一種雙酚a分子印跡聚合物固相萃取柱的製備方法
2023-10-25 14:03:32 2
專利名稱：一種雙酚a分子印跡聚合物固相萃取柱的製備方法
技術領域：
本發明涉及一種固相萃取柱的製備方法，具體涉及一種雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱的製備方法。
背景技術：
雙酚A分子(Bisphenol A，CAS 80-05-7，BPA)是一種環境內分泌幹擾物，主要用於生產聚碳酸酯和環氧樹脂，是一種重要的化工原料。BPA無處不在，從礦泉水瓶、醫療器械到及食品包裝的內裡，都有它的身影。每年，全世界生產2700萬噸含有BPA的塑料。但BPA也能導致內分泌失調，威脅著胎兒和兒童的健康。癌症和新陳代謝紊亂導致的肥胖也被認為與此有關。歐盟認為含雙酚A奶瓶會誘發性早熟，從2011年3月2日起，禁止含生產化學物質雙酚A(BPA)的嬰兒奶瓶。目前，雙酚A的測定主要採用色譜法、酶法和免疫法等，這些分析技術的精確度、靈敏度都很高，但其對樣品的前處理要求非常高，需要從複雜的基質樣品中將低濃度的目標化合物高效提取、純化和濃縮；且儀器價格昂貴，過程複雜，耗時較長。 近年來,固相萃取(Solid-phase extraction, SPE)已成為痕量分析的常用富集技術。許多商用固相萃取吸附劑，由於其選擇性不高，對於組分複雜的樣品(如生物、藥物及環境樣品)來說，常常發生共萃取現象。如果採用高選擇性的SPE材料則可以避免這樣的問題，具有這樣高選擇性的吸附劑目前用的最多的是免疫吸附劑(immunosorbnet, IS)。但由於IS價格昂貴且性質不穩定。而樣品前處理是分析過程中的關鍵環節，直接影響著分析結果的準確度和精密度，因此人們不得不尋找合成仿生抗體的途徑，分子印跡聚合物(MIP)用於固相萃取是很有利的替代方法。分子印跡聚合物具有特異性和親和性，用作固相萃取劑，可克服生物或環境樣品體系複雜、預處理手續繁雜等不利因素，為樣品的採集、富集和分析提供了很大的方便，可用於醫藥、食品和環境分析樣品的製備，對於痕量分析有重要作用。目前，有關雙酚A分子印跡聚合物在特定環境中的識別專屬性和靈敏性研究則報導很少，將此技術用於環境監測領域的研究更少。目前雙酚A分子在環境樣品前處理中存在步驟複雜繁瑣，耗時多，工作量大等問題。同時，目前商品化的SPME裝置也有不足之處萃取頭塗層品種較少，不能滿足一些特殊樣品的分析；萃取頭耐溫性差，高溫下容易脫落，價格高且壽命短。
發明內容
本發明的目的在於克服現有技術存在的以上問題，提供一種雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱的製備方法。為實現上述技術目的，達到上述技術效果，本發明通過以下技術方案實現一種雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱的製備方法，包括以下步驟步驟I)取280-330mg的雙酚A分子印跡聚合物，加入4_5ml的第一有機溶劑混合均勻，製成漿液，裝入固相萃取裝置中；步驟2)將所述漿液填入均勻後用8_15ml的第二有機溶劑對萃取柱進行衝洗，重複3-5次，然後用真空泵抽乾；步驟3)使用前，將製備好的填料雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱用8_12ml的第三有機溶劑浸潤。優選的，步驟I中所述的第一有機溶劑為甲醇。進一步的，步驟I中採用超聲法使所述雙酚A分子印跡聚合物與所述第一有機溶劑均勻混合，混合時間10-20min。進一步的，步驟I中所述的固相萃取裝置採用離線固相萃取方式將固相萃取柱橡膠塞接於抽濾瓶口，抽濾瓶接上帶三通閥的緩衝瓶，再接上真空泵，通過調節三通閥控制萃取流量。優選的，步驟2中所述的第二有機溶劑為甲醇。優選的，步驟3中所述的第三有機溶劑為甲苯。本發明的有益效果是I、實驗證明，採用甲醇溶劑作為洗脫溶劑，洗脫效率最高。2、在洗脫液中，只有雙酚A分子被洗脫下來，回收率達到76. 7%，而苯酚和四溴雙酚A均未被洗脫下來。說明雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱具有明顯的選擇吸附識別能力。3、進行樣品前處理時，具有工藝簡單，特異選擇性分離、富集的優良效果。跟常規的C18柱相比，具有性能穩定、抗腐蝕性、耐高溫性強等優勢。上述說明僅是本發明技術方案的概述，為了能夠更清楚了解本發明的技術手段，並可依照說明書的內容予以實施，以下以本發明的較佳實施例並配合附圖詳細說明如後。本發明的具體實施方式
由以下實施例及其附圖詳細給出。
此處所說明的附圖用來提供對本發明的進一步理解，構成本申請的一部分，本發明的示意性實施例及其說明用於解釋本發明，並不構成對本發明的不當限定。在附圖中圖I固相萃取裝置示意圖；圖2四種不同極性溶劑的洗脫效率圖(將甲醇溶劑洗脫的溶液鋒面積定為I. 00)。
