一種提取發酵液中納他黴素的方法
2023-10-29 00:59:27 1
專利名稱：一種提取發酵液中納他黴素的方法
技術領域：
本發明涉及一種發酵液中納他黴素的提取方法。
背景技術：
納他黴素(natamycin)也稱遊鏈黴素或匹馬菌素(pimaricin)，是一種重要的多 烯類抗菌素。納他黴素是一種高效殺真菌劑，對黴菌、酵母菌具有極強的抑制和殺滅作用。 因此，納他黴素用於食品防腐不僅可以解決食品腐敗問題，還能減少真菌毒素對人類的毒 害。與其他抗菌成分相比，納他黴素對哺乳動物細胞的毒性極低，可以廣泛應用於由真菌引 起的疾病。除此之外，由於納他黴素的溶解度低，可用其對食品的表面進行處理以增加食品 保質期而不影響食品的風味和口感。 納他黴素除了在食品中的應用外，還可以用於醫藥、日化、飼料、畜牧和農業等領 域。醫藥上可以用於眼科等外用藥；在日化上用在消毒、洗髮香波、浴液等；在飼料上，可以 作為飼料防黴劑，防病劑和促生長劑；在畜牧上可以防止牛羊馬洗液防止真菌病，也可以用 在寵物上；在農業上可以作為綠色農藥，可以應用在植物組織培養中防止黴菌汙染，可以用 在蘑菇栽培上，提高蘑菇的產量和質量。 國內外目前使用的食品防腐劑的防腐效果均受微生物種類、食品成分、pH值和溶 解性等因素的影響，且在常規使用量下，影響食品的風味，致使這些防腐劑的使用受到限 制，不能滿足現代食品加工的需要。而且，隨著人們對化學合成食品防腐劑安全認識的提 高，低毒、高效、廣譜及經濟實用的生物防腐劑的研究和開發，受到人們的關注。
納他黴素是通過發酵法製備的，產生菌一般為納塔爾鏈黴菌、褐黃孢鏈黴菌等。最 早的描述其回收過程的專利一般都要求多種純化步驟，並包含一些相對來說比較昂貴的單 元操作。英國專利GB846933發現了一種吸附一洗提的方法，可以用水溶性極性溶劑如甲 醛、丁醇和丙酮從發酵液中提取納他黴素。美國專利USP3892850提出了一種方法，用不 易溶於水的有機溶劑從發酵液中萃取納他黴素，然後從溶劑中回收納他黴素。美國專利 USP3378441聲稱可以用鹽析的方法從發酵液中分離納他黴素，並輔以溶劑溶解和濃縮沉 澱。最新的專利GB2106498，描述了用真空濃縮或丁醇萃取過濾了的發酵液來得到一種原始 的抗真菌複合體，而從這種複合體中可以得到納他黴素。世界專利W092/10550發現納他黴 素易溶於低pH的甲醇，之後只要除去固形物，提高pH以沉澱析出納他黴素即可。
發明內容
本發明公開了一種納他黴素提取回收的方法。其方法是納他黴素發酵液留下固形 物，低pH條件下異丙醇溶液中溶解，除去固形物，回調pH值，結晶，醇洗，水洗，真空乾燥得 到成品。本法可使納他黴素回收率達到60%，且工藝過程相對簡單，適於工業化生產。
具體步驟如下 1.在含有納他黴素的發酵液中加入2倍體積的異丙醇-水-冰乙酸(體積比 40 : 50 : 10)，保持混合液的溫度在20到30。C之間。
2.在上述溫度條件下加入一種酸，調整混合液的pH值為1到3，這使得納他黴素 在提取介質中高度可溶，任何常規的兼容的酸性物料都可使用。
3.在上述溫度條件下超聲波處理1小時。 4.通過過濾或者離心，分離出混合液中的固體，收集富含納他黴素的混合液。
5.任何兼容性的物料調整混合液的pH為6到9之間，此時混合液中納他黴素的溶 解度下降而逐漸結晶沉澱下來。 6.通過板框壓濾或離心的方法分離出納他黴素結晶體，洗滌乾燥後得到粗品。
具體實施方式
實施例1 : 該實施例說明了在控制pH值和溫度的條件下提取納他黴素。 發酵法製備的含有納他黴素、生物體、水和少量營養物和雜質的發酵液，採用板框 過濾法濃縮至約含30%固體，濾餅中含有約6%重量的納他黴素。 大約50g的濾餅與約lOOmL的異丙醇_水_冰乙酸(體積比40 : 50 : 10)混合
以生成一種萃取介質，在3(TC下將鹽酸加入其中，降低pH值至約2，並將此介質於超聲波儀 中處理l小時左右。 過濾漿液，加入氫氧化鈉溶液調節pH值至7左右，並在此條件下緩慢攪拌保持約 l小時，此時，白色晶體析出。 用過濾法分離出沉澱，並在5(TC左右真空乾燥。得到約6g幹品。產品含納他黴素
約佔95%重量。
實施例2 : 該實施例說明了在控制的pH值和溫度條件下提取納他黴素。重複實施例l的過 程，但加入鹽酸時萃取介質溫度為約2(TC，乾燥後得到4. 5g左右產品。產品約含90%重量 的納他黴素。
權利要求
一種提取發酵液中納他黴素的方法，包括下列步驟(1)將體積比為40∶50∶10的異丙醇-水-冰乙酸加入發酵液，並維持該萃取介質的溫度為20到30℃之間；(2)調節該萃取介質的pH值為1到3；(3)超聲波處理1小時；(4)將萃取介質中的固體除去以形成納他黴素混合液；(5)將混合液的pH值提高至6到9之間；(6)回收沉澱的納他黴素。
2. 根據權利要求1所述的一種提取發酵液中納他黴素的方法，其特徵在於所述發酵液 中至少含有40%重量的固體。
3. 根據權利要求1或2所述的一種提取發酵液中納他黴素的方法，其特徵在於在步驟 (1)之前，將納他黴素發酵液中除去水，以使其含有少於10%重量的水。
全文摘要
本發明公開了一種納他黴素的提取方法，具體說是一種從發酵液中提取納他黴素的方法。其方法是從納他黴素發酵液中得到固形物，將固形物在低pH條件下用異丙醇-水-冰乙酸溶液溶解，除去固形物，回調pH值，結晶，醇洗，水洗，真空乾燥得到成品。本法可使納他黴素回收率達到60％，且工藝過程相對簡單，適於工業化生產。
文檔編號C07H1/06GK101735293SQ20081017625
公開日2010年6月16日 申請日期2008年11月12日 優先權日2008年11月12日
發明者丁春華, 朱至 申請人:鎮江東方生物工程設備技術有限責任公司