用廣譜脈衝光滅活病原體的方法

2023-06-30 23:53:11

專利名稱：用廣譜脈衝光滅活病原體的方法
背景技術：
在科學研究和在藥物/治療劑製造中生物衍生組合物的使用無所不在。常規用人血作為蛋白質製劑的來源，用於治療各種疾病和異常；例如，級分血漿，提供凝血因子VIII、凝血因子IX、抗凝血酶、轉鐵蛋白、白蛋白、免疫球蛋白和血小板，以及其它治療劑。在許多藥物學/治療劑和相關組合物，如基因工程改造的細胞系的重組DNA和/或重組蛋白質、病毒載體、胺基酸、蛋白腖、胰島素和單克隆抗體的生產中常用組織培養方法。類似的，在研究和製造中常規使用動物衍生的試劑，如牛血清白蛋白(BSA)和羊血組分。
由於這些組合物來自活生物體，包括人類、動物和植物，它們可能被一種或多種病毒、細菌或其它病原體汙染。只要人或其它動物與汙染的產品接觸，就可導致個體感染、疾病、甚至死亡。在個體必須用某組合物治療一段較長時間時，例如，某些血友病人必須經常用血液衍生的組合物治療一生的情況下，這種感染的危險是特別引人注意的。類似的，具有嚴重免疫系統缺陷的人，如患有獲得性免疫缺陷症候群(AIDS)的病人特別容易通過接觸生物衍生組合物中汙染的病原體而感染。用獸醫學藥物治療的動物也同樣受到汙染組合物的威脅。除了對接受生物衍生組合物的人造成感染危險外，由於存在病毒、細菌和其它病原體汙染物，這種組合物本身的效力也可能是有缺陷的。
生物衍生組合物不僅被用於藥物/治療劑的生產，某些產品還常用作生物學研究的試劑(或用於生產製劑)。當生物衍生試劑被病毒、細菌或其它病原體汙染時，使用它的研究計劃就可能變得無用、不確定或甚至誤導。常用於製造和研究的血液產品包括BSA和人血漿蛋白質。
重組DNA和蛋白質、單克隆抗體、病毒載體和相關組合物也是生物衍生組合物用於研究和製造過程的例子。雖然這些產品很少可能被病毒、細菌和/或其它病原體汙染，但是這些汙染仍然是可能的。另外，當這些組合物被用作研究工具時，如果它們被汙染，會對這些研究造成顯著的風險，使得必須在此關心這種汙染。
因此，生物衍生的組合物，特別是人或動物來源的，包括例如細胞系、血液和/或血漿，在出售前需要嚴謹的病毒安全評估。目前提供這種安全性確認的方法包括在特定製造步驟用感染性試驗或其它診斷試驗測試原材料和產品中的病毒、細菌和/或其它病原體。
測試材料的有效性受到可得到的測試方法、試驗靈敏度和檢測不到的未知或突變病原體，尤其是病毒的可能性的限制。因此，在開發製造方法的過程中，包括設計用來從這些生物學衍生的組合物中去除或滅活病毒和/或其它病原體的加工步驟。測試這些方法能否去除或滅活病毒至所需的或最合適的安全水平。各方法步驟對數減少之和決定了病毒清除的總效果。例如，對於每一個加工步驟，病毒含量必須下降至少1個對數。
目前，已有許多去除生物衍生組合物中的汙染和對其進行消毒的方法。總的說，這些處理方法包括物理方法、化學方法、加熱方法、輻照方法和優選的，它們的一些組合。長時間加熱生物衍生組合物；用一種或多種化學試劑聯合加熱或輻射處理這種組合物；和用溶劑-清潔劑方法滅活病毒是三種最常用的去除生物衍生組合物中汙染的方法。然而，沒有一種滅活生物衍生組合物中病原體特別是病毒的方法被證明對後續廣譜病原性物質是成功的。另外，這些方法大部分需要進一步加工生物學組合物，來除去在滅活病毒、細菌和/或其它病原體中使用的化學藥品。這些額外的加工步驟通常包括一或多次抽提步驟和/或層析步驟，它們大大提高了製造最終產品的成本，並因此提高了產品對消費者的零售價格。
已有的去除或滅活病毒和/或其它汙染物的示範性物理方法包括高度專門化的過濾方法、親和層析、離子交換層析和聚乙二醇分級。然而，這些物理方法受到許多限制，尤其是當許多組合物不能如此過濾時。因此，在使用過濾、層析和其它物理方法的程度上，它們常常是一系列消除汙染方法中的一個步驟。例如，為了產生較純的凝血因子VIII、凝血因子IX或免疫球蛋白的溶液，必須先對血漿進行溶劑-清潔劑處理方法，然後層析處理，最後進一步過濾，得到所要的最終產物。可用超濾消除血液或血液產品中的細小病毒，但該方法僅部分有效。例如，它可應用於凝血因子IX濃縮液，但不能用於凝血因子VIII。
例如，在美國專利號4,540,573(Neurath等)、美國專利號4,946,648(Dichtelmüller等)、美國專利號5,418,130(Platz等)、美國專利號5,527,704(Wolf，Jr.等)、美國專利號5,663,043(Zepp等)和美國專利5,866,316(Kempf等)中描述了其它去除或滅活病毒、細菌/或其它病原體汙染的生物衍生組合物的熟知方法。這些專利描述了聯合處理生物衍生組合物，特別是哺乳動物血產品，如血漿、血漿組分或血液細胞物質(紅細胞、血小板或蛋白質組分)，來滅活其中的病毒和/或細菌汙染物。另外，所有所述方法包括使用至少一種化學藥品直接降解汙染生物或使其對另一種化學藥品或加熱或輻照的降解作用敏感。
這些聯合處理方法的使用對於某些病毒比用一種化學藥劑處理更有效，而且更可靠。例如，實驗已顯示單用β-丙內酯冷處理僅滅活了血漿中0-3log的HIV和SV40(Scheidler等，1998)，單用紫外線輻射處理血漿僅對約40％接受者提供了防止肝炎感染的保護作用；但是使用同時用β-丙內酯和紫外線輻射處理的血漿感染率為0(Lo Grippo等，「用紫外線和丙內酯處理人血漿-6年臨床評估」，JAMA1987722-726(1964))。因此可理解單用一種化學試劑滅活生物衍生組合物中的病毒汙染物已是次優選的。
