周圍神經病變的預防和/或治療藥的製作方法

2023-06-10 14:54:26

專利名稱：：周圍神經病變的預防和/或治療藥的製作方法
技術領域：
：本發明涉及含有紅細胞生成素作為有效成分的新的藥物組合物，用於預防和/或治療由微管抑制作用(微管抑制作用)引起的周圍神經病變。
背景技術：
：順鉑(Cisplatin)及其衍生物、紫杉(Taxan)類抗癌劑雖然具有良好的治療效果，在臨床上被廣泛應用，但同時引起嚴重的副作用——貧血和周圍神經病變(neuropathy)。人們已清楚了解到周圍神經病變表現出疼痛症狀、是神經的軸突變性和髓鞘受損的疾病，除了由於給予抗癌劑造成周圍神經病變之外，周圍神經病變還會作為HIV感染或糖尿病的併發症發作。另一方面，被認為是造血系統的細胞因子的紅細胞生成素(EP0)近年來已逐漸明了它也是在中樞神經系統中產生的(Masuda等人，1994)、參與神經系統的發生(Liu等人，1994;Juul等人,1998;1999;Chin等人，2000)、對腦缺血(Sakanaka等人，1998;Briness等人，2000)和脊髓損傷(Gorio等人,2002)、腦炎症(Agnello等人，2002)等疾病表現出廣泛的神經保護作用。另外，據報告，在大鼠(Campana&Myers，2001)和人組織(Hassan等人，2004)的末稍神經系統中也存在EPO和EPO的受體，表明EPO在末稍神經系統中承擔著生理上的作用。作為EPO在末稍神經系統中表現出生理功能的旁證，Campana等人的研究小組報告了如果給予大鼠的坐骨神經以慢性壓迫的損傷或壓損，在病變部位附近的神經膠質細胞(施萬(Schwann)細胞)中EP0的表達會上升(Li等人，2005)。坐骨神經如果受傷，在病變部位的遠側就會引起沃勒變性(軸突變性)，病變部位的近側則成為神經突起發芽時的位置(Ide，1996;Cheng&Zochodne，2002)。作為施萬細胞在周圍神經病變中的作用，已知在病變部位及其遠側，施萬細胞通過再分化和增殖，進一步引起細胞移動，起著作為對新形成的神經突起的發芽和再生軸突的立足點所必需的作用(Hall&Gregson,1974;Ide，1996;Li等人，2005)。施萬細胞是在末稍神經中形成髓鞘(myelin)的神經膠質細胞，相當於中樞神經系統中的少突膠質細胞(oligodendrocyte)。本發明人等報告了EP0是參與少突膠質細胞的成熟和髓鞘化的分子，有可能促進中樞神經系統的脫髓鞘病中的再髓鞘化(Sugawa等人，2002;國際專利國際公開號W002/02135A1)。根據這些報告可以認為，EPO不僅對中樞神經系統的神經細胞有作用、而且對施萬細胞也有作用，還有可能參與周圍神經病變時的神經保護以及神經再生和修復。有關外原性給予時的EPO對神經病變的作用，據報告EPO具有防止因HIV感染而最常出現的麻煩的神經症狀一一與HIV相關的感覺神經病(HIV-SN)的模型由於添加與HIV相關的嚢膜糖蛋白gpl20而引起的DRG(脊髓背根神經節)的細胞脫落的作用(Keswanai等人，2004)，以及具有改善因給予鏈脲黴素(streptozotocin)而導致的糖尿病模型大鼠中神經傳導速度的降低和改善痛覺的作用(Bianchi等人，2004)。據報導，臨床上給予順鉑的癌患者的神經症狀的評價為在給予EPO組得到顯著性改善(Mangiameli等人，2002)。然而，因順鉑導致的周圍神經病變是由於產生自由基而引起的，對於與上述不同的發生機理導致的周圍神經病變，EPO是否具有預防或治療效果還完全不清楚。特別是對於將通過抑制主要參與細胞分裂的染色體的微管作用而使癌細胞死亡的微管抑制劑作為抗癌劑給予時引起的周圍神經病變，EPO是否有效果還沒有任何報告。非專利文獻l:AgnelloD，BiginiP，VillaP，MenniniT，CeramiA，BrinesML，GhezziP.Erythropoietinexertsanant卜inflammatoryeffectontheCNSinamodelofexperimentalautoimmuneencephalomyelitis,.BrainRes.2002Oct11;952(1):128-34。