人IL-23上解離。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分是重組抗體或其抗原結合部分。在一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分是中和抗體，如中和人IL-12和/或人IL-23的活性。在一個實施方案中，中和抗體或其抗原結合部分以lxl(T9M或更小的IC5Q在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖。在另一個實施方案中，中和抗體或其抗原結合部分以1x10-1GM或更小的IC5o在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖。在又一個實施方案中，中和抗體或其抗原結合部分以lxl(T"M或更小的IC5C)在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖。在又一個實施方案中，中和抗體或其抗原結合部分以lxlO々M或更小的IC5o在體外植物凝集素胚細胞增殖測定(PHA測定)中抑制植物凝集素胚細胞增殖。在又一個實施方案中，中和抗體或其抗原結合部分以lxl(T8M或更小的IC5o在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖。在一個實施方案中，中和抗體或其抗原結合部分以1x10"gM或更小的IC5015抑制人IFNy產生。在又一個實施方案中，中和抗體或其抗原結合部分以lxl(T11M或更小的ICsq抑制人IFNy產生。在再一個實施方案中，中和抗體或其抗原結合部分以5xl(T12M或更小的ICso抑制人IFNy產生。在一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分a)以lxlO力M或更小的IC5o在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖；b)具有包含胺基酸序列SEQIDNO:25的重鏈CDR3;和c)具有包含胺基酸序列SEQIDNO:26的輕鏈CDR3。在一個實施方案中，抗體進一步具有包含胺基酸序列SEQIDNO:27的重鏈CDR2;和包含胺基酸序列SEQIDNO:28的輕鏈CDR2。在又一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分進一步具有包含胺基酸序列SEQIDN〇29的重鏈CDR1;和包含胺基酸序列SEQIDNO:30的輕鏈CDR1。在又一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以lxlO"gM或更小的IC50在體外PHA測定中進一步抑制植物凝集素胚細胞增殖。在又一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以lxl(T1M或更小的IC5o在體外PHA測定中進一步抑制植物凝集素胚細胞增殖。在一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分具有包含胺基酸序列SEQIDNO:31的重鏈可變區和包含胺基酸序列SEQIDNO:32的輕鏈可變區。在一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分包含選自IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA和IgE恆定區的重鏈恆定區。在一個實施方案中，抗體重鏈恆定區為IgGl。在另一個實施方案中，抗體是Fab片段、F(ab')2片段或單鏈Fv片段。在一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分以1xl(T10M或更小的Kd從人IL-12和/或人IL-23上解離並結合人IL-12和/或人IL-23的p40亞基上的表位。在一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分是人抗體或其抗原結合部分，其a)如通過表面等離振子共振所測定的，以lxlO-3s-1或更小的k0ff速率常數從人IL-12上解離；b)具有包含胺基酸序列SEQIDNO:25的重鏈CDR3;和c)具有包含胺基酸序列SEQIDNO:26的輕鏈CDR3。在另一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分以1x10-4s-1或更小的koff速率常數從人IL-12上解離。在另一個實施方案中，人抗體或其抗原結合部分以1x10-5s-1或更小的koff速率常數從人IL-12上解離。在一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分是結合人IL-12的人抗體或其抗原結合部分，並且包含包含胺基酸序列SEQIDNO:26的輕鏈CDR3區；和包含胺基酸序列SEQIDNO:25的重鏈CDR3區。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分具有輕鏈可變區(LCVR),該輕鏈可變區具有包含胺基酸序列SEQIDNO:26的CDR3區，並且具有重鏈可變區(HCVR),該重鏈可變區具有包含胺基酸序列SEQIDNO:25的CDR3區。在另一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分包含進一步具有包含胺基酸序列SEQIDNO:28的CDR2區的LCVR和進一步包含含有胺基酸序列SEQIDNO:27的CDR2區的HCVR。在又一個實施方案中，LCVR進一步具有包含胺基酸序列SEQIDNO:30的CDRl區，以及HCVR具有包含胺基酸序列SEQIDNO:29的CDRl區。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分結合人IL-12和/或人IL-23,並且是抗體J695(也稱為ABT-874)或其抗原結合部分。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分結合人IL-12和/或人IL-23,以1.34xl(T1GM或更小的Kd從人IL-12上解離，並中和人IL-12和/或人IL-23。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以9.74xl(T11M或更小的Kd從人IL-12和/或人IL-23上解離。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以lxl(T7M或更小的IC5o在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以1x10-8M或更小的IC5o在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以lxl0力M或更小的IC50在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以1x1(T1QM或更小的IC5o在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以1x10-11M或更小的IC5o在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以lxl0-1QM或更小的IC5o抑制人IFNy產生。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以1xM或更小的ICso抑制人IFNy產生。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以5xlO"M或更小的IC5o抑制人IFNy產生。在一個實施方案中，用於本發明方法中的抗體或其抗原結合部分以lxlO力M或更小的IC5o,分別在IL-12或IL-23受體結合測定(RBA)中抑制IL-12和/或IL-23結合其受體。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以lxlO"。M或更小的IC5q,分別在IL-12或IL-23受體結合測定(RBA)中抑制IL-12和/或IL-23結合其受體。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分以lxl(T11M或更小的IC50,分別在IL-12或IL-23受體結合測定(RBA)中抑制IL-12和/或IL-23結合其受體。附圖簡述圖l顯示了患者的試驗配置。(術語"eow"指每隔一周給藥)圖2顯示了在12周試驗部分過程中，在銀屑病面積和嚴重性指數中具有至少75。/。改善(PASI75)的患者的百分數。到第8周，基於對意向治療人群觀察數據的方差分析，分別與安慰劑相比，除200mgx1組外，在每一ABT-874治療組中具有PASI75應答的患者的百分數在統計學上顯著更高(pO.001)(術語"eow"指每隔一周給藥)。圖3顯示了自基線的在銀屑病面積和嚴重性指數(PASI)得分中的平均百分數改善。數據顯示基於對意向治療人群觀察數據的方差分析，在所有時間點上與安慰劑相比，對於每一ABT-874治療組*口E)，或可將輕鏈CDR3的第94位甘氨酸(G)突變為酪氨酸(Y)(L94G—Y)。術語"人抗體'，包括具有相應於Kabat等(參見Kabat,等(1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIH出版物編號91-3242)所描述的人種系免疫球蛋白序列的可變區和恆定區的抗體。本發明的人抗體可包括不是人種系免疫球蛋白序列所編碼的胺基酸殘基(如通過體外隨機或位點專一誘變或體內體細胞突變導入的突變)，例如在CDRs中以及特別在CDR3中。優選使用本文中描述的"選擇性誘變法"導入該突變。人抗體可具有至少一個為不是人種系免疫球蛋白序列所編碼的胺基酸殘基，如活性增強胺基酸殘基所取代的位置。人抗體可具有多達20個為不是人種系免疫球蛋白序列的一部分的胺基酸殘基所取代的位置。在其他實施方案中，多達10個、多達5個、多達3個或多達2個位置被取代。在一個優選的實施方案中，如下所詳述的，這些取代位於CDR區中。然而，當在本文中使用時，術語"人抗體，，並不意在包括其中CDR序列業已嫁接在人框架序列上並且來源於另一哺乳動物物種如小鼠的種系的抗體。短語"重組人抗體，，包括通過重組手段製備、表達、產生或分離的人抗體，例如使用轉染到宿主細胞中的重組表達載體表達的抗體(進一步描述於以下第II節中)，分離自重組的、組合的人抗體文庫的抗體(進一步描述於以下第III節中)，分離自轉入了人免疫球蛋白基因的動物(如小鼠)的抗體(參見如Taylor,L.D.,等(1992)Nucl.AcidsRes.20:6287-6295)或通過涉及剪接人免疫球蛋白基因序列入其他DNA序列中的其他方法所製備、表達、產生或分離的抗體。這樣的.重組人抗體具有來源於人種系免疫球蛋白序列的可變區和恆定區(參見Kabat,E.A.,等(l"l)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIH出版物編號91-3242)。然而，在某些實施方案中，對這樣的重組人抗體進行體外誘變(或當使用轉入人Ig序列基因的動物時，體內體細胞誘變)，從而重組抗體的VH和VL區的胺基酸序列是這樣的序列，即雖然來源於並與人種系VH和VL序列相關，但可以不天然存在於體內人抗體種系所有組成成分中。然而，在某些實施方案中，這樣的重組抗體是選擇性誘變法或回復突變或兩者的結果。"分離的抗體"包括基本上不含有具有不同的抗原特異性的其他抗體的抗體(如特異性結合hIL-12的分離的抗體是基本上不含有特異性結合不同於hIL-12的抗原的抗體)。特異性結合hlL-12的分離的抗體可結合來自其他物種的IL-12分子(以下進一步詳細討論)。此外，分離的抗體可基本上不含有其他細胞物質和/或化學藥品。"中和抗體，，(或"中和hIL-l2活性的抗體，，)包括結合hlL-12引起抑制hIL-12的生物活性的抗體。可通過測定一種或多種hIL-12生物活性的指示物評價該hIL-12的生物活性的抑制，例如在植物凝集素胚細胞增殖測定(PHA)中人植物凝集素胚細胞增殖的抑制，或在人IL-12受體結合測定中受體結合的抑制(參見美國專利第6,914,128號的實施例3-幹擾素-Y誘導測定)。可通過幾種本領域已知的標準的體外或體內測定中的一種或多種評價這些hIL-12生物活性的指示物(參見美國專利第6,914,128號的實施例3)。術語"活性"包括諸如抗體對抗原的結合特異性/親和力的活性，例如，抗-hlL-12抗體結合IL-12抗原和/或抗體的中和效價，例如，結合hIL-12的抗-hlL-12抗體抑制WL-12的生物活性，如抑制PHA胚細胞增殖或在人IL-12受體結合測定中抑制受體結合(參見美國專利第6,914,128號的實施例3)。短語"表面等離振子共振"包括例如使用BIAcore系統(PharmaciaBiosensorAB,Uppsala,SwedenandPiscataway,NJ),通過才全測生4勿4專感器基質中蛋白質濃度改變，提供用於實時生物特異性相互作用分析的光學現象。詳情參見美國專利第6,914,128號的實施例5和J6nsson,U.,等(1993)Ann.Biol.Clin.51:19-26;J。nsson,U.,等(1991)Biotechniques11:620-627;Johnsson,B.,等(1995)J.Mol.Recognit.8:125誦131;和Johnnson,B.,等(1991)Anal.Biochem.198:268-277。當在本文中使用時，術語"Koff意指抗體從抗體/抗原複合物上解離的離解速率常數(offrateconstant)。當在本文中使用時，術語"Kd"意指特定抗體-抗原相互作用的離解常數(dissociationconstant)。短語"核酸分子"包括DNA分子和RNA分子。核酸分子可以是單鏈或雙鏈的，但優選是雙鏈DNA。關於編碼結合hlL-12的抗體或抗體部分(如VH、VL、CDR3)包括"分離的抗體"的核酸，當在本文中使用時，短語"分離的核酸分子"包括其中編碼抗體或抗體部分的核苷酸序列不含編碼結合除WL-12之外的抗原的抗體或抗體部分的其他核苷酸序列的核酸分子，該其他的序列可在人基因組DNA中天然地側接該核酸。因此，例如，編碼抗-IL-12抗體的VH區的本發明的分離的核酸不含有編碼結合除IL-12之外的抗原的其他VH區的其他序列。短語"分離的核酸分子"還意在包括編碼二價、雙特異性抗體的序列，例如編碼其中VH和VL區不含有不同於該雙抗體序列的其他序列的雙抗體的序列。術語"載體"包括能將它所連接的另一個核酸轉運的核酸分子。一種類型的載體是"質粒，，，其指其中可以連接另外的DNA區段的環狀雙鏈DNA環。另一種類型的載體是病毒載體，其中另外的DNA區段可被連接到病毒基因組中。某些載體能在導入它們的宿主細胞中自主複製(如具有細菌複製起點的細菌載體和游離型哺乳動物載體)。其他載體(如非游離型哺乳動物載體)在導入宿主細胞中時能被整合到宿主細胞的基因組中，從而與宿主基因組一起複製。此外，某些載體能指導它們可操作地連接的基因的表達。這樣的載體在此稱為"重組表達載體，，(或簡稱為"表達載體")。一般而言，在重組DNA技術中應用的表達載體經常是以質粒形式存在。在本說明書中，"質粒，，和"載體，，可以交換使用，因為質粒是最常使用的載體形式。然而，本發明意在包括這樣的表達載體的其他形式，例如病毒載體(如複製缺陷型逆轉錄病毒、腺病毒和腺病毒相關病毒)，它們起著同等的功能。短語"重組宿主細胞"(或簡稱為"宿主細胞")包括其中已導入重組表達載體的細胞。應當理解該術語不但意指特定的對象細胞，還意指這樣的細胞的後代。因為由於突變或環境影響，在後代中可能存在某些改變，這樣的後代事實上可能與親本細胞不同，但仍包括在本文所使用的術語"宿主細胞"的範圍內。當在本文中使用時，術語"修飾"意指改變抗體或其抗原結合部分中的一個或多個胺基酸。可通過在一個或多個位置添加、取代或缺失胺基酸而產生該改變。可4吏用已知技術例如PCR誘變產生該改變。短語"接觸位置"包括在26個已知抗體-抗原結構的某一個中，為接觸抗原的胺基酸所佔據的處於抗體重鏈可變區或輕鏈可變區的CDR1、CDR2或CDR3中的胺基酸位置。如果26個已解結構的抗體-抗原複合物的任一個中的CDR胺基酸接觸抗原，則該胺基酸可被視為佔據了接觸位置。與非接觸位置相比，接觸位置具有更高的為接觸抗原的胺基酸所佔據的概率。優選地，接觸位置是含有在26個結構的多於3個(>11.5%)中接觸抗原的胺基酸的CDR位置。最優選地，接觸位置是含有在25個結構的多於8個(〉32%)中接觸抗原的胺基酸的CDR位置。術語"高變位置"包括佔據抗體的重鏈可變區或輕鏈可變區的CDR1、CDR2或CDR3區中的位置的胺基酸殘基，該位置被認為在抗體的體內親和力成熟過程中具有高頻率或概率的體細胞高變。"高頻率或概率的體細胞高變"包括在抗體的體內親和力成熟過程中5-約40%機率的殘基會經歷體細胞高變的頻率或概率。應當理解該指定範圍內的所有範圍也意在成為本發明的一部分，如5-約30%,如5-約15%,如15-約30%。術語"優先選擇性誘變位置"包括佔據重鏈可變區或輕鏈可變區的CDR1、CDR2或CDR3區中的位置的胺基酸殘基，該位置可被認為是接觸位置和高變位置。短語"選擇性誘變法，，包括一種通過在至少一個優先選擇性誘變位置、高變位置和/或接觸位置處選擇和單獨突變CDR殘基改善抗體活性的方法。"選擇性突變的"人抗體是一種包含使用選擇性誘變在經選擇的位置進行突變的抗體。在另一個實施方案中，選擇性誘變法意在提供一種優先突變抗體的重鏈可變區的CDR1、CDR2或CDR3(以下分別簡稱為H1、H2和H3),或輕鏈可變區的CDR1、CDR2或CDR3(以下分別簡稱為L1、L2和L3)中的經選擇的單個胺基酸殘基的方法。胺基酸殘基可選自優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置。基於它們在輕鏈或重鏈可變區中的位置，選擇單個胺基酸。應當理解高變位置還可能是接觸位置。在一個實施方案中，選擇性誘變法是一種"定向方法"。措辭"定向方法"意在包括以定向方式優先突變抗體的重鏈可變區的CDR1、CDR2或CDR3或輕鏈可變區的CDR1、CDR2或CDR3中的經選擇的單個胺基酸殘基的方法，如"Group-wise定向方法"或"CDR-wise定向方法"。在"Group-wise定向方法"中，單個胺基酸殘基特別是成組被定向用於選擇性突變，包括組I(包括L3和H3)、II(包括H2和Ll)和III(包括L2和H1),以優先用於定向的順序列組。在"CDR-wise定向方法"中，單個胺基酸殘基特別是CDRs被定向用於選擇性突變，具有下列用於定向的優先順序H3、L3、H2、Ll、Hl和L2。經選擇的胺基酸殘基被突變為例如至少兩種其他的胺基酸殘基，並測定突變對抗體活性的效果。活性被測定為抗體的結合特異性/親和力和/或抗體的中和效價的改述來源括p藍菌體展示'、'用口人igo種系^因轉基因"動物、°分離自人B-細胞的人抗體。優選地，選擇性誘變法用在無法進一步使用噬菌體展示技術優化的抗體上。應當理解可在選擇性誘變法前後對來自任何來源包括噬菌體展示、用人IgG種系基因轉基因的動物、分離自人B-細胞的人抗體的抗體進行回復突變。術語"活性增強胺基酸殘基"包括改善抗體活性的胺基酸殘基。應當理解活性增強胺基酸殘基可取代優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置處的胺基酸殘基，此外，多於一個的活性增強胺基酸殘基可存在於一個或多個CDRs中。活性增強胺基酸殘基包括改善抗體，例如結合人IL-12的抗-人IL-12抗體的結合特異性/親和力的胺基酸殘基。活性增強胺基酸殘基還意在包括改善抗體，例如抑制人IL-12的人IL-12抗體的中和效價的胺基酸殘基。當在本文中使用時，術語"給藥，，指給予物質(如抗-IL-12、抗-IL-23抗體)以達到治療目的(如治療類風溼性關節炎)。當在本文中使用時，術語"每兩周一次的給藥方案，，、"每兩周一次的給藥"和"每兩周一次給藥"指給予個體物質(如抗-IL-12、抗-IL-23抗體)以達到治療目的的時程，其中該時程為每隔一周(eow)。每兩周一次的給藥方案並不意在包括每周一次的給藥方案。優選地，每9-19天給予一次物質，更優選地，每11-17天給予一次物質，還更優選地，每13-15天給予一次物質，以及最優選地，每14天給予一次物質。當在短語"第一藥物與第二藥物聯合"中時，術語"聯合"包括同時給予笫一藥物和第二藥物，其例如可溶解於或混入同一藥學上可接受的載體中，或先給予笫一藥物，然後給予第二藥物，或先給予第二藥物，然後給予笫一藥物。因此，本發明包括聯合治療性處理的方法和聯合藥物組合物。當在短語"伴隨治療性處理"中時，術語"伴隨"包括在第二藥物存在下給予藥物。伴隨治療性處理方法包括其中第一、第二、第三或另外的藥物被同時給予的方法。伴隨治療性處理方法還包括其中在第二或另外的藥物存在下給予第一或另外的藥物的方法，其中第二或另外的藥物例如可在先前已給予。伴隨治療性處理方法可通過不同的參與者逐步執行。例如，一個參與者可給予個體第一藥物，和另一參與者可給予個體第二藥物，以及該給藥步驟可在同時、或幾乎同時、或在間隔的時間執行，只要在第二藥物(和另外的藥物)存在下第一藥物(和另外的藥物)之後給予即可。該參與者和個體可以是相同的實體(如人)。當在本文中使用時，術語"聯合治療"指給予兩種或更多種治療性物質，如抗-IL-12、抗-IL-23抗體和另外的藥物。該另外的藥物可伴隨抗-IL-12、抗-IL-23抗體給予而給予、在抗-IL-12、抗-IL-23抗體給予之前給予或在抗-IL-12、抗-IL-23給予之後給予。當在本文中使用時，術語"試劑盒"指包含用於給予本發明的抗-IL-12、抗-IL-23抗體治療IL-12相關病症的組分的包裝產品。試劑盒優選包含容納有該試劑盒組分的盒子或容器。該盒子或容器貼有標籤或食品和藥物管理局批准的治療方案。該盒子或容器容納有本發明的組分，該組分優選容納於塑料、聚乙烯、聚丙烯、乙烯或丙烯容器中。該容器可以是帶蓋的管或瓶。試劑盒還可包含用於給予抗-IL-12、抗-IL-23抗體的使用說明。本發明的各個方面進一步詳述於如下小節中。I.結合人IL-12的人抗體本發明提供了使用結合人IL-12的人抗體或其抗原結合部分用於治療銀屑病的方法和組合物。本發明還包括使用結合IL-12和IL-23的抗體的方法和組合物。優選地，用於本發明中的人抗體是重組的、中和的人抗-hlL-12抗體。在一個實施方案中，用於本發名的抗體是抗體ABT-874(參見美國專利第6,914，128號)。ABT-874是一種抗白介素12(IL-12)和IL-23的全人抗體。其以高親和力結合IL-12和IL-23所共有的p40亞基——在銀屑病(Ps)治療中經確認的靶標。可通過例如用hIL-12篩選一個或多個人Vl和VhcDNA文庫，如通過美國專利第6,914,128號的實施例1中所描述的噬菌體展示技術，來選擇結合人IL-12的抗體。篩選人Vl和VhcDNA文庫最初鑑定了一系列的抗-IL-12抗體，其中一種抗體，在此稱為"Joe9"(或"Joe9野生型")被選擇用於進一步的開發。Joe9是一種相對低親和力的人IL-12抗體(如約0.1s-l的K。ff),但對於特異性結合和檢測hlL-12還是有用的。通過進行重鏈和輕鏈CDRs誘變，產生一組"混配的"輕鏈和重鏈可變區並進一步突變，產生眾多具有增加的對hIL-12親和力的另外的抗-hIL-12抗體，從而改善了Joe9抗體的親和力(參見美國專利第6,914,128號的實施例1、表2(參見附錄A)和美國專利笫6,914,128號的圖1A-D的序列比對)。在這些抗體中，在此^皮稱為Y61的人抗-hlL-12抗體證實在結合親和力上得到明顯改善(如約2x10-4s-l的K0ff)。選擇Y61抗-WL-12抗體通過單獨突變重鏈和輕鏈CDRs中的特定胺基酸殘基用於進一步的親和力成熟。基於佔據優先選擇性誘變位置、接觸位置和/或高變位置的胺基酸殘基，選擇Y61的胺基酸殘基用於位點專一突變(選擇性誘變法)。在重鏈和輕鏈CDRs中經選擇的位置進行取代的概要示於美國專利第6,914,128號的圖2A-2H中。