美國專利號4,726,949、4,866,282和4952,812，Miripol等(本文下文收集的，Miripol專利)描述了用波長主要為280納米-320納米的紫外光輻射一薄層白血細胞約0.25-15分鐘，以導致白血細胞基本上喪失其在同種異體免疫病人中引發免疫反應的能力。Miripol專利說明，應在實施所述方法中避免使用發射254納米波長處的有效能量的紫外線燈泡，因為該波長的光導致血細胞損傷。類似的，鑑定出UV-A範圍(約365納米)也是不理想的，因為它不能很好的降低淋巴細胞同種異體免疫的作用。雖然Miripol專利描述了一種用紫外光輻照血液產品(即白血細胞)的方法，並不表明這些方法對於滅活病毒、細菌和/或其它病原體消除生物衍生組合物中的汙染是有用的，也不表明廣譜脈衝光(必須包括253和365納米範圍的光)與單用紫外光相比較可提供改進的消除汙染作用。
雖然已知道並使用了各種消除生物衍生組合物汙染的方法，但未開發出能穩定有效消除大部分病原性微生物，而且能安全的用於生物衍生組合物，包括治療性蛋白質和/或其它生物分子的方法。熱處理一般需要大量時間，並對於蛋白質或其它需要回收的物質有損害；例如，血漿蛋白組分和人白蛋白需要在60℃加熱10-11小時來滅活病毒。已發現細小病毒、肝炎A和其它非脂包膜病毒對於溶劑/清潔劑具有抗性，還顯示細小病毒對加熱滅活具有抗性。
鑑於在生物衍生組合物中加入化學物質來消除汙染的方法很流行，已開發了許多方法用於在消除汙染處理後，去除或滅活這些化學物質。例如，美國專利號4,540,573(Neurath等)、4,789,545(Woods等)和5,817,765(Isaksson等)描述了不同方法，用於將生物衍生終產物與其中存在的化學汙染物分開，作為滅活病原性汙染物處理的結果。顯然需要進行額外加工步驟，以從生物衍生組合物中除去先前加入的化學物質，這是不理想的。
雖然細菌和其它病原性汙染物在製造和使用生物衍生組合物中受到關注，但病毒常常是最受關注的。病毒根據其基因組常分為DNA或RNA病毒，和/或根據有衣殼或無衣殼的生理特徵分組。另外，各個病毒常常分類編入一病毒家族，一個家族中共有某些進化特徵。例如皰疹病毒家族(皰疹病毒科)中的病毒是衣殼DNA病毒而腺病毒家族的病毒是無衣殼DNA病毒。有衣殼和無衣殼RNA病毒的例子分別是黃病毒科(包括黃熱病病毒、C型肝炎病毒和牛腹瀉病毒)，和微小核糖核酸病毒科(包括脊髓灰質炎病毒、鼻病毒和A肝病毒)。當然，在生物衍生組合物中對於人類毒性最強，和/或最普遍的病毒在開發和實施消除汙染的方法中受到了最大的關注。這些病毒包括例如細小病毒、猿猴乳多空病毒(SV40)、人免疫缺陷病毒(HIV)、肝炎病毒和牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)。
細小病毒是一種無衣殼DNA病毒。人-B19細小病毒的感染可導致流產或導致感染HIV的人持續貧血。細小病毒可通過血液或血產品傳播，對於熱處理和溶劑/清潔劑處理具有抗性。它甚至還能通過已用兩種滅活方法聯用處理的組合物傳播。犬細小病毒(CPV)普遍存在於環境中，並且是一種嚴重的獸醫學病原體，需要針對它的疫苗。顯然，已證明能滅活HIV的光滅活方法對於CPV是無效的(Hirayama等，1997)。
猿猴乳多空病毒(SV40)是一種無衣殼DNA病毒。當使用在含有SV40的恆河猴細胞中製備的脊髓灰質炎和腺病毒疫苗時，在二十世紀50年代晚期和60年代早期發生了疏忽的人對SV40的接觸，Shah，K.等，Am.J.Epidemiology，1031-12(1976)。雖然皮膚調查已發現接觸SV40與腫瘤發生之間沒有可辨別的相關性(具體說，在與SV40汙染的脊髓灰質炎疫苗接觸與腦和卵巢中發現腫瘤的發生之間無關)，但近來已在各種人組織中檢測到了與SV40有關的DNA序列。例如，已在脈絡叢腫瘤、室管膜瘤、間皮瘤和骨肉瘤中發現SV40-相關的DNA。見例如，Bersagel等，NEJ Med.，326988-93(1992)；Carbone等，Oncogene 91781-90(1994)；Cristando等，J.Environ.Pathol Toxicol Oncol.1429-34(1995)；和Martini等，Cancer Res.564820-25(1996)。已從脈絡叢腫瘤分離到了感染性SV40，Lednecky等，Virology，212710-717(1995)。不清楚生物衍生組合物中的SV40汙染物可能在何種情況下，和以何種程度感染該產品的接受者。因此，有益的是嘗試除去和/或滅活存在於生物衍生組合物中的SV40，然後施用該產品。不幸的是，已發現SV40對熱的抗性較強，並不總能被β-丙內酯處理滅活。見Lelie等，J.Med.Virol.，23(3)297301(Nov.1987)和Sheilder等Biologicals，26(2)135-144(June 1998)。
人免疫缺陷病毒(HIV)是一種熟知的無衣殼RNA病毒，在人中導致疾病和死亡。在合適的條件下，HIV可被γ輻射滅活(Salai等，Ann.Transplant，2(1)55-56，1997)和一些化學物質所滅活(Dewilde等，Biol.Chem.379(1)1377-79，1998，Arthur等，AIDS Res.Human Retroviruses 14(Suppl.13)5311-19(Oct.1998))。然而，顯示用β-丙內酯僅有限滅活HIV-2(Scheidler等，Biologicals，26(2)135-44(June 1998))。類似的，已顯示HIV的熱處理僅在某些組合物中是有效的(Azari等，Artif.Cells Blood Substit.immobil Biotech 26(5-6)577-82(1998年11月))；而HIV-1和-2都能被合適的溶劑/清潔劑在幾分鐘內滅活(Biesert等，Vox Sang 74(Suppl 1)207-212(1998))。還已報導HIV可被可見光和染料亞甲基藍的聯合處理所滅活(Muller-Breitkreutz和Mohr，1998)。
牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)是一種衣殼RNA病毒，屬於黃病毒科，在牛中導致嚴重疾病。由於該病毒能穿過胎盤感染牛胚胎，估計胎牛血清10％-75％之間的商品汙染了BVDV。雖然尚不清楚BVDV在什麼情況下感染人類，感染到什麼程度，它的存在已與小兒胃腸炎和人小頭畸形聯繫起來(Harasawa，1997)。另一引人關注的是非細胞病變性BVDV株能在宿主細胞RNA中摻入其基因組，從而在被該病毒汙染的連續傳代細胞系中提出了致癌問題。用化學物質如β-丙內酯已實現了有限的BVDV滅活(Scheidler等，Biologicals，26(2)135-144(1998年6月))。另外，74℃熱處理90分鐘已顯示減少了7log的BVDV(Azari等，Actif.Cells BloodSubstit.Immobil.Biotech.26(5-6)577-82(Nov.1998))。然而顯然這種劇烈而長時間的熱處理對許多汙染的組合物是不適合的。
廣譜脈衝光(BPL)提供了一種用廣譜的非相干多色光的高強度短歷時脈衝滅活微生物的方法。BPL與連續非脈衝紫外光有許多方面的不同。BPL的光譜含有紫外光，還包括更寬的光譜，特別是在約180-2600納米之間的廣譜。BPL的光譜和海平面的陽光光譜相似，雖然比其強90,000倍，並包括在正常情況下被地球大氣層濾去的200-300納米之間波長的紫外光。與非脈衝紫外光的更長曝光時間和較低能量相比，BPL以相對高能的短歷時脈衝應用。見例如美國專利號5,034,235(Dunn等)、5,489,442(Dunn等)、5,768,853(Bushnell等)和5,786,598(Clark等)。
已用BPL去除各種目標，如食品、包裝、水和其它液體、半流體和固體的汙染和/或對其消毒。本來，這些是通過將目標物放入或使目標物通過BPL消毒室，使目標物暴露在合適數量的合適能量水平的BPL光束下。見例如上述四個專利和5,900,211(Dunn等)。然而重要的是，使用BPL去除生物性衍生組合物的汙染在這之前還未被描述或考慮過。雖然BPL已被證明能用於對固體表面和/或某些相對透明的液體內的各種微生物進行滅活，還沒有提出BPL可用於去除含有蛋白質和/或其它感興趣的生物分子的生物衍生組合物中的汙染。由於生物衍生的治療和藥物組合物常常在靜脈內施用，而且是任一情況下以濃縮形式施用，所以完全去除汙染微生物對於確保安全是關鍵的。類似的，選擇的淨化加工必須能有效而可靠的消除生物衍生組合物的汙染，而對最終產品的效力沒有不良影響。
BPL提供了與非脈衝紫外光不同的生物學作用。例如已知產生色素的細菌，如黑麴黴(Aspergillus niger)對紫外光輻射比芽孢桿菌孢子更有抗性。然而在用BPL的研究中，黑麴黴在乾燥表面上比以下三種不同的芽孢桿菌孢子更敏感嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillus stearothermophilus)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、和短小芽孢桿菌(Bacilluspumilus)。另外，常規UV處理會損傷DNA，其損傷機制在某些實驗條件下可逆轉，這些機制分類為「暗酶修復」或「光酶修復」(Block，S.Disinfectin，Sterilization and Preservation，第四版，Williamsand Wilkins，U.S.A.(1991))。在用BPL處理相同的微生物(如枯草芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、黑麴黴、生孢梭菌(Clostridium sporogenens)、白色念珠菌(Candidaalbicans)、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、霍亂沙門菌和綠膿桿菌)時，該暗酶或光酶的光反應不發生(Furukawa等「全新的脈衝光消毒技術可同時對注射用溶液及其2毫升聚乙烯容器消毒」，在PDA國際會議上發表，Japan(1999年2月))。存在可見光範圍內的波長，以及產生這兩種不同光的方法進一步將BPL與紫外光區分開來。常採用汞燈產生紫外光，它造成了一些安全威脅；而BPL是使用惰性氣體，如氙氣的燈產生的。
因此，需要的是一種新方法，來滅活生物衍生組合物中所含的病毒、細菌和/或其它病原體，這對於各種病原體，尤其是對於各種病毒是有效的，而且能用於各種組合物，而不會無謂損傷最終產品的效果。
發明概述本發明提供了用廣譜非相干多色光的高強度短歷時脈衝消除生物衍生組合物的方法和裝置，而滿足上述需要和其它需要。具體說，本文描述了至少減少1個log的存在於生物衍生組合物中的活病原體，如病毒、細菌、毒素、致熱原、真菌和/或朊病毒的含量的方法，該方法包括提供一種含有至少一種病原體的生物衍生組合物，並用至少一種廣譜非相干多色光的高強度短歷時脈衝照射該生物衍生組合物，從而使活病原體的含量減少至少10倍(即，1個log)。本文描述的方法可以有益的用於生物衍生組合物，如單克隆抗體、基因工程改造的哺乳動物細胞系產生的蛋白質、基因治療產品(如病毒載體)、人和/或動物血液製品產物、生物藥物(如肝素和/或膠原)、牛血清、羊血、蛋白腖/胺基酸和/或牛胰島素/轉鐵蛋白，而不會破壞該組合物的治療性質、藥物性質、抗原性、營養或其他所需性能。特別是，在暴露於這種廣譜脈衝光下時，存在於該生物衍生組合物中的蛋白質、多糖、核酸、脂類、抗體和其它感興趣的生物分子不會喪失對其用途必須的性能，即感興趣的生物分子不會被不可逆改變(例如使它們不再顯示其理想的生物活性)。因此，有益的是在經過這種廣譜脈衝光處理後，生物衍生組合物幾乎(如果存在)不需要其它加工步驟。
