C-10位紫杉烷衍生物及其藥物組合物的製作方法

2023-09-16 15:08:15

專利名稱：C-10位紫杉烷衍生物及其藥物組合物的製作方法
本申請是申請日為1994年1月15日，申請號為94100725.1，發明名稱為「C-10位紫杉烷衍生物及其藥物組合物」的發明專利申請的分案申請。
本發明涉及用作抗白血病和抗腫瘤藥劑的新的紫杉烷類化合物(taxanes)。萜類化合物中紫杉族的一員，紫杉酚，在生物和化學領域已引起人們很大的興趣。紫杉酚是一種具有寬譜抗白血病和抑制腫瘤活性的很有前景的癌化學治療劑。紫杉酚具有2′R，3′S構型，其結構式如下所示 式中Ac為乙醯基。由於這一有前景的活性，在法國和美國現在都對紫杉酚在進行臨床試驗。
Colin等人在U.S.P.No 4814470中報告，結構式為(2)的紫杉酚衍生物具有比結構式為(1)的紫杉酚大得多的活性。
式中R′為氫或乙醯基，R″和R之一為羥基和另一個為叔丁氧羰基氨基和它們的立體異構形式及混合物。R′為氫，R″為羥基，R為叔丁氧羰氨基的具有2′R，3′S構型的通式(2)化合物一般叫做taxotere。
雖然，紫杉酚和taxotere都是有前景的化學治療劑，但是，它們並非普遍有效，因此，需要研製另外化學治療劑。
本發明的目的是提供新的紫杉烷衍生物，它們是有價值的抗白血病和抗腫瘤藥劑。
因此，簡而言之，本發明涉及C-10位紫杉烷衍生物。在優選的具體實施方案中，紫杉烷衍生物具有三環或四環核心，相應的結構式如下 式中X1是-OX6，-SX7或-NX8X9；X2是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基；X3和X4各自獨立地是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基；X5是-COX10，-COOX10，-COSX10，-CONX8X10或-SO2X11；X6是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基，羥基保護基或增加紫杉烷衍生物水溶性的官能團；X7是烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基或巰基保護基；X8是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基或者雜取代的烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基；X9是氨基保護基；X10是烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基或者雜取代的烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基；X11是烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基，-OX10或-NX8X14；
X14是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基；R1是氫，羥基，保護了的羥基或與R14一起形成碳酸酯；R2是氫，羥基，-OCOR31或與R2a一起形成氧代基；R2a是氫或與R2一起形成氧代基；R4是氫，與R4a一起形成氧代基，環氧乙烷或亞甲基，或者與R5a和連接它們的碳原子一起形成氧雜環丁烷環；R4a是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基，氰基，羥基，-OCOR30，或與R4一起形成氧代基，環氧乙烷或亞甲基；R5是氫或與R5a一起形成氧代基；R5a是氫，羥基，保護了羥基，醯氧基，與R5一起形成氧代基，或與R4和連接它們的碳原子一起形成氧雜環丁烷環；R6是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基，羥基，保護了的羥基或與R6a一起形成氧代基；R6a是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基