具有抗增殖活性的查耳酮類化合物的製作方法
2023-06-10 20:14:36 6
專利名稱：具有抗增殖活性的查耳酮類化合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及某些具有與天然的和合成的查耳酮類相關的結構的新的一類化合物，以及這些化合物的製備方法及其藥學用途。
化合物1，3-二苯基-2-丙烯-1-酮的俗名是「查耳酮」。很多天然黃酮類具有與查耳酮相同的結構特徵，並通稱為「查耳酮類」。最近表明，某些包括分類為查耳酮類的黃酮類具有抗癌活性(CancerResearch，48，5754，1988)，並對一些腫瘤有化學預防活性(J.Nat.Prod.，53，23，1990)。
具體地講，已表明五羥黃酮(在植物中發現的普遍存在的黃酮類)作用於人白血病細胞(Br.J.of Haematology，75，489，1990)和其它細胞系(Br.J.Cancer，62，94，942，1990；Int.J.Cancer，46，112，1990；Gynecologic Oncology，45，13，1992)的增殖，並與常用的抑制細菌藥物具有協同作用。
此外，一些天然或合成的查耳酮類描述於國際專利公布號WO91/17749和WO96/19209(Baylor College of Medicine)，已證明它們對多種不同的細胞系具有顯著的抗增殖活性。
雖然，黃酮類和查耳酮類抗增殖活性的機制尚不清楚，但是據信與這些化合物和II型雌激素受體相互作用有關。
這些多元酚物質的體內作用當然更複雜。所有這些化合物一般具有的特徵為在體內幾乎完全不溶於水、與酚類的快速代謝相聯繫的非常差的生物利用度和對脂類和蛋白質顯著的親和性。
令人驚奇的是，現在發現某些新的查耳酮類、查耳酮衍生物和查耳酮類似物，特別是其中苯環的3位被取代或被含一個或多個雜原子的環代替的上述化合物，對敏感的癌性細胞和對常用化療藥物包括最新一代抗腫瘤劑紫杉醇和docetaxel有抗性的細胞具有更大的抗增殖活性。
因此，本發明的一方面提供了通式(A)化合物
其中Ar表示苯基，該苯基可以是未被取代或被一個、兩個或三個獨立地選自氯、溴、氟、甲氧基、硝基、三氟甲基、C1-C4低級烷基(優選甲基)、-NMe2、-NEt2、-SCH3、-NHCOCH3的取代基取代；或表示2-噻吩基；2-呋喃基；3-吡啶基；4-吡啶基或3-吲哚基；R表示-OCH2R1，其中R1選自-CH＝CMe2、-CMe＝CH2、-C≡CH；條件是當Ar表示苯基時，R不是3-甲基-2-丁烯基。
在此類化合物中，優選Ar為未被取代的苯基、3-吡啶基、4-吡啶基和3-吲哚基。特別優選其中R表示-OCH2-CH＝CMe2、-OCH2-CMe＝CH2或-OCH2-C≡CH的化合物。
可以用藥學上適用的酸如鹽酸和磷酸使含鹼性氨基官能團的式(A)化合物轉變為酸加成鹽，這些鹽包括在本發明中。
本發明還包括應用式(A)化合物治療和預防腫瘤，特別是子宮、卵巢和乳腺腫瘤，以及治療和預防絕經紊亂和骨質疏鬆。本發明還包括含有一個或多個式(A)化合物和一種或多種藥用賦形劑的藥物組合物。
體外試驗結果表明，本發明的化合物對II型雌激素受體具有顯著的親和性，並是酪氨酸激酶的抑制劑。它們還能抑制P-170蛋白質泵的活性，該泵在腫瘤細胞中調節MDR，它們還能以相同的比例拮抗激素依賴性和抗藥物腫瘤細胞的增殖。
式(A)化合物的作用機制很可能不同於結構上相關的先有技術化合物(包括天然查耳酮類)，因為它們能完全抑制蛋白質P-170。為此，本發明的化合物顯示出比先有技術中已知的其他產物更顯著的活性，無論是體外還是體內。
一些化合物對II型受體的親和性和對卵巢腫瘤細胞的抗增殖活性見表1。
表1對II型雌激素受體的親和性和體外對敏感的MDA，抗阿黴素的MCF-7ADR人乳腺瘤細胞系的抗增殖活性
