一種水塔花的離體培養基的製作方法
2023-10-06 22:08:09
本發明涉及組織培養技術領域，具體是一種水塔花的離體培養基。
背景技術：
水塔花(Billbergia pyramidalis Lindl.)鳳梨科多年生常綠草本多漿植物，莖甚短。葉闊披針形，急尖，邊緣有細鋸齒，硬革質，鮮綠色，表面有厚角質層和吸收鱗片。穗狀花序直立，高出葉叢，苞片粉紅色，花冠朱紅色，花瓣外卷，邊緣帶紫色。葉片從根莖處旋疊狀叢生，基部呈蓮座狀，中心呈筒狀。多於冬春季開花。葉片革質；青翠而光澤，叢生成蓮座狀，端莊秀麗；葉基部相互抱合，使植株中心成筒狀，內可盛水而不漏，狀似水塔，故得名「水塔花」。喜溫暖、溼潤、半陰環境。不耐寒。稍耐旱，原產巴西。水塔花株叢青翠，花色豔麗，是良好的盆栽花卉。盛開的水塔花是點綴陽臺、廳室的佳品，為良好的室內室栽觀葉植物。原產美洲熱帶，附生在熱帶森林的樹上或腐殖質中。中國溫室多有栽培，尤其是南方地區。然而，水塔花傳統的育苗繁殖方法產量降低，病毒積累嚴重，品種退化，品質和產量大幅度下降，種植效益下降。組培快繁技術已在很多植物上作為經濟、高效的繁殖方法應用，周期短、繁殖係數高、成本低，並不受時間和空間的制約。
技術實現要素：
本發明針對現有技術的不足，滿足人工快速繁育、大面積豐產栽培的需要，提供一種水塔花的離體培養基。
為了實現上述目的，本發明採用了以下技術方案：
一種水塔花的離體培養基，其特徵在於，包括不同階段的三種培養基，各種培養基的原料及其成分濃度如下，
初代培養基為：在改良White培養基基礎上，先將硫酸鐵的濃度調整為3.0～3.2mg/L，將硫酸鈉的濃度調整為160～180mg/L，再添加天冬氨酸6～8mg/L，添加吲哚乙酸2～3mg/L；
繼代培養基為：在改良White培養基基礎上，先將硼酸的濃度調整為2.0～2.2mg/L，將氧化鉬的濃度調整為0.0003～0.0005mg/L，另外再添加維生素K1 0.5～0.8mg/L，添加吲哚乙酸1～1.2mg/L，添加萘乙酸1.2～1.5mg/L；
生根培養基為：在B5培養基基礎上，另外再添加鉬酸銨0.01～0.02mg/L，添加赤黴素2～3mg/L，用石灰水調節pH為7.2。
與現有技術相比較，本發明具備的有益效果：
本發明培養基針對水塔花生長特點而設計，能夠滿足水塔花組織培養各個階段的營養需要，利用本發明所述離體培養基對水塔花進行組織培養，存活率高，獲得的水塔花幼苗健壯生命力頑強，移栽後能夠快速適應自然生長條件，有效地提高水塔花的繁殖係數，為水塔花商業化生產提供充足的種苗源。與播種繁殖相比，組織培養法能有效縮短育苗周期，能夠在室內大量連續地生產，實現工廠化、專業化和規模化，提高種苗的載培成活率，提高產量和品質。
具體實施方式
下面通過實施例對本發明的技術方案作進一步闡述。
實施例1
一種水塔花的離體培養基，包括不同階段的三種培養基，各種培養基的原料及其成分濃度如下，
初代培養基為：在改良White培養基基礎上，先將硫酸鐵的濃度調整為3.2mg/L，將硫酸鈉的濃度調整為180mg/L，再添加天冬氨酸8mg/L，添加吲哚乙酸3mg/L；
繼代培養基為：在改良White培養基基礎上，先將硼酸的濃度調整為2.2mg/L，將氧化鉬的濃度調整為0.0005mg/L，另外再添加維生素K1 0.8mg/L，添加吲哚乙酸1.2mg/L，添加萘乙酸1.5mg/L；
生根培養基為：在B5培養基基礎上，另外再添加鉬酸銨0.02mg/L，添加赤黴素3mg/L，用石灰水調節pH為7.2。
實施例2
一種水塔花的離體培養基，包括不同階段的三種培養基，各種培養基的原料及其成分濃度如下，
