以水為溶媒提取高純葛根素的方法
2023-10-17 14:41:54 2
專利名稱：以水為溶媒提取高純葛根素的方法
技術領域：
本發明屬於中約提取製備技術領域，尤其是一種以水為溶媒提取高純度葛根素的方法。
背景技術：
葛根(Radixpuerariae)為豆科植物野葛 Pueraria lobata (Wiolld) Ohwi 的乾燥根，其味甘、辛、性平，其主要成分是澱粉，此外還含有約12%的黃酮類化合物，包括大豆(黃豆)甙、大豆甙元、葛根素等10餘種；並含有胡蘿蔔甙、胺基酸、香豆素類等。既是中藥材又是營養豐富的食用原料。葛根具有解痙退熱、生津、透疹、昇陽止瀉等功能。同其它大多數黃酮類化合物相似，葛根黃酮類化合物也具有多種藥理功能，如改善血液循環、降血壓、降血糖、降血脂、抑制動脈硬化、抗心率失常、抗血小板聚集、抗腫瘤、抗缺氧與抗氧化等。葛根素是從葛根中所提取得到的一種異黃酮類化合物，是葛根總黃酮中的一種。實驗證明其有擴張心腦血管，降低心肌氧耗，改善心肌收縮功能和促進血液微循環作用，可用於治療冠心病、視網膜動、靜脈阻塞和突發性耳聾等微循環障礙病。現在葛根黃酮及葛根素因其顯著的藥用價值己被廣泛應用於醫藥工業、食品工業、日用化工等領域。近年來，天然植物有效成份因其功效明顯、天然低毒等特點倍受青睞，引發了全世界範圍使用天然草本植物來預防和治療各種疾病的熱潮。隨著對天然植物藥材研究的深入開展，葛根的研究範圍有了進一步拓展，其中葛根黃酮和葛根素提取及純化的研究受到了廣泛關注，目前葛根總黃酮的提取的主要方法有:(I)醇回流法，主要以水、乙醇、鹼性醇、石灰水、甲醇、丙酮等溶媒，加熱回流。回流提取2 3次，提取葛根總黃酮；(2)醇滲漉法；
(3)浸潰法；(4)微波輔助萃取法；(5)酶解回流法；(6)超聲逆流萃取法；(7)離子配位萃取法。市場對葛根黃酮的需求越來越大。但由於科技投入的不足，國內的葛根黃酮製取技術相對落後，且葛根黃酮和葛根素的提取方法多為有機溶劑提取，生產效率低、能耗大、環境汙染嚴重、雜質含量高，產品缺乏市場競爭力。以水代替有機溶劑做溶媒對葛根黃酮和葛根素進行高純提取解決了有機殘留問題。通過檢索發現兩篇與本發明相關的專利文獻，其一為葛根素及其提取方法(CN1163127)，主要包括以下步驟:(I)葛根粉碎，水煎煮；(2)濃縮得水浸膏；(3)乙醇沉澱得醇浸膏；(4)聚醯胺柱層析；(5)水洗脫，濃縮；(6)放置析晶得粗品；(7)精製。其二是葛根素提取物的生產方法(CN1927876)，主要包括以下步驟:(1)葛根粉碎水煎煮；(2)離子交換樹脂層析；(3)大孔樹脂層析；上述專利文獻是在葛根素純化的技術上改進，但與本專利申請的技術方案有本質上的不同
發明內容
本發明的目的在於克服現有技術的不足之處，提供一種以水為溶媒提取高純度葛根素的方法。本發明的目的是通過以下技術方案實現的:(I)葛根素提取:將乾燥的葛根韌皮部粉碎成粗粉與水混合，於1.5MPa，60°C熱浸IOh0過濾，濾液備用。再加入等量水於濾渣中，相同溫度和壓力條件下熱浸15h，過濾，反覆3次。在真空度< 0.1MPa, 45 60°C下將濾液濃縮到10%以上即可得到葛根總黃酮浸膏，有效成分提取率達90%以上；(2)葛根素純化:得到的葛根總黃酮浸膏經HPD-600大孔樹脂進行吸附、洗脫。洗脫時先用蒸餾水洗去糖類、蛋白質、鞣質等水溶性雜質，然後改用60%乙醇洗脫，洗脫液濃縮回收乙醇，得到的浸膏配製成水溶解液經AB-8型大孔吸附樹脂層析柱進行吸附，用50%乙醇洗脫。收集洗脫液濃縮回收乙醇。(3)葛根素脫色:洗脫液經三氧化二鋁柱脫色，再經減壓濃縮至原洗脫液的50%，濃縮液靜置24h析出後，抽濾乾燥得粗製品。(4)葛根素精製:粗製品加入殼聚糖反覆結晶沉澱，濾液濃縮乾燥得到純度大於99%的葛根素。
而且所述步驟⑴中葛根韌皮部粗粉與水的質量比為Ig: SmL ；而且所述步驟⑵中HPD-600大孔樹脂的條件為:徑高比為1:6，上樣濃度50mg/mL，最大上樣量為3BV，流速為lmL/min，洗脫劑用量5BV ；而且所述步驟(2)中AB-8型大孔吸附樹脂層析柱的條件為:徑高比為1: 5，上樣濃度為15mg/mL，最大上樣量為2.5BV，流速為3BV/h，洗脫劑用量2.5BV ；而且所述步驟(4)中粗製品反覆結晶沉澱所採用的方法是將粗製品配製成0.1g/HiL的溶液，按1:1的比例加入1%殼聚糖醋酸溶解液，於40°C攪拌15min，然後靜置2h，過濾，按上述方法重複3次。本發明的優點和積極效果是:本發明以水為溶媒，提取得到高純度葛根素。該方法用水代替以往有機溶劑做溶媒，減少了有機殘留和對環境的汙染，降低了生產成本，提高了工作效率。工序安全、銜接合理簡捷，易於推廣。
