一種含磷酸肌醇3－激酶抑制劑及拓撲酶抑制劑的抗癌組合物的製作方法
2023-05-30 08:07:16
專利名稱：一種含磷酸肌醇3－激酶抑制劑及拓撲酶抑制劑的抗癌組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種含磷酸肌醇3-激酶抑制劑和/或拓撲酶抑制劑的抗癌組合物，為抗癌緩釋注射劑和緩釋植入劑，屬於藥物技術領域。
背景技術：
作為一類常用的化療藥物，磷酸肌醇3-激酶抑制劑已廣泛應用於多種惡性腫瘤的治療，而且作用效果較為明顯。然而，其顯著的毒性反應極大地限制了該類藥物的廣泛應用。
由於實體腫瘤過度膨脹性增生，其間質壓力、組織彈性壓力、流體壓力及間質的粘稠度均較其周圍正常組織為高，因此，常規化療，難於腫瘤局部形成有效藥物濃度。另外，腫瘤間質中的血管、結締組織、基質蛋白、纖維蛋白及膠原蛋白等不僅為腫瘤細胞的生長提供了支架及必不可少的營養物質，還影響了化療藥物在腫瘤周圍及腫瘤組織內的滲透和擴散(參見尼提等「細胞外間質的狀況對實體腫瘤內藥物運轉的影響」《癌症研究》60期2497-503頁(2000年)(Netti PA，Cancer Res.2000，60(9)2497-503))。所以，單純提高給藥劑量又受到全身反應的限制。藥物局部應用可能在某種程度上解決藥物濃度的問題，然而藥物植入等手術操作較複雜，創傷性大，除易導致出血、感染、免疫力降低等各種併發症外，還可引起或加速腫瘤的擴散與轉移。除此之外，手術前後本身的準備及昂貴的費用常常影響其有效的實施。
另外，許多腫瘤細胞內的DNA修復功能在化療之後明顯增加。後者常導致腫瘤細胞對抗癌藥物的耐受性的增強，其結果是治療失敗。除此之外，低劑量的抗癌藥物治療不僅能夠增加癌細胞的藥物耐受性，而且還可促進其浸潤性生長」(參見梁等「抗癌藥物脈衝篩選後增加了人肺癌細胞的藥物耐受性及體外浸潤能力並伴有基因表達的改變」《國際癌症雜誌》111期484-93頁(2004年)(Liang Y，et al.，Iht J Cancer.2004；111(4)484-93))。
因此，研究既方便操作，能在腫瘤局部維持高的藥物濃度又能增加腫瘤細胞對藥物的敏感程度的製劑和方法便成為當前一個重要課題。
發明內容本發明針對現有技術的不足，提供一種含磷酸肌醇3-激酶抑制劑和拓撲酶抑制劑的抗癌藥物組合物，具體而言，是一種含磷酸肌醇3-激酶抑制劑和拓撲酶抑制劑的抗癌緩釋注射劑或緩釋植入劑。
磷酸肌醇3-激酶抑制劑作為一類新的抗癌藥物，國內外已廣泛用於治療多種實體腫瘤。然而在應用過程中，其明顯的全身毒性極大地限制了該藥的應用。
為有效提高腫瘤局部的藥物濃度、降低藥物在循環系統中的藥物濃度，人們研究了含磷酸肌醇3-激酶抑制劑的藥物緩釋系統，包括磁性微球(見中國專利號CN200410044113.8；CN200410009233.4)、緩釋微球(囊)(見中國專利號CN200410023746.0)和納米微粒(見中國專利號CN200410099292.5；CN200510002387.5)等。然而，固體緩釋植入劑(中國專利號ZL96115937.5；ZL97107076.8；CN200410084621.9)、帶放射源的微型植入器(中國專利號CN200510011250.6)、緩釋微球(中國專利號ZL00809160.9；美國專利US5,651,986)均存在不容易操作、療效差、併發症多等問題。除此之外，許多實體腫瘤對抗癌藥包括磷酸肌醇3-激酶抑制劑的敏感性較差，且在治療過程中容易產生耐藥性。
本發明發現，拓撲酶抑制劑與磷酸肌醇3-激酶抑制劑合用可使其抗癌作用相互加強；除此之外，將磷酸肌醇3-激酶抑制劑與拓撲酶抑制劑的組合製成抗癌藥物緩釋劑(主要為緩釋注射劑和緩釋植入劑)不僅能夠極大地提高腫瘤局部的藥物濃度、降低藥物在循環系統中的藥物濃度、降低藥物對正常組織的毒性，還能夠極大方便藥物注射、減少手術操作的併發症、降低病人的費用。以上意外發現構成本發明的主要內容。
本發明還發現，就具有抗癌活性的成分如磷酸肌醇3-激酶抑制劑與拓撲酶抑制劑而言，並非所有緩釋輔料均可達到有效釋放的緩釋效果。藥用輔料有數百種以上，具有緩釋作用的藥用輔料，特別是能將不同藥物在人體或動物體內於一定的時間內緩慢釋放的藥用輔料必須經過大量創造性的實驗才能獲得，特定的緩釋輔料與可被緩釋藥物的組合的選擇需要經過大量的創造性勞動才能確定。釋放過慢不足以獲得有效藥物濃度，因而不能有效殺死腫瘤細胞；若釋放過快會造成突釋，則容易引起全身毒性反應，如聚苯丙生(A.J.Domb等，Biomaterials(1995)，16(14)1069-1072；Wenbin Dang等，Journal ofControlled Release(1996)，4283-92；Eric P.Sipos等，Cancer ChemotherPharmacol(1997)，39383-389；Lawrence K.Fung等，Cancer Research(1998)，58672-684)。相關數據，特別是動物體內釋放特性的數據需要經過體內外大量創造性的實驗才能獲得，並非經過有限的實驗就能確定，具有非顯而易見性。
本發明發現，聚磷酯(polyphosphoesters)、聚磷酸酯(polyphosphate)、聚亞磷酸酯(polyphosphite)、聚膦酸酯(polyphosphonate)、聚脂環磷酸酯(poly(cycloaliphatic phosphoester))、磷酸乙酯(EOP)等磷酸酯高分子聚合物能將本發明的有效成分平穩緩慢釋放，釋放周期40到100天以上。且無突釋，特別是與聚乳酸等糖酐類高分子混合或共聚。以上發現解決了現有緩釋製劑的突釋和過快釋放的不足，能夠緩慢釋藥40-100天以上。以上發現構成本發明的主要特徵。
本發明磷酸肌醇3-激酶抑制劑緩釋劑的一種形式是緩釋注射劑，由緩釋微球和溶媒組成。具體而言，該抗癌緩釋注射劑由以下成分組成(A)緩釋微球，包括抗癌有效成分0.5-70％緩釋輔料30-99％助懸劑 0.0-30％以上為重量百分比和(B)溶媒，為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。
其中，抗癌有效成分為磷酸肌醇3-激酶抑制劑和/或拓撲酶抑制劑。
磷酸肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase，簡稱PI3K)抑制劑(PI3Ki)選自7-氫氧基-星狀孢子素(7-hydroxyl-staurosporine，UCN-01)、7-O-烷基-星狀孢子素(UCN-02)、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼(alkylphosphocholines)、六癸基磷酸膽鹼(hexadecylphosphocholine，MIL、HPC，Miltefosine)、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽(Octadecyl-(1，1-dimethyl-4-piperidylio)phosphate，perifosine，D-21266)、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼(AMG-PC，1-O-hexadecyl-2-O-methylrac-glycero-3-phosphocholine，ET-16-OCH3)、1-O十八基-2-O甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼(1-O-Octadecyl-2-O-methyl-rac-glycerophosphocholine，ET-18-OCH3，edelfosine)、1-O-十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼(1-O-octadecyl-2-O-methylsn-glycero-3-phosphocholine，ilmofosine，L-ET-18-OCH(3))、肌醇聚磷酸鹽(inositolpolyphosphates)、環孢菌素A(Cyclosporin