一種藥物球囊的生產方法與流程
2023-06-18 20:51:42
本發明涉及藥物球囊的生產技術領域，具體涉及一種藥物球囊的生產方法。
背景技術：
藥物球囊是在球囊擴張術或球囊成形術等介入技術基礎上發展起來的新型治療性球囊藥物釋放技術，它是將抗增生性的藥物，如紫杉醇，塗層於球囊表面，當球囊到達病變部位時血管壁並被撐開、擴張，與血管壁內膜接觸時，藥物快速釋放、轉移藥物在局部血管壁內的技術，藥物在局部起到抗血管內膜增生的作用，從而預防血管介入術後的血管再狹窄。
藥物球囊的首選藥物是紫杉醇，由於紫杉醇是脂溶性的，可以被血管平滑肌細胞快速吸收而且能夠在體內長期保留。但是在球囊上單純塗布紫杉醇並不具有生物有效性，紫杉醇要發揮作用需要通過載體或助劑輔助其在體內的吸收。Bruno教授通過將少量碘普羅胺造影液添加到紫杉醇中提高了紫杉醇的生物利用度。動物實驗結果顯示出紫杉醇塗層的藥物球囊具有顯著的抑制再狹窄作用。2006年藥物球囊首次用於人體的臨床試驗證明藥物球囊和裸球囊相比對支架內再狹窄具有顯著的療效。後期越來越多的藥物球囊和載體技術公布，但並不是所有的藥物球囊都是有效的。影響藥物球囊有效性的因素主要有幾點，關於產品本身的因素主要是：
1.藥物塗層的牢固度；由於藥物球囊要經過介入手術進入人體血液循環系統，球囊在達到血管病變部位前要經過血流衝刷，管壁摩擦等挑戰，藥物到達目標血管時是否有足夠藥物影響著產品是否有效。
2.載體(carrier)或者基質(matrix)技術。紫杉醇是脂溶性藥物，單純的紫杉醇塗層球囊生物利用度低，吸收差，載體(基質)一般是水溶性強的物質，和紫杉醇結合後促進藥物的吸收。目前公布較成功的載體包括碘普羅胺(優維顯370)，尿素，蟲膠等，其相應的藥物球囊有效性得到了證明。
3.紫杉醇的結晶形態和結晶度。非晶態的紫杉醇最容易吸收，但是在體內保留時間短。結晶的紫杉醇在體內保留時間更長，能夠抑制細胞的增殖。當藥物球囊的藥物結晶狀態良好的時候，產品才具有治療效果。
紫杉醇是一種結晶性化合物，工業生產中在有機溶劑中逐步添加水析出結晶成針狀晶體。早在1996年Richard T Liggins等人就研究了固態紫杉醇的聚集態結構，共有四種狀態:無水紫杉醇晶體(anhydrous paclitaxel)，二水紫杉醇晶體(paclitaxel.2H2O)，半結晶紫杉醇(paclitaxel I/am)和非晶紫杉醇(amorphous paclitaxel)。四種聚集態形式在一定條件下可以轉換。但是只有三種狀態(無水晶體，二水晶體和無定形紫杉醇)是可以穩定存在的。Jeong Hoon Lee等人使用溶劑誘導方法獲得了穩定的二水紫杉醇晶體，無水紫杉醇晶體以及無定形紫杉醇。當紫杉醇在不同的溶劑中以不同的工藝生產藥物球囊時，會形成不同結晶形態的藥物球囊。也有可能形成完全非晶的藥物塗層球囊。目前公布的藥物球囊生產工藝主要有三種：
1.浸漬法：首先配製一定濃度的藥物溶液，將充氣的藥物球囊完全浸漬到藥物溶液中，然後取出，藥物附著在球囊表面進行乾燥後得到藥物塗層球囊導管。該方法簡單易行，但是塗層載藥量難於控制。
2.微注射法：使用微型注射器抽取精確劑量的藥物溶液施加到充盈的球囊導管上，球囊處於平行放置且旋轉狀態，藥物溶液在球囊表面迅速鋪平，均勻擴散並獲得藥物塗層。該方法可以精確控制藥物含量，獲得了工業化生產。