一種在此稱為J695(也稱為ABT-874(AbbottLaboratories)的優選的本發明的重組中和抗體，產生自Y61的輕鏈CDR2的第50位處Tyr對Gly的取代以及Y61的輕鏈CDR3的第94位處Tyr對Gly的取代。在從Joe9野生型到J695的譜繫上，一組用於本發明中的抗-IL-12抗體的重鏈和輕鏈可變區的胺基酸序列比對示於美國專利第6,914,128號的圖1A-1D中。這些序列比對能用於在從Joe9到J695的譜繫上，針對結合WL-12的本發明的抗體的優選的重鏈和輕鏈可變區鑑定共有序列，以及針對CDR3、CDR2和CDR1鑑定共有序列。此外，概述於圖2A-2H中的Y61誘變分析能用於在包含具有來自Y61的修飾但仍保留良好的hIL-12結合特性的序列的從Y61到J695的譜繫上，針對結合hIL-12的重鏈和輕鏈可變區鑑定共有序列，以及針對結合hIL-12的CDR3、CDR2和CDR1鑑定共有序列。通過附加的序列表中序列標識符所確定的本發明優選的CDR、VH和VL序列(包括共有序列)概述於下。tableseeoriginaldocumentpage28tableseeoriginaldocumentpage29tableseeoriginaldocumentpage30通過表面等離振子共振分析測定Kd和Koff速率，在功能上鑑定了產生自Joe9野生型親和力成熟的抗體。產生了一系列具有在約0.1s-l-約1x10-5s-l範圍內的Koff速率，以及更優選約1x10-4s-l-lxl0-5s"或更小的K0ff的抗體。如美國專利第6,914,128號的實施例3中所描述的，還在體外鑑定了抗體抑制植物凝集素(PHA)胚細胞增殖的能力。產生了一系列的具有約1x10-6M-約ix10-11M,更優選約1x10-10M-lx10-11M或更小的IC50值的抗體。因此，在一個方面，本發明提供了供使用分離的人抗體或其抗原結合部分的方法和組合物，該分離的人抗體或其抗原結合部分結合人IL-12並如通過表面等離振子共振所測定的以0.1s-l或更小的Koff速率常數從人IL-12上解離，或以1x10-6M或更小的IC50在體外植物凝集素胚細胞增殖測定(PHA測定)中抑制植物凝集素胚細胞增殖。在優選的實施方案中，分離的人IL-12抗體或其抗原結合部分以1x10-2s-l或更小的Koff速率常數從人IL-12上解離，或以1x10-7M或更小的IC50在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖。在更優選的實施方案中，分離的人IL-12抗體或其抗原結合部分以1x10-3s-l或更小的Koff速率常數從人IL-12上解離，或以1x10-8M或更小的IC50在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖。在更優選的實施方案中，分離的人IL-12抗體或其抗原結合部分以lxlO-4s-l或更小的Koff速率常數從人IL-12上解離，或以1x10-9M或更小的IC50在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖。在更優選的實施方案中，分離的人IL-12抗體或其抗原結合部分以lxlO-Ss-l或更小的Koff速率常數從人IL-12上解離，或以1x10-10M或更小的IC50在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖。在還更優選的實施方案中，分離的人IL-12抗體或其抗原結合部分以lxlO-5s-1或更小的Koff速率常數從人IL-12上解離，或以1x10-11M或更小的IC50在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖。可通過表面等離振子共振測定IL-12抗體的離解速率常數(Koff)(參見美國專利第6,914,128號的實施例5)。通常，使用BIAcore系統(PharmaciaBiosensor,Piscataway,NJ)通過表面等離4展子共才展(SPR)，表面等離振子共振分析測定配體(固定在生物傳感器基質上的重組人IL-12)和分析物(溶液中的抗體)之間的實時結合相互作用。還可通過固定分析物(生物傳感器基質上的抗體)並引入配體(溶液中的重組IL-12)進行表面等離振子分析。可使用幾種適合的體外測定中的一種或多種評估IL-12抗體或其抗原結合部分的中和活性(參見美國專利第6,914,128號的實施例3)。本領域眾所周知抗體重鏈和輕鏈CDRs在針對抗原的抗體結合特異性/親和力中起重要作用。因此，本發明包括具有Joe9的輕鏈和重鏈CDRs的人抗體，以及具有已被修飾以改善抗體結合特異性/親和力的CDRs的其他抗體。如美國專利笫6,914,128號的實施例1中所證明的，一系列對輕鏈和重鏈CDRs的修飾產生了親和力成熟的人抗-WL-12抗體。從Joe9野生型到J695的一系列結合人IL-12的人抗體的重鏈和輕鏈可變區胺基酸序列比對示於美國專利第6,914，128號的圖1A-1D中。可從序列比對中確定抗體CDRs的共有序列基序。例如，對於從Joe9到J695i普系的VHCDR3,共有基序包含胺基酸序列(H/S)-G-S-(H/Y)畫D-(N/T/Y)(SEQIDNO:1)，其包含來自SEQIDNO:7中所示的共有HCVR的第95-102位的胺基酸。對於VLCDR3，共有基序包含胺基酸序列Q-(S/T)-Y-(D/E)-(S/R/K)-(S/G/Y)-(L/F/T/S)-包含來自SEQIDNO:8中所示的共有LCVR的第89-97位的胺基酸。八因此，在另一個方面，本發明提供了包含分離的人抗體或其抗原結合部分方法和組合物，該人抗體或其抗原結合部分具有如下特性a)以lxlO-6M或更小的IC50在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖；b)具有包含胺基酸序列SEQIDNO:1的重鏈CDR3;和c)具有包含胺基酸序列SEQIDNO:2的輕鏈CDR3。在一個優選的實施方案中，抗體進一步包含含有胺基酸序列F-I-R-Y-D-G-S-N國K國Y-Y國A腳D畫S-V國K隱G(SEQIDNO:3)(其包含來自包含胺基酸序列SEQIDNO:7的共有HCVR的第50-65位的胺基酸)的VHCDR2，以及進一步包含含有胺基酸序列(G/Y)-N-(D/S)-(Q/N)-R-P-S(SEQIDNO:4)(其包含來自包含胺基酸序列SEQIDNO:8的共有LCVR的第50-56位的胺基酸)的VLCDR2。在另一個優選的實施方案中，抗體進一步包含含有胺基酸序列F畫T-F誦S-(S/E)-Y-G-M國H(SEQIDNO:5)(其包含來自包含胺基酸序列SEQIDNO:7的共有HCVR的第27-35位的胺基酸)的VHCDR1，以及進一步和包含含有胺基酸序列(S/T)-G-(G/S)-(R/S)-S-N-I-(G/V)-(S/A)-(N/G/Y)-(T/D)-V-(K/H)(SEQIDNO:6)(其包含來自包含胺基酸序列SEQIDNO:8的共有LCVR的第24-34位的胺基酸)的VLCDRl。在又一個優選的實施方案中，用於本發明的抗體包含含有胺基酸序列SEQIDNO:7的HCVR和包含含有胺基酸序列SEQIDNO:8的LCVR。基於對Y61所執行的產生J695抗體的突變分析(概述於美國專利第6,914,128號的圖2A陽2H中)，可確定另外的共有基序。如美國專利第6,914,128號的圖2A-2H中所示圖所證實的，Y61的重鏈和輕鏈CDRs的某些殘基能被取代而基本上不損害抗體的hlL-12結合性質。例如，在CDRHI第30位處用12個不同的胺基酸殘基所進行的單獨取代基本上不會減小抗體的Koff速率，表明其是能用於多種不同胺基酸殘基取代的位置。因此，基於突變分析(即能用其他胺基酸殘基取代的Y61中位置)確定了共有基序。對於重鏈和輕鏈CDR3s,共有基序分別示於SEQIDNOs:9和10中，對於重鏈和輕鏈CDR2s，共有基序分別示於SEQIDNOs:11和12中，以及對於重鏈和輕鏈CDRls,共有基序分別示於SEQIDNOs:13和14中。對於VH和VL區，共有基序分別示於SEQIDNOs:15和16中。因此，在一個方面，本發明包括一種分離的人抗體或其抗原結合部分，其具有如下特性a)以1x10-9m或更小的ic50在體外pha測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖；b)具有包含胺基酸序列SEQIDNO:9的重鏈CDR3;和c)具有包含胺基酸序列SEQIDNO:10的輕鏈CDR3。在一個優選的實施方案中，抗體進一步包含含有胺基酸序列SEQIDNO:11的VHCDR2以及進一步包含含有胺基酸序列SEQIDNO:12的VLCDR2。在另一個優選的實施方案中，抗體進一步包含含有胺基酸序列SEQIDNO:13的VHCDRl以及進一步包含含有胺基酸序列SEQIDNO:14的VLCDRl。在又一個優選的實施方案中，用於本發明中的抗體包含含有胺基酸序列SEQIDNO:15的HCVR和含有胺基酸序列SEQIDNO:16的LCVR。可經CDR3的PCR"i秀變通過Joe9野生型的親和力成熟(如美國專利第6,914,128號的實施例1中所描述的)產生用於本發明中的優選的抗體——人抗-hlL-12抗體Y61。Y61具有通過表面等離振子共振和體外中和測定所測定的改善的特異性/結合親和力。Y61的重鏈和輕鏈CDR3s分別示於SEQIDNOs:17和18中，Y61的重鏈和輕鏈CDR2s分別示於SEQIDNOs:19和20中，以及Y61的重鏈和輕鏈CDRls分別示於SEQIDNOs:21和22中。Y61的VH具有胺基酸序列SEQIDNO:23以及Y61的VL具有胺基酸序列SEQIDNO:24(這些序列也示於美國專利第6,914,128號的與Joe9比對的圖1A-1D中)。因此，在另一個方面，本發明提供了一種分離的人抗體或其抗原結合部分的應用，其a)以1x10-9m或更小的IC50在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖；b)具有包含胺基酸序列SEQIDNO:17的重鏈CDR3;和c)具有包含胺基酸序列SEQIDNO:18的輕鏈CDR3。在一個優選的實施方案中，用於本發明的方法和組合物中的分離的人抗體或其抗原結合部分具有包含的胺基酸序列SEQIDNO:19的重鏈CDR2和包含胺基酸序列SEQIDNO:20的輕鏈CDR2。在另一個優選的實施方案中，用於本發明的方法和組合物中的分離的人抗體或其抗原結合部分具有包含胺基酸序列SEQIDNO:21的重鏈CDR1和包含胺基酸序列SEQIDNO:22的輕鏈CDR1。在又一個優選的實施方案中，用於本發明的方法和組合物中的分離的人抗體或其抗原結合部分包含含有胺基酸序列SEQIDNO:23的重鏈可變區和含有胺基酸序列SEQIDNO:24的輕鏈可變區。在某些實施方案中，全長抗體包含重鏈恆定區，例如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA和IgE恆定區以及如Kabat中所描述的任何同種異型變體(Kabat,E.A.,等(1991)SequencesofProteinsofImmunological33Interest,第5版，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIH出版物編號91-3242)。優選地，抗體重鏈恆定區是IgGl重鏈恆定區。或者，抗體部分可以是Fab片段、F(ab，2)片段或單鏈Fv片段。對Y61單個殘基的修飾導致產生了一組示於美國專利第6,914,128號的圖2A-2H中的抗體。通過表面等離振子共振和/或體外中和測定測定了每個抗體的特異性/結合親和力。因此，在另一個方面，本發明提供了一種分離的人抗體或其抗原結合部分，其a)以1x10-9m或更小的ic50在體外pha測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖；b)具有包含選自SEQIDNO:404-SEQIDNO:469的胺基酸序列的重鏈CDR3;和c)具有包含選自SEQIDNO:534-SEQIDNO:579的胺基酸序列的輕鏈CDR3。在優選的實施方案中，用於本發明的方法和組合物中的分離的人抗體或其抗原結合部分具有包含選自SEQIDNO:335-SEQIDNO:403的胺基酸序列的重鏈CDR2;和包含選自SEQIDNO:506-SEQIDNO:533的胺基酸序列的輕鏈CDR2。在另一個優選的實施方案中，分離的人抗體或其抗原結合部分具有包含選自SEQIDNO:288-SEQIDNO:334的胺基酸序列的重鏈CDR1;和包含選自SEQIDNO:470-SEQIDNO:505的胺基酸序列的輕鏈CDRl。在又一個優選的實施方案中，分離的人抗體或其抗原結合部分包含含有胺基酸序列SEQIDNO:23的重鏈可變區和含有胺基酸序列SEQIDNO:24的輕鏈可變區。在某些實施方案中，全長抗體包含重鏈恆定區例如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA和IgE恆定區以及如Kabat中所描述的任何同種異型變體(，Kabat,E.A.,等(1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,笫5版，，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIH出版物編號91-3242)。優選地，抗體重鏈恆定區是IgGl重鏈恆定區。或者，抗體部分可以是Fab片段、F(ab、)片段或單鏈Fv片段。34一種可用於本發明中的特別優選的重組中和抗體J695是通過抗體Y61的接觸和高變胺基酸殘基的位點定向誘變產生的(參見美國專利第6,914,128號的實施例2和下節III)。J695不同於Y61之處在於在輕鏈CDR2的第50位處Tyr取代了Gly以及在輕鏈CDR3的第94位處Tyr取代了Gly。J695的重鏈和輕鏈CDR3s分別示於SEQIDNOs:25和26中，J695的重鏈和輕鏈CDR2s分別示於SEQIDNOs:27和28中，以及J695的重鏈和輕鏈CDRls分別示於SEQIDNOs:29和30中。J695的VH具有胺基酸序列SEQIDNO:31以及J695的VL具有胺基酸序列SEQIDNO:32(這些序列也示於與Joe9比對的美國專利第6,914,128號的圖1A-1D中)。因此，在另一個方面，本發明提供了一種分離的人抗體或其抗原結合部分，其a)以1x10-9M或更小的IC50在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖；b)具有包含胺基酸序列SEQIDNO:25的重鏈CDR3;和c)具有包含胺基酸序列SEQIDNO:26的輕鏈CDR3。在優選的實施方案中，用於本發明中的分離的人抗體或其抗原結合部分具有包含胺基酸序列SEQIDNO:27的重鏈CDR2和包含胺基酸序列SEQIDNO:28的輕鏈CDR2。在另一個優選的實施方案中，用於本發明中的分離的人抗體或其抗原結合部分具有包含胺基酸序列SEQIDNO:29的重鏈CDR1和包含胺基酸序列SEQIDNO:30的輕鏈CDR1。在又一個優選的實施方案中，用於本發明中的分離的人抗體或其抗原結合部分具有包含胺基酸序列SEQIDNO:31的重鏈可變區和包含胺基酸序列SEQIDNO:32的輕鏈可變區。在某些實施方案中，全長抗體包含重鏈恆定區，例如IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgM、IgA和IgE恆定區以及如Kabat中所描述的任何同種異型變體(Kabat,E.A.，等(1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5片反，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIH出版物編號91-3242)。優選地，抗體重鏈恆定區是IgGl重鏈恆定區。或者，抗體部分可以是Fab片段、F(ab，2)片段或單鏈Fv片段。在從Joe9到J695的譜繫上，或從Y61到J695的i普繫上，可針對抗體的CDR3、CDR2和CDR1在優選的共有序列中進行另外的突變，以提供另外的本發明的抗-IL-12抗體。可使用標準的分子生物學技術進行這樣的修飾方法，例如通過PCR誘變，粑向輕鏈和/或重鏈CDRs中的單個接觸或高變胺基酸殘基，繼之以如在此所述的修飾的抗體的動力學和功能分析(如美國專利第6,914,128號的實施例3中所描述的中和測定，和如美國專利第6,914,128號的實施例5中所描述的BIAcore分析)。因此，在另一個方面中，本發明提供了一種分離的人抗體或其抗原結合部分的應用，其a)以1x10-6m或更小的IC50在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖；b)包含含有胺基酸序列SEQIDNO:1的重鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDNO:3的重鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:5的重鏈CDR1,或在優先選擇性誘變位置或高變位置處具有一個或多個胺基酸取代的其突變體，其中與包含含有胺基酸序列SEQIDNO:1的重鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDNO:3的重鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:5的重鏈CDR1的抗體相比，所述突變體具有不高於10-倍的koff速率；和c)包含含有胺基酸序列SEQIDNO:2的輕鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDNO:4的輕鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:6的輕鏈CDR1,或在優先選擇性誘變位置或高變位置處具有一個或多個胺基酸取代的其突變體，其中與包含含有胺基酸序列SEQIDNO:2的輕鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDNO:4的輕鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:6的輕鏈CDR1的抗體相比，所述突變體具有不高於10-倍的k0ff速率。在另一個方面中，本發明提供了一種分離的人抗體或其抗原結合部分的應用，其a)以1x10-9M或更小的IC50在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖；b)包含含有胺基酸序列SEQIDNO:9的重鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDNO:11的重鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:13的重鏈CDR1,或在優先選擇性誘變位置或高變位置處具有一個或多個胺基酸取代的其突變體，其中與包含含有胺基酸序列SEQIDNO:9的重鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDNO:11的重鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:13的重鏈CDR1的抗體相比，所述突變體具有不高於10-倍的k0ff速率；和c)包含含有胺基酸序列SEQIDNO:10的輕鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDNO:12的輕鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:14的輕鏈CDR1,或在優先選擇性誘變位置或高變位置處具有一個或多個胺基酸取代的其突變體，其中與包含含有胺基酸序列SEQIDNO:10的輕鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDNO:12的輕鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:14的輕鏈CDR1的抗體相比，所述突變體具有不高於10-倍的koff速率。本領域技術人員還應當理解可對抗體的CDR區進行另外的突變，例如在Y61或J695中，以提供另外的本發明的抗-IL-12抗體。如上所述，可使用標準的分子生物學技術進行這樣的修飾方法。可如美國專利第6,914,128號的實施例3和美國專利第6,914,128號的實施例5中所分別描述的，進行修飾的抗體的功能和動力學分析。導致鑑定J695的Y61的單獨殘基的修飾示於美國專利第6,914，128號的圖2A-2H中，並描述於美國專利第6,914,128號的實施例2中。因此，在另一個方面中，本發明提供了一種分離的人抗體或其抗原結合部分的應用，其a)以1x10一M或更小的IC50在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖；b)包含含有胺基酸序列SEQIDNO:17的重鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDNO:19的重鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:21的重鏈CDR1,或在優先選擇性誘變位置或高變位置處具有一個或多個胺基酸取代的其突變體，其中與包含含有胺基酸序列SEQIDNO:17的重鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDNO:19的重鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:21的重鏈CDR1的抗體相比，所述突變體具有不高於10-倍的koff速率；和c)包含含有胺基酸序列SEQIDNO:18的輕鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDN〇20的輕鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:22的輕鏈CDR1,或在優先選擇性誘變位置或高變位置處具有一個或多個胺基酸取代的其突變體，其中與包含含有胺基酸序列SEQIDNO:18的輕鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDNO:20的輕鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:22的輕鏈CDR1的抗體相比，所述突變體具有不高於10-倍的k。ff速率。在另一個方面中，本發明提供了一種分離的人抗體或其抗原結合部分的應用，其a)以1x10刁M或更小的IC50在體外PHA測定中抑制植物凝集素胚細胞增殖；b)包含含有胺基酸序列SEQIDNO:25的重鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDNO:27的重鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:29的重鏈CDR1,或在優先選擇性誘變位置或高變位置處具有一個或多個胺基酸取代的其突變體，其中與包含含有胺基酸序列SEQIDNO:25的重鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDNO:27的重鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:29的重鏈CDR1的抗體相比，所述突變體具有不高於10-倍的koff速率；和c)包含含有胺基酸序列SEQIDNO:26的輕鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDNO:28的輕鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:30的輕鏈CDR1,或在優先選擇性誘變位置或高變位置處具有一個或多個胺基酸取代的其突變體，其中與包含含有胺基酸序列SEQIDNO:26的輕鏈CDR3、含有胺基酸序列SEQIDNO:28的輕鏈CDR2和含有胺基酸序列SEQIDNO:30的輕鏈CDR1的抗體相比，所述突變體具有不高於10-倍的koff速率。