治療血栓形成性疾病的方法
2023-09-18 21:41:10
專利名稱：治療血栓形成性疾病的方法
本申請是申請日為1998年6月1日，申請號為98807818.X，發明名稱同上的發明專利申請的分案申請。
本發明涉及醫學科學尤其是用活化的人蛋白C聯合抗血小板藥物治療血栓形成性疾病。
蛋白C是一種絲氨酸蛋白酶和天然存在的抗凝劑，它通過使凝血級聯中的因子Va和VIIIa失活從而在止血調節中發揮作用。人蛋白C以雙鏈酶原循環於體內，它在體內被凝血酶和磷脂表面上的凝血調節蛋白活化，從而產生活化的蛋白C(aPC)。
血液凝固是一個非常複雜的過程，受前凝血和抗凝血機制之間的平衡的調節。該平衡決定或者是正常的止血或者是異常病理的血栓形成狀態，所述病理血栓形成引起諸如中風、心肌梗塞和靜脈血栓形成的事件。兩個主要因素控制該平衡，即纖維蛋白的產生和血小板的激活及其隨後的聚集。控制以上兩個過程的一個重要因素是凝血酶的產生，凝血酶的產生發生於凝血級聯激活之後。凝血酶是一種前凝血酶，它使血小板聚集並使循環型纖維蛋白原轉化為不溶性纖維蛋白，導致形成血凝塊。因為凝血酶將蛋白C酶原激活成為活化的蛋白C，該活化的蛋白C再抑制凝血酶的產生，所以它也以有效的抗凝劑發揮作用。因此，aPC通過反饋調節凝血酶的產生，它也可能作為血液凝固最重要的負調節劑發揮作用，從而產生抗血栓形成的保護作用。
在雜合型缺陷蛋白C抗性(例如，由常見的因子V Leiden突變引起的)和未治療的純合型蛋白C缺陷的致死性後果中血栓形成速率增高，說明了蛋白C在控制止血中的重要作用。在各種靜脈和動脈血栓形成動物模型中已經表明，血漿衍生的人活性蛋白C以及重組人活化蛋白C是有效安全的抗血栓形成藥物。
在目前的臨床實踐中，許多文獻證明血小板抑制例如使用阿斯匹林(ASP)在預防和治療血栓形成性疾病中是有效的。此外，在諸如心肌梗塞和中風的疾病中，血小板抑制已經成為標準治療。然而，使用諸如ASA的抗血小板藥物增加了出血風險，從而限制了該藥物的劑量和治療時間。為了阻止凝血酶在纖維蛋白形成中的作用，在急性治療處理中，肝素仍然是標準抗凝劑。然而，肝素的治療指數窄，且與顯著的出血風險有關，尤其是在聯合應用抗血小板藥物時。
在犬冠狀動脈血栓形成模型中已經研究了阿斯匹林和一種合成的凝血酶抑制劑、組織纖溶酶原激活物或單克隆抗血小板糖蛋白IIb/IIIa抗體的聯合治療[Yasuda等，J Am Coll Cardiol.，16714-22(1990)]。阿斯匹林聯合這些藥物使出血時間延長，而並不能防止冠狀動脈的再阻塞。另外，已經提出了aPC與諸如組織纖溶酶原激活物、尿激酶或鏈激酶的溶栓劑的聯合治療[Griffin等，美國專利第5,350,578號]。然而，還未證實這些聯合治療成功與否。因此，仍然需要鑑定治療血栓形成性疾病的有效治療法。
本發明是第一個描述在治療血栓形成中aPC與抗血小板藥物聯合的發明。因此，本發明提供aPC聯合抗血小板藥物用於治療血栓形成性疾病的應用。該聯合治療使得對各種血栓形成性疾病的療效提高，所述血栓形成性疾病包括但不限於中風、心肌梗塞、不穩定型心絞痛、血管成形術或stent放置術後突發性血管閉塞以及外周血管手術引起的血栓形成。此外，aPC與抗血小板藥物的聯合應用產生協同作用，使得允許減少aPC和抗血小板藥物的劑量。聯合治療中所述藥物劑量的減少又使得諸如出血傾向增高的副作用降低，所述副作用在聯合抗凝劑/抗血小板治療中常常觀觀察到。
