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水稻品種抗黑條矮縮病田間接種鑑定方法

2023-05-31 07:06:16 4

水稻品種抗黑條矮縮病田間接種鑑定方法
【專利摘要】本發明提供了一種水稻黑條矮縮病品種抗性的田間接種鑑定方法,農業科學【技術領域】。選取具備一定條件的田塊作為鑑定圃,在特定時期播種不同水稻品種,麥收後鑑定圃內傳毒介體灰飛蝨具備一定的帶毒率和蟲口密度,待水稻生長至特定生育期後根據病害發生的嚴重程度評價水稻品種對水稻黑條矮縮病的抗性水平。利用本方法可以一次性對大量水稻品種進行抗黑條矮縮病鑑定,克服實驗室人工鑑定規模較小、鑑定品種數較少的缺點。這一鑑定方法可以應用於篩選抗黑條矮縮病水稻品種、品種抗性評價、抗性品種選育和抗性遺傳規律研究等眾多領域。
【專利說明】水稻品種抗黑條矮縮病田間接種鑑定方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種水稻品種對黑條矮縮病抗性的田間鑑定方法,屬於農業科學【技術領域】。
【背景技術】 [0002]水稻黑條矮縮病是一種由水稻黑條矮縮病毒(Riceblack-streakeddwarfvirus,RBSDV)引起的病毒病,主要由灰飛蝨以持久性不經卵方式進行傳播。近年來,隨著耕作制度和栽培方式的變化、冬季氣候變暖和感病品種的大面積推廣,傳毒介體灰飛蝨發生量日益上升,水稻黑條矮縮病在江蘇、浙江、江西和福建大規模發生,並迅速上升為生產上最主要的病毒病害。據江蘇省植保站統計,截止2007年,病害已在該省沿海、淮北及裡下河的鹽城、連雲港、泰州、淮安、揚州和徐州等地嚴重發生,當年發生危害的面積達30.8萬畝,而2008年水稻黑條矮縮病的發生面積則超過400萬畝,病害爆發、流行的形勢非常嚴峻。
[0003]篩選抗病品種應用於生產是防治水稻黑條矮縮病最為直接有效的方法,至今為止還沒有抗性品種在生產上應用。田間灰飛蝨往往同時攜帶有條紋葉枯病的(Ricestripevirus, RSV)和RBSDV,但由於近年來抗條紋葉枯病品種的廣泛推廣,使得這一病害得到了有效遏制,因此,黑條矮縮病的田間鑑定結果不會受到RSV的幹擾。另外,實驗室人工鑑定步驟較為繁瑣,鑑定空間也受到限制,不能進行大規模的品種鑑定,而資源篩選和抗性育種往往需要鑑定上千份水稻品種或品系,同時考察這些品種在田間的生長情況,這使得抗黑條矮縮病水稻資源的篩選和抗病育種工作受到極大的限制,迫切需要發明一種可以大規模進行水稻黑條矮縮病鑑定的田間鑑定方法,為水稻抗黑條矮縮病的資源發掘篩選、品種選育和遺傳規律研究提供基本的研究手段。

【發明內容】
:
[0004]技術問題
[0005]本發明提供了一種水稻品種對水稻黑條矮縮病抗性的田間接種鑑定方法。
[0006]技術方案
[0007]—種水稻品種對水稻黑條矮縮病抗性的田間接種鑑定方法,其特徵在於:
[0008]I)鑑定圃選擇:
[0009]選擇連續3年以上重發水稻黑條矮縮病的田塊,且上年度感病對照品種在不防治條件下發病率大於40%,且麥收後鑑定圃內傳毒介體灰飛蝨帶毒率高於4%,蟲口密度最高為1.5X108頭/ hm2,最低為6X IO6頭/ hm2的田塊作為鑑定圃,鑑定圃四周種植小麥作為灰飛蝨寄養區,以保證獲得足量蟲源;
[0010]2)播栽方式
[0011]參加鑑定的品種種子,麥收前15-20天播種,每個待鑑定材料播150粒幹種子,均勻撒播I行,行長50cm,行距IOcm ;播種結束後田塊浸水1_2天,除草劑封殺,出苗後正常管理,秧田期間不用藥劑防蟲;[0012]秧齡5-6葉時進行移栽,單苗栽插,行株距15cmX 20cm,每個品種和家系栽插100穴,常規肥水管理,大田不施用任何農藥,兩次重複;
[0013]3)灰飛蝨密度