非專利文獻2:BianchiR，Buyukaki11iB，BrinesM，SavinoC，CavalettiG，0ggioniN，LauriaG，BorgnaM，LombardiR，CimenB，ComelekogluU，KanikA，TatarogluC，CeramiA，GhezziP.Erythropoietinbothprotectsfromandreversesexperimentaldiabeticneuropathy,ProcNatlAcadSciUSA.2004Jan20;101(3)823-8。非專利文獻3:BrinesML,GhezziP，KeenanS，AgnelloD，deLanerolleNC,CeramiC，ItriLM，CeramiA.ErythropoietincrossestheMood-brainbarriertoprotectagainstexperimentalbraininjury,.ProcNatlAcadSciUSA.2000Sep12;97(19):10526-31。非專利文獻4:CampanaWM，MyersRR.Erythropoietinanderythropoietinreceptorsintheperipheralnervoussystem:changesafternerveinjury,FASEBJ.2001Aug:15(10):1804-6。非專利文獻5:CampanaWM，MyersRR.Exogenouserythropoietinprotectsagainstdorsalrootganglionapoptosisandpainfollowingperipheralnerveinjury,EurJNeurosci.2003Sep;18(6):1497-506。非專利文獻6:ChengC，ZochodneDW，Invivoproliferation,migrationandphenotypicchangesofSchwanncellsinthepresenceofmyelinatedfibers.Neuroscience.2002;115(1):321-9。非專利文獻7:GorioA，GokmenN，ErbayraktarS，YilmazO，MadaschiL，CichettiC，DiGiulioAM,VardarE，CeramiA，BrinesM.Recombinanthumanerythropoietincounteractssecondaryinjuryandmarkedlyenhancesneurologicalrecoveryfromexperimentalspinalcordtrauma.ProcNatlAcadSciUSA.2002Jul9;99(14):9450-5。非專利文獻8:HallSM，GregsonNA.TheeffectsofmitomycinConremyelinationintheperipheralnervoussystem.Nature.1974Nov22;252(5481):303-5。非專利文獻9:HassanK，SirariW，RubenchikI，ManelisJ，GrossB，ShashaSM，KristalB.Effectoferythropoietintherapyonpolyneuropathyinpredialyticpatients.JNephrol.2003Jan-Feb;16(1):121-5。非專利文獻IO:HassanK，GrossB，SimriW，RubinchikI，CohenH，JacobiJ，ShashaSM，KristalB.Thepresenceoferythropoietinreceptorsinthehumanperipheralnervoussystem.ClinNephrol.2004Feb;61(2):127-9。非專利文獻ll:IdeC.Peripheralnerveregeneration.NeurosciRes.1996Jun;25(2):101-21.Review。非專利文獻12:JuulSE，YachnisAT,RojianiAM，ChristensenRD.Immunohistochemicalloca1izationoferythropoietinanditsreceptorinthedevelopinghumanbrain.PediatrDevPathol.1999Mar-Apr;2(2):148-58。非專利文獻13:JuulSE，AndersonDK，UY，ChristensenRD.Erythropoietinanderythropoietinreceptorinthedevelopinghumancentralnervoussystem.PediatrRes.1998Jan;43(1):40-9。