本發明提供治療需要其治療的病人的血栓形成性疾病的方法，它包括與一種抗血小板藥物聯合，給予所述病人藥用有效量的活化蛋白C。此外，本發明提供治療需要其治療病人的血栓形成性疾病的方法，包括給予所述病人藥用有效量的抗血小板藥物和活化蛋白C，從而使得活化蛋白C血漿水平為10ng/ml至低於100ng/ml。
為了本發明，如本文說明書和權力要求書所述，下列術語定義如下。
無論是重組還是血漿衍生的aPC或活化蛋白C，aPC包括並最好是人蛋白C，儘管aPC也可以包括其它物種的aPC或具有蛋白C蛋白水解活性、醯胺分解活性、酯解活性以及生物活性(抗凝活性或纖維蛋白原分解活性)的衍生物。Gerlitz等的美國專利第5,453,373號和Foster等，美國專利第5,516,650號描述了蛋白C衍生物的實例，所述文獻的全部知識通過引用結合到本文中。
APTT-活化部分凝血致活酶時間。
HPC-人蛋白C酶原。
r-hPC-在原核細胞、真核細胞或轉基因動物中產生的重組人蛋白C酶原。
r-aPC-重組人活化蛋白C，它通過體外激活r-hPC產生或由原核細胞、真核細胞或轉基因動物直接分泌活化形式的蛋白C[Cottingham，WO97/20043]，包括例如以酶原從人腎293細胞分泌，然後用本領域技術人員熟知、在Yan的美國專利第4,981,952號中證實的技術純化和活化，所述文獻的全部知識通過引用結合到本文中。
酶原-是指分泌的非活性形式的單鏈或雙鏈蛋白C。
抗血小板藥物-降低血小板聚集能力的單獨或組合的一種或多種藥物。本領域已知並鑑定的藥物包括在例如Remington，The Scienceand Practice of Pharmacy，第19版，第II卷，第924-25頁，Mack PublishingCo.中引用的藥物，該文獻通過引用結合到本文中。這類藥物包括但不限於阿斯匹林(ASA)、clopidogrel、ReoPro(abciximab)、潘生丁、氯苄噻啶和IIb/IIIa拮抗劑。
治療-是指為了防禦疾病、病症或紊亂對病人的處理及護理，包括給予本發明化合物，以防止症狀或併發症的發生，緩解所述症狀或併發症，或解除疾病、病症或紊亂。
連續輸注-特定時間內基本上不間斷地持續將一種溶液導入靜脈內。
大劑量注射-於高達約120分鐘的時間內注射給定量(稱為大劑量)的藥物。
藥用有效量-指本發明化合物能夠抑制哺乳動物血栓形成性疾病的量。當然，主治醫師對該病例的特定情況包括所給予的化合物、待治療的特定病症以及類似情況的考慮，確定按照本發明給予的化合物的具體劑量。
血栓形成性疾病-涉及或受血管內形成或存在的凝血塊影響的疾病。血栓形成性疾病包括但不限於中風、心肌梗塞、不穩定型心絞痛、血管成形術或stent放置術後突發性血管閉塞以及外周血管手術引起的血栓形成。
本發明優選涉及用活化蛋白C聯合抗血小板藥物治療血栓形成性疾病。在這種組合中所用的aPC可以按照已知方法配製，以製備藥學上有用的組合物。通過連續輸注約24小時至約144小時注入合適劑量，胃腸外給予所述aPC，以保證將其以有效形式傳遞入血流。
