C-糖苷衍生物和l-脯氨酸的共結晶體的製作方法

2023-10-06 06:28:49 2

專利名稱：：C-糖苷衍生物和l-脯氨酸的共結晶體的製作方法
技術領域：
：本發明涉及(IS)-1,5-脫水-1-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇(以下也稱"C-葡糖苷衍生物A"或簡稱"公知化合物A")和L-脯氨酸的共結晶體，更具體涉及作為用於藥物製造的原料藥的結晶具有一定的品質且保存穩定性良好的C-糖苷衍生物A和L-脯氨酸的共結晶體以及包含該共結晶體作為有效成分的特別是可用作糖尿病治療劑的醫藥組合物。本發明人報導了(1S)-l，5-脫水-1-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇(公知化合物A)作為Na+-葡萄糖共轉運體抑制劑，是可用於例如胰島素依賴型糖尿病(I型糖尿病)、非胰島素依賴型糖尿病(II型糖尿病)等糖尿病及胰島素抗性疾病和肥胖的治療以及它們的預防的化合物(參照專利文獻1:實施例138)。專利文獻l:國際公開第2004/080990號文本發明的揭示己知專利文獻1中所揭示的公知化合物A的結晶形成包合水合物，表現出根據溫溼度環境而由無水物可逆地變化為非化學計量的水合物的性質。因此，確認公知化合物A難以作為供於藥品的原料藥保持一定的品質。於是，本發明人對於公知化合物A進行了用於獲得不形成包合水合物的結晶的結晶條件的各種研究。具體來說，研究了如下的結晶條件使用甲
背景技術：
：醇、乙醇、2-丙醇、二甲基甲醯胺、四氫呋喃、丙酮、甲基乙基酮、乙酸乙酯、乙酸、吡啶、1,4-二噁垸、乙腈、苯甲醚、水、甲苯、乙醚、異丙醚、正丁醚、正己烷、環己垸、正庚烷、氯仿和四氯化碳的單一溶劑以及將它們的兩種以上組合而得的混合溶劑，將公知化合物A加熱溶解後，慢慢地冷卻。上述研究的結果是，在幾乎所有的結晶條件下都獲得了形成包合水合物的結晶。此外，在一部分的結晶條件下，僅確認到結晶溶劑的一部分或全部溶劑合了的結晶。大量混入有安全性存在問題的溶劑合物結晶不合適作為供於藥品的原料藥。因此，存在實際上無法將公知化合物A的游離體用作藥物製造中的原料藥。此外，公知化合物A在通常的pH條件下作為非離子性化合物存在。因此，無法通過形成製藥學上允許的鹽來避免上述問題。本發明是為了解決上述問題而完成的，其目的在於提供具有一定的品質且保存穩定性良好的適合作為供於藥品的原料藥的公知化合物A的共結晶體。為了實現上述目的，本發明人對公知化合物A和胺基酸的共結晶體的形成進行了認真研究。其結果是，公知化合物A與甘氨酸、L-天冬醯胺、L-天冬氨酸、L-穀氨醯胺、L-穀氨酸、L-賴氨酸、L-精氨酸、L-組氨酸、L-絲氨酸、L-蘇氨酸、L-半胱氨酸、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-色氨酸、L-丙氨酸、L-纈氨酸、L-亮氨酸、L-異亮氨酸、D-天冬醯胺、D-天冬氨酸、D-穀氨醯胺、D-穀氨酸、D-精氨酸、D-絲氨酸、D-蘇氨酸、D-甲硫氨酸、D-苯丙氨酸、D-丙氨酸、D-纈氨酸、D-亮氨酸、D-異亮氨酸或D-脯氨酸無法獲得共結晶體。與之相對，發現公知化合物A與L-脯氨酸以l:l的摩爾比再現性良好地形成具有一定品質的單一的共結晶體。此外，發現該共結晶體在保存穩定性良好的同時，可以穩定地供作用於藥品製造的原料藥的結晶，從而完成了本發明。艮P，為了實現上述目的，本發明提供以下的C-糖苷衍生物A和L-脯氨酸的共結晶體(以下也稱"本發明共結晶體")以及包含該共結晶體作為有效成分的特別是可用作糖尿病治療劑的醫藥組合物。