A)、十四(烷)基磷酸膽鹼(Tetradecylphosphocholine，TPC)、六癸基磷酸(N-N-N-三甲基)己醇胺(hexadecylphospho(N-N-N-trimethyl)hexanolamine，HPC6)、十八基磷酸膽鹼(octadecylphosphocholine，OPC)或十八基-[2- (N-甲基哌啶)乙基]-磷酸鹽(octadecyl-[2-(N-methylpiperidinio)ethyl]-phosphate，D-20133或OMPEP)。
以7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-基星-狀孢子素、β-氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼、六癸基磷酸膽鹼(Miltefosine)、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽(perifosine)、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼(edelfosine)、1-O-十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼(ilmofosine)、肌醇聚磷酸鹽、環孢菌素A、十四(烷)基磷酸膽鹼、六癸基磷酸(N-N-N-三甲基)己醇胺、十八基磷酸膽鹼或十八基-[2-(N-甲基哌啶)乙基]-磷酸鹽為優選。
磷酸肌醇3-激酶抑制劑在組合物中的含量為0.01％-60％，以1％-40％為佳，以2％-30％為最佳，以上均為重量百分比。
拓撲酶抑制劑選自下列之一或組合喜樹礆(camptothecin，CPT)、喜樹礆的衍生物、勒託替康(Lurtotecan)、拓撲替康(10-hydroxy-9-dimethylaminomethyl(S)-camptothecin，topotecan)、依力替康(irinotecan，IRT)、9-硝基喜樹礆(9-nitrocamptothecin，9NC)、7-乙基-10-羥基-喜樹礆(7-ethyl-10hydroxy-camptothecin，SN-38)、7-乙基-10-[4-(1-哌啶子基)-1-哌啶子基]羰基喜樹礆(7-ethyl-10-[4-(1-pyperidino)-1-piperidino]carbonyloxycamptothecin，CPT-11)、10-羥基-喜樹礆(10-Hydroxycamptothecin，HCPT)、同型喜樹礆(Homocamptothecins)、亞甲二氧基喜樹礆(10，11-methylenedioxy，MD-CPT)、(RS)-亞甲二氧基喜樹礆(10，11-MD-20(RS)-CPT)、(S)-亞甲二氧基喜樹礆甘氨酸酯(10，11-MD-20(S)-cpTglycinate ester(Gly).HCl)、9-氨基-(S)-亞甲二氧基喜樹礆甘氨酸酯(9-amino-10，11-MD-20(S)-CPT-Gly)、N-[2-(二甲基氨基)乙基]呀啶-4-羧醯胺(N-[2-(dimethylamino)ethyl]acridine-4-carboxamide，DACA)及其5或7位取代的衍生物、鬼臼黴素(podophyllotoxin)、依託泊甙(Etoposide，epipodophyllotoxins，鬼臼乙叉甙、足葉乙甙、VP-16)、替尼泊甙(Teniposide、鬼臼噻吩甙、VM-26)、鬼臼酸、鬼臼毒素、三羥基異黃酮(Genistein)、14-羥柔紅黴素、氨柔比星(Amrubicin)、艾柔比星(4』-(acridinylamino)methansulfon-m-anisidide(amsacrine，m-AMSA))、4-去甲氧道諾紅菌素(4-demeth oxydaunorubicin)、地託比星、阿黴素、表阿黴素、7-O-甲基諾加-4』表阿黴素(7-o-methylnogallol-4』-epiadriamycin)、依索比星(Esorubicin)、卡柔比星、伊達比星(idarubicin，IDA)、羅多比星、流柔比星(Leurubicin)、美多比星、奈莫柔比星(Nemorubicin)、多柔比星、吡柔比星、戊柔比星(N-三氟毒素-14-戊酸鹽，N-trifluoroacetyladriamycin-14-valerate，AD 32，valrubicin)、2-[4-(7-氯-2-喹喔啉基氧苯氧基]-丙酸((2-[4-(7-chloro-2-quinoxalinyloxyphenoxy]-propionic acid，XK469)、佐柔比星(Zorubicin)、N-(2-氯乙烷)-N-亞硝基脲基柔紅黴素(N-(2-Chloroethyl)-N-nitrosoureidodaunorubicin，AD 312)、吡唑[1，5-a]吲哚衍生物，如，但不限於，GS-2，-3，-4，GS-5；二氧代哌嗪衍生物，如，但不限於，(+)-1，2-雙(3，5-二氧代哌嗪基)丙烷((+)-1，2-bis(3，5-dioxopiperazinyl-1-yl)propane，ICRF-187)、間-2，3-雙(3，5-二氧代哌嗪-1-基)丁烷(meso-2，3-bis(3，5dioxopiperazine-1-yl)butane，ICRF-193)、雙二氧代哌嗪(bisdioxopiperazine)；蘇拉明(Suramin)，脫氧鳥苷(Deoxyguanosine)，石膽酸(lithocholic acid，LCA)或疊氮化鈉(sodium azide)。
在上述拓撲酶抑制劑中，以喜樹礆、羥基喜樹礆、勒託替康、拓撲替康、依力替康、依託泊甙、替尼泊甙、氨柔比星、艾柔比星、地託比星、阿黴素、表阿黴素、依索比星、卡柔比星、羅多比星、流柔比星、美多比星、奈莫柔比星、佐柔比星、多柔比星、吡柔比星、戊柔比星或伊達比星為優選。拓撲酶抑制劑在組合物中所佔的比例因具體情況而定，一般而言，可從0.01％-50％，以1％-40％為佳，以5％-30％為最佳。均為重量百分比。
抗腫瘤藥物在藥物緩釋微球中的重量百分比為0.5％-60％，以2％-40％為佳，以5％-30％為最佳。當聯合應用時，磷酸肌醇3-激酶抑制劑與拓撲酶抑制劑的重量比為1-9∶1到1∶1-9，以1-4∶1和4-1∶1為優選，1-2∶1和2-1∶1為最優選。