在又一個實施方案中，本發明提供了一種分離的人抗體或其抗原結合部分中和人IL-12以及至少一種選自狒狒IL-12、狨猴IL-12、黑猩猩IL-12、獼猴IL-12和恆河猴IL-12的另外的靈長類動物IL-12的活性，但不中和小鼠IL-12的活性的應用。II重組人抗體的選擇可通過篩選重組組合抗體文庫，優選地篩選scFv噬菌體展示文庫分離能用於本發明中的重組人抗體，該scFv噬菌體展示文庫是使用製備自來源於人淋巴細胞的mRNA的人VL和VHcDNAs製備的。用於鑑定可用於本發明的方法和組合物中的抗體的方法描述於美國專利第6,914,128號中，在此併入作為參考。用於製備和篩選這樣的文庫的方法是本領域已知的。除市售用於產生噬菌體展示文庫的試劑盒(如Pharmacia重組嗟菌體抗體系統(RecombinantPhageAntibodySystem),商品目錄號27-9400-01;和StratageneSurfZAP丁M噬菌體展示試劑盒，商品目錄號240612)之外，特別適用於產生和篩選抗體展示文庫的方法和試劑的實例可見於例如，Kang等PCT出版物編號WO92/18619;Winter等PCT出版物編號WO92/20791;Breitling等PCT出版物編號WO93/01288;McCafferty等PCT出版物編號WO92/01047;Garrard等PCT出版物編號WO92/09690;Fuchs等(1991)Bio/Technology2:1370-1372;Hay等(1992)HumAntibodHybridomas丄81-85;Huse等(1989)Science巫:1275-1281;McCafferty等，Nature(1990)348:552-554;Griffiths等(1993)EMBOJ12:725-734;Hawkins等(1992)JMolBiol謹:889-896;Clackson等(1991)Nature352:624-628;Gram等(1992)PNAS^￡:3576-3580;Garrad等(1991)Bio/Technology2:1373-1377;Hoogenboom等(1991)NucAcidRes1^:4133-4137;和Barbas等(1991)PNASM:7978-7982。用於該方法中的抗體文庫優選是製備自人VL和VHcDNAs的scFv文庫。優選使用重組人IL-12作為抗原來選擇具有針對IL-12的結合活性的人重鏈和輕鏈序列，從而篩選該scFv抗體文庫。為選擇特異於IL-12的p35亞基或p70異二聚體的抗體，在過量的游離的p40亞基存在下進行篩選測試。可例如通過如美國專利第6,914,128號的實施例1中所描述的微-Friguet滴定確定亞基偏愛性(preference)。一旦選才奪了最初的人VL和VH區段，就進4亍其中經選4,的VL和VH區段的不同配對被篩選對IL-12結合的"混配"試驗，來選擇優選的VL/VH對組合(參見美國專利第6,914,128號的實施例1)。此外，為進一步改善對hIL-12結合親和力和/或降低對hIL-12結合的離解速率常數，以類似於在天然免疫應答過程中造成抗體親和力成熟的體內體細胞突變方法的方法，可隨機突變優選的VL/VH對的VL和VH區段，優選在VH和/或VL的CDR3區中進行隨機突變。可通過使用與VHCDR3或VLCDR3分別互補的PCR引物擴增VH和VL區實現該體外親和力成熟，所述引物業已在某些位置處"摻入，，四種核苷酸鹼基的隨機混合物，以致所得到的PCR產物編碼其中隨機突變已導入VH和/或VLCDR3區的VH和VL區段。可對這些隨機突變的VH和VL區段進行針對結合hIL-12的再選擇和再篩選，並可選擇具有對IL-12結合之高親和力和低離解速率的序列。表2(參見美國專利第6,914,128號的附錄A)顯示了展示作為體外親和力成熟結果所產生的改變的結合特異性/親和力的抗體。在從重組免疫球蛋白展示文庫選擇、分離和篩選本發明的抗-WL-12抗體後，可從噬菌體顆粒(如來自噬菌體基因組)中回收編碼經選擇的抗體的核酸，並通過標準的重組DNA技術亞克隆入其他的表達載體中。如果需要的話，可進一步操作核酸以產生本發明的其他抗體類型(如連接至編碼另外的免疫球蛋白區，例如另外的恆定區的核酸)。為表達通過篩選組合文庫分離的重組人抗體，如以下第IV節中所進一步詳述的，將編碼抗體的DNA克隆入重組表達載體中並導入哺乳動物宿主細胞中。通過噬菌體展示技術選擇的人IL-12結合抗體的方法，以及通過CDR區的隨機或位點定向誘變親和力成熟經選擇的抗體的方法進一步詳述於美國專利第6,914,128號的實施例1中。如美國專利第6,914,128號的實施例1所述，篩選人VL和VHcDNA文庫鑑定了一系列的抗-IL-12抗體，其中選擇Joe9抗體用於進一步的開發。比較Joe9的重鏈可變區與選自VBASE資料庫的重鏈種系序列，揭示了Joe9類似於cos-3種系序列。cos-3屬於Vh3家族種系序列。VH3家族是人VH種系所有組成成分的一部分，人VH種系所有組成成分基於核苷酸序列同源性歸組為7個家族--VHl-VH7(Tomlinson等(1992)J.Mol.Biol.,227,776-798和Cook等(1995)ImmunologyToday,16,237-242)。Vh3家族包含最多數目的成員，因此對於種系所有組成成分貢獻最大。對於任何給定的人VH3種系抗體序列，整個Vh3家族中的胺基酸序列同一性是高的(參見如Tomlmson等(1992)J.Mol.Biol.,227,776-798和Cook等(1995)ImmunologyToday,16,237-242)。任何兩條Vh3家族的種系vh序列之間胺基酸序列同一性的範圍在大約100個VH殘基中有69-98個相同之內(即在任何兩個種系VH序列之間69-98%的胺基酸序列同源性)。對於大多數種系序列對，存在至少80個或更多個相同的胺基酸殘基(即至少80%胺基酸序列同源性)。VH3家族成員之間的胺基酸序列高度同源性導致某些胺基酸殘基存在於VH鏈的CDR和框架區中的關鍵位置上。這些胺基酸殘基賦予針對CDRs的結構特徵。對抗體結構的研究已顯示基於佔據CDR和框架區中某些位置的關鍵胺基酸殘基，CDR構象可歸組成規範的CDR結構家族。因此，在具有帶有相同的關鍵胺基酸殘基的規範結構的不同的抗體中存在類似的局部CDR構象(Chothia等(1987)J.Mol.Biol.,196，901-917和Chothia等(1989)Nature,342,877-883)。在Vh3家族中，對於cdr1和cdr2規範結構，在關鍵位點處存在保守的胺基酸殘基同一性(Chothia等(1992)J.Mol.Biol.,227,799-817)。COS-3種系VH基因是Vh3家族成員，並且是3-30(DP-49)種系VH等位基因的變體。COS-3與Joe9VH胺基酸序列不同之處僅在於5個位置。在Joe9VH和COS-3之間以及在Joe9VH和其他Vh3家族成員之間的胺基酸序列的高度同源性也賦予了CDR結構的高度同源性(Chothia等(1992)J.Mol.Biol.,227,799-817;Chothia等(1987)J.Mol.Biol.,196,901-917和Chothia等(1989)Nature,342,877-883)。本領域技術人員應當理解基於與Joe9的高胺基酸序列和規範結構相似性，其他VH3家族成員也可用於產生結合人IL-12的抗體。這可通過如下方法來進行，例如通過經鏈改組技術選擇合適的VL(Winter等(1994)AnnualRev.Immunol.,12,433-55)、或通過從齧齒動物或其他人抗體包括來自本發明抗體的CDRs將CDRs嫁接到Vh3家族框架上。基於核苷酸序列同源性，將人Vl人種系所有組成成分歸組為IO個家族(Williams等(1996)J.Mol.Biol.,264，220-232)。將Joe9的輕鏈可變區與選自VBASE資料庫的輕鏈種系序列進行比較，揭示了Joe9類似於DPL8人種系。該Joe9VL與DPL8序列不同之處僅在於四個框架位置，並且高度同源與其他V人l家族成員的框架序列。基於對Joe9的胺基酸序列高同源性和規範結構相似性，其他V人l家族成員也可用於產生結合人IL-12的抗體。這可例如通過經鏈改組技術選擇合適的VH(Winter等，見上)，或通過從齧齒動物或其他人抗體包括來自本發明抗體的CDRs將CDRs嫁接到V^l家族框架上而得以進行。本發明的方法意在包括結合hlL-12的重組抗體，該重組抗體包含來源於Vh3種系序列家族成員的重鏈可變區和來源於V人l種系序列家族成員的輕鏈可變區。此外，本領域技術人員應當理解任何Vh3家族重鏈序列成員可與任何V人1家族輕鏈序列成員相結合。本領域技術人員還應當理解導致種系胺基酸序列改變的DNA序列多態性可存在於群體(如人群)中。由於天然的等位基因改變，因此這樣的種系序列中的遺傳多態性可存在於群體中的個體之間。這樣的天然等位基因改變通常能在基因的核普酸序列中產生1-5%的變化。作為天然的等位基因改變結果的任何和所有這樣的核苦酸改變以及所產生的種系序列中胺基酸多態性都被規定在本發明的範圍內。因此，在一個方面，本發明提供了一種分離的人抗體或其抗原結合部分，其具有如下特性a)結合人IL-12並如通過表面等離振子共振所測定的，以0.1s"或更少的k。ff速率常數從人IL-12上解離，或以1x1(^M或更小的ICso在體外植物凝集素胚細胞增殖測定(PHA測定)中抑制植物凝集素胚細胞增殖。b)具有包含選自VH3種系家族成員的胺基酸序列的重鏈可變區，其中重鏈可變區具有用活性增強胺基酸殘基在接觸位置或高變位置處的突變。c)具有包含選自Vxl種系家族成員的胺基酸序列的輕鏈可變區，其中輕鏈可變區具有用活性增強胺基酸殘基在優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置處的突變。在一個優選的實施方案中，分離的人抗體或其抗原結合部分在重鏈CDR3中具有突變。在另一個優選的實施方案中，分離的人抗體或其抗原結合部分在輕鏈CDR3中具有突變。在另一個優選的實施方案中，分離的人抗體或其抗原結合部分在重鏈CDR2中具有突變。在另一個優選的實施方案中，分離的人抗體或其抗原結合部分在輕鏈CDR2中具有突變。在另一個優選的實施方案中，分離的人抗體或其抗原結合部分在重鏈CDR1中具有突變。在另一個優選的實施方案中，分離的人抗體或其抗原結合部分在輕鏈CDR1中具有突變.本領域技術人員應當理解基於Vh3種系家族成員或輕鏈V人l種系家族成員之間的胺基酸序列高相似性，對種系序列的突變可提供結合人IL-12的另外的抗體。美國專利第6,914,128號的表l(也參見的美國專利第6,914,128號附錄A)顯示了VH3家族成員的種系序列並表明了在家族成員內顯著的序列同源性。也在美國專利第6,914,128號的表1中所示的是V;U家族成員的種系序列。提供Joe9的重鏈和輕鏈序列作為比較。例如可在與對本發明抗體所進行的突變(如在Joe9中的突變)中相同的胺基酸位置進行對Vh3或V^l家族成員種系序列的突變。可使用標準的分子生物學技術進行該修飾，例如通過PCR誘變，靶向種系序列中的單個胺基酸殘基，繼之以如在此所述的修飾的抗體的動力學和功能分析(如美國專利第6,914,128號的實施例3中所描述的中和測定，以及美國專利第6,914,128號的實施例5中所描述的BIAcore分析)。因此，在一個方面，本發明提供了一種分離的人抗體或其抗原結合部分的應用，其具有如下特性a)具有包含選自SEQIDNOs:595-667的胺基酸序列的重鏈可變區，其中重鏈可變區具有用活性增強胺基酸殘基在優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置處的突變。b)具有包含選自SEQIDNOs:669-675的氨.基酸序列的輕鏈可變區，其中輕鏈可變區具有用活性增強胺基酸殘基在優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置處的突變。本領域技術人員應當理解基於Joe9和COS-3重鏈種系序列之間以及Joe9和DPL8X種系序列之間的高胺基酸序列相似性，這些種系序列CDR區的其他突變可提供結合人IL-12的另外的抗體。可使用上述標準的分子生物學技術進行這樣的修飾方法。因此，在一個方面，本發明提供了分離的人抗體或其抗原結合部分的應用，該人抗體或其抗原結合部分具有如下特性a)結合人IL-12並如通過表面等離振子共振所測定的以O.ls"或更少的k。ff速率常數從人IL-12上解離，或以1x1(T6M或更小的IC5o在體外植物凝集素胚細胞增殖測定(PHA測定)中抑制植物凝集素胚細胞增殖。b)具有包含COS-3種系胺基酸序列的重鏈可變區，其中重鏈可變區具有用活性增強胺基酸殘基在優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置處的突變。c)具有包含DPL8種系胺基酸序列的輕鏈可變區，其中輕鏈可變區具有用活性增強胺基酸殘基在優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置處的突變。由於某些胺基酸殘基佔據著輕鏈和重鏈可變區的CDR和框架區中的關鍵位置，因此在這些區域處賦予了結構特徵。特別是，對CDR2和CDR1區進行了規範結構分類。由於在家族成員之間存在胺基酸序列的高度同源性,因此這些規範特徵存在於家族成員之間。本領域技術人員應當理解在賦予這些規範結構的胺基酸殘基處的修飾會產生另外的結合IL-12的抗體。可使用上述標準的分子生物學技術進行該修飾。因此，在另一個方面，本發明提供了分離的人抗體或其抗原結合部分的應用，該人抗體或其抗原結合部分具有如下特性a)結合人IL-12並如通過表面等離振子共振所測定的以O.ls"或更少的k。ff速率常數從人IL-12上解離，或以1x10^M或更小的IC5。在體外植物凝集素胚細胞增殖測定(PHA測定)中抑制植物凝集素胚細胞增殖。b)具有包含選自VH3種系家族成員的胺基酸序列的重鏈可變區，其中重鏈可變區包含在結構上類似於來自其他VH3種系家族成員的CDR2s的CDR2,和在結構上類似於來自其他VH3種系家族成員的CDRls的CDRl,以及其中重鏈可變區具有用活性增強胺基酸殘基在優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置處的突變；c)具有包含選自V人l種系家族成員的胺基酸序列的輕鏈可變區，其中輕鏈可變區包含在結構上類似於來自其他V人l種系家族成員的CDR2s的CDR2,和在結構上類似於來自其他V人l種系家族成員的CDRls的CDR1，以及其中輕鏈可變區具有用活性增強胺基酸殘基在優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置處的突變。用於本發明中的重組人抗體具有與選自VBASE資料庫的人種系免疫球蛋白序列同源的可變區和恆定區。突變重組人抗體(如通過隨機誘變或PCR誘變)產生了不為人種系免疫球蛋白序列所編碼的胺基酸。同樣，由於在B-細胞發育期間出現的正常過程的體細胞突變，來源於人供體的重組抗體文庫會包含不同它們相應的種系序列的抗體序列。應當注意如果通過PCR擴增獲得的"種系"序列編碼來自真實種系構型的框架區中的胺基酸差異(即與真實種系序列相比，在擴增的序列中的差異)，則可能期望要將這些胺基酸差異改變回真實的種系序列(即框架殘基"回復突變"至種系構型)。因此，本發明可任選地包括回復突變步驟。為進行該步驟，首先將種系編碼的重鏈和輕鏈的胺基酸序列(VBASE資料庫中實例所見的)與突變的免疫球蛋白重鏈和輕鏈框架胺基酸序列進行比較，以鑑定突變的免疫球蛋白框架序列中不同於最接近的種系序列的胺基酸殘基。然後，使用遺傳密碼以確定哪些核苷酸改變應當進行，從而將突變的免疫球蛋白序列的合適的核苷酸回復突變以相應於種系序列。通過標準的方法，例如PCR-指導的誘變(其中突變的核苷酸被摻入PCR引物中，使得PCR產物包含該突變)或位點定向誘變進行對突變的免疫球蛋白框架序列的誘變。應當調查被鑑定作為回復突變候選物的每個胺基酸的作用在抗原結合中究竟是直接作用或間接作用，並且所發現的突變後影響任何人抗體期望特性的任何胺基酸不應包括在最終的人抗體中；作為一個實例，通過選擇性誘變法鑑定的活性增強胺基酸不進行回復突變。確定產生自誘變的抗體特性的測定法可包括ELISA、竟爭性ELISA、體外和體內中和測定(參見如美國專利第6,914,128號的實施例3)和/或使用來自不同來源(包括人、靈長類動物和/或其他物種)的組織切片的免疫組織化學。為使進行回復突變的胺基酸的數目減至最少，可保留被發現不同於最接近的種系序列但與另一種系序列中相應的胺基酸相同的那些胺基酸位置，前提是對於在所討論的胺基酸的兩側，該另一種系序列與本發明的人抗體的序列具有至少10個、優選12個胺基酸是相同或線性對應所呈遞給免疫系統的肽表位不會是外源的，、而是等同於自身抗原:'即為該另一種系序列所編碼的免疫球蛋白。回復突變可出現在抗體優化的任何階段；優選地，在選擇性誘變法前後即刻進行回復突變。更優選地，在選擇性誘變法前即刻進行回復突變。III.對優先選擇性誘變位置、接觸位置和/或高變位置的修飾通常，如上述第II節和在此併入作為參考的美國專利第6,914,128號中所描述的，可使用噬菌體展示方法進行具有改善的親和力的抗體的選擇。可通過隨機突變CDR殘基組合併產生包含不同序列抗體的大文庫來實現這樣的選擇。然而，對於這些起作用的選擇方法，抗體-抗原反應必須趨向於平衡，以隨時間過去得以使更高親和力的抗體優先結合抗原。當使用噬菌體展示方法改善經選擇的抗-IL-12抗體的親和力，剛一達到一定水平的預期的親和力(即抗體Y61的親和力)時，就無法確定會使平衡得以建立的選擇條件(可能是由於抗原和噬菌體顆粒之間另外的非特異性相互作用所致)。因此，具有甚至更高的親和力的抗體可能無法通過噬菌體展示法被選擇。因而，對於至少某些抗體或抗原，噬菌體展示方法受限於它們選擇具有高改善的結合特異性/親和力的抗體的能力。因此，建立了一種無需噬菌體展示抗體親和力成熟的稱為選擇性誘變法的方法以克服該局限，本發明提供了該方法。儘管開發了該選擇性誘變法以克服使用噬菌體展示系統的局限，但應當注意該方法也能與噬菌體展示系統一起使用。此外，該選擇性誘變法可用於改善任何抗體的活性。為改善抗體的活性(如親和力或中和活性)，理想地意欲將重鏈和輕鏈中的每一個CDR位置突變為所有其他可能的胺基酸殘基。然而，由於平均起來在抗體中存在70個CDR位置，因此這種方法將會非常耗時且勞動密集。因此，本發明的方法容許僅通過突變重鏈和/或輕鏈CDRs中某些經選擇的殘基，從而改善抗體的活性。此外，本發明的方法容許改善抗體活性而不影響抗體的其他期望特性。基於一級序列或它們在可變區中的位置，確定抗體可變區的胺基酸殘基與抗原接觸可以不必作精確預測。儘管如此，Kabat等所進行的具變區中局部區域的CDRs(Kabat等(1971)Ann.NYAcad,Sci.透:382國393,Kabat,E.A.,等(1991)S叫uencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIH出版物編號91-3242)。結構研究已顯示抗原結合表面是由於存在於CDRs中的胺基酸殘基所形成。還已知CDR外的其他胺基酸殘基起著結構作用或直接涉及抗原結合。因此，對於每一抗原-抗體對，CDRs內外的胺基酸殘基都可能是重要的。Tomlison等的序列比對研究鑑定了重鏈和輕鏈CDR1和CDR2中以及在k鏈CDR3的一部分中的許多位置，這些位置是體細胞突變的頻發位置(Tomlison等(1996)J.Mol.Biol.256:813-817)。特別是，位置H31、H31B、H33、H33B、H52B、H56、H58、L30、L31、L31A、L50、L53、L91、L92、L93和L94淨皮鑑定為體細胞突變的頻發位置。然而，'該分析排除了已知位於抗體結合位點中心以及可能提供了與抗原的重要相互作用的重要的重鏈CDR3區以及輕鏈CDR3的部分。此外，Tomlison等提出體細胞多樣性單獨不能必然預測特定胺基酸在抗原結合中的作用，以及暗示與抗原接觸的保守的胺基酸殘基，和不與抗原接觸的各種胺基酸殘基。該結論得到了針對體細胞突變對抗體親和力作用的突變研究的進一步支持(Sharon,(1990),PNAS,87:4814-7)。在高親和力抗-對苯偶氮胂酸鹽(Ars)抗體中，19個體細胞突變被同時用它們的相應的種系殘基取代，產生具有200倍活性損失的抗-Ars抗體的種系型。該46完全親和力的抗-Ars抗體可僅通過恢復該19個體細胞突變中的3個而得到恢復，證明了可容許許多不助於抗原結合活性的體細胞突變。該結果可通過抗體自身多樣性的性質得以部分解釋。幼B-細胞可最初產生識別多種自身或非自身抗原的低親和力抗體。此外，在親和力成熟期間抗體可經歷能導致自身反應性的序列變化。這樣的低親和力抗體的高變可用於消除自身反應性("負選擇")並增加對外源抗原的親和力。因此，對大量抗體的一級和結構數據的分析無法提供一種預測(l)相對於針對不需要的抗原減少親和力的過程中，體細胞高變位點在親和力成熟過程中的作用，或(2)給定的胺基酸如何有助於特定的抗原-抗體對的性質的方法。通過分析大量抗原-抗體複合物的晶體結構，進行了針對特定胺基酸殘基在抗原識別中的作用的其他嘗試(MacCallum等(1996)J.Mol.Biol.262:732-745)。指示了位於CDRs內外的位置的潛在作用。在26個已分析結構的超過10個中涉及抗原結合的CDRs中的位置包括重鏈中的H31、H33、H50、H52、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、H98牙口H100以及車聖鏈中的L30A、L32、L91、L92、L93、L94、L96。然而，該作者特別提到使用這些和其他結構數據預測抗原接觸可能過預測或不足以預測接觸位置，引起這樣的猜測，即不同的抗體可能不得不應用不同的策略。Pini等描述了隨機化大的噬菌體展示文庫中的抗體CDR序列中的多個殘基以快速增加抗體親和力(Pini等(1998)J.BiolChem.273:21769-21776)。然而，Pini等所討論的高親和力抗體在總共8個位置上具有突變，並且對於改善抗體的親和力絕對必需的該改變的還原分析變得不切實際，原因在於對於所需的最小數目的胺基酸，要測試大量可能的組合。此外，隨機化多個殘基不一定能保留抗體的其它期望性質。抗體的期望性質或特性是本領域公知的，並包括例如，保留如與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，以及保留接近於人種系免疫球蛋白序列的抗體序列、改善中和效價。其他期望性質或特性包括保留種間交叉反應性的能力、保留表位特異性的能力以及保留在哺乳動物細胞中蛋白高表達水平的能力。可使用本領域公知的技術觀察或測定期望性質或特性，所述技術包括但不限於ELISA,竟爭性ELISA，體外和體內中和測定(參見如美國專利第6,914,128號的實施例3),使用來自包括人、靈長類動物或可能需要的其他來源的不同來源的組織切片的免疫組織化學，以及使用瞬間表達或穩定表達針對哺乳動物細胞中表達的研究。此外，Pini等的方法可能導入較改善親和力所實際需要的最少數目更多的改變，並且可能在人個體中導致抗體觸發抗-人抗體(HAMA)產生。此外，如在別處所討論的，在此得到證明的噬菌體展示或其它相關方法包括核糖體展示無法適當地對在抗體和抗原之間達到某一親和力起作用，並且由於額外的相互作用包括與其它噬菌體或核糖體成分以及抗原的相互作用，因此達到平衡所需的條件無法在合理的時限內得到確定。本領域技術人員可從上述討論的參考文獻的教導中發現關於抗體多樣性來源的感興趣的科學資料。然而，本發明提供了一種增加特定抗原-抗體對的抗體親和力，同時保留其它抗體相關特徵或期望特性的方法。當考慮到對特定抗體賦予多種不同特性包括抗原結合的期望時，這是尤其重要的。如果起始抗體具有需要被保留的期望性質或特性，則選擇性誘變法可能是用於保留這些期望性質同時改善抗體活性的最好策略。例如，在Y61的誘變中，目標在於增加對hlL-12的親和力，以及改善抗體的中和效價，同時保留期望的性質。Y61的期望的性質包括(l)保留於其他蛋白或人組織的非交叉反應性，(2)保留優良的表位特異性，即優先在p70(p40/p35)異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾；和(3)產生具有儘可能接近於它們相應的種系免疫球蛋白序列的重鏈和輕鏈胺基酸序列的抗體。