在與抗血小板藥物的聯合治療中，所給予的aPC量為約4mg/70Kg/24小時至160mg/70Kg/24小時，或者等同表示為0.1mg/m2至4mg/m2或者2μg/kg/hr至96μg/kg/hr。所給予的aPC量更優選為約4mg/70Kg/24小時至120mg/70Kg/24小時，或者等同表示為0.1mg/m2至3mg/m2或者2.4μg/kg/hr至72μg/kg/hr。而所給予的aPC量更優選為約4mg/70Kg/24小時至80mg/70Kg/24小時，或者等同表示為0.1mg/m2至2mg/m2或者2.4μg/kg/hr至48μg/kg/hr。所給予的aPC的量甚至更優選為約4mg/70Kg/24小時至60mg/70Kg/24小時，或者等同表示為0.1mg/m2至1.5mg/m2或者2.4μg/kg/hr至36μg/kg/hr。所給予的aPC的量甚至再更優選為約10mg/70Kg/24小時至50mg/70Kg/24小時，或者等同表示為0.25mg/m2至1.25mg/m2或者6μg/kg/hr至30μg/kg/hr。所給予的aPC的量甚至再更優選為約20mg/70Kg/24小時至40mg/70Kg/24小時，或者等同表示為0.5mg/m2至1.0mg/m2或者12μg/kg/hr至24μg/kg/hr。所給予aPC的最優選量為約40mg/70Kg/24小時，或者等同表示為1.0mg/m2或者24μg/kg/hr。與抗血小板治療藥物一起給予合適劑量的aPC，將使得或者提高療效或者減少其中之一或者兩種藥物的劑量。
給予上述量aPC所獲得的血漿濃度範圍為2ng/ml至低於100ng/ml。優選血漿濃度範圍從約20ng/ml至80ng/ml。最優選血漿濃度範圍從約30ng/ml至約60ng/ml，甚至更優選約50ng/ml。
或者，所述aPC的給予採取以大劑量注射注入每小時合適劑量的三分之一，接下來連續輸注每小時劑量的餘下三分之二1小時，之後連續輸注合適劑量23小時，這使得24小時給予合適劑量。
術語「聯合」是指抗小板藥物與aPC同時、序貫或者組合給予。血小板抑制劑與aPC聯合給予將提高各種血栓形成性疾病的治療效能，所述疾病包括但不限於中風、靜脈血栓形成、心肌梗塞、不穩定型心絞痛、血管成形術或stent放置術後突發性血管閉塞以及外周血管手術引起的血栓形成。該協同作用也使得能夠降低聯合治療中的藥物劑量，從而使得降低在聯合抗凝劑/抗血小板治療中常常觀察到的諸如出血傾向增高的副作用。
所用抗血小板藥物和合適的劑量水平是本領域已知並接受的。技術人員知道每種抗血小板藥物獲得治療血栓形成性疾病的藥用有效量的所用的合適劑量水平。在本發明中適合應用的抗血小板藥物包括但不限於臨床認可並有市售的藥物，諸如阿斯匹林(ASA)、clopidogrel、ReoPro(abciximab)、潘生丁、氯苄噻啶和IIb/IIIa拮抗劑。與aPC聯合給予的抗血小板藥物阿斯匹林(ASA)的量為約10mg-1000mg，一日一次。與aPC聯合給予的抗血小板藥物氯苄噻啶的量為約50mg-1250mg，一日兩次(B.I.D.)。與aPC聯合給予的抗血小板藥物潘生丁的量為約15mg-500mg，一日四次。與aPC聯合給予的抗血小板藥物clopidogrel的量為約40mg-1000mg，一日一次。與aPC聯合給予的抗血小板藥物ReoPro(abciximab)的量為約0.025μg/kg/min-1μg/kg/min，12小時靜脈輸注給予。或者，與aPC聯合給予的ReoPro可以以約0.05mg/kg-1.0mg/kg大劑量注射。此外，與aPC聯合給予的ReoPro可以以大劑量注射，然後靜脈輸注12小時。根據使用的具體藥物，與aPC聯合使用的IIb/IIIa拮抗劑的量為約0.1mg/kg至約100mg/kg[參見例如Fisher等，美國專利第5,618,843號，其全部知識通過引用結合到本文中]。本領域技術人員能夠確定用以獲得藥用有效量的合適劑量水平。
