竹葉黃酮凍乾粉針，製備方法及其應用的製作方法

2023-05-26 05:52:21 4

專利名稱：竹葉黃酮凍乾粉針，製備方法及其應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種中藥凍乾粉針，製備方法及其應用，具體地說是從竹葉中提取的竹葉黃酮凍乾粉針、製備方法及其在製藥中的新應用。
背景技術：
竹葉黃酮是由竹葉經提取後得到的提取產物，所指的竹葉是指禾本科禾亞科植物淡竹的葉，竹葉以剛竹屬竹子的竹葉為佳，如毛金竹、桂竹、毛竹、哺雞竹、早園竹、高節竹、紫竹、斑竹等。竹子是多年生常綠植物，竹葉一年四季可採，但以秋冬季(9～12月)採收最佳，竹子是一種大眾化的藥食兩用植物，我國竹葉資源非常豐富。
中國專利《從竹葉中提取黃酮類化合物浸膏或粉劑的生產方法》(專利號98104564，2001年5月23日授權)公開了從竹葉中提取竹葉黃酮的方法，在此申請中還公開了竹葉黃酮具有優良的抗自由基、抗氧化、抗衰老活性等藥用活性。目前市場上的竹葉黃酮製品只有膠囊劑(竹康寧，由浙江安吉聖氏生物製品有限公司生產)在銷售，用於調節血脂、並證明其對抵制體重增加，降低甘油三脂有效。
眾所周知，膠囊劑口服後需經胃腸吸收後起效，起效時間長，吸收不完全，不能用於急症治療；而水針劑的生產設備比較簡單，由於中藥成分複雜，藥液中數種成分共存，在水劑中藥品質量難免不大穩定，且存放時間長久容易出現沉澱，容易氧化，顏色改變，PH值下降等，從而影響療效，常常會造成一些醫療事故。

發明內容
本發明的目的在於解決中藥注射劑在儲存中常常出現的溶液顏色改變、澄明度和PH發生變化，以及藥物質量不穩定等問題；提供了一種靜脈直接給藥、藥物作用迅速、療效快捷的藥物劑型；同時提供了一種可在工業上大批量生產的製備工藝。
本發明公開了一種竹葉黃酮凍乾粉針，包括以下組分作為活性成分的竹葉黃酮原料25～95％，針用填充劑5～72％，水分小於5％，以上各個組分以重量計；其中竹葉黃酮以90％為佳。
本發明提供的竹葉黃酮凍乾粉針，選用的針用填充劑為甘露醇、乳糖、葡聚糖、肌醇和葡萄糖，優選甘露醇作為針用填充劑。
本發明還提供了一種製備竹葉黃酮凍乾粉針的方法，包括以下步驟a)原料精製；b)注射用水調PH至6.0～12.0；c)加入已精製的原料；d)攪拌加熱，溶解；e)加入針用填充劑；f)除熱源；g)過濾，無菌灌裝；h)凍幹。
本發明提供的製備方法，其中步驟a為將竹葉黃酮粗提物用60～80％藥用乙醇在45～65℃下水浴溶解攪勻，減壓濃縮成粘稠液體或浸膏，真空乾燥，得粉末；無菌粉碎至100目以上；其中步驟c的竹葉黃酮的濃度(質量計)為0.5～5.5％，以1.0～2.5％為佳；其中步驟d加熱溫度為30～70℃，時間10～60分鐘；其中步驟f為加入0.05～1.0％(體積比)針用活性炭吸附；步驟f還可用膜分離方法除去熱源，選用截留分子量為5000～20000的膜，可以是中空纖維膜或卷式膜，材質可以是醋酸纖維素、聚醚類、聚碸醯胺或聚丙烯腈高分子材料，優選內壓式中空纖維膜組件；步驟g為孔徑0.2微米的微孔濾膜過濾；步驟h為低溫凍幹。
以下詳細說明本發明的製備方法原料精製由於竹葉黃酮粗製品是從竹葉中提取的，往往會攜帶、滋生和染上一些細菌和蟎蟲，作為注射用藥用原料，必須除菌去蟲。為了達到這一目的，可使用60～80％藥用乙醇及結合微波技術處理達到理想的效果。將竹葉黃酮粗製品，用60～80％藥用乙醇3～10倍(重量體積比)溶解，攪勻，在熱水中水浴稍微加熱，然後減壓濃縮成粘稠液體或浸膏，在微波真空乾燥設備內進行微波真空乾燥，溫度≤60℃，得到疏鬆狀乾燥的金黃色竹葉黃酮顆粒，並在無菌條件下粉碎成細粉，細度達到100目以上，得到竹葉黃酮凍乾粉針的原料(標定含有大於25％的竹葉黃酮甙)，裝入乾燥經滅菌處理的玻璃容器內並密封。