(1S)-1，5-脫水-1-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇和L-脯氨酸的共結晶體。如前述[1]所述的共結晶體，其中，(1S)-1,5-脫水-卜[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇和L-脯氨酸的摩爾比為l:1。如前述[1]所述的共結晶體，其中，在差示掃描量熱計分析(DSC分析)中於201213。C具有吸熱峰。如前述[1]所述的共結晶體，其中，在粉末X射線衍射中於26(°)4.14、8.98、12.4、16.5、17.5、18.7、20.5和21.5具有峰值。如前述[1]所述的共結晶體，其中，在差示掃描量熱計分析(DSC分析)中於201213'C具有吸熱峰，且在粉末X射線衍射中於29(°)4.14、8.98、12.4、16.5、17.5、18.7、20.5和21.5具有峰值。包含前述[1][5]中的任一項所述的共結晶體作為有效成分的醫藥組合物。使用前述[1][5]中的任一項所述的共結晶體而製成的醫藥組合物。[8]如前述[6]或[7]所述的醫藥組合物，其中，還包含製藥學上允許的載體。作為糖尿病治療劑的如前述[6][8]中的任一項所述的醫藥組合物。[10]前述[1][5]中的任一項所述的共結晶體在糖尿病治療劑的製造中的應用。糖尿病的治療方法，其中，包括向患者給予治療有效量的前述[1][5]中的任一項所述的共結晶體。通過本發明，可提供作為用於藥品製造的原料藥的結晶具有一定的品質且保存穩定性良好的公知化合物A和L-脯氨酸的共結晶體以及包含該共結晶體作為有效成分的特別是可用作糖尿病治療劑的醫藥組合物。附圖的簡單說明圖l是(lS)-l,5-脫水-l-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇(公知化合物A)的差示掃描量熱計分析圖(DSC分析圖)。5圖2是(1S)-1,5-脫水-1-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇(公知化合物A)的粉末X射線衍射圖。圖3是L-脯氨酸的差示掃描量熱計分析圖(DSC分析圖)。圖4是L-脯氨酸的粉末X射線衍射圖。圖5是(1S)-1,5-脫水-1-[3-(l-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇和L-脯氨酸的共結晶體(本發明共結晶體)的差示掃描量熱計分析圖(DSC分析圖)。圖6是(1S)-1，5-脫水-1-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇和L-脯氨酸的共結晶體(本發明共結晶體)的粉末X射線衍射圖。圖7是溼度可變條件下測得的(1S)-1，5-脫水-1-[3-(l-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇(公知化合物A)的粉末X射線衍射圖。圖8是將在各種溼度條件下保存7天後的(1S)-1，5-脫水-1-[3-(l-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇和L-脯氨酸的共結晶體(本發明共結晶體)與保存前的共結晶體比較的粉末X射線衍射圖。圖9是(1S)-1,5-脫水-1-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇(公知化合物A)的吸附脫附等溫線。圖10是(lS)-l，5-脫水-l-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇和L-脯氨酸的共結晶體(本發明共結晶體)的吸附脫附等溫線。