擬南芥耐鹽基因srat2及其應用的製作方法
2023-10-21 10:33:42 1
專利名稱：擬南芥耐鹽基因srat2及其應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及功能基因組學領域，尤其涉及一種擬南芥耐鹽基因SRAT2 及其應用。
背景技術：
土壤鹽漬化對農業的威脅是一個全球性的問題。全世界共有10億公 項的鹽鹼地，約佔世界陸地面積7.6%,我國鹽石威地近1億多公項，農業 耕地因鹽漬化引起的減產、棄耕地就近333.5萬公項。近年來，我國設施 農業的快速發展，特別是蔬菜和花卉大棚生產面積不斷擴大，據統計，2005 年全國蔬菜、花舟、瓜果等作物設施栽培面積達210萬公項。設施農業的 發展為農業生產結構調整和提高農業生產效益發揮了重要作用，但是隨著 設施栽培時間延長，土壤次生鹽漬化的問題日益加劇，嚴重影響了設施栽 培作物的產量和品質，效益也隨之下降，從而影響設施農業的健康發展。 解決設施栽培土壤鹽漬化一般採取以下兩種措施， 一是用石膏和硫磺等化 學方法或用排水和灌溉洗鹽等物理方法改良土;裡；二是通過常規育種或生 物技術手段培育耐鹽作物品種。前者投入成本高。通過培育適宜在鹽鹼地 區栽培和設施栽培的農作物抗鹽新品種將不僅能有效解決設施栽培土壤 鹽漬化問題，而且還能通過有效利用部分鹽漬化土地而大大地緩解我國土 地資源匱乏的問題。
功能基因的發掘與利用是當今世界生物資源竟爭的制高點。 一旦誰擁 有更多的功能基因資源，誰就會在生物經濟竟爭中掌握主動權。在20世 紀90年代，美國利用我國的野生大豆資源發掘出抗線蟲功能基因，並申
請國際專利。現在我國若利用該功能基因進行大豆育種和生產，就會受到 其專利權限制。發掘新耐鹽功能基因，不僅有利於我國搶佔生物基因資源 竟爭的制高點，而且能夠改變功能基因利用受制於國外壟斷的被動局面。
1983年轉基因才直物問世，1994年耐儲藏番茄最先獲準上市，1996 ~ 1999 年全世界轉基因作物生產面積由170萬公項增加到3990萬公項，四年間增 長了23倍。2005年全球種植面積已達9000萬公項，佔世界總耕地面積的6%。 我國已批准轉基因抗蟲棉、轉基因耐儲藏番茄等6件轉基因植物商品化， 其中5件是我國自主開發的，現在已成為全球轉基因作物推廣面積最大的 國家之一。我國利用Bt基因培育抗蟲棉品種有效解決了因棉鈴蟲危害而帶 來的棉花嚴重減產問題。2006年我國石家莊農科院通過耐旱基因的發掘而 培育出小麥耐旱新品種，整個生育期只澆一次水畝產可達500kg，有效解 決了北方乾旱而導致的小麥減產問題。近年來，國內外利用基因工程手段 將參與合成滲透調節物質和離子區域化效應相關的基因導入水稻、玉米、 草莓、菸草等作物，已獲得高耐鹽作物抹系，但目前還沒有商業化應用。
近年來，隨著模式植物擬南芥和水稻基因組測序完成，植物基因組學 研究已轉入到功能基因組學。目前一些研究功能基因組學的新方法和實驗 技術體系如cDNA微陣列、基因晶片、基因表達系統分析(serial analysis of gene expression, SAGE )、基因敲除(gene knockout)和RNAi分才斤均 能有效分析大量基因的表達和功能模式，並在耐鹽性相關功能基因資源發 掘上取得了一定*。 一些與滲透調節相關基因已從不同植物種類中被成 功克隆並轉化應用，如脯氨酸合成相關基因P5CS和甜菜鹼脫氫酶BADH 基因。植物體內Na+離子平衡是植物自身耐鹽調節的重要機制。朱健康研 究小組發現擬南芥SOS基因系列的調控信號是植物自身調節Na+離子平 衡的重要途徑之一。2005年，林鴻宣研究小組與美國欒升教授合作，成 功克隆了水稻耐鹽相關的數量性狀基因SKC1。該基因能控制水稻植抹地 上部鈉離子和鉀離子的含量，維持鈉和鉀離子平衡，使過量鈉離子不在莖 葉等部位積累，並使鈉離子回流到根部，減輕鈉離子毒害，同時增加營養 元素鉀離子，從而增加水稻耐鹽性。