凍乾粉針的製備方法為竹葉黃酮在鹼性條件下溶解性很好，不用加其他助溶劑。在注射用水內加入分析純氫氧化鈉的配製的溶液，調PH至6.0～12.0，如過於鹼性，對玻璃瓶有腐蝕影響，對竹葉黃酮有效成分結構有影響，並會對膜材料有影響，這時可加稀鹽酸中和調節PH在此範圍之內。稱取適量竹葉黃酮凍乾粉針原料加入，使配成的溶液濃度在0.5～5.5％之間，以1.0～2.5％為最佳。攪拌加熱，加熱溫度為30～60℃，時間為10～60分鐘，使之全部溶解；加入常用針用填充劑，如甘露醇、乳糖和葡萄糖，但以甘露醇為佳。加入溶液重量0.05～1.0％針用活性炭，在30～70℃的溫度下邊加熱邊攪拌10～60分鐘，加注射用水至全量，採用活性炭來吸附熱原是有效的方法，但活性炭對竹葉黃酮有吸附作用，因此要控制一定的比例，量過低吸附熱原達不到要求，量過高對竹葉黃酮吸附過高，經多次試驗，活性炭的使用量控制在0.05～1.0％比較合適。此外還有一種行之有效的除熱源的方法用膜分離方法除去熱原，採用超濾技術是除去熱原的有效方法，在常溫條件下，依靠一定的壓力和流速，迫使小分子物質竹葉黃酮透過膜孔，而高分子物質熱原被截留，實現分離。選用截留分子量為5000～20000的膜，可以是中空纖維膜或卷式膜，材質可以是醋酸纖維素、聚醚類、聚碸醯胺或聚丙烯腈高分子材料，優選內壓式中空纖維膜組件，設備及管道要先進行除熱源處理，竹葉黃酮在膜分離透出液中，而熱原被截留分離。然後用孔徑為0.2微米的微孔濾膜過濾，除去細菌及微小顆粒，濾液在無菌條件下灌裝於10毫升瓶中，每支裝量為2.0～2.5毫升後在真空冷凍乾燥機真空凍幹，壓蓋，貼籤，即得到竹葉黃酮凍乾粉針。
用本發明所公開的製備工藝的有益效果體現在1、竹葉黃酮凍乾粉針穩定性好，質量穩定，其PH值、顏色、澄明度不發生改變，便於保管、存放和運輸；2、竹葉黃酮凍乾粉針採用單味傳統藥材竹葉，其資源豐富，採摘時間基本不受限制，為純天然的綠色植物，且處理過程避免了有機溶劑及其他有害物質的殘留，保證了該藥物的安全性；3、竹葉黃酮凍乾粉針其注射用原料處理技術先進併合理，組方精簡，除熱原的方法既可選用常規的的技術，適於小規模的樣品試製，除熱原也可選用現代先進的膜分離技術，適於較大規模的生產；4、竹葉黃酮凍乾粉針的有效成分純度高，療效確切，適於靜脈給藥；5、竹葉黃酮凍乾粉針的製備方法對生產設施要求較高，適於規模化生產。
本發明還公開了竹葉黃酮凍乾粉針的新用途，即在製藥中的新應用。
實際上，本發明公開了竹葉黃酮凍乾粉針在製備增加冠脈流量的藥物中的應用。
還公開了竹葉黃酮凍乾粉針在製備改善心肌缺血的藥物中的應用。
還公開了竹葉黃酮凍乾粉針在製備降低血小板聚集的藥物中的應用。
還公開了竹葉黃酮凍乾粉針在製備治療心肌梗塞的藥物中的應用為了更好地理解本發明，下面將以竹葉黃酮凍乾粉針的藥理試驗及結果來說明其在製藥領域中的新用途。
據《天然功能性竹葉提取物--竹葉黃酮》(發表於《中國食品添加劑》，2002年第3期)報導，經試驗證明竹葉黃酮無毒，無致突變作用。