[0014]麥收前後為灰飛蝨從麥田遷移到鑑定圃的高發期,為了使鑑定圃內各個點的灰飛蝨密度平均、一致,每天上午9點、下午4點用竹竿驅趕鑑定圃內的灰飛蝨;
[0015]鑑定圃周圍麥收後2-4天調查灰飛蝨密度:對整個鑑定圃採用對角線法5點取樣,每點拍查0.5mX0.2m ;用水溼潤長方形35cmX 50cm白搪瓷盤內壁,對準水稻秧苗中下部,連拍三下,每次拍查計數後清洗白搪瓷盤,進行下次拍查;
[0016]4)灰飛蝨帶毒率檢測
[0017]於鑑定圃周圍麥收後2-4天,捕捉灰飛蝨500頭以上,隨機選取100頭,按照SN/T1666-2005檢測灰飛蝨群體帶毒情況,計算灰飛蝨群體的帶毒率;
[0018]5)有效接種的灰飛蝨密度和帶毒率要求
[0019]有效接種的灰飛蝨密度和帶毒率關係按公式(I)計算:
[0021]式中:
[0022]D——有效接種的灰飛蝨密度,單位為頭每公頃(頭/ hm2);
[0023]PVS——灰飛蝨帶毒率,單位為百分率(%);
[0024]鑑定圃中灰飛蝨密度應低於1.5 X IO8頭/ hm2,當灰飛蝨帶毒率達到100%時根據公式(I)可知,鑑定圃中灰飛風密度最低為6X IO6頭/ hm2 ;
[0025]鑑定圃中灰飛蝨帶毒率不低於4% ;
[0026]6)管理
[0027]鑑定圃及其周圍IOm範圍內田塊不使用任何殺蟲劑和防治病毒藥劑,麥收後不焚燒秸杆;田間肥料運籌、灌溉水管理與常規生產一致,不使用任何殺蟲劑和防治病毒藥劑;
[0028]7)調查時期
[0029]鑑定圃中秧苗移栽後生長至分櫱高峰期時進行病情調查,江蘇蘇北地區在I月下旬;
[0030]8)調查方法
[0031]鑑定圃中秧苗移栽後長至分櫱高峰期時統計發病率:
[0032]此時發病植株表現出明顯的病狀:稻株嚴重矮縮不及正常株高的1/3、心葉突破下葉葉鞘而出、部分植株表現為從下葉枕口呈螺旋狀伸出、部分葉片的頂端出現旋狀捲曲;
[0033]而健康稻株表現株高正常,分櫱旺盛,生命力強;以每個試驗點2個重複的發病百分率平均值作為品種抗黑條矮縮病表型值進行統計;
[0034]9)水稻黑條矮縮病抗性級別的劃分:
[0035]免疫:發病率為0 ;
[0036]高抗:發病率0-5% ;
[0037]抗病:發病率5%-10% ;
[0038]中抗:發病率11-20% ;
[0039]感病:發病率20%_50% ;[0040]高感:發病率高於50%。
[0041]有益效果
[0042]本方法可以一次性對大量水稻品種進行抗黑條矮縮病鑑定,克服實驗室人工鑑定規模較小、鑑定品種數較少的缺點。這一鑑定方法可以應用於篩選抗黑條矮縮病水稻品種、品種抗性評價、抗性品種選育和抗性遺傳規律研究等眾多領域。
[0043]本發明方法已用於1000多個水稻品種黑條矮縮病抗性鑑定,部分品種鑑定結果如表3所示。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0044]圖1水稻分櫱高峰期黑條矮縮病特徵
[0045]A:黑條矮縮病毒侵染後的發病植株B:黑條矮縮病毒侵染後的發病家系
[0046]具體實施方法
[0047](一)一次性對大量水稻品種進行抗黑條矮縮病鑑定
[0048]1、鑑定圃選擇
[0049]選擇連續3年以上重發水稻黑條矮縮病的田塊,且上年度感病對照品種在不防治條件下發病率大於40%作為鑑定圃,鑑定圃四周種植小麥作為灰飛蝨寄養區,以保證獲得足量蟲源。
[0050]2、播栽方式`
[0051]參加鑑定的品種種子(含抗病對照和感病對照品種),麥收前15-20天播種,每個待鑑定材料播150粒幹種子,均勻撒播I行,行長50cm,行距10cm。播種結束後田塊浸水1_2天,出苗後正常管理,秧田期間不用藥劑防蟲。
[0052]秧齡5-6葉時進行移栽,單苗栽插,行株距15cmX 20cm,每個品種和家系栽插100穴。常規肥水管理,大田不施用任何農藥。兩次重複。
[0053]3、灰飛蝨密度及帶毒率調查