3.噴塗法：借鑑藥物支架的超聲噴塗方法，將藥物球囊固定在旋轉裝置上，通過超聲波將藥物溶液霧化，在氣流輔助下藥物溶液附著在球囊表面，乾燥，獲得均勻的藥物塗層。
中國專利CN 102307602A公布了一種水合溶劑化紫杉醇晶體的藥物球囊生產方法，其製造方法如下：a，在含水溶劑中溶解紫杉醇；b，用該溶液完全或部分潤溼球囊；c，使溶劑揮發。該方法可以獲得摩爾比2～4個結晶水的紫杉醇晶體塗層藥物球囊。其所述含水溶劑選自9：1的四氫呋喃/水混合物，或比例在9.5：0.5到65：35之間的四氫呋喃/水混合物，或者有機溶劑含量相對於水的體積比不低於50％的丙酮/乙醇/水混合物。
中國專利CN 104324421A公布了一種治療用球囊擴張導管的藥物塗層製備方法，讓藥物溶液和藥物不相容溶液(水或酒精)混合後進入雙流道的超生噴頭中隊球囊擴張導管進行噴塗。其通過藥物不相容溶液改變藥物在溶液中的形態，獲得藥物塗層均勻，藥物塗層牢度大，晶體力度可控，藥效持久的藥物球囊。其製備方法為超聲噴塗，具體參數包括超聲頻率25kHz～60kHz，超聲功率為1W～4W，藥物溶液的流速為0.1ml/min～0.2ml/min，幹涉溶劑流速為0.05ml/min～0.2ml/min，球囊導管旋轉速度為2r/s～5r/s，噴塗時間為0.4min～3min，載氣壓力為1psi。
中國專利CN 103611212 A公布了一種藥物球囊的製備方法，首先將球囊進行親水預處理，然後將紫杉醇刷塗在球囊上或者球囊直接輥壓紫杉醇藥物得到藥物塗層，掃描電鏡照片顯示該紫杉醇結晶為棍狀晶體，晶體尺寸在20微米～40微米。
中國專利CN 104922735 A提供了一種藥物球囊的製備方法，包括以下步驟：(1)在球囊表面製備微粒塗層，所述微粒塗層由氯化鈉、氯化鈣或尿素製成；(2)將帶有微粒塗層的球囊置於藥物溶液中，使藥物在微粒塗層表面結晶，形成藥物塗層；將球囊從藥物溶液中取出，乾燥，即得到所述藥物球囊。
但是，上述現有技術或專利文獻的技術都各自存在一些問題：
目前貝朗醫療的紫杉醇釋放冠脈藥物球囊導管，商品名為sequent please已經在歐洲和中國上市，作為第一代藥物洗脫球囊導管，其安全有效性得到了大量的臨床證明。如圖1和圖2所示，第一代產品的塗層牢度不高，藥物晶體尺寸和顆粒度偏大。
如圖3和圖4所示，從目前公開的專利和文獻中也可以看出，藥物球囊的結晶尺寸普遍較大，晶體和載體之間沒有結合，呈現出分離或無載體的現象。
獲得結晶型的紫杉醇藥物塗層已經形成了共識，這是藥物球囊產生治療作用的首要前提。然而目前的技術獲得的紫杉醇晶體尺寸較大，結晶鬆散，晶體和載體之間沒有牢固的結合，這種塗層的牢度不高，在藥物球囊穿越和擴張過程中會有較大損失，藥物利用率不高。根據公布的數據，藥物球囊穿越擴張過程中約80％的藥物會被血流衝走，只有不到20％會被血管吸收發揮治療作用。而且較大的晶體尺寸意味著藥物塗層可能在手術過程中產生藥物顆粒，這些藥物顆粒隨著血液循環進入微循環系統或者毛細血管，容易造成血栓堵塞。
