韌革菌素及其製備方法和在藥物上的應用的製作方法

2023-05-31 02:03:41 2

專利名稱：韌革菌素及其製備方法和在藥物上的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及韌革菌素(vibralactone)，其製備方法，以該化合物為活性成分的藥物組合物，以及該化合物在製備治療和預防高血脂症、糖尿病以及肥胖症的藥物方面的應用。
背景技術：
脂代謝通常維持著人體內脂的合成和降解的平衡。此平衡一旦被打破，即發生高血脂症，並引起動脈硬化、高血壓、糖尿病等。脂代謝調節劑可用來控制這些紊亂。非胰島素依賴型糖尿病(non-insulin-dependentdiabetes mellitus，NIDDM)脂解的抑制可降低血糖。在脂肪作為能量的起始階段是甘油三酯的脂肪酶催化水解，甘油三酯的水解導致血液中甘油和脂肪酸水平的提高。脂肪酶抑制劑可以降低血液中的脂肪酸和糖的水平。肥胖和高膽固醇是由於食物中過高的脂肪攝入。飲食中甘油三酯吸收的關鍵酶是胰脂肪酶(pancreatic lipase)，抑制胰脂肪酶可導致脂肪吸收的抑制。
迄今，現有技術中沒有含有式(I)化合物韌革菌素(vibralactone)作為有效成分在治療高血脂症、糖尿病以及肥胖症方面的報導。

發明內容
本發明的目的在於提供一種新的具有藥用價值的韌革菌素(vihralactone)。
本發明的另一目的是提供一種從韌革菌(Boreostereum vibrans)發酵液中提取本發明化合物的方法。
本發明的進一步目的是提供一種以式(I)化合物為活性成分的用於治療和預防高血脂症、糖尿病以及肥胖症的藥物組合物，及該化合物和組合物在製備治療和預防高血脂症、糖尿病以及肥胖症的藥物方面的應用。
為了實現上述目的，本發明提供了如下技術方案用於治療和預防高血脂症、糖尿病以及肥胖症的藥物，其中含有治療和預防高血脂症、糖尿病以及肥胖症有效量的式(I)化合物(包括立體異構體和互變異構體)及可藥用載體和/或賦形劑。
本發明化合物韌革菌素(vibralactone)可以轉化藥學上可接受的鹽和衍生物，如酯、醚和其它衍生物。酯和醚的形成可採用文獻中的方法(用羧酸或胺基酸，胺基酸中的氨基可以保護，酯化後去保護；酯化可在脫水劑DCC存在下進行)。雙鍵可以採用文獻方法還原，也可用OsO4進行羥基化，或氫滷化。還可以通過雙鍵的環氧化以及環外雙鍵氧化成醛、酸或醇引入新的功能基，進一步通過Wittig反應引入4～10個碳的鏈，引入的鏈中可攜帶OR1(R＝H或1～4個碳的烷基)，NR2R3(R2R3＝H或1～4個碳的烷基)，或F，Cl，Br，I等。
本發明化合物用作藥物上時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。該藥物組合物含有0.1～99％，優選為0.5～90％的本發明化合物，其餘為藥物學上可接受的鹽，或對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
所述的藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料以及藥物製品輔劑。將所述的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發明的藥物可經口服和注射(靜注、肌注)兩種形式給藥。
口服可用其固體或液體製劑，如粉劑、片劑、糖衣劑、膠囊、溶液、糖漿、滴丸劑等。
注射可用其固體或液體製劑，如粉針劑、溶液形注射劑等。
為了更好地理解本發明的實質，下面將用本發明的式(I)化合物與藥物載體或賦形劑組成的藥物的生物活性結果來說明它在醫藥領域中的應用。
胰脂肪酶活性檢測胰脂肪酶活性檢測採用4-methylumbelliferyl oleate(4-MU oleate)作為底物。25μl DMSO樣品液，50μl 0.1mM 4-MU溶液(用緩衝液配製而成13mM Tris-HCl，150mM NaCl，1.3mM CaCl2，pH 8.0)在96孔微板上混合，加入25μl脂肪酶溶液(50U/ml，用緩衝液配製而成13mM Tris-HCl，150mM NaCl，1.3mM CaCl2，pH 8.0)。25℃孵化30分鐘，加入0.1ml 0.1M檸檬酸鈉溶液阻斷反應，用螢光酶標儀讀脂肪酸酶釋放出的4-methylumbelliferone(激發波長355nm，發射波長460nm)。韌革菌素(vibralactone)的脂肪酶抑制活性IC50為0.4μg/ml。
具體實施例方式
下面結合實施例進一步對本發明的實質內容進行說明，但本發明的內容並不局限於此。
實施例1B.vibrans新鮮子實體2005年8月採於中國雲南省哀牢山，標本藏於中國科學院昆明植物研究所。培養基組成potato(peel off)200g，glucose20g，KH2PO43g，MgSO41.5g，citric acid 0.1g，thiamin hydrochloride 10mg，溶於1升無菌水中。棕色試劑瓶(大小500ml；培養基體積300ml)。pH調至6.5，滅菌，22℃，140rpm搖床上培養2周。過濾，除去菌絲，濾液(12生)用醋酸乙酯萃取2次，萃取物1.75克進行矽膠柱層析，用CHCl3/MeOH梯度洗脫。在CHCl3-MeOH(98∶2)洗脫段得一組分。該組分進一步進行矽膠柱層析(石油醚-醋酸乙酯8∶1洗脫)和Sephadex LH-20柱層析(CHCl3/MeOH 1∶1)得韌革菌素(vibralactone)純品65mg。
該方法分離出的化合物韌革菌素(vibralactone)其化學結構式為
韌革菌素(vibralactone)的結構是基於它的質譜和核磁共振等波譜數據以及計算而確定。
紅外光譜數據IR vKBrmaxcm-13423(OH)，2971，2915，2860，1816(β-lactone)，1112，1000，836.
質譜數據MS(ESI+)m/z(％)231(100)[M+Na]+，439(85)[2M+Na]+；HR-ESI-MSm/zcalc.for C12H16O3Na[M+Na]+231.1004；found231.0997.
有關核磁共振數據見表1。
該化合物的立體構型通過旋光和13C NMR化學位移計算決定(表2和表3)。計算值和實測值非常符合。
Table 1NMR spectral data for vibralactone(3)in CDCl3.