泛素連接酶是泛素與26S蛋白酶體系統的主要組分之一。在泛素與26S 蛋白酶體系統中存在三種關鍵酶，分別是泛素活化酶E1、泛素偶聯酶E2 和泛素連接酶E3。 E1在ATP存在條件下主要激活泛素，產生一個活化的泛 素庫供下遊反應。在模式植物擬南芥中有2種E1同工型，其中一個可能是 核定位。E2酶通過其活化座位的半胱氨酸與活化的泛素結合，然後將泛素 轉移到靶蛋白，與靶蛋白上的賴氨酸位共價結合。接著結合泛素的E2直接 將泛素轉移到第一個泛素上，它們通過各自的賴氨酸位共價結合。然後在 靶蛋白分子上形成多泛素鏈。目前在擬南芥基因組中有37E2酶基因，分 為12個亞家族。泛素連接酶E3可以識別靶蛋白上的多泛素鏈信號，並與靶 蛋白結合。另一方面，E3還可以識別26S蛋白酶體，然後將帶多泛素鏈的 靶蛋白引入26S蛋白酶體中，實現蛋白的快速降解。多泛素鏈被降解成單 個泛素，可以在體內循環利用。目前在擬南芥基因組中有1300多個基因編 碼推測E3酶亞基，並具有一個700個成員的家族。因此，泛素連接酶E3種 類和數量可以對應廣泛的靶蛋白分子，實現植物體內的蛋白快速降解，完 成植物生長發育的多種信號轉導途徑。根據亞基組成和作用機制，目前植 物中E3酶包括與E6APC末端同源物(HECT)、 RING/U-Box、 SCF複合體 和後期促進複合體(APC)。目前在擬南芥基因組中含有7個HECTE3、約 480個RING蛋白、64個U-Box蛋白、約700個F-Box蛋白和ll個APC亞基。 Stone等(2005 )在擬南芥基因組中預測並鑑定了469個RING型蛋白。根據 RING區的不同，將其劃分成八大類，包括30個不同的組。以AUBC8為通 用E2酶，體外測定規範的或修飾的RING蛋白的E3活性，結果發現，大部 分RING蛋白具有E3活性。
泛素連接酶E3在植物的生長發育過程中具有重要作用。大量研究結 果表明不同類型的E3酶參與表皮毛的發育、花的發育、地上部分枝、蠟
質合成、自交不親和、細胞周期、多種激素信號如生長素、脫落酸、芸苔 素內酯、乙烯、赤黴素和茉莉酸、非生物逆境脅迫響應如光、藍光、熱和
冷休克和低溫信號、生物逆境如NIM1途徑和病毒蔓延和代i射途徑如糖酵 解、生物鹼合成和N-末端規則途徑等多種過程。不同的E3酶有各自特異 的靶蛋白，但是一個E3酶可以有兩個以上的靶蛋白，例如COPl下遊是 3個受其降解的靶蛋白。
發明內容
本發明提供一種擬南芥耐鹽基因SRAT2及其應用。 一種擬南芥耐鹽基因SRAT2，具有序列表中SEQ ID NO. 1所述的鹼基 序列。
所述的擬南芥耐鹽基因SRAT2編碼的蛋白質，具有序列表中SEQ ID NO. 3所述的胺基酸序列。
本發明利用基因晶片技術，檢測擬南齊鹽響應基因表達，根據NCBI、 TAIR等資料庫查詢結果，獲得水稻耐鹽相關基因序列信息，然後通過逆向 遺傳學方法證實基因功能。
基因來源
以野生型擬南芥Col-0 (Columbia ecotype ) 7天苗齡幼苗為材料，分 別轉移到MS或MS+150 mM (毫摩爾濃度)NaCl培養基上處理24 h， 然後取地上部(包括莖和葉)分別轉移到1.5 ml離心管中，加液氮快速 磨碎，再加入lmlTrizol顛倒混勻，經過一系列步驟分離純化，獲得高純 度的mRNA。通過反轉錄合成cDNA。再通過利用Affymetrix基因晶片 (Affymetrix ATH1- 25K)技術，檢測在鹽脅迫下擬南芥地上部基因表達 差異，結果發現SRAT2基因在鹽處理24小時後表達量比對照(未處理) 高出2倍以上。根據Expasy和TAIR資料庫查詢結果，SRAT2基因是擬 南芥ATL基因家族，編碼一個E3泛素連接酶。基因SRAT2是顯alt Stress