非專利文獻14:KeswaniSC,LeitsGJ，HokeA.ErythropoietinisneuroprotectiveinmodelsofHIVsensoryneuropathy.NeurosciLett.2004Nov23;371(2-3):102-5。非專利文獻15:LiX，GoniasSL，CampanaWM.SchwanncellsexpresserythropoietinreceptorandrepresentamajortargetforEpoinperipheralnerveinjury.Glia.2005Apr5。非專利文獻16:LiuZY，ChinK，NoguchiCT.Aminimalcytoplasmicsubdomainoftheerythropoietinreceptormediateserythroidandmegakaryocyticcelldevelopment.Blood.1999Nov15;94(10):3381—7。非專利文獻17:MangiameliA，SpinaS，IannettiE，CatalanoD，SpadaroD，TrovatoGM.Erythropoietinandcisplatin-inducedneuropathiesincancerpatients.ClinTer.2002May-Jun;153(3):177-80.Italian。非專利文獻18:MasudaS.，0kanoM.，YamagishiK.，NagaoM.UedaM.，SasakiR.Anovelsiteoferythropoietinproduction:oxygen-dependentproductioninculturedratastrocytes.,JBiol.Chem.269,19488-19493。非專利文獻19:SakanakaM，WenTC，MatsudaS，MasudaS，MorishitaE，NagaoM，SasakiR.Invivoevidencethaterythropoietinprotectsneuronsfromischemicdamage.ProcNatlAcadSciUSA.1998Apr14;95(8):4635-40。非專利文獻20:SugawaM.SakuraiY，Ishikawa—IedaY，SuzukiH,AsouH.Effectsoferythropoietinonglialcelldevelopment;oligodendrocytematurationandastrocyteproliferation.NeurosciRes.2002Dec;44(4):391-403。
發明內容發明要解決的課題本發明的目的在於提供用於預防和/或治療周圍神經病變的藥物組合物，特別是提供用於預防和/或治療由微管抑制作用引起的周圍神經病變的藥物組合物。解決課題的手段劑給予時產生的周圍神經病變具有顯著的治療效果，從而完成了本發明。即，本發明提供以下發明。(l)藥物組合物，含有紅細胞生成素作為有效成分，用於預防和/或治療由微管抑制作用引起的周圍神經病變。(2)如(1)所述的藥物組合物，其中，上述由微管抑制作用引起的周圍神經病變是由於給予了選自長春花生物鹼類或紫杉類的至少l種而引起的周圍神經病變。(3)如(2)所述的藥物組合物，其中，上述紫杉類(紫杉烷類)是紫杉醇(Paclitaxel)或泰索帝(Taxotere)。(4)含有紅細胞生成素的藥物組合物在癌症治療中的應用，其特徵在於，將該藥物組合物與具有微管抑制作用的抗癌劑組合。(5)用於預防或治療由微管抑制作用引起的周圍神經病變的方法，包括將含有預防或治療有效量的紅細胞生成素的藥物組合物給予需要該預防或治療的患者。(6)癌症的治療方法，包括將含有對於預防或治療由微管抑制作用引起的周圍神經病變為有效量的紅細胞生成素的藥物組合物與具有微管抑制作用的抗癌劑組合，給予患者。(7)紅細胞生成素在製造用於預防或治療由微管抑制作用引起的周圍神經病變的藥物組合物中的應用。(8)組合製劑，包括藥物組合物和具有微管抑制作用的抗癌劑，所述藥物組合物含有對於預防或治療由微管抑制作用引起的周圍神經病變為有效量的紅細胞生成素。發明效果如後述實施例所示，在由泰索帝引起的周圍神經病變(neuropathy)模型小鼠中，在神經症狀的評價和坐骨神經的病理組織學評價的任一評價中都可觀察到EPO可減輕周圍神經病變。