一種滇雞血藤乙醇提取物及其高提取率的製備方法與流程
2023-06-04 02:40:26 4
本發明屬於中藥製藥技術領域，具體涉及一種溶解性好、易粉碎、質量穩定性好、總木脂素含量高、雜質少、工藝簡單、經濟的滇雞血藤乙醇提取物及其高提取率的製備方法。
背景技術：
滇雞血藤（KADSURAE CAULIS）為木蘭科植物內南五味子（Kadsura interior A.C.Smith）或異型南五味子的藤莖。滇雞血藤是傳統婦科良藥複方雞血藤膏的主藥，始創於清道光年間。目前，用作雞血藤的植物達26種，分屬於6科12屬。文獻記載最早、使用歷史最悠久的鳳慶雞血藤，其基原為木蘭科植物異型南五味子。
現代醫學研究複方雞血藤膏表明其具有增加造血功能，抗炎、鎮痛，增加子宮收縮作用。其中君藥滇雞血藤膏粉為滇雞血藤的水提幹浸膏粉，處方劑量約為其他四味藥原藥材總量的2倍，可見滇雞血藤在方中所起到的重要作用。是故，《中國藥典》2010版一部（第925頁）已將《複方雞血藤膏》更名為《複方滇雞血藤膏》，再次強調滇雞血藤的重要性及其地位。但由於雞血藤各地習用品種和混雜品種甚多，藥材質量難以控制。
據文獻報導，對滇雞血藤化學成分採用矽膠柱色譜、HPLC製備色譜以及紅外、紫外、旋光譜、質譜、核磁共振(氫譜、碳譜、HMQC、HMBC和NOESY)等波譜技術，從滇雞血藤乙酸乙酯部位分離鑑定了17個木脂素、2個三萜(甘五酸、馬五味子酸)和β—谷甾醇。木脂素類化合物包括聯苯環辛烯類木脂素10個、螺苯駢呋喃型聯苯環辛烯類木脂素6個：南五味子酯丙、滇南五味子酯、異型南五味子丁素、內南五味子素、schiarisanrin C、異型南五味子庚素；2，3-二甲基-1，4二芳基丁烷。根據現代科學的研究，滇雞血藤的主要活性成分是聯苯環辛烯類木脂素，其中異型南五味子丁素( heteroclitin D) 含量高、活性強，具有抗氧化、抗病毒活性，且能明顯抑制KCl、CaCl2和NA產生的血管收縮，以及ADP和PAF誘導的兔血小板聚集，可作為滇雞血藤質量控制的指標成分。
目前，雞血藤中發現的化合物中黃酮類化合物研究最多。因此，現有技術中對雞血藤提取物的質量控制以黃酮類化合物為主，傳統的水提不僅有效成分含量低和提取率低，而且由於提取溫度較高，容易破壞熱敏性有效物質。另外，傳統水煎煮法製備滇雞血藤膏，所得浸膏中有效成分含量不高，浸膏較硬，難粉碎，對加工製備其他的劑型和製劑有許多不利影響。也有採用乙酸乙酯、乙醇或其混合溶劑提取，提取物過正相矽膠柱，用石油醚、乙酸乙酯、氯仿等進行洗脫，最後用製備液相色譜，乙腈-水洗脫，該方法不僅過程繁雜，而且使用氯仿、乙腈等有毒溶劑，且應用製備液相等精密儀器，不適合工業化大生產；另外，現有技術中採用的滲漉法滲漉速度一般在每2～3小時得到1倍體積的滲漉液，不僅工藝時間長，而且最終提取物的總木脂素含量和提取率並沒有顯著的提高，效率較低。
技術實現要素：
本發明的第一目的在於提供一種總木脂素含量高、溶解性好、易粉碎、質量穩定性好的滇雞血藤乙醇提取物；第二目的在於提供一種實現第一目的且總木脂素提取率高、雜質少、工藝簡單、經濟的滇雞血藤乙醇提取物的高提取率製備方法。
本發明的第一目的是這樣實現的：含量不少於2.75%的總木脂素
本發明的第二目的是這樣實現的：包括前處理、提取、分離步驟，具體步驟如下：
A、前處理：將滇雞血藤藥材初清除雜後切片並粉碎過篩，留篩下物得到滇雞血藤粉末；
B、提取：將上述滇雞血藤粉末經70～85%乙醇浸漬20～36h，並以1～3體積倍數/h的速度滲漉，收集40～50倍體積的滲漉液；
C、分離：將上述滲漉液減壓濃縮或旋轉蒸發儀濃縮至無醇味以回收乙醇並得到滇雞血藤乙醇提取物浸膏。