要解決塗層牢固度的問題，首先要了解藥物塗層載體的作用以及藥物和球囊的粘附機理。紫杉醇是一種脂溶性的藥物，由於分子中苯環的存在，其空間位阻很高，尤其是分子處於結晶狀態時，對球囊本體材料(尼龍或其共聚物)的粘附力很弱。所以一般藥物塗層中都會添加親水性很強的載體，比如碘普羅胺等。載體分子中有大量的極性基團(羥基，羰基，醯氨基等)，可以和尼龍的醯胺極性基團產生分子間作用力(範德華力)，球囊材料黏附性很高。理想的藥物球囊塗層應該是紫杉醇藥物和載體最優化的結合體，從球囊，載體和紫杉醇晶體之間，球囊和載體的粘附，載體和晶體的粘附都達到極高的狀態，塗層的牢固度達到最佳。球囊在到達病變部位時，具有較高的藥物含量，而載體和藥物的良好結合則促進藥物的吸收效率，大大提高藥物球囊的治療效率。
技術實現要素：
為解決採用現有技術獲得的藥物球囊的藥物晶體尺寸較大，結晶鬆散，晶體和載體之間結合不牢固，導致藥物塗層的牢固度不高，在藥物球囊穿越和擴張過程中藥物會有較大損失，藥物利用率較低，而且較大的晶體尺寸可能導致藥物塗層在手術過程中產生藥物顆粒，這些藥物顆粒隨著血液循環進入微循環系統或者毛細血管，容易造成血栓堵塞的缺陷，本發明提供一種藥物球囊的生產方法，能夠生產出藥物塗層牢固度較高、藥物顆粒度小的藥物球囊，在藥物球囊穿越和擴張過程中會大大減少藥物損失，提高藥物利用率。
為實現上述目的，本發明採用的技術方案為：
一種藥物球囊的生產方法，包括以下步驟：
1).配製藥物溶液；
2).使用多次噴塗技術，將所述藥物溶液一層一層噴塗到球囊表面。
優選的，所述藥物溶液為過飽和藥物溶液。
當溶劑含量較高時，溶劑揮發在藥物塗層表面會留下許多空隙，降低了藥物塗層的緻密度和牢固度，本發明提供的藥物球囊的生產方法，採用多次噴塗技術，每次將極少的藥物溶液噴塗在球囊上，能夠獲得藥物分子緻密的塗層，塗層牢固度很高。噴塗次數可以為1次～30次。而且噴塗的是過飽和藥物溶液，每一次噴塗的藥物溶液不會溶解原有的藥物塗層，而是以原有的藥物塗層作為成核劑繼續結晶，層層堆積，獲得藥物分子排列緊密、塗層牢固度較高的藥物塗層。
優選的，所述藥物溶液為紫杉醇藥物溶液，其包括紫杉醇原料藥、載體、有機溶劑及純化水。
優選的，所述步驟2)之後，還包括以下步驟：
3).對噴塗好藥物溶液的球囊進行溶劑蒸汽處理。將噴塗好的球囊放置在含有溶劑蒸汽的環境中，藥物會由晶態轉變為非晶態，然後球囊表面的藥物塗層在空氣中揮發溶劑，重新結晶。該晶體和載體結合緊密。且每一次噴塗結束後都可以進行一次或多次的溶劑蒸汽處理，能夠獲得晶體和載體結合良好的藥物塗層，然後進行下一次噴塗。
優選的，所述步驟1)包括以下步驟：
11).按預設劑量稱量載體和紫杉醇原料藥，並將其溶解於有機溶劑中，超聲波溶解直至藥物溶液無色透明；
12).向所述步驟11)得到的無色透明的藥物溶液中添加純化水，使部分所述紫杉醇原料藥以晶體形式從有機溶劑中析出；
13).將析出紫杉醇晶體後的藥物溶液密封放入50℃～70℃的恆溫烘箱10分鐘～30分鐘，直至藥物溶液再次變成無色透明為止；
14).將所述步驟13)得到的無色透明的藥物溶液自然降溫到室溫，得到過飽和的紫杉醇藥物溶液。
優選的，所述載體和紫杉醇原料藥的重量比為0.5：1～1.5：1。
優選的，所述載體和紫杉醇原料藥的重量比為0.8:1～1.0：1。