本發明抗癌緩釋注射劑微球中的抗癌有效成分優選如下，均為重量百分比(a)1-40％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼、六癸基磷酸膽鹼、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼、1-O-十八基-2-O甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼或1-O十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼；(b)1-40％的喜樹礆、羥基喜樹礆、勒託替康、拓撲替康、依力替康、依託泊甙、替尼泊甙、氨柔比星、艾柔比星、地託比星、阿黴素、表阿黴素、依索比星、卡柔比星、羅多比星、流柔比星、美多比星、奈莫柔比星、佐柔比星、多柔比星、吡柔比星、戊柔比星或伊達比星；或(c)1-40％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼、六癸基磷酸膽鹼、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼或1-O十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼與1-40％的喜樹礆、羥基喜樹礆、勒託替康、拓撲替康、依力替康、依託泊甙、替尼泊甙、氨柔比星、艾柔比星、地託比星、阿黴素、表阿黴素、依索比星、卡柔比星、羅多比星、流柔比星、美多比星、 奈莫柔比星、佐柔比星、多柔比星、吡柔比星、戊柔比星或伊達比星的組合。
緩釋輔料粘度範圍IV(dl/g)0.05～1.8，以0.1～1.4為優選，以0.1～1.4為最優選。本發明所用的緩釋輔料選自聚磷酯(polyphosphoesters)、聚磷酸酯(polyphosphate)、聚亞磷酸酯(polyphosphite)、聚膦酸酯(polyphosphonate)、聚脂環磷酸酯(poly(cycloaliphatic phosphoester))、磷酸乙酯(EOP)、聚(1，4-二(羥乙酯)對苯二酸酯-co-磷酸乙酯/對苯二酸酯鹽酸酯，80/20)(p(BHET-EOP/TC，80/20))、p(BHET-EOP/TC，50/50)、聚(L-丙交酯-co-磷酸乙酯(p(LAEG-EOP))、聚(L-丙交酯-co-磷酸丙酯)(p(DAPG-EOP))、反(式)-1，4-二甲基環己烷(trans-1，4-cyclohexanedimethanil，CHDM)、己基二氯代磷酸酯(hexyl phosphorodichloridate，HOP)、4-二甲胺基吡啶(4-dimethylaminopyridine，DMAP)、聚(1，4-二(羥乙酯)對苯二酸酯-co-4-二甲胺基吡啶-co-磷酸乙酯/對苯二酸酯鹽酸鹽，80/20)(p(BHDPT-EOP/TC，80/20))、p(BHDPT-EOP/TC，50/50)、聚(反(式)-1，4-二甲基環己烷-磷酸乙酯)(p(CHDM-HOP))、聚(反(式)-1，4-二甲基環己烷-己基二氯代磷酸酯(p(CHDM-EOP))中的一種或其組合。
上述磷酸酯中以p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)、p(CHDM-EOP)為優選。
本發明所用的緩釋輔料還選自上述磷酸酯與外消旋聚乳酸(D，L-PLA)、外消旋聚乳酸/乙醇酸共聚物(D，L-PLGA)、單甲基聚乙二醇/聚乳酸(MPEG-PLA)、單甲基聚乙二醇/聚乳酸共聚物(MPEG-PLGA)、聚乙二醇/聚乳酸(PLA-PEG-PLA)、聚乙二醇/聚乳酸共聚物(PLGA-PEG-PLGA)、端羧基聚乳酸(PLA-COOH)、端羧基聚乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA-COOH)、聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]、乙烯乙酸乙烯酯共聚物(EVAc)、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)、聚對二氧環己酮(PDO)、聚三亞甲基碳酸酯(PTMC)、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、殼聚糖、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、透明質酸、膠原蛋白、明膠或蛋白膠的共混或共聚物。其中磷酸酯所佔的重量百分比為1-99％，以40-80％為優選，50-60％為最優選。
助懸劑選自羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲矽油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合。
為調節藥物釋放速度或改變本發明的其它特性，可以改變聚合物的單體成分或分子量、添加或調節藥用輔料的組成及配比，添加水溶性低分子化合物，如，但不限於，各種糖或鹽等。其中糖可為，但不限於，木糖醇、低聚糖、(硫酸)軟骨素及甲殼素等，其中鹽可為，但不限於，鉀鹽和鈉鹽等。
除上述輔料外，還可選用其他物質見美國專利(4757128；4857311；4888176；4789724)及《藥用輔料大全》(第123頁，四川科學技術出版社1993年出版，羅明生和高天惠主編)中已有詳細描述。另外，中國專利(申請號96115937.5；91109723.6；9710703.3；01803562.0)及美國發明專利(專利號5,651,986)也列舉了某些藥用輔料，包括充填劑、增溶劑、吸收促進劑、成膜劑、膠凝劑、制(或致)孔劑、賦型劑或阻滯劑等。
助懸劑的含量因溶媒所懸浮的藥物、緩釋微球(或微囊)的組成、性質及其需要量、注射劑的製備方法及助懸劑的種類及其組成而定，如，羧甲基纖維素鈉可為0.5-5％，但以1-3％為優選，甘露醇和/或山梨醇為5-30％，但以10-20％為優選，而吐溫20、吐溫40或吐溫80為0.05-2％，但以0.10-0.5％為優選。多數情況下，緩釋微粒由有效成分與緩釋輔料組成，溶媒為特殊溶媒。當溶媒為普通溶媒時，所懸浮之藥物或緩釋微球(或微囊)則由有效成分、緩釋輔料和/或助懸劑組成。換言之，當緩釋微粒(A)中的助懸劑為「0」時，溶媒(B)為特殊溶媒，當緩釋微粒(A)中的助懸劑不為「0」時，溶媒(B)可為普通溶媒或特殊溶媒。助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時)，優選1000cp-3000cp(20℃-30℃時)，最優選1500cp-3000cp(20℃-30℃時)。
普通溶媒可為，但不限於，蒸餾水、注射用水、生理衝液、無水乙醇或各種鹽配製的緩衝液，藥典有相應規定；本發明所指的特殊溶媒為含助懸劑的普通溶媒，助懸劑可為，但不限於，羧甲基纖維素鈉、(碘)甘油、二甲矽油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質、吐溫20、吐溫40和吐溫80之一或其組合。特殊溶媒中助懸劑的含量為0.1-30％體積重量百分比，優選如下(a)0.5-5％羧甲基纖維素鈉；或(b)0.5-5％羧甲基纖維素鈉和0.1-0.5％吐溫80；或(c)5-20％甘露醇；或(d)5-20％甘露醇和0.1-0.5％吐溫80；或。
(e)0.5-5％羧甲基纖維素鈉、5-20％山梨醇和0.1-0.5％吐溫80。
上述均為體積重量百分比，單位體積的普通溶媒中含助懸劑的重量，如g/ml，kg/L下同注射劑的製備包括緩釋微球或藥物微粒的製備、溶媒的製備以及緩釋微球或藥物微粒在溶媒中懸浮，最後製成注射劑。
