一種（S）-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑及其製備方法與流程

2023-09-23 18:02:15

本發明主要涉及製藥
技術領域：
，具體涉及一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑及其製備方法。
背景技術：
：左旋奧拉西坦化學名稱為：s-(-)-4-羥基-2-氧代吡咯烷-n-乙醯胺，為白色微晶狀粉末，熔點135～136℃，旋光度-36°(c＝1.00inwater)，左旋奧拉西坦的溶解性明顯優於消旋體。化學結構式如下所示：該藥於1987年在義大利上市，上市的劑型為片劑，800mg；膠囊，800mg；注射液，1g/5ml。目前國內只有奧拉西坦膠囊和注射液上市，且所用主要活性成分均為外消旋體。葉雷等在公開號為cn103735545a專利中提到左旋奧拉西坦對酒精中毒所致昏迷的促醒作用明顯，而右旋奧拉西坦基本沒有作用，左旋奧拉西坦的上述促醒效果為消旋奧拉西坦的2倍；左旋奧拉西坦對外傷、麻醉所致昏迷的促醒作用均顯著。張峰等在公開號為cn103599101a的專利中披露左旋奧拉西坦對液壓及自由落體所致創傷性腦損傷大鼠學習記憶認知功能障礙均有明顯的改善作用，其藥效遠高於右旋奧拉西坦。且200mg/kg左旋奧拉西坦與400mg/kg奧拉西坦的作用相當。藥代動力學研究結果顯示：左旋奧拉西坦和右旋奧拉西坦在比格犬體內無明顯手性轉化。比格犬單次靜脈注射給予左旋和2倍劑量的消旋奧拉西坦後血漿中左旋奧拉西坦的主要藥動學參數均無明顯差異。安全藥理、急毒、長毒等試驗結果表明，在同等劑量水平下，左旋奧拉西坦與奧拉西坦對受試動物或細胞的毒性無明顯差異。上述臨床前的研究結果表明，左旋奧拉西坦是奧拉西坦體內發揮藥效的主要活性成分，單獨使用本品可降低臨床使用劑量，降低潛在的毒副反應。現有注射用(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末其主要存在製備過程雜質增加明顯、產品無固定形狀、不易形成骨架、易出現幹縮和鼓泡現象，成品穩定性差，貨架期短，均一性不好，上下層性狀不一致，並且產品注射過程疼痛明顯，患者順應性差等問題。技術實現要素：本發明的目的在於提供一種具有固定形態、穩定性好、產品均一性好的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑。本發明的另一目的在於提供上述(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑的製備方法。本發明的目的是通過如下技術措施實現的：一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑，其特徵在於，它是以(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺為原料，再加入一定量的附加劑製得；其中所述附加劑為蔗糖、海藻糖、甘露醇、乳糖、葡萄糖、麥芽糖、葡聚糖、白蛋白、聚乙二醇、甘油、l-絲氨酸、維生素c、硫代硫酸鈉，甲硫氨酸、穀氨酸鈉、丙氨酸、甘氨酸、肌氨酸、磷酸鹽、醋酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲醇中的一種或多種。發明人在研究過程中發現，選擇特定的附加劑種類，配合附加劑特定用量配比、再配合特定的冷凍乾燥技術，可使得上述(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑在製備過程雜質增加較小、其具有固定形狀、易形成骨架、產品均一性好、上下層性狀一致，並且產品注射過程疼痛感有所減輕，；上述(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑，其特徵在於，它是以(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺、l-絲氨酸、甘露醇、聚乙二醇2000、甲硫氨酸、苯甲醇為原輔料，通過濃配、稀配、冷凍乾燥以及軋蓋步驟製得；其中原輔料用量分別為重量百分比的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺58％～65％、l-絲氨酸15％～23％、甘露醇10％～16％、聚乙二醇20002％～8％、甲硫氨酸3％～8％、苯甲醇1％～2％；所述冷凍乾燥步驟為快速將導熱油溫度冷凍至-40℃，保持恆溫60分鐘，以5℃/小時升溫至-10℃，保持恆溫80分鐘，在快速冷卻至-40℃，恆溫冷凍120分鐘，然後抽真空乾燥，以10℃/小時升溫至，-10℃恆溫150分鐘；以4℃/小時升溫至0℃，0℃恆溫300分鐘；以5℃/小時升溫至10℃，10℃恆溫240分鐘，以10℃/小時升溫至30℃，30℃恆溫60分鐘，同時前箱真空降達到10pa/10分時，凍乾結束。