因此在一個方面，本文提供了一種迅速、有效和可靠的方法，即通過將產品暴露於至少一種高強度短歷時BPL(即廣譜的非相干多色光)脈衝光來滅活存在於生物衍生產品，如血漿中的病毒，如HIV-1或-2、甲、乙或C型肝炎病毒、HTLV-I或II，或巨細胞病毒。在另一個方面，本文提供了類似的快速、有效和可靠的方法，即通過將組合物暴露於BPL，來滅活存在於動物血液衍生組合物中的病毒，如SV40和/或有關的血液攜帶病毒。
另一個方面，本文提供了減少存在於生物衍生組合物中的病原體含量的方法，這些方法包括首先稀釋生物衍生組合物，然後用至少一種廣譜非相干多色光的高強度、短歷時脈衝照射該稀釋的生物衍生組合物，最後將生物衍生組合物濃縮到所需濃度。在這方面，本發明對於消除廣譜光不大能射穿，因此如果不先稀釋就不能被充分消毒的生物衍生組合物的汙染是有用的。另外，當該生物衍生組合物的蛋白質含量特別高，如高於10％，理想的是用BPL照射之前先稀釋該組合物，以便更好的控制BPL對蛋白質的效果並更好的控制組合物中存在的病原體的滅活。
本文還提供了滅活存在於生物學衍生物中多種汙染微生物的方法，其中汙染微生物包括至少兩種選自病毒、細菌、真菌和朊病毒的微生物，該組合物中的蛋白質、肽、和/或其它感興趣的生物分子不會被不可逆改變，從而使其保留了預期目的的效果，該方法包括使生物衍生組合物暴露於與至少一種廣譜光的脈衝。
在另一個方面，本文提供了通過使組合物接觸廣譜(即170-2600納米；l.8×1015-1.2×1014Hz)非相干多色光的高強度(如0.01焦耳/平方釐米-50焦耳/平方釐米，如0.05焦耳/平方釐米-1.0焦耳/平方釐米，其中能量密度是在靶目標表面測得的)、短歷時(即10納秒-100毫秒，如0.3毫秒)脈衝滅活存在於生物衍生組合物中的至少一種微生物的方法。通常用1-5次脈衝。
在一個具體方面，本發明提供了一種減少生物衍生組合物中存在的活病原體含量的方法，該方法包括步驟提供一種生物衍生組合物，該組合物含有至少一種病原體，用廣譜非相干多色光的至少一次高強度短歷時脈衝照射該生物衍生組合物，從而使活病原體的含量減少至少10倍。
在另一個具體方面，本發明提供了一種滅活存在於含有感興趣的生物分子的生物衍生組合物中的病毒的方法，該方法包含步驟提供一種含有感興趣的生物分子和病毒的生物衍生組合物，用廣譜脈衝光的至少一次脈衝照射該生物衍生組合物，從而滅活病毒。
在另一個具體方面，本發明提供了一種含有感興趣生物分子的生物衍生組合物，其中通過用廣譜脈衝光的至少一次脈衝照射該生物衍生組合物，使組合物中的活病毒含量比其原來含量至少降低了10倍，而滅活病毒，同時保留所述生物分子的生物活性。
在另一個方面，本發明提供了一種減少生物衍生組合物中存在的活病原體含量的方法，該方法包括步驟提供含有至少一種病原體和至少一種感興趣的生物分子的生物衍生組合物，用廣譜非相干多色光的至少一次高強度短歷時脈衝照射該生物衍生組合物，降低了活病原體的含量，而不破壞感興趣的生物分子。
附圖簡述

圖1是示範性脈衝光處理裝置的處理區示意圖，可用於消除本發明生物衍生組合物中的汙染，該裝置使用排列緊密的薄板，處理其中放置的組合物；圖2是另一種本文所用的示範性脈衝光處理裝置的示意圖，該裝置使生物衍生組合物沿縱向流過環繞一伸長的非相干脈衝光源的套筒，該光源提供廣譜非相干多色光的高強度短歷時脈衝；圖3是另一種示範性脈衝光處理裝置的示意圖，其中生物衍生組合物在橢圓反光鏡內平行於一個或多個伸長的非相干光源流動，並用廣譜非相干多色光的高強度短歷時脈衝處理；和圖4是一張流程圖，說明在製備用脈衝光消除生物衍生組合物汙染，使組合物暴露於脈衝光，然後處理已淨化的組合物中所採用的各個步驟中的一些步驟。
優選例的詳細描述本發明提供了一種迅速、可靠和有效滅活存在於生物衍生組合物中的病原體的方法。已發現可用廣譜非相干多色光的高強度短歷時脈衝滅活存在於生物衍生組合物，如血液衍生組合物、基因工程改造的細胞系衍生的組合物、組織培養過程衍生的組合物和相關產品中的病毒、細菌和其它病原體(應理解這種應用的目的包括致熱原、毒素、真菌和朊病毒)，一般不破壞感興趣生物分子，如組合物中的蛋白質、多糖、抗體、核酸脂類、胺基酸和/或蛋白腖的所需生物學性質。
具體說，將生物衍生組合物置於和/或流過廣譜脈衝光處理裝置，在該裝置的處理區域中用廣譜(如170-2600納米；即1.8×1015-1.2×1014Hz)的高強度(如0.01焦耳/平方釐米，例如0.05-1.0焦耳/平方釐米，在組合物表面測得)非相干多色光至少一次，優選兩次，最優選三次短歷時(如少於100毫秒，優選約0.3毫秒)的脈衝照射組合物。總的說，預計這種商業方法可使用1-5次短脈衝。如此照射的結果，生物衍生組合物內的活病原體含量減少了至少1個log(即10倍)，優選減少2個log以上(即100倍)。最有益的是，可在生物衍生組合物處理過程中的不同時間點簡單和快速的使用該處理方法，從而進一步確保完全或近乎完全滅活組合物中的病原體。
可用各種裝置實施這些減少病原體的方法。已有人描述了設計用於提供廣譜非相干多色光的高強度短歷時脈衝的裝置，例如在｀235專利、｀236專利、｀853專利、｀442專利、｀853專利、｀598專利和專利號5,900,211中。與用於提供廣譜脈衝光處理的裝置相同的是，處理室是不透光的；閃光燈置於該裝置內，使其射出的光最佳射在目標物體上；優選使用能進一步使脈衝光最大程度指向目標物體的反射材料；當在閃光燈和目標物體之間需要材料(如處理室內的目標物體的支持結構)還使用了可透射材料(如石英、藍寶石或類似材料)，從而使對BPL的幹擾最小化。