*引起細胞增殖50％抑制的濃度**引起標記的雌二醇被其自身受體替換50％的濃度。
用卵巢腫瘤細胞和其它靶器官細胞評價與II型雌激素受體的結合。按照文獻中報告的已知技術進行細胞單層培養。為了使該試驗具有重複性，每周用胰蛋白酶處理細胞，並以8×104細胞/平方釐米的密度置於培養皿中，並在含5％二氧化碳的空氣中於37℃培養。
將被測定的不同化合物溶解於乙醇中，將其以系列稀釋濃度加入並將處理的細胞和對照細胞與3H-雌二醇一起培育，或在己烯雌酚的存在下按照文獻所述方法培育。將所述化合物溶解於DMSO並加入到介質中，在72小時後進行細胞計數以相同的方式確定它們的抗增殖活性。
本發明的化合物抑制體內細胞增殖，這可按照文獻中充分報導的技術通過檢測無胸腺裸鼠中植入腫瘤的大小來證實。
用劑量為1mg/kg至200mg/kg治療的動物，其腫瘤明顯減小，並且被治療的許多動物的腫瘤有總的退化。
本發明的化合物在藥用載體中可以通過腸內或非經腸道(即口服或注射)給藥。本發明化合物(基本上是無毒的)治療和預防腫瘤的劑量每天為50mg至1000mg，時間為一個月至幾年，這取決於疾病的情況和嚴重性。
本發明化合物特別可用於與其它抗腫瘤藥物和/或物理抗腫瘤治療如放射治療結合治療。因此，例如，它們可有利地在抑制細菌藥物使用前用於抗腫瘤治療，以便使後者的劑量及它們隨後的副作用降低至有利於患者。
由於它們對激素依賴腫瘤細胞有明顯的抗增殖活性並對蛋白質激酶有活性，因此在傳統化療和摘除腫瘤的手術後可繼續對患者進行此種治療以便阻斷轉移病灶的擴散。本發明的相同化合物可用於預防子宮、卵巢和乳腺腫瘤的預防治療中，以及減少典型的絕經紊亂。
在上述情況下，劑量可以是5mg/kg至100mg/kg/每天，並且這些產物可以有利地以含有磷脂的製劑形式口服給藥，該磷脂有利於其吸收。
本發明化合物可以按兩種主要的方式合成a)等摩爾的苯乙酮和合適醛的乙醇溶液在氫氧化鉀的存在下反應；及
b)等摩爾的苯乙酮和合適醛的乙醇溶液在哌啶和乙酸的存在下於弱的回流條件下反應。
反應結束時，這些產物可從醇溶劑中結晶或通過色譜方法純化。該反應產物一般純度較高，故結晶一般足以得到所需高純度的產物。
下列實施例非限制性地更詳細地說明了本發明。
實施例1得到查耳酮類的一般條件方法A將50％的氫氧化鉀溶液加入到等摩爾的苯乙酮(0.075mol)和醛(0.075mol)在95％乙醇的溶液中；此加入是於室溫下在劇烈攪拌的條件下進行的。在攪拌下將此反應放置過夜，然後用水稀釋並酸化；經過濾分離沉澱，並真空乾燥。化合物用乙醇結晶，或首先通過色譜分離然後再用乙醇結晶。
方法B將苯乙酮(0.075mol)、醛(0.075mol)、哌啶(15ml)和乙酸(75ml)的95％乙醇(80ml)溶液一起加熱回流5小時。將分子篩加入到該溶液中以除去水並將其全部反應放置過夜。通常所得的沉澱經收集並結晶。如果該產物在所述條件下未析出，則真空蒸發溶劑，殘餘物經矽膠柱色譜純化。
實施例II製備1-[2-羥基-4-(3-甲基丁-2-烯基氧基)苯基]-3-(吡啶-4-基)-丙烯-1-酮；化合物I在攪拌下，向含2.2g(10mmol)2-羥基-4-(3-甲基丁-2-烯基氧基)-苯乙酮和1.07g(10mmol)吡啶-4-甲醛的25ml 95％乙醇溶液中滴加50％氫氧化鉀溶液(3ml)。將溶液在攪拌下於室溫放置過夜，然後倒入60ml水中。再用稀鹽酸酸化，然後過濾；殘餘物用95％乙醇結晶兩次。得到1.9g產物，它具有以下特徵
m.p.99-100℃；1H NMRδ(CHCl3)1.68(s，3H，CH3)，1.7(s，3H，CH3)，4.53(d，2H，OCH2)，5.45(m，1H，CH＝)，6.5-6.7(m，2H，olefins)，8.7-9.1(m，7H，Ar).MassM/z(％)309(M+，7.57)，241(59.12)，163(62.41)，69(100).