因此，本發明的預防和/或治療藥對周圍神經病變的治療是有用的，特別是可用於減輕給予了微管抑制劑的抗癌劑的患者的周圍神經病變副作用。由此在減輕患者痛苦的同時(提高生活質量(Q0L))，可以增加以往不可能的抗癌劑的給藥量、給藥期間、給藥次數，而且可以延長生命。圖l是表示由於給予泰索帝導致的神經症狀變化的圖。圖2是表示因給予泰索帝90mg/kgip導致的神經症狀變化及給予EPO後對其的影響的圖。圖3-l是表示在未給予泰索帝組(Oiv)中，經甲苯胺藍染色顯現的坐骨神經病理組織的軸突變性變化及給予EPO後對其的影響的照片。圖3-2是表示在給予泰索帝組(90mg/kgip)中，經甲苯胺藍染色顯現的坐骨神經病理組織的軸突變性變化及給予EPO後對其的影響的照片。具體實施例方式紅細胞生成素對於本發明所用的紅細胞生成素而言，任何EPO均可使用，但優選高度純化的EPO，更具體講，優選哺乳動物EPO、特別是基本上與人EPO具有同樣生物學活性的EPO。本發明中使用的紅細胞生成素可用任何方法製造，可以使用例如由來自人的提取物純化得到的天然人EPO(特公平l-38800號公報等)，或通過基因工程的方法由大腸桿菌、酵母菌、中國倉鼠卵巢細胞(CHO細胞)、C127細胞、COS細胞、骨髓瘤細胞、BHK細胞、昆蟲細胞等產生，再經各種方法提取、分離純化的人EPO等。本發明中可使用的紅細胞生成素優選通過基因工程方法製造的EPO，優選使用哺乳動物細胞(特別是CHO細胞)製造的EPO(例如特公平l-44317號公報、KennethJacobs等人，Nature,313806-810(1985)等)。通過基因重組法得到的EPO的胺基酸序列可以與天然的EPO相同，或者是該胺基酸序列中缺失、置換、附加l個或多個胺基酸後的產物，只要其具有與天然EPO同樣的生物學活性。胺基酸的缺失、置換、附加等可以通過本領域技術人員公知的方法進行。例如，若是本領域技術人員，可運用定點誘變法(Gotoh,T.等人(1995)Gene152，271-275;Zoller,M.J.andSmith,M.(1983)MethodsEnzymol.100，468—500;Kramer,W.等人(1984)NucleicAcidsRes.12，9441-9456;Kramer,W.andFritz,H.J.(1987)MethodsEnzymol.154，350—367;Kunkel，T.A，(1985)Proc.Natl.Acad.Sci，USA.82，488-492;Kunkel(1988)MethodsEnzymol.85，2763-2766)等，通過在EPO的胺基酸中導入適當變異，可以製備功能上與EPO同等的多肽。而胺基酸的變異也可以在自然界中產生。一般來說，被置換的胺基酸殘基中，理想的是置換成可保持胺基酸側鏈性質的其它胺基酸。作為胺基酸側鏈的性質，例如可舉出疏水性胺基酸(A、I、L、M、F、P、W、Y、V)、親水性胺基酸(R、D、N、C、E、Q、G、H、K、S、T)、含有月旨肪族側鏈的胺基酸(G、A、V、L、I、P)、含有帶羥基的側鏈的胺基酸(S、T、Y)、含有帶硫原子的側鏈的胺基酸(C、M)、含有羧酸以及帶醯胺的側鏈的胺基酸(D、N、E、Q)、含有帶鹼的側鏈的胺基酸(R、K、H)、含有帶芳香族的側鏈的胺基酸(H、F、Y、W)(括號內任一個字母均表示胺基酸的單字母標記)。已知通過對一胺基酸序列缺失、附加l個或多個胺基酸殘基和/或用其它胺基酸置換而具有被修飾的胺基酸序列的多肽可以維持其生物學活性(Mark,D.F.等人,Proc.Nat1.Acad.Sci.USA(1984)81，5662—5666;Zoller，M.J.&Smith,M.NucleicAcidsResearch(1982)10，6487-6500;Wang,A.等人，Science224，1431-1433;Dalbadie-McFarland,G.等人，Proc，Natl.Acad.Sci.USA(1982)79，6409-6413)。另外，作為本發明的紅細胞生成素，也可以使用EPO和其它蛋白質的融合蛋白質。為了製作融合多肽，例如可以按照將編碼EPO的DNA與編碼其它蛋白質的DNA的讀框做成一致那樣連接後，導入表達載體，通過宿主使融合蛋白表達。在本發明中可與EPO融合的其它蛋白質沒有特別限定。另外，作為本發明的紅細胞生成素也可以使用進行了化學修飾的EP0。