優選的，所述紫杉醇藥物溶液中紫杉醇的濃度為5mg/ml～40mg/ml。
優選的，所述紫杉醇藥物溶液中紫杉醇的濃度為25mg/ml。
優選的，所述純化水的體積佔所述有機溶劑和純化水的體積和的5％～60％。
優選的，所述載體為碘普羅胺，尿素，丁醯檸檬酸三正己酯，蟲膠，聚山梨醇中的一種或多種。
優選的，所述步驟1)中的有機溶劑為乙醇，甲醇，丙酮，異丙醇，甲基乙烯基酮，二甲基亞碸，乙酸乙酯，乙腈，四氫呋喃中的一種或多種。
優選的，所述步驟2)包括以下步驟：
21).將步驟1)得到的藥物溶液霧化成粒徑均勻的液滴；
22).將所述粒徑均勻的液滴噴塗到球囊表面；
23).等待一定時間，直至噴塗到球囊表面的藥物溶劑揮發至完全乾燥；
24).進行下一層藥物溶液的噴塗。
優選的，所述步驟2)採用超聲噴塗機操作。通過超聲波噴塗技術將過飽和藥物溶液噴塗到球囊表面可以獲得結晶完整的藥物塗層。
優選的，所述步驟21)之前，所述步驟2)還包括以下步驟：
將處於充氣狀態的球囊水平放置於所述超聲噴塗機中，使所述球囊繞所述球囊的中軸定向旋轉。
優選的，所述步驟3)進一步包括以下步驟：
31).將噴塗好的球囊水平放置在一個有機溶劑的蒸汽裝置中；
32).溶劑蒸汽處理一定時間後，球囊從白色變為半透明狀，然後取出；
33).等待一段時間，溶劑在空氣中自然揮發乾燥，獲得藥物球囊。
優選的，所述步驟3)中的有機溶劑為乙醇，甲醇，丙酮，異丙醇，甲基乙烯基酮，二甲基亞碸，乙酸乙酯，乙腈，四氫呋喃中的一種或多種。
優選的，所述步驟3)中的有機溶劑為乙醇。
優選的，所述步驟3)中，溶劑蒸汽溫度為76℃。
使用本發明的生產方法生產的藥物球囊藥物晶體尺寸在2微米左右，晶體和基質結合良好。
本發明的有益效果為：本發明在生產藥物球囊時：
1.配製過飽和的藥物溶液，直接採用超聲噴塗技術將過飽和的藥物溶液噴塗到球囊表面，能夠獲得結晶完整的藥物塗層。
2.使用多次噴塗技術，將過飽和的藥物溶液一層一層噴塗到球囊表面，每次噴塗的藥物塗層極稀薄，藥物在球囊表面形成一層非常薄的塗層，等待藥物溶劑揮發乾後繼續噴塗下一層藥物塗層，直到球囊表面的藥物含量達到預定要求為止；這樣藥物分子之間間隙達到極小的狀態，分子間範德華力達到最大狀態，同時形成的藥物晶體尺寸比單次噴塗藥物塗層小很多，能夠獲得分子排列緊密、塗層牢固度較高的藥物塗層。
3.對藥物塗層進行溶劑蒸汽處理，可以大大改善藥物晶體和載體的結合狀態，使藥物顆粒度小。使用有機溶劑蒸汽對藥物塗層進行處理，藥物塗層處於半溶解狀態，藥物晶體首先變成非晶狀態，但是藥物和球囊的位置仍然保持不變；停止溶劑蒸汽處理，藥物塗層中的溶劑揮發，藥物重新結晶，獲得結晶尺寸較小，晶體和基質結合良好的藥物塗層，因此使用本發明的生產方法生產的藥物球囊在穿越和擴張過程中會大大減少藥物損失，提高藥物利用率。
附圖說明
圖1為背景技術中第一代藥物洗脫球囊導管放大100倍的顯微鏡照片；
圖2為背景技術中第一代藥物洗脫球囊導管放大5000倍的顯微鏡照片；
圖3和圖4分別為背景技術中中國專利CN 104922735 A和中國專利CN 103611212 A中公布的藥物塗層的顯微鏡照片；
圖5為本發明實施例所使用的超聲噴塗機及球囊導管的結構簡圖；