實施例III製備1-[2-羥基-4-(3-甲基丁-2-烯基氧基)苯基]-3-(吡啶-3-基)-丙烯-1-酮；化合物II在攪拌下，向含2.2g(10mmol)2-羥基-4-(3-甲基丁-2-烯基氧基)-苯乙酮和1.07g(10mmol)吡啶-3-甲醛的25ml 95％乙醇溶液中滴加50％氫氧化鉀溶液(3ml)。將溶液在攪拌下於室溫放置過夜，然後倒入60ml水中。再用稀鹽酸酸化，然後過濾；殘餘物用95％乙醇結晶兩次。得到1.6g產物，它具有以下特徵m.p.177-79℃；1H NMRδ(CHCl3)1.65(s，3H，CH3)，1.72(s，3H，CH3)，4.64(d，2H，OCH2)，5.42(m，1H，CH＝)，6.5-6.65(m，2H，olefins)，7.8-9.4(m，7H，Ar).MassM/z(％)309(M+，10.76)，241(71.17)，163(43.17)，69(100).
實施例IV製備1-[2-羥基-4-(3-甲基丁-2-烯基氧基)苯基]-3-(4-乙醯胺)-苯基-丙烯-1-酮；化合物III在攪拌下，向含2.2g(10mmol)2-羥基-4-(3-甲基丁-2-烯基氧基)-苯乙酮和1.63g(10mmol)4-乙醯胺苯甲醛的25ml 95％乙醇溶液中滴加50％氫氧化鉀溶液(3ml)。將溶液在攪拌下於室溫放置過夜，然後倒入60ml水中。再用稀鹽酸酸化並用二氯甲烷萃取。有機溶液用水洗滌，傾析並蒸發乾燥。殘餘物經矽膠柱色譜純化，用甲苯/乙酸乙酯9∶1的混合液洗脫。收集起始的苯乙酮(30％)後，洗脫所需產物，它具有以下特徵m.p.150-152℃；1H NMRδ(CHCl3)1.75(s，3H，CH3)，1.8(s，3H，CH3)，2.2(s，3H，COCH3)，4.55(d，2H，OCH2)，5.6(m，1H，CH＝)，6.4-6.5(m，2H，olefins)，7.3(broad，1H，NH)，7.4-7.9(m，7H，Ar).Massm/z(％)365(M+，48.38)，297(100)，148(70.77)，69(97.15).
實施例V製備1-[2-羥基-4-(2-甲基烯丙基氧基)苯基-3-(4-二甲基胺)-苯基]-丙烯-1-酮；化合物IV將含2.06g(10mmol)2-羥基-4-(2-甲基烯丙基氧基)苯乙酮、1.79g(10mmol)4-二甲基胺苯甲醛、11ml 95％乙醇、2ml哌啶和15ml冰醋酸的溶液一起加熱回流5小時。加入分子篩後，將溶液放置過夜；然後過濾並用95％乙醇將此沉澱結晶。得到0.75g產物，它具有以下特徵m.p.85-87℃；1H NMRδ(CHCl3)1.85(s，3H，CH3)，3.02(s，6H，NMe，)，4.48(s，2H，CH2＝)，5.05(d，2H，OCH2)，6.4-6.5(m，2H，olefins)，6.6-7.9(m，7H，Ar).Massm/z(％)337(M+，55.97)，147(100)，134(67.67)，55(8.87).
實施例VI製備1-[2-羥基-4-(3-甲基丁-2-烯基氧基)-苯基-3-(吲哚-3-基)-丙烯-1-酮；化合物V將含2.2g(10mmol)2-羥基-4-(3-甲基丁-2-烯基氧基)苯乙酮、1.45g(10mmol)吲哚-3-甲醛、11ml 95％乙醇、2ml哌啶和15ml冰醋酸的溶液一起加熱回流5小時。加入分子篩後，將溶液放置過夜；然後乾燥蒸發並經矽膠柱色譜純化，用石油醚/乙酸乙酯3∶7洗脫。除去起始的苯乙酮後，得到0.8g所需產物，它具有以下特徵m.p.228-230℃(Toluene)；1H NMRδ(DMSO)1.72(s，3H，CH3)，1.76(s，3H，CH3)，4.64(d，2H，OCH2)，5.45(t，1H，CH＝)，6.5-6.6(m，2H，olefins)，7.2-8.2(m，8H，Ar)，12(s，1H，OH).Massm/z(％)347(M+，55.88)，143(100)，130(85.83)，69(40.80).