作為化學修飾的EP0的例子，可舉出經聚乙二醇等化學修飾的EPO(WO90/12874等)、對不帶糖鏈的EPO通過聚乙二醇等化學修飾後的產物、以及結合了維生素B12等、無機或有機化合物等化合物的EPO等。10此外，作為本發明的紅細胞生成素，也可以使用EPO衍生物。所謂EPO衍生物是指對EPO分子中的胺基酸進行修飾的EP0或對EP0分子中的糖鏈進行修飾的EPO。EPO分子中糖鏈的修飾包括附加、置換、缺失糖鏈等。作為本發明中優選的糖鏈修飾如EPO分子中唾液酸的缺失。通常，通過重組動物細胞產生的EPO、來自尿的EPO都是以含有不同糖鏈結構的多種EP0的EP0組合物的形式得到的。附加到EP0組合物中的EPO分子的唾液酸的數目可以因各個EP0分子的不同而不同，通常在1個EP0分子中可附加11個~15個唾液酸。通過除去這些唾液酸可以製作脫唾液酸化的EPO(脫唾液酸EP0)。脫唾液酸化時被除去的唾液酸的數目沒有特別限定，可以將全部唾液酸都除去，也可以除去l、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14個唾液酸。對於本發明所優選的脫唾液酸EPO，附加到EPO分子中的唾液酸數為10個以下，更優選5個以下，特別優選2個以下。予以說明，對於本發明中可使用的唾液酸的數目，使用EPO組合物中含有的EPO分子的平均數。平均每分子的唾液酸數可通過本領域技術人員公知的方法進行測定(EP0428267公報等)。除去唾液酸的EPO(脫唾液酸EPO)可通過本領域技術人員公知的方法進行製作，例如可通過唾液酸酶等酶對EPO進行處理等來製作。唾液酸酶可以使用市售的產品。(特表2005-5t)7426號、NobuoIraai等人，Eur.J.Biochem,194，457-462(1990)等)另外，本發明的紅細胞生成素可以是糖鏈改變體EPO，其中可舉出在EPO的N末端附著唾液酸的糖鏈改變體EPO——NESP(NovelErythropoietinStimulatingProtein:WO85/02610,WO91/05867,WO95/05465等記栽)等糖鏈被改變的EP0類似物。EPO分子中胺基酸的修飾可舉出氨基曱醯化、生物素化、脒化、乙醯化、胍化等，本發明中優選的胺基酸修飾是氨基曱醯化。被修飾的胺基酸殘基沒有特別限定，可舉出賴氨酸、精氨酸、穀氨酸、色氨酸等，在本發明中，被修飾的胺基酸優選是賴氨酸。因此，作為本發明中胺基酸被修飾的EPO的特別優選形式，可舉出賴氨酸被氨基甲醯化的EPO(MarcelL等人，Derivativesoferythropoietinthataretissueprotectivebutnoterythropoietic.Science,2004;305:239、FiordalisoE等人，Anonerythropoieticderivativeoferythropoietinprotectsthemyocardiumfromischemia-reperfusioninjury.PNAS，2005;102:2046等)。EPO的氨基曱醯化包括通過與異氰酸鹽離子等反應而進行的氨基甲醯化、通過與烷基-異氰酸酯等反應而進行的烷基-氨基甲醯化、通過與芳基-異氰酸酯等反應而進行的芳基-氨基甲醯化等。預防和/或治療用製劑在本發明的目標預防和/或治療藥中，根據需要，可適當添加混懸劑、助溶劑、穩定劑、等滲劑、保存劑、防吸附劑、表面活性劑、稀釋劑、賦形劑、pH調整劑、鎮痛劑、緩衝劑、含硫還原劑、抗氧化劑等。作為混懸劑的例子，可舉出甲基纖維素、聚山梨酯80、幾乙基纖維素、阿拉伯膠、黃蓍膠粉末、羧甲基纖維素鈉、聚氧乙烯山梨糖醇酐單月桂酸酯等。作為助溶劑，可舉出聚氧乙烯硬化蓖麻油、聚山梨酯80、煙醯胺、聚氧乙烯山梨糖醇酐單月桂酸酯、聚乙二醇、蓖麻油脂肪酸乙酯等。作為穩定劑，可舉出葡聚糖40、曱基纖維素、明膠、亞硫酸鈉、偏亞硫酸鈉等。作為穩定劑，也可以添加某種胺基酸(例如，特開平10-182481號公報等)。作為穩定劑添加的胺基酸包括游離的胺基酸、其鈉鹽、鉀鹽、鹽酸鹽等鹽等。胺基酸可以添加1種或2種以上組合。作為穩定劑添加的胺基酸沒有特別限定，作為優選胺基酸，可舉出亮氨酸、色氨酸、絲氨酸、穀氨酸、精氨酸、組氨酸、賴氨酸。作為等滲劑，可舉出D-甘露醇、山梨醇等。作為保存劑，可舉出對羥基苯曱酸曱酯、對羥基苯曱酸乙酯、山梨酸、苯酚、曱酚、氯甲酚等。作為防吸附劑，可舉出人血清白蛋白、印磷脂、葡聚糖、環氧乙烷-丙氧乙烷共聚物、羥丙基纖維素、甲基纖維素、聚氧乙烯硬化蓖麻油、聚乙二醇等。作為表面活性劑，舉出以下一些典型的例子。