具體實施例方式下面將參考附圖並結合實施例，來詳細說明本發明。一種雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱的製備方法，包括以下步驟 步驟I)取280-330mg的雙酚A分子印跡聚合物，加入4_5ml的甲醇，採用超聲法混合10-20min,製成眾液,裝入固相萃取裝置中；步驟2)將所述漿液填入均勻後用8_15ml的甲醇對萃取柱進行衝洗，重複3_5次，然後用真空泵抽乾；步驟3)使用前，將製備好的填料雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱用8_12ml的甲苯浸潤。步驟I中所述的固相萃取裝置採用離線固相萃取方式將固相萃取柱橡膠塞接於抽濾瓶口，抽濾瓶接上帶三通閥的緩衝瓶，再接上真空泵，通過調節三通閥控制萃取流量，參照圖I所示。
實施例I :分別取ImL濃度為O. lmmol/L的雙酚A、苯酚、四溴雙酚A的甲苯溶液，置於IOmL容量瓶中，超聲混合均勻後作為底物分子，加入至固相萃取柱上端，用IOmL氯仿淋洗萃取柱，收集淋洗液；分別選擇四種不同極性溶劑-乙腈、甲醇、乙醇、丙酮作為洗脫溶齊IJ，對固相萃取柱進行清洗，對洗脫條件進行優化。然後用雙酚A分子印跡聚合物萃取柱富集實際樣品並對其進行評價。結果表明，四種洗脫溶劑中，採用甲醇溶劑作為洗脫溶劑為最佳。如圖2所示。實施例2 :分別取ImL濃度為O. lmmol/L的雙酚A、苯酚、四溴雙酚A的甲苯溶液，置於IOmL容量瓶中，超聲混合均勻後作為底物分子，加入至固相萃取柱上端，控制流速為
O.5mL/min。流出液收集完後,用IOmL氯仿淋洗萃取柱,流速為O. 2mL/min,收集淋洗液；再用IOmL甲醇洗脫萃取柱，流速為O. 2mL/min，收集洗脫液。流出液、淋洗液和洗脫液分別用氮吹儀濃縮至幹，用甲醇定容至lmL，由高效液相色譜儀測定各種化合物的濃度。結果表明， 雖然苯酚和四溴雙酚A都是雙酚A分子結構相似的化合物，但是檢測結果有著巨大的區別。在洗脫液中，只有雙酚A分子被洗脫下來，回收率達到76. 7%，而苯酚和四溴雙酚A均未被洗脫下來。說明雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱具有明顯的選擇吸附識別能力。對比實驗在兩組空白樣品中加入相同計量的雙酚A分子印跡聚合物與苯酚、四溴雙酚A均勻混合的底物分子，分別採用具體實施利I中的雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱和非印跡聚合物固相萃取柱進行吸附及洗脫試驗進行檢測，結果如下表所示。分子印跡聚合物固相萃取柱的萃取能力遠遠大於非分子印跡聚合物固相萃取柱，且對雙酚A分子有很強的特異選擇性和識別能力。
權利要求
1.一種雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱的製備方法，其特徵在於，包括以下步驟 步驟I)取280-330mg的雙酚A分子印跡聚合物，加入4-5ml的第一有機溶劑混合均勻，製成漿液，裝入固相萃取裝置中； 步驟2)將所述漿液填入均勻後用8-15ml的第二有機溶劑對萃取柱進行衝洗，重複3-5次，然後用真空泵抽乾； 步驟3)使用前，將製備好的填料雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱用8-12ml的第三有機溶劑浸潤。
2.根據權利要求I所述的雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱的製備方法，其特徵在於步驟I中所述的第一有機溶劑為甲醇。
3.根據權利要求I所述的雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱的製備方法，其特徵在於步驟I中採用超聲法使所述雙酚A分子印跡聚合物與所述第一有機溶劑均勻混合，混合時間 10-20min。
4.根據權利要求I所述的雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱的製備方法，其特徵在於步驟I中所述的固相萃取裝置採用離線固相萃取方式將固相萃取柱橡膠塞接於抽濾瓶口，抽濾瓶接上帶三通閥的緩衝瓶，再接上真空泵，通過調節三通閥控制萃取流量。
5.根據權利要求I所述的雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱的製備方法，其特徵在於步驟2中所述的第二有機溶劑為甲醇。
6.根據權利要求I所述的雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱的製備方法，其特徵在於步驟3中所述的第三有機溶劑為甲苯。
全文摘要
本發明公開了一種雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱的製備方法，包括以下步驟，取280-330mg的雙酚A分子印跡聚合物，加入4-5ml的第一有機溶劑混合均勻，製成漿液，裝入固相萃取裝置中；將填料填入均勻後用8-15ml的第二有機溶劑對萃取柱進行衝洗，重複3-5次，然後用真空泵抽乾；使用前，將製備好的填料雙酚A分子印跡聚合物固相萃取柱用8-12ml的第三有機溶劑浸潤。本發明方法進行樣品前處理時，具有工藝簡單，特異選擇性分離、富集的優良效果。跟常規的C18柱相比，具有性能穩定、抗腐蝕性強等優勢。
文檔編號B01J20/26GK102698722SQ201210202128
公開日2012年10月3日 申請日期2012年6月19日 優先權日2012年6月19日
發明者楊本曉, 鄭亞楠, 韋斯, 黎麗 申請人:蘇州市漢微環保科技有限公司