圖6為本發明實施例所使用的溶劑蒸汽處理裝置及球囊導管的結構簡圖；
圖7-1和圖7-2分別為本發明實驗驗證中第一組樣品的低倍(500倍)和高倍(20000倍)的掃面電子顯微鏡照片；
圖8-1和圖8-2分別為本發明實驗驗證中第二組樣品的低倍(500倍)和高倍(20000倍)的掃面電子顯微鏡照片；
圖9-1和圖9-2分別為本發明實驗驗證中第三組樣品的低倍(500倍)和高倍(20000倍)的掃面電子顯微鏡照片；
圖10-1和圖10-2分別為本發明實驗驗證中第四組樣品的低倍(500倍)和高倍(20000倍)的掃面電子顯微鏡照片。
圖中，
1-進樣針；2-超聲噴頭；3-旋轉裝置；4-球囊導管；5-氣壓表；6-球囊導管入口；7-蒸汽發生器；8-溫度計。
具體實施方式
下面結合附圖對本發明的結構進行詳細解釋說明。
如圖5至圖6所示，本發明實施例提供的一種藥物球囊的生產方法，包括以下步驟：
1).配製過飽和藥物溶液：
11).按預設劑量稱量載體和紫杉醇原料藥，並將紫杉醇和載體溶解於有機溶劑中，獲得一定濃度的藥物溶液。載體和紫杉醇的比例在0.5～1.5：1，優選為0.8～1.0：1。該有機溶劑可以為乙醇，甲醇，丙酮，異丙醇，甲基乙烯基酮，二甲基亞碸，乙酸乙酯，乙腈，四氫呋喃等中的一種或多種。在超聲清洗機中超聲波溶解10分鐘～30分鐘直至藥物溶液無色透明。
12).向所述步驟11)得到的無色透明的藥物溶液中添加預定劑量的純化水，具體的純化水的劑量為：所述純化水的體積佔所述有機溶劑和純化水的體積和的5％～60％，該劑量的純化水使得紫杉醇晶體從有機溶劑中析出。
13).將析出紫杉醇晶體後的藥物溶液密封放入50℃～70℃的恆溫烘箱10分鐘～30分鐘，直至藥物溶液再次變成無色透明為止；
14).將所述步驟13)得到的無色透明的藥物溶液放置在淨化車間自然降溫到室溫，得到過飽和的紫杉醇藥物溶液。紫杉醇的濃度範圍在5mg/ml～40mg/ml，優選濃度為25mg/ml。載體可以是一種親水性很強的小分子物質，如碘普羅胺，尿素，丁醯檸檬酸三正己酯(BTHC)，蟲膠，聚山梨醇等的一種或多種。
2).使用多次噴塗技術，將所述過飽和藥物溶液一層一層噴塗到球囊表面：
將球囊放置在所述超聲噴塗機的旋轉裝置3中，球囊處於充氣狀態(實際操作中，可以直接將處於充氣狀態的球囊導管4放置在超聲噴塗機的旋轉裝置3中進行噴塗)。噴塗的時候，球囊水平放置，繞著所述球囊的中軸以一個固定方向不停旋轉。
21).將步驟1)得到的過飽和的紫杉醇藥物溶液抽取到超聲噴塗機的進樣針1中，並將進樣針1和超聲噴塗機的超聲噴頭2連接。進樣針1在注射泵的精確控制下，將過飽和的紫杉醇藥物溶液以一定速率注入超聲噴塗機的超聲噴頭2中，所述超聲噴頭2中含有超聲發射器，噴針和氣流通道。所述過飽和的紫杉醇藥物溶液進入噴針後在超聲波作用下，被霧化成粒徑均勻的液滴後隨著壓縮空氣的通入，液滴沿著氣流通道以一定形狀噴出超聲噴頭2。
22).噴塗的過飽和的紫杉醇藥物溶液以霧狀形式噴灑到球囊表面，同時超聲噴頭2以一定速度來回移動。
23).等待一定時間，直至噴塗到球囊表面的藥物溶劑揮發至完全乾燥；
24).進行下一層藥物溶液的噴塗。