與抗血小板藥物聯合使用的aPC提高單獨的抗血小板藥物的抗血栓形成作用。因此，該聯合治療可以減少aPC的治療劑量和減少治療性治療血栓形成需要的抗血小板藥物的劑量，由此避免諸如出血傾向的併發症、高劑量抗血小板藥物的毒性以及一般副反應。
製備1人蛋白C的製備重組人蛋白C(r-hPC)通過技術人員熟知的技術在人腎293細胞中生產，所述技術諸如在Yan，美國專利第4,981,952號中提出的技術，該文獻全部知識通過引用結合到本文中。編碼人蛋白C的基因在Bang等，美國專利第4,775,624號中公開並要求保護，該專利全部知識通過引用結合到本文中。用來在293細胞中表達人蛋白C的質粒是在Bang等，美國專利第4,992,373號中公開的質粒pLPC，所述專利的全部知識通過引用結合到本文中。質粒pLPC的構建也描述於歐洲專利公告第0 445 939號和Grinnell等，1987，Bio/Technology 51189-1192，所述文獻的知識也通過引用結合到本文中。簡而言之，將該質粒轉染入293細胞，然後鑑定、傳代培養穩定的轉化體並使其在無血清培養基中生長。發酵後，通過微量過濾獲得無細胞培養液。
採用修改的Yan，美國專利第4,981,952號的技術，從培養液分離人蛋白C，所述專利的全部知識通過引用結合到本文中。在澄明培養液吸附到陰離子交換樹脂(Fast-Flow Q，Pharmacia)之前製備其4mMEDTA液。用4倍柱體積的20mM Tris，200mM NaCl，pH 7.4和2倍柱體積的20mM Tris，150mM NaCl，pH 7.4洗滌後，用20mM Tris，150mMNaCl，10mM CaCl2，pH 7.4洗脫結合的重組人蛋白C酶原。洗脫後按照SDS聚丙稀醯胺凝膠電泳判定，該洗脫蛋白的純度高於95％。
製備所述蛋白的3M NaCl液，然後吸附到已在20mM Tris，3MNaCl，10mM CaCl2，pH 7.4中平衡的疏水作用樹脂(Toyopearl Phenyl650 M，TosoHaas)，從而完成該蛋白的進一步純化，用2倍柱體積無CaCl2的平衡緩衝液洗滌後，用20mM Tris，pH 7.4洗脫該重組人蛋白C。
通過去除殘餘鈣製備用於活化的洗脫蛋白。使該重組人蛋白C通過金屬親合柱(Chelex-100，BioRad)以去除鈣並再結合到陰離子交換劑(Fast-Flow Q，Pharmacia)。這兩種柱子連續串聯排列並用20 mM Tris，150 mM NaCl，5 Mm EDTA，pH 6.5平衡。將該蛋白加樣後，用一倍柱體積的相同緩衝液洗滌Chelex-100柱，然後將其中斷串聯。所述陰離子交換柱用3倍柱體積的平衡緩衝液洗滌，然後用0.4M NaCl，20mMTris-乙酸鹽，pH 6.5洗脫該蛋白。分別用UV 280 nm消光E0.1％＝1.81或1.85測定重組人蛋白C和重組活化蛋白C溶液的蛋白濃度。
製備2重組人蛋白C的活化將牛凝血酶在存在50mM HEPES，pH 7.5的情況下於4℃偶聯至活化的CH-Sepharose 4B(Pharmacia)。採用約5000單位凝血酶/ml樹脂，當樹脂裝入柱中時進行所述偶聯反應。所述凝血酶溶液循環通過所述柱子約3小時，然後加入MEA成為0.6ml/l濃度的循環液。該含MEA的溶液再循環10-12小時，以確保完全封閉所述樹脂上未反應的胺。封閉後，所述凝血酶偶聯樹脂用10倍柱體積的1M NaCl，20mM Tris，pH6.5洗滌以去除所有非特異性結合的蛋白，並在活化緩衝液中平衡後用於活化反應。
