一種從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法
2023-05-31 18:55:26
專利名稱：一種從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法
技術領域：
本發明涉及一種羅漢果提取物的製備方法，具體地說，涉及一種從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法。
背景技術：
羅漢果(Momordicae grosvenori swingle)是傳統的保健果品，已有三百年的食療歷史。其味甘、性微涼，具有清肺止咳、促進腸胃功能之療效，治療急、慢性支氣管炎，急、慢性扁桃體炎，急性胃炎，大便秘結等。
羅漢果成份研究表明1、羅漢果含有1％的三萜系糖甙類S-5的強甜物質，其甜度相當於蔗糖的300倍，比甜菊甙和甘草素要甜得多，而且沒有甜菊甙的苦異味，這種強甜物質味甜而純正，無異味、回味感強、熱穩定好，在100℃水溶液中穩定，在120℃連續加熱12小時以上仍不被破壞。屬非發酵物質，利於加工貯存。日本竹本常松教授研究推測，這種物質具有治療癌症作用。
2、羅漢果的維生素C含量非常豐富，據測定每100g鮮羅漢果含維生素C為319-510mg，比柑桔、香蕉、小白菜等都高出十幾倍至幾十倍，比目前國內公認的維生素含量較高的獼猴桃(每100g含維生素100-420mg)還要高。
3、羅漢果含有治療冠心病和預防血管硬化較理想的油酸和亞油酸成份。
4、羅漢果含有十七種胺基酸。又含有硒等十六種無機微量元素。現代醫學證明硒在對冠心病治、抗衰老、抗癌方面均有療效。
如日本學者竹本常松教授研究和中國藥學證明羅漢果主要有效成分為羅漢果甜甙，它是三萜系的強甜物質。羅漢果甜甙是由天然羅漢鮮果提取，是羅漢果之精華，具有很好的保健作用，對促進腸胃機能和清熱止咳、止渴化痰、清熱潤肺效果更為顯著。與人工合成甜味劑及其它甜味劑比較，羅漢果甜甙最突出的優點是食用安全，甜度高(純品甜度為蔗糖的300倍)，是肥胖症、高血壓、糖尿病、心臟病等患者最好的甜味劑及最佳的保健品。本品易溶於水和酒精溶液，熱穩定性好，在100℃水溶液中穩定，長時間在120℃高溫下仍不被破壞，且屬於非發酵物質，利於食品貯存和加工。可廣泛應用於醫藥、食品、日化、飲料、老年保健品等工業。
現在，從羅漢果中提取羅漢果甜甙，使用的方法一般就是用水浸提，然後濃縮乾燥水分即得羅漢果甜甙。如專利號為ZL 87101850的中國專利公開了一種羅漢果甜味素的提取方法。它用羅漢果生果研碎、打漿，溫水50-60℃萃取，過濾。通過DA-201丙烯酸型吸附劑分離，50％(V/V)乙醇溶解，經D-211丙烯酸型陰樹脂脫色、脫鹽、去雜質，蒸餾法回收乙醇，經真空泵減壓濃縮，冷凍乾燥得到羅漢果甜甙。它工藝複雜，且羅漢果甜甙中的有效成分含量不高。其工藝方法急待改進。
發明內容
本發明需要解決的技術問題就在於克服現有從羅漢果中提取羅漢果甜甙方法的缺陷，提供一種從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，通過該方法所得產品的有效成分含量高，按紫外--可見分光光度UV(ultraviolet-visible spectrophotometry)法測定羅漢果提取物中羅漢果甜甙重量含量為40～80％、或者按高效液相色譜HPLC(HighPerformance Liquid Chromatography)法測定，羅漢果提取物中羅漢果甜甙V重量含量為20～40％。本發明方法生產的羅漢果甜甙含量高、避免了活性成分的損失、簡化了生產工藝、縮短了生產周期。
為解決上述問題，本發明採用如下技術方案本發明一種從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，它是一種以羅漢果為原料，經提取溶媒提取、濃縮、分離純化提取羅漢果甜甙的方法，按紫外--可見分光光度UV法測定，羅漢果提取物中羅漢果甜甙重量含量為40～80％、或者按高效液相色譜HPLC法測定，羅漢果提取物中羅漢果甜甙V重量含量為20～40％。
本發明方法中所述羅漢果可以為鮮羅漢果或幹羅漢果。
本發明方法中所述提取溶媒為水或低碳醇。所述低碳醇為甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇或戊醇，所述低碳醇的重量濃度為1％～95％。