可通過調節過飽和的紫杉醇藥物溶液濃度，注射泵的注射速率，超聲噴頭2的移動速度，噴塗次數來控制最終球囊的載藥量。噴塗次數的調節範圍可以為1次到30次。噴塗的每一次時間間隔可以調節，以保證每次噴塗後塗層溶劑揮發完全乾燥。
3).對噴塗好過飽和的紫杉醇藥物溶液的球囊進行溶劑蒸汽處理：
31).噴塗好的藥物球囊放置在一個有機溶劑的溶劑蒸汽處理裝置中，所述溶劑蒸汽處理裝置為現有設備，所述溶劑蒸汽處理裝置上設有球囊導管入口6、所述溶劑蒸汽處理裝置上還設有蒸汽發生器7，溫度計8和氣壓表5等，其中，所述蒸汽發生器7用於將所述有機溶劑加熱為蒸汽。該裝置內溶劑的蒸汽壓和溫度可以調節。
32).球囊水平放置，溶劑蒸汽處理一定時間後，球囊從白色變為半透明狀，然後取出。
33).等待一段時間，溶劑在空氣中自然揮發乾燥，獲得藥物球囊。
溶劑蒸汽處理過程中使用的有機溶劑可以是乙醇，甲醇，丙酮，異丙醇，甲基乙烯基酮，二甲基亞碸，乙酸乙酯，乙腈，四氫呋喃等的一種或多種，有機溶劑的蒸汽壓在1個大氣壓左右，裝置內的溫度在有機溶劑的沸點附近。多次噴塗的過程中每一次噴塗結束都可以進行一次溶劑蒸汽處理，或者不同次數之間穿插進行溶劑蒸汽處理，優化的組合可以獲得紫杉醇晶體和載體結合良好的塗層。
本發明實施例提供的一種藥物球囊的生產方法，所述超聲噴塗機及超聲清洗機均為採購的現有設備，在使用時，具體參數範圍可以設定為：注射泵的速率為0.1ml/min～0.5ml/min；超聲噴頭2移動速度為2mm/s～10mm/s，旋轉速度為50轉每分～300轉每分；超生波頻率為50kHz～100kHz；霧化粒徑為40微米；噴塗次數為1次～30次。
本發明實施例提供的一種藥物球囊的生產方法，優化的工藝參數範圍為：注射泵速率為0.2ml/min～0.3ml/min；超聲噴頭2移動速度為4mm/s～6mm/s，旋轉速度為100轉每分～150轉每分；超聲波頻率為80kHz；霧化粒徑為40微米；噴塗次數為6次～8次。每次噴塗結束後使用無水乙醇溶劑蒸汽處理10分鐘～30分鐘，有機溶劑蒸汽溫度為60℃～80℃，蒸汽壓力為1個大氣壓。
多次噴塗技術獲得藥物球囊實驗驗證：
稱量1.5克紫杉醇溶解在60毫升乙醇中，超聲波溶解30分鐘，紫杉醇完全溶解。添加40毫升純化水，紫杉醇晶體析出。繼續添加載體碘普羅胺1克，然後將溶液放置在50℃烘箱中10分鐘，藥物完全溶解。藥物溶液無色透明，無沉澱物和析出物。將無色透明的藥物溶液放置在淨化車間，自然冷卻到室溫22～24℃。得到藥物濃度為15mg/ml的紫杉醇過飽和溶液。
將配製的紫杉醇過飽和溶液進行噴塗，使用超聲噴塗機的進樣針1抽取藥物溶液，連接注射泵。取30根PTCA球囊導管4，球囊直徑4毫米，長度30毫米。將球囊導管4放置在超聲噴塗機的旋轉裝置3上，進行噴塗。
第一組5根，超聲噴頭2移動速度2mm/s，注射泵流速0.3ml/min，旋轉速度150r/min，噴塗一次，結束。藥物球囊放在真空乾燥箱中乾燥2小時。
第二組5根，超聲噴頭2移動速度6mm/s，注射泵流速0.15ml/min，旋轉速度150r/min，噴塗4次結束。藥物球囊在真空乾燥箱中乾燥2小時。
第三組10根，超聲噴頭2移動速度9mm/s，注射泵流速0.10ml/min，旋轉速度150r/min，噴塗10次結束。