在設計或選擇BPL處理裝置中，最重要的是配置儀器的處理區，即儀器內用脈衝光照射目標物體的區域。由於脈衝光必須照到目標物體的所有表面，一般將處理區設計成能將最大程度照向目標物體。例如，當同時使用一盞以上的閃光燈來消除目標物體汙染時，優選將處理區設計成目標物體與每盞閃光燈都是等距離的，優選閃光燈環繞目標物體。為了確保脈衝光照射到整個目標物體，在處理區中用來支持目標物體的結構優選由至少約1％，優選至少約10％，更優選至少約50％，和最優選至少約85％的BPL可透過的材料組成。下列描述是根據本發明能用於生物衍生組合物消毒或淨化的示範性裝置。
圖1顯示了用BPL處理生物衍生組合物的優選示範性裝置的處理區示意圖。在該優選裝置中，兩片薄(如不到5毫米，例如約2釐米)的可透射板110、112彼此平行放置，並相互非常靠近(即分開不到5毫米，如約1毫米)，提供了通道或管道100，使待處理的組合物能通過其中。在板110、112的各一側裝置了閃光燈系統102、104，各包括部分包圍閃光燈108的反射片106，這些閃光燈系統是可商品購得的，例如PurePulse Technologies of San Diego的PUREBRIGHT型PBS-1號。
優選伸長閃光燈108，優選生物衍生組合物(由圖1中的箭頭114表示)的流動伸長的閃光燈平行。優選板110、112彼此沿兩條平行於閃光燈的對邊固定，從而使在它們之間通過的組合物被包含在其中。可使用合適的透光膠體，如瓊脂糖。可用正方形的透射管道(如石英或藍寶石)將組合物轉運過照射的處理區。雖然僅用兩個閃光燈系統102、104照射，但可使用其它系統；例如管道100可被脈衝光源環繞。在這兩種情況下，當生物衍生組合物通過(或停留在)管道100時，從閃光燈系統116發出的光照向它，從而滅活其中含有的病毒和/或其它微生物。將管道100的板110、112靠近放置在一起有好處，可使待處理的組合物通過時分散成一薄層，即使組合物比較不透明和/或未稀釋時，也有利於組合物整體暴露在脈衝光下。
圖2顯示了另一種示範性裝置50的示意圖，該裝置可用於滅活組合物中的病毒和/或其它汙染的微生物。裝置50包括一個反射性柱狀外殼，形成了處理室202，組合物流經其中，周圍環繞脈衝光源204。脈衝光源是高能氙閃光燈，按照常規的閃光燈操作實踐裝有合適的電源(未顯示)。
液體循環泵208根據脈衝光源204的脈衝重複速率控制著組合物通過處理室202的流速，從而在組合物位於處理室202中時，使通過其中的全部產品暴露在預定數量的廣譜非相干多色光的高強度短歷時脈衝。一般待處理的組合物以約1-4升/分鐘的流速被泵送通過該處理室。流出處理室202的組合物就被消除汙染，一般沒有感染性。
可以安排產品處理室202與脈衝光源204分開，以避免其中的組合物與光源204接觸。要辦到這一點可以使用石英外殼(或石英柱)環繞光源204，而待處理的組合物在石英柱外通過。冷卻水可以在光源204和石英外殼之間循環。
處理室的直徑可根據許多因素而不同，包括但不限於待處理的組合物的具體吸收特性，光源204即閃光燈的物理和操作特性，和光脈衝即閃光之間產品混合的程度。處理室202可以包括一作為其外壁的集成反射片或外部反射片，以反射照射光穿過組合物回到組合物流動通道。當使用外部反射片時，該集成反射片可包括一石英(或其它透射材料)柱體(或管道)，組合物在其中通過，外面裝有外部反射片。
注意到一些天然或稀釋後的生物衍生液體對包括相當部分的UV光譜的光相對透明。因此，光在這些組合物中的吸收較少減弱，光通量密度主要僅隨離光源的距離而下降。然而，對於其它具有顯著吸收的組合物，光通量密度將同時隨離閃光燈的距離和組合物的吸收而下降。在任一情況下，在整個處理區中應維持理想的最小光通量密度，如0.4或0.5焦耳/平方釐米(或甚至低至0.1-0.2焦耳/平方釐米，這取決於待滅活的具體微生物)。可另選的或另外的，應進行混合，以確保所有要處理的液體都受到適當的光通量密度和脈衝數處理以達到所需程度或水平的滅活，即殺死或滅菌。雖然閃光燈204在圖2的裝置50中位於處理室202內部，圖3顯示了可另選的(或另外的)將一盞或多盞閃光燈256置於處理室252的外部。顯示了一種優選設計，其中將待處理的組合物通過採用透射處理管道(如石英管)的處理室252。處理室252沿橢圓反射片254的一個焦點放置。沿橢圓反射片254的另一個焦點放置了一閃光燈256。閃光燈256最好套在石英管中，用水冷卻。由於橢圓反射片254將光脈衝聚焦在處理室252的中央，對於待處理的組合物的光吸收提供了補償，從而所有組合物都受到均一的光處理。在所示實施例的一個變化(未顯示)中，如需要可採用多個橢圓反射片，每個在一個焦點有一個閃光燈，在另一個焦點具有處理室252。
雖然已描述在實施本發明的方法中可使用各種裝置，但本領域技術人員將會理解為了這些目的可選擇使用各種其它裝置，包括上述裝置的組合，因此它們在本文中是平等考慮的。例如，可使用小型脈衝光滅菌器來處理含有生物衍生組合物的靜脈內用溶液，該滅菌器的一個入口接受靜脈插管，使該溶液通過脈衝光室，並從出口輸出，然後通過剩下的靜脈插管進入病人體內。
在這樣的處理裝置中，使用BPL來照射和處理生物衍生組合物，以減少病原體如病毒和/或細菌的含量至少10倍。優選處理方法包括用強度至少約0.01焦耳/平方釐米，優選約0.02-50焦耳/平方釐米、和最優選約0.05-1.0焦耳/平方釐米的脈衝光照射生物衍生組合物，其中能量強度是在照射的組合物表面測得的。光脈衝優選歷時非常短。優選脈衝歷時不到100毫秒；最優選約10納秒到100毫秒之間，如大約0.3毫秒。除了高強度和短歷時脈衝光外，它應是廣譜非相干多色光。優選包括170-2600納米(即頻率為1.8×1015Hz-1.2×1014Hz)的光。因為脈衝之間的時間非常短，如不到100毫秒，對於每次處理，可在不到1分鐘內完成一次多脈衝滅活處理。如果處理是被泵送或循環(與批處理相反)流動的產品，理想的是提供多個閃光燈，沿流動路線安置，使流速更快。這類處理與先前已知的減少生物衍生組合物中的病原體含量的方法完全相反，後者需要幾小時才能完成。