其中，緩釋微球或藥物微粒可用若干種方法製備如，但不限於，混合法、熔融法、溶解法、噴霧乾燥法製備微球、溶解法結合冷凍(乾燥)粉碎法、脂質體包藥法及乳化法等。其中以溶解法(即溶劑揮發法)、冷凍(乾燥)粉碎法、乾燥法、噴霧乾燥法和乳化法為優選。微球則可用於製備上述各種緩釋注射劑。懸浮藥物或緩釋微球(或微囊)的粒徑因具體需要而定，可為，但不限於，1-300um，但以20-200um為優選，30-150um最優選。藥物或緩釋微球可製成微球、亞微球、微乳、納米球、顆粒或球形小丸。緩釋輔料為上述生物可容性、可生物降解或非生物降解多聚物。
溶媒的製備則取決於溶媒的種類，普通溶媒有市售，也可以自制，如蒸餾水、注射用水、生理衝液、無水乙醇或各種鹽配製的緩衝液，但必須嚴格按照有關標準。特殊溶媒需考慮到助懸劑的種類及其組成、溶媒所懸浮的藥物、緩釋微球(或微囊)的組成、性質及其需要量及注射劑的製備方法，如將羧甲基纖維素鈉(1.5％)+甘露醇和/或山梨醇(15％)和/或吐溫80(0.1％)溶於生理鹽水中得相應得溶媒，黏度在10cp-650cp(20℃-30℃時)。
本發明發現影響藥物和/或緩釋微球懸浮和/或注射的關鍵因素是溶媒的黏度，黏度越大，懸浮效果越好，可注射性越強。這種意外發現構成了本發明的主要指數特徵之一。溶媒的黏度取決於助懸劑的黏度，助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時)，優選1000cp-3000cp(20℃-30℃時)，最優選1500cp-3000cp(20℃-30℃時)。按照此條件所製得的溶媒的黏度為10cp-650cp(20℃-30℃時)，優選20cp-650cp(20℃-30℃時)，最優選60cp-650cp(20℃-30℃時)。
注射劑的製備有多種方法，一種是將助懸劑為「0」的緩釋微粒(A)直接混於特殊溶媒中，得到相應的緩釋微粒注射劑；另一種是將助懸劑不為「0」的緩釋微粒(A)混於特殊溶媒或普通溶媒中，得到相應的緩釋微粒注射劑；再一種是將緩釋微粒(A)混於普通溶媒中，然後加入助懸劑混勻，得到相應的緩釋微粒注射劑。除外，還可先將緩釋微粒(A)混於特殊溶媒中製得相應的混懸液，然後用真空乾燥等辦法去除混懸液中的水分，之後再用特殊溶媒或普通溶媒混懸，得到相應的緩釋微粒注射劑。以上方法只是用於說明而非限制本發明。值得注意的是，懸浮藥物或緩釋微球(或微囊)在注射劑中的濃度因具體需要而定，可為，但不限於，10-400mg/ml，但以30-300mg/ml為優選，以50-200mg/ml最優選。注射劑的黏度為50cp-1000cp(20℃-30℃時)，優選100cp-1000cp(20℃-30℃時)，最優選200cp-650cp(20℃-30℃時)。此黏度適用於18-22號注射針頭和特製的內徑更大的(至3毫米)注射針頭。
注射劑的應用包括緩釋微球或藥物微粒的應用、溶媒的應用以及緩釋微球或藥物微粒在溶媒中懸浮後製成的注射劑的應用。
微球用於製備緩釋注射劑，如混懸型緩釋注射劑、凝膠注射劑、嵌段共聚物膠束注射劑。在各種注射劑中以混懸型緩釋注射劑為優選。混懸型緩釋注射劑是將含有效成分的藥物緩釋微球或藥物微粒懸浮於溶媒中所得的製劑，所用的輔料為上述緩釋輔料中的一種或其組合，所用溶媒為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。普通溶媒為，但不限於，蒸餾水、注射用水、生理衝液、無水乙醇或各種鹽配製的緩衝液；嵌段共聚物膠束由疏水-親水嵌段共聚物在水溶液中形成，具有球形內核-外殼結構，疏水嵌段形成內核，親水嵌段形成外殼。載藥膠束注射進入體內達到控制藥物釋放或靶向治療的目的。所用藥物載體為上述任意一種或其組合。其中優選分子量為1000-15000的聚乙二醇(PEG)作為膠束共聚物的親水嵌段，優選生物降解聚合物(如PLA、聚丙交酯、聚己內酯及其共聚物(分子量1500-25000))作為膠束共聚物的疏水嵌段。嵌段共聚物膠束的粒徑範圍可在1-300um，但以20-200um為優選，30-150um最優選；凝膠注射劑系將生物降解聚合物(如PLA、PLGA或DL-LA和ε-己內酯共聚物)溶於某些兩親性溶媒，再加入藥物與之混溶(或混懸)後形成流動性較好的凝膠，可經瘤周或瘤內注射。一旦注入，兩親性溶媒很快擴散至體液，而體液中的水分則滲入凝膠，使聚合物固化，緩慢釋放藥物。
溶媒的應用主要指特殊溶媒的應用在於有效懸浮、穩定和/或保護各種藥物或緩釋微球(或微囊)，從而製備相應的注射劑。特殊溶媒的應用會使所製得的注射劑具有更好的注射性、穩定性及較高的黏度。
注射劑的應用是用高粘度的特殊溶媒將含藥微粒，特別是緩釋微粒，製成相應的緩釋注射劑，從而使相應的藥物能夠以注射的方式輸入所需藥物的病人或哺乳動物體內。所注入的藥物可為，但不限於，上述藥物微粉或藥物緩釋微粒。
注射劑的給藥途逕取決於多種因素。對於非增生性病變，可經靜脈、淋巴管、皮下、肌肉、腔內(如腹腔、胸腔、關節腔內及椎管內)、組織內、瘤內、瘤周、選擇性動脈注射、淋巴結內及骨髓內注射。對於增生性病變，如實體腫瘤，雖然可經上述途徑給藥，但以選擇性動脈、腔內、瘤內、瘤周注射為優選。
為於原發或轉移腫瘤所在部位獲有效濃度，也可經多種途徑聯合給予，如靜脈、淋巴管、皮下、肌肉、腔內(如腹腔、胸腔、關節腔內及椎管內)或選擇性動脈注射的同時結合局部注射。如此聯合給藥特別適用於對實體腫瘤。如瘤內、瘤周注射的同時結合全身注射。
本發明可以用於製備治療人及動物的各種腫瘤的藥物，主要為緩釋注射劑。
本發明抗癌藥物緩釋劑的又一種形式是抗癌藥物緩釋劑為緩釋植入劑。抗癌植入劑的有效成分可均勻地包裝於整個藥用輔料中，也可包裝於載體支持物中心或其表面；可通過直接擴散和/或經多聚物降解的方式將有效成分釋放。
緩釋植入劑的特點在於所用的緩釋輔料除高分子聚合物外，還含有上述任意一種或多種其它輔料。添加的藥用輔料統稱為添加劑。添加劑可根據其功能分為充填劑、致孔劑、賦型劑、分散劑、等滲劑、保存劑、阻滯劑、增溶劑、吸收促進劑、成膜劑、膠凝劑等。
緩釋植入劑的主要成份可製成多種劑型。如，但不限於，膠囊、緩釋劑、植入劑、緩釋劑植入劑等；呈多種形狀，如，但不限於，顆粒劑、丸劑、片劑、散劑、顆粒劑、球形、塊狀、針狀、棒狀、柱狀及膜狀。在各種劑型中，以體內緩慢釋放植入劑為優選。
緩釋植入劑的最佳劑型為生物相容性、可降解吸收的緩釋劑植入，可因不同臨床需要而製成各種形狀及各種劑型。其主要成份的包裝方法和步驟在美國專利中(US5651986)已有詳細描述，包括若干種製備緩釋製劑的方法如，但不限於，(i)把載體支持物粉末與藥物混合然後壓製成植入劑，即所謂的混合法；(ii)把載體支持物熔化，與待包裝的藥物相混合，然後固體冷卻，即所謂的熔融法；(iii)把載體支持物溶解於溶劑中，把待包裝的藥物溶解或分散於聚合物溶液中，然後蒸發溶劑，乾燥，即所謂的溶解法；(iv)噴霧乾燥法；及(v)冷凍乾燥法等。
緩釋劑的給藥途逕取決於多種因素，為於原發或轉移腫瘤所在部位獲得有效濃度，藥物可經多種途徑給予，如皮下、腔內(如腹腔、胸腔及椎管內)、瘤內、瘤周注射或放置、選擇性動脈注射、淋巴結內及骨髓內注射。以選擇性動脈注射、腔內、瘤內、瘤周注射或放置為優選。
本發明可以用於製備治療人及動物的各種腫瘤的藥物製劑，主要為緩釋注射劑或緩釋植入劑，所指腫瘤包括起源於大腦、中樞神經系統、腎臟、肝、膽囊、頭頸部、口腔、甲狀腺、皮膚、黏膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結、肺臟、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宮、卵巢、子宮內膜、子宮頸、前列腺、膀胱、結腸、直腸的原發或轉移的癌或肉瘤或癌肉瘤。