實施發明的最佳方式以下，對用於實施本發明的最佳方式進行具體說明。本發明的C-糖苷衍生物A((1S)-1，5-脫水-1-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇)和L-脯氨酸的共結晶體(本發明共結晶體)具有如下所示的化學結構。如上所述，本發明共結晶體與形成包合水合物的結晶不同，可以再現性良好地獲得具有一定品質的單一的共結晶體，能夠穩定地供作用於藥物製造的原料藥的結晶，保存穩定性良好。形成包合水合物的公知化合物A與本發明共結晶體的晶形的不同特別是可由差示掃描量熱計分析(DSC分析)和粉末X射線衍射的結果確認。艮P，本發明共結晶體在差示掃描量熱計分析(DSC分析)中於201213。C具有吸熱峰，且/或在粉末X射線衍射中於26(°)4.14、8.98、12.4、16.5、17.5、18.7、20.5和21.5附近具有峰值。公知化合物A以表l所示的粉末X射線衍射圖譜中的衍射角(2e(°))和相對強度為特徵。與之相對，本發明共結晶體以表2所示的粉末X射線衍射圖譜中的衍射角(26(°))和相對強度為特徵。還有，粉末X射線衍射從數據的性質來看，在結晶的同一性認定中重要的是晶格間距和整體的圖案，相對強度可能會因結晶生長的方向、粒子的大小、測定條件而稍有不同，所以不應被理解為是嚴密的。tableseeoriginaldocumentpage7形成包合水合物的結晶(公知化合物A)由於具有非化學計量的水合物，結晶的面間距出現偏差，出現衍射角偏移的現象。tableseeoriginaldocumentpage7"粉末X射線衍射"和"差示掃描量熱計分析(DSC分析)"分別在以下的條件下測定。(粉末X射線衍射)(1)標準測定使用"MACScienceMXP18TAHF22"，在管球Cu、管電流200mA、管電壓40kV、採樣間隔0.020°、掃描速度3。/分鐘、波長1.54056A、測定衍射角範圍(26):340°的條件下測定。(2)調溼測定使用"帶多功能溼度溫度變換器(VAISALAMHP235)的MACScienceMXP18TAHF22"，在管球Cu、管電流350mA、管電壓50kV、採樣間隔0.02(T、掃描速度3。/分鐘、波長1.54056A、測定衍射角範圍(2e):540。的條件下測定。(差示掃描量熱計分析(DSC分析))使用"TAInstrumentTA5000"，在室溫300。C(10。C/分鐘)、N2(50m1/分鐘)、鋁製樣品盤的條件下測定。(製造方法)如下式所示，本發明共結晶體可以使用專利文獻1的實施例138中所記載的C-糖苷衍生物A的游離體和L-脯氨酸來製造。即，將(1S)-1，5-脫水-1-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇(公知化合物A)和L-脯氨酸以約l:l的摩爾比在適當的溶劑中加熱攪拌，攪拌反應液的同時慢慢地冷卻後，濾取析出的固體。將通過用適當的溶劑洗滌而得到的固體乾燥後，使用適當的溶劑進行重結晶操作，濾取析出的結晶。用適當的溶劑洗滌後，乾燥，從而可以獲得(1S)-1,5-脫水-l-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇和L-脯氨酸的共結晶體(本發明共結晶體)。公知化合物AL-脯氨酸本發明共結晶體作為溶劑的具體例子，可以例舉甲醇、乙醇、2-丙醇、正丙醇等醇類，水以及它們的混合溶劑。加熱攪拌時的溫度通常為約4015(TC，較好是約6010(TC。加熱攪拌的時間通常為約15分鐘2小時，較好是約20分鐘1小時。