為了根據本發明的方法最有效和最可靠的處理生物衍生組合物，該組合物應儘可能的用廣譜脈衝光充分照射。因此，重要的是至少在處理過程中將待處理的組合物包含在這種廣譜脈衝光能充分透射，例如至少1％穿透的材料中以實現可靠滅活。合適的材料的例子包括例如聚烯烴，如聚乙烯和聚丙烯，尼龍，石英和藍寶石；598專利討論了各種適用於脈衝光處理裝置的聚合物。
為了形成包含材料可優選不同材料，這取決於使用的脈衝光處理裝置的具體配置。例如，當處理裝置使用靠近安置的薄板中流過生物衍生組合物時，這些板優選用較硬的透光性材料製成，如石英或藍寶石。相反，當處理區是靜脈管時，優選柔韌的聚合物材料。
除了考慮用何種脈衝光處理裝置，和待要處理的生物衍生組合物包含在哪種材料中以外，還應考慮組合物本身的某些性質。例如，生物衍生組合物的透光性對於確保廣譜脈衝光的完全照射是重要的。生物衍生組合物的不同組分可能引起廣譜脈衝光對組合物的透射性減少。例如，全細胞、高濃度的蛋白質和/或大量脂類或其它大分子的存在都可能干擾廣譜脈衝光透過和/或對生物衍生組合物的穿透性。
幸運的是，通常可用簡單的稀釋調節生物衍生組合物的透射性，而不對組合物造成永久損傷，這種方法常用於這些組合物的加工過程，因此這些方法的合適技術是眾所周知的。例如，如果需要改進血漿對BPL的透射性，以按照本發明對其進行最佳處理，可首先用合適的鹽水溶液稀釋血漿，然後用BPL處理，處理後重新濃縮或進一步加工，來提供所需的最終產品。由於用本發明的脈衝光處理可能破壞存在於生物衍生組合物中的全細胞而不可修復，所以這些方法最適合處理既不包括全細胞，又不需要在用BPL處理後回收完整全細胞的生物衍生組合物。
如前所述，可有益的用這些方法滅活存在於生物衍生組合物中的病原體，一般不破壞組合物內感興趣的生物分子的治療性、藥理性、營養性和/或其他所需性質。雖然一些感興趣的生物分子的效力可能因為用廣譜脈衝光處理而輕微下降，但是在許多這樣的情況下剩餘的活性仍可接受。另外，在某些情況下，一些感興趣的生物分子的效力可因BPL處理而增強，可能導致增強的或甚至新的療效。
圖4是一張流程圖，其中說明了本發明方法的各種實施例中的一些。可將待處理的生物衍生組合物的未稀釋樣品300稀釋成稀釋組合物302或不經稀釋處理。提出了三種將生物衍生組合物引入脈衝光處理裝置處理區的三種優選示範方法管式流動方法304、批處理方法306和板式流動處理308。圖2和3描述了管式流動304法的具體實施例。根據這第一個備選方案，將組合物經管子或類似的伸長裝置引入處理室的處理區。這包括例如在橢圓形處理裝置中處理，通過一靜脈內管道處理和相關方法。優選至少在組合物所在點受到脈衝光照射的管道直徑足夠小，使組合物整體被照射到。
將生物衍生組合物引入處理室的處理區的第二種替代方法是以批量形式306處理組合物。在這個替換方法中，可將組合物分成相對少量，置於一個或多個合適的透光容器中並用脈衝光照射。批量處理法特別適用於培養基組分，如胎牛血清的脈衝光處理，可以用該批量法非常迅速而有效的處理小量物質。圖4中提出的第三種替代方法是板式流動308裝置。如上文詳述的，板式流動308裝置含有兩張靠近放置的薄板，待處理的組合物從其中流過。有利的是，這種具體替換方法可將組合物分散成薄而寬的層，允許一次處理相當體積的組合物，其它將生物衍生組合物引入脈衝光處理室的處理區的方法對於本領域技術人員來說將是明白易懂的。
下面是一些用本文描述的方法滅活具體病原體的例子。特別是，說明了存在於生物衍生組合物中的HIV-1和BVDV的滅活。這些實驗的結果顯示，測試的四種病毒各自的含量在用廣譜非相干多色光的三次高強度短歷時脈衝處理後顯著下降了。在用廣譜非相干多色光的僅一次高強度短歷時脈衝照射後，顯示HIV-1和CPV病毒含量下降大於3個log。隨後的第五個實施例說明了胎牛血清中一種細菌大腸桿菌的滅活。
實施例1SV40的滅活用猿病毒40(SV40，ATCC VR-305)接種非洲綠猴腎(AGMK)細胞。當75％-100％的細胞展示細胞病變作用(CPE)時，收集病毒。冰凍病毒原種，並-60℃儲藏在含有10％-15％胎牛血清(FBS)的培養液中。用AGMK細胞滴定含有SV40的樣品。用於生長和維持AGMK細胞的培養液是Eagles極限必需培養基(E-MEM)，含5％-10％加熱滅活的FBS、10毫克/毫升慶大黴素、100單位/毫升的青黴素、和2.5毫克/毫升兩性黴素B。
在溼潤的5-7％C02的大氣中36-38℃培育細胞培養物。
在無菌聚乙烯樣品容器中加入0.2毫升體積的以含有10％熱-滅活FBS的E-MEM配的SV40。製備了12份樣品。9份樣品用BPL處理。其中三份樣品用一次光脈衝處理，三份樣品用兩次脈衝處理，三份樣品用三次脈衝處理。三份未處理的樣品用作對照。
暴露脈衝光後，在接種有AGMK的96-孔微量培養板中製作各病毒樣品的10倍稀釋液，進行滴定。使SV40吸附1-2小時，然後從孔中除去，替換以新鮮培養液。用RPMI(無酚紅)滴定作為對照。所有滴定在板中作一式四份，監測CPE和/或細胞毒性的存在達10日。表1列出了結果。
表1用BPL處理SV40
將曝光後滴度與曝光前滴度比較，以測定是否曝光後BPL後病毒感染力下降。實施例1顯示SV40下降了2-3個log。該實施例中使用了可得到的最高滴度。當使用的起始滴度越高，用的脈衝次數越多，或培養液稀釋到較低的蛋白濃度時，預期病毒減少也越大。
實施例2HIV-I的滅活用HIV-I型毒株HTLVIIIB(Vanderbilt University，Nashville，TN)接種CCRF-CEM細胞。當用免疫螢光試驗法(IFA)測定感染性達到最小值80％時，收集HIV-1。冰凍病毒儲液，-60℃儲藏在含有10％-15％FBS的培養液中。