上述臟器的腫瘤可為不同的病理類型，淋巴結的淋巴結的腫瘤分為何杰金淋巴結瘤和非何杰金氏淋巴瘤，肺癌包括小細胞肺癌和非小細胞肺癌等，腦腫瘤包括膠質瘤等。然而常見的腫瘤包括腦腫瘤、腦膠質瘤、腎癌、肝癌、膽囊癌、頭頸部腫瘤、口腔癌、甲狀腺癌、皮膚癌、血管瘤、骨肉瘤、淋巴瘤、肺癌、胸腺癌、食管癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、眼睛的視網膜母細胞瘤、鼻咽癌、卵巢癌、子宮內膜癌、子宮頸癌、前列腺癌、膀胱癌、結腸癌、直腸癌、睪丸癌等實體腫瘤。
緩釋植入劑的應用及增效方式同抗癌緩釋注射劑，即局部放置的化療增效劑與其它途徑給藥的抗癌藥物的聯合、局部放置的抗癌藥物與其它途徑給藥的化療增效劑的聯合、局部放置的抗癌藥物與局部放置的化療增效劑的聯合。其中局部應用的抗癌藥物與化療增效劑可單獨或聯合生產、包裝、銷售、使用。包裝指藥物對輔料而言的載藥過程以及含藥緩釋劑對運輸和/或儲存而言的內外包裝。載藥過程包括，但不限於，稱量、溶解、混合、乾燥、成形、包衣、噴霧、制粒等。如將藥物與不同的輔料混合製成含不同藥物的緩釋微球，此緩釋微球可單獨包裝儲存，在應用時同時或先後注射於體內；此緩釋微球也可通過多種方法進一步成形，製成各種形狀的緩釋植入劑。
有效成分的臨床應用劑量取決於病人的具體情況，可從0.01到1000mg/kg體重，0.1到800mg/kg為優選，1到500mg/kg為最有選。
緩釋植入劑中的抗癌有效成分的用量可參照緩釋注射劑。但優選如下(a)1-40％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼、六癸基磷酸膽鹼、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼或1-O十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼；(b)1-40％的喜樹礆、羥基喜樹礆、勒託替康、拓撲替康、依力替康、依託泊甙、替尼泊甙、氨柔比星、艾柔比星、地託比星、阿黴素、表阿黴素、依索比星、卡柔比星、羅多比星、流柔比星、美多比星、奈莫柔比星、佐柔比星、多柔比星、吡柔比星、戊柔比星或伊達比星；或(c)1-40％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼、六癸基磷酸膽鹼、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼或1-O十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼與1-40％的喜樹礆、羥基喜樹礆、勒託替康、拓撲替康、依力替康、依託泊甙、替尼泊甙、氨柔比星、艾柔比星、地託比星、阿黴素、表阿黴素、依索比星、卡柔比星、羅多比星、流柔比星、美多比星、奈莫柔比星、佐柔比星、多柔比星、吡柔比星、戊柔比星或伊達比星的組合。
本發明所制的緩釋注射劑中還可加入其它藥用成分，如，但不限於，抗菌素、止疼藥、抗凝藥、止血藥等。
通過如下試驗和實施例對本發明的技術方法作進一步的描述試驗1、不同方式應用7-氫氧基-星狀孢子素後的局部藥物濃度比較以大白鼠為試驗對象，將2×105個前列腺腫瘤細胞皮下注射於其季肋部，待腫瘤生長至1釐米直徑後將其分組。每組劑量均為5mg/kg。測定不同時間腫瘤內藥物含量(％)，結果表明，7-氫氧基-星狀孢子素經不同方式應用後的局部藥物濃度差異顯著，局部給藥能夠明顯提高並有效維持腫瘤所在部位的有效藥物濃度，其中以瘤內放置緩釋植入劑和瘤內注射緩釋注射劑的效果最好。然而，瘤內注射緩釋注射劑操作最方便、容易。這一發現構成本發明的重要特徵。以下的相關抑瘤試驗進一步證實了這一點。
試驗2、不同方式應用7-O-烷基-星狀孢子素後的體內抑瘤作用比較以大白鼠為試驗對象，將2×105個乳腺腫瘤細胞皮下注射於其季肋部，待腫瘤生長至0.5釐米直徑後將其分組。每組劑量均為15mg/kg。治療後第20天測量腫瘤體積大小，比較治療效果。結果表明，7-O-烷基-星狀孢子素經不同方式應用後的抑瘤作用差異顯著，局部給藥能夠明顯提高並有效維持腫瘤所在部位的有效藥物濃度，其中以瘤內放置緩釋植入劑和瘤內注射緩釋注射劑的效果最好。然而，瘤內注射緩釋注射劑操作最方便、容易。不僅療效好，毒副作用也小。
試驗3、含六癸基磷酸膽鹼和拓撲酶抑制劑的抑瘤作用以大白鼠為試驗對象，將2×105個胰腺腫瘤細胞皮下注射於其季肋部，待腫瘤生長14天後將其分為對照組和治療組(1-11)。治療組分為六癸基磷酸膽鹼組、拓撲酶抑制劑組、六癸基磷酸膽鹼和拓撲酶抑制劑組。六癸基磷酸膽鹼組和拓撲酶抑制劑藥物劑量分別為25mg/kg和5mg/kg，經瘤內注射。治療後第20天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表1)。
表1
以上結果表明，磷酸肌醇-3-激酶抑制劑(六癸基磷酸膽鹼)及所用拓撲酶抑制劑(喜樹礆、羥基喜樹礆、勒託替康、拓撲替康、依力替康)在該濃度單獨應用時對腫瘤生長均有顯著的抑制作用(*P值小於0.05)，當聯合應用時可表現出非常顯著的增效作用(**P值小於0.001)。
試驗4、UCN-1和拓撲酶抑制劑(緩釋注射劑)的抑瘤作用所用的腫瘤細胞包括CNS-1、C6、胃腺上皮癌(SA)、骨腫瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲狀腺乳頭狀腺癌(PAT)等。將UCN-1和拓撲酶抑制劑按10ug/ml濃度加到體外培養24小時的各種腫瘤細胞中，繼續培養48小時後計數細胞總數。其腫瘤細胞生長抑制效果(％)見表2所示。
表2
以上結果表明，所用PI3Ki(UCN-1)及拓撲酶抑制劑(其中A依託泊甙，B替尼泊甙，C氨柔比星，D艾柔比星，E地託比星)在該濃度單獨應用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，當聯合應用時可表現出顯著的增效作用。
試驗5、UCN-2和拓撲酶抑制劑(緩釋注射劑)的抑瘤作用所用的腫瘤細胞包括CNS-1、C6、9L、胃腺上皮癌(SA)、骨腫瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲狀腺乳頭狀腺癌(PAT)、肝癌等。將UCN-2和拓撲酶抑制劑按10ug/ml濃度加到體外培養24小時的各種腫瘤細胞中，繼續培養48小時後計數細胞總數。其腫瘤細胞生長抑制效果表明，所用UCN-2及拓撲酶抑制劑(地託比星、阿黴素、表阿黴素、依索比星、卡柔比星)單獨應用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用(P＜0.05)，當聯合應用時可表現出顯著的增效作用(P＜0.01)。
試驗6、含PI3Ki和拓撲酶抑制劑的抑瘤作用以大白鼠為試驗對象，將2×105個胰腺腫瘤細胞皮下注射於其季肋部，待腫瘤生長14天後將其分為對照組和治療組(1-11)。治療組分為PI3Ki組、拓撲酶抑制劑組、PI3Ki和拓撲酶抑制劑組。PI3Ki組和拓撲酶抑制劑藥物劑量分別為25mg/kg和5mg/kg，經瘤內注射。治療後第20天測量腫瘤體積大小，比較治療效果(見表3)。
表3
以上結果表明，PI3Ki(Perifosine)及所用拓撲酶抑制劑(喜樹鹼、羥基喜樹鹼、勒託替康、拓撲替康、依力替康)在該濃度單獨應用時對腫瘤生長均有顯著的抑制作用(*P值小於0.05)，當聯合應用時可表現出非常顯著的增效作用(**P值小於0.001)。