冷卻攪拌時的溫度通常為約-202(TC，較好是約01(TC。冷卻攪拌的時間通常為約30分鐘3小時，較好是約12小時。乾燥通常在減壓加熱條件下進行。乾燥時的溫度通常為約3010(TC，較好是約406CTC。可以如上所述得到的本發明共結晶體是以約1:1的摩爾比使用C-糖苷衍生物A和L-脯氨酸來獲得。因此，本發明共結晶體被認為通常是C-糖苷衍生物A和L-脯氨酸的摩爾比為l:l的共結晶體。本發明的醫藥組合物包含上述的本發明結晶作為有效成分。此外，本發明的醫藥組合物使用上述的本發明結晶製成。本發明的醫藥組合物中，作為除上述的本發明結晶以外的成分，可以還包含製藥學上允許的載體，本發明的醫藥組合物特別是可以用作糖尿病治療劑。包含本發明共結晶體作為有效成分的醫藥組合物使用常用的製劑用的載體和賦形劑以及其它添加劑，製成片劑、散劑、細粒劑、顆粒劑、.膠囊劑、丸劑、液劑、注射劑、栓劑、軟膏、貼附劑，以口服或非口服的方式給藥。本發明共結晶體對於人的臨床給藥量(治療有效量)考慮所適用的患者的症狀、體重、年齡和性別等適當決定，通常在口服的情況下，成人每天0.1500rag，非口服的情況下為O.01100mg，將其l次或分數次給予。給藥量根據各種條件而不同，有時低於上述給藥量範圍的量就足夠。作為用於本發明的共結晶體的口服給藥的固體組合物，可以採用片劑、散劑、顆粒劑等。這樣的固體組合物中，一種以上的化學物質與至少一種惰性的稀釋劑混合，所述稀釋劑例如有乳糖、甘露糖醇、葡萄糖、羥丙基纖維素、微晶纖維素、澱粉、聚乙烯吡咯烷酮、矽酸鋁鎂。組合物可以按照常規方法包含除惰性的稀釋劑以外的添加劑，例如硬脂酸鎂等潤滑劑和纖維素乙醇酸鈣等崩解劑、乳糖等穩定劑、穀氨酸或天冬氨酸等增溶劑或溶解助劑。片劑或丸劑可以根據需要以蔗糖、明膠、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯等的糖衣或者胃溶性或腸溶性物質的膜進行包覆。用於口服給藥的液體組合物包括藥劑方面允許的乳劑、溶液劑、懸浮劑、糖漿劑、酏劑等，包含常用的惰性的稀釋劑，例如精製水、乙醇。該組合物除了惰性的稀釋劑之外，還可以包含增溶劑、溶解助劑、溼潤劑、懸浮劑等助劑和甜味劑、調味劑、芳香劑、防腐劑。9作為用於非口服給藥的注射劑，包括無菌的水性或非水性的溶液劑、懸浮劑、乳劑。作為水性的溶液劑、懸浮劑的稀釋劑，包括例如注射用蒸餾水和生理鹽水。作為非水溶性的溶液劑、懸浮劑的稀釋劑，例如有丙二醇、聚乙二醇、橄欖油等植物油，乙醇等醇類，聚山梨醇酯-80(商品名)等。這樣的組合物可以還包含等滲劑、防腐劑、溼潤劑、乳化劑、分散劑、穩定劑(例如乳糖)、增溶劑或溶解助劑等添加劑。它們以例如通過細菌濾器的過濾、殺菌劑的摻入或照射而被無菌化。它們也可以製造成無菌的固體組合物，使用前溶解於無菌水或無菌的注射用溶劑後使用。實施例以下，通過實施例對本發明進行具體說明，但本發明並不受到這些實施例的任何限定。(參考例l)在氬氣氣流下，在冷卻至-78"C的(1S)-1,5-脫水-1-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-2，3，4，6-四-0-苄基-D-葡糖醇(2.5g)的二氯甲垸(5OmL)溶液中加入五甲基苯(4.85g)、三氯化硼的l.OM正庚垸溶液(16.3mL)，在同一溫度下攪拌2小時。反應結束後，加入甲醇(100mL)，分解過剩的試劑，減壓餾去溶劑。將殘渣用矽膠柱色譜法(氯仿-甲醇)純化，將得到的殘渣懸浮於乙醇和水的混合溶劑中進行加熱回流而使其溶解後，慢慢冷卻至室溫來進行重結晶。濾取得到的結晶，在加熱條件下減壓乾燥，獲得呈白色結晶的(lS)-l，5-脫水-1-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇(公知化合物A)(1.lg)。