由瀋陽藥科大學對竹葉黃酮凍乾粉針進行了動物試驗，發現竹葉黃酮凍乾粉針具有擴張冠脈流量，降低血小板聚集，改善心肌缺血，對抗心肌梗塞和腦缺血等治療作用，效果比較明顯。藥理藥效試驗的結果如下1.竹葉黃酮凍乾粉針對豚鼠離體心臟冠脈流量的影響取豚鼠25隻，分為5組，每組5隻，雌雄兼用，體重300-400g。擊頭致昏，迅速取心臟，在4攝氏度任洛氏液中清洗，排除積血。將主動脈套入灌流裝置的套管上，並結紮固定。用蛙心夾將張力換能器與心尖部連接，再輸入MS-302中。以純氧飽和的任洛氏液(Ringer-Locke’s)恆速灌流，灌注壓差50-80cm水柱。灌流10min後，測定連續3min的每分冠脈流量，以其平均值作為藥前值。加藥後，記錄1-3min的每分冠脈流量，取極值，作為藥後值，比較前後變化。對照組給注射用水0.5ml，其他各組分別給竹葉黃酮凍乾粉針(折算成竹葉黃酮)為2.5、5、10mg/ml，陽性對照藥給複方丹參注射液0.5g/ml。
實驗結果用t檢驗進行處理，其顯示不同劑量的竹葉黃酮凍乾粉針均可增加離體豚鼠心臟的冠脈流量，組間及自身t檢驗均有顯著性差異，而且與劑量正相關，結果見表1。中、高劑量的竹葉黃酮凍乾粉針均能增加心肌收縮力，組間及自身t檢驗均有顯著性差異，低劑量的竹葉黃酮凍乾粉針增加心肌收縮力，組間t檢驗有顯著性差異，結果見表2。
表1 竹葉黃酮凍乾粉針對離體豚鼠心臟冠脈流量的影響(X±SD，n＝5)劑量 給藥前均值 給藥後均值 差值(ml) 變化率(％)(ml/min) (ml)溶劑對照- 4.4±0.664.8±0.85 0.4±0.19 9.0±2.24丹參0.5g/ml4.4±1.266.9±0.74##2.5±0.52 52.2±13.8***竹葉黃酮2.5mg/ml 4.1±1.486.5±0.85#2.3±0.58 58.5±18.1**竹葉黃酮5mg/ml 4.2±1.547.8±1.12##3.7±0.65 85.7±8.08***竹葉黃酮10mg/ml4.5±1.4810.2±1.78###6.7±1.47 126.6±15.1*****，***，與溶劑對照比較，p＜0.01，p＜0.001；#，##，###，自身比較，p＜0.05，p＜0.01，p＜0.001
表2 竹葉黃酮凍乾粉針對離體豚鼠心臟心肌收縮力的影響(X±SD，n＝5) **，***，與溶劑對照比較，p＜0.01，p＜0.001；#，##，自身比較，p＜0.05，p＜0.01，上述結果說明竹葉黃酮凍乾粉針有擴張冠脈流量的作用。
2.竹葉黃酮凍乾粉針對垂體後葉素所致大鼠心肌缺血的影響取大鼠50隻，雌雄兼用，體重180-220g。隨機分成5組分為注射用水組、竹葉黃酮凍乾粉針低、中、高3個劑量組，複方丹參注射液陽性對照組。分別靜脈給予注射用水、竹葉黃酮凍乾粉針(折算成竹葉黃酮)1.5g/kg、4.5mg/kg和1.35mg/kg以及複方丹參注射液0.8g/kg。靜脈給藥20min後，烏拉坦1g/kg腹腔注射，麻醉30min，固定，記錄正常II導聯心電圖後，舌靜脈注射垂體後葉素0.8單位/kg，10sec注完。分別記錄0、15、30、60秒、3、8分的II導聯心電圖，觀察各期心電圖變化，比較給予垂體後葉素前後T波高度的變化，進行組間t檢驗。
0.3g/kg、0.6g/kg、1.2g/kg三個劑量竹葉黃酮凍乾粉針(以竹葉黃酮計)經連續給藥後均可不同程度的對抗垂體後葉素(pit)所致大鼠心肌缺血損傷(T波變化)，其中竹葉黃酮0.3g/kg可以對抗15sec、30sec時pit所致T波變化(與模型組比較，p＜0.05)；竹葉黃酮0.6g/kg可以對抗15sec、30sec、3min時pit所致T波變化(與模型組比較，p＜0.05)；竹葉黃酮1.2g/kg可以對抗15sec、30sec、60sec、3min時pit所致T波變化(與模型組比較，p＜0.05，p＜0.01或p＜0.001)，作用與模型組比較有明顯差異，結果見表3。
