一種含有利福昔明的用於預防和治療奶牛幹奶期乳房炎製劑及其製備方法
2023-10-04 03:53:59
專利名稱：一種含有利福昔明的用於預防和治療奶牛幹奶期乳房炎製劑及其製備方法
技術領域：
本發明屬於獸用藥領域，涉及一種用於預防和治療奶牛幹奶期乳房炎的乳房注入藥物及其製備方法。
背景技術：
乳房炎是奶牛的一種常見多發疾病，主要是由致病性細菌感染引起。奶牛在幹奶期發生乳房炎，很容易導致產後初期發生乳房炎，而奶牛在產後2 3個月是泌乳高峰期，此時發生乳房炎，不僅奶牛的泌乳性能得不到充分表現，而且病情嚴重時可喪失泌乳能力。處於幹奶期的奶牛，由於身體和乳房的生理機能均發生一系列變化，造成免疫機能下降，力口上停止擠奶後乳房內的白細胞和免疫球蛋白數量隨之驟然減少，因此奶牛在停奶後三周內極易發生環境性病原菌的感染。另外，奶牛乳房炎可分為臨床型和隱性感染(即不表現臨床症狀)，文獻報導我國奶牛隱性乳房炎陽性率高達70%，隱性感染特別是幹奶期隱性感染由於臨床表現不明顯，容易被忽視，而當轉入產奶期後，則可能導致產奶量急劇下降，影響生產效益。幹奶期是治療和預防乳房炎的最佳時期，幹奶期乳房炎的治癒率是泌乳期的兩倍左右；乳腺組織會在分娩前再生，幹奶期治療乳房炎降低分娩時臨床型乳房炎的發生率。60%革蘭氏陰性菌感染所導致的乳房炎發生在幹奶期，50%以上的乳房炎是由在幹奶時內存細菌復甦造成的，如果不進行乳房內感染的治療，細菌會保持靜止，直至產後或泌乳早期引發乳房炎。幹奶期可以使用更大劑量的抗生素，抗生素在乳房內存留期更長，乳房炎造成的受損組織可以在重新泌乳前恢復，且藥物殘留對牛奶的汙染風險將大大降低。目前國內所用的均為單一抗生素類藥物。如青黴素、鏈黴素等，這類藥物存在作用時間短，且不具有廣譜性，對預防奶牛隱性乳房炎的效果並不明顯。也有些奶牛場利用國外幹奶牛乳房注入劑防治，但其大多是由幾種抗生素構成的複合劑，沒有消炎成分，僅對特異性的細菌性感染有預防作用，對奶牛幹奶期乳房組織不具消炎作用，且大多價格較貴。因此，研製一種具有廣譜抗菌作用和長效的，用於防治奶牛幹奶期乳房炎的乳房注入藥物，已經成為我國奶牛乳房炎治療中亟待解決的問題。利福昔明(Rifaximin)屬於利福黴素類抗生素，為利福黴素的衍生物，抗菌譜較廣，對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌、棒狀桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌、擬桿菌等均具有很高的殺菌活性，而上述病原菌多為引起奶牛乳房炎的主要病原菌。同時，該藥物在體內吸收極少，屬於局部殺菌藥，適於治療奶牛幹奶期乳房炎。動物試驗表明，其無致突變、致畸作用，僅長期大劑量服用(150-250 mg/kg bw/d連用2年)後可能存在致癌風險，安全性較高。由於利福昔明不易吸收、作用於局部的特點，Fatix)公司開發了動物用乳房注入劑、子宮注入劑和噴霧劑，用於治療奶牛幹奶期乳房炎、子宮炎症及皮膚感染。利福昔明用於治療奶牛幹奶期乳房炎，對病原菌特異性殺滅作用強，產犢後，在乳汁中無藥物殘留，對乳汁品質影響較小，是一種理想的奶牛幹奶期乳房炎治療藥物。目前利福昔明乳房注入劑(商品名Fatroximin或Fatrox)已在多個國家(義大利、西班牙、拉脫維亞、法國、比利時等)註冊上市，是一種肉產品無休藥期的奶牛幹奶期乳房炎治療用藥。國內人藥已有多種利福昔明產品，主要用於治療腹瀉及肝性腦病，但是用於治療奶牛乳房炎的獸藥尚無利福昔明製劑產品面世。蒲公英是一味重要的臨床常用中草藥，集藥用和食用於一身，具有清熱解毒、消腫散結和利尿通淋的功效。臨床上主要用於乳癰、疔瘡腫毒、咽痛、肺癰、腸癰、目赤、溼熱黃疸、熱淋澀痛等症。蒲公英在我國分布非常廣泛，採集方便、易得，價格低廉。上千年來人們積累了豐富的臨床經驗，在某些方面是西醫不可比擬的。自唐代人們就用蒲公英治療乳癰，蒲公英是治療動物和人乳房炎的首選藥物。