區eponsiveness ^!L gene 2的英文縮寫，中文意指為一個鹽脅迫響應ATL 家族基因。
根據TAIR資料庫查詢，SRAT2基因號為At5g66070。該基因的ORF (開放閱讀框)為738 bp, mRNA長度為1005 bp。基因編碼產物大小245 個胺基酸，分子量26.94 Kd，等電點6.59。 基因克隆與轉化
以野生型擬南芥Col-O ( Columbia ecotype ) 7天苗齡幼苗總mRNA為 模板，利用RT-PCR方法擴增到SRAT2基因的編碼序列，然後將SRAT2基 因裝入PMD18-T栽體中，經測序正確，用Xbal和Kpnl酶切，回收基因 片段，然後連入Superl300載體中，再轉入EH105農桿菌，鑑定正確後， 通過農桿菌介導花浸法轉化模式植物擬南齊，在含潮黴素的MS固體培養 基上篩選轉基因擬南芥陽性植抹，繁種並鑑定至T3代，獲得純合的轉基 因26個4朱系。
基因耐鹽功能鑑定
T3代純合轉基因株系和野生型((ecotype Columbia))擬南芥種子處理 後培養7天，觀察幼苗生長情況。待幼苗子葉完全展開後，將轉基因株系 和野生型的幼苗分別移入含NaCl和正常的MS培養基上，然後置於相同 光溫條件的培養箱中培養。培養12-15天後，觀察轉基因株系與野生型幼 苗在高鹽脅迫下的表型。結果發現在200mMNaCl下，野生型幼苗全部白 化死亡，轉SRAT2基因株系僅在幼苗基部1-2老葉出現白化死亡，而在 幼苗的生長點和其餘葉片仍保持綠色，說明SRAT2基因在植物中超量表 達可以緩解植物鹽害。
本發明有益效果將耐鹽基因SRAT2轉化模式植物擬南芥，可以提 高擬南芥幼苗耐鹽性。若將耐鹽基因SRAT2轉化水稻或草莓等蔬菜、花 卉等植物，有可能提高植物耐鹽性， 一方面，可以增加水稻或露地蔬菜、 花卉在鹽鹼地上的產量，提高我省濱海地區的鹽鹼地的利用；另一方面，可以克服設施條件下因土壤返鹽引起的連作障礙，提高蔬菜、花卉等植物 的產量和品質，增加農民收入。
具體實施方式
基因的獲得
以野生型擬南齊Col-0 (Columbia ecotype ) 7天苗齡幼苗為材料，分 別轉移到MS或MS+150 mM NaCl培養基上處理24 h,然後取地上部分 別轉移到1.5 ml離心管中，加液氮快速磨碎，再加入1 ml Trizol (Invitrogen)顛倒混勻，室溫放置5 min，在4。C 12000 rpm離心10 min。 取上清液轉移至新1.5ml離心管中，然後加入200jil氯仿，用力震蕩15 s， 室溫放置2-3 min，在4°C 12000 rpm離心15 min。吸取上層水相，加入 500 lal異丙醇，在4。C下12000g離心10 min。棄去上清液，加入1.2 ml 75% 乙醇，在4。C下10000 g離心5 min。棄去上清液，吸盡殘液，室溫乾燥 5-10 min。加入200 pi DEPC (焦碳酸二乙酯)水，用槍頭吸吐混勻。取5 HlRNA溶液進行定量，其餘溶液用2.5-3倍體積無水乙醇(600|11無水乙 醇中加入80ial 3MpH5.2乙酸鈉)，-20匸水箱中放置1-2 h,在4。C下 12000 g離心30min。棄去上清液，加入lml70。/o乙醇，在4。C下10000 g 離心5min。棄去上清液，真空乾燥。
用DEPC水稀釋即獲得高純度的mRNA。通過反轉錄合成cDNA。再 通過利用Affymertrix基因晶片(Affymetrix ATH1-25K)技術，檢測在鹽 脅迫下擬南齊地上部基因表達差異，結果發現SRAT2基因在鹽處理24後 表達量比對照(未處理)高出2倍以上。根據Expasy和TAIR資料庫查詢 結果，SRAT2基因是擬南芥ATL基因家族，編碼一個E3泛素連接酶。基 因SRAT2是gait Stress區eponsiveness ^!L gene2的英文縮寫，中文意指為 一個鹽脅迫響應ATL家族基因。