本發明方法所述提取方法為加熱提取或超聲波提取或微波提取，超聲波提取條件為工作頻率15～60kHz，時間5～30min；微波提取條件為工作頻率900～2500MHz，時間5～30min。
本發明幹羅漢果提取後需要進行脫色處理。脫色方法為通過脫色樹脂或者陰陽離子柱或者Al2O3柱脫色處理。
本發明方法所述濃縮為真空濃縮，溫度為60℃以下，濃縮至原來提取液體積的1/4-1/2。
本發明所述分離純化可以為柱層析分離純化或膜分離純化。
本發明柱層析分離純化為1)提取液經濃縮(真空濃縮，溫度控制在60攝氏度以下，真空度0.08MPa以上，濃縮至原來提取液體積的1/4-1/2)、離心(臥式離心機4800r/min)後，直接進入大孔樹脂柱；2)用去離子水洗柱至流出液清澈；3)用低碳醇洗柱至流出液無甜味；4)分別收集從大孔樹脂柱中的流出液和由低到高濃度醇水溶液洗脫的洗脫液；5)醇水洗脫液經真空濃縮，真空度0.06-0.1MPa，濃縮至8婆美度左右，噴霧乾燥進風口溫度190℃，出風口溫度80℃，得羅漢果甜甙。
其中所述低碳醇為甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇或戊醇，低濃度醇水溶液的濃度最低為體積濃度30％，高濃度醇水溶液的濃度最高為體積濃度95％，用醇將從大孔樹脂中收集液的混合液調整至醇在其中的總含量為體積含量70％～90％；其中所述大孔樹脂為以聚苯乙烯為骨架的材料，如DIAION品牌，型號為D101、D130、AB-8或HP-20。
本發明所述膜分離純化包括1)微濾除雜將提取液濃縮後進行微濾，微濾膜為0.05μm～0.3μm孔徑的微孔濾膜，除去溶液中絕大多數的水溶性蛋白質、果膠及懸浮物等雜質；2)超濾分離採用截流相對分子量為40000的中空纖維超濾膜，進行羅漢果甜甙與其它組分間的分離；3)納濾濃縮採用截流相對分子量為100～400的納濾膜或RO反滲透設備進行濃縮。
優選地，所述微濾膜為0.08μm～0.12μm孔徑的微孔濾膜；所述納濾為採用截流相對分子量為150～250的陶瓷膜，進一步優選地，所述微濾膜為0.1μm孔徑的不鏽鋼微孔濾膜；所述納濾為採用截流相對分子量為200的納濾膜。
本發明方法可以在提取前先將羅漢果進行破碎，羅漢果經破碎後有利於各種成分的充分溶出。鮮果將其榨碎即可。
本發明還提供了一種由上述方法製備的羅漢果提取物，按紫外--可見分光光度UV法測定，羅漢果提取物中羅漢果甜甙重量含量為40～80％、或者按高效液相色譜HPLC法測定，羅漢果提取物中羅漢果甜甙V重量含量為20～40％。
本發明方法以羅漢果為原料，以水為提取溶媒，集成應用膜分離微濾、超濾、納濾技術，解決羅漢果甜甙提取中的除雜、分離、濃縮問題。按紫外--可見分光光度UV法測定，羅漢果提取物中羅漢果甜甙重量含量為40～80％、或者按高效液相色譜HPLC法測定，羅漢果提取物中羅漢果甜甙V重量含量為20～40％。本發明方法生產的羅漢果甜甙含量高、避免了活性成分的損失、簡化了生產工藝、縮短了生產周期。
具體實施例方式
實施例11)前處理將羅漢果鮮果榨碎。
2)回流提取將原料與去離子水按1∶3比例混合裝入提取罐，加熱至沸騰後保持溫度2小時，收取第一次提取料液，第二次提取再加入3倍量的去離子水，加熱沸騰保溫2小時，收取第二次提取料液。
3)減壓濃縮將提取液導入濃縮器中進行減壓濃縮，溫度控制在60攝氏度以下，真空度控制在0.08以上。
4)離心將濃縮後的提取液通過離心機離心。
5)濃縮、離心後的提取液直接進大孔樹脂柱；6)用水洗柱至流出液清澈；7)用乙醇洗柱至流出液無甜味；8)收集從大孔樹脂柱中的流出液和由低到高濃度醇水溶液洗脫的洗脫液；9)洗脫液進行減壓濃縮，濃縮至8婆美度；10)噴霧乾燥、滅菌包裝實施例21)前處理將羅漢果乾果破碎。
2)回流提取將原料與重量濃度為1％的乙醇按1∶12比例混合，進行超聲波提取，提取條件為工作頻率15～60kHz，時間5～30min，提取3次；提取後通過脫色樹脂進行脫色處理。
3)減壓濃縮將提取液導入濃縮器中進行減壓濃縮，溫度控制在60攝氏度以下，真空度控制在0.08以上，縮至原來提取液體積的1/4-1/2。
4)微濾除雜將減壓濃縮液抽入管式不鏽鋼微濾膜設備中，微濾膜為0.05μm～0.3μm孔徑的微孔濾膜，除去溶液中絕大多數的水溶性蛋白質、果膠及懸浮物等雜質，操作過程中壓力為0.2Mpa，收取透過微濾膜的濾液。