製備純化r-hPC的5mM EDTA液(以螯合任何殘餘鈣)，並用20mMTris，pH 7.4或20mM Tris-乙酸鹽，pH 6.5稀釋為2mg/ml濃度。將該物質通過於37℃用50mM NaCl和或20mM Tris pH 7.4或20mM Tris-乙酸鹽pH 6.5平衡的凝血酶柱。調節流速以允許該r-hPC與凝血酶樹脂接觸時間近20min。收集流出液並立即檢測醯胺分解活性。假如該物質無相當於aPC確立的標準的比活(醯胺分解活性)，則將其再循環通過凝血酶柱完全活化所述r-hPC。之後用7.4至6.0之間任何pH(pH ofanywhere between 7.4 or 6.0)(優選較低pH以防止自動降解)的上述20mM緩衝液1∶1稀釋該物質，以保持aPC於較低濃度，而待下一加工步驟使用。
通過將所述aPC結合至陰離子交換樹脂(Fast Flow Q，Pharmacia)，完成從aPC物質去除浸提的凝血酶，所述陰離子交換樹脂已在含150mM NaCl的活化緩衝液(或者為20mM Tris，pH 7.4或者優選20mMTris-乙酸鹽，pH 6.5)中平衡。使凝血酶通過該柱，並在經過用20mM平衡緩衝液的2-6個柱體積洗滌期間進行洗脫。結合的aPC用採用0.4M NaCl的或者5mM Tris-乙酸鹽pH 6.5或者20mM TrispH 7.4的階式梯度進行洗脫。較大體積洗滌液洗滌該柱有助於更徹底去除所述十二肽。從該柱子洗脫的物質或者以冷凍液(-20℃)或者作為凍乾粉貯藏。
採用Beckman DU-7400二極體矩陣分光光度計，通過由購自KabiVitrum的合成底物H-D-Phe-Pip-Arg-對硝基醯基苯胺(S-2238)釋放的p-硝基苯胺，測定aPC的醯胺分解活性(AU)。一個單位的活化蛋白C定義為採用於450nm下9620M-1cm-1的對硝基苯胺的消光係數，於25℃、pH 7.4在1分鐘內釋放1μmol對硝基苯胺所需要的酶量。
通過檢測活化部分凝血致活酶時間(APTT)凝血測定中凝血時間的延長，從而測定治化蛋白C的抗凝活性。用蛋白C濃度範圍125-1000ng/ml的稀釋緩衝液(1mg/ml放免檢測級BSA，20mM Tris，pH 7.4，150mM NaCl，0.02％ NaN3)製備標準曲線，同時在該濃度範圍內製備幾個稀釋度的樣品。於每一樣品池加入50μl冷馬血漿和50μl重建的活化部分凝血致活酶時間試劑(APTT試劑，Sigma)，並於37℃溫育5分鐘。溫育後，於每一小池加入50μl合適的樣品或標準品。用稀釋緩衝液取代樣品或標準品以確定基礎凝血時間。在加入50μl 37℃ 30mMCaCl2至每個樣品或標準品池時，啟動纖維蛋白儀(fibrometer)計時器(CoA Screener Hemostasis Analyzer，American Labor)。由標準曲線的線性回歸公式計算樣品中的活化蛋白C濃度。本文報告的凝血時間是至少三個復份的均值，包括標準曲線樣品。
製備3活化蛋白C的製劑用包括冷凍乾燥溶液的方法製備活化蛋白C的穩定凍幹製劑，所述溶液含有約2.5mg/ml活化蛋白C、約15mg/ml蔗糖、約20mg/ml NaCl和pH高於5.5但是低於6.5的檸檬酸鈉緩衝液。活化蛋白C的穩定凍幹配製還包括凍幹包含約5mg/ml活化蛋白C、約30mg/ml蔗糖、約38mg/ml NaCl和pH高於5.5但是低於6.5的檸檬酸鹽緩衝液的溶液。