實施例VII製備1-[2-羥基-4-(2-甲基烯丙基氧基)-苯基]-3-(吲哚-3-基)-丙烯-1-酮；化合物VI將含2.06g(10mmol)2-羥基-4-(2-甲基烯丙基氧基)苯乙酮、1.45g(10mmol)吲哚-3-甲醛、11ml 95％乙醇、2ml哌啶和15ml冰醋酸的溶液一起加熱回流5小時。加入分子篩後，將溶液放置過夜；然後乾燥蒸發並經矽膠柱色譜純化，用石油醚/乙酸乙酯3∶1洗脫。除去起始的苯乙酮後，得到0.7g所需產物，它具有以下特徵
m.p.29-30℃；1H NMRδ(CHCl3)1.8(s，3H，CH3)，4.55(s，2H，CH2＝)，5.05(d，2H，OCH2)，6.4-6.5(m，2H，olefins)，7.4-7.9(m，8H，Ar).Massm/z(％)333(M+，44.03)，143(100)，130(48.23)，115(17.10).
實施例VIII製備1-[2-羥基-4-(丙-2-烯基氧基)-苯基-3-(吲哚-3-基)-丙炔-1-酮；化合物VII將含1.9g(10mmol)2-羥基-4-(丙-2-炔基氧基)苯乙酮、1.45g(10mmol)吲哚-3-甲醛、11ml 95％乙醇、2ml哌啶和15ml冰醋酸的溶液一起加熱回流5小時。加入分子篩後，將溶液放置過夜；然後乾燥蒸發並經矽膠柱色譜純化，用石油醚/乙酸乙酯3∶1洗脫。除去起始的苯乙酮後，得到0.8g所需產物，它具有以下特徵m.p.228-230℃；1H NMRδ(CHCl3)2.5(t，1H，CH＝)，4.65(s，2H，OCH2)，6.4-6.5(m，2H，olefins)，7.1-8.2(m，9H，Ar and NH)，11(broad，1H，OH).Massm/z(％)317(M』，27.02)，143(50.70)，130(23.40)，91(41.09).
實施例IX製備1-[2-羥基-4-(2-甲基烯丙基氧基)苯基]-3-(吡啶-3-基)-丙烯-1-酮；化合物VIII在攪拌下，向含2.06g(10mmol)2-羥基-4-(2-甲基烯丙基氧基)-苯乙酮和1.07g(10mmol)吡啶-3-甲醛的25ml 95％乙醇溶液中滴加50％氫氧化鉀溶液(3ml)。將溶液在攪拌下於室溫放置過夜，然後倒入60ml水中。再用稀鹽酸酸化，然後過濾；殘餘物用95％乙醇結晶。得到1.4g產物，它具有以下特徵m.p.164-166℃；1H NMRδ(CHCl3)1.8(s，3H，CH3)，4.5(s，2H，CH2＝)，5.8(d，2H，OCH2)，6.4-6.6(m，2H，olefins)，7.3-8.9(m，7H，Ar).Massm/z(％)295(M+，45.98)，240(21.93)，217(35.55)，132(24.23)，55(100).
實施例X製備1-[2-羥基-4-(3-甲基烯丙基氧基)苯基]-3-(3-甲氧基苯基)-丙烯-1-酮；化合物IX在攪拌下，向含2.06g(10mmol)2-羥基-4-(3-甲基烯丙基氧基)-苯乙酮和1.36g(10mmol)3-甲氧基苯甲醛的25ml 95％乙醇溶液中滴加50％氫氧化鉀溶液(3ml)。將溶液在攪拌下於室溫放置過夜，然後倒入60ml水中。再用稀鹽酸酸化，然後過濾；殘餘物用95％乙醇結晶。得到1.7g產物，它具有以下特徵m.p.97-100℃；1H NMRδ(CHCl3)2.54(t，1H，CH＝)，3.82(s，3H，OCH3)，4.70(s，2H，OCH2)，6.5-6.6(m，2H，olefins)，6.9-7.9(m，7H，Ar).Massm/z(％)308(M+，100)，269(19.75)，161(56.42)，134(65.79)，118(32.73).