根據TAIR資料庫查詢，SRAT2基因號為At5g66070。該基因的ORF(開放閱讀框)為738 bp, mRNA長度為1005 bp。基因編碼產物大小245 個胺基酸，分子量26.94 kD，等電點6.59。 基因克隆與轉化
以野生型擬南芥Col-0 ( Columbia ecotype ) 7天苗齡幼苗總mRNA為 模板，利用RT-PCR方法擴增到SRAT2基因的編碼序列。
具體操作如下首先，將mRNA反轉錄成第一鏈cDNA，所用反轉錄 試劑盒為GIBCOBRL公司的SUPERSCRIPTTM III，反應體系20 jil，依 次加入1 oligo dT、 1 pl 10 mM dNTP、 5嗎RNA和DEPC水至13 pl， 在65。C變性5min,迅速在冰上冷卻至少1分鐘，稍《殷離心，然後依次加 入4 (il 5x First-Strand buffer、 1 pl 0.1 M DTT、 1 pi RNase OUT Recombinant脂ase inhibitor和1 Superscript III RT。輕孩丈混合均勻， 50。C反應60分鐘，70°C 15分鐘使酶失活。為了去掉與cDNA互補的RNA 鏈，加入l RNase 200在37。C溫育20min， -20。C保存。然後以第一鏈 cDNA為摸板擴增目的基因Cyp2，所用擴增配對引物
SRAT2-F, 5，- TCTAGAATGGATGGTTATTATTCTCT -3'， SRAT2-R, 5，- GGTACCTCAAAGATGTCTTCTGCACA畫3', PCR反應體系為50 pl，依次加入10x PCR buffer 5 |il、 10 mM dNTPs 1 |il、反轉錄產物5(xl、 10pM正向引物(SRAT2-F) 1 |il 、 10 反向引物 (SRAT2-R) 1^1、 5U/^dTagDNA聚合酶0.5iil，最後加水至50 jil。 PCR 反應條件預變性95。C,變性95。C 30s,退火58。C30s，延伸72°C 1 min， 30個循環，最後延伸72。C 10min, 4。C保存。
擴增後將SRAT2基因裝入pMD18-T載體中pMD18-T載體由TakaRa 公司生產。將回收純化的SRAT2基因的DNA與pMD18-T載體進行連接 反應，連接體系10 pl，各組分分別為0.5 plpMD18-T載體、4.5pl純化的 SRAT2基因的DNA、 5 pi SolutionI。在14。C 16。C下連接8~12小時，然 後將連接產物轉化到大腸桿菌DH5a感受態細胞中。
將SRAT2基因裝入pMD18-T載體後經測序正確，用TakaRa公司生 產的Xbal和Kpnl酶切，才喿作如下酶切體系40 pl，包括4 pl 10xbuffer、 8 pi已插入SRAT2基因的pMD18-T栽體、1 pl Xbal、 1 (xl Kpnl和26|il 水，在37。C水浴中溫育6h。
用北京博大泰克生物技術公司生產的Glassmilk kit回收基因片段，操 作如下從瓊脂糖凝膠上切下所需DNA片段，放在1.5 ml的Eppendorf 管中。加入3倍體積的溶膠液，室溫下放置5 min,期間輕搖Eppendorf 管幾次使膠完全溶化。加入10pl玻璃奶，顛倒混勻，水浴下放置10min。 每隔2-3 min混勻1次，12000 rpm離心30 s，吸棄上清。加入250 jil漂洗 液，用移液器吹打漂洗液，輕柔地將玻璃奶懸浮混勻，12000rpm離心30 s，吸棄上清。重複漂洗1次。用槍頭將剩餘的漂洗液吸乾淨。然後，放 置於37。C溫箱乾燥15-20 min。加入20pl的無菌蒸餾水，混勻，60。C水浴 5 min, 12000 rpm離心1 min,回》]欠上清'液。