藥理試驗證明，蒲公英具有廣譜抗菌、保肝利膽、抗內毒素、健胃和免疫促進作用。在長期實踐中，蒲公英治療乳房炎有較好的效果。然而，蒲公英的主要抗菌成分及其抑菌效果、相互協同作用以及抑菌作用機理等，人們沒有完全清楚。蒲公英具有廣譜抑菌作用，對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、真菌、螺旋體和病毒均有不同程度的抑制作用。蒲公英對金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌有較強的殺滅作用， 其對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度(MIC)為0. 5g/mL，主要是抑制細菌的生長及蛋白質合成；最小殺菌濃度(MBC)為lmg/mL，可使金黃色葡萄球菌的細胞膨大，細胞壁增厚，核糖體聚集成塊，有的細胞壁破裂，胞質滲出，說明蒲公英的抗菌機制一方面是通過抑制細胞壁合成，另一方面是通過抑制蛋白質和DNA的合成來實現。蒲公英毒性較低，腹腔注射為(156. 3 ±9. 0) g/kg，靜脈注射為(58. 9 ±7. 9) g/kg。自20世紀40年代抗生素問世以來，乳腺炎的治療主要依賴於抗生素，但是抗生素療法已漸漸暴露了它的弊端，首先是抗生素成分單一，細菌易產生耐藥性；另一個弊端是牛奶中的抗生素殘留問題，牛奶中殘留的抗生素會誘發人體發生超敏反應，給人類健康造成極大的危害。而純中藥製劑，雖然無殘留、毒副作用小，但其抗菌效力遠不如抗生素。所以，發明新的更為理想的藥物是當務之急。本發明就是為了儘可能的克服抗生素殘留和耐藥性以及純中藥製劑抗菌效力小之不足而展開。因此，開發一種專門用於預防和治療奶牛幹奶期乳房炎的含有利福昔明和中藥的複方製劑具有重要意義。
發明內容
為克服現有技術的不足，本發明的目的在於提供一種安全有效、質量可控的，並具有局部高效低毒的含有利福昔明及蒲公英植物提取物的複方製劑。本發明所提供的含有利福昔明及蒲公英植物提取物的複方製劑的主要有效成分為
利福昔明、蒲公英植物提取物；
其重量用量配比為
利福昔明蒲公英植物提取物=(0. 5 I) : (5 5. 5)
製備所述複方製劑所需要的輔助成分為增稠劑、粘度調節劑、抗氧劑及溶媒；所述增稠劑可選用波洛沙姆407，所述粘度調節劑可選用肉豆蘧酸異丙酯，所述抗氧劑可選用BHT，所述溶媒可選用藥用級蓖麻油。上述複方製劑中主要有效成分及副輔助成分的重量用量配比範圍如下利福昔明0. 5^1份、蒲公英植物提取物5 5. 5份、
增稠劑波洛沙姆407 4飛份、粘度調節劑肉豆蘧酸異丙酯1 2份、抗氧劑BHT
0.05、. 10份，其餘為藥用級蓖麻油，合計共100份。上述複方製劑中主要有效成分及副輔助成分的優選重量用量配比如下
利福昔明0. 5份、蒲公英植物提取物5. 5份、
增稠劑波洛沙姆4074 6份、粘度調節劑肉豆蘧酸異丙酯廣2份、抗氧劑BHT 0. 05 0. 10份，其餘為藥用級蓖麻油，合計共100份。上述複方製劑中，所使用的利福昔明執行的質量標準為國家食品藥品監督管理局 標準，含量為98. 4% ;上述複方製劑中，所使用的蒲公英植物提取物是由原藥材蒲公英提取加工製得，其中，含咖啡酸不低於0. 140% (按100%幹品計)。上述蒲公英植物提取物具體製備方法如下
I)原藥材的挑揀將原藥材鋪放於挑揀臺上，逐個將原藥材中的雜質揀出。2)清洗將經挑揀的原藥材置清洗池中，用飲用水洗滌，並將洗後的藥材放入第二個清洗池中浸洗，洗淨後置容器內浙幹水分。3)水提在提取罐中加入為投料量的8倍(w/w)的飲用水，加入蒲公英，物料浸泡30分鐘，加熱煎煮3小時，將已提取好的藥液輸送至儲罐。重複水提3次。合併3次水提的提取液。4)將提取液進行噴霧乾燥，得蒲公英植物提取物粉末，粒度不大於200目。本發明所提供的含有利福昔明及蒲公英植物提取物的複方製劑的製備方法，其具體步驟和工藝條件如下