進一步的上述(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑，其特徵在於，它是由下列重量百分比的原輔料製得：(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺60％～63％、l-絲氨酸17％～20％、甘露醇11％～13％、聚乙二醇20003％～5％、甲硫氨酸4％～7％、苯甲醇1％～2％；將處方量的原輔料置於容器中，加入(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺5倍重量份的滅菌注射用水攪拌，溶解後，加入質量分數0.5％的針用活性炭，攪拌30min，隨後用0.45微米微孔濾膜濾過，收集濾液，備用；向濾液中加入滅菌注射用水至濾液體積的1000倍，用鹽酸或氫氧化鈉調節ph至7.0，隨後用0.22微米的微孔濾膜除菌過濾，取濾液合格後灌裝分裝於無菌玻璃瓶中，備用；快速將導熱油溫度冷凍至-40℃，保持恆溫60分鐘，以5℃/小時升溫至-10℃，保持恆溫80分鐘，在快速冷卻至-40℃，恆溫冷凍120分鐘，然後抽真空乾燥，以10℃/小時升溫至，-10℃恆溫150分鐘；以4℃/小時升溫至0℃，0℃恆溫300分鐘；以5℃/小時升溫至10℃，10℃恆溫240分鐘，以10℃/小時升溫至30℃，30℃恆溫60分鐘，同時前箱真空降達到10pa/10分時，凍乾結束。上述所需原輔料，均為本領域技術人員公知的，市場上均可購買到。一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺凍乾粉針的製備方法，其特徵在於，它是按如下步驟製得的：1.濃配：將處方量的原輔料置於容器中，加入(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺5倍重量份的滅菌注射用水攪拌，溶解後，加入質量分數0.5％的針用活性炭，攪拌30min，隨後用0.45微米微孔濾膜濾過，收集濾液，備用；2.稀配：向濾液中加入滅菌注射用水至濾液體積的1000倍，用鹽酸或氫氧化鈉調節ph至7.0，隨後用0.22微米的微孔濾膜除菌過濾，取濾液合格後灌裝分裝於無菌玻璃瓶中，備用；3.冷凍乾燥：快速將導熱油溫度冷凍至-40℃，保持恆溫60分鐘，以5℃/小時升溫至-10℃，保持恆溫80分鐘，在快速冷卻至-40℃，恆溫冷凍120分鐘，然後抽真空乾燥，以10℃/小時升溫至，-10℃恆溫150分鐘；以4℃/小時升溫至0℃，0℃恆溫300分鐘；以5℃/小時升溫至10℃，10℃恆溫240分鐘，以10℃/小時升溫至30℃，30℃恆溫60分鐘，同時前箱真空降達到10pa/10分時，凍乾結束；4.軋蓋：鋁塑組合蓋需經清洗後滅菌、乾燥，然後進行軋蓋，即得。本發明具有如下的有益效果：本發明(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑在製備過程中雜質增加較少，其整個製備過程雜質增加量僅為0.04％，產品具有固定形狀、在凍幹製備過程中無幹縮和鼓泡的現象，成品均一性好，上下層性狀一致，穩定性好，雜質少，貨架期內總雜質低於0.28％，貨架期長達24月，患者注射過程中疼痛感較輕，患者順應性好。具體實施方式下面通過實施例對本發明進行具體的描述，有必要在此指出的是以下實施例只用於對本發明進行進一步說明，不能理解為對本發明保護範圍的限制，在不背離本發明精神和實質的情況下，對本發明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬於本發明的範圍。實施例1一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑，按以下步驟製得：成分用量(重量百分比％)(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺60％l-絲氨酸18％甘露醇11％聚乙二醇20005％甲硫氨酸5％苯甲醇1％製成1000瓶製劑工藝：1.濃配：將處方量的原輔料置於容器中，加入(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺5倍重量份的滅菌注射用水攪拌，溶解後，加入質量分數0.5％的針用活性炭，攪拌30min，隨後用0.45微米微孔濾膜濾過，收集濾液，備用；2.稀配：向濾液中加入滅菌注射用水至濾液體積的1000倍，用鹽酸或氫氧化鈉調節ph至7.0，隨後用0.22微米的微孔濾膜除菌過濾，取濾液合格後灌裝分裝於無菌玻璃瓶中，備用；3.冷凍乾燥：快速將導熱油溫度冷凍至-40℃，保持恆溫60分鐘，以5℃/小時升溫至-10℃，保持恆溫80分鐘，在快速冷卻至-40℃，恆溫冷凍120分鐘，然後抽真空乾燥，以10℃/小時升溫至，-10℃恆溫150分鐘；以4℃/小時升溫至0℃，0℃恆溫300分鐘；以5℃/小時升溫至10℃，10℃恆溫240分鐘，以10℃/小時升溫至30℃，30℃恆溫60分鐘，同時前箱真空降達到10pa/10分時，凍乾結束；4.軋蓋：鋁塑組合蓋需經清洗後滅菌、乾燥，然後進行軋蓋，即得。為了更好的理解本發明，以下通過本發明穩定性試驗來進一步闡述發明藥物的有益效果，而非對本發明的限制。實驗一：本發明一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑穩定性實驗實驗材料：(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑樣品：為實施例1製得加速實驗方法：將實施例1製得的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑按上市包裝，置加速實驗箱中，一定時間取樣，對考察項目進行檢驗。