，羥基，保護了的羥基或與R6一起形成氧代基；R7是氫或與R7a一起形成氧代基；R7a是氫，囟素，保護了的羥基，-OR28，或與R7一起形成氧代基；R9是氫或與R9a一起形成氧代基；R9a是氫，羥基，保護了的羥基，醯氧基，或與R9一起形成氧代基；R10是氫或與R10a一起形成氧代基；R10a是氫或與R10一起形成氧代基；R14是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基，羥基，保護了的羥基或與R1一起形成碳酸酯；R14a是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基；R28是氫，醯基，羥基保護基或增加紫杉烷衍生物的溶解性的官能基團；和R29，R30和R31各自獨立地是氫，烷基，鏈烯基，炔基，單環芳基或單環雜芳基。
本發明的其它目的和特徵，部分是明顯的，部分將在下文中指出。
文中所用符號和術語的含義是「Ar」指芳基；「Ph」指苯基；「Ac」指乙醯基；「Et」指乙基；「R」除另外定義外一般是指烷基；「Bu」指丁基；「Pr」指丙基；「TES」指三乙基甲矽烷基；「TMS」指三甲基矽烷基；「TPAP」指過釘酸四丙基銨；「DMAP」指對二甲氨基吡啶；「DMF」指二甲基甲醯胺；「LDA」指二異丙基氨基化鋰；「LHMDS」指六甲基二矽氮化鋰；「LAH」指氫化鋁鋰；「Red-A1」指氫化雙(2-甲氧基乙氧基)鋁鈉；「AIBN」指偶氮-(雙)-異丁腈；「10-DAB」指10-脫乙醯基漿果赤黴素III；「FAR」指2-氯-1，1，2-三氟三乙胺；「保護了的羥基」指-OR，其中R是羥基保護基；「巰基保護基」包括但不限於半硫縮醛如1-乙氧基乙基和甲氧基甲基硫酯，或硫代碳酸酯；「氨基保護基」，包括但不限於，氨基甲酸酯如氨基甲酸2，2，2-三氯乙酯或氨基甲酸叔丁酯；和「羥基保護基」包括但不限於，醚如甲基，叔丁基，苄基，對甲氧基苄基，對硝基苄基，烯丙基，三苯甲基，甲氧基甲基，2-甲氧基丙基，甲氧基乙氧基甲基，乙氧基乙基，四氫吡喃基，四氫噻喃基，和三烷基甲矽烷基醚如三甲基甲矽烷基醚，三乙基甲矽烷基醚，二甲基芳基甲矽烷基醚，三異丙基甲矽烷基醚和叔丁基二甲基甲矽烷基醚；酯如苯甲醯基，乙醯基，苯基乙醯基，甲醯基，一、二和三囟乙醯基如氯乙醯基，二氯乙醯基，三氯乙醯基，三氟乙醯基；和碳酸酯包括但不限於有1-6個碳原子的烷基的碳酸酯，如甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，叔丁基，異丁基和正戊基的碳酸酯；有1-6個碳原子和一個或多個囟原子取代的烷基的碳酸酯，如2，2，2-三氯乙氧基甲基和2，2，2-三氯乙基的碳酸酯；有2-6個碳原子的鏈烯基的碳酸酯，如乙烯基和烯丙基；的碳酸酯；有3-6個碳原子的環烷基的碳酸酯，如環丙基，環丁基，環戊基和環己基和在環上任意取代有1個或多個C1-C6烷氧基或硝基的苯基或苄基的碳酸酯。其它的羥基，巰基和氨基保護基可以在「Protective Groups in Organic Synthes is」byT.W.Greene，John Wiley and Sons，1981中找到。
這裡所說的烷基，不論是獨立的還是有各種取代基，優選主鏈含1-6個碳原子和至多為15個碳原子的低級烷基。它們可以是取代的。直鏈的，支鏈的或環狀的，包括甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，己基，環丙基，環戊基，環己基等。
這裡所說的鏈烯基，不論是獨立的還是有各種取代基，優選主鏈含2-6個碳原子和至多為15個碳原子的低級鏈烯基。它們可以是取代的，直鏈的或支鏈的，包括乙烯基，丙烯基，異丙烯基，丁烯基，異丁烯基，己烯基等。
這裡所說的炔基，不論是獨立的還是有各種取代基，優選主鏈含2-6個碳原子和至多有15個碳原子的低級炔基。它們可以是取代的，直鏈的或支鏈的包括乙炔基，丙炔基，丁炔基，異丁炔基或己炔基等。
這裡所說的芳基部分，或者是獨立的或者是取代的，含有6-15個碳原子並包括苯基。取代基包括烷氧基，保護了的羥基，囟素，烷基，芳基，鏈烯基，醯基，醯氧基，硝基，氨基，醯胺基等。苯基是最優選的芳基。