本發明與現有技術相比具有以下有益效果：
1、本發明的滇雞血藤乙醇提取物浸膏中總木脂素含量是水提浸膏的10.5倍，本發明的製備方法中總木脂素提取率是水煎煮法的6.9倍，即本發明的製備方法能顯著增加對滇雞血藤中總木質素的提取率；
2、本發明的滇雞血藤乙醇提取物浸膏相較傳統水煎煮法得到的浸膏溶解性好、易粉碎、質量穩定性好，製備成其它劑型使用亦能提高生物利用度；
3、本發明的製備方法在總木脂素提取率基本相當的情況下，滲漉速度為1～3體積倍數/h，較現有技術中普遍採用的每2～3小時得到1倍體積滲漉液的滲漉速度快2～9倍，顛覆了傳統認知中滲漉速度越慢提取率越高的認識，取得了意想不到的技術效果；
4、本發明的製備方法相較傳統的乙醇回流提取雖然總木脂素提取率相近，但本發明所得的浸膏中總木脂素含量更高，提取物中的雜質相對較少；
5、本發明的製備方法全程採用低溫乾燥和提取、分離技術，提取物能夠有效保留滇雞血藤中的揮發性、熱敏性的有效成分；
6、本發明的製備方法採用單一的乙醇溶液作為溶劑，不僅回收容易，而且無毒，易於規模化生產。
所以，本發明的滇雞血藤乙醇提取物總木脂素含量高、溶解性好、易粉碎、質量穩定性好，本發明的滇雞血藤乙醇提取物的高提取率製備方法總木脂素提取率高、雜質少、工藝簡單、經濟。
具體實施方式
下面結合實施例對本發明作進一步的說明，但不以任何方式對本發明加以限制，基於本發明教導所作的任何變更或改進，均屬於本發明的保護範圍。
本發明之滇雞血藤乙醇提取物包括含量不少於2.75%的總木脂素。
所述總木脂素包括聯苯環辛烯類木脂素、螺苯駢呋喃型聯苯環辛烯類木脂素。
所述聯苯環辛烯類木脂素包括南五味子酯甲、南五味子酯乙、滇南五味子酮、南五味子素、異型南五味子丙素。
所述螺苯駢呋喃型聯苯環辛烯類木脂素包括南五味子酯丙、滇南五味子酯、異型南五味子丁素、內南五味子素。
本發明之滇雞血藤乙醇提取物的製備過程包括前處理、提取、分離步驟，具體步驟如下：
A、前處理：將滇雞血藤藥材初清除雜後切片並粉碎過篩，留篩下物得到滇雞血藤粉末；
B、提取：將上述滇雞血藤粉末經70～85%乙醇浸漬20～36h，並以1～3體積倍數/h的速度滲漉，收集40～50倍體積的滲漉液；
C、分離：將上述滲漉液減壓濃縮或旋轉蒸發儀濃縮至無醇味以回收乙醇並得到滇雞血藤乙醇提取物浸膏。
本發明之滇雞血藤乙醇提取物的高提取率製備方法，包括前處理、提取、分離步驟，具體步驟如下：
A、前處理：將滇雞血藤藥材初清除雜後切片並粉碎過篩，留篩下物得到滇雞血藤粉末；
B、提取：將上述滇雞血藤粉末經70～85%乙醇浸漬20～36h，並以1～3體積倍數/h的速度滲漉，收集40～50倍體積的滲漉液；
C、分離：將上述滲漉液減壓濃縮或旋轉蒸發儀濃縮至無醇味以回收乙醇並得到滇雞血藤乙醇提取物浸膏。
所述前處理步驟中的滇雞血藤粉碎後過5～20目篩。
所述前處理步驟中的滇雞血藤切片後乾燥至含水率低於10%，然後粉碎過篩。
所述滇雞血藤切片後在60℃以下熱風乾燥至含水率低於10%。
所述提取步驟中乙醇的溫度為20～35℃。
所述滇雞血藤乙醇提取物浸膏經噴霧乾燥或低溫真空乾燥後粉碎過篩，得到滇雞血藤乙醇提取物粉末。
所述滇雞血藤中的總木脂素提取率不小於0.25%。
實施例1
1、滇雞血藤藥材初清除雜後切片並在60℃以下熱風乾燥至含水率低於10%，然後粉碎並過20目篩，留篩下物得到滇雞血藤粉末；
2、稱取上述滇雞血藤粉末10g經20±2℃的85%乙醇浸漬20h，並以3體積倍數/h的速度滲漉，收集45倍體積的滲漉液；
3、將上述滲漉液減壓濃縮至無醇味以回收乙醇，得到滇雞血藤乙醇提取物浸膏；