在一個實施方案中，本發明的方法提供了一種作為保留抗體的期望性質或特性同時改善親和力和/或中和效價策略的選擇性誘變法。術語"選擇性誘變法，，如上所定義並包括一種單獨突變經選擇的胺基酸殘基的方法。要被突變的胺基酸殘基可首先選自優先選擇性誘變位置、然後是接觸位置、接著是高變位置。可將該單個經選擇的位置突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，並測定該突對期望的抗體性質和抗體活性改善的作用。該選擇性誘變法包括步驟以如下順序選擇候選的位置1)優先選擇性誘變位置；2)接觸位置；3)高變位置，並基於所述位置在抗體的重鏈和輕鏈可變區中的位置排列該位置(CDR3優於CDR2優於CDR1);以所排列的順序將候選的優先選擇性誘變位置、高變位置和/或接觸位置單獨突變為所有可能的其他的胺基酸殘基，並分析該單獨突變對抗體活性的作用，以便確定活性增強胺基酸殘基；如有必要，逐步組合單獨的活性增強胺基酸殘基並分析不同的組合對抗體活性的作用；選擇帶有活性增強胺基酸殘基的突變型抗體並基於關於它們的免疫原性潛力的胺基酸取代的位置和身份對突變型抗體排序。將最高的排名給予包含幾乎等同於在種係數據庫中所描述的可變區序列的胺基酸序列，或具有與其它人抗體可比較的胺基酸序列的突變型抗體。將較低的排名給予包含在種系序列或其他人抗體的序列中很少出現的胺基酸取代的突變型抗體。將最低的排名給予包含在種系序列或別的人抗體序列中沒有出現的胺基酸取代的突變型抗體。如上所述，突變型抗體包含位於CDR3優於CDR2優於CDR1中的至少一個活性增強胺基酸殘基。重鏈可變區的CDRs優於輕鏈可變區的CDRs。還可研究突變型抗體的活性改善，如當與它們相應的親本抗體相比時。可例如通過中和測定或經表面等離振子共振分析結合特異性/親和力測定該突變型抗體的活性改善(參見美國專利第6,914,128號的實施例3)。優選地，與親本抗體相比，該活性改善可高至少2-20倍。與親本抗體相比，該活性改善可高至少"X1，，國"X2"倍，其中"x!"和"X2"是在2-20之間並包括2-20在內的整數，包括在所指定範圍內的範圍，如2-15,如5-10。還可對具有活性增強胺基酸殘基的突變型抗體進行研究以確定在突變後是否至少一種其他的期望的性質得以保留。例如，對抗-hlL-12抗體測試(l)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，(2)保留表位識別，即優先在p70(p40/p35)異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾；和(3)產生具有儘可能接近於它們相應的種系免疫球蛋白序列的重鏈和輕鏈胺基酸序列的抗體，並基於與種系序列差異的數目確定該抗體會不大可能引發人免疫應答。可對具有多於一個活性增強胺基酸殘基，如至少兩個或至少三個活性增強胺基酸殘基的抗體進行相間的觀察，以確定是否存在期望的性質或特性的保留。在Y61誘變中使用"選擇性誘變法"的一個實例描述如下。單獨突變H31S—E、L50—Y或L94G—Y各自改善了抗體的中和活性。然而，當測試組合克隆時，組合克隆H31S—E+L50—Y+L94G—Y的活性與L50—Y+L94G—Y(J695)差不多。因此，對於較Y61改善J695的活性，將CDR1的第31位的種系胺基酸殘基Ser改變為Glu是不必要的。因而，該選擇性誘變法鑑定了有助於最終活性的最小數目的改變，從而降低了最終抗體的免疫原性潛力並保留了抗體的其他期望的性質。如第IV節中所描述的，可將編碼通過選擇的誘變方法產生的VHL、,TAAA畝AAFV\TAz5i沐A人麼4士乂士》:在蘭向T7kge&茸陽ep"R^/萁因。為了表達通過選擇的誘變方法產生的VH和VL區，可將編碼重鏈和輕鏈的表達載體轉染入如在第IV節中所詳述的各種宿主細胞中。優選的宿主細胞包括原核宿主細胞，例如大腸桿菌，或真核宿主細胞，例如酵母細胞，如釀酒酵母(S.cerevisae)。最優選的真核宿主細胞是在笫IV節中詳述的哺乳動物宿主細胞。選擇性誘變法提供了一種產生具有改善的活性的抗體的方法，沒有通過其他手段進行在前的抗體親和力成熟。選擇性誘變法提供了一種產生具有改善的親和力的抗體的方法，該抗體已進行了回復突變。選擇性誘變法還提供了一種改善親和力成熟的抗體的活性的方法。本領域技術人員應當認識到選擇性誘變法可用於本領域已知的標準抗體操作技術中。實例包括但不限於CDR嫁接抗體、嵌合抗體、scFv片段、全長抗體的Fab片段以及來自其他來源如轉基因小鼠的人抗體。抗體的快速大規模突變分析包括使用核糖體展示技術的體外轉錄和翻譯(參見如Hanes等，(1997)Proc.Natl.Acad.Sci.94:4937-4942;DallAcqua等，(1998)Curr.Opin.Struc.Biol.8:443-450;He等，(1997)核酸Res.25:5132-5134),以及頒給Kawasaki的美國專利笫5,643,768號和第5,658,754號。選擇性誘變法還提供了一種產生具有改善的活性的抗體的方法，該抗體可使用核糖體展示技術進行選擇。在本發明的方法中，抗體或其抗原結合部分通過改變HCVR和/或LCVR的CDRs中單個位置被進一步修飾。儘管這些修飾可在噬菌體展示的抗體中進行，但是該方法有利之處在於其能用在其他類型的宿主系統如細菌、酵母或哺乳動物細胞表達系統中表達的抗體來執行。經選擇用於修飾的CDRs中的單個位置是基於是接觸位置和/或高變位置的位置。如本文中所定義的優選的接觸位置和高變位置示於美國專利第6,914,128號的表3中(參見美國專利笫6,914，128號的附錄A)，以及根據本發明方法對它們進行的修飾詳述於美國專利第6,914,128號的實施例2中。優選的接觸位置選自H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、H98、腦l、IJO、IJ1、U2、134、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L96。優選的高變位置選自H30、H31、H31B、H32、H52、H56、H58、L30、L31、L32、L53和L93。更優選的胺基酸殘基(稱為"優先選擇性誘變位置")是接觸位置和高變位置，並且選自H30、H31、H31B、H32、H33、H52、H56、H58、L30、Ul、L32、L50、L91、L92、L93、L94。特別優選的接觸位置選自L50和L94。優選的活性增強胺基酸殘基取代了位於選自H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、脂、H98、HlOl、L30、L31、L32、134、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L96的位置上的胺基酸殘基。更優選的活性增強胺基酸殘基取代了位於位置H30、H31、H31B、H32、H33、H52、H56、H58、L30、131、LJ2、L50、L91、L92、L93、L94上的氛基酸殘基。淨爭另'M尤選的活性增強胺基酸殘基取代了位於選自L50和L94的位置上的胺基酸殘基。的重鏈或輕鏈的CDR中特定的優先選擇性誘變位置、接觸位置和/或高變位置，隨機誘變該單個位置(如通過遺傳學手段，使用誘變的寡核苷酸來產生修飾的抗體的"微文庫"),或將該位置突變為特定的期望的胺基酸以鑑定活性增強胺基酸殘基，表達並純化修飾的抗體(如在非噬菌體展示宿主系統中)，測定該修飾的抗體對抗原的活性(如通過BIAcore分析測定k。ff速率)，需要時，對其他的CDR位置重複這些步驟，並組合顯示具有改善的活性的單獨突變，測試是否該組合產生具有較親本抗體或其抗原結合部分甚至更高活性(如親和力或中和效價)的抗體。因此，在一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分活性的方法，所述方法包括51a)提供親本抗體或其抗原結合部分；b)依次選擇互補決定區(CDR)中的1)優先選擇性誘變位置、2)接觸位置或3)高變位置用於突變，從而鑑定經選擇的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置；c)將所述經選擇的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一組突變的抗體或其抗原結合部分；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的活性；e)任選地，對至少一個其他優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置重複步驟a)-d);f)在親本抗體或其抗原結合部分中組合顯示具有改善的活性的單獨突變，以產生組合抗體或其抗原結合部分；和g)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組合抗體或其抗原結合部分的活性；直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性的抗體或其抗原結合部分。優選地，經選擇的一個抗體或多個抗體具有改善的活性，而不損失或保留至少一種上述親本抗體期望特性或性質。通過使用本領域公知技術，本領域技術人員可測定或觀察到該期望特性或性質。優選的接觸位置選自H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、H98、HlOl、L30、Ul、L32、L34、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L%。優選的高變位置選自H30、H31、H31B、H32、H52、H56、H58、L30、L31、L32、L53和L93。更優選的優先選擇性誘變位置選自H30、H31、H31B、H32、H33、H52、H56、H58、L30、131、L32、L50、L91、L92、L93和L94。特別優選的接觸位置選自L50和L94。在另一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分活性的方法，所述方法包括a)提供親本抗體或其抗原結合部分；b)選擇互補決定區(CDR)中的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置用於突變；C)將所述經選擇的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一組突變的抗體或其抗原結合部分；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的活性，從而鑑定活性增強胺基酸殘基；e)任選地，對至少一個其他優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置重複步驟a)-d);f)在親本抗體或其抗原結合部分中組合兩個顯示具有改善的活性的單獨的活性增強胺基酸殘基，以產生組合抗體或其抗原結合部分；和g)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價具有兩個活性增強胺基酸殘基的該組合抗體或其抗原結合部分的活性；直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性的抗體或其抗原結合部分。優選的接觸位置選自H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、H98、HlOl、L30、L31、L32、134、L50、L52、U3、L55、L91、L92、L93、L94和L96。優選的高變位置選自H30、H31、H31B、H32、H52、H56、H58、L30、L31、L32、L53和L93。更優選的優先選擇性誘變位置選自H30、H31、H31B、H32、H33、H52、H56、H58、L30、L31、L32、L50、L91、L92、L93和L94。特別優選的接觸位置選自L50和L94。在另一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分活性的方法，所述方法包括a)提供親本抗體或其抗原結合部分；b)選擇互補決定區(CDR)中的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置用於突變；c)將所述經選擇的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一組突變的抗體或其抗原結合部分；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的活性，從而鑑定活性增強胺基酸殘基；e)任選地，對至少一個其他優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置重複步驟a)-d);f)在親本抗體或其抗原結合部分中組合三個顯示具有改善的活性的單獨的活性增強胺基酸殘基，以產生組合抗體或其抗原結合部分；和g)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價具有兩個活性增強胺基酸殘基的該組合抗體或其抗原結合部分的活性；直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性的抗體或其抗原結合部分。優選地，活性增強胺基酸殘基取代了位於選自H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、H98、腦l、L30、Ul、L32、L34、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L96的位置上的胺基酸殘基。在單獨經選擇的位置誘變後，可對突變的克隆進行測序以鑑定在每個克隆中哪些胺基酸殘基已被導入到經選擇的位置中。可選擇少量克隆(如約24個)用於測序，其在統計學上應當產生10-15個獨特的抗體，而對更大數量的克隆(如大於60個)進行測序則可確保鑑定在經選擇的位置處具有每種可能的取代的抗體。在一個實施方案中，首先選擇重鏈和/或輕鏈的CDR3區中的接觸位置和/或高變位置用於誘變。然而，對於已經噬菌體展示選擇通過CDR3區的隨機誘變體外親和力成熟的抗體，其可能優選首先選擇重鏈和/或輕鏈的CDR1或CDR2中的接觸位置和/或高變位置。在一個更優選的實施方案中，首先選擇重鏈和/或輕鏈的CDR3區中的優先選擇性誘變位置用於誘變。然而，對於已經噬菌體展示選擇通過CDR3區的隨機誘變體外親和力成熟的抗體，其可能優選首先選擇重鏈和/或輕鏈的CDR1或CDR2中的優先選擇性誘變位置。在另一個優選的實施方案中，通過選擇性誘變法對經選擇的抗體的優化依如下順序進行首先將選自H30、H31、H31B、H32、H33、H52、H56、H58、L30、L31、L32、L50、L91、L92、L93、L94的優先選擇性誘變位置各自突變為至少2個其他的胺基酸(優選5-14個其他的胺基酸)，並對所得到的抗體鑑定增加的親和力、中和效價(有可能的話還鑑定至少一種在別處所討論的其他的保留的特性或性質)。如果單個優先選擇性誘變位置的突變無法根本上或充分地增加親和力或中和效價，並且如果甚至取代了優先選擇性誘變位置中胺基酸的多個活性增強胺基酸的組合也無法產生符合目標活性(包括親和力和/或中和效價)的組合抗體，則應當選擇選自H35、H50、H53、H54、H95、H96、H97、H98、L30A和L96的另外的胺基酸殘基用於選擇性誘變，將它們各自突變為至少2個其他的胺基酸(優選5-14個其他的胺基酸)，並對所得到的抗體鑑定增加的親和力、中和效價(有可能的話還鑑定至少一種在別處所討論的其他的保留的特性或性質)。如果選自H35、H50、H53、H54、H95、H96、H97、H98、L30A和L96的單個胺基酸殘基的突變無法根本或不足以增加活性(包括親和力和/或中和效價)，以及如果甚至取代在那些位置中的胺基酸的多個活性增強胺基酸的組合無法產生符合目標活性(包括親和力和/或目標中和效價)的組合抗體，則應當從H33B、H52B、L31A組成的組中選擇另外的胺基酸殘基用於選擇性誘變，並各自突變為至少2個其他的胺基酸(優選5-14個其他的胺基酸)，然後鑑定所得到的抗體的增加的親和力、中和效價(以及可能的話還要對至少一種別處討論的其他的保留特性或性質進行鑑定)。應當理解一旦鑑定了具有期望活性(包括親和力和中和效價)的抗體，該順序選擇性誘變法就可在以上概述的任何步驟終止。如果預先選擇的位置的誘變鑑定了活性增強胺基酸殘基，但該組合抗體仍無法滿足針對活性(包括親和力和中和效價)的目標設定，和/或如果鑑定了活性增強胺基酸也影響其他期望的特性並且因此無法接受時，可對剩餘的CDR殘基進行誘變(參見第IV節)。本發明的方法可用於改善抗體或其抗原結合部分的活性以達到預定的目標活性(如預定的親和力和/或中和效價，和/或期望性質或特性)。因此，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分的活性以達到預定的目標活性的方法，所述方法包括a)提供親本抗體或其抗原結合部分；b)選擇選自H30、H31、H31B、H32、H33、H52、H56、H58、L30、L31、L32、L50、L91、L92、L93、L94的優先選擇性誘變位置；c)將經選擇的優先選擇性誘變位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生第一組突變的抗體或其抗原結合部分；d)評價第一組突變的抗體或其抗原結合部分的活性，以確定是否單個選擇性誘變位置的突變產生了具有預定的目標活性或部分目標活性的抗體或其抗原結合部分；e)在親本抗體或其抗原結合部分中，以逐步的方式組合顯示具有改善的活性的單獨突變，以產生組合抗體或其抗原結合部分。f)評價組合抗體或其抗原結合部分的活性以確定是否該組合抗體或其抗原結合部分具有預定的目標活性或部分目標活性。g)如果步驟d)或f)無法產生具有預定目標活性的抗體或其抗原結合部分，或無法產生僅具部分活性的抗體，就將選自H35、H50、H53、H54、H95、H96、H97、H98、L30A和L96的另外的胺基酸殘基突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生第二組突變的抗體或其抗原結合部分；h)評價第二組突變的抗體或其抗原結合部分的活性，以確定是否選自H35、H50、H53、H54、H95、H96、H97、腦、L30A和L96的單個胺基酸殘基的突變產生具有預定的目標活性或部分活性的抗體或其抗原結合部分；i)在親本抗體或其抗原結合部分中，以逐步的方式組合顯示具有改善的活性的步驟g)的單獨突變，以產生組合抗體或其抗原結合部分；j)評價組合抗體或其抗原結合部分的活性以確定是否該組合抗體或其抗原結合部分具有預定的目標活性或部分目標活性；k)如果步驟h)或j)無法產生具有預定目標活性的抗體或其抗原結合部分，或無法產生僅具部分活性的抗體，就將選自H33B、H52B和L31A的另外的胺基酸殘基突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生第三組突變的抗體或其抗原結合部分；1)評價第三組突變的抗體或其抗原結合部分的活性，以確定是否選自H33B、H52B和L31A的單個胺基酸殘基的突變產生具有預定的目標活性或部分活性的抗體或其抗原結合部分；m)在親本抗體或其抗原結合部分中，以逐步的方式組合顯示具有改善的活性的步驟k)的單獨突變，以產生組合抗體或其抗原結合部分；n)評價組合抗體或其抗原結合部分的活性以確定是否該組合抗體或其抗原結合部分具有預定的目標活性，從而產生具有預定的目標活性的抗體或其抗原結合部分。可使用多種誘變方法，包括PCR裝配、Kunkel(dut-ung-)和硫代硫酸酯(AmershamSculptor試劑盒)寡核苷酸-定向誘變。多種宿主表達系統可用於表達突變的抗體，包括細菌、酵母、杆狀56病毒和哺乳動物表達系統(以及噬菌體展示表達系統)。合適的細菌表達載體的一個實例是pUC119(Sfi)。其他抗體表達系統是本領域已知的和/或描述於以下第IV節中。不依賴於用於選擇的噬菌體展示方法，可鑑定通過本發明的方法產生的修飾的抗體或其抗原結合部分。因此，對於改善在噬菌體展示系統中通過選擇獲得的、但在噬菌體展示系統中其活性無法進一步通過誘變得到改善的重組親本抗體或其抗原結合部分的活性，本發明的方法是特別有利的。因此，在另一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分親和力的方法，所述方法包括a)提供重組親本抗體或其抗原結合部分；該重組親本抗體或其抗原結合部分是在噬菌體展示系統中通過選擇獲得的，但在所述噬菌體展示系統中其活性無法進一步通過誘變得到改善；b)選擇互補決定區(CDR)中的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置用於突變，從而鑑定經選擇的接觸位置或高變位置；c)將所述經選擇的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一組突變的抗體或其抗原結合部分，並在非噬菌體展示系統中表達所述組；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的活性；e)任選地，對至少一個其他的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置重複步驟b)-d);f)在親本抗體或其抗原結合部分中組合顯示具有改善的活性的單獨突變，以產生組合抗體或其抗原結合部分；和g)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組合抗體或其抗原結合部分的活性；直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性的抗體或其抗原結合部分。優選的接觸位置選自H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、脂、HlOl、L30、Ul、L32、L34、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L96。優選的高變位置選自H30、H31、H31B、H32、H52、H56、H58、57L30、L31、L32、L53andL93。更優選的優先選擇性i秀變位置選自H30、H31、H31B、H32、H33、H52、H56、H58、L30、L31、L32、L50、L91、L92、L93和L94。特別優選的接觸位置選自L50和L94。使用現有方法，要使抗體具有增加的結合親和力和中和效價，同時保留如上討論的抗體的其他性質或特性是不可能的或非常費力。然而，本發明的方法能容易地鑑定這樣的抗體。適於本發明方法的抗體可來自任何來源。因此，在另一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分活性的方法，所述方法包括a)提供重組親本抗體或其抗原結合部分；觸位置或高變位置，從而鑑定經選擇的優先選擇性誘變位置、'接觸位置或高變位置；c)將所述經選擇的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一組突變的抗體或其抗原結合部分，並在合適的表達系統表達所述組；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的活性，從而鑑定活性增強胺基酸殘基；e)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的至少一種其他的性質或特性，其中該性質或特性是需要在抗體中保留的性質或特性之一；直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性和至少一種保留的性質或特性的抗體或其抗原結合部分。在一個優選的實施方案中，接觸位置選自H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、脂、謂、HlOl、L30、Ul、L32、L34、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L96，以及其他的特性選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。