第四組10根，超聲噴頭2移動速度9mm/s，注射泵流速0.10ml/min，旋轉速度150r/min，噴塗10次，第3次，第7次和第10次結束後使用溶劑處理工藝處理。處理方法為將藥物球囊放置在乙醇溶劑槽，升溫到76℃，乙醇蒸汽大量產生，保持溶劑蒸汽在一個大氣壓附近，和外界空氣保持平衡狀態。處理15分鐘。
將所有藥物球囊進行摺疊卷繞後，套上保護套管。
測試1，藥物球囊表面藥物含量的確定：
使用高效液相色譜法確定球囊表面藥物的含量。使用安捷倫高效液相色譜儀HPLC 1260進行定量分析，色譜條件參考《中國藥典》2005版本，紫杉醇含量測定的方法。
測試2，藥物球囊塗層牢固度評估：
將實施實例1中的藥物球囊取下保護套管，將球囊導管4接到壓力泵的魯爾接頭上，壓力泵內為空氣，將藥物球囊充壓到名義壓力下，然後迅速洩壓，重複三次；最後將藥物球囊和落入試管中的藥物分別洗脫並HPLC測試，計算脫落藥物的佔總藥量百分比。
塗層牢固度(％)＝100*脫落藥物/(脫落藥物+球囊表面殘留藥物)
牢固度數值越高代表牢固度越差，數值越小代表牢固度越好。
測試結果如表1，一次噴塗的藥物球囊藥物牢固度很差，測試過程中有一半脫落；四次噴塗的藥物球囊牢固度有較大提高，測試中脫落在5％左右；十次噴塗的兩組藥物球囊牢固度都非常好，測試過程中藥物脫落非常微量(低於HPLC的檢出限，以0％計算)。
表1噴塗次數和牢固度數據
測試3，掃面電子顯微鏡觀察藥物塗層：
將藥物球囊剪開，平鋪在一塊平板上，藥物塗層朝上，固定在掃面電子顯微鏡的銅板上，噴金處理，進行掃面電鏡觀察。
如圖7-1、圖7-2、圖8-1、圖8-2、圖9-1、圖9-2、圖10-1、圖10-2所示，分別列舉了1，4，10次噴塗和10次噴塗溶劑蒸汽處理的藥物塗層表面SEM照片，從低倍照片可以看出藥物塗層的緻密度隨著噴塗次數提高變得更加緻密。高倍SEM照片則可以看到紫杉醇的結晶尺寸，晶體和載體的結合狀態。使用imagepro plus 6.0軟體分析圖片，1次噴塗的紫杉醇晶體的長度為6微米～10微米之間，4次噴塗的紫杉醇晶體的長度為3.5微米～6微米之間，10次噴塗和10次噴塗溶劑蒸汽處理的紫杉醇晶體的長度均為1.5微米～2微米之間。
測試4，顆粒度測試：
將第三和第四兩組藥物球囊進行藥物顆粒度檢測。將藥物球囊摺疊卷繞後，套上保護套管備用。顆粒度測試方法採用文獻：Petersen S,Kaule S,Stein F,etc.Novel paclitaxel-coated angioplasty balloon catheter based on cetylpyridinium salicylate:preparation,characterization and simulated use in an in vitro vessel model.Materials science and engineering C,33(2013)4244-4250所描述的方法，測量結果見表2。可以看出，經過溶劑蒸汽處理的藥物球囊顆粒度顯著低於未經處理的藥物球囊。
表2球囊表面顆粒度釋放(個/mm2)
以上僅為本發明的較佳實施例而已，並不用以限制本發明，凡在本發明實質內容上所作的任何修改、等同替換和簡單改進等，均應包含在本發明的保護範圍之內。