3.竹葉黃酮凍乾粉針對家兔血小板聚集的影響體外給藥對花生四烯酸誘導的家兔血小板聚集的功能的影響取大耳白家兔8隻，雌雄各半。耳緣靜脈取血3ml，置事先放有枸櫞酸鈉溶液(抗凝劑，血與抗凝劑比例9∶1)的塑料管中，將血液與抗凝劑輕輕混勻，離心(800rpm)3分鐘，吸出上層米黃色懸液為PRP(富血小板血漿)。然後再離心(2000rpm)10分鐘，吸出上清液為PPP(貧血小板血漿)備用。竹葉黃酮凍乾粉針用注射用水配製，用等比稀釋法配成2.5mg/ml、5mg/ml、10mg/ml的藥液。取PRP200ul加20ul的待測藥物(對照用同體積的注射用水)，於37℃預溫10分鐘，用PPP加20ul的相應的藥液或對照液調節器透光度為100％，再在攪拌作用下加入50ul的誘導劑花生四烯酸，測定10分鐘內藥物對花生四烯酸(2mg/ml)誘導血小板聚集的影響。
體內給藥對花生四烯酸誘導的家兔血小板聚集的功能的影響取大耳白家兔40隻，雌雄各半，隨機分為5組，每組8隻，分別為空白對照組，竹葉黃酮凍乾粉針低中高三個劑量組及複方丹參注射液組。分別靜脈給藥，注射用水，竹葉黃酮凍乾粉針(折算成竹葉黃酮)0.1g、0.2g、0.4g/kg及複方丹參注射液0.5g/kg。給藥20min後耳緣靜脈取血3ml，置事先放有枸櫞酸鈉溶液(抗凝劑，血與抗凝劑比例9∶1)的塑料管中，將血液與抗凝劑輕輕混勻，離心(800rpm)3分鐘，吸出上層米黃色懸液為PRP(富血小板血漿)。然後再離心(2000rpm)10分鐘，吸出上清液為PPP(貧血小板血漿)。測定藥物對花生四烯酸(2mg/ml)誘導血小板聚集的影響。
由表4及5可以看出無論是體內或是體外，竹葉黃酮凍乾粉針均具有明顯的抗家兔血小板聚集的作用，與陰性對照組比較差異顯著，其中在體內抗血小板聚集實驗中，中劑量及高劑量組的抗血小板聚集作用強於複方丹參片組。
表3 竹葉黃酮凍乾粉針對垂體後葉素所致大鼠心肌缺血損傷的影響(T波變化，X±SD，n＝10)組別 劑 給pit後T波變化(ΔT波，mV)量(g/ 給pit前T波 0sec 15sec 30sec 60sec 3minkg)模型組-0.276±0.086 ΔT波(mV)0.038±0.031 0.104±0.0360.176±0.1150.086±0.0470.128±0.089變化率(％) 17.72±19.82 41.56±13.5684.35±30.0439.20±23.4457.93±16.98丹參組0.5 0.366±0.123 ΔT波(mV)0.056±0.028 0.055±0.0340.043±0.030*0.037±0.0280.037±0.023變化率(％) 21.83±10.42 18.39±14.66*13.67±13.95*11.23±7.58 9.28±3.17**低劑量0.3 0.287±0.017 ΔT波(mV)0.047±0.038 0.057±0.0320.040±0.0520.057±0.0610.07±0.082變化率(％) 7.06±5.392 17.45±9.68*21.45±23.61*26.45±31.4824.58±27.53中劑量0.6 0.256±0.045 ΔT波(mV)0.033±0.049 0.053±0.0400.073±0.1020.053±0.0610.056±0.030變化率(％) 17.20±22.21 21.15±9.90*19.87±22.22*25.96±27.5725.71±15.11*高劑量1.2 0.355±0.094 ΔT波(mV)0.020±0.018 0.012±0.009***0.032±0.009*0.017±0.009*0.037±0.020變化率(％) 7.055±5.583*4.17±1.07***10.07±1.400**5.34±2.98*12.70±2.04***，**，***，與模型組比較，p＜0.05，p＜0.01，P＜0.001