*Weak but significant allyl long-range correlations.

Table 2The computed energy，optical rotation and13C NMR data for cis-isomer(1R，5S)-1 a to f.


Table 3The computed energy，optical rotation and13C NMR data for cis-isomer(1S，5R)-1 a to f.

實施例2按實施例1製得化合物，按化合物晶體與賦形劑重量比1∶1的比例加入賦形劑，制粒壓片。
實施例3按實施例1製得化合物韌革菌素(vibralactone)，按常規膠囊製劑方法製成膠囊。
實施例4
按實施例1製得化合物韌革菌素(vibralactone)，按化合物晶體與賦形劑重量比1∶2的比例加入賦形劑，制粒壓片。
實施例5按實施例1製得化合物韌革菌素(vibralactone)，按化合物晶體與賦形劑重量比1∶3的比例加入賦形劑，制粒壓片。
實施例6片劑韌革菌素(vibralactone) 100mg澱粉100mg玉米漿17％ 適量硬脂酸鎂適量實施例7膠囊劑韌革菌素(vibralactone) 100mg澱粉100mg硬脂酸鎂適量製備方法將韌革菌素(vibralactone)與助劑混合，過篩，在合適的容器中均勻混合，把得到的混合物裝入硬明膠膠囊。
實施例8安瓿劑韌革菌素(vibralactone) 50mg製備方法將韌革菌素(vibralactone)溶解於2毫升丙二醇中，過濾所得溶液在無菌條件下裝入安瓿瓶中。
權利要求
1.下述結構式(I)化合物
2.權利要求1化合物的製備方法，該方法包括以下步驟取高等真菌韌革菌(Boreostereum vibrans)菌種，通過液體發酵，用醋酸乙酯溶劑萃取，所得提取物反覆用矽膠和Sephedex LH-20柱層析分離，得韌革菌素(vibralactone)。
3.用於治療和預防高血脂症、糖尿病以及肥胖症的藥物組合物，其中含有治療有效量的權利要求1化合物(包括立體異構體和互變異構體)和藥學上可接受的鹽以及載體。
4.權利要求1的化合物(包括立體異構體和互變異構體)在製備治療和預防高血脂症、糖尿病以及肥胖症的藥物中的應用。
全文摘要
本發明提供一種新的具有藥用價值的韌革菌素(vibralactone)(式I化合物)，及從韌革菌(Boreostereum vibrans)發酵液中提取本發明化合物的方法，同時提供一種以式I化合物為活性成分的用於治療和預防高血脂症、糖尿病以及肥胖症的藥物組合物，及該化合物及其藥物組合物在製備治療和預防高血脂症、糖尿病以及肥胖症藥物方面的應用。
文檔編號A61P3/06GK1907978SQ20061004862
公開日2007年2月7日 申請日期2006年8月17日 優先權日2006年8月17日
發明者劉吉開, 劉東澤, 朱華結, 王飛, 湯建國 申請人:中國科學院昆明植物研究所