4、將滇雞血藤乙醇提取物浸膏經低溫真空乾燥後粉碎過篩，得到總木脂素提取率為0.329%及總木脂素含量（高效液相色譜法：色譜條件為Phenomenex Gemini-NX 5u C18 110A(4.6 mm×250 mm)色譜柱；甲醇-乙腈-水連續梯度洗脫，流速1mL／min；柱溫35℃；檢測波長230nm，進樣量10μL）為3.272%的滇雞血藤乙醇提取物粉末。
實施例2
1、滇雞血藤藥材初清除雜後切片並在60℃以下熱風乾燥至含水率低於10%，然後粉碎並過5目篩，留篩下物得到滇雞血藤粉末；
2、稱取上述滇雞血藤粉末10g經30±2℃的80%乙醇浸漬24h，並以3體積倍數/h的速度滲漉，收集50倍體積的滲漉液；
3、將上述滲漉液旋轉蒸發儀濃縮至無醇味以回收乙醇，得到滇雞血藤乙醇提取物浸膏；
4、將滇雞血藤乙醇提取物浸膏經低溫真空乾燥後粉碎過篩，得到總木脂素提取率為0.283%及總木脂素含量（高效液相色譜法：色譜條件為Phenomenex Gemini-NX 5u C18 110A(4.6 mm×250 mm)色譜柱；甲醇-乙腈-水連續梯度洗脫，流速1mL／min；柱溫35℃；檢測波長230nm，進樣量10μL）為3.110%的滇雞血藤乙醇提取物粉末。
實施例3
1、滇雞血藤藥材初清除雜後切片並在60℃以下熱風乾燥至含水率低於10%，然後粉碎並過15目篩，留篩下物得到滇雞血藤粉末；
2、稱取上述滇雞血藤粉末10g經25±2℃的70%乙醇浸漬36h，並以1體積倍數/h的速度滲漉，收集40倍體積的滲漉液；
3、將上述滲漉液旋轉蒸發儀濃縮至無醇味以回收乙醇，得到滇雞血藤乙醇提取物浸膏；
4、將滇雞血藤乙醇提取物浸膏經低溫真空乾燥後粉碎過篩，得到總木脂素提取率為0.306%及總木脂素含量（高效液相色譜法：色譜條件為Phenomenex Gemini-NX 5u C18 110A(4.6 mm×250 mm)色譜柱；甲醇-乙腈-水連續梯度洗脫，流速1mL／min；柱溫35℃；檢測波長230nm，進樣量10μL）為3.204%的滇雞血藤乙醇提取物粉末。
實施例4
1、滇雞血藤藥材初清除雜後切片並在60℃以下熱風乾燥至含水率低於10%，然後粉碎並過10目篩，留篩下物得到滇雞血藤粉末；
2、稱取上述滇雞血藤粉末10g經35±2℃的75%乙醇浸漬30h，並以2體積倍數/h的速度滲漉，收集40倍體積的滲漉液；
3、將上述滲漉液旋轉蒸發儀濃縮至無醇味以回收乙醇，得到滇雞血藤乙醇提取物浸膏；
4、將滇雞血藤乙醇提取物浸膏經低溫真空乾燥後粉碎過篩，得到總木脂素提取率為0. 275%及總木脂素含量（高效液相色譜法：色譜條件為Phenomenex Gemini-NX 5u C18 110A(4.6 mm×250 mm)色譜柱；甲醇-乙腈-水連續梯度洗脫，流速1mL／min；柱溫35℃；檢測波長230nm，進樣量10μL）為3.018%的滇雞血藤乙醇提取物粉末。
對照例1：
參照《藥典》及文獻報導的提取方法，經實驗研究，確定最佳水提取工藝為：取與實施例2相同的滇雞血藤粗粉10g，加6倍量的水，煎煮3次，時間分別為1.5h、1h、0.5h，合併三次煎煮夜，濃縮成幹浸膏3份，粉碎，過五號篩備用。以高效液相色譜法測定水提浸膏總木脂素含量：色譜條件為Phenomenex Gemini-NX 5u C18 110A(4.6 mm×250 mm)色譜柱；甲醇-乙腈-水連續梯度洗脫，流速1mL／min；柱溫35℃；檢測波長230nm，進樣量10μL。得到水提浸膏總木脂素含量為0.296%，總木脂素提取率為0.041%。
對比實施例2和對照例1，實施例2的總木脂素提取率是對照例1的6.9倍，實施例2得到的滇雞血藤乙醇提取物中總木脂素含量是對照例1的10.5倍。