將回收的基因片段連入Superl300載體中，操作如下連接體系10 jil， 包括2 pl Superl300載體、6 pl純化的SRAT2基因的DNA、 1 jil 10xT4連 接酶buffer和1 |il T4連接酶，在4-10°C下連接12 h，然後將連接產物轉 化到大腸桿菌DH5a感受態細胞中，提取質粒進行鑑定。
基因片段連入Superl300載體後再轉入EH105農桿菌中，操作如下 取200nl農桿菌感受態細胞，加入5 10nl構建好的質粒DNA, 30。C冰浴 30 min,液氮中速凍1 min， 37。C水浴5 min,然後加入1 ml YEB培養基 (1升YEBJ咅養基含1 g酵母提取物、5g牛肉f曼膏、5g蛋白腖、5g蔑 糖和0.5 g MgS04 . 7H20, pH 7.0 ), 28°C恢復培養4 h; 10000 g離心30 s, 棄上清，加入0.1 ml YEB培養基重新懸浮細胞，塗布於含有100 |xg/ml卡 那黴素和125 )Lig/ml利福平的YEB平板(1升YEB培養基含1 g酵母提取 物、5g牛肉〉菱膏、5g蛋白腖、5g哀並唐、0.5gMgSO4 7H20和12g瓊 脂，pH7.0)上，28。C培養約48h。
經鑑定正確後(糸沐陽性克隆作為模板，用菌落PCR方法進行鑑定), 通過農桿菌介導浸花法轉化模式植物擬南芥，操作如下接種含有目的質 粒的農桿菌菌落於10 ml YEB培養基(含0.1%酵母提取物、0.5%牛肉浸 膏、0.5%蛋白腖、0.5%蔗糖、0.05%MgSO4 7H20、 1.2%瓊月旨、100 |ug/ml 卡那黴素和125 pg/ml利福平)中28。C、 200 rpm震蕩培養過夜，轉化前 一天按1:50接種於200 ml含相同抗生素的YEB培養液中擴大培養至 OD600為1.2 1.6，約6h， 5000 g離心15 min集菌，重懸於滲透緩沖液， 使OD600為0.8, 200 ml重懸液可使用3次。轉化所用浸泡液含有0.5 x MS大量元素、0.5xMS孩支量元素、0.5mg/LVB5、 5°/。蔗糖、44 nM 6-BA (Sigma公司，美國)和0.03% Silwet L-77 ( LEHLE SEEDS公司，美國)。 將200 ml含目的農桿菌的滲透轉化液置於一容器中，翻轉種有擬南芥的 花盆，使植抹浸入含有待轉化農桿菌的滲透緩沖液中，浸5分鐘，緩慢取 出花盆，側放於託盤中，蓋上黑塑料布避光24小時，第二天取下塑料布， 直立放置花盆。
製備MS篩選平板(MS培養基外加80 g/ml潮黴素和50 g/ml氨千青 黴素)，轉化收穫的T1代種子經消毒後播種於篩選平板，每15cm的平板 上可以篩選lOOiig左右的擬南芥種子。4。C春化3天，平放在生長箱中培 養(22。C恆溫，24h光照)，7 10天後挑選在篩選培養基上根系和地上部 生長正常的陽性植;昧，移入正常MS培養基緩苗3 5天後移植入土壤，單 抹收穫T2代種子。繁種並鑑定至T3代，獲得純合的轉基因12個抹系。
基因耐鹽功能鑑定
T3代純合轉基因株系和野生型((ecotype Columbia))擬南芥種子用 1%次氯酸鈉消毒，在4。C冰箱中春化3天，然後置於溫度22。C 、溼度50%、 連續24h光照的培養箱中培養。培養7d後，觀察幼苗生長情況。待幼苗 子葉完全展開後，將轉基因抹系和野生型幼苗移入含200 mMNaCl和正常