試驗7、PI3Ki和拓撲酶抑制劑(緩釋注射劑)的抑瘤作用所用的腫瘤細胞包括CNS-1、C6、胃腺上皮癌(SA)、骨腫瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲狀腺乳頭狀腺癌(PAT)等。將PI3Ki和拓撲酶抑制劑按10ug/ml濃度加到體外培養24小時的各種腫瘤細胞中，繼續培養48小時後計數細胞總數。其腫瘤細胞生長抑制效果(％)見表4所示。
表4
以上結果表明，所用拓撲酶抑制劑為A地託比星，B阿黴素，C表阿黴素，D依索比星，E卡柔比星。上述藥物在該濃度單獨應用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，當聯合應用時可表現出顯著的增效作用。
試驗8、Edelfosine和拓撲酶抑制劑(緩釋注射劑)的抑瘤作用所用的腫瘤細胞包括CNS-1、C6、9L、胃腺上皮癌(SA)、骨腫瘤(BC)、乳腺癌(BA)、肺癌(LH)、甲狀腺乳頭狀腺癌(PAT)、肝癌等。將Edelfosine和拓撲酶抑制劑按10ug/ml濃度加到體外培養24小時的各種腫瘤細胞中，繼續培養48小時後計數細胞總數。其腫瘤細胞生長抑制效果表明，所用Edelfosine及拓撲酶抑制劑(羅多比星、流柔比星、美多比星、奈莫柔比星、佐柔比星、多柔比星、吡柔比星、戊柔比星或伊達比星)單獨應用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用(P＜0.05)，當聯合應用時可表現出顯著的增效作用(P＜0.01)。
上述結果表明，當聯合應用時，PI3Ki與拓撲酶抑制劑的重量比為1-9∶1到1∶1-9，以1-4∶1和4-1∶1為優選，1-2∶1和2-1∶1為最優選。
進一步研究表明，羥基喜樹鹼、勒託替康、羅多比星、流柔比星、美多比星、奈莫柔比星、佐柔比星、多柔比星、吡柔比星、戊柔比星、伊達比星等拓撲酶抑制劑與UCN-1或UCN-2合用宮頸腫癌、甲狀腺癌、直結腸癌、卵巢癌等腫瘤同樣具有明顯的增效作用(P＜0.05)。
總之，所用PI3Ki和/或各種拓撲酶抑制劑單獨應用時對多種腫瘤細胞生長均有明顯的抑制作用，當聯合應用時可表現出顯著的增效作用。因此，本發明所述的有效成分為任意一種PI3Ki和/或任意一種拓撲酶抑制劑的組合。含有以上有效成分的藥物可製成緩釋微球，進而製成緩釋注射劑和植入劑，其中以與含助懸劑的特殊溶媒組合形成的混懸注射劑為優選。
緩釋注射劑或緩釋植入劑還可通過以下實施方式得以進一步說明。上述實施例及以下實施例只是對本發明作進一步說明，並非對其內容和使用作任何限制。
具體實施方式
實施例1.
將80、80和80mg p(BHET-EOP/TC)(BHET-EOP∶TC為80∶20)共聚物分別放入甲、乙及丙三個容器中，然後每個中加100毫升二氯甲烷，溶解混勻後，分別加入20mgUCN-1、20mg依力替康、10mgUCN-1和10mg依力替康，重新搖勻後用噴霧乾燥法製備含20％UCN-1、20％依力替康、及10％UCN-1和10％依力替康的注射用微球。然後將微球懸浮於含15％甘露醇的生理鹽水中，製得相應的混懸型緩釋注射劑。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為40-50天，在小鼠皮下肝癌的釋藥時間為50天以上。
實施例2.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例1相同，但所不同的是所用輔料為50∶50的p(BHET-EOP/TC)，含抗癌有效成分及其重量百分比為(1)1-40％的UCN-1或UCN-2；(2)1-40％的喜樹礆、羥基喜樹礆、勒託替康、拓撲替康、依力替康、依託泊甙、替尼泊甙、氨柔比星、艾柔比星、地託比星、阿黴素、表阿黴素、依索比星、卡柔比星、羅多比星、流柔比星、美多比星、奈莫柔比星、佐柔比星、多柔比星、吡柔比星、戊柔比星或伊達比星；或(3)1-40％的UCN-1或UCN-2與1-30％的喜樹礆、羥基喜樹礆、勒託替康、拓撲替康、依力替康、依託泊甙、替尼泊甙、氨柔比星、艾柔比星、地託比星、阿黴素、表阿黴素、依索比星、卡柔比星、羅多比星、流柔比星、美多比星、奈莫柔比星、佐柔比星、多柔比星、吡柔比星、戊柔比星或伊達比星的組合。
實施例3.
將70mg分子量峰值為10000-25000的p(LAEG-EOP)分別放入甲、乙及丙三個容器中，然後每個中加100毫升二氯甲烷，溶解混勻後，分別向三個容器中加入30mgUCN-2、30mg依力替康、20mgUCN-2和10mg依力替康，重新搖勻後用噴霧乾燥法製備含30％UCN-2、30％依力替康、20％UCN-2和10％依力替康的注射用微球。將乾燥後的微球懸浮於含1.5％羧甲基纖維素鈉的生理鹽水中，製得相應的混懸型緩釋注射劑。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為55-65天，在小鼠肺癌的釋藥時間為60天左右。
實施例4加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例3相同，但所不同的是p(LAEG-EOP)的分子量峰值為25000-45000，所含抗癌有效成分及其重量百分比為(1)5-30％的依力替康、羥基喜樹鹼或勒託替康；或(2)5-40％的UCN-1或UCN-2；或(3)5-30％的UCN-1或UCN-2與5-30％的依力替康、羥基喜樹鹼或勒託替康的組合。
實施例5.
將60mg分子量峰值為10000-25000的p(DAPG-EOP)放入容器中，加入100毫升二氯甲烷溶解混勻後，加入30毫克UCN-1和10毫克勒託替康，重新搖勻後用噴霧乾燥法製備含30％UCN-1和10％勒託替康的注射用微球。然後將微球懸浮於含15％山梨醇的注射液中，製得相應的混懸型緩釋注射劑。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為50-55天，在小鼠皮下胃癌的釋藥時間為55天左右。
實施例6.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例5相同，但所不同的是所用輔料的分子量峰值為25000-45000，含抗癌有效成分為(1)5-40％的UCN-1；或(2)1-20％的勒託替康；或(3)5-30％的UCN-1與1-20％的勒託替康的組合。
實施例7.
將70mg分子量峰值為10000-25000的p(BHDPT-EOP/TC，80/20)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻後，加入25mgPerifosine和5mg拓撲替康，重新搖勻後用噴霧乾燥法製備含25％Perifosine與5％拓撲替康的注射用微球。然後將微球懸浮於含1.5％羧甲基纖維素鈉和0.5％吐溫80的生理鹽水中，製得相應的混懸型緩釋注射劑。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為40-45天，在小鼠皮下食道癌的釋藥時間為50天左右。
實施例8.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例7相同，但所不同的是p(BHDPT-EOP/TC)的分子量峰值為40000-65000，BHDPT-EOP∶TC為50∶50，所含抗癌有效成分為(1)10-20％的拓撲替康；(2)10-25％的UCN-1或Perifosine；或(3)10-20％的拓撲替康與10-25％的UCN-1或Perifosine的組合。
實施例9.