這裡所說的雜芳基部分，或者是獨立的或者是取代的，含有5-15個碳原子和包括呋喃基，噻吩基，吡啶基等。取代基包括烷氧基，保護了的羥基，囟素，烷基，芳基，鏈烯基，醯基，醯氧基，硝基，氨基和醯胺基。
這裡所說的醯氧基含有烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基。
這裡所說的取代的烷基，鏈烯基，炔基，芳基和雜芳基的取代基部分可以是烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基和/或可以含有氮，氧，硫，囟素，包括例如甲氧基，乙氧基，丁氧基這樣的低級烷氧基，囟素如氯或氟，硝基，氨基和酮基。
按照本發明，發現通式(3)化合物在試管內顯示顯著的性質，是有價值的抗白血病和抗腫瘤劑。它們的生物活性已經在試管內，按照Parness等人在J.Cell Biology，91479-487(1981)中發表的方法，用微管蛋白試驗和人的癌細胞系測定，並可與紫杉酚和taxotere的活性比較。
在本發明的優選的具體實施方案中，紫杉烷的結構與紫杉酚或taxotere相似，只是在C-10位的取代基是兩個氫。即，R2a是氫，R2是苯甲醯氧基，R14和R14a是氫，R9和R9a形成氧代基，R7是氫，R7a是羥基，R5是氫，R5a和R4和它們所連的碳原子一起形成氧雜環丁烷環，R4a是乙醯氧基，R1是羥基，X1是-OH，X2是氫，X3是苯基，X4是氫，X5是-COX10，X10是苯基或叔丁氧基，該紫杉烷具有2′R，3′S構型。
在本發明的其它具體實施方案中，就C-10位取代基和至少一個另個的取代基而言，紫杉烷的結構與紫杉酚或taxotere不同。例如，R2可以是羥基或-OCOR31，其中R31是氫，烷基或選自如下的基團 Z是烷基，羥基，烷氧基，囟素或三氟甲基。R9a可以是氫和R9可以是氫或羥基，R7可以是氫，乙醯氧基及其它的醯氧基或囟素，X3可以是選自異丁烯基，異丙基，環丙基，正丁基，叔丁基，環丁基，環己基，呋喃基，噻吩基，吡啶基或它們的取代衍生物，X5可以是，-COX10或-COOX10和X10可選自呋喃基，噻吩基，吡啶基，烷基取代的呋喃基或噻吩基，叔丁基，異丁基，正丁基，乙基，異丙基，正丙基，環丙基，環己基，烯丙基，2-丁烯基，1，3-二乙氧基-2-丙基，2-甲氧基乙基，戊基，新戊基，PhCH2O-，NPh2，-NHnPr，-NHPh和-NHEt。
通式3的紫杉烷可以通過β-內醯胺與有紫杉烷三環或四環核並在C13位有金屬氧化物取代基的醇鹽反應形成在C13位有β-氨基酯取代基的化合物而製得。β-內醯胺具有如下結構式 式中X1-X5的定義同上。
β-內醯胺可從容易得到的原料，由如以下反應流程A和B來製備流程A 流程B
試劑(a)三乙胺，CH2Cl2，25℃，18小時；(b)4當量硝酸鈰銨，CH3CN，-10℃，10分鐘；(c)KOH，THF，H2O，0℃，30分鐘，或吡咯烷，吡啶，25℃，3小時；(d)TESCl，吡啶，25℃，30分鐘或2-甲氧基丙烯甲苯磺酸(cat.)，THF，0℃，2小時；(e)正丁基鋰，THF，-78℃，30分鐘；和醯氯或氯甲酸酯(X5＝-COX10)，磺醯氯(X5＝-COSX10)或異氰酸酯(X5＝-CONX8X10)；(f)二異丙基氨基鋰，THF，-78℃至-50℃；(g)六甲基二矽氮化鋰；THF，-78℃-0℃；(h)THF，-78℃至25℃，12小時。
原料容易獲得。在流程A中，α-乙醯氧基乙醯基氯從羥基乙酸製得，並在叔胺存在下，與從醛和對甲氧基苯胺製得的亞胺環縮合，得到1-對甲氧基苯基-3-醯氧基-4-芳基氮雜環丁烷-2-酮。對甲氧基苯基通過硝酸鈰銨氧化可容易地除去，和醯氧基可在本技術領域技術人員熟悉的一般條件下水解，得到3-羥基-4-芳基氮雜環丁烷-2-酮。在流程B中，α-三乙基甲矽烷氧乙酸乙酯容易從羥基乙酸製備。
在反應流程A和B中，X1最好是-OX6和X6是羥基保護基。優選保護基如2-甲氧基丙基(「MOP」)，1-乙氧基乙基(「EE」)等，但可以使用各種其它標準保護基如三乙基甲矽烷基或其它三烷基(或芳基)甲矽烷基。如上所指出，另外的羥基保護基及其合成可參見「Protcctive groups in organic Synthesis」by T.W.Greene，JohnWiley Sons，1981。