在另一個優選的實施方案中，高變位置選自H30、H31、H31B、H32、H52、H56、H58、L30、L31、L32、L53和L93,以及其他的特性選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位/人而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。在一個更優選的實施方案中，用於選擇性誘變的殘基選自來自H30、H31、H31B、H32、H33、H52、H56、H58、L30、L31、L32、L50、L91、L92、L93、L94的優先選擇性誘變位置，以及其他的特性選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位^v而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。在一個更優選的實施方案中，接觸位置選自L50和L94,以及其他的特性選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。因此，如果針對特定抗原的抗體的親和力應當改善，而噬菌體展示(或包括核糖體展示的相關系統)方法不再可行，並且應當保留其他期望性質或特性，則可使用本發明的方法。因此，在另一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分活性的方法，所述方法包括a)提供重組親本抗體或其抗原結合部分；該重組親本抗體或其抗原結合部分是在噬菌體展示系統中通過選擇獲得的，但在所述噬菌體展示系統中其活性無法進一步通過誘變得到改善；b)選擇互補決定區(CDR)中的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置用於突變，從而鑑定經選擇的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置；c)將所述經選擇的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一組突變的抗體或其抗原結合部分，並在非噬菌體展示系統中表達所述組；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的活性；從而鑑定活性增強胺基酸殘基；e)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的至少一種其他的性質或特性，其中該性質或特性是需要保59留的性質或特性之一；直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性和至少一種保留的性質或特性的抗體或其抗原結合部分。f)任選地，對至少一個其他的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置重複步驟a)-e);g)在親本抗體或其抗原結合部分中組合至少兩個顯示具有改善的活性和至少一種保留的性質或特性的單獨的活性增強胺基酸殘基，以產生組合抗體或其抗原結合部分；和h)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組合抗體或其抗原結合部分的活性；直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性和至少一種保留的其他性質或特性的抗體或其抗原結合部分。在一個優選的實施方案中，接觸位置選自H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、謂、HlOl、L30、L31、L32、L34、L50、L52、L53、E55、L91、L92、L93、L94和L96,以及其他的特性選自l)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。在另一個優選的實施方案中，高變位置選自H30、H31、H31B、H32、H52、H56、H58、L30、L31、L32、L53和L93,以及其他的特性選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。在一個更優選的實施方案中，用於選擇性誘變的殘基選自來自H30、H31、H31B、H32、H33、H52、H56、H58、L30、L31、L32、L50、L91、L92、L93、L94的優先選擇性誘變位置，以及其他的特性選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。在一個更優選的實施方案中，接觸位置選自L50和L94,以及其他的特性選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。在另一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分活性的方法，所述方法包括a)提供重組親本抗體或其抗原結合部分；該重組親本抗體或其抗原結合部分是在噬菌體展示系統中通過選擇獲得的，但在所述噬菌體展示系統中其活性無法進一步通過誘變得到改善；b)選擇互補決定區(CDR)中的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置用於突變，從而鑑定經選擇的接觸位置或高變位置；c)將所述經選擇的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一組突變的抗體或其抗原結合部分，並在非噬菌體展示系統中表達所述組；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的活性；從而鑑定活性增強胺基酸殘基；e)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的至少一種其他的性質或特性，其中該性質或特性是需要保留的性質或特性之一；直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性和至少一種保留的性質或特性的抗體或其抗原結合部分。在一個優選的實施方案中，接觸位置選自H30、H31、H31B、H32、H33、H35、固、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、H98、HlOl、UO、Ul、U2、L34、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L96,以及其他的特性選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合千擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。在另一個優選的實施方案中，高變位置選自H30、H31、H31B、H32、H52、H56、H58、L30、L31、L32、L53和L93,以及其他的特性選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位/人而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。在一個更優選的實施方案中，用於選擇性誘變的殘基選自來自H30、H31、H31B、H32、H33、H52、H56、H58、L30、L31、U2、L50、L91、61L92、L93、L94的優先選擇性誘變位置，以及其他的特性選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。在一個更優選的實施方案中，接觸位置選自L50和L94,以及其他的特性選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。在另一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分活性的方法，所述方法包括a)提供重組親本抗體或其抗原結合部分；該重組親本抗體或其抗原結合部分是在噬菌體展示系統中通過選擇獲得的，但在所述噬菌體展示系統中其活性無法進一步通過誘變得到改善；觸位置或高變位置，從而鑑定經選擇的接觸位置或高變位置;、'c)將所述經選擇的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一組突變的抗體或其抗原結合部分，並在非噬菌體展示系統中表達所述組；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的活性；從而鑑定活性增強胺基酸殘基；e)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的至少一種其他的性質或特性，其中該性質或特性是需要保留的性質或特性之一；直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性和至少一種保留的特性的抗體或其抗原結合部分。f)任選地，對至少一個其他的優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置重複步驟a)-e);g)在親本抗體或其抗原結合部分中組合至少兩個顯示具有改善的活性和至少一種保留的其他的特性的單獨的活性增強胺基酸殘基，以產生組合抗體或其抗原結合部分；和h)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組合抗體或其抗原結合部分的活性；直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性和至少一種保留的性質或特性的抗體或其抗原結合部分。在一個優選的實施方案中，接觸位置選自H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、腦、HlOl、L30、Ul、132、L34、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L96,以及其他的特性選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。在另一個優選的實施方案中，高變位置選自H30、H31、H31B、H32、H52、H56、H58、L30、L31、L32、L53和L93，以及其他的特性選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。在一個更優選的實施方案中，用千選擇性誘變的殘基選自來自H30、H31、H31B、H32、H33、H52、H56、H58、L30、L31、U2、L50、L91、L92、L93、L94的優先選擇性誘變位置，以及其他的特性選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。在一個更優選的實施方案中，接觸位置選自L50和L94，以及其他的特性選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。IV.其他CDR殘基的#~飾最終，以任何手段鑑定了給定的抗體-抗原對中作為活性增強胺基酸殘基所需要的和/或為了結合抗原而直接或間接需要的和/或用於保留抗體的其他的期望性質或特性的所有CDR殘基。這樣的CDR殘基^f皮稱為"優先選擇性誘變位置"。應當注意在特定的情況下，優先選擇性誘變殘基也可通過其他手段包括抗體和抗原共結晶以及分子模建得以鑑定。如果上述聚焦於優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置的針對63鑑定活性增強胺基酸的優選的嘗試無用，或如果需要另外的改善的話，可如下所述修飾剩餘的CDR殘基。應當理解根據以上所討論的實施方案，抗體可早已在任何一個或多個接觸位置或高變位置上進行了修飾，但仍可能需要進一步的改善。因此，在另一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分活性的方法，所述方法包括a)提供親本抗體或其抗原結合部分；b)除H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、謂、HlOl、L30、L31、L32、L34、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L96夕卜，在互補決定區(CDR)中選擇胺基酸殘基用於突變；c)將所述經選擇的位置單獨突變為例如至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一種突變的抗體或一組突變的抗體或其抗原結合部分；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該突變的抗體或該組突變的抗體或其抗原結合部分的活性；從而鑑定活性增強胺基酸殘基；e)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該突變的抗體或該組突變的抗體或其抗原結合部分在至少一種其他的性質或特性中的改變，直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分具有改善的活性的抗體或其抗原結合部分。優選地，其他的特性或性質選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹4尤和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。如果單個殘基的誘變不足夠，則可包括其他殘基；因此，在另一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分活性的方法，所述方法包括a)提供親本抗體或其抗原結合部分；b)除H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、謂、HlOl、L30、L31、L32、L34、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L96之夕卜，在互才卜決定區(CDR)中選擇胺基酸殘基用於突變；c)將所述經選擇的位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一組突變的抗體或其抗原結合部分；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的活性；從而鑑定活性增強胺基酸殘基；e)對至少一個其他的CDR位置重複步驟b)-d),該位置不是在b)中選擇的位置，也不是處於H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、H98、HlOl、L30、L31、L32、L34、L50、L52、L53、"5、L91、L92、L93、L94和L96的位置；f)在親本抗體或其抗原結合部分中組合至少兩個顯示具有改善的活性的單獨的活性增強胺基酸殘基，以產生組合抗體或其抗原結合部分；和g)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該具有兩個活性增強胺基酸殘基的組合抗體或其抗原結合部分的活性，直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性的抗體或其抗原結合部分。如果上述聚焦於接觸位置或高變位置的針對鑑定活性增強胺基酸的優選的嘗試無用，或如果需要另外的改善，並且所討論的抗體無法進一步通過誘變和噬菌體展示(或相關的核糖體展示)方法得到優化的話，可如下所述修飾剩餘的CDR殘基。應當理解根據上述討論的實施方案，抗體可早已在任何一個或多個優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置上進行了修飾，但仍可能需要進一步的改善。因此，在另一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分活性的方法，所述方法包括a)提供重組親本抗體或其抗原結合部分；該重組親本抗體或其抗原結合部分是在噬菌體展示系統中通過選擇獲得的，但在所述噬菌體展示系統中其活性無法進一步通過誘變得到改善；b)除H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、謂、HlOl、L30、L31、L32、L34、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和之夕卜，在互才卜)夬定區(CDR)中選擇胺基酸殘基用於突變；c)將所述經選擇的接觸位置或高變位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一組突變的抗體或其抗原結合部分，並在非噬菌體展示系統中表達所述組；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗65原結合部分的活性；從而鑑定活性增強胺基酸殘基；e)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分在至少一種其他的性質或特性中的改變，直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分具有改善的活性的抗體或其抗原結合部分。優選地，其他的特性或性質選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。如果單獨誘變不足以增加抗體的親和力，則其他殘基可包括於該誘變中。因此，在另一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分活性的方法，所述方法包括a)提供親本抗體或其抗原結合部分；該重組親本抗體或其抗原結合部分是在噬菌體展示系統中通過選擇獲得的，但在所述噬菌體展示系統中其活性無法進一步通過誘變得到改善；b)除H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、H98、HlOl、L30、L31、L32、L34、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94禾口L96之夕卜，在互才卜決定區(CDR)中選擇胺基酸殘基用於突變；c)將所述經選擇的位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一組突變的抗體或其抗原結合部分，並在非噬菌體展示系統中表達；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的活性，從而鑑定活性增強胺基酸殘基；e)對至少一個其他的位置重複步驟b)-d),該位置不是在b)中選擇的位置，也不是處於H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、訓、H97、謂、HlOl、L30、L31、L32、1J4、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94的位置；g)在親本抗體或其抗原結合部分中組合至少兩個顯示具有改善的活性的單獨的活性增強胺基酸殘基，以產生組合抗體或其抗原結合部分；和h)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該具有兩個活性增強胺基酸殘基的組合抗體或其抗原結合部分的活性；直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性的抗體或其抗原結合部分。優選地，其他的特性或性質選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。所述的聚焦於優先選擇性誘變位置、接觸位置或高變位置的針對鑑定活性增強胺基酸的優選的嘗試可能是無用，或可能需要另外的改善，並且對保留抗體的其他的性質或特性而言，其是重要的。因此，在另一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分活性而不影響其他的特性的方法，所述方法包括a)提供親本抗體或其抗原結合部分；b)除H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、腦、訓l、L30、L31、L32、L34、L50、E52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L96之夕卜，在互才卜決定區(CDR)中選擇胺基酸殘基用於突變；c)將所述經選擇的位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一組突變的抗體或其抗原結合部分；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的活性，從而鑑定活性增強胺基酸殘基；e)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分在至少一種其他的性質或特性中的改變，直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性並保留其他的性質或特性的抗體或其抗原結合部分。優選地，其他的特性或性質選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。如果單個殘基的誘變不足夠，則其他殘基可包括於其中；因此，在另一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分活性的方法，所述方法包括a)提供親本抗體或其抗原結合部分；67b)除H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、H98、HlOl、L30、L31、L32、L34、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L96之夕卜，在互^卜決定區(CDR)中選擇胺基酸殘基用於突變；c)將所述經選擇的位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一組突變的抗體或其抗原結合部分；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的活性，從而鑑定活性增強胺基酸殘基；e.)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分在至少一種其他的特性或性質中的改變；e)對至少一個其他的CDR位置重複步驟b)-e)，該位置不是在b)中選擇的位置，也不是處於H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、H98、HlOl、IJO、Ul、U2、L34、"0、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L96的位置；f)在親本抗體或其抗原結合部分中組合至少兩個顯示具有改善的活性和不影響至少一種其他的性質或特性的單獨的活性增強胺基酸殘基，以產生組合抗體或其抗原結合部分；和g)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該具有兩個活性增強胺基酸殘基的組合抗體或其抗原結合部分的活性和至少一種其他的性質或特性的保留，直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性和至少一種保留的其他的性質或特性的抗體或其抗原結合部分。優先選擇性誘變位置、接觸和高變殘基的誘變可能無法充足地增加抗體的親和力，並且誘變和噬菌體展示方法(或相關的核糖體展示方法)可能不再有用並且至少一種抗體的其他的特性或性質應當要保留。