將30mg聚苯丙生(對羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)為20∶80)與40mg分子量峰值為30000-45000的p(DAPG-EOP)共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻後，分別加入30mgEdelfosine、30mg阿黴素、5mgEdelfosine和25mg阿黴素，重新搖勻後用噴霧乾燥法製備含30％Edelfosine、30％的阿黴素、5％Edelfosine和25％阿黴素注射用微球。然後將微球懸浮於含1.5％羧甲基纖維素鈉和15％山梨醇和0.2％吐溫80的生理鹽水中，製得相應的混懸型緩釋注射劑。該緩釋注射劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為40-45天，在小鼠皮直腸癌的釋藥時間為45天左右。
實施例10.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例9相同，但所不同的是聚苯丙生中對羧苯基丙烷∶葵二酸為50∶50，p(DAPG-EOP)的分子量峰值為40000-65000，所含抗癌有效成分為(1)5-30％的UCN-1；(2)20-40％的阿黴素；(3)5-20％的UCN-1與10-40％的阿黴素或表阿黴素的組合。
實施例11將40mg分子量峰值為20000-45000p的(LAEG-EOP)和30mg分子量峰值為10000-25000的PLA共聚物放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻後，加入10mg羥基喜樹鹼和20mgIlmofosine，重新搖勻後用噴霧乾燥法製備含10％羥基喜樹鹼和20％Ilmofosine的注射用微球。然後將微球經壓片法製得相應的緩釋植入劑。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為40-45天，在小鼠皮下乳腺癌的釋藥時間為45天左右。
實施例12加工成緩釋植入劑的方法步驟與實施例11相同，但所不同的是所用輔料為分子量峰值為40000-65000p的(LAEG-EOP)和分子量峰值為25000-45000的PLA，含抗癌有效成分為(1)10-20％的羥基喜樹鹼；或
(2)10-20％的Ilmofosine；或(3)10-20％的喜樹鹼或羥基喜樹鹼與10-20％的Ilmofosine的組合。
實施例13將40mg分子量峰值為15000-35000的聚乳酸(PLGA，50∶50)和30分子量峰值為20000-45000p的(LAEG-EOP)放入容器中，加100毫升二氯甲烷，溶解混勻後，加入10mg依力替康和20mgMilefosine，重新搖勻後用噴霧乾燥法製備含10％依力替康和20％Milefosine的注射用微球。然後將微球經壓片法製得相應的緩釋植入劑。該緩釋植入劑在體外生理鹽水中的釋藥時間為50-60天，在小鼠皮下胰腺癌的釋藥時間為60天左右。
實施例14加工緩釋植入劑的方法步驟與實施例11、13相同，但所不同的是所含抗癌有效成分為(1)10-20％的UCN-1或Milefosine；或(2)10-20％的依力替康、羥基喜樹鹼或勒託替康；或(3)10-20％的UCN-1或Milefosine與10-20％的依力替康、羥基喜樹鹼或勒託替康的組合實施例15加工成緩釋劑的方法步驟與實施例1-14相同，但所不同的是所用的緩釋輔料為下列之一或其組合a)p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)；b)p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)與分子量峰值為10000-30000、30000-60000、60000-100000或100000-150000的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物(PLGA)的組合，其中，聚乙醇酸和羥基乙酸的比例為50-95∶50-50；c)p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)與分子量峰值為為10000-30000、30000-60000、60000-100000或100000-150000的聚乳酸(PLA)的組合；d)p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)與聚苯丙生的組合，其中聚苯丙生中對羧苯基丙烷(p-CPP)∶葵二酸(SA)為10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40；
e)p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)與雙脂肪酸與癸二酸共聚物(PFAD-SA)]、聚(芥酸二聚體-癸二酸)[P(EAD-SA)]、聚(富馬酸-癸二酸)[P(FA-SA)]、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、殼聚糖、泊洛沙姆、透明質酸、膠原蛋白、明膠或白蛋膠的組合。
實施例16.
加工成緩釋注射劑的方法步驟與實施例1-15相同，但所不同的是所用的助懸劑分別為下列之一或其組合a)0.5-3.0％羧甲基纖維素(鈉)；b)5-15％甘露醇；c)5-15％山梨醇；d)0.1-1.5％表面活性物質；e)0.1-0.5％吐溫20。
實施例17加工緩釋植入劑的方法步驟與實施例11、13相同，但所不同的是所含抗癌有效成分為(1)1-40％的喜樹鹼、羥基喜樹鹼、依力替康、勒託替康、依託泊甙、替尼泊甙、阿黴素、拓撲替康或表阿黴素；或(2)1-40％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼、六癸基磷酸膽鹼、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基3磷酸膽鹼、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼或1-O十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼；或(3)20-40％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼、六癸基磷酸膽鹼、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼或1-O十八基2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼與1-20％的喜樹鹼、羥基喜樹鹼、依力替康、勒託替康、依託泊甙、替尼泊甙、阿黴素、表阿黴素或拓撲替康的組合；或(4)1-20％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼、六癸基磷酸膽鹼、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼或1-O十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼與20-40％的羥基喜樹鹼、依力替康、勒託替康、阿黴素、表阿黴素或拓撲替康的組合。
實施例18比較不同緩釋輔料及其組合後的釋藥特徵(表5)加工緩釋植入劑的方法步驟與實施例11相同，比較不同緩釋輔料及其組合後的釋藥特徵。第一天藥物釋放量(體外)超過總量的20％為突釋。
表5
表中數據表明，PLA、PLGA(50/50)和聚苯丙生(20/80)等糖酐類高分子聚合物單獨應用時，藥物釋放較快，其中聚苯丙生的釋藥時間為8-10天且有明顯突釋。p(LAEG-EOP)和p(DAPG-EOP)等聚磷酸酯高分子聚合物釋藥較慢且平穩，和PLA、PLGA、聚苯丙生等糖酐類高分子聚合物合用時可減輕後者所引起的突釋，但其平穩緩慢的釋藥特性並沒受到太大影響。此意想不到的發現構成本發明的又一主要技術特徵。由於聚磷酸酯高分子聚合物價格昂貴，這將有利於降低緩釋製劑的成本，並提高其釋藥特性。
實施例19比較不同緩釋輔料及其組合後的釋藥特徵(表6)加工緩釋植入劑的方法步驟與實施例11相同，比較不同緩釋輔料及其組合後的釋藥特徵。第一天藥物釋放量(體外)超過總量的20％為突釋。
表6
表中數據表明，PLA、PLGA(50/50)和聚苯丙生(20/80)等糖酐類高分子聚合物單獨應用時，藥物釋放較快，其中聚苯丙生的釋藥時間為10-13天且有明顯突釋。p(LAEG-EOP)和p(DAPG-EOP)等聚磷酸酯高分子聚合物釋藥較慢且平穩，和PLA、PLGA、聚苯丙生等糖酐類高分子聚合物合用時可減輕後者所引起的突釋，但其平穩緩慢的釋藥特性並沒受到太大影響。此意想不到的發現構成本發明的又一主要技術特徵。由於聚磷酸酯高分子聚合物價格昂貴，這將有利於降低緩釋製劑的成本，並提高其釋藥特性。
這一釋放規律也見於對其他藥物組合，如拓撲替康與UCN-1的組合以及羥基喜樹鹼或依託泊甙與UCN-2的組合。
以上實施例僅用於說明，而並非局限本發明的應用。
本發明所公開和保護的內容見權利要求。
權利要求
1.一種含磷酸肌醇3-激酶抑制劑及拓撲酶抑制劑的抗癌組合物，其特徵在於抗癌組合物為緩釋注射劑，由以下成分組成(A)緩釋微球，包括抗癌有效成分0.5-70％緩釋輔料30-99％助懸劑 0.0-30％以上為重量百分比和(B)溶媒，為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。其中，抗癌有效成分為磷酸肌醇3-激酶抑制劑和/或拓撲酶抑制劑；緩釋輔料選自磷酸酯高分子聚合物或磷酸酯高分子聚合物與聚糖酐類高分子聚合物的混合或共聚物磷酸肌醇3-激酶抑制劑選自7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼、六癸基磷酸膽鹼、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼或1-O-十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼；助懸劑的黏度為100cp-3000cp(20℃-30℃時)，選自羧甲基纖維素鈉、碘甘油、二甲矽油、丙二醇、卡波姆、甘露醇、山梨醇、表面活性物質、土溫20、土溫40和土溫80之一或其組合。