的MS固體培養基(含lx大量元素、lx微量元素、lx鐵鹽、3%蔗糖和0.8% 瓊脂)上，然後置於相同光溫條件(22°C、溼度50%、連續24 h光照) 的培養箱中培養。培養12-15d後，觀察轉基因林系與野生型幼苗在高鹽 脅迫下的表型。結果發現在200mMNaCl下，野生型幼苗全部白化死亡， 轉SRAT2基因抹系僅在幼苗基部1-2老葉出現白化死亡，而在幼苗的生長 點和其餘葉片仍保持綠色，說明SRAT2基因超量表達可以緩解植物鹽害。
SEQUENCE LISTING 〈110〉 4充州市農業科學研究院 擬南芥耐鹽基因SRAT2及其應用 〈160〉 3
〈170〉 Patentln version 3.3
〈210〉 1
〈211〉 738
〈212〉 DNA
〈213〉 擬南芥
〈400〉 1
atggatggtt attattctct gtctcccatc tctgtcctcc accggattaa agattccttc 60
catttcgccg tctctgccct tctcgccaac ctcttctccg ctctcttcac cttcttcttc 120
gctttagtgg ggactttgct gggagcattg acaggggctt tgatcggcca agaaacagag 180
agcggtttca tcagaggagc cgccgttggt gctatctcag gcgccgtctt ctccatcgaa 240
gtctttgaat cttccctcct cctttggcaa tccgatgagt ctggaattgg atgccttctc 300
tacttgattg atgtcattgc tagccttttg agcgggaggc ttgttcgtga gcgtatcggt 360
cctgcaatgc taagtgccgt ccagagtcag gtacaactac catttctttt ctttgatgca 420
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tctctcaacaggatccctaa ggtccg犯tcacagacacct ctccggagattgtctcttgc600
tctgtctgccttcaggactt tcaggtgggagagacagttei g犯gtttgccgcactgccat660
catatgttccacctaccatg catcgacaaatggcttcgca ggcatgcttcttgtcccttg 720tgcagaagacatctttga738
〈210〉2
〈211〉1005
〈212〉m薩
〈213〉擬南芥
〈400〉2
gttccttgtttttccagaca aagaaaacacaaattcattc cctcctcctcttcatctctt60
ttgcagatatggatggttat tattctctgtctcccatctc tgtcctccacCgg3tt6L犯g120
attccttccatttcgccgtc tctgcccttctcgccaacct cttctccgctctcttcacct180
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gtcccttgtg cagaagacat ctttgaattg attttgaact cttctttctt ctcttctttg 840
tacatgaggt ataggcatac acacacacac atatatacac actagtagtc ttccttgatt 900
ttttttagat tacacgttac acagattttg atgcaccaat cattgtaact tcactcatct 960
cttggagatc ctgtttattt atgctactta ttcttggctt catca 1005
〈210〉 3
〈211〉 245
〈212〉 PRT
〈213> 擬南芥
〈■〉 3