因此，在另一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分的親和力的方法，所述方法包括a)提供親本抗體或其抗原結合部分，該親本抗體或其抗原結合部分是在噬菌體展示系統中通過選擇獲得的，但在所述噬菌體展示系統中其活性無法進一步通過誘變得到改善；b)除H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、H98、HlOl、L30、L31、L32、L34、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L96之夕卜，在互補決定區(CDR)中選擇胺基酸殘基用於突變；c)將所述經選擇的位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一組突變的抗體或其抗原結合部分，並在非噬菌體展示系統中表達；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的活性，從而鑑定活性增強胺基酸殘基；e)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分在至少一種其他的性質或特性中的改變，直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性的抗體或其抗原結合部分。優選地，其他的特性或性質選自1)保留與其他蛋白或人組織的非交叉反應性，2)保留表位識別，即優先在p70p40/p35異二聚體的環境中識別p40表位從而阻止游離的、可溶性p40的結合幹擾和/或3)產生接近於種系免疫球蛋白序列的抗體。如果單個殘基的誘變不足夠，則其他殘基可包括於其中；因此，在另一個實施方案中，本發明提供了一種改善抗體或其抗原結合部分活性的方法，所述方法包括a)提供親本抗體或其抗原結合部分，該親本抗體或其抗原結合部分是在噬菌體展示系統中通過選擇獲得的，但在所述噬菌體展示系統中其活性無法進一步通過誘變得到改善；b)除H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、畫、H97、H98、HlOl、L30、L31、L32、K34、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L96之夕卜，選擇互補決定區(CDR)中的胺基酸殘基用於突變；c)將所述經選擇的位置單獨突變為至少兩種其他的胺基酸殘基，從而產生一組突變的抗體或其抗原結合部分並在非噬菌體展示系統中表達；d)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該組突變的抗體或其抗原結合部分的活性和至少一種其他的特性或性質的保留，從而鑑定活性增強胺基酸殘基；e)對至少一個其他的CDR位置重複步驟b)-d),該位置不是在b)中選擇的位置，也不是處於H30、H31、H31B、H32、H33、H35、H50、69H52、H52A、H53、H54、H56、H58、H95、H96、H97、腦、HlOl、L30、L31、L32、U4、L50、L52、L53、L55、L91、L92、L93、L94和L96的位置；f)在親本抗體或其抗原結合部分中組合至少兩個顯示具有改善的活性和不影響至少一種其他的性質或特性的單獨的活性增強胺基酸殘基，以產生組合抗體或其抗原結合部分；和g)相對於親本抗體或其抗原結合部分，評價該具有兩個活性增強胺基酸殘基的組合抗體或其抗原結合部分的活性和至少一種性質或特性的保留，直至獲得相對於親本抗體或其抗原結合部分，具有改善的活性和至少一種其他的保留的特性或性質的抗體或其抗原結合部分。V.抗體表達可通過在宿主細胞中重組表達免疫球蛋白輕鏈和重鏈基因製備本發明的抗體或抗體部分。為重組表達抗體，用一個或多個攜帶編碼抗體的免疫球蛋白輕鏈和重鏈的DNA片段的重組表達載體轉染宿主細胞，使得在該宿主細胞中表達輕鏈和重鏈，並優選地分泌到培養該宿主細胞的培養基中，從而可從該培養基回收抗體。標準的重組DNA方法，例如在Sambrook,Fritsch和Maniatis(編)，MolecularCloning;ALaboratoryManual,笫2版，ColdSpringHarbor,N.Y.,(1989),Ausubel,F.M.等(編)CurrentProtocolsinMolecularBiology,GreenePublishingAssociates,(1989)和Boss等的美國專利第4,816,397號中所描述的那些技術，;波用於獲得抗體重鏈和輕鏈基因，將這些基因整合入重組表達載體中並將載體導入宿主細胞中。為獲得編碼Joe9wt或Joe9wt-相關的抗體的重鏈可變區的DNA片段，如第II節中所描述的，從人文庫中篩選特異於人IL-12的抗體並進行突變。一旦獲得編碼Joe9wt或Joe9wt-相關的VH和VL區段的DNA片段，通過標準的方法進行這些序列的誘變，例如PCR位點定向誘變(PCR-指導的誘變，其中突變的核苷酸被摻入PCR引物中，使得PCR產物包含該突變)或其他的位點定向誘變法。通過標準的重組DNA技術進一步操作顯示一定水平的活性和結合特異性/親和力以及期望的例如J695的人IL-12抗體，例如將可變區基因轉變為全長抗體鏈基因、Fab片段基因或scFv基因。在這些操作中，將VL-或VH-編碼DNA片段可操作地連接至另一編碼另外的蛋白(例如抗體恆定區或柔性接頭)的DNA片段。當在上下文中使用時，術語"可操作地連接的"意指兩條DNA片段如此連接以致於為這兩條DNA片段所編碼的胺基酸序列保持在讀框中。可通過將VH-編碼DNA可操作地連接另一編碼重鏈恆定區(CH1、CH2和CH3)的DNA分子，從而將分離的編碼VH區的DNA轉變為全長重鏈基因。人重鏈恆定區基因的序列是本領域已知的(參見如Kabat,E.A.,等(1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIH出版物編號91-3242)，並且可通過標準的PCR擴增獲得包含這些區的DNA片段。重鏈恆定區可以是IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgA、IgE、IgM或IgD恆定區以及如在Kabat(,Kabat,E.A.,等(1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIH出版物編號91-3242)中所描述的其中的任何同種異型變體，但最優選是IgGl或IgG4恆定區。對於Fab片段重鏈基因，VH-編碼DNA能可操作地連接另一僅編碼重鏈CHI恆定區的DNA分子。可通過將VL-編碼DNA可操作地連接另一編碼輕鏈恆定區CL的DNA分子，從而將分離的編碼VL區的DNA轉變為全長輕鏈基因(以及Fab輕鏈基因)。人輕鏈恆定區基因的序列是本領域已知的(參見如Kabat,E.A.,等(1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版，U.S.DepartmentofHealthandHumanServices,NIH出版物編號91-3242),並且可通過標準的PCR擴增獲得包含這些區的DNA片段。輕鏈恆定區可以是k或X恆定區，但最優選是X恆定區。為產生scFv基因，將VH-和VL-編碼DNA片段可操作地連接至另一編碼柔性接頭的片段，如編碼胺基酸序列(Gly4-Ser)3的片段，使得VH和VL序列可作為一條具有通過柔性接頭連接的VL和VH區的連續的單鏈蛋白被表達(參見如Bird等(1988)Science242:423-426;Huston等(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USAM:5879-5883;McCafferty等，Nature(1990)348:552-554)。為表達本發明的抗體或抗體部分，將如上所述獲得的編碼部分或全長輕鏈和重鏈的DNA插入表達載體中，使得該基因可操作地連接轉錄和翻譯控制序列。在上下文中，術語"可操作地連接"意指將抗體基因71連接入載體中，使得載體中的轉錄和翻譯控制序列發揮它們預期的調節抗體基因的轉錄和翻譯的作用。選擇表達載體和表達控制序列以與所使用的表達宿主細胞相容。可將抗體輕鏈基因和抗體重鏈基因插入分開的載體中，或更典型地，將兩個基因都插入同一表達載體中。通過標準的方法將抗體基因插入表達載體中(如連接抗體基因片段和載體上互補的限制酶切位點，或如果不存在限制酶切位點下進行平端連接)。在插入J695或J695-相關的輕鏈或重鏈序列之前，表達載體可已攜帶抗體恆定區序列。例如，一種將J695或J695-相關的VH和VL序列轉變為全長抗體基因的方法是將它們分別插入已編碼重鏈恆定區和輕鏈恆定區的表達載體中，使得在載體中該VH區段可操作地連接CH區l殳以及在該載體中VL區段可操作地連接CL區段。另外或可選地，重組表達載體可編碼有利於抗體鏈從宿主細胞中分泌的信號肽。可將抗體鏈基因克隆入載體中，使得信號肽按閱讀框架與抗體鏈基因的氨基末端連接。信號肽可以是免疫球蛋白信號肽或異源信號肽(即來自非免疫球蛋白的蛋白的信號肽)。除抗體鏈基因之外，本發明的重組表達載體攜帶有控制抗體鏈基因在宿主細胞中表達的調節序列。術語"調節序列，，意在包括啟動子、增強子和控制抗體鏈基因轉錄或翻譯的其他表達調控元件(如多腺苦酸化信號)。這樣的調節序列描述於例如Goeddel;GeneExpressionTechnology:MethodsinEnzymology185,AcademicPress,SanDiego，CA(1990)中。本領域技術人員應當理解表達載體的設計包括選擇調節序列可取決於諸如選擇要被轉化的宿主細胞、期望的蛋白表達水平等的因素。優選用於哺乳動物宿主細胞表達的調節序列包括在哺乳動物細胞中指導高水平蛋白表達的病毒元件，例如來源於巨細胞病毒(CMV)(例如CMV啟動子/增強子)、猿猴病毒40(SV40)(例如SV40啟動子/增強子)、腺病毒(如腺病毒主要晚期啟動子(AdMLP))和多瘤病毒的啟動子和/或增強子。對於病毒調節元件及其序列的進一步描述，參見如Stinski的美國專利第5,168,062號，Bell等的美國專利第4,510,245號和Schaffner等的美國專利笫4,968,615號，Bujard等的美國專利笫5,464,758號和Bujard等的美國專利第5,654,168號。除抗體鏈基因和調節序列之外，本發明的重組表達載體可攜帶另外的序列，例如調節載體在宿主細胞中複製的序列(如複製起點)和選擇標72記基因。選擇標記基因有利於載體已導入其中的宿主細胞的選擇(參見如Axel等的美國專利第4,399,216號、第4,634,665號和第5，179,017號)。例如，通常選擇標記基因賦予載體已導入的宿主細胞針對藥物例如G418、潮黴素或氨甲蝶呤的抗性。優選的選擇標記基因包括二氬葉酸還原酶(DHFR)基因(用於利用氨甲蝶呤選擇/擴增的dhfr-宿主細胞)和neo基因(用於G418選擇)。為了表達輕鏈和重鏈，通過標準的技術將編碼重鏈和輕鏈的表達載體轉染入宿主細胞中。不同形式的術語"轉染"意在包括多種常用於將外源DNA導入原核或真核宿主細胞中的技術，如電穿孔、磷酸4丐沉澱、DEAE-葡聚糖轉染等。儘管理論上有可能在原核或真核宿主細胞中表達本發明的抗體，但是在真核細胞以及最優選地在哺乳動物宿主細胞中表達抗體，其是最優選的原因在於這樣的真核細胞，以及特別是哺乳動物細胞較原核細胞更易於裝配並分泌正確摺疊且具免疫活性的抗體。優選用於表達本發明重組抗體的哺乳動物宿主細胞包括中國倉鼠卵巢(CHO細胞)(包括dhfr-CHO細胞，描述於Urlaub和Chasin,(1980)Proc.Natl.Acad.Sd.USA22:4216-4220,使用DHFR可選擇標記，魚在R丄Kaufman和P.A.Sharp(1982)Mol.Biol.159:601-621中所描述的)、NS0骨髓瘤細胞、COS細胞和SP2細胞。當將編碼抗體基因的重組表達載體導入哺乳動物宿主細胞時，通過將該宿主細胞培養一段足以容許在該宿主細胞中表達抗體的時間來產生抗體，或更優選地，將抗體分泌入該宿主細胞所生長的培養基中。可使用標準的蛋白純化方法從培養基中回收抗體。宿主細胞還可用於出生完整抗體的一部分，例如Fab片段或scFv分子。應當理解對上述步驟的改變處於本發明的範圍內。例如，用編碼本發明抗體的輕鏈或重鏈(但非兩者)的DNA轉染宿主細胞是合意的。重組DNA技術還可用於除去編碼對於結合hIL-12是不需要的輕鏈和重鏈的DNA的一部分或全部。由這樣的截短的DNA分子表達的分子也包括在本發明的抗體中。此外，通過用標準的化學交聯方法將本發明的抗體與另一抗體相交聯，可產生這樣一種雙功能抗體，其中一條重鏈和一條輕鏈是本發明的抗體的，以及另外的重鏈和輕鏈特異於不同於hIL-12的抗原。在用於重組表達本發明的抗體或其抗原結合部分的優選的系統中，通過磷酸釣介導的轉染將編碼抗體重鏈和抗體輕鏈的重組表達載體導入dhfr-CHO細胞中。在重組表達載體中，抗體重鏈和輕鏈基因各自可操作地連接增強子/啟動子調節元件(如來源於SV40、CMV、腺病毒等，例如CMV增強子/AdMLP啟動子調節元件或SV40增強子/AdMLP啟動子調節元件)以驅動高水平的基因轉錄。重組表達載體還攜帶有DHFR基因，其容許使用氨甲蝶呤選擇/擴增來選擇已用載體轉染的CHO細胞。培養經選擇的轉化宿主細胞以用於表達抗體重鏈和輕鏈，並從培養基中回收完整的抗體。標準的分子生物學技術用於製備重組表達載體、轉染宿主細胞、選擇轉化體、培養宿主細胞和從培養基中回收抗體。本發明的抗體或其抗原結合部分可在轉入人免疫球蛋白基因的動物(如小鼠)中表達(參見如Taylor,L.D.等(1992)Nucl.AcidsRes.祉6287-6295)。植物細胞也可被修飾以產生表達本發明的抗體或其抗原結合部分的轉基因植物。鑑於上述內容，本發明的另一個方面涉及可用於重組表達本發明的抗體和抗體部分的核酸、載體和宿主細胞組合物。優選地，本發明提供了編碼J695的CDRs或J695的完整的重鏈和/或輕鏈可變區的分離的核酸。因此，在一個實施方案中，本發明提供了一種編碼抗體重鏈可變區的分離的核酸，其編碼包含胺基酸序列SEQIDNO:25的J695重鏈CDR3。優選地，編碼抗體重鏈可變區的核酸進一步編碼包含胺基酸序列SEQIDNO:27的J695重鏈CDR2。更優選地，編碼抗體重鏈可變區的核酸進一步編碼包含胺基酸序列SEQIDNO:29的J695重鏈CDRl。還更優選地，該分離的核酸編碼包含胺基酸序列SEQIDNO:31(J695的完整的VH區)的抗體重鏈可變區。在其他實施方案中，本發明提供了一種編碼抗體輕鏈可變區的分離的核酸，其編碼包含胺基酸序列SEQIDNO:26的J695輕鏈CDR3。優選地，該編碼抗體輕鏈可變區的核酸進一步編碼包含胺基酸序列SEQIDNO:28的J695輕鏈CDR2。更優選地，該編碼抗體輕鏈可變區的核酸進一步編碼包含胺基酸序列SEQIDNO:30的J695輕鏈CDR1。還更優選地，分離的核酸編碼包含胺基酸序列SEQIDNO:32(J695的完整VL區)的抗體輕鏈可變區。本發明還提供了編碼抗體重鏈和抗體輕鏈的重組表達載體。例如，在一個實施方案中，本發明提供了一種重組表達載體，所述載體編碼a)具有包含胺基酸序列SEQIDNO:31的可變區的抗體重鏈；和b)具有包含胺基酸序列SEQIDNO:32的可變區的抗體輕鏈。本發明還提供了其中已導入一種或多種本發明的重組表達載體的宿主細胞。優選地，宿主細胞是哺乳動物宿主細胞，更優選地，宿主細胞是CHO細胞、NS0細胞或COS細胞。本發明更進一步提供了一種通過在合適的培養基中培養本發明的宿主細胞直至本發明的重組人抗體被合成的合成本發明的重組人抗體的方法。該方法可進一步包括從培養基中分離重組人抗體。VI.藥物組合物和給藥本發明的抗體和抗體部分可摻入適合於給予個體的藥物組合物中。通常，藥物組合物包含本發明的抗體或抗體部分和藥學上可接受的載體。當在本文中使用時，"藥學上可接受的載體"包括生理學上可相容的任何一種和全部的溶劑，分散介質，包衣、抗細菌和抗真菌劑，等滲劑和吸收延遲劑等。藥學上可接受的載體的實例包括一種或多種水、鹽水、磷酸鹽緩沖鹽水、葡萄糖、甘油、乙醇等，以及它們的組合。在多數情況下，在組合物中優選包括等滲劑，例如糖類，多元醇如甘露糖醇、山梨糖醇或氯化鈉。藥學上可接受的載體可進一步包括少量的增加抗體或抗體部分的貯存期限或有效性的輔助性物質，例如潤溼劑或乳化劑、防腐劑或緩沖劑。本發明的抗體和抗體部分可摻入適合於腸胃外給藥的藥物組合物中。優選地，抗體或抗體部分應當製備為包含0.1-250mg/ml抗體的可注射的溶液。該可注射的溶液可由處於火石玻璃管瓶或淡黃色管瓶、安瓿或載藥注射器中的液體或凍幹劑型組成。緩衝劑可以是L-組氨酸(1-50mM)，最佳5-10mM,處於pH5.0-7.0(最佳pH6.0)。其他適合的緩衝劑包括但不限於丁二酸鈉、檸檬酸鈉、磷酸鈉或磷酸鉀。可以用氯化鈉來改變0-300mM(對於液體劑型最佳150mM)濃度的溶液的毒性。凍幹劑型可包含冷凍保護劑，主要是0-10%蔗糖(最佳0.5-1.0%)。其他合適的冷凍保護劑包括海藻糖和乳糖。凍幹劑型可包含填充劑，主要是1-10%甘露糖醇(最佳2-4%)。穩定劑可用於液體和凍幹劑型中，主要是1-50mML-曱硫氨酸(最佳5-10mM)。其他合適的填充劑包括甘氨酸、精氨酸，可包括0-0.05%聚山梨醇酯-80(最佳0.005-0.01%)。另外的表面活性劑包括但不限於聚山梨醇酯20和BRIJ表面活性劑。75在一個優選的實施方案中，藥物組合物包^r以約100mg-200mg劑量存在的抗體。本發明的組合物可以多種劑型存在。這些包括例如液體、半固體和固體劑型，例如液體溶液(如可注射的和可輸注的溶液)、分散液或混懸劑、片劑、丸劑、粉劑、脂質體和栓劑。優選的劑型取決於預期的給藥方式以及治療應用。典型優選的組合物是以可注射的或可輸注的溶液形組合物。優選的給藥方式是腸胃外(如靜脈內、皮下、腹膜內、肌內)給藥。在一個優選的實施方案中，抗體通過皮下注射給予。在製造和貯藏條件下，治療組合物通常必須是無菌且穩定的。可將組合物配製為溶液、微乳劑、分散劑、脂質體或其他適於高藥物濃度的有序結構。可通過將需要量的活性物質(即抗體或抗體部分)摻入合適的具有一種或組合的上述列舉成分(根據需要)的溶劑中，繼之以過濾滅菌，製備無菌可注射溶液。一般地，通過將活性物質摻入含有基礎分散介質和所需的來自上述列舉的那些成分的其他成分的無菌賦形劑中製備分散劑。至於用於製備無菌可注射的溶液的無菌凍乾粉劑，優選的製備方法是真空乾燥和噴霧乾燥產生活性成分加任何另外的所需成分的粉劑，所述成分來自之前其無菌過濾的溶液。可例如通過使用包衣如卵磷脂保持適當的溶液流動性，至於分散劑則通過保持所需的粒度以及通過使用表面活性劑。可通過在組合物包含一種延遲吸收的物質例如單硬脂酸鹽和明膠，從而帶來可注射組合物的延長吸收。可通過多種本領域已知的方法給予本發明的抗體和抗體部分，儘管對於許多治療應用，優選的給藥途徑/方式是皮下注射、靜脈注射或輸注。但是如本領域技術人員所應當理解的，給藥途徑和/或方式會取決於所期望的結果而改變。在某些實施方案中，活性物質可與會保護該物質抗快速釋放的載體一起製備，例如控釋劑型，包括植入物、皮膚貼片和微嚢化遞藥系統。可使用生物可降解的、生物相容的聚合物，例如乙二醇二乙酸酯、聚酐、聚乙醇酸、膠原、多正酯類和聚乳酸。許多用於製備這樣的配方的方法是專利方法或為本領域技術人員所廣泛知道。參見如SustainedandControlledReleaseDrugDeliverySystems,J.R.Robinson,編，MarcelDekker,Inc.,NewYork,1978。在某些實施方案中，本發明的抗體或抗體部分可例如與惰性稀釋劑76或能同化的可食載體一起經口給予。所述化合物(和其他成分，如有必要)還封於硬或軟殼膠嚢中，壓製成片劑或直接摻入個體的飲食中。為了口服治療給藥，化合物可與賦形劑相摻合併以可攝取的片劑、口含片、錠劑、膠嚢劑、酏劑、混懸劑、糖漿劑、糯米紙嚢劑等的形式使用。為通過除腸胃外給藥之外的途徑給予本發明的化合物，可能需要用阻止化合物失活的材料包被該化合物或與該化合物一起給予。補充的活性物質也可摻入組合物中。在某些實施方案中，本發明的抗體或抗體部分與一種或多種對於治療其中IL-12活性是有害的病症有用的另外的治療劑共同配製和/或共同給予。例如，本發明的抗-hlL-12抗體或抗體部分可與一種或多種結合其他把標的另外的抗體(如給合其他細胞因子或結合細胞表面分子的抗體)共同配製和/或共同給。此外，本發明的一種或多種抗體可與兩種或更多種前述治療劑相聯合。這樣的聯合治療可有利地利用較低劑量的所給予的治療劑，從而避免了可能的毒性或與各種單一療法相關的併發症。熟練醫師應當理解當本發明的抗體用作聯合治療的一部分時，與當將抗體單獨給予個體相比，較低劑量的抗體可能是合意的(如可通過使用聯合治療達到協同療效，轉而容許使用較低劑量的抗體以達到期望的療效)。在與多種涉及免疫和炎性要素的疾病相關的病理學中白介素12起著關鍵的作用。這些疾病包括但不限於類風溼性關節炎、骨關節炎、幼年型慢性關節炎、萊姆關節炎、銀屑病關節炎、反應性關節炎、脊推關節病、系統性紅斑狼瘡、克羅恩氏病、潰瘍性結腸炎、炎性腸病、胰島素依賴型糖尿病、曱狀腺炎、哮喘、變應性疾病、銀屑病、皮炎硬皮病、特應性皮炎、移植物抗宿主病、器官移植排斥、器官移植相關的急性或慢性免疫病、結節病、動脈粥樣硬化、瀰漫性血管內凝血、川崎氏病、格雷夫斯氏病、腎病症候群、慢性疲勞綜合症、韋格內氏肉芽腫症、Henoch-Schoenlein紫癜、腎微小性血管炎、慢性活動性肝炎、葡萄膜炎、膿毒性休克、中毒性休克症候群、敗血病症候群、惡病質、傳染病、寄生蟲病、獲得性免疫缺陷症候群、急性橫貫性脊髓炎、亨廷頓氏舞蹈病、帕金森氏病、阿爾茨海默氏病、中風、原發性膽汁性肝硬變、溶血性貧血、惡性腫瘤、心力衰竭、心肌梗死、阿狄森氏病、散發性I型多腺缺乏和II型多腺缺乏、施密特氏症候群、成人(急性)呼吸窘迫症候群、脫髮、斑禿、血清反應陰性關節病、關節病、萊特爾氏病、牛皮癬性關節病、潰瘍性結腸關節病、腸病性滑膜炎、衣原體、耶爾森菌屬和沙門菌屬相關的關節病、脊推關節病、動脈粥樣化疾病/動脈硬化，特應性變態反應、自身免疫大皰病、尋常型天皰瘡、落葉型天皰瘡、類天皰瘡、線性IgA病、自身免疫溶血性貧血、Coombs陽性溶血性貧血、獲得性惡性貧血、少年惡性貧血、肌痛性大腦炎/RoyalFree病、慢性皮膚黏膜念珠菌病、巨細胞動脈炎、原發性硬化性肝炎、起因不明的自身免疫性肝炎、獲得性免疫缺陷病症候群、獲得性免疫缺陷相關的疾病、C型肝炎、普通各式各樣的免疫缺陷(普通各式各樣的血丙種球蛋白減少症)、擴張型心肌病、女性不孕症、卵巢功能衰竭、卵巢功能早衰、纖維化肺疾病,隱原性纖維化肺泡炎、炎症後間質性肺病、間質性肺炎、結締組織病相關的間質性肺病、混合性結締組織病相關的肺病、全身硬化相關的間質性肺病、類風溼性關節炎相關的間質性肺病、系統性紅斑狼瘉相關的肺病、皮肌炎/多肌炎相關的肺病、Sj6gren氏病相關的肺病、強直性脊柱炎相關的肺病、血管炎彌散性肺病、鐵質沉著出血相關的肺病、藥物造成的間質性肺病、放射性纖維化、閉塞性細支氣管炎、慢性嗜酸粒細胞性肺炎、淋巴細胞浸潤性肺病、傳染後間質性肺病、痛風性關節炎、自2型自身免疫生肝炎(抗-LKM抗體:炎):自身免疫介導^低血糖症r具有黑色棘皮症的B型胰島素抗性、曱狀旁腺功能減退、與器官移植相關的急性免疫病、與器官移植相關的慢性免疫病、骨關節炎、原發性硬化性膽管炎、特發性白血球減少症、自身免疫性嗜中性白血球減少症、腎病NOS、腎小球腎炎、腎微小性血管炎、萊姆病、盤狀紅斑狼瘡、特發性男性不孕症或NOS、精液自身免疫性、多發性硬化(所有亞型)、胰島素依賴型糖尿病、交感性眼炎、結締組織疾病繼發性肺高血壓、古德帕斯丘症候群、結節性多動脈炎的肺表現、急性風溼性發熱、類風溼性脊推炎、斯蒂爾病、系統性硬化、無脈症/動脈炎、自身免疫性血小板減少、特發性血小板減少、自身免疫性甲狀腺病、曱狀腺機能亢進、曱狀腺腫性自身免疫性甲狀腺機能減退(Hashimoto氏病)、萎縮性自身免疫性曱狀腺機能減退、原發性粘液水肺、晶狀體原性葡萄膜炎、原發性血管炎和白癜風。本發明的人抗體和抗體部分可用於治療自身免疫病，特別是與炎症相關的那些自身免疫病，包括類風溼性脊推炎、變態反應、自身免疫性糖尿病、自身免疫性葡萄膜炎。優選地，如第vn節中所更詳細描述的，本發明的抗體或其抗原結合部分用於治療類風溼性關節炎、克羅恩氏病、多發性硬化、胰島素依賴型糖尿病和銀屑病。本發明的人抗體或抗體部分還可與一種或多種在自身免疫和炎性疾病治療中有用的另外的治療劑一起給予。本發明的抗體或其抗原結合部分可單獨使用或聯合使用來治療上述疾病。