2.根據權利要求1所述之抗癌組合物，其特徵在於拓撲酶抑制劑選自喜樹鹼、羥基喜樹鹼、勒託替康、拓撲替康、依力替康、米潑昔芬、拓撲替康、4-單羥基拓撲替康、可莫昔芬、雷洛昔芬、甾抗雌、抗癌甾烯酚、4-羥基拓撲替康、氟他米特、氨魯米特、吡魯米特、甲地孕酮、甲羥孕酮、氯米芬、阿黴素、來曲唑、拓撲替康、依西美坦或比卡魯胺。
3.根據權利要求1所述之抗癌組合物，其特徵在於抗癌緩釋注射劑的抗癌有效成分為(1)1-40％的喜樹鹼、羥基喜樹鹼、依力替康、勒託替康、依託泊甙、替尼泊甙、阿黴素、拓撲替康或表阿黴素；或(2)1-40％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼、六癸基磷酸膽鹼、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼或1-O-十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼；或(3)20-40％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼、六癸基磷酸膽鹼、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼或1-O-十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼與1-20％的喜樹鹼、羥基喜樹鹼、依力替康、勒託替康、依託泊甙、替尼泊甙、阿黴素、表阿黴素或拓撲替康的組合；或(4)1-20％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼、六癸基磷酸膽鹼、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼或1-O-十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼與20-40％的羥基喜樹鹼、依力替康、勒託替康、阿黴素、表阿黴素或拓撲替康的組合。以上均為重量百分比。緩釋輔料為下列之一或其組合a)p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)；b)p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)與分子量峰值為10000-30000、30000-60000、60000-100000或100000-150000的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物的組合，其中，聚乙醇酸和羥基乙酸的比例為50-95∶50-50；c)p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)與分子量峰值為為10000-30000、30000-60000、60000-100000或100000-150000的聚乳酸的組合；d)p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)與聚苯丙生的組合，其中聚苯丙生中對羧苯基丙烷∶葵二酸為10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40；e)p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)與雙脂肪酸與癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚體-癸二酸)、聚(富馬酸-癸二酸)、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、殼聚糖、泊洛沙姆、透明質酸、膠原蛋白、明膠或白蛋膠的組合。
4.根據權利要求1所述之抗癌緩釋注射劑，其特徵在於所用的助懸劑分別為下列之一或其組合a)0.5-3.0％羧甲基纖維素(鈉)；b)5-15％甘露醇；c)5-15％山梨醇；d)0.1-1.5％表面活性物質；e)0.1-0.5％吐溫20；或f)甘油、二甲矽油、丙二醇或卡波姆。
5.根據權利要求1所述之抗癌緩釋注射劑，其特徵在於所用的助懸劑為下列之一A)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+0.1-0.5％土溫80；B)5-20％甘露醇+0.1-0.5％土溫80；或C)0.5-5％羧甲基纖維素鈉+5-20％山梨醇+0.1-0.5％土溫80。
6.根據權利要求1所述之抗癌組合物為緩釋植入劑。
7.根據權利要求6所述之抗癌緩釋植入劑，其特徵在於抗癌有效成分為(1)1-40％的喜樹鹼、羥基喜樹鹼、依力替康、勒託替康、依託泊甙、替尼泊甙、阿黴素、拓撲替康或表阿黴素；或(2)1-40％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼、六癸基磷酸膽鹼、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼或1-O-十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼；或(3)20-40％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼、六癸基磷酸膽鹼、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽、1-O-六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼或1-O-十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼與1-20％的喜樹鹼、羥基喜樹鹼、依力替康、勒託替康、依託泊甙、替尼泊甙、阿黴素、表阿黴素或拓撲替康的組合；或(4)1-20％的7-氫氧基-星狀孢子素、7-O-烷基-星狀孢子素、β-甲氧星狀孢子素、烷基磷酸膽鹼、六癸基磷酸膽鹼、十八基-(1，1-二甲基-4-哌啶)磷酸鹽、1-O六癸基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼、1-O-十八基-2-O-甲基-rac-丙三基-3-磷酸膽鹼或1-O-十八基-2-O-甲基-sn-丙三基-3-磷酸膽鹼與20-40％的羥基喜樹鹼、依力替康、勒託替康、阿黴素、表阿黴素或拓撲替康的組合。緩釋輔料選自選自磷酸酯高分子聚合物或磷酸酯高分子聚合物與聚糖酐類高分子聚合物的混合或共聚物。
8.根據權利要求6所述之所述之抗癌緩釋植入劑，其特徵在於緩釋輔料選自下列之一a)p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)；b)p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)與分子量峰值為10000-30000、30000-60000、60000-100000或100000-150000的聚乙醇酸和羥基乙酸的共聚物的組合，其中，聚乙醇酸和羥基乙酸的比例為50-95∶50-50；c)p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)與分子量峰值為10000-30000、30000-60000、60000-100000或100000-150000的聚乳酸的組合；d)p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)與聚苯丙生的組合，其中聚苯丙生中對羧苯基丙烷∶葵二酸為10∶90、20∶80、30∶70、40∶60、50∶50或60∶40；e)p(BHET-EOP/TC)、p(BHET-EOP/TC)、p(LAEG-EOP)、p(DAPG-EOP)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(BHDPT-EOP/TC)、p(CHDM-HOP)或p(CHDM-EOP)與雙脂肪酸與癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚體-癸二酸)、聚(富馬酸-癸二酸)、木糖醇、低聚糖、軟骨素、甲殼素、殼聚糖、泊洛沙姆、透明質酸、膠原蛋白、明膠或白蛋膠的組合。
9.根據權利要求1所述之抗癌緩釋注射劑，其特徵在於抗癌緩釋注射劑中的有效成分用於製備治療起源於人及動物大腦、中樞神經系統、腎臟、肝、膽囊、頭頸部、口腔、甲狀腺、皮膚、黏膜、腺體、血管、骨組織、淋巴結、肺臟、食管、胃、乳腺、胰腺、眼睛、鼻咽部、子宮、卵巢、子宮內膜、子宮頸、前列腺、膀胱、結腸或直腸的原發或繼發的癌、肉瘤或癌肉瘤的藥物製劑。
10.根據權利要求1和6所述之抗癌緩釋注射劑和緩釋注射劑，其特徵在於抗癌緩釋劑經瘤內或瘤周注射或放置給藥，於體內緩釋40天以上。
全文摘要
一種含磷酸肌醇3－激酶抑制劑(PI3Ki)和/或拓撲酶抑制劑的抗癌組合物為緩釋注射劑，由緩釋微球和溶媒組成。其中緩釋微球由PI3Ki和/或拓撲酶抑制劑和緩釋輔料組成，溶媒為普通溶媒或含助懸劑的特殊溶媒。助懸劑的黏度為100cp－3000cp(20℃－30℃時)，選自羧甲基纖維素鈉等；緩釋輔料選自p(LAEG－EOP)、p(DAPG－EOP)、p(BHET－EOP/TC)、p(BHET－EOP/TC)、p(BHDPT－EOP/TC)、p(BHDPT－EOP/TC)、p(CHDM－HOP)或p(CHDM－EOP)等聚磷酸酯共聚物或聚磷酸酯與聚乳酸、聚苯丙生、雙脂肪酸與癸二酸共聚物、聚(芥酸二聚體－癸二酸)或聚(富馬酸－癸二酸)的共聚或共混物；抗癌組合物還製成緩釋植入劑，瘤內或瘤周注射或放置可維持有效藥物濃度達40天以上，還能夠明顯降低藥物的全身反應，並選擇性地增強放化療等非手術療法的治療效果。
文檔編號A61K45/06GK101019830SQ20071020032
公開日2007年8月22日 申請日期2007年3月23日 優先權日2007年3月23日
發明者孫娟, 劉玉燕, 孔慶新 申請人:濟南帥華醫藥科技有限公司