(I)準確稱取利福昔明及蒲公英植物提取物(已用高速氣流粉碎法微粉化)，用少量藥用級蓖麻油(約佔蓖麻油總用量的5%-6%)分散，超聲混勻，攪拌至完全分散開。(2)將抗氧劑BHT溶於粘度調節劑肉豆蘧酸異丙酯中，攪拌至完全溶解，備用。(3)將其餘藥用級蓖麻油加熱至65 °C，再稱取增稠劑波洛沙姆407加入蓖麻油中，攪拌至完全溶解。(4)將(2)步料液倒入(3)，攪拌均勻，然後再將(I)步的有效成分混合料液倒入
(3)，攪拌均勻。最後使用高剪切乳化機在50 Hz的條件下攪拌30 min，放置冷卻後分裝。本發明藥物可用於治療由金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌、棒狀桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌及擬桿菌等引起的幹奶期奶牛乳房炎。本發明所提供的含有利福昔明及蒲公英植物提取物的複方製劑為複方乳房注入劑。本發明的創造性在於揭示了利福昔明及蒲公英植物提取物的複方製劑乳房注入劑具有臨床上常用抗生素的抗菌作用，又具有抗生素所沒有的非特異性抗炎和免疫調節作用，試驗表明利福昔明及蒲公英植物提取物互相組合，具有協同、互補和增效作用。本發明的創新之處在於將難溶於水的廣譜抗菌藥物利福昔明及具有安全、低毒、高效的蒲公英植物提取物製備成可以直接進行乳房注入的製劑，不進入血液循環，在體內殘留低，降低了對奶牛的損害，該製劑使用不易被動物機體吸收的蓖麻油作為溶媒，在蓖麻油中加入增稠劑泊洛沙姆407起到吸收阻滯劑和穩定劑的作用，使該製劑可以在奶牛乳房內長期、緩慢、穩定釋放，幹奶期間用藥可以保證在下次產奶前仍能保持防治效果。
與現有技術相比，本發明的藥物具有以下優點
1)本發明的複合製劑具有抗菌譜廣，緩釋藥物，延長藥物作用時間；
2)本發明的複合製劑具有釋藥性好，提高局部藥物濃度、降低用藥量、減少細菌耐藥性和體內藥物殘留，提高藥物生物利用度充分發揮了藥物協同作用，增強藥效，並降低藥物毒性。3)本發明的複合製劑具有穩定性良好，易於保存；製備方法具有快速簡便、成本低、可操作性強等優點，且製備過程中使用的輔料均為醫藥級，動物體耐受性好，安全。湯劑灌服雖有較好的治癒效果，但對奶牛的刺激較大，而且因為口服給藥的肝臟首過效應和胃腸道的代謝降低了藥物的有效成分，用藥劑量大，治療成本高；而拌料飼喂，因藥物氣味影響，常常引起奶牛採食量下降，從而影響治療效果。本發明採用乳房注入方法，避免了以上兩種給藥方式的缺點，使藥物直接作用於患處，在乳腺內達到較高的藥物濃 度，發揮抗菌消炎的治療作用，達到較好的治療效果。將利福昔明與中藥合用並製成複方製劑用於治療和預防奶牛幹奶期乳房炎還並未見到報導，主要是中西藥作用機理不同，對於本領域技術人員無法預料到二者復配後的效果。
具體實施例方式實施例一
I)取82. 9份(重量份，以下同)藥用級蓖麻油放入燒杯中，加熱至65 V ;再稱取5份增稠劑波洛沙姆407加入蓖麻油中，攪拌至完全溶解。
2)稱取I. 5份粘度調節劑肉豆蘧酸異丙酯，加熱至65 °C，並將0. I份抗氧劑BHT
溶解於其中，備用。3)稱取0. 5份利福昔明及5份蒲公英植物提取物，加入5份藥用蓖麻油，充分超聲混勻，使其完全分散。4)將2)粘度調節劑趁熱倒入I)步藥用級蓖麻油中，攪拌至完全溶解，放冷至室溫；然後再將3)步原料藥倒入1)，充分混勻I小時，使其完全分散，最後使用高速剪切乳化機在50Hz的條件下攪拌30 min，放冷即可分裝。製得含0. 5%利福昔明和5%蒲公英植物提取物製劑。實施例二
I)取82. 4份藥用級蓖麻油放入燒杯中，加熱至65 °C;再稱取5份增稠劑波洛沙姆407加入蓖麻油攪拌至完全溶解。2)稱取I. 5份粘度調節劑肉豆蘧酸異丙酯，加熱至65 °C，並將0. I份抗氧劑BHT