[0054]I)灰飛蝨密度調查
[0055]麥收前後為灰飛蝨從麥田遷移到鑑定圃的高發期,為了使鑑定圃內各個點的灰飛蝨密度平均、一致,每天上午9點、下午4點用竹竿驅趕鑑定圃內的灰飛蝨。
[0056]鑑定圃周圍麥收後2-4天,鑑定圃內灰飛風密度達到最大,因此選擇這個時期是調查灰飛蝨密度的最佳時機。對整個鑑定圃採用對角線法5點取樣,每點拍查0.1(0.5X0.2 V ;用水溼潤長方形(35cmX50cm)白搪瓷盤內壁,對準水稻秧苗中下部,連拍三下,每次拍查計數後清洗白搪瓷盤,進行下次拍查。
[0057]2)灰飛蝨帶毒率檢測
[0058]於鑑定圃周圍麥收後2-4天,捕捉灰飛蝨500頭以上,隨機選取100頭,按照SN/T1666-2005檢測灰飛蝨群體帶毒情況,計算灰飛蝨群體的帶毒率。
[0059]4、有效接種的灰飛蝨密度和帶毒率要求
[0060]有效接種的灰飛蝨密度和帶毒率關係按公式(I)計算:
[0061]D = 6X106/PVS......................................................(I)
[0062]式中:
[0063]D——有效接種的灰飛蝨密度,單位為頭每公頃(頭/ hm2);[0064]PVS——灰飛蝨帶毒率,單位為百分率(%)。
[0065]根據鑑定圃的播種量及播種株距和行距,每公頃鑑定圃苗數約為3X IO7株,每株秧苗蟲量乘以灰飛蝨帶毒率接近I時才能達到接種要求,設定每頭灰飛蝨在田間不同植株間可以傳毒5次,因此有效接種的灰飛蝨密度和帶毒率關係為D = (3X 107 + 5) /PVS,即為公式(I )。
[0066]I)有效接種的灰飛蝨密度要求
[0067]當鑑定圃中灰飛蝨密度達到1.5X IO8頭/ hm2時,秧苗受蟲害較重,出現大量死苗,因此鑑定圃中灰飛蝨密度應低於1.5X IO8頭/ hm2。當灰飛蝨帶毒率達到100%時根據公式(I)可知,鑑定圃中灰飛風密度最低為6X IO6頭/ hm2。
[0068]2)有效接種的灰飛蝨帶毒率要求
[0069]鑑定圃中灰飛蝨密度應低於1.5X IO8頭/ hm2,在這種條件下,根據公式(I)計算,鑑定圃中灰飛蝨帶毒率不低於4%。
[0070]5、鑑定圃寄養區管理
[0071]鑑定圃及其周圍IOm範圍內田塊不使用任何殺蟲劑和防治病毒藥劑,麥收後不焚燒稻杆。
[0072]6、調查時期
[0073]鑑定圃中秧苗移栽後生長至分櫱高峰期時進行病情調查,江蘇蘇北地區通常在7月下旬。
[0074]7、調查方法
[0075]鑑定圃中秧苗移栽後長至分櫱高峰期時統計發病率。此時發病植株表現出明顯的病狀(參考文獻:劉萬才等,警惕南方水稻黑條矮縮病暴發造成嚴重危害,《中國植保導刊》,2010,30(3):17-18.):
[0076]稻株嚴重矮縮不及正常株高的1/3、心葉突破下葉葉鞘而出、部分植株表現為從下葉枕口呈螺旋狀伸出、部分葉片的頂端出現旋狀捲曲;
[0077]而健康稻株表現株高正常,分櫱旺盛,生命力強(圖1)。另外,此時的發病植株很少有中間型病狀,以每個試驗點2個重複的發病百分率平均值作為品種抗黑條矮縮病表型值進行統計。
[0078]8、田間肥水管理
[0079]田間肥料運籌、灌溉水管理與常規生產一致,不使用任何殺蟲劑和防治病毒藥劑。
[0080]9、水稻黑條矮縮病抗性級別的劃分:
[0081]免疫:發病率為0 ;聞抗:發病率0-5% ;抗:發病率5%_10% ;中抗:發病率11-20% ;感病:發病率高於20%,高感。
[0082](二)有效接種的灰飛蝨密度和帶毒率要求實驗依據