用MT-2細胞(NIH AIDS Research and Reference Reagent Program.目錄號237)滴定含有HIV-1的樣品。用於MT-2細胞生長和維持的培養液是補充有2mM L-穀氨醯胺、25mM Hepes、2克/升NaHCO3、15％熱滅活FBS和50毫克/毫升慶大黴素的RPMI1640(含有酚紅)。在36-38℃在溼潤的5-7％CO2大氣中培育細胞培養物。
在無菌聚乙烯樣品容器中加入0.2毫升以含有15％熱滅活的FBS的RPMI配的HIV。製備了12份樣品。9份樣品用BPL處理。其中，三份用一次光脈衝處理，三份用兩次脈衝處理，三份用三次脈衝處理。三份未處理的樣品作為對照。
曝光後，在接種了MT-2的96-孔微量培養板中製作各病毒樣品的10倍稀釋液，進行滴定。HIV-1稀釋液在整個滴定時間內留在孔中。用RPMI(無酚紅)滴定作為對照。所有滴定在板中作一式四份，監測CPE和/或細胞毒性的存在達10日。表2列出了結果。
表2用BPL處理HIV-1
將曝光後滴度與曝光前滴度作比較，以測定是否曝光於BPL後病毒感染力下降。實施例2顯示用BPL後發生HIV-1減少了5-6個log。
該實施例中使用了可得到的最高滴度。當使用的起始滴度越高，用的脈衝次數越多，或培養液稀釋到較低的蛋白濃度時，預期病毒減少也越大。
實施例3CPV的滅活用CPV(ATCCVR-2017)接種A-72細胞(ATCC CRL 1542)。當75％-100％的細胞顯示細胞病變作用(CPE)時，收集病毒。冰凍病毒儲液，-60℃儲藏在含有10％-15％FBS的培養液中。
用A-72細胞滴定含有CPV的樣品。用於A-72細胞生長和維持的培養液是補充有5％-10％熱滅活FBS、10毫克/毫升慶大黴素、100單位/毫升青黴素和2.5毫克/毫升兩性黴素B的E-MEM。在36-38℃溼潤的5-7％CO2大氣中培育細胞培養物。
在無菌聚乙烯樣品容器中加入0.2毫升以含有5％熱滅活FBS的E-MEM配的CPV。製備了12份樣品。9份樣品用BPL處理。其中，三份用一次光脈衝處理，三份用兩次脈衝處理，三份用三次脈衝處理。三份未處理的樣品作為對照。
曝光後，在以A-72接種的96-孔微量培養板中製作各病毒樣品的10倍稀釋液，進行滴定。使CPV吸附1-2小時，然後從孔中除去，替換新鮮培養液。將上清液樣品從CPV滴定板轉移到新的滴定板中，測試血細胞凝集(HA)。用RPMI(無酚紅)滴定作為對照。所有滴定在板中作一式四份，監測CPE和/或細胞毒性的存在達10日。表3列出了結果。
表3用BPL處理CPV
*該實驗的檢測極限是≤3.16×101。
將曝光後滴度與曝光前滴度比較，以測定是否接觸BPL後病毒感染力下降。實施例3顯示用BPL後發生CPV減少了3-4個log。
該實施例中使用了可得到的最高滴度。當使用的起始滴度越高，用的脈衝次數越多，或培養液稀釋到較低的蛋白濃度時，預期病毒減少也越大。
實施例4BVDV的滅活用BVDV(ATCC VR-534)接種Bovine Turbinate(BT)細胞(ATCC CRL 1390)。當75％-100％的細胞顯示細胞病變作用(CPE)時，收集病毒。冰凍病毒儲液，-60℃含有儲藏在10％-15％FBS的培養液中。
用BT細胞滴定含有BVDV的樣品。用於A-72細胞生長和維持的培養液是補充有15％馬血清的E-MEM。
在36-38℃溼潤的5-7％CO2大氣中培育細胞培養物。
在無菌聚乙烯樣品容器中加入0.2毫升以含有5％熱滅活FBS的E-MEM配的BVDV。製備了12份樣品。9份樣品用BPL處理。其中，三份用一次光脈衝處理，三份用兩次脈衝處理，三份用三次脈衝處理。三份未處理的樣品作為對照。
曝光後，在接種有A-72的96-孔微量培養板中製作各病毒樣品的10倍稀釋液，進行滴定。使BVDV吸附1-2小時，然後從孔中除去，替換新鮮培養液。用RPMI(無酚紅)滴定作為對照。所有滴定在板中作一式四份，監測CPE和/或細胞毒性的存在達10日。表4列出了結果。
表4用BPL處理BVDV
將曝光後滴度與曝光前滴度比較，以測定是否接觸BPL後病毒感染力下降。實施例4顯示用BPL後發生BVDV減少了4個log。
該實施例中使用了可得到的最高滴度。當使用的起始滴度越高，用的脈衝次數越多，或培養液稀釋到較低的蛋白濃度時，預期病毒減少也越大。
實施例5大腸桿菌的滅活用大腸桿菌(ATCC26)接種15％FBS樣品並在32℃培養過夜，直到最終濃度為8.8×104CFU/ml(4.9log CFU/ml)。然後根據本文所述的方法，用3次廣譜光的短歷時脈衝(1.0焦耳/平方釐米/閃光)照射200微升汙染的血清(含有17,600CFU，即4.25log CFU)。製備該樣品的系列稀釋液(10x)(用0.05M磷酸緩衝液)並接種於標準瓊脂平板上。32℃培育該平板，在24和48小時計數。
培育48小時後，在任何平板上都觀察不到存活的大腸桿菌。如果靈敏度水平是20CFU(即1.3log CFU)，該試驗證明僅用三次廣譜光脈衝處理接種有大腸桿菌的FBS，導致細菌含量減少了3個log。(4.25logCFU-1.3log CFU＝2.95log CFU)。
雖然已用具體實施例及其應用描述了本文公開的發明，但是本領域技術人員可作出許多修改和變化，而不違背權利要求限定的本發明的範圍。所有的參考文獻和美國專利的公開內容引入本文以供參考。
權利要求
1.一種減少生物衍生組合物中存在的病原體含量的方法，其特徵在於，該方法包括步驟提供含有至少一種病原體的生物衍生組合物；和用廣譜非相干多色光的至少一次高強度短歷時脈衝照射生物衍生組合物，從而使活病原體含量至少減少10倍。
2.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述提供步驟提供了含有選自病毒、細菌、致熱原、毒素、真菌和朊病毒的至少一種病原體的生物衍生組合物。