應當理解本發明的IL-12抗體或其抗原結合部分可單獨使用或與另外的藥物如治療劑聯合使用，所述另外的藥物為本領域技術人員根據其預期目的所選擇的。例如，該另外的藥物可以是本領域公認的對治療本發明的抗體所治療的疾病或病症有用的治療劑。該另外的藥物還可以是一種給予治療組合物有益特性的藥物，即如一種影響該組合物的粘度的藥物。應當進一步理解包括在本發明中的聯合是那些對於它們預期的目的是有用的聯合。如下所刮的藥物作為例證性的目的並不意在限制。作為本發明一部分的聯合可以是本發明的抗體和至少一種選自以下列表的另外的藥物。如果該聯合是這樣一種以致於所產生的組合物能執行其預期功能的聯合，則該聯合還可包括多於一種的另外的藥物，如兩種或三種另外的藥物。此外，用於與IL-12抗體相聯合的在此描述的另外的藥物並不限制它們歸屬治療的病症。優選的聯合是也稱為NSAIDS的非類固醇類的抗炎藥物，其包括諸如布洛芬的藥物。其他優選的聯合是皮質激素類包括氪化潑尼松；當與本發明的抗-IL-12抗體聯合治療患者時，可通過逐漸減少所需的類固醇劑量，從而降低或甚至消除所使用的類固醇的眾所周知的副作用。可與本發明的抗體或抗體部分聯合的用於類風溼性關節炎的治療劑的非限制性實例包括如下抑制細胞因子的抗炎藥物(CSAIDs);其他人細胞因子或生長因子，例如TNF(包括阿達木單抗/HUMIRA)、LT、IL-1、IL-2、IL-6、IL隱7、IL-8、IL-15、IL畫16、IL誦18、EMAP-II、GM畫CSF、FGF和PDGF的抗體或拮抗劑。本發明的抗體或其抗原結合部分可與細胞表面分子例如CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD80(B7.1)、CD86(B7.2)、CD90的抗體或它們的配體包括CD154(gp39或CD40L)相聯合。79上進行幹擾；優選的實例包括TNF拮抗劑，如嵌合、人源化或人TNF抗體，D2E7(1996年2月9日提交的美國申請序列號08/599,226)、cA2(RemicadeTM)、CDP571、抗-TNF抗體片段(如CDP870)和可溶性p55或p75TNF受體、其衍生物(p75TNFRlgG(EnbrelTM)或p55TNFRlgG(Lenercept)、可溶性IL-13受體(sIL-13)以及TNFa轉化酶(TACE)抑制劑；類似地，由於相同的原因IL-1抑制劑(如白介素-l-轉化酶抑制劑，例如Vx740或IL-1RA等)可能是有效的。其他優選的聯合包括白介素11、抗-P7s和p-選擇蛋白金屬蛋白配體(PSGL)。又一個優選的聯合是取決於IL-12功能或與IL-12功能相呼應，可起平行作用的其他自身免疫應答的關鍵參與者；尤其優選的是IL-18拮抗劑，包括IL-18抗體或可溶性IL-18受體，或IL-18結合蛋白。已經表明IL-12和IL-18具有交疊但截然不同的功能，因此針對兩者的拮抗劑的聯合可能是最有效的。另一個優選的聯合是非耗竭的抗-CD4抑制劑。其他優選的聯合包括共刺激通路CD80(B7.1)或CD86(B7.2)的拮抗劑，包括抗體、可溶性受體或拮抗'l"生配體。抗-IL12抗體或其抗原結合部分還可與其他藥物相聯合，例如氨甲蝶呤、6-MP、硝基咪唑硫嘌呤、柳氮磺胺吡啶、美沙拉。秦、奧沙拉。秦、氯喹/羥化氯喹、青黴胺、金硫代蘋果酸鹽(肌肉注射或口服)、硝基咪唑硫嘌呤、秋水仙鹼、皮質激素類(口服、吸入和局部注射)、(3-2腎上腺素受體激動劑(舒喘靈、叔丁喘寧、salmeteml)、黃嘌呤類(茶鹼、氨茶鹼)、色甘酸鹽、奈多羅米、酮替芬、異丙託銨和氧託品、環孢菌素、FK506、雷帕黴素、嗎替麥考酚酯、來氟米特、NSAIDs例如布洛芬、皮質激素類例如氫化潑尼松、磷酸二酯酶抑制劑、腺芬激動劑、抗血栓藥、補體抑制物、類腎上腺素能藥物、幹擾通過促炎細胞因子例如TNFa或IL-1的信號傳導的藥物(如IRAK、NIK、IKK、p38或MAP激酶抑制劑)、IL-1(3轉化酶抑制劑(如Vx740)、抗-P7s、p-選擇蛋白金屬蛋白配體(PSGL)、TNFa轉化酶(TACE)抑制劑、T-細胞信號傳導抑制劑例如激酶抑制劑、金屬蛋白酶抑制劑、柳氮磺胺吡啶、硝基咪唑硫嘌呤、6-巰基噤呤、血管緊張素轉化酶抑制劑、可溶性細胞因子受體及其衍生物(如可溶性p55或p75TNF受體以及衍生物p75TNFRIgG(EnbrefM)和p55TNFRIgG(Lenercept)、sIL隱lRI、sIL-lRII、sIL-6R、可溶性IL-13受體(sIL-13))和抗炎細胞因子(如IL-4、IL-IO、IL-ll、IL-13和TGF(3)。優選的聯合包括氨甲蝶呤或來氟米特，和在中度或重度類風溼性關節炎病例下，環孢菌素。制性;;J包括如下布;也奈德;；表皮生長因子r皮質激素類;'環孢菌素,柳氮磺胺吡啶；氨基水楊酸鹽；6-巰基。票呤；硝基咪唑硫噪呤；曱硝噠唑；脂氧合酶抑制劑；美沙拉。秦；奧沙拉唪；巴柳氮；抗氧化劑；血栓烷抑制劑；IL-1受體拮抗劑；抗-IL-l(3單克隆抗體；抗-IL-6單克隆抗體；生長因子；彈性蛋白酶抑制劑；吡啶基-咪唑化合物；其他人細胞因子或生長因子的抗體或拮抗劑，例如TNF(包括阿達木單抗/HUMIRA)、LT、IL-1、IL-2、IL國6、IL-7、IL-8、IL-15、IL-16、IL國18、EMAP-II、GM國CSF、FGF和PDGF。本發明的抗體或其抗原結合部分可與細胞表面分子例如CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD90的抗體或它們的配體相聯合。本發明的抗體或其抗原結合部分還可與以下藥物相聯合，所述藥物例如氨甲蝶呤，環孢菌素，FK506,雷帕黴素，嗎替麥考酚酯，來氟米特，NSAIDs,例如布洛芬，皮質激素類例如氫化潑尼松，磷酸二酯酶抑制劑，腺苷激動劑，抗血栓藥，補體抑制物，類腎上腺素能藥物，幹擾通過促炎細胞因子如TNFa或IL-l的信號傳導的藥物(如IRAK、NIK、IKK、p38或MAP激酶抑制劑)，IL-ip轉化酶抑制劑(如Vx740)，抗-P7s,p-選擇蛋白金屬蛋白配體(PSGL),TNFa轉化酶抑制劑，T-細胞信號傳導抑制劑例如激酶抑制劑，金屬蛋白酶抑制劑，柳氮磺胺吡啶，硝基咪唑硫噪呤，6-巰基噪呤，血管緊張素轉化酶抑制劑，可溶性細胞因子受體及其衍生物(如可溶性p55或p75TNF受體、sIL-lRI、sIL-腦、sIL畫6R、可溶性IL-13受體(sIL-13))和抗炎細胞因子(如IL-4、IL-IO、IL-ll、IL-13和TGFp)。其中可與抗體或抗原結合部分聯合的用於克羅恩氏病的治療劑的優選的實例包括如下TNF拮抗劑，例如抗-TNF抗體，D2E7(阿達木單抗/HUMIRA),cA2(Remicade),CDP571,抗畫TNF抗體片段(如CDP870)，TNFR-Ig構建物(p75TNFRIgG(EnbrefM)和p55TNFRIgG(Lenercept))，抗-P7s，p-選擇蛋白金屬蛋白配體(PSGL),可溶性IL-13受體(sIL-13)和PDE4抑制劑。本發明的抗體或其抗原結合部分可與皮質激素類例如布地奈德和地塞米松相聯合。抗體還可與如下藥物相聯合，例如柳氮磺胺吡咬、5-對氨基水楊酸和奧沙拉唪、和幹擾促炎細胞因子如IL-1合成或作用的藥物，例如IL-1(3轉化酶抑制劑(如Vx740)和IL-lra。81抗體或其抗原結合部分還可與T細胞信號傳導抑制劑例如酪氨酸激酶抑制劑6-巰基噪呤一起使用。抗體或其抗原結合部分可與IL-ll相聯合。可與抗體或抗體部分聯合的用於多發性硬化的治療劑的非限制性實例包括如下皮質激素類；氫化潑尼松；曱基氬化潑尼松；硝基咪唑硫噤呤；環磷醯胺；環孢菌素；氨甲蝶呤；4-氨基吡。定；替扎尼定；幹擾素-(31a(Avonex;Biogen);幹擾素-pib(Betaseron;Chiron/Berlex);共聚物l(Cop-l;醋酸才各4立-齊美；TevaPharmaceuticalIndustries,Inc.);高壓氧；靜脈滴注免疫球蛋白；克拉屈濱；其他人細胞因子或生長因子的抗體或拮抗劑，例如TNF、LT、IL-1、IL-2、IL畫6、IL畫7、IL-8、IL-15、IL隱16、IL-18、EMAP-II、GM-CSF、FGF和PDGF。本發明的抗體或其抗原結合部分可與細胞表面分子例如CD2、CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD30、CD40、CD45、CD69、CD80、CD86、CD90的抗體或它們的配體相聯合。本發明的抗體或其抗原結合部分還可與如下藥物相聯合，例如氨曱蝶呤，環孢菌素，FK506，雷帕黴素，嗎替麥考酚酯，來氟米特、NSAIDs、例如布洛芬、皮質激素類例如氫化潑尼松、磷酸二酯酶抑制劑、腺苷激動劑、抗血栓藥、補體抑制物、類腎上腺素能藥物、幹擾通過促炎細胞因子如TNFoc或IL-1的信號傳導的藥物(如IRAK、NIK、IKK、p38或MAP激酶抑制劑)、IL-1(3轉化酶抑制劑(如Vx740)、抗-P7s、p-選擇蛋白金屬蛋白配體(PSGL)、TACE抑制劑、T-細胞信號傳導抑制劑例如激酶抑制劑、金屬蛋白酶抑制劑、柳氮磺胺吡咬、硝基咪唑硫。票呤、6-巰基噤呤、血管緊張素轉化酶抑制劑、可溶性細胞因子受體及其衍生物(如可溶性p55或p75TNF受體、sIL-lRI、sIL-lRII、sIL-6R、可溶性IL-13受體(sIL-13))和抗炎細胞因子(如IL-4、IL-10、IL-13和TGF(3)。其中可與抗體或抗體部分聯合的用於多發性硬化的治療劑的優選的實例包括幹擾素-(3,例如IFN(31a和IFNpib;醋酸格拉替美，皮質激素類，IL誦1抑制劑，TNF抑制劑和CD40配體和CD80的抗體。抗體、抗體部分可與其他治療皮膚病的藥物相聯合。例如，本發明的抗體、抗體部分或其他IL-12抑制劑與PUVA療法相聯合。PUVA是用於治療許多不同的皮膚病的補骨脂素(P)和長波紫外線輻射(UVA)的組合。本發明的抗體、抗體部分或其他IL-12抑制劑還可與吡美莫司相聯合。在另一個實施方案中，本發明的抗體用於治療銀屑病，其中抗體82與他克莫司聯合給藥。在另一個實施方案中，他克莫司和IL-12抑制刑與氨曱蝶呤和/或環孢菌素聯合給藥。在又一個實施方案中，本發明的IL-12抑制劑與用於治療銀屑病的準分子雷射治療一起使用。本發明的藥物組合物可包括"治療有效量"或"預防有效量"的本發明的抗體或抗體部分。"治療有效量"指一種在劑量和所需的一段時間上有效達到期望治療效果的量。抗體或抗體部分的治療有效量可隨諸如疾病狀況、年齡、性別和個體體重以及該抗體或抗體部分在個體中引發期望應答的能力的因素而改變。治療有效量還是其中抗體或抗體部分的治療有益效果超過了任何毒性或有害效果的這樣的一種量。"預防有效量"指一種在劑量上以及所需的一段時間內有效獲得期望預防效果的量。通常，由於預防劑量是在疾病發作前或發作早期用於個體中的，因此預防有效量應當小於治療有效量。可調節給藥方案以提供最佳期望應答(如治療或預防應答)。例如，根據治療情況緊急事件所需要的，可給予單次推注，可隨時間過去給予幾個分劑量或劑量可按比例減少或增加。為了容易給藥及劑量的一致性，以劑量單位形式配製腸胃外組合物是特別有利的。當在本文中使用時，劑量單位形式指適合作為用於要被治療的哺乳動物個體的單個劑量的物理上分離的單位；每個單位包含經計算的預定量的活性物質以與必需的藥物載體相結合產生期望的療效。本發明的劑量單位形式的規格支配自並直接取決於(a)活性物質的獨特性質和要達到的特定的治療或預防效果所其，和(b)對於個體中治療敏感性，配製上述活性物質的領域中固有局限性。在一個實施方案中，IL-12抗體或其抗原結合部分以每兩周一次的給藥方案給予，包括例如，每兩周一次的約50-300mg、約100mg-約200mg和約125-約175mg的劑量。或者，IL-12抗體可作為單次劑量給予，包括例如約200mg、約100mg的劑量。在另一個實施方案中，IL-12抗體可以每周一次的給藥方案給予，包括例如約50-300mg、約lOOmg-約200mg和約125-約175mg的劑量。應當注意指定範圍內的劑量也包括在本文中，如85mg、97mg等。在另一個實施方案中，人IL-12抗體或其抗原結合部分作為單次劑量給予具有其中IL-12活性是有害的病症如銀屑病的個體，其產生治療。在個體中對IL-12抗體或其抗原結合部分的應答可維持一段持續時間。可才艮據正治療的病症監測應答的維持。例如，可通過隨時間過去的個體的PASI75應答確定IL-12抗體或其抗原結合部分用於治療銀屑病的應答的維持。應當注意劑量值可隨要被緩解的病症的類型和嚴重程度而改變。應當進一步理解對於任何特定的個體，根據個體需要和管理或監督組合物給予的人士的專業判斷，特定的給藥方案應當隨時間而調節，以及如本文中所示的劑量範圍僅是示範性的，並不意在限制所主張的組合物的範圍或實踐。VII.本發明的應用本發明提供了一種抑制患有其中IL-12活性是有害的病症的個體中IL-12活性的方法。在一個實施方案中，本發明提供了一種治療銀屑病的方法，所述方法包括給予單次劑量的IL-12抗體或其抗原結合部分。IL-12業已牽涉多種病症的病理生理學(Windhagen等，(l"5)J,Exp.Med.182:1985-1996;Morita等(1998)ArthritisandRheumatism.41:306-314;Bucht等，(1996)Clin.Exp.Immunol.103:347-367;Fais等(1994)J.InterferonRes.14:235-238;Parronchi等，(1997)Am.J.Path.150:823-832;Monteleone等，(1997)Gastroenterology.112:1169-1178,和Berrebi等，(1998)Am.J.Path152:667-672;Parronchi等(1997)Am.J.Path.150:823-832)。本發明提供了抑制患這樣的病症的個體中IL-12活性的方法，該方法包括給予個體本發明的抗體或抗體部分，使得個體中的IL-12活性被抑制。優選地，IL-12為人IL-12以及個體為人個體。或者，個體可以是表達與本發明的抗體交叉反應的IL-12的哺乳動物。更進一步地，個體可以是已導入hlL-12(如通過給予hIL-12或通過表達hlL-12轉基因)的哺乳動物。可將本發明的抗體給予人個體用於治療目的(進一步討論於下)。此外，為了獸醫目的或作為人疾病的動物模型，可將本發明的抗體給予表達該抗體交叉反應的IL-12的非人哺乳動物。關於後者，這樣的動物^t型可用於評價本發明的抗體的療效(如測試給藥劑量和時程)。當在本文中使用時，短語"其中IL-12活性是有害的病症，，意在包括這樣的疾病或其他病症，其中在患該病症的個體中IL-12的存在業已症的因素。因此，其中IL-12活性是有害的病症是一種其中期望抑制IL-12活性以緩解症狀和/或病症進展的病症。這樣的病症可例如通過例如4吏用上述抗-IL-12抗體可^r測到的在患該病症的個體的生物液體中IL-12濃度增加(如個體的血清、血漿、滑液等中IL-12的濃度增加)而得以證實。存在著許多其中IL-12活性是有害的病症的實例。在一個實施方案中，抗體或其抗原結合部分可用於治療在此所描述的疾病或病症的療法。在描述的疾病或病症的藥物。本發明的抗體和抗體部分在治療幾種非限制性的具體病症中的應用進一步討論於下A.類風溼性關節炎白介素-12涉及在諸如類風溼性關節炎的炎性疾病中起一定作用。已從類風溼性關節炎患者滑液中檢測到可誘導的IL-12p40信使，並且已顯示IL-12出現於類風溼性關節炎患者的滑液中(參見如Morita等,(1998)ArthritisandRheumatism41:306-314)。已發現IL-12陽性細胞存在於類風溼性關節炎滑膜的襯裡下層中。本發明的人抗體和抗體部分可用於治療例如類風溼性關節炎、幼年型類風溼性關節炎、萊姆關節炎、類風溼性脊推炎、骨關節炎和痛風性關節炎。通常，抗體或抗體部分是全身給予，儘管對於某些病症，局部給予抗體或抗體部分可能是有利的。本發明的抗體或抗體部分還可與一種或多種在治療自身免疫病中有用的附加治療劑一起給予。在用於類風溼性關節炎的膠原誘發關節炎(CIA)鼠模型中，在關節炎發作之前用抗-IL-12mAb(大鼠抗-小鼠IL-12單克隆抗體，C17.15)治療小鼠完全抑制了發作，並降低了發病率和疾病的嚴重程度。在關節炎發作後早期用抗-IL-12mAb治療降低了嚴重程度，但在疾病發作後稍遲用抗-IL-12mAb治療小鼠對疾病嚴重程度則具有最低的效果。B.克羅恩氏病在炎性腸病、克羅恩氏病中白介素-12也起著一定作用。克羅恩氏病患者的腸黏膜中存在增加的IFN-.和IL-12表達(參見如Fais等,(1994)J.InterferonRes.ii:235-238;Parronchi等，(1997)Amer.J.Pathol.雄823-832;Monteleone等，(1997)Gastroenterology112:851169-1178;Berrebi等，(1998)Amer.J.Pathol.152:667-672)。在結腸炎小鼠模型中已顯示抗-IL-12抗體抑制疾病，如TNBS誘發的結腸炎IL-2基因敲除小鼠以及近來在IL-10基因敲除小鼠中。因此，本發明的抗體和抗體部分可用於治療炎性腸病。C.多發性硬化白介素-12涉及作為多發性硬化的關鍵介體。在多發性硬化患者的損害中可證明可誘導的IL-12p40信使或IL-12自身的表達(Windhagen等，(1995)J.Exp.Med.巡:1985-1996,Dmlovic等，(1997)J.Neurol.Sci.147:145-150)。慢性進行性多發性硬化患者具有升高的IL-12循環水平。對來自多發性硬化患者的T-細胞和抗原呈遞細胞(APCs)進行的研究揭示了作為進行性多發性硬化基礎的一系列自持的免疫相互作用引起了Thl-型免疫應答。增加的T細胞的IFN-分泌導致增加的APCs的IL-12產生，其維持著導致慢性狀態的Thl-型免疫活化和疾病的循環(Balashov等，(1997)Proc.Natl.Acad.Sci.21:599-603)。已使用多發性硬化的小鼠和大鼠實驗性變應性腦脊髓炎(EAE)模型調查了IL-12在多發性硬化中的作用。在小鼠的多發性硬化復發-緩解EAE模型中，用抗-IL-12mAb預處理延遲了癱瘓並降低了臨床得分。在癱瘓高峰期或在隨後的緩解期的過程中用抗-IL-12mAb治療降低了臨床得分。因此，本發明的抗體或其抗原結合部分可在人中用於緩解與多發性硬化相關的症狀。D.胰島素依賴型糖尿病白介素-12已涉及作為一種重要的胰島素依賴型糖尿病(IDDM)介質。通過給予IL-12在NOD小鼠中誘導了IDDM,在IDDM繼承性轉移模型中抗-IL-12抗體具保護作用。早期發作的IDDM患者通常經歷了所謂的"蜜月期"，期間某些殘留的胰島細胞功能得以保持。這些殘留的胰島細胞產生胰島素並較給予胰島素能更好的調節血糖水平。用抗-IL-12抗體治療這些早期發作的患者可阻止胰島細胞進一步的破壞，從而維持了胰島素內源性來源。E.銀屑病白介素-12(IL-12)和相關的細胞因子IL-23涉及作為銀屑病中關鍵的介質。銀屑病包括與THl-型細胞因子表達模式相關的急性和慢性皮損(Hamid等(1996)J.AllergyClin.Immunol.1:225-231;Turka等(1995)Mol.Med.1:690-699)。IL-12和IL-23都有助於銀屑病中1型T輔助細胞(Thl)免疫應答的發展。此外，在銀屑病患者皮損中IL-12p40和IL-23p40信使RNA過表達。因此，本發明的抗體或其抗原結合部分可用於緩解慢性皮膚病症例如銀屑病。在一個實施方案中，本發明提供了一種治療銀屑病的方法。對銀屑病的治療通常包括局部皮質激素類、維生素D類似物和局部或口服類維生素A、或它們的聯合。在一個實施方案中，IL-12和/或IL-23抗體與這些常見治療之一聯合或存在這些常見治療之一。可與IL-12和/或IL-23抗體聯合用於治療銀屑病的另外的治療劑詳述於下。通常基於皮膚外表診斷銀屑病。此外，可能需要進行皮膚活體組織檢查或刮片以及皮斑培養以排除其他皮膚病。如果關節疼痛存在且不停止，則可使用x-射線檢查銀屑病關節炎。可通過個體的銀屑病面積和嚴重性指數得分(PASI)監測個體中銀屑病的改善。用於測定PASI的方法已描述於Fredriksson和Pettersson(1978)Dermatologica157:238以及Marks等(1989)ArchDermatol125:235種。簡言之，該指數基於使用5分量表(0=無症狀；1=輕微；2=中度；3=顯著的；4=非常顯著的)對四個解剖部位，包括頭、上肢、軀幹和下肢，對紅斑、硬結和脫屑的評價。基於給定解剖部位中損害的程度，對影響的面積分配數值(0=0;1=<10%;2=10-29%;3=30-49%;4=50-69%;5=70=89%;6=90-100%)。然後計算PASI得分，其中PASI得分的可能範圍在0.0-72.0，最高的得分代表了最嚴重程度的整體的紅皮病。在本發明的一個實施方案中，IL-12和/或IL-23抗體用於治療銀屑病，包括慢性斑塊型銀屑病、滴狀銀屑病、皮褶性銀屑病、膿皰性銀屑病、尋常型天皰瘡、紅皮病型銀屑病病、與炎性腸病(IBD)相關的銀屑病和與類風溼性關節炎(RA)相關的銀屑病。在另一個實施方案中，IL-12和/或IL-23抗體，例如J695/ABT-874用於治療患有銀屑病合併PsA的個體。包括在本發明治療方法中的特定類型的銀屑病詳述於下a.慢性斑塊型銀屑病87慢性斑塊型銀屑病(也稱為尋常性銀屑病)是最常見的銀屑病類型。慢性斑塊型銀屑病特徵在於隆起變紅的皮膚斑塊，範圍從硬幣大小到非常大。在慢性斑塊型銀屑病中，斑塊可以是單個或多個的，它們大小可從幾毫米到幾釐米。斑塊通常是具有鱗屑狀的紅色表面，當輕輕搔抓時會反光，產生一種"銀色的"效果。慢性斑塊型銀屑病的損害(其經常是對稱的)遍布全身，但偏好出現在伸面，包括膝、肘、腰骶部、頭皮和指甲。慢性斑塊型銀屑病可偶現於陰莖、外陰和撓曲，但通常不存在鱗屑。通常基於上述臨床特徵診斷慢性斑塊型銀屑病患者。特別是，慢性斑塊型銀屑病中損害的分布、顏色和典型的銀色鱗屑均是慢性斑塊型銀屑病的特徵。b.滴狀4艮屑病滴狀銀屑病指一種特徵在於水滴型鱗屑斑塊的銀屑病類型。滴狀銀屑病的發作通常伴隨著感染，最顯著的是鏈球菌咽喉感染。通常基於皮膚外表以及最近經常存在咽喉痛病史的事實診斷滴狀銀屑病。c.皮褶性銀屑病皮褶性銀屑病(inversepsoriasis)是一種其中不像與斑塊型銀屑病相關的鱗屑，患者具有光滑的、通常潮溼的紅且發炎的皮膚區域的銀屑病類型。皮褶性銀屑病也稱為擦爛性銀屑病或屈側性銀屑病。皮褶性銀屑病最常出現在腋窩、腹股溝、乳房下以及在生殖器和臀部周圍的其他皮褶中，以及由於在這些部位出現，摩擦和出汗可刺激受影響的區域。d.膿皰性銀屑病膿皰性銀屑病，也稱為掌蹠銀屑病，是一種導致不同大小和位置的充膿水皰，但經常出現在手足的銀屑病類型。該水皰可位於或散布在大面積身體上。膿皰性銀屑病可既敏感又疼痛，可引起發熱。e.其他的銀屑病可用IL-12和/或IL-23抗體治療的其他銀屑病的實例包括紅皮性銀屑、與IBD相關的尋常性銀屑病、與包括類風溼性關節炎在內的關節炎相關的銀屑病。本發明通過下列實施例得以進一步說明，這樣的實施例不應以任何方式視為限制。所有引用的文獻包括的參考文獻、授權專利和公布的專利申請的內容當在本申請全文中引用時，在此明確併入作為參考。應當進一步理解的是所有附於此的表格內容(參見美國專利第6,914,128號的附錄A)以及美國專利第6,914,128號的全文均在此併入作為參考。實施例實施例1:全人IL-12/IL-23單克隆抗體ABT-874在中重度斑塊型銀屑病治療中的療效ABT-874是抗白介素-12(IL-12)和IL-23的全人抗體。其以高親和力與IL-12和IL-23共有的p40亞基結合，IL-12和IL-23兩者都被確認為在銀屑病(Ps)治療中的耙標。下述研究的目的在於評價在中重度斑塊型銀屑病患者治療中皮下注射ABT-874的療效。在基線處^10%體表面積(BSA)受累以及銀屑病面積和嚴重性指數(PASI)得分d2的成年銀屑病患者適合於該12-周、雙盲的、安慰劑對照的研究。將患者隨機分到6組中的1組1)每隔一周一次(eow),100-mgABT-874,持續12周；2)在笫0周,200-mgABT-874,—次劑量；3)每周一次，200-mgABT-874,持續4周；4)每隔一周一次，200-mgABT-874,持續12周；5)每周一次，200-mgABT-874,持續12周；或6)安慰劑。第一終末點是在笫12周2PASI75應答。其他療效評估包括PAS150和醫師整體評價(PGA)。符合該第一終末點的患者進入36-周盲的/再治療期並對時間監測應答損失。