外消旋β-內醯胺可在保護之前通過相應的2-甲氧基-2-(三氟甲基)苯基乙酸酯重結晶拆分為純的對映體。然而，下文所述的連接β-氨基酯側鏈的反應具有高度非立體選擇性的優點，這允許使用側鏈前體的外消旋混合物。
具有三環或四環紫杉烷核並在C-13位有金屬氧化物或銨氧化物取代基的醇鹽的結構式如下
式中R1-R14a的定義同前，M是銨或選自IA族，IIA族和過渡金屬的任意一種金屬，優選Li，Mg，Na，K或Ti。最優選的醇鹽具有四環紫杉烷核並相應於下式結構下 式中M，R2，R4a，R7，R7a，R9，R9a，R10和R10a的定義同前。
醇鹽可由具有紫杉烷核並在C-13位有羥基的醇與有機金屬化合物在適合的溶劑中反應來製備。最可取的，該醇是保護了漿果赤黴素III，特別是7-o-三乙基甲矽烷基漿果赤黴素III(可由Greene等人在JACS 1105917(1988)中所敘的方法或其它方法製得)或7，10-雙-o-三乙基甲矽烷基漿果赤黴素III。
如Greene等人報告的，按照如下反應流程，10-脫乙醯基漿果赤黴素III轉化成7-o-三乙基甲矽烷基-10-脫乙醯基漿果赤黴素III
在據報是仔細優選的條件下，10-脫乙醯基漿果赤黴素III與20當量(C2H5)3SiCl在氬氣氛下和在50ml吡啶/mmol 10-脫乙醯基漿果赤黴素III存在下，23℃反應20小時，得到反應產物7-三乙基甲矽烷基-10-脫乙醯基漿果赤黴素III(4a)，提純後的收率為84-86％。反應產物然後可任意地以5當量CH3COCl3和25ml吡啶/mmol 4a反應脫乙醯基，條件是在氬氣氛下在0℃反應48小時，得到86％的7-O-三乙基甲矽烷基漿果赤黴素III(4b)。參見Greene等人在JACS 110，5917至5918(1988)中的方法。
7-保護的漿果赤黴素III(4b)與有機金屬化合物如LHMDS在溶劑如四氫呋喃中反應，得到金屬醇鹽13-O-鋰-7-O-三乙基甲矽烷基漿果赤黴素III，反應流程如下所示
如以下流程所示，13-O-鋰-7-O-三乙基甲矽烷基漿果赤黴素III與β-內醯胺(其中X1優選為-OX6，X6是羥基保護基，X2-X5的定義同前)反應，得到C-7和C-2′位羥基被保護的中間體。然後，在溫和條件下水解保護基以使不影響酯鏈或紫杉烷取代基。
醇轉化為醇鹽和紫杉烷衍生物的最終合成可以在同一反應容器中進行。最好是，在反應容器中形成醇鹽後再加入β-內醯胺。
本發明的通式3化合物可用於抑制包括人在內的動物體內腫瘤的生長。優選的給藥形式是含有效抗腫瘤量的本發明化合物和藥學上可接受的載體或稀釋劑的藥物組合物。
這種抗腫瘤組合物可製成適於所要求用途例如口服、胃腸外或局部給藥的任何適宜形式。胃腸外給藥的例子是肌內，靜脈內，腹膜內，直腸和皮下給藥。
稀釋劑或載體組分不應該是減弱抗腫瘤化合物治療效果的物質。
適宜口服的劑量形式包括片劑、可分散粉劑、粒劑、膠囊劑，懸浮液，糖漿劑和酏劑。片劑用的惰性稀釋劑和載體包括例如，碳酸鈣，碳酸鈉，乳糖和滑石粉。片劑也可含有成粒劑和分散劑如澱粉和藻酸，粘結劑如澱粉，明膠和阿拉伯樹膠，潤滑劑如硬脂酸鎂，硬脂酸和滑石粉。片劑可以不包衣，也可以用各種已知技術包衣以便例如延遲崩解和吸收。在膠囊劑中所用的惰性稀釋劑和載體包括例如，碳酸鈣，磷酸鈣和高嶺土。懸浮液，糖漿劑和酏劑可以含常規的賦形劑如，甲基纖維素，黃蓍膠，藻酸鈉；溼潤劑如，卵磷脂和硬脂酸聚氧乙烯酯；和防腐劑如，對羥基苯甲酸乙酯。
適宜胃腸外給藥的劑量形式包括溶液，懸浮液，分散液，乳液等。它們也可製成無菌固體組合物形式，在使用前溶解或懸浮於無菌注射介質中。它們可含有本技術領域已知的懸浮劑或分散劑。