非離子表面活性劑、例如山梨糖醇酐單辛酸酯、山梨糖醇酐單月桂酸酯、山梨糖醇酐單棕櫚酸酯等山梨糖醇酐脂肪酸酯；甘油單辛酸酯、甘油單肉豆蔻酸酯、甘油單硬脂酸酯等甘油脂肪酸酯；十甘油單硬脂酸酯、十甘油二硬脂酸酯、十甘油單亞油酸酯等多甘油脂肪酸酯；聚氧乙烯山梨糖醇酐單月桂酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐單硬脂酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐單棕櫚酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐三油酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐三硬脂酸酯等聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯；聚氧乙烯山梨糖醇四硬脂酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇四油酸酯等聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯；聚氧乙烯甘油單硬脂酸酯等聚氧乙烯甘油脂肪酸酯；聚乙二醇二硬脂酸酯等聚乙二醇脂肪酸酯；聚氧乙烯月桂基醚等聚氧乙烯烷基醚；聚氧乙烯聚氧丙烯二醇、聚氧乙烯聚氧丙烯丙基醚、聚氧乙烯聚氧丙烯十六烷基醚等聚氧乙烯聚氧丙烯烷基醚；聚氧乙烯壬基苯基醚等聚氧乙烯烷基苯基醚；聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯硬化蓖麻油(聚氧乙烯氫化蓖麻油)等聚氧乙烯硬化蓖麻油；聚氧乙烯山梨醇醚蜂蠟等聚氧乙烯蜂蠟衍生物；聚氧乙烯羊毛脂等聚氧乙烯羊毛脂衍生物；聚氧乙烯硬脂醯胺等聚氧乙烯脂肪醯胺等具有HLB618的衍生物；陰離子表面活性劑、例如十六烷基硫酸鈉、十二烷基硫酸鈉、油基硫酸鈉等含有碳數10~18的烷基的烷基硫酸鹽；聚氧乙烯十二烷基硫酸鈉等環氧乙烷的平均加成摩爾數為2-4、烷基的碳數為10~18的聚氧乙烯烷基醚硫酸鹽；十二烷基磺基琥珀酸鈉等烷基的碳數為8~18的烷基磺基琥珀酸鹽；天然的表面活性劑，例如卵磷脂、甘油磷脂、鞘髓磷脂等神經鞘氨醇磷脂；碳數1218的脂肪酸的蔗糖脂肪酸酯等。在本發明的製劑中可以添加這些表面活性劑中的l種或2種以上的組合。優選的表面活性劑是聚山梨酯20、40、60或80等聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯，特別優選聚山梨酯20和聚山梨酯80。另外優選以聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物(PluronicF-68(註冊商標)等)為代表的聚氧乙烯聚丙二醇。作為含疏還原劑，可舉出N-乙醯半胱氨酸、N-乙醯同型半胱氨酸、硫辛酸、硫二甘醇、硫代乙醇胺、硫代甘油、硫代山梨糖醇、硫基乙酸及其鹽、硫代硫酸鈉、穀胱甘肽、碳數l~7的硫代鏈烷酸等含有巰基的化合物等。作為抗氧化劑，可舉出異抗壞血酸、二丁羥基甲苯、丁羥基茴香醚、a-生育酚、醋酸生育酚、L-抗壞血酸及其鹽、L-抗壞血酸棕櫚酸酯、L-抗壞血酸硬脂酸酯、亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉、沒食子酸三戊酯、沒食子酸丙酯或乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)、焦磷酸鈉、偏磷酸鈉等螯合劑。另外，也可以含有氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、磷酸鈉、磷酸鉀、碳酸氫鈉等無機鹽；檸檬酸鈉、檸檬酸鉀、醋酸鈉等有機鹽等通常添加的成分。本發明的目標預防和/或治療藥中的紅細胞生成素的有效量由醫生在考慮作為對象的疾病及其症狀等、患者的年齡、體重、給藥途徑等之後確定。通常，按照成人每人EPO的給予量為O.ljug5000Mg、優選51000Mg來給予。本發明的預防和/或治療藥通常以非口服途徑給予，可舉出注射劑(皮下注射、靜脈注射、肌肉注射等)、經皮、經黏膜、經鼻、經肺等途徑給予，也可以口服。疾病本發明的預防和/或治療藥可用於周圍神經病變的治療。周圍神經病變是指除了腦和脊髓之外的神經系統的病變。具體來說是指包圍神經軸突的髓鞘(myelin)被破壞、進而伴隨著軸突變性的末稍神經疾病。