實施例XI製備1-[2-羥基-4-(丙-2-烯基氧基)苯基-3-(吡啶-3-基)-丙烯-1-酮；化合物X在攪拌下，向含1.9g(10mmol)2-羥基-4-(丙-2-烯基氧基)-苯乙酮和1.07g(10mmol)吡啶-3-甲醛的25ml 95％乙醇溶液中滴加50％氫氧化鉀溶液(3ml)。將溶液在攪拌下於室溫放置過夜，然後倒入60ml水中。再用稀鹽酸酸化，然後過濾；殘餘物用95％乙醇結晶。得到1.5g產物，它具有以下特徵m.p.115-117℃；1H NMRδ(CHCl3)2.5(t，1H，CH＝)，4.8(s，2H，OCH2)，6.55-6.65(m，2H，olefins)，7.3-8.9(m，7H，Ar).Massm/z(％)279(M+，100)，240(27.47)，201(74.86)，147(24.90)，104(49.93).
權利要求
1.通式(A)化合物
其中Ar表示苯基，該苯基可以是未被取代或被一個、兩個或三個獨立地選自氯、溴、氟、甲氧基、硝基、三氟甲基、C1-C4低級烷基、-NMe2、-NEt2、-SCH3、-NHCOCH3的取代基取代；或表示2-噻吩基、2-呋喃基、3-吡啶基、4-吡啶基或3-吲哚基；R表示-OCH2R1，其中R1選自-CH＝CMe2、-CMe＝CH2、-C≡CH；條件是當Ar表示苯基時，R不是3-甲基-2-丁烯基。
2.權利要求1所述的化合物，其中Ar選自來被取代的苯基、4-二甲氨基苯基、4-乙醯氨基苯基、3-吡啶基、4-吡啶基和3-吲哚基。
3.選自如下的化合物1-[2-羥基-4-(3-甲基丁-2-烯基氧基)苯基]-3-(吡啶-4-基)-丙烯-1-酮；1-[2-羥基-4-(3-甲基丁-2-烯基氧基)苯基]-3-(吡啶-3-基)-丙烯-1-酮；1-[2-羥基-4-(3-甲基丁-2-烯基氧基)苯基]-3-(4-乙醯氨基)-苯基-丙烯-1-酮；1-[2-羥基-4-(2-甲基烯丙基氧基)苯基-3-(4-二甲基胺)-苯基]-丙烯-1-酮；1-[2-羥基-4-(3-甲基丁-2-烯基氧基)-苯基-3-(吲哚-3-基)-丙烯-1-酮；1-[2-羥基-4-(2-甲基烯丙基氧基)-苯基]-3-(吲哚-3-基)-丙烯-1-酮；1-[2-羥基-4-(丙-2-炔基氧基)-苯基-3-(吲哚-3-基)-丙烯-1-酮；1-[2-羥基-4-(2-甲基烯丙基氧基)苯基]-3-(吡啶-3-基)-丙烯-1-酮；1-[2-羥基-4-(2-甲基烯丙基氧基)苯基]-3-(3-甲氧基苯基)-丙烯-1-酮；1-[2-羥基-4-(丙-2-炔基氧基)苯基-3-(吡啶-3-基)-丙烯-1-酮。
4.一種藥物組合物，該組合物含有上述任一權利要求所述的化合物和藥學上適用的賦形劑。
5.用作藥物的權利要求1至3中任一項所述的化合物。
6.權利要求1至4中任一項所述的化合物在製備治療或預防腫瘤、治療或預防絕經紊亂、治療或預防骨質疏鬆的藥用組合物中的應用。
全文摘要
本申請公開了通式(A)化合物,其中Ar表示苯基,該苯基可以是未被取代或被一個、兩個或三個獨立地選自氯、溴、氟、甲氧基、硝基、三氟甲基、C
文檔編號A61K31/44GK1261349SQ98806212
公開日2000年7月26日 申請日期1998年6月12日 優先權日1997年6月19日
發明者E·波姆巴德利, P·瓦倫蒂 申請人:英登納股份有限公司