得到的公知化合物A的差示掃描量熱計分析圖(DSC分析圖)示於圖1，粉末X射線衍射圖示於圖2。(參考例2)L-脯氨酸的差示掃描量熱計分析圖(DSC分析圖)示於圖3，粉末X射線衍射圖示於圖4。(實施例l)在(1S)-1,5-脫水-1-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇(公知化合物A)(2.Og)的乙醇(25mL)懸浮液中加入L-脯氨酸(570mg)，在10(TC攪拌30分鐘。將反應液慢慢冷卻至室溫後，濾取析出的固體，用乙醇洗滌。將得到的固體在加熱條件下減壓乾燥後，懸浮於乙醇和水的混合溶劑中進行加熱回流而使其溶解後，慢慢冷卻，在冰冷下攪拌l小時。濾取析出的結晶，用乙醇洗滌後，在加熱條件下減壓乾燥，獲得(1S)-1,5-脫水-1-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇和L-脯氨酸的共結晶體(本發明共結晶體)(1.7g)。得到的本發明共結晶體的差示掃描量熱計分析圖(DSC分析圖)示於圖5，粉末X射線衍射圖示於圖6。如圖i6的差示掃描量熱計分析圖(bsc分析圖)和粉末x射線衍射圖的分布型所示.，確認根據上述實施例l，獲得了公知化合物A和L-脯氨酸的共結晶體，而不是公知化合物A和L-脯氨酸的簡單混合物。產業上利用的可能性本發明的(1S)-1，5-脫水-1-[3-(l-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇和L-脯氨酸的共結晶體(本發明共結晶體)不僅保存穩定性良好，而且具有^+-葡萄糖共轉運體抑制作用和降血糖作用，因此作為藥物、特別是化+-葡萄糖共轉運體抑制劑，可用於例如胰島素依賴型糖尿病(I型糖尿病)、非胰島素依賴型糖尿病(II型糖尿病)等糖尿病及胰島素抗性疾病和肥胖的治療以及它們的預防。本發明共結晶體的良好的保存穩定性以及顯著的^+-葡萄糖共轉運體抑制作用和降血糖作用通過以下所示的[保存穩定性試驗]、[吸溼性試驗]和[藥理試驗](試驗例1和試驗例2)得到確認。在溫度25'C、測定範圍相對溼度288X的條件下連續地測定粉末X射線衍射。其結果是，公知化合物A確認到伴隨相對溼度的變化的衍射角的偏移(參照圖7)。此外，游離體的在大多數的結晶條件下得到的結晶是自室溫、低溼度的條件開始可逆地形成非化學計量的包合水合物的物理上不穩定的結晶。與之相對，本發明共結晶體即使在室溫(25。C)、63.5XRH84XRH的條件下放置多達7天，也未發現物理上的變化(參照圖8)。另外，在4(TC/75%朋/開放、6CTC/自然溼度、8(TC/自然溼度的條件下，也至少2個月內在物理上是穩定的。[吸溼性試驗]使用"VTISGA-100"，在溫度25。C、測定範圍相對溼度595%、測定間隔相對溼度5%的條件下測定重量變化。其結果是，公知化合物A自低溼度開始顯示伴隨物理變化的非化學計量的吸溼性。特別是自相對溼度2535%開始顯示急劇的重量增加(參照圖9)。此外，雖然吸溼曲線根據粒徑和晶癖而稍有不同，確認在25'C、相對溼度595%的條件下吸附或脫附3.2%的水分。與之相對，本發明共結晶體在相對溼度595%的整個範圍內水分保持量在O.7%以下，未顯示吸溼性(參照圖IO)。此外，物理上也穩定。[藥理試驗](試驗例l):[人化+-葡萄糖共轉運體(人3&1^2)活性抑制作用確認試驗]1)人SGLT2表達載體的製備首先，使用S叩erscriptII(吉伯科公司(Gibco社)制)和六鹼基隨機引物，從來源於人腎臟的全RNA(克隆泰克公司(Clontech社)制)逆轉錄單鏈cDNA。