其病變不僅是在神經細胞，而且在形成髓鞘的施萬細胞中也會出現。會出現感覺障礙、麻木、感覺遲鈍、疼、灼熱感、痛、異常感覺、感覺缺失、運動障礙、無力、麻痺(完全運動喪失)等症狀。本發明的預防和/或治療藥特別是對於治療當將微管抑制劑作為抗癌劑給予時出現的周圍神經病變是有用的。作為細胞內結構的微管是多個微管蛋白結合(聚合)而形成的，微管蛋白的2聚體和微管通過聚合、解聚而處於"動態平衡"狀態。微管抑制劑是通過打亂該平衡狀態而發揮抗癌作用的製劑。作為微管抑制劑，已知有l)長春花生物鹼類(通過與微管蛋白結合，引起微管蛋白之間結合，由此具有抑制微管形成的作用)的長春新鹼(vincristine)、長春鹼(vinblastine)、長春地辛(vindesine)、長春瑞濱(vinorelbine)等，和，2)紫杉類(與長春花生物鹼相反，通過促進微管蛋白的聚合，穩定微管，結果，影響細胞分裂期(M期)的紡錘體(由微管構成)的形成及其功能，通過使細胞停止分裂而引起細胞病變。由此發揮抗癌作用。)的紫杉醇(paclitaxel)(taxol，泰素)、泰索帝(taxotere)、多西他賽(docetaxel)等。特別是通過與像紫杉醇和泰索帝那樣的抗癌作用強、通過強烈抑制微管的作用而容易出現手足麻木等神經病變的抗癌劑並用時，本發明的預防治療藥可獲得優越的效果。本發明還提供含有紅細胞生成素的藥物組合物在癌症治療中的應用，其特徵在於，將該藥物組合物與具有微管抑制作用的抗癌劑組合。作為具有微管抑制作用的抗癌劑，優選上述的長春花生物鹼類和紫杉類，更優選紫杉類。特別優選紫杉醇和泰索帝。將本發明的含有紅細胞生成素的藥物組合物與上述抗癌劑組合的時期，由醫生考慮紅細胞生成素的效果、作為對象的疾病及其症狀等、患者的年齡、體重、給藥途徑等之後確定，在給予上述抗癌劑之前、給予的同時、或給予後的任一時期進行組合均可。特別優選在給予上述抗癌劑之前或給予的同時進行組合。本發明還提供用於預防或治療由微管抑制作用引起的周圍神經病變的方法，包括將含有預防或治療有效量的紅細胞生成素的藥物組合物給予需要該預防或治療的患者。本發明還提供癌症的治療方法，包括將含有對於預防或治療由微管抑制作用引起的周圍神經病變為有效量的紅細胞生成素的藥物組合物與具有微管抑制作用的抗癌劑組合，給予患者。本發明還提供紅細胞生成素在製造用於預防或治療由微管抑制作用引起的周圍神經病變的藥物組合物中的應用。本發明還提供組合製劑，其包括藥物組合物和具有微管抑制作用的抗癌劑，所述藥物組合物含有對於預防或治療由微管抑制作用引起的周圍神經病變為有效量的紅細胞生成素。在本發明中，將含有紅細胞生成素的藥物組合物與具有微管抑制作用的抗癌劑"組合"給予的方式，包括在抗癌劑給予之前、與抗癌劑給予的同時、在抗癌劑給予後進行"組合"的所有情況。實施例通過實施例對本發明進行更詳細說明，但本發明並不限定於這些實施例。各種各樣的變更、修飾對於本領域技術人員來說都是可以的，這些變更、修飾也都包括在本發明中。實施例l:EPO在由泰索帝引起的周圍神經病變(neuropathy)模型中的作用(1)由給予泰索帝引起的周圍神經病變模型的製作(1-1)動物購入5周齡的ICR小鼠(雄性)，進行l周的處理(飼養)後，用於實驗。(l-2)試劑的製備和給予作為抗癌劑使用泰索帝(泰索帝注射液、AventisPharma公司制、IV80mg2mL)。使用附帶的溶劑和生理鹽水，按照小鼠體重每10g的給予量為0.15ml左右，配製泰索帝(45mg/kgiv,90mg/kgip)。作為對照的溶劑(Omg/kg)，使用土溫-80和生理鹽水進行同樣配製，以iv方式給予。另外，作為人重組EPO，將Epogin(商品名、中外製藥制)用溶劑(含有135nmol/LNaCl、0.125%組氨酸-HC1、含0.005%土溫80的10隨ol/L磷酸緩沖液(pH6.0)的溶液)進行調製，按照720U/只動物/周給予。給予方案按照每周一次分別給予泰索帝O、45mg/kgiv(尾部靜注)、90mg/kgip，共給予3周(第0、7、14天，共計3次)。而溶劑和EPO(720U/只動物)在給予泰索帝3小時前分別以sc(背頸部)方式給予。給予組分為以下6組(括號內的數字為動物只數)。1.泰索帝(Tax)0iv+賦形劑(5)2.泰索帝(Tax)0iv+EPO(5)3.泰索帝(Tax)45iv+賦形劑(8)4，泰索帝(Tax)90ip+賦形劑(8)5.