雙液相系統發酵法降解植物甾醇製備雄烯二酮的製作方法
2023-06-11 12:17:31 3
雙液相系統發酵法降解植物甾醇製備雄烯二酮的製作方法
【專利摘要】本發明提供一種採用雙液相發酵系統發酵分枝桿菌Mycobacterium?sp.DE6823製備雄烯二酮的方法，發酵培養基水相選用無菌蒸餾水，油相可選用米糠油、葵花油、大豆油和花生油，在發酵轉化完成後，通過膜分離方法，得到含有雄烯二酮的溶液，經濃縮、脫色、過濾、濃縮、重結晶和真空乾燥等操作可得到純度在99％以上的雄烯二酮。根據選用油相的不同，植物甾醇的轉化率在59％～85％的範圍之間。本發明解決了我國現有雄烯二酮生產工藝中原料受季節和地域的限制，可有效降低對生態環境的破壞，具有操作簡單、環境汙染小、轉化率高、生產成本低等特點，適合產業化生產。
【專利說明】雙液相系統發酵法降解植物留醇製備雄烯二酮
一、【技術領域】
[0001]本發明利用發酵法降解植物留醇製備雄烯二酮的方法屬於生物【技術領域】，涉及利用雙液相發酵系統進行發酵降解。
二、【背景技術】
[0002]雄烯二酮的化學結構式如下:
[0003]
【權利要求】
1. 本發明涉及一種利用微生物發酵降解植物留醇製備雄烯二酮(雄留-4-烯-3，17-雙酮，簡稱AD)的方法，其具體步驟如下:發酵菌種接種至雙液相培養基中，保持一定的溫度，加入植物留醇，攪拌、控制PH值，發酵完成後，採用膜分離技術獲得含AD溶液，後經濃縮、活性炭脫色、過濾、濃縮、重結晶、真空乾燥得到AD晶體，純度達到99%以上。
2.根據權利要求1所述的一種利用微生物發酵降解植物留醇製備雄烯二酮，其特徵在於發酵菌種為分枝桿菌(Mycobacterium sp.) DE6823，其菌種保藏編號為CGMCC N0.6419。
3.根據權利要求1所述的一種利用微生物發酵降解植物留醇製備雄烯二酮，其特徵在於雙液相指的是水相和油相；水相具體為滅菌蒸餾水，油相具體可是米糠油、葵花油、大豆油和花生油。
4.根據權利要求1所述的一種利用微生物發酵降解植物留醇製備雄烯二酮，其特徵在於菌種的接入量為8%~17%。
5.根據權利要求1所述的一種利用微生物發酵降解植物留醇製備雄烯二酮，其特徵在於培養基配方如下:玉米澱粉4~17% (g/L)，NH4NO3 0.1~0.4% (g/L)，K2HPO3 0.1~0.2% (g/L)，航空煤油0.1~0.5% (g/L)，消泡劑0.002~0.009% (g/L)，油相的濃度為14~26g/L，植物留醇的添加濃度維持15~22g/L，其餘為滅菌蒸餾水。
6.根據權利要求1所述的一種利用微生物發酵降解植物留醇製備雄烯二酮，其特徵在於保持一定溫度為30°C~32°C。
7.根據權利要求1所述的一種利用微生物發酵降解植物留醇製備雄烯二酮，其特徵在於攪拌速度為130~300r/min ;pH值範圍為8.2~8.4。
8.根據權利要求1所述的一種利用微生物發酵降解植物留醇製備雄烯二酮，其特徵在於有機溶劑指的是烷基醇和烷基酮，具體包括乙醇、甲醇、異丁醇、丙酮。
9.根據權利要求1所述的一種利用微生物發酵降解植物留醇製備雄烯二酮，其特徵在於發酵結束後，過濾，濾去發酵液中的固體，加入少量的無機鹽，取油相，加入權利要求8所述溶劑，充分攪拌後，通過膜過濾，濃縮，在濃縮液中加入活性炭，回流10~20min，過濾、濾液旋蒸得到AD粗品。
10.根據權利要求9所述的一種利用微生物發酵降解植物留醇製備雄烯二酮，其特徵在於無機鹽指的是NaCl、K2CO3和Na2C03。
【文檔編號】C12P33/16GK103627769SQ201310143845
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2013年4月24日 優先權日:2013年4月24日
【發明者】楊旭錦, 石慧 申請人:北京明新高科技發展有限公司