溶解於其中，備用。3)稱取0. 5份利福昔明及5. 5份蒲公英植物提取物，加入5份藥用蓖麻油，充分超聲混勻，使其完全分散。將2)步粘度調節劑趁熱倒入I)步藥用級蓖麻油中，攪拌至完全溶解，放冷至室溫；然後再將3)步原料藥倒入1)，充分混勻I小時，使其完全分散，最後使用高速剪切乳化機在50Hz的條件下攪拌30 min，放冷即可分裝。製得含0. 5%利福昔明5. 5%蒲公英植物提取物製劑。
實施例三
I)取81. 9份藥用級蓖麻油放入燒杯中，加熱至65 °C;再稱取5份增稠劑波洛沙姆407加入蓖麻油中，攪拌至完全溶解。2)稱取I. 5份粘度調節劑肉豆蘧酸異丙酯，加熱至65 °C，並將0. I份抗氧劑BHT
溶解於其中，備用。3)稱取I份利福昔明及5. 5份蒲公英植物提取物，加入5份藥用蓖麻油，充分超聲混勻，使其完全分散。4)將2)步粘度調節劑趁熱倒入I)步藥用級蓖麻油中，攪拌至完全溶解，放冷至室溫；然後再將3)步原料藥倒入1)，充分混勻I小時，使其完全分散，最後使用高速剪切乳化機在50Hz的條件下攪拌30 min，放冷即可分裝。製得含1%利福昔明5. 5%蒲公英植物提取 物製劑。實施例四.溫度穩定性試驗
將適量製備好的本發明抗生素製劑裝入乳管中，密封，置於4 °C冰箱，室溫25 °C和40°〇條件下留樣考察30 d，每隔5天取樣考察。結果表明，該利福昔明抗生素藥物製劑在上述條件下沒有明顯結塊團聚現象，呈均勻膠體狀，橘紅色，未見分層、變色等現象，表明該抗生素藥物的溫度穩定性好。光照試驗
將適量製備好的本發明抗生素製劑裝入玻璃瓶中，密封，置於裝有日光燈的光照箱或其他適宜的光照裝置內，照度為4500 lx±500 Ix的條件下放置10天，分別在第5天、10天取樣。結果顯示，本抗生素製劑保持均勻的橘紅色，未見變色、分層等現象。熱加速試驗
將適量製備好的本發明抗生素製劑裝入乳管中，密封，置於30 °C ±2 °C、相對溼度75%±5%的條件下放置6個月，分別在I個月、2個月、3個月、6個月末取樣考察。結果顯示，本發明的含有利福昔明抗生素製劑在30 °C條件下，未見分層，呈均勻的膠體狀，橘紅色，未發現變色、分層等現象。實施例無五.體外抑菌試驗
I、試驗材料
受試藥物本發明含有利福昔明蒲公英的複方製劑0. 5:5,0. 5:5. 5,1:5. 5 ； 2%利福昔明單方製劑及10%蒲公英植物提取物單方製劑；規格5g/支；
試驗菌種及培養基普通瓊脂培養基(自製)、普通營養肉湯(自製)、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌。2、試驗方法
取內徑90 mm，高16 17 mm的平皿。分別注入加熱融化的培養基20 ml作為底層，使其在皿底內均勻攤布，放置水平檯面上使凝固，作為底層。另取培養基適量加熱融化後，放冷至48 50 °C，分別加入金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌懸液適量，搖勻，在每平皿中分別加入5 ml，使在底層上均勻攤布，作為菌層。放置在水平檯面上冷卻後，在每平皿中以等距離均勻安置不鏽鋼小管(內徑為6. 0±0. I mm，高10.0±0.1 mm，外徑7.8±0.1 mm) 4個。在小管中分別滴裝被檢品溶液50 u 1，35°C孵育18 24h後觀察抑菌情況，測量各個抑菌圈的直徑。
根據體外抑菌試驗結果對2%利福昔明單方製劑、10%蒲公英植物提取物單方製劑及利福昔明的複方製劑中利福昔明和蒲公英植物提取物濃度的比例進行篩選。表I體外抑菌試驗
權利要求
1.一種含有利福昔明的用於預防和治療奶牛幹奶期乳房炎製劑，其特徵在於該製劑為含有利福昔明及蒲公英植物提取物的複方製劑。
2.如權利要求I所述的含有利福昔明及蒲公英植物提取物的複方製劑，其特徵在於主要有效成分利福昔明、蒲公英植物提取物的重量用量配比為 利福昔明蒲公英植物提取物=(0.5 I) : (5 5. 5)。
3.如權利要求I或2所述的含有利福昔明及蒲公英植物提取物的複方製劑，其特徵在於主要有效成分利福昔明、蒲公英植物提取物的重量用量配比為 利福昔明蒲公英植物提取物=0.5 : 5.5。