5)超濾分離將微濾濾液導入中空纖維膜超濾設備儲罐中，操作過程中壓力為1Mpa，通過截流相對分子量為40000的超濾膜，進行羅漢果甜甙與其它組分間的分離，收取透過超濾膜的濾液。
6)納濾濃縮將超濾濾液導入納濾設備的儲液罐中，調節壓力至3Mpa，採用截流相對分子量為100～400的納濾膜進行濃縮。待濃縮液達到8婆美度時，收取濃縮液。
7)噴霧乾燥、滅菌包裝。
實施例31)前處理將羅漢果乾果破碎。
2)回流提取將原料與重量濃度為95％的丙醇按1∶2比例混合，進行微波提取，提取條件為工作頻率900～2500MHz，時間5～30min。提取，提取2次；提取後通過陰陽離子柱進行脫色處理。
3)減壓濃縮將提取液導入濃縮器中進行減壓濃縮，溫度控制在60攝氏度以下，真空度控制在0.08以上，縮至原來提取液體積的1/4-1/2。
4)微濾除雜將減壓濃縮液抽入管式不鏽鋼微濾膜設備中，微濾膜為0.08μm～0.12μm孔徑的微孔濾膜，除去溶液中絕大多數的水溶性蛋白質、果膠及懸浮物等雜質，操作過程中壓力為0.2Mpa，收取透過微濾膜的濾液。
5)超濾分離將微濾濾液導入中空纖維膜超濾設備儲罐中，操作過程中壓力為1Mpa，通過截流相對分子量為40000的超濾膜，進行羅漢果甜甙與其它組分間的分離，收取透過超濾膜的濾液。
6)納濾濃縮將超濾濾液導入納濾設備的儲液罐中，調節壓力至3Mpa，採用截流相對分子量為150～250的陶瓷膜進行濃縮。待濃縮液達到8婆美度時，收取濃縮液。
7)噴霧乾燥、滅菌包裝實施例4
1)前處理將羅漢果乾果破碎。
2)回流提取將原料與重量濃度為50％的異丙醇按1∶5比例混合，進行微波提取，提取條件為工作頻率900～2500MHz，時間5～30min。提取2次；提取後通過Al2O3柱進行脫色處理。
3)減壓濃縮將提取液導入濃縮器中進行減壓濃縮，溫度控制在60攝氏度以下，真空度控制在0.08以上，縮至原來提取液體積的1/4-1/2。
4)微濾除雜將減壓濃縮液抽入管式不鏽鋼微濾膜設備中，微濾膜為0.08μm～0.12μm孔徑的微孔濾膜，除去溶液中絕大多數的水溶性蛋白質、果膠及懸浮物等雜質，操作過程中壓力為0.2Mpa，收取透過微濾膜的濾液。
5)超濾分離將微濾濾液導入中空纖維膜超濾設備儲罐中，操作過程中壓力為1Mpa，通過截流相對分子量為40000的超濾膜，進行羅漢果甜甙與其它組分間的分離，收取透過超濾膜的濾液。
6)納濾濃縮將超濾濾液導入納濾設備的儲液罐中，調節壓力至3Mpa，採用截流相對分子量為150～250的陶瓷膜進行濃縮。待濃縮液達到8婆美度時，收取濃縮液。
7)噴霧乾燥、滅菌包裝。
權利要求
1.一種從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於它是一種以羅漢果為原料，經提取溶媒提取、濃縮、分離純化提取羅漢果甜甙的方法，按紫外--可見分光光度UV法測定，提取物中羅漢果甜甙重量含量為40～80％、或者按高效液相色譜HPLC法測定，提取物中羅漢果甜甙V重量含量為20～40％。
2.如權利要求1所述從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於所述羅漢果為鮮羅漢果或幹羅漢果。
3.如權利要求1所述從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於所述提取溶媒為水或低碳醇，提取次數為3～4次，溶媒用量為2～12倍；溫度為40～100℃。
4.如權利要求3所述從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於所述低碳醇為甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇或戊醇，所述低碳醇的重量濃度為1％～95％。
5.如權利要求1所述從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於所述提取方法為加熱提取或超聲波提取或微波提取。
6.如權利要求5所述的方法，其特徵在於超聲波提取條件為工作頻率15～60kHz，時間5～30min；微波提取條件為工作頻率900～2500MHz，時間5～30min。
7.如權利要求2所述從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於幹羅漢果提取後進行脫色處理。
8.如權利要求7所述從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於所述脫色方法為通過脫色樹脂或者陰陽離子柱或者Al2O3柱脫色處理。