aPC∶鹽∶填充劑的比率(w∶w∶w)是在適合冷凍乾燥法的配製中的重要因素。所述比率的變化取決於aPC濃度、鹽的選擇和濃度以及填充劑的選擇和濃度。具體地說，優選比率為約1份活化蛋白C∶約7.6份鹽∶約6份填充劑。
通過混合活化蛋白C、NaCl、蔗糖和檸檬酸鈉緩衝液，製備用於適合連續靜脈輸注給藥的單位劑量活化蛋白C製劑。混合後，將4ml該溶液轉移至一個單位劑量容器，並凍幹。密封含有約5mg至約20mg活化蛋白C的單位劑量容器並貯藏備用，所述單位劑量容器含有的活化蛋白適合給予需要其的病人約0.01mg/kg/hr至約0.05mg/kg/hr的劑量。
實施例1豚鼠動靜脈短路的血栓形成模型因為已經證明了血小板抑制的臨床效果和aPC在控制止血中起著重要作用，所以在豚鼠動脈/靜脈(AV)短路血栓形成模型中檢測aPC與ASA之間可能的協同作用。在該血栓形成模型中，已經表明aPC是有效的抗血栓形成藥物，導致劑量依賴性地抑制血栓形成。
為了檢測aPC和阿斯匹林的作用，用20mg/kg Rompun和125mg/kgKetaset麻醉豚鼠(約500g)，並插入分流管將右側頸動脈和左側頸靜脈連接起來。所述分流管含有刺激血栓形成的棉纖維。用大劑量注射加靜脈輸注給藥方案(0.5mg/kg大劑量加3mg/kg/hr)給予aPC以抑制血栓形成。此外，在給予所述給藥方案之前和期間進行全血aPTT檢測，並通過免疫捕獲醯胺分解測定法檢測循環的aPC血漿水平。以10mg/kg靜脈給予阿斯匹林，而在肝素研究中，採用先給予一劑30單位/kg大劑量，接著靜脈輸注40單位/kg/hr。通過左側頸靜脈的插管進行大劑量給藥，通過右側頸靜脈插管進行血樣品採集。於連續時間點將血樣品採集到含300mM鹽酸苯甲脒的3.8％檸檬酸鈉(9體積血∶1體積檸檬酸鹽/苯甲脒溶液)中。在動物每次採血後用注入等體積鹽水。離心分離血漿並凍藏於-20℃。用免疫捕獲醯胺分解測定檢測aPC的血漿濃度。
為了檢測aPC和抗血小板藥物ASA之間潛在抗血栓形成的協同作用，通過抑制血栓烷B2釋放進行檢測，選擇ASA劑量以產生幾乎完全抑制血小板環加氧酶。如表1所示，10mg/kg ASA的劑量有效抑制血小板環加氧酶，然而，它對血栓重量無明顯影響。採用不影響血栓重量的該ASA劑量，進行與aPC聯合的實驗。為了可比較的目的，也比較標準臨床抗凝血劑肝素。如表2所示，選擇aPC和肝素的劑量，以使每一種在所述模型中產生大致相同的抗血栓形成效應(分別抑制45.9和43.3％)。ASA和aPC的聯合引起的血栓形成抑制作用顯著強於單獨用aPC所觀察到的抑制作用(P＝0.01)。相反，抗凝劑肝素和ASA的聯合顯示，並不明顯強於單獨用肝素所觀察到的抑制效應。這些資料證實了抗血小板藥物和aPC之間的協同作用，並提示(a)或者ASA或者其它抗血小板藥物治療的病人通過與aPC聯合治療將獲得增高的療效，和(b)在存在抗血小板治療情況下，可以減少aPC的治療劑量。
表1在豚鼠動靜脈短路模型中ASA對血小板血栓烷B2釋放和血栓重量的影響。該資料表明，儘管ASA幾乎最大程度抑制血栓烷B2釋放，但是對血栓重量無影響。
表2aPC而非肝素和ASA之間抗血栓形成的協同作用。