表4 竹葉黃酮凍乾粉針對家兔體外血小板聚集的影響(X±SD，n＝8)組別劑量(mg/kg)動物數 血小板聚集率(％) 抑制率(％)對照組 -- 836.36±6.65 --低劑量組2.5821.91±2.05* 39.74中劑量組5 817.13±3.25* 52.88高劑量組10 810.97±4.70** 69.82*，**，與模型組比較，p＜0.05，p＜0.01表5 竹葉黃酮凍乾粉針對家兔半體內血小板聚集的影響(X±SD，n＝8)組別劑量(g/kg)動物數血小板聚集率(％)抑制率(％)對照組 --8 51.17±4.96 --低劑量組0.1 8 38.63±2.65** 24.51中劑量組0.2 8 31.66±2.64*** 38.13高劑量組0.4 8 27.27±4.85*** 46.57複方丹參0.1 8 35.67±6.67** 30.30與空白對照比較*P＜0.05；**P＜0.01 ***P＜0.0014.竹葉黃酮凍乾粉針對大鼠急性心肌梗塞的影響取大鼠50隻(360-400g)隨機分為偽手術組，缺血對照組，複方丹參對照組，竹葉黃酮凍乾粉針(折算成竹葉黃酮)低、中、高劑量組。術前24小時及30分鐘各靜脈注射一次藥物(竹葉黃酮50mg/kg、150mg/kg和450mg/kg及複方丹參0.8g/ml)，偽手術組和缺血對照組給予等量的注射用水，按FIEDLER法造成大鼠實驗性心肌梗塞模型。大鼠以烏拉坦(0.8g/kg，ip)淺麻醉，在自主呼吸情況下，於左胸前縱行切開皮膚2釐米左右，分離筋膜及肌層，於心尖搏動明顯處上方剪斷一根肋骨，輕壓右側胸廓擠出心臟，在左心耳根部下方2毫米處結紮冠脈左室支，迅速將心臟送回胸腔，使其恢復自主呼吸。術後給予適量青黴素以防感染。術前及術後24小時記錄ECG(II)，監測心肌缺血的情況。結紮24小時後，取心臟洗淨血液，剔除心房，沿房室溝切成4片，加入0.05％的N-BT液中染色15分鐘，將未著色的梗塞心肌切下，稱重，計算梗塞區佔心室肌總重量的百分比。
由表6中可以看出，結紮大鼠冠脈左前降支能使ST明顯抬高，和偽試組相比有顯著差異；而陽性藥組的ST抬高值低於缺血對照組(p＜0.05)；竹葉黃酮的中劑量和高劑量組的ST抬高值明顯低於缺血對照組(p＜0.05，p＜0.01)。從表7中可以看出竹葉黃酮凍乾粉針的中、高劑量能顯著對抗大鼠冠脈結紮引起的心肌梗塞，縮小心肌梗塞面積(p＜0.05，p＜0.01)，並呈劑量依賴性。
表6 竹葉黃酮凍乾粉針對缺血心肌ECG S-T的影響(X±SD，n＝8)組別劑量(mg/kg)動物數目(只) S-T段抬高(mv)偽試組 ----- 80.060±0.045*缺血對照組 ------ 80.335±0.122複方丹參25080.143±0.060*低劑量 50 80.255±0.171中劑量 15080.121±0.042*高劑量 45080.097±0.015**與缺血對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01表7 竹葉黃酮凍乾粉針對大鼠實驗性心肌梗塞範圍的影響(X±SD，n＝8)組別劑量(mg/kg)動物數(只)心室肌重(g)梗塞心肌重(g)心梗率(％)偽試組 ----- 8 0.86±0.04 0.04±0.01 5.3±2.0*缺血對照組 ------ 8 1.11±0.13 0.48±0.13 42.9±8.1複方丹參2508 0.88±0.02 0.10±0.02 10.3±3.1*低劑量 50 8 0.91±0.21 0.37±0.10 36.2±9.5中劑量 1508 0.82±0.02 0.20±0.04 26.0±4.9*高劑量 4508 0.99±0.22 0.26±0.07 26.7±2.8**與缺血對照組比較*P＜0.05，**P＜0.015.小鼠急性腦缺血實驗取小鼠(20±2g)50隻，隨機分成5組，每組10隻，雌雄各半，分為注射用水組、竹葉黃酮凍乾粉針低、中、高3個劑量組，尼莫通陽性對照組。分別靜脈給予注射用水、竹葉黃酮(折算成竹葉黃酮)1.5g/kg、4.5mg/kg和1.35mg/kg以及尼莫通40ug/kg。給藥20min後迅速從小鼠雙耳後頸部斷頭，依雙盲法觀察小鼠喘氣時間。
由表8中可以看出不同劑量均能明顯延長小白鼠斷頭腦缺血生存時間，與對照組比較差異顯著。
表8 對小白鼠斷頭腦缺血生存時間的影響(X±SD，n＝10)組別 劑量(g/kg)動物數目喘息時間(s) 延長率(％)對照組- 10 20±2.1 -尼莫通40ug/kg 10 24.2±1.3** 21％低劑量0.15 10 23.4±4.6* 17％中劑量0.45 10 25.4±1.6** 27％高劑量1.35 10 25.4±2.2*** 29.1％與空白對照比較*P＜0.05；**P＜0.01 ***P＜0.001從以上結果可以得出本發明所公開的新應用的優點在於
1.本發明對已知化合物竹葉黃酮發掘了新的醫療用途，開拓了一個新的應用領域。
2.本發明的竹葉黃酮凍乾粉針安全無毒，藥理作用強，預示著很好的藥用前景；3.本發明的物質原料來源豐富，價廉，沒有發現有毒副作用，製備工藝簡單，並可做成口服劑型，注射劑、片劑等，使用方便。
具體實施例方式
為了更好地理解本發明，現給出製備竹葉黃酮凍乾粉針實施例。
實施例1一.竹葉黃酮凍乾粉針原料的精製稱取100克竹葉黃酮粗製品，用70％藥用乙醇500毫升(5倍重量體積比)，在約46℃水浴加熱15分鐘溶解，攪勻，然後在真空度為-0.1MPa，加熱溫度50℃減壓濃縮，得到粘稠液體，置於微波真空乾燥設備內進行微波真空乾燥，溫度控制在55℃之內，經20分鐘，就得到疏鬆狀乾燥的金黃色竹葉黃酮粉末。對小型的粉碎機表面無菌處理，將竹葉黃酮粉末粉碎成細粉，細度達到100目，得到注射用竹葉黃酮凍乾粉針的原料95克，裝入乾燥經滅菌處理的玻璃容器內並密封包裝。
二、竹葉黃酮凍乾粉針的製備方法用分析純的氫氧化鈉和注射用水配製1.0％的水溶液，取少量加入150毫升的注射用水內，調PH至6.7，稱取3.7克注射用竹葉黃酮凍乾粉針的原料粉(標定含有大於25％的竹葉黃酮甙)，加入，攪拌加熱至35℃，55分鐘，使之全部溶解，加入0.5克甘露醇，加注射用水至全量2 00毫升，配成的溶液濃度為1.5％，加入0.8克的針用活性炭，在52℃的溫度下邊加熱邊攪拌30分鐘，減壓過濾，再用孔徑為0.2微米的微孔濾膜過濾，檢測含量和熱源等合格後，濾液在無菌條件下灌裝於10毫升瓶中，每支裝量為2.1毫升。後在真空冷凍乾燥機真空凍幹，壓蓋，貼籤，得到竹葉黃酮凍乾粉針，相當於每瓶含竹葉黃酮30毫克。