接著，將其作為模板，通過使用PyrobestDNA聚合酶(寶生物技術株式會社(Takara社)制)的PCR反應，擴增編碼人SGLT2(WellsR.G.等，Am.J.Physiol.，1992,263(3)F459)的DNA片斷(使用在該DNA片斷的5'端引入有HindIII位點，在3'端引入有EcoRl位點的引物)。使用TopoTA克隆試劑盒(英傑公司(Invitrogen社)制)將擴增後的片斷克隆到pCR2.1-T叩o載體中，並將其轉染到大腸桿菌JM109菌株的感受態細胞中，在含有氨苄青黴素(100mg/L)的LB培養基中培養表現氨苄青黴素抗性的克隆。由增殖了的大腸桿菌通過Hanahan的方法(參見Maniatis等的《分子克隆》(MolecularCloning))純化質粒，對於將該質粒進行HindIII和EcoRI消化而得到的編碼人SGLT2的片斷，使用T4DNA連接酶(羅氏診斷公司(RocheDiagnostics社)制)連接並克隆到表達載體pcDNA3.1(英傑公司(Invitrogen社)制)的相同位點。將連接了的克隆轉染到與上述相同的大腸桿菌JM109菌株的感受態細胞中，使其在含有氨苄青黴素的LB培養基中增殖，通過Hanahan的方法獲得人SGLT2表達載體。2)人SGLT2穩定表達細胞的製備12將人SGLT2表達載體用Lipofectamine2000(吉伯科公司(Gibco社)制)轉染到CH0-K1細胞中。引入基因後，將細胞在含有青黴素(50IU/mL，大日本製藥株式會社(大日本製薬社)制)、鏈黴素(50iig/mL，大日本製藥株式會社(大日本製薬社)制)、Geneticin((40ng/mL，吉伯科公司(Gibco社)律lj)和10X胎牛血清的Ham，sF12培養基(日水製藥株式會社(日水製薬社)帝ij)中，在37"且存在5%(:02的條件下培養兩周左右，得到Geneticin抗性的克隆。從這些克隆中，以相對一般水平的鈉存在下的糖攝取的比活性為指標，篩選得到人SGLT2穩定表達的細胞(糖攝取的詳細測定方法參照後項)。3)甲基-a-D-吡喃葡萄糖苷攝取抑制活性的測定除去穩定表達人SGLT2的CHO細胞的培養基，每孔加入100"L預處理用緩衝液(緩衝液含有140函氯化膽鹼、2mM氯化鉀、lmM氯化鈣、lmM氯化鎂、10mM2-[4-(2-羥乙基)-1-哌嗪基]乙磺酸、5mM三(羥甲基)氨基甲垸，pH7.4)，在37'C下靜置20分鐘。向1000uL含有本發明共結晶體的攝取用緩衝液(緩衝液含有140mM氯化鈉、2mM氯化鉀、lmM氯化鈣、lmM氯化鎂、50nM甲基-a-D-吡喃葡萄糖苷、10mM2-[4-(2-羥乙基)-1-哌嗪基]乙磺酸、5mM三(羥甲基)氨基甲垸，pH7.4)加入lliiL甲基-a-D-(U-14C)吡喃葡萄糖苷(安法瑪西亞生物技術公司((AmersharaPharmaciaBiotech社)制))混合，作為攝取用緩衝液。作為對照組，配製不含本發明共結晶體的攝取用緩衝液。此外，同樣地配製含有140mM氯化膽鹼代替氯化鈉的基礎攝取用緩衝液，用於不存在本發明共結晶體和鈉時的基礎攝取測定。除去預處理用緩衝液，每孔加入25pL攝取用緩衝液，在37。C下靜置2小時。除去攝取用緩衝液，每孔加入200"L洗滌用緩衝液(緩衝液含有140mM氯化膽鹼、2mM氯化鉀、lmM氯化鈣、lmM氯化鎂、10mM甲基-a-D-吡喃葡萄糖苷、10mM2-[4-(2-羥乙基)-l-哌嗪基]乙磺酸、5mM三(羥甲基)氨基甲烷，pH7.4)，並立即除去。再重複一次該洗滌操作，每孔加入25uL0.5%月桂基硫酸鈉，將細胞溶解。