泰索帝(Tax)90ip+EPO(8)(2)神經症狀的評價通過連續給予泰索帝，當把尾巴懸吊時則誘發典型的後腿的交差反應，隨著症狀發展，前肢也可看到同樣的反應，導致步行障礙。以該症狀為指標，將完全看不到症狀的情況評價為O,將雖然沒有表現出明顯的彎曲反應，但出現運動異常的情況評價為O.5，將任何後肢表現出彎曲反應的情況評價為l，將後肢維持2秒以上的彎曲狀態或伸展狀態的情況評價為2、將出現步行障礙的情況評價為3。該評分通過盲法對症狀進行評價來進行。(3)坐骨神經的病理組織學的評價在將肌肉組織剝離，露出坐骨神經的狀態下，加戊二醛固定液(在使用前保存在冰中)使得坐骨神經完全浸沒，放置10分鐘後，分離坐骨神經，在戊二醛醇固定液中用振蕩器(shaker)緩慢攪拌l小時。然後按照常規方法，將該坐骨神包埋在電子顯微鏡用樹脂中，通過曱苯胺藍(toluidineblue)染色製作染色切片，將軸突變性的程度按照無變性(-)、輕度(+)、中度(++)3個等級進行評價。(1)神經症狀的變化給予泰索帝時，對於給予45mg/kgiv、90rag/kgip的情況，均在給予第8天前後出現神經症狀，之後，經時觀察到症狀的進一步惡化，關於症狀的程度，在給予的第7-10天，與45mg/kgip相比，90mg/kgip給予組更早出現惡化傾向，但之後兩者的症狀變化幾乎相同，兩者之間無明顯差^(圖l)。另一方面，在未給予泰索帝組(naive)，則完全未出現神經症狀(圖l)。基於以上結果，可以採用症狀較早出現的泰索帝90mg/kgip給予來進行藥效的研究。在由給予泰索帝90mg/kgip而引起的病變中，通過給予EPO，10天後觀察到神經症狀的顯著性減輕(圖2)。(2)組織學研究表l和圖3-l、圖3-2給出了通過甲苯胺藍染色進行組織學研究的結果。在給予泰索帝(Tax)的坐骨神經標本中的軸突變性變化和EPO的效果tableseeoriginaldocumentpage18在未給予泰索帝組(0iv)，沒有觀察到任何坐骨神經軸突的變性，但在給予泰索帝組軸突徑縮小、變形，明顯觀察到軸突變性。變性程度在90mg/kgip給予組為±3、輕度(+)1、中度(++)3(圖3-2、表l)。另一方面，在EPO給予組，給予90mg/kgip的變性程度在±~輕度(+)的範圍，評價為士的個數比賦形劑(vehicle)組的要多，確認病變有減輕的傾向(圖3-2，表l)。由這些結果可知，在由給予在癌症治療中廣泛使用的抗癌劑泰索帝造成的周圍神經病變模型中，通過給予EP0，具有抑制神經症狀的惡化和坐骨神經的軸突變性的傾向(圖l、圖2、圖3-l、圖3-2、表l)。產業實用性通過將含有紅細胞生成素作為有效成分的藥物組合物給予給藥有微管抑制劑的抗癌劑的患者，使該患者的周圍神經病變減輕，可以增加以往不可能的上述抗癌劑的給藥劑量、給藥周期、給藥次數。因此，該藥物組合物不僅可以改善該患者的生活質量(Q0L),而且可以延長該患者的生命。權利要求1.藥物組合物，含有紅細胞生成素作為有效成分，用於預防和/或治療由微管抑制作用引起的周圍神經病變。2.權利要求l所述的藥物組合物，其中，上述由微管抑制作用引起引起的周圍神經病變。3.權利要求2所述的藥物組合物，其中，上述紫杉類是紫杉醇或泰索帝。4.含有紅細胞生成素的藥物組合物在癌症治療中的應用，其特徵在於，將該藥物組合物與具有微管抑制作用的抗癌劑組合。5.用於預防或治療由微管抑制作用引起的周圍神經病變的方法，包括將含有預防或治療有效量的紅細胞生成素的藥物組合物給予需要該預防或治療的患者。6.癌症的治療方法，包括將含有對於預防或治療由微管抑制作用引起的周圍神經病變為有效量的紅細胞生成素的藥物組合物與具有微管抑制作用的抗癌劑組合，給予患者。7.紅細胞生成素在製造用於預防或治療由微管抑制作用引起的周圍神經病變的藥物組合物中的應用。8.組合製劑，包括藥物組合物和具有微管抑制作用的抗癌劑，所述藥物組合物含有對於預防或治療由微管抑制作用引起的周圍神經病變為有效量的紅細胞生成素。全文摘要通過將含有紅細胞生成素作為有效成分的用於預防和/或治療由染色體的微管抑制作用引起的周圍神經病變的藥物組合物給予服用了微管抑制劑的抗癌劑的患者，可減輕該患者的周圍神經病變，可增加以往不可能的上述抗癌劑的給藥劑量、給藥周期、給藥次數。因此，該藥物組合物不僅可以改善該患者的生活質量(QOL)，而且可以延長該患者的生命。文檔編號A61P35/00GK101505788SQ20078003112公開日2009年8月12日申請日期2007年8月22日優先權日2006年8月22日發明者須川誠申請人:中外製藥株式會社