3.如權利要求2所述的方法，其特徵在於，所述提供步驟提供了一種生物衍生組合物，它含有至少一種病毒，選自人免疫缺陷病毒-1、人免疫缺陷病毒-2、A型肝炎病毒、B型肝炎病毒、C型肝炎病毒、HTLV-I、HTLV-II、巨細胞病毒、猿猴乳多空病毒40、牛病毒性腹瀉病毒和犬細小病毒。
4.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述提供步驟提供的一種生物衍生組合物，選自血漿組合物、凝血因子VIII組合物、凝血因子IX組合物、抗凝血酶組合物、轉鐵蛋白組合物、白蛋白組合物、免疫球蛋白組合物、單克隆抗體組合物、病毒載體組合物、肝素組合物、膠原組合物、胰島素組合物和血清白蛋白組合物。
5.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述照射步驟包括用廣譜非相干多色光的至少一次高強度短歷時脈衝照射生物衍生組合物，光強度至少0.01焦耳/平方釐米，脈衝歷時不到100毫秒，光波長在170-2600納米之間。
6.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述照射步驟包括用廣譜非相干多色光的至少二次高強度短歷時脈衝照射該生物衍生組合物。
7.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述提供步驟提供一種生物衍生組合物，它含有至少一種病原體並含有一種感興趣的生物分子；所述照射步驟包括用廣譜非相干多色光的至少一次高強度短歷時脈衝照射該生物衍生組合物，而不破壞感興趣的生物分子。
8.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，該方法還包括在所述照射步驟之前稀釋該生物衍生組合物；和在所述照射步驟後濃縮該生物衍生組合物。
9.如權利要求1所述的方法，其特徵在於，該方法還包括提供一種廣譜脈衝光裝置，所述裝置包括一處理區，所述處理區由至少一盞閃光燈和兩塊相對的透光板組成；使生物衍生組合物在兩塊相對的透光板之間流動；其中在所述生物衍生組合物位於相對的兩塊透光板之間時對其進行所述照射。
10.一種滅活存在於含有感興趣生物分子的生物衍生組合物中的病毒的方法，其特徵在於，該方法包括步驟提供一種含有感興趣生物分子和一種病毒的生物衍生組合物；和用廣譜非相干多色光的至少一次高強度短歷時脈衝照射所述生物衍生組合物，從而滅活病毒。
11.一種含有感興趣生物分子的生物衍生組合物，其特徵在於，經過如權利要求10所述的處理方法處理後，該組合物中的活病毒含量比原來的含量減少了至少10倍，而所述生物分子保留其生物活性。
12.如權利要求10所述的方法，其特徵在於，所述提供步驟提供的一種生物衍生組合物，選自牛血清、羊血、牛胰島素、牛轉鐵蛋白、牛肝素、膠原、胺基酸、蛋白腖、肽、單克隆抗體和基因改造過的哺乳動物細胞系產生的蛋白質。
13.如權利要求10所述的方法，其特徵在於，所述照射步驟包括用廣譜非相干多色光的至少一次高強度短歷時脈衝照射生物衍生組合物，從而滅活病毒導致活病毒含量減少至少1個log。
14.如權利要求10所述的方法，其特徵在於，所述照射步驟包括用廣譜非相干多色光的至少一次高強度短歷時脈衝照射生物衍生組合物，從而滅活病毒導致活病毒含量減少至少2個log。
15.一種減少生物衍生組合物中存在的病原體含量的方法，其特徵在於該方法包括步驟提供一種生物衍生組合物，它含有至少一種病原體和至少一種感興趣的生物分子；和用廣譜非相干多色光的至少一次高強度短歷時脈衝照射該生物衍生組合物，從而減少活病原體的含量，而感興趣的生物分子不受破壞。
16.如權利要求15所述的方法，其特徵在於，所述照射步驟包括照射生物衍生組合物，從而使其中的活病原體含量減少至少1個log。
17.如權利要求15所述的方法，其特徵在於，所述提供步驟提供的一種生物衍生組合物含有至少一種選自病毒、細菌、致熱原、毒素、真菌和朊病毒的病原體。
18.如權利要求16所述的方法，其特徵在於，所述提供步驟提供的一種生物衍生組合物含有至少一種病毒，選自人免疫缺陷病毒-1、人免疫缺陷病毒-2、A型肝炎病毒、B型肝炎病毒、C型肝炎病毒、HTLV-I、HTLV-II、巨細胞病毒、猿猴乳多空病毒40、牛病毒性腹瀉病毒和犬細小病毒。
19.如權利要求15所述的方法，其特徵在於，所述提供步驟提供的一種生物衍生組合物，選自牛血清、羊血、牛胰島素、牛轉鐵蛋白、牛肝素、膠原、胺基酸、蛋白腖、肽、單克隆抗體和基因改造過的哺乳動物細胞系產生的蛋白質。
20.如權利要求15所述的方法，其特徵在於，所述照射步驟包括用廣譜非相干多色光的至少兩次高強度短歷時脈衝照射生物衍生組合物。
全文摘要
通過用廣譜非相干多色光的至少一次高強度短歷時脈衝照射,減少生物衍生組合物中的病原體含量的方法。在得到的經處理的組合物中感興趣的生物分子保留了生物活性。生物衍生組合物,如血清、血漿或其它血液製品,包括胰島素、轉鐵蛋白、肝素、膠原、凝血因子VIII和/或凝血因子IX中,或含有單克隆抗體、或基因工程改造的細胞系等產生的蛋白質組合物中存在的病原體,如病毒、細菌、熱原、真菌和/或朊病毒的含量通過用廣譜脈衝光照射而降低。用廣譜光的單脈衝顯著降低了生物衍生組合物中的HIV－1、SV40、犬細小病毒或牛病毒性腹瀉病毒的含量。
文檔編號A61K38/43GK1344170SQ00805398
公開日2002年4月10日 申請日期2000年2月11日 優先權日1999年2月13日
發明者H·W·科弗, J·M·伯格爾, C·J·麥克唐納德, S·馬洛伊, A·H·布希內爾, J·R·庫珀 申請人:坡裡坡勒斯技術股份有限公司