初代培養基為：在改良White培養基基礎上，先將硫酸鐵的濃度調整為3.0mg/L，將硫酸鈉的濃度調整為160mg/L，再添加天冬氨酸6mg/L，添加吲哚乙酸2mg/L；
繼代培養基為：在改良White培養基基礎上，先將硼酸的濃度調整為2.0mg/L，將氧化鉬的濃度調整為0.0003mg/L，另外再添加維生素K1 0.5mg/L，添加吲哚乙酸1mg/L，添加萘乙酸1.2mg/L；
生根培養基為：在B5培養基基礎上，另外再添加鉬酸銨0.01mg/L，添加赤黴素2mg/L，用石灰水調節pH為7.2。
實施例3
一種水塔花的離體培養基，包括不同階段的三種培養基，各種培養基的原料及其成分濃度如下，
初代培養基為：在改良White培養基基礎上，先將硫酸鐵的濃度調整為3.0～3.2mg/L，將硫酸鈉的濃度調整為160～180mg/L，再添加天冬氨酸6～8mg/L，添加吲哚乙酸2～3mg/L；
繼代培養基為：在改良White培養基基礎上，先將硼酸的濃度調整為2.0～2.2mg/L，將氧化鉬的濃度調整為0.0003～0.0005mg/L，另外再添加維生素K1 0.5～0.8mg/L，添加吲哚乙酸1～1.2mg/L，添加萘乙酸1.2～1.5mg/L；
生根培養基為：在B5培養基基礎上，另外再添加鉬酸銨0.01～0.02mg/L，添加赤黴素2～3mg/L，用石灰水調節pH為7.2。
實施例4
一種利用本發明所述離體培養基對水塔花進行培養的方法，包括如下步驟：
(1)獲取外植體並消毒
選取健壯植株新生的幼嫩枝芽，自來水洗滌枝芽表面汙垢塵土，先酒精浸泡，再升汞消毒，最後無菌水衝洗乾淨後得到消毒外植體，
(2)初代培養
將消毒外植體分割成0.6～1.0cm的帶芽莖段，然後接入初代培養基中培養32～36天獲得不定芽，
初代培養條件為：溫度為28±2℃，溼度為55～60％，光照時間為8～10小時/天，光照強度為1800～20001x，初代培養第1～7天，每天施加超聲場3～4小時，超聲場功率為10～15W/cm2，超聲場頻率為25～28KHz，初代培養第8～15天，每天施加超聲場4～6小時，超聲場功率為20～22W/cm2，超聲場頻率為30～35KHz；
初代培養基為：在改良White培養基基礎上，先將硫酸鐵的濃度調整為3.1mg/L，將硫酸鈉的濃度調整為170mg/L，再添加天冬氨酸7mg/L，添加吲哚乙酸2.5mg/L；
(3)繼代培養
將不定芽轉移至繼代培養基中培養40～45天獲得繼代培養苗，
繼代培養條件為：溫度為30±2℃，溼度為65～70％，光照時間為12～15小時/天，光照強度為3000～35001x，
繼代培養基為：在改良White培養基基礎上，先將硼酸的濃度調整為2.1mg/L，將氧化鉬的濃度調整為0.0004mg/L，另外再添加維生素K1 0.6mg/L，添加吲哚乙酸1.1mg/L，添加萘乙酸1.3mg/L；
(4)生根培養
將繼代培養苗轉移至生根培養基中培養20～25天得到水塔花幼苗，
生根培養條件為：溫度為30±2℃，溼度為40～50％，光照時間為12～15小時/天，光照強度為5000～60001x，
生根培養基為：在B5培養基基礎上，另外再添加鉬酸銨0.015mg/L，添加赤黴素2.5mg/L，用石灰水調節pH為7.2；
(5)煉苗和移栽
生根培養結束後，打開培養瓶蓋，在自然光下進行開瓶練苗5～7天，然後將水塔花幼苗用清水多次衝洗去除殘留培養基，用質量分數3％的多菌靈浸泡根部30min後再清水清洗後移入塑料小盆中，塑料小盆放置在遮光率60％～70％的大棚中2～3周，大棚中溫度25～28℃，噴霧灑水保持溼度為75～85％，大棚煉苗一個月後移栽至定植地中。