*對照的％實施例2aPC和IIb/IIIa拮抗劑在豚鼠動靜脈短路的血栓形成模型中的作用為了檢測aPC和典型的合成IIb/IIIa受體抗劑聯合治療的作用，採用實施例1中所述豚鼠AV短路的血栓形成模型。採用按Fisher等，美國專利第5,618,843號所述製備的2-([6-羧基-n-己基]甲醯胺基(carboxamidyl))-5-脒基苯並呋喃三氟乙酸鹽。aPC和IIb/IIIa拮抗劑的聯合使得抑制血栓形成顯著強於單獨用aPC所觀察到的作用(表3)。這些資料證實了aPC和合成IIb/IIIa拮抗劑之間的協同作用。
表3aPC和IIb/IIIa拮抗劑之間抗血栓形成的協同作用。
*對照的％實施例3aPC和abciximab在治療血栓形成性疾病中的作用abiciximab(ReoPro)是一種通過結合至血小板細胞表面的IIb/IIIa受體而抑制血小板聚集的藥物。aPC和abciximab的聯合治療在通過負調節血液凝固過程和抑制血小板聚集從而抑制血栓形成中是有效的。Abiciximab以約0.05mg/kg至約1.0mg/kg藥物團注射給予，接著以約0.025μg/kg/min至約1μg/kg/min持續靜脈輸注12小時。aPC作為藥物團注射給予，然後持續靜脈輸注或者以約2μg/kg/hr至約96μg/kg/hr持續靜脈輸注約24至約144小時給予。
所述聯合治療產生一種協同作用，該聯合治療更安全更有效，並減少治療血栓形成性疾病所必需的aPC和abciximab的劑量。
權利要求
1.活化蛋白C聯合一種抗血小板藥物用於生產一種藥物的用途，所述藥物用於治療需要其治療的病人的血栓形成性疾病。
2.權利要求1的用途，其中所述血栓形成性疾病是急性血栓形成性中風、靜脈血栓形成、心肌梗塞、不穩定型心絞痛、血管成形術或stent放置術後突發性血管閉塞以及外周血管手術引起的血栓形成。
3.權利要求2的用途，其中所述活化蛋白C的劑量為約2μg/kg/hr至約96μg/kg/hr。
4.權利要求3的用途，其中所述血小板藥物選自阿斯匹林(ASA)、clopidogrel、abciximab、潘生丁、氯苄噻啶和IIb/IIIa受體拮抗劑或它們的組合物。
5.活化蛋白C聯合一種抗血小板藥物用於生產一種藥物的用途，所述藥物用於治療需要其治療的病人的血栓形成性疾病，所述治療包括給予所述病人藥用有效量的一種抗血小板藥物和活化蛋白C，使得活化蛋白C的血漿水平達到10ng/ml至低於100ng/ml。
6.權利要求4的用途，其中所述抗血小板藥物是阿斯匹林(ASA)和clopidogrel。
7.權利要求4的用途，其中所述抗血小板藥物是阿斯匹林(ASA)和氯苄噻啶。
8.權利要求4的用途，其中所述抗血小板藥物是阿斯匹林(ASA)和潘生丁。
9.權利要求4的用途，其中所述抗血小板藥物是阿斯匹林(ASA)和abciximab。
10.權利要求4的用途，其中所述抗血小板藥物是阿斯匹林(ASA)和IIb/IIIa受體拮抗劑。
全文摘要
本發明提供治療各種血栓形成性疾病患者的方法,所述血栓形成性疾病包括但不限於中風、靜脈血栓形成、心肌梗塞、不穩定型心絞痛、血管成形術或stent放置術後突發性血管閉塞以及外周血管手術引起的血栓形成。所述治療是一種人aPC和抗血小板藥物的聯合治療,所述抗血小板藥物包括但不限於阿斯匹林(ASA)、clopidogrel、ReoPro
文檔編號A61K31/00GK1347734SQ01125300
公開日2002年5月8日 申請日期2001年9月1日 優先權日1997年6月5日
發明者B·W·格林尼爾, J·A·亞庫波夫斯基 申請人:伊萊利利公司