4.如權利要求I或2所述的含有利福昔明及蒲公英植物提取物的複方製劑，其特徵在於輔助成分為增稠劑、粘度調節劑、抗氧劑及溶媒。
5.如權利要求4所述的含有利福昔明及蒲公英植物提取物的複方製劑，其特徵在於所述增稠劑選用波洛沙姆407 ；所述粘度調節劑選用肉豆蘧酸異丙酯；所述抗氧劑選用BHT ；所述溶媒選用藥用級蓖麻油。
6.如權利要求4所述的含有利福昔明及蒲公英植物提取物的複方製劑，其特徵在於所述複方製劑中各成分的重量用量範圍如下 利福昔明0. 5^1份、蒲公英植物提取物5 5. 5份、增稠劑波洛沙姆407 4^6份、粘度調節劑肉豆蘧酸異丙酯f 2份、抗氧劑BHT 0.05、. 10份，其餘為藥用級蓖麻油，合計共100份。
7.如權利要求4所述的含有利福昔明及蒲公英植物提取物的複方製劑，其特徵在於所述複方製劑中各成分的重量用量如下 利福昔明0. 5份、蒲公英植物提取物5. 5份、增稠劑波洛沙姆4074飛份、粘度調節劑肉豆蘧酸異丙酯廣2份、抗氧劑BHT 0. 05、. 10份，其餘為藥用級蓖麻油，合計共100份。
8.如權利要求1-7所述的含有利福昔明及蒲公英植物提取物的複方製劑，其特徵在於所說的蒲公英植物提取物的是按如下方法製備的 I)原藥材的挑揀將原藥材鋪放於挑揀臺上，逐個將原藥材中的雜質揀出； 2)清洗將經挑揀的原藥材置清洗池中，用飲用水洗滌，並將洗後的藥材放入第二個清洗池中浸洗，洗淨後置容器內浙幹水分； 3)水提在提取罐中加入為投料量的8倍(w/w)的飲用水，加入蒲公英，物料浸泡30分鐘，加熱煎煮3小時，將已提取好的藥液輸送至儲罐； 重複水提3次，合併3次水提的提取液； 4)將提取液進行噴霧乾燥，得蒲公英植物提取物粉末，粒度不大於200目，其中，含咖啡酸不低於0. 140%。
9.如權利要求1-7所述的含有利福昔明及蒲公英植物提取物的複方製劑的製備方法，其特徵在於具體步驟和工藝條件如下 (1)準確稱取利福昔明及蒲公英植物提取物(已用高速氣流粉碎法微粉化)，用少量藥用級蓖麻油(約佔蓖麻油總用量的5%-6%)分散，超聲混勻，攪拌至完全分散開； (2)將抗氧劑BHT溶於粘度調節劑肉豆蘧酸異丙酯中，攪拌至完全溶解，備用； (3)將其餘藥用級蓖麻油加熱至65°C，再稱取增稠劑波洛沙姆407加入蓖麻油中，攪拌至完全溶解；(4 )將(2 )步料液倒入(3 )，攪拌均勻，然後再將(I)步的有效成分混合料液倒入(3 )，攪拌均勻；最後使用高剪切乳化機在50 Hz的條件下攪拌30 min，放置冷卻後分裝。
10.如權利要求1-7所述的含有利福昔明及蒲公英植物提取物的複方製劑的應用，其特徵在於用作預防和治療由金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌、棒狀桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌及擬桿菌引起的幹奶期奶牛乳房炎的乳房注入劑。
全文摘要
本發明為一種含有利福昔明的用於預防和治療奶牛幹奶期乳房炎製劑，其主要有效成分為利福昔明及蒲公英植物提取物，輔助成分為增稠劑波洛沙姆407；粘度調節劑肉豆蔻酸異丙酯；抗氧劑BHT；溶媒藥用級蓖麻油。可用作預防和治療由金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、鏈球菌、腸球菌、棒狀桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌及擬桿菌引起的幹奶期奶牛乳房炎的乳房注入劑。
文檔編號A61K36/288GK102716168SQ20121021675
公開日2012年10月10日 申請日期2012年6月28日 優先權日2012年6月28日
發明者劉金亮, 吳連勇, 孔梅, 崔進, 李成應, 王海挺, 田玉柱, 董菊紅 申請人:齊魯動物保健品有限公司