9.如權利要求1所述從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於所述濃縮為真空濃縮，溫度為60℃以下，濃縮至原來提取液體積的1/4-1/2。
10.如權利要求1所述從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於所述分離純化為柱層析分離純化或膜分離純化。
11.如權利要求10所述從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於柱層析分離純化包括1)提取液經濃縮、離心後，直接進入大孔樹脂柱；2)用去離子水洗柱至流出液清澈；3)用低碳醇洗柱至流出液無甜味；4)分別收集從大孔樹脂柱中的流出液和由低到高濃度醇水溶液洗脫的洗脫液；5)真空濃縮、噴霧乾燥真空度0.06-0.1MPa，濃縮至8婆美度進行噴霧乾燥進風口溫度190℃，出風口溫度90℃。
12.如權利要求11所述的從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於所述低碳醇為甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇或戊醇，低濃度醇水溶液的濃度最低為體積濃度30％，高濃度醇水溶液的濃度最高為體積濃度95％，用醇將從大孔樹脂中收集液的混合液調整至醇在其中的總含量為體積含量70％～90％。
13.如權利要求11或12所述從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於所述大孔樹脂為以聚苯乙烯為骨架的材料。
14.如權利要求13所述的從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於所述聚苯乙烯型號為D101、D130、AB-8或HP-20。
15.如權利要求10所述從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於所述膜分離純化為1)微濾除雜將提取液濃縮後進行微濾，微濾膜為0.05μm～0.3μm孔徑的微孔濾膜，除去溶液中絕大多數的水溶性蛋白質、果膠及懸浮物等雜質；2)超濾分離採用截流相對分子量為40000的中空纖維超濾膜，進行羅漢果甜甙與其它組分間的分離；3)納濾濃縮採用截流相對分子量為100～400的納濾膜或RO反滲透設備進行濃縮。
16.如權利要求15所述從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於所述微濾膜為0.08μm～0.12μm孔徑的微孔濾膜；所述納濾為採用截流相對分子量為150～250的陶瓷膜。
17.如權利要求15所述從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於所述微濾膜為0.1μm孔徑的不鏽鋼微孔濾膜；所述納濾為採用截流相對分子量為200的納濾膜。
18.如權利要求1-17之任一所述從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，其特徵在於在提取前先將羅漢果進行破碎。
19.一種如權利要求1-18之任一所述方法製備的羅漢果提取物，其特徵在於按紫外--可見分光光度UV法測定，羅漢果提取物中羅漢果甜甙重量含量為40～80％、或者按高效液相色譜HPLC法測定，羅漢果提取物中羅漢果甜甙V重量含量為20～40％。
全文摘要
本發明公開了一種從羅漢果中提取羅漢果甜甙的方法，它是一種以羅漢果為原料，經提取溶媒提取、濃縮、分離純化提取羅漢果甜甙的方法，它以水或低碳醇為溶媒；提取的方法為水加熱提取或超聲波提取或微波提取；分離純化為柱層析分離純化或膜分離純化，提取物中羅漢果甜甙重量含量為40～80％(紫外——可見分光光度法，即UV法測定)、或者羅漢果甜甙V重量含量為20～40％(高效液相色譜法，即HPLC法測定)。本發明方法生產的羅漢果甜甙含量高、避免了活性成分的損失、簡化了生產工藝、縮短了生產周期。
文檔編號C07J9/00GK1683387SQ200510055229
公開日2005年10月19日 申請日期2005年3月16日 優先權日2005年3月16日
發明者秦本軍, 宋雲飛, 湯凌志, 季永賢 申請人:桂林萊茵生物科技股份有限公司