具體實施例方式下面結合實施例，對本發明進一步說明，下述實施例是說明性的，不是限定性的，不能以下述實施例來限定本發明的保護範圍。本發明的具體實例:l、500g乾燥的葛根韌皮部粉碎成粗粉與4L的蒸餾水混合，於1.5MPa，60°C熱浸IOh0過濾，濾液備用。再加入等量水於濾渣中，相同溫度和壓力條件下熱浸15h，過濾，反覆3次。在真空度< 0.1MPa, 45 60°C下將濾液濃縮到10%以上即可得到葛根總黃酮浸膏，有效成分提取率達90%以上；2、得到的葛根總黃酮浸膏配製成50mg/mL的溶液，經HPD-600大孔樹脂進行吸附、洗脫。HPD-600大孔樹脂徑高比為1: 6，最大上樣量為3BV，流速為lmL/min，洗脫劑用量5BV。洗脫時先用蒸餾水洗去糖類、蛋白質、鞣質等水溶性雜質，然後改用60%乙醇洗脫，洗脫液濃縮回收乙醇。得到的浸膏配製成水溶解液經AB-8型大孔吸附樹脂層析柱進行吸附，用50%乙醇洗脫。徑高比為1: 5，上樣濃度為15mg/mL，最大上樣量為2.5BV，流速為3BV/h，洗脫劑用量2.5BV,收集洗脫液濃縮回收乙醇。3、洗脫液經三氧化二鋁柱脫色，再經減壓濃縮至原洗脫液的50%，濃縮液靜置24h析出後，抽濾乾燥得粗製品。4、將粗製品配製成0.lg/mL的溶液，按1:1的比例加入1%殼聚糖醋酸溶解液，於40°C攪拌15min，然後靜置2h，過濾，按上述方法重複3次，濾液濃縮乾燥，得到純度大於99%的葛根素。·
權利要求
1.一種以水為溶媒提取高純度葛根素的方法，其特徵在於: 步驟為: (1)葛根素提取:將乾燥的葛根韌皮部粉碎成粗粉與水混合，於1.5MPa，60°C熱浸10h。過濾，濾液備用。再加入等量水於濾渣中，相同溫度和壓力條件下熱浸15h，過濾，反覆3次。在真空度<0.lMPa，45 60°C下將濾液濃縮到10%以上即可得到葛根總黃酮浸膏，有效成分提取率達90%以上； (2)葛根素純化:得到的葛根總黃酮浸膏經HPD-600行吸附、洗脫。洗脫時先用蒸餾水洗去糖類、蛋白質、鞣質等水溶性雜質，然後改用60%乙醇洗脫，對洗脫液進行濃縮並回收乙醇，得到的浸膏配製成水溶解液經AB-8型大孔吸附樹脂層析柱進行吸附，用50%乙醇洗脫。收集洗脫液濃縮並回收乙醇。
(3)葛根素脫色:洗脫液經三氧化二鋁柱脫色，再經減壓濃縮至原洗脫液的50%，濃縮液靜置24h晶體析出後，抽濾乾燥得粗製品。
(4)葛根素精製:粗製品加入殼聚糖反覆結晶沉澱，濾液濃縮乾燥得到純度大於99%的葛根素。
2.根據權利要求1所述的以水為溶媒提取高純度葛根素的方法，其特徵在於:所述步驟⑴中葛根韌皮部粗粉與水的質量比為Ig: 8mL。
3.根據權利要求1所述的以水為溶媒提取高純度葛根素的方法，其特徵在於:所述步驟(2)中HPD-600大孔樹脂的條件為:徑高比為1: 6，上樣濃度50mg/mL，最大上樣量為3BV，流速為lmL/min，洗脫劑用量5BV。
4.根據權利要求1所述的以水為溶媒提取高純度葛根素的方法，其特徵在於:所述步驟(2)中AB-8型大孔吸附樹脂層析柱的條件為:徑高比為1: 5，上樣濃度為15mg/mL，最大上樣量為2.5BV，流速為3BV/h，洗脫劑用量2.5BV。
5.根據權利要求1所述的以水為溶媒提取高純度葛根素的方法，其特徵在於:所述步驟(4)中粗製品反覆結晶沉澱所採用的方法是將粗製品配製成0.lg/mL的溶液，按1:1的比例加入I %殼聚糖醋酸溶解液， 於40°C攪拌15min，然後靜置2h，過濾，按上述方法重複3次。
全文摘要
本發明涉及一種以水為溶媒提取高純葛根素的方法，該方法是以水為溶媒進行提取，將得到的葛根總黃酮浸膏通過HPD-600大孔樹脂進行吸附洗脫，再經AB-8型大孔吸附樹脂柱吸附洗脫後，經三氧化二鋁柱脫色，減壓濃縮乾燥製得粗製品；粗製品加入殼聚糖反覆結晶沉澱，得到純度為99％以上的葛根素。本發明採用水替代有機溶劑做溶媒，對葛根素進行提取，得到高純度的葛根素。解決了有機殘留問題，減少了對環境的汙染。工序安全、銜接合理簡捷，易於推廣。
文檔編號C07D407/04GK103224491SQ20131019233
公開日2013年7月31日 申請日期2013年5月22日 優先權日2013年5月22日
發明者張朋 申請人:天津道谷生物科技有限公司