在該研究中招募了總共180名患者，每組30名。每組之間的基線特性是類似的，並且表現出中重度銀屑病(除％男性外，所有均為平均值)年齡，46歲，74%男性；銀屑病持續時間21年；PASI19;和25%BSA受累。在第12周，對於5個ABT-874組的每個組中的患者而言，與安慰劑相比，達到SPASI75的患者的百分數在統計學上顯著更高(分別為93%、63%、90%、93%、90%對3%,pO.OOl,ITT)。此外，對於5個ABT-874組的每個組中的患者而言，與安慰劑相比，達到2PASI50的患者的百分數在統計學上顯著更高(分別為100%、77%、97%、97%和100%對17%,pO.OOl)。在ABT-874組中，在笫12周PASI平均百分數減少(改善)分別為90%、70%、92%、92%和90%,而安慰劑為26%。類似地，在ABT-874組中，具有歸零/最小的PGA的患者的百分數分別為83%、50%、73%、87%和87%,而安慰劑為3%。總之，在中重度斑塊型銀屑病治療中ABT-874較安慰劑明顯更有效。實施例2:全人IL-12/-23單克隆抗體ABT-874在中重度斑塊型銀屑病治療中的安全性和療效ABT-874是抗白介素-12(IL-12)和IL-23的全人抗體。其以高親和力與IL-12和IL-23共有的p40亞基結合，IL-12和IL-23兩者都被確認為在銀屑病(Ps)治療中的靶標。該II期研究的目的在於調查在中重度斑塊型銀屑病治療中皮下注射ABT-874的療效和安全性。^10%體表面積(BSA)受累和PASI得分^12的成年銀屑病患者適合於該12-周、雙盲的、安慰劑對照的研究。將患者隨機分到6組中的1組1)每隔一周一次(eow),100-mgABT-874,持續12周；2)在第0周，200-mgAB丁-874，一次劑量；3)每周一次，200-mgABT-874,持續4周；4)每隔一周一次，200-mgABT-874,持續12周；5)每周一次，200-mgABT-874,持續12周；或6)安慰劑。第一終末點是在第12周2PASI75應答。符合該第一終末點的患者進入36-周盲的/再治療期並對時間監測應答損失。對所有患者評估整個54周中的安全性。招募了180名患者，每組30名。每組之間的基線特性是類似的(除%男性外，所有均為平均值)年齡，46歲，74%男性；銀屑病持續時間21年；PASI19;和25。/。BSA受累。在第12周，在5個ABT-874組的每個組中，與安慰劑相比，具有^PASI75的患者的％在統計學上顯著更高(分別為93%、63%、90%、93%、90%對3%,pO.OOl,ITT)。在12周、DB期期間，對於ABT-874組感染性AEs範圍在23-43%,而對於安慰劑組則為23%,最常見的是鼻咽炎(7-17%,對於ABT-874;3%,對於安慰劑)。在各組之間沒有統計學上顯著差異。沒有嚴重感染性AEs報導，沒有出現死亡。總之，在中重度斑塊型銀屑病治療中ABT-874較安慰劑明顯更有效，並且似乎具有有利的安全性分布。實施例3:全人IL-12A23單克隆抗體ABT-874在中重度斑塊型銀屑病治療中應答的維持在12-周、II期、隨機化對照試驗和36-周隨訪期中評估了ABT-874的療效和安全性。下述實施例的目的在於分析在該中重度斑塊型銀屑病治療中皮下注射ABT-874的II期研究的第二個12周期間，停止治療後應答的維持。210%體表面積(BSA)受累和PASI得分212的成年銀屑病患者適合於該12-周、雙盲的、安慰劑對照的研究。將患者隨機分到6組中的1組1)每隔一周一次(eow),100-mgABT-874,持續12周；2)在第0周，200-mgABT-874,—次劑量；3)每周一次，200-mgABT-874,持續4周；4)每隔一周一次，200-mgABT-874，持續12周；5)每周一次，200-mgABT-874,持續12周；或6)安慰劑。第一終末點是在笫12周^PASI75應答。符合該第一終末點的患者進入36-周盲的/再治療期。停止使用研究藥物的治療，並對時間監測患者應答損失(36-周隨訪期過程中的任何時間，PASI得分減少至〈PASI50)。評估整個24周中PASI應答的維持。招募了總共180名患者，每組30名。每組之間的基線特性是類似的(除％男性外，所有均為平均值)年齡，46歲，74%男性；銀屑病持續時間21年；PASI19;和25。/。BSA受累。在第12周，在5個ABT-874組的每個組中，與安慰劑相比，具有SPASI75的患者的百分數在統計學上顯著更高(表1)。在第24周，在主91表l:ABT-874的24-周療效維持PASI應答第24在第12周，2PASI75周對第12周每隔一周一次，10028/30(93%)*24/28(86%)mg,持續12周200mg,—次劑量19/30(63%)*15/19(79%)每周一次，200-mg,持27/30(90%)*23/27(85%)續4周每隔一周一次，28/30(93%)*26/28(93%)200-mg,持續12周每周一次，200-mg,持27/30(90%)*26/27(96%)續12周安慰劑1/30(3%)——*p5倍正常值上限；血清總膽紅素〉3倍正常值上限；血清肌酸酐〉3倍正常值上限；肌酸磷酸激酶>5倍正常值上限；血紅蛋白〈8g/dL;白細胞計數<2x109/L;或血小板計數,1/30),在所有的ABT-874治療組(200mgxl:63.3%,19/30;100mgeow:93.3%,28/30;200mgx4:90.0%,27/30;200mgeow:93.3%,28/30;200mg,每周一次90.0%,27/30)中在第12周達到PASI75應答的第一終末點的患者的百分數在統計學上顯著更高(pO.OOl)。對於相對短的持續時間的該試^r,除200mgxl治療組之外，在所有ABT-874治療組中PASI75應答均是類似的(圖2)。通過人口統計學(性別、年齡、種族和體重)、基線疾病特性(銀屑病關節炎病史、BSA和PASI得分)以及在接受研究治療的12個月內對銀屑病的基線治療(系統性生物學和非生物學、局部和光療)的小組分析證實了在不同小組中ABT-874-治療的患者在第12周一致達到高水平的PASI75應答。經過12周，幾乎100%的較高的ABT-874劑量組達到至少PASI50應答(200mgxl:76.7%,23/30;100mgeow:100.0%,30/30;200mgx4:96.7%，29/30;200mgeow:96.7%,29/30;200mg,每周一次95100.0%,30/30;安慰劑16.7%，5/30;對於每次與安慰劑進行比較，pO.OOl)。當與安慰劑比較時，在除了l組(200mgxl)的ABT-874治療組外的所有組中，在第12周達到至少PASI90應答的患者的百分數在統計學上顯著更高(pO.OOl),如下200mgxl:16.7%,5/30;100mgeow:53.3%,16/30;200mgx4:63.3%,19/30;200mgeow:76.6%,23/30;200mg,每周一次53.3%,16/30;和安慰劑0%，0/30。此外，經過12周，與安慰劑組中的患者相比，在所有的ABT-874治療組中明顯更多(pO.001)的患者具有達到歸零或最小的PGA等級，如下200mgx1:50.0%，15/30;lOOmgeow:83.3%,25/30;200mgx4:73.3%,22/30;200mgeow:86.7%,26/30;200mg,每周一次86.7%,26/30;對安慰劑3.3%，1/30。與安慰劑(0%，0/30)相比，在下列ABT-874治療組(200mgeow:46.7%,14/30;200mg，每周一次36.7%,11/30)中，在笫12周達到PASI100應答的第一終末點的患者的百分數在統計學上顯著更高(p<0.001)。對ABT-874的應答是快速的。對於所有ABT-874治療組自基線PASI得分的平均百分數改善隨時間增加(圖3),並且在每個時間點上與安慰劑相比，每個ABT-874治療組在統計學上顯著更高(p〈0.001,除100mgeow組在第1周以外,p=0.023)。C.安全性ABT-874治療通常是良好耐受的(表2)。由於局部皮膚變色，一名(0.7%)用ABT-874治療的患者停止該研究；2名(6.7%)用安慰劑治療的患者停止該研究，1名是因為牛皮癬性關節病，另l名是因為卵巢癌。兩名(1.1%)患者經歷嚴重的不良反應(AEs);1名安慰劑治療的患者在第37天被診斷為卵巢癌，以及1名ABT-874-治療的患者(200mgxl)在第10天被診斷圍肋軟骨炎。沒有患者經歷心肌或腦梗塞，也沒有死亡。與接受安慰劑的患者相比，接受任何劑量的ABT-874的患者是明顯(p=0.033)更有可能經歷至少可能於研究藥物相關的AE(ABT-874:36.0%,54/150;安慰劑10.0%,3/30;表2);大多數的這些AEs與注射部位相關(注射部位反應、紅斑、瘙癢或刺激)。大多數AEs是輕度的(輕度AEs出現在46.0%[69/150]的ABT-874-治療的患者和30.0%[9/30]安慰劑治療的患者中)。最常見的AE是注射部位反應，出現在16.7%(25/150)的用任何劑量ABT-874治療的患者中(對於安慰劑治療的患者，沒有報導注射部位反應；p=0.028;表3)。與安慰劑治療的患者相比，在ABT-874-治療的患者中其他AEs的發生率之間不存在統計學顯著差異。其次最常報導的AEs是鼻咽炎和上呼吸道感染。在32.8%(59/180)的全部患者(安慰劑23.3%,7/30;全部ABT-874誦治療的患者34.7%,52/150)中報導了感染性AEs。對於任何ABT-874治療組最常見報導的感染性AEs是鼻咽炎(12.0%,18/150)、上呼吸道感染(10.7%,16/150)以及支氣管炎和病毒感染(兩者2.7%,4/150)。沒有報導嚴重的感染性AEs。在該研究過程中報導了兩名患者得惡性胂瘤。一名安慰劑治療的患者被診斷為卵巢癌，其是在第129天發展的。一名ABT-874-治療的患者(200mgx4)被診斷為非黑素瘤皮膚癌(鱗狀細胞癌)，其在第133天離開。該患者的病史包括在2005年3月摘除良性皮膚生長。與安慰劑相比，沒有臨床上有意義的血液學、化學(包括血糖濃度)或生命指徵改變。97表l:基線人口統計學和臨床特徵治療組200mg200mg200mg，全部安慰劑x1100mgeowx4200mgeow每周一次ABT-874特性N=30N=30N=30N=30N=30N=30N=150年齡，歲49±14.452±12.045±13.843±13.844±16.046±14.046±14.1男性，數目c/。22(73.3)23(76.7)22(73.3)21(70.0)23(76.7)23(76.7)112(74.7)白人，數目(0/0)28(93.3)25(83.3)28(93.3)27(90.0)30(100.0)28(93.3)138(92.0)體重，kg89±17.694±21.294±17.992±27.893±24.195±18.094±21.9銀屑病持續時間，年21±12.420±13.224±14.622±14.218±11.518±10.921±13.0PASI得分16±2.918±6.720±6.320±7.620±6.219±6.319±6.6BSA受累，"/。21±9.224±13.628±15.724±13.029±16.823士12.626±14.5PGA,數目(％)輕度1(3.3)000000中度20(66.7)19(63.3)17(56.7)13(43.3)15(50.0)17(56.7)81(54.0)重度9(30.0)11(36.7)12(40.0)14(46.7)13(43.3)11(36.7)61(40.7)PsA病史，數目(％)9(30.0)7(23.3)12(40.0)9(30.0)6(20.0)9(30.0)43(28.7)之前的銀屑病治療，*數量(％)局部療法19(63.3)21(70.0)26(86.7)15(50.0)21(70.0)23(76.7)106(70.7)光療1(3.3)6(20.0)4(13.3)4(13.3)3(10.0)5(16.7)22(14.7)系統性非生物6(20.0)4(13.3)7(23.3)5(16.7)6(20.0)8(26.7)30(20.0)系統性生物3(10.0)3(10.0)7(23.3)6(20.0)4(13.3)7(23.3)27(18.0)除非另作說明，數值是平均值士SD。*在研究治療前的過去12個月內。BSA-體表面積；eo『每隔一周一次;PASI—艮屑病面積和嚴重性指數；PGA-醫師整體評價；PsA—艮屑病關節炎tableseeoriginaldocumentpage99tableseeoriginaldocumentpage0III.結論在該實施例中描述的II期、多中心的、隨機的、雙盲的、安慰劑-對照試驗證實了在中重度慢性斑塊型銀屑病治療中ABT-874的統計學和臨床上顯著的療效。經過12周，除ABT-874200mgx1治療組之外，在所有ABT-874治療組中90%或更多的患者達到PASI75或更大，與之相比安慰劑治療的患者僅為3.3%。即使在僅接受1次劑量的研究藥物(200mgxl)的組中，經過12周，大多數(63.3%)患者具有達到至少PASI75。此夕卜，經過12周，幾乎100%的用ABT-874治療的患者達到PASI50或更大，這被認為是臨床上顯著的改善(CarlinCS,FeldmanSR,KruegerJG,MenterA，KmegerGG.JAmAcadDermatol2004;50:859-66)。對於其他第二終末點的結果，例如PASI90和歸零或最小的PGA,也與第一次療效分析相一致並支持其。對ABT-874的應答是快速的。對於PASI得分改善的平均百分數，早在第l周就出現了在安慰劑和ABT-874治療的患者之間的統計學顯著的分離。在12-周的試驗持續期間持續著改善，即使對於在ABT-874200mgx1和200mgx4劑量組中的患者。ABT-874是良好耐受的，大多數的AEs是輕度的。儘管ABT-874-治療的患者明顯更有可能經歷至少可能與研究藥物相關的AE,但大多數的這些AE是注射部位相關的AEs(注射部位反應、紅斑、瘙癢或刺激)。在增加的ABT-874劑量和增加的AEs發生率之間不存在明顯的相關。值得注意的是，不存在心肌或腦梗塞。對於接受抗-IL-12/23抗體的患者，免疫相關事件是特別感興趣的。最常報導的感染性AEs是鼻咽炎、上呼吸道感染、支氣管炎和病毒感染。在該試驗持續期間沒有嚴重感染性AEs報導。在該研究期間診斷了2例惡性腫瘤。在安慰劑治療的患者中診斷了卵巢癌，以及在具有良性皮膚生長史的ABT-874-治療的患者中診斷了非黑素瘤皮膚癌。總之，在中重度慢性斑塊型銀屑病治療患者中ABT-874被證實在統計學上和臨床上明顯有益並且良好耐受。實施例5:全人IL-12/-23單克隆抗體ABT-874在中重度斑塊型銀屑病治療中的應答的維持在12-周、II期、隨機化對照試驗和36-周隨訪期中評估ABT-874的療效和安全性。下述實施例的目的在於分析在該中重度斑塊型銀屑病治療中皮下注射ABT-874的II期研究的第二個12周期間，停止治療後應答的維持。^10%體表面積(BSA)受累和PASI得分^12的成年銀屑病患者適合於該12-周、雙盲的、安慰劑對照的研究。將患者隨機分到6組中的1組1)每隔一周一次(eow)，100-mgABT-874,持續12周；2)在第0周，200-mgABT-874,一次劑量；3)每周一次，200-mgABT-874,持續4周；4)每隔一周一次，200-mgABT-874,持續12周；5)每周一次，200-mgABT-874,持續12周；或6)安慰劑。第一終末點是在第12周2PASI75應答。符合該第一終末點的患者進入36-周盲的/再治療期。停止使用研究藥物的治療，並在36-周隨訪期期間在不同的時間監測患者PASI得分，包括PASI50、PASI75和PASI90應答。評估整個24周中PASI應答的維持。招募了總共180名患者，每組30名。每組之間的基線特性是類似的(除％男性外，所有均為平均值)年齡，46歲，74%男性；銀屑病持續時間21年；PASI19;和25。/。BSA受累。在第12周，在5個ABT-874組的每個組中，與安慰劑相比，具有2PASI75的患者的百分數在統計學上顯著更高(表4)。在第24周，在主動治療組中相當大百分數的PASI75應答者具有維持至少^PASI50的PASI50得分。此外，在主動治療組中相當大百分數的PASI75應答者還具有維持至少^PASI75的PASI得分以及三PASI90的PASI得分(表4和圖4A-C)。在24周期間，隨時間過去維持PASI75應答的患者的百分數描繪於圖4D中。表4:ABT-874的24-周療效tableseeoriginaldocumentpage103*p5倍正常值上限；血清總膽紅素>3倍正常值上限；血清肌酸酐>3倍正常值上限；肌酸磷酸激酶>5倍正常值上限；血紅蛋白<8g/dL;白細胞計數<2x109/L;和血小板計數<75x109/L;(iii)停止給予其中檢測到臨床上顯著的異常實驗室結果的個體抗體或其抗原結合部分；從而治療個體中的銀屑病。7.權利要求l-6任一項的方法，其中每兩周一次給予抗體或其抗原結合部分。8.權利要求l-6任一項的方法，其中每周一次給予抗體或其抗原結合部分。9.權利要求l-6任一項的方法，其中以約200mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。10.權利要求l-6任一項的方法，其中以約100mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。11.權利要求l-6任一項的方法，其中當p40亞基結合IL-12的p35亞基時，抗體或其抗原結合部分能結合該p40亞基的表位。12.權利要求l-6任一項的方法，其中當p40亞基結合IL-23的p19亞基時，抗體或其抗原結合部分能結合該p40亞基的表位。13.權利要求l-6任一項的方法，其中當p40亞基結合IL-12的p35亞基以及當p40亞基結合IL-23的p19亞基時，抗體或其抗原結合部分能結合該p40亞基的表位。14.權利要求1-3任一項的方法，其中慢性銀屑病是慢性斑塊型銀屑病。15.權利要求4-6任一項的方法，其中銀屑病是慢性銀屑病。16.權利要求15的方法，其中慢性銀屑病是慢性斑塊型銀屑病。17.—種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體或其抗原結合部分，其中個體在初次給予抗體或其抗原結合部分後維持至少PASI90應答一段持續時間，從而治療個體中的銀屑病。18.權利要求17的方法，其中持續時間為至少約12周。19.權利要求17的方法，其中每兩周一次給予抗體或其抗原結合部分。20.權利要求17的方法，其中每周一次給予抗體或其抗原結合部分。21.權利要求17的方法，其中以單次劑量給予抗體。22.權利要求17的方法，其中以約200mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。23.權利要求17的方法，其中以約100mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。24.權利要求17的方法，其中銀屑病是慢性銀屑病。25.—種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體或其抗原結合部分，其中個體在初次給予抗體或其抗原結合部分後維持歸零或最小的PGA等級一,殳持續時間，從而治療個體中的銀屑病。26.權利要求25的方法，其中持續時間為至少約12周。27.權利要求25的方法，其中每兩周一次給予抗體或其抗原結合部分。28.權利要求25的方法，其中每周一次給予抗體或其抗原結合部分。29.權利要求25的方法，其中以單次劑量給予抗體或其抗原結合部分。30.權利要求25的方法，其中以約200mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。31.權利要求25的方法，其中以約100mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。32.權利要求25的方法，其中銀屑病是慢性銀屑病。33.—種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體或其抗原結合部分，其中個體在初次給予抗體或其抗原結合部分後經約8周顯示改善的PASI得分，從而治療個體中的銀屑病。34.權利要求33的方法，其中個體在初次給予抗體或其抗原結合部分後經約4周顯示改善的PASI得分。35.權利要求33的方法，其中個體在初次給予抗體或其抗原結合部分後經約2周顯示改善的PASI得分。36.權利要求33的方法，其中個體在初次給予抗體或其抗原結合部分後經約1周顯示改善的PASI得分。37.權利要求33的方法，其中每兩周一次給予抗體或其抗原結合部分。38.權利要求33的方法，其中每周一次給予抗體或其抗原結合部分。39.權利要求33的方法，其中以單次劑量給予抗體或其抗原結合部分。40.權利要求33的方法，其中以約200mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。41.權利要求33的方法，其中以約100mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。42.權利要求33的方法，其中銀屑病是慢性銀屑病。43.—種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體或其抗原結合部分，其中個體在初次給予抗體或其抗原結合部分後維持至少PASI100應答一段持續時間，從而治療個體中的銀屑病。44.權利要求43的方法，其中持續時間為至少約12周。45.權利要求43的方法，其中每兩周一次給予抗體或其抗原結合部分。46.權利要求43的方法，其中每周一次給予抗體或其抗原結合部分。47.權利要求43的方法，其中以約200mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。48.權利要求43的方法，其中銀屑病是慢性銀屑病。49.一種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體或其抗原結合部分，其中個體在停止給予抗體或其抗原結合部分後維持至少PASI50應答一段持續時間，從而治療個體中的銀屑病。50.—種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體或其抗原結合部分，其中個體在停止給予抗體或其抗原結合部分後維持至少PASI75應答一段持續時間，從而治療個體中的銀屑病。51.—種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的表位的抗體或其抗原結合部分，其中個體在停止給予抗體或其抗原結合部分後維持至少PASI90應答一段持續時間，從而治療個體中的^^屑病。52.權利要求49-51任一項的方法，其中持續時間為至少約12周。53.權利要求49-51任一項的方法，其中給予抗體至少約12周。54.權利要求49-51任一項的方法，其中每兩周一次給予抗體或其抗原結合部分。55.權利要求49-51任一項的方法，其中每周一次給予抗體或其抗原結合部分。56.權利要求49-51任一項的方法，其中以單次劑量給予抗體或其抗原結合部分。57.權利要求49-51任一項的方法，其中以約200mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。58.權利要求49-51任一項的方法，其中以約100mg的劑量給予抗體或其抗原結合部分。59.權利要求49-51任一項的方法，其中銀屑病是慢性銀屑病。60.—種治療個體中銀屑病的方法，所述方法包括以每兩周一次的給藥方案給予個體針對人IL-12和人IL-23的抗體，從而治療銀屑病。全文摘要本發明提供了一種通過給予個體能結合IL-12和/或IL-23的p40亞基的抗體，從而治療個體中銀屑病的方法。文檔編號A01N37/18GK101636080SQ200880008553公開日2010年1月27日申請日期2008年1月16日優先權日2007年1月16日發明者A·B·金鮑爾,E·K·查塔什,J·M·瓦爾德斯,S·K·保羅森,W·T·巴楚克申請人:艾博特公司