實施例2一.竹葉黃酮凍乾粉針原料的精製稱取100克竹葉黃酮粗製品，用75％藥用乙醇700毫升(7倍重量體積比)，在約52℃水浴加熱15分鐘溶解，攪勻，然後在真空度為-0.095MPa，加熱溫度55℃減壓濃縮，得到粘稠浸膏，置於微波真空乾燥設備內進行微波真空乾燥，溫度控制在52℃之內，經20分鐘，就得到疏鬆狀乾燥的金黃色竹葉黃酮粉末。對小型的粉碎機表面無菌處理，將竹葉黃酮粉末粉碎成細粉，細度達到120目，得到注射用竹葉黃酮凍乾粉針的原料93克，裝入乾燥經滅菌處理的玻璃容器內並密封包裝。
二、竹葉黃酮凍乾粉針的製備方法稱取注射用的竹葉黃酮凍乾粉針原料150克(標定含有大於25％的竹葉黃酮甙)，加入注射用水9000毫升，用分析純的氫氧化鈉和注射用水配製2.0％的水溶液滴加，調PH至11.3，攪拌加熱至55℃，15分鐘，使之全部溶解，加入溶液重量3％的針用填充劑乳糖，加入注射用水至全量10000毫升，配好的溶液備用。在無菌空氣淨化室(10000級)內，選用截留分子量為5000內壓式中空纖維膜分離設備，設備管道及各個死角用1％的氫氧化鈉和1％的鹽酸循環處理以及用大量的純水、注射用水反覆正洗、反洗，進行除熱源處理，然後進行竹葉黃酮溶液膜分離，竹葉黃酮在膜分離透過液中，而熱原被截留分離。膜透過液檢查合格後，然後用孔徑為0.2微米的微孔濾膜過濾，在無菌條件下(100級)將竹葉黃酮灌裝於10毫升瓶中，每支裝量為2.2毫升。後在真空冷凍乾燥機真空凍幹，壓蓋，貼籤，即得到竹葉黃酮凍乾粉針，相當於每瓶含竹葉黃酮大約30毫克。
權利要求
1.一種竹葉黃酮凍乾粉針，包括以下組分作為活性成分的竹葉黃酮25～95％，針用填充劑5～72％，水分小於5％，以上各個組分以重量計。
2.根據權利要求1所述的竹葉黃酮凍乾粉針，其特徵是所述的針用填充劑為甘露醇、乳糖、葡聚糖、肌醇和葡萄糖。
3.根據權利要求1，2所述的竹葉黃酮凍乾粉針，其特徵是所述的針用填充劑為甘露醇。
4.一種製備竹葉黃酮凍乾粉針的方法，包括以下步驟a)原料精製；b)注射用水調PH至6.0～12.0；c)加入已精製的原料；d)攪拌加熱，溶解；e)加入針用填充劑；f)過濾，除熱源，無菌灌裝；g)凍幹
5.根據權利要求4所述的製備方法，其中步驟a所述的精製為將竹葉黃酮粗提物用60～80％藥用乙醇在45～65℃下水浴，溶解攪勻，減壓濃縮成粘稠液體或浸膏，真空乾燥，得粉末；無菌粉碎至100目以上。
6.據權利要求4所述的製備方法，其中步驟d所述的加熱溫度為30～70℃，時間為10～60分鐘。
7.根據權利要求4所述的製備方法，其中步驟f所述的過濾為加入0.05～1.0％針用活性炭吸附；其中步驟f所述的除熱源為採用孔徑為0.2微米的微孔濾膜過濾。
8.竹葉黃酮凍乾粉針在製備增加冠脈流量的藥物中的應用。
9.竹葉黃酮凍乾粉針在製備改善心肌缺血的藥物中的應用。
10.竹葉黃酮凍乾粉針在製備降低血小板聚集的藥物中的應用。
11.竹葉黃酮凍乾粉針在製備治療心肌梗塞的藥物中的應用。
全文摘要
本發明公開了一種竹葉黃酮凍乾粉針，旨在提供一種吸收快、質量穩定的新劑型。它含有以重量計25～95％的竹葉黃酮，5～72％的針用填充劑，水分小於5％。本發明還公開了一種製備竹葉黃酮凍乾粉針的方法，本方法適宜於大規模的工業化大生產。本發明還公開竹葉黃酮凍乾粉針具有擴張冠脈流量，改善心肌缺血，降低血小板聚集，對抗心肌梗塞，改善腦缺血等功能。
文檔編號A61K31/7042GK1517097SQ0310117
公開日2004年8月4日 申請日期2003年1月15日 優先權日2003年1月15日
發明者潘福生, 王新華, 方國林, 金海光 申請人:杭州華東醫藥集團生物工程研究所有限公司, 杭州華東醫藥集團生物工程研究所有限