向其中加入75pLMicroscint40(帕卡德公司(Packard社)制)，用微閃爍計數器(raicroscintillationcounter)TopCount(帕卡德公司(Packard社)制)測量放射活性。將對照組的攝取量減去基礎攝取量得到的值作為100%，根據濃度-抑制曲線通過最小二乘法計算攝取量的50%抑制濃度(1(:5。值)。其結果是，本發明共結晶體的ICs。值為5.8nM。(試驗例2):[降血糖作用確認試驗]選取餵養的KK-AV」、鼠(日本科雷亞株式會社(日本夕k7)，雄性)作為實驗動物。將本發明共結晶體懸浮於0.5%甲基纖維素水溶液中，濃度為lmg/10mL。測定小鼠的體重，將本發明共結晶體懸浮液以10mL/kg的用量強制口服給藥，對照組只給予0.5%甲基纖維素水溶液。每組6隻。採血在臨給藥前和給藥後l、2、4及8小時從尾靜脈進行，用葡萄糖CIITestWako(和光純藥株式會社(和光純薬))測定血糖值。對於降血糖作用強度，根據本發明共結晶體給藥組的從0到8小時的經時血糖值用梯形法(trapezoidalmethod)計算血糖值-時間曲線下的面積(AUC)，以相對於對照組的該值的下降比例(％)進行評價。其結果是，本發明共結晶體表現出較強的降血糖作用。根據試驗例1和試驗例2的結果，本發明共結晶體顯示顯著的^+-葡萄糖共轉運體活性抑制作用，且顯示較強的降血糖作用，因此可期待它成為具有與現有的糖尿病治療劑同樣效果或更有效的糖尿病治療劑。權利要求1.(1S)-1，5-脫水-1-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇和L-脯氨酸的共結晶體。2.如權利要求l所述的共結晶體，其特徵在於，(1S)-1,5-脫水-l-[3-(l-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇和L-脯氨酸的摩爾比為l:l。3.如權利要求l所述的共結晶體，其特徵在於，在差示掃描量熱計分析(DSC分析)中於201213"C具有吸熱峰。4.如權利要求l所述的共結晶體，其特徵在於，在粉末X射線衍射中於26(°)4.14、8.98、12.4、16.5、17.5、18.7、20.5和21.5具有峰值。5.如權利要求l所述的共結晶體，其特徵在於，在差示掃描量熱計分析(DSC分析)中於201213'C具有吸熱峰，且在粉末X射線衍射中於2e(°)4.14、8.98、12.4、16.5、17.5、18.7、20.5和21.5具有峰值。6.醫藥組合物，其特徵在於，包含權利要求15中的任一項所述的共結晶體作為有效成分。7.醫藥組合物，其特徵在於，使用權利要求15中的任一項所述的共結晶體而製成。8.如權利要求6或7所述的醫藥組合物，其特徵在於，還包含製藥學上允許的載體。9.如權利要求68中的任一項所述的醫藥組合物，其特徵在於，所述醫藥組合物是糖尿病治療劑。10.權利要求15中的任一項所述的共結晶體在糖尿病治療劑的製造中的應用。11.糖尿病的治療方法，其特徵在於，包括向患者給予治療有效量的權利要求15中的任一項所述的共結晶體。全文摘要(1S)-1，5-脫水-1-[3-(1-苯並噻吩-2-基甲基)-4-氟苯基]-D-葡糖醇和L-脯氨酸的共結晶體。不僅具有一定的品質，而且保存穩定性良好，不具有吸溼性，適合作為供於藥品的原料藥的結晶的公知化合物A的共結晶體。文檔編號C07D407/10GK101443328SQ20078001690公開日2009年5月27日申請日期2007年4月4日優先權日2006年4月5日發明者中西慶太,今村雅一,恩田健一,湯田真道,流石大輔,白木良太申請人:安斯泰來製藥有限公司;壽製藥株式會社