[0083]在帶毒率3%、5%和8%條件下,接蟲量從600萬頭/畝上升至800萬頭/畝時,高感水稻黑條矮縮病品種武育粳3號發病率上升幅度最大,分別為15%、10%和16% ;接蟲量從800萬頭/畝上升至1000萬頭/畝時,武育粳3號死苗率上升幅度最大,分別為13%、12%和18% (表2)。另外,在灰飛蝨蟲量為800萬頭/畝條件下,灰飛蝨帶毒率為3%時,武育粳3號發病率為26%,發病較輕;而帶毒率分別為5%和8%時,發病率達到了 48%和64%,所以帶毒率應不低於5%。[0084]表1蟲量、帶毒率、發病率和死苗率之間的關係
【權利要求】
1.一種水稻品種對水稻黑條矮縮病抗性的田間接種鑑定方法,其特徵在於: I)鑑定圃選擇: 選擇連續3年以上重發水稻黑條矮縮病的田塊,且上年度感病對照品種在不防治條件下發病率大於40%,且麥收後鑑定圃內傳毒介體灰飛蝨帶毒率高於4%,蟲口密度最高為1.5父108頭/ hm2,最低為6X IO6頭/ hm2的田塊作為鑑定圃,鑑定圃四周種植小麥作為灰飛蝨寄養區,以保證獲得足量蟲源; 2)播栽方式 參加鑑定的品種種子,麥收前15-20天播種,每個待鑑定材料播150粒幹種子,均勻撒播I行,行長50cm,行距IOcm ;播種結束後田塊浸水1_2天,出苗後正常管理,秧田期間不用藥劑防蟲; 秧齡5-6葉時進行移栽,單苗栽插,行株距15cmX 20cm,每個品種和家系栽插100穴,常規肥水管理,大田不施用任何農藥,兩次重複; 3)灰飛蝨密度 麥收前後為灰飛蝨從麥田遷移到鑑定圃的高發期,為了使鑑定圃內各個點的灰飛蝨密度平均、一致,每天上午9點、下午4點用竹竿驅趕鑑定圃內的灰飛蝨; 鑑定圃周圍麥收後2-4天調查灰飛蝨密度:對整個鑑定圃採用對角線法5點取樣,每點拍查0.5mX0.2m ;用水溼潤 長方形35cmX50cm白搪瓷盤內壁,對準水稻秧苗中下部,連拍三下,每次拍查計數後清洗白搪瓷盤,進行下次拍查; 4)灰飛蝨帶毒率檢測 於鑑定圃周圍麥收後2-4天,捕捉灰飛蝨500頭以上,隨機選取100頭,按照SN/T1666-2005檢測灰飛蝨群體帶毒情況,計算灰飛蝨群體的帶毒率; 5)有效接種的灰飛蝨密度和帶毒率要求 有效接種的灰飛蝨密度和帶毒率關係按公式(I)計算: D = 6X107/"^......................................................(I) 式中: D—有效接種的灰飛蝨密度,單位為頭每公頃(頭/ hm2); PVS~灰飛蝨帶毒率,單位為百分率(%); 鑑定圃中灰飛蝨密度應低於1.5父108頭/ hm2,當灰飛蝨帶毒率達到100%時根據公式(I)可知,鑑定圃中灰飛風密度最低為6X IO6頭/ hm2 ; 鑑定圃中灰飛蝨帶毒率不低於4% ; 6)管理 鑑定圃及其周圍IOm範圍內田塊不使用任何殺蟲劑和防治病毒藥劑,麥收後不焚燒秸杆;田間肥料運籌、灌溉水管理與常規生產一致,不使用任何殺蟲劑和防治病毒藥劑; 7)調查時期 鑑定圃中秧苗移栽後生長至分櫱高峰期時進行病情調查,江蘇蘇北地區在7月下旬; 8)調查方法 鑑定圃中秧苗移栽後長至分櫱高峰期時統計發病率: 此時發病植株表現出明顯的病狀:稻株嚴重矮縮不及正常株高的1/3、心葉突破下葉葉鞘而出、部分植株表現為從下葉枕口呈螺旋狀伸出、部分葉片的頂端出現旋狀捲曲;而健康稻株表現株高正常,分櫱旺盛,生命力強;以每個試驗點2個重複的發病百分率平均值作為品種抗黑條矮縮病表型值進行統計; 9)水稻黑條矮縮病抗性級別的劃分: 免疫:發病率為O ; 聞抗:發病率0-5% ; 抗病:發病率5%-10% ; 中抗:發病率11-20% ; 感病:發病率20%-50% ; 高感:發病率高於50%。`
【文檔編號】A01G16/00GK103749230SQ201410039175
【公開日】2014年4月30日 申請日期:2014年1月27日 優先權日:2014年1月27日
【發明者】王寶祥, 盧百關, 周振玲, 宋兆強, 秦德榮, 徐大勇 申請人:江蘇徐淮地區連雲港農業科學研究所

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