Met Asp Gly Tyr Tyr Ser Leu Ser Pro lie Ser Val Leu His Arg lie
15 10 15
Lys Asp Ser Phe His Phe Ala Val Ser Ala Leu Leu Ala Asn Leu Phe
20 25 30
Ser Ala Leu Phe Thr Phe Phe Phe Ala Leu Val Gly Thr Leu Leu Gly
35 40 45
Ala Leu Thr Gly Ala Leu lie Gly Gin Glu Thr Glu Ser Gly Phe lie
50 55 60
Arg Gly Ala Ala Val Gly Ala lie Ser Gly Ala Val Phe Ser lie Glu 65 70 75 80
Val Phe Glu Ser Ser Leu Leu Leu Trp Gin Ser Asp Glu Ser Gly lie
85 90 95
Gly Cys Leu Leu Tyr Leu lie Asp Val lie Ala Ser Leu Leu Ser Gly
100 105 110
Arg Leu Val Arg Glu Arg lie Gly Pro Ala Met Leu Ser Ala Val Gin
115 120 125
Ser Gin Val Gin Leu Pro Phe Leu Phe Phe Asp Ala Ser Phe lie lie
130 135 140
Leu Leu Asn Phe Cys lie Asn Asn Lys Gin Met Gly Ala Val Glu Ser 145 150 155 160
Gin Phe Gin Asp His Thr Asp lie Phe Asp Thr Ala lie Ser Lys Gly
165 170 175
Leu Thr Gly Asp Ser Leu Asn Arg lie Pro Lys Val Arg lie Thr Asp
180 185 190
Thr Ser Pro Glu lie Val Ser Cys Ser Val Cys Leu Gin Asp Phe Gin
195 200 205
Val Gly Glu Thr Val Arg Ser Leu Pro His Cys His His Met Phe His
210 215 220
Leu Pro Cys lie Asp Lys Trp Leu Arg Arg His Ala Ser Cys Pro Leu 225 230 235 240
Cys Arg Arg His Leu 24權利要求
1、一種擬南芥耐鹽基因SRAT2，具有序列表中SEQ ID N0.1所述的鹼基序列。
2、 如權利要求1所述的所述的擬南芥耐鹽基因SRAT2編碼的蛋白質， 具有序列表中SEQ ID NO. 3所述的胺基酸序列。
全文摘要
本發明提供公開了一種擬南芥耐鹽基因SRAT2，具有序列表中SEQ IDNO.1所述的鹼基序列。將擬南芥耐鹽基因SRAT2轉化模式植物擬南芥，可以提高擬南芥幼苗耐鹽性。若將擬南芥耐鹽基因SRAT2轉化水稻或草莓等蔬菜、花卉等植物，有可能提高植物耐鹽性，一方面，可以增加水稻或露地蔬菜、花卉在鹽鹼地上的產量，提高我國濱海地區的鹽鹼地的利用；另一方面，可以克服設施條件下因土壤返鹽引起的連作障礙，提高蔬菜、花卉等植物的產量和品質，增加農民收入。
文檔編號C12N15/29GK101173286SQ200710157010
公開日2008年5月7日 申請日期2007年11月13日 優先權日2007年11月13日
發明者雅 忻, 王世恆, 王淑珍, 童建新, 錢麗華, 阮松林, 馬華升 申請人:杭州市農業科學研究院