加速實驗溫度：40±2℃溼度：rh75％±5％考察時間：0、1、2、3、6月考察指標：性狀、可見異物、ph、有關物質、含量、無菌檢查加速試驗穩定性記錄：加速實驗結果表明：加速6月樣品與0月樣品各項檢測指標質量相當，表明本品加速實驗6月，質量保持穩定，本品穩定性較好。長期實驗方法：將實施例1製得的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑按上市包裝，置長期留樣箱中，一定時間取樣，對考察項目進行檢驗。加速實驗溫度：25±2℃溼度：rh60％±10％考察時間：0、3、6、9、12、18、24月考察指標：性狀、可見異物、ph、有關物質、含量、無菌檢查長期試驗穩定性記錄：長期試驗表明：本品長期試驗24個月性狀、可見異物、ph值、有關物質、含量以及無菌檢查各項指標均無顯著變化，均符合生產用質量標準草案的各項相關規定。本品長期試驗24個月質量穩定，故本品貨架期最少24個月，長期試驗仍在繼續考察過程中。實驗二：本發明一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑製備過程對雜質增加的影響1.實驗材料：(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑樣品：按實施例1製備。(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑對照樣品：為缺少甲硫氨酸的樣品，其製備工藝同實施例1。2.實驗方法：實施例1製備過程中，分別在製備前後取樣，檢測其有關物質，考察製備過程對有關物質的影響。同時，取缺少甲硫氨酸的處方作為對照處方，按實施例1的製備方法製備，同樣在製備前後取樣檢測其有關物質，考察製備過程對有關物質的影響。3.實驗結果見下表：供試品制各前有關物質％製備後有關物質％製備過程有關物質增加量％實施例10.15％0.19％0.04％對照樣品10.15％0.35％0.20％4.實驗結論：實施例1的處方，製備過程有關物質增加僅為0.03％，明顯優於對照樣品。實驗三：小鼠扭體法觀察注射過程中的疼痛感試驗試驗樣品：按實施例1製得的一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑作為供試品，未加苯甲醇的處方按實施例1製得的(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑作為對照樣品；目的：比較兩種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑注射過程中的疼痛程度方法：取實驗用小白鼠，皮下注射(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末(生理鹽水溶解稀釋至10ml)，觀察小白鼠是否會發生扭體反應，根據小鼠發生扭體反應的機率來判斷注射過程中疼痛感的強弱，供試品與對照樣品各重複30次試驗；試驗結果：試驗結果見下表：產品名稱實驗樣本(小鼠)發生扭體反應個體數扭體反應發生率％供試品30隻2隻6.7％對照樣品30隻23隻76.7％結論：由上表可知，本發明一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑注射過程中疼痛感明顯弱於對照樣品。實施例2一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑，按以下步驟製得：成分用量(重量百分比％)(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺63％l-絲氨酸17％甘露醇11％聚乙二醇20003％甲硫氨酸5％苯甲醇1％製成1000瓶製劑工藝：照實施例1的製備工藝製得。按實施例1的試驗方法，實施例2樣品穩定性試驗結果表明加速6月樣品質量穩定，長期24個月質量穩定，故本品有效期最少24個月。實施例2製備過程對雜質增加的影響實驗結果表明本品在製備過程中產品雜質增加量較小，滿足產品要求。小鼠扭體法觀察注射過程中的疼痛感試驗結果表明，實施例2樣品注射過程中疼痛感明顯弱於對照樣品。實施例3一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑，按以下步驟製得：成分用量(重量百分比％)(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺61％l-絲氨酸19％甘露醇12％聚乙二醇20003％甲硫氨酸3％苯甲醇2％製成1000瓶製劑工藝：照實施例1的製備工藝製得。按實施例1的試驗方法，實施例3樣品穩定性試驗結果表明加速6月樣品質量穩定，長期24個月質量穩定，故本品有效期最少24個月。實施例3製備過程對雜質增加的影響實驗結果表明本品在製備過程中產品雜質增加量較小，滿足產品要求。小鼠扭體法觀察注射過程中的疼痛感試驗結果表明，實施例3樣品注射過程中疼痛感明顯弱於對照樣品。實施例4-6：一種(s)-4-羥基-2氧代-1-吡咯烷乙醯胺無菌粉末注射劑，按以下重量的原輔料製備而得，製備方法同實施例1：製劑工藝：照實施例1的製備工藝製得。按實施例1的試驗方法，實施例4、5、6樣品穩定性試驗結果表明加速6月樣品質量穩定，長期24個月質量穩定，故本品有效期最少24個月。實施例4、5、6製備過程對雜質增加的影響實驗結果表明本品在製備過程中產品雜質增加量均較小，滿足產品要求。小鼠扭體法觀察注射過程中的疼痛感試驗結果表明，實施例4、5、6樣品注射過程中疼痛感明顯弱於對照樣品。當前第1頁12