通式(3)化合物的水溶性可以通過C-2′和/或C-7位取代基的修飾而得到改進。例如，以下取代基可增加水溶性X1為-OX6和R7a是-OR28，X6和R28各自獨立地是氫或-COGCOR1，其中G是亞乙基，亞丙基，-CH＝CH-，1，2-環己基或1，2-亞苯基，R1＝OH鹼，NR2R3，OR3，SR3，OCH2CONR4R5，OH，R2＝氫，甲基，R3＝(CH2)nNR6R7，(CH2)nNR6R7R8Xn＝1-3，R4＝氫，C1-4低級烷基，R5＝氫，C1-4低級烷基，苄基，羥乙基，CH2CO2H，二甲基氨基乙基，R6，R7＝甲基，乙基，苄基或R6和R7與NR6R7的氮原子一起形成如下環 R8＝甲基，乙基或苄基，X＝囟素鹼＝NH3，(HOC2H4)3N，N(CH3)3，CH3N(C2H4OH)2，NH2(CH2)6NH2，N-甲基葡糖胺，NaOH，KOH。
X1或X2是-COGCOR1的化合物的製備在Haugwitz的U.S.4942184中已說明，合併在這裡作參考。
當X1是-OX6和X6是-COCX＝CHX或-COX-CHX-CHX-SO2O-M，其中X是氫，烷基或芳基和M是氫，鹼金屬或銨時，溶解性可增加，如在Kingston等人的U.S.5059699中所述(合併於這裡作參考)。
具有除酮基外的C-9位取代基的紫杉烷可通過10-DAB，漿果赤黴素III或者10-DAB或漿果赤黴素III的衍生物的C9酮基取代基的選擇性還原得到相應的C-9位β-羥基衍生物來製備。還原劑優選硼氫化物，更可選的硼氫化四丁銨(Bu4NBH4)或三乙醯氧基硼氫化物。
正如反應流程1中闡明的，漿果赤黴素III與Bu4NBH4在二氯甲烷中反應，得到9-脫氧-9β-羥基漿果赤黴素III5。在C-7位羥基用三乙基甲矽烷基保護基保護後，例如，適宜的側鏈可接到7-位保護的-9β-羥基衍生物6，如本文別處所述。除去剩餘的保護基，得到具有C-13位側鏈的9β-羥基-脫氧紫杉酚或其它9β-羥基四環紫杉烷。
反應流程1 或者，7-位保護的-9β-羥基衍生物6的C-13位羥基可用三甲基甲矽烷基或其它保護基保護，該保護基相對於C-7位羥基保護基可被選擇性地除去，如在反應流程2中闡明的，因此，能夠進一步的選擇性控制紫杉烷的各種取代基。例如，7，13-保護的-9β-羥基衍生物7與KH反應，引起乙醯基從C-10位遷移到C-9位和羥基從C-9位遷移到C-10位，因此，得到10-位脫乙醯基衍生物8。10-位脫乙醯衍生物的C-10位羥基用三乙基甲矽烷基保護，得到衍生物9。從衍生物9選擇性除去C-13位羥基保護基，得到可以如上述連接適宜側鏈的衍生物10。
反應流程2
如反應流程3所示，10-脫乙醯基衍生物8經氧化可得到10-氧代衍生物11。然後，如上述，C-13位羥基保護基被選擇性除去後，得到具有C-13位側鏈的9-乙醯氧基-10-氧代-紫杉酚或其它9-乙醯氧基-10-氧代四環紫杉烷。用還原劑如二磺化釤還原10-氧化衍生物11，選擇性除去C-9位乙醯基，得到9-脫氧-10-氧代衍生物12，C-13位羥基保護在選擇性除去後，以上述方法連接側連，可由衍生物12得到具有C-13位側鏈的9-脫氧-10-氧代-紫杉酚或其它9-脫氧-10-氧代四環紫杉烷。
反應流程3 反應流程4說明10-DAB還原成五元醇13的反應。五元醇13的C-7位和C-10位羥基然後用三乙基甲矽烷基或其它保護基選擇性保護得到三元醇14，該三元醇可按上述方法連接C-13位側鏈，或者也可在進一步四環取代基修飾後再接C-13位側鏈。
反應流程4 C-9位和/或C-10位有除乙酸根以外的醯氧基取代基的紫杉烷可以如反應流程5說明的用10-DAB作原料來製備。10-DAB與氯化三乙基甲矽烷在吡啶中反應，得到7-位保護的10-DAB 15。7-位保護的10-DAB 15的C-10位羥基然後用任何標準醯化劑很容易地醯化為具有新的C-10位醯氧取代基的衍生物16。衍生物16的C-9位酮取代基選擇還原成9β-羥基衍生物17，然後，可連接C-13位側鏈。或者也可如上面反應流程2闡述的那樣，發生C-10位和C-9位基團的遷移。
反應流程5
具有C-2和/或C-4位酯的紫杉烷可以用漿果赤黴素III和10-DAB作原料製備。漿果赤黴素III和10-DAB的C-2位和/或C-4位酯，可用還原劑如LAH或Red-A1選擇性還原為相應的醇，然後，新酯可用標準醯化劑如酸酐和醯氯與胺如吡啶，三乙胺，DMAP或二異丙基乙基胺結合進行取代。C-2位和/或C-4位醇也可以轉化為新的C-2位和/或C-4位酯，方法是該醇用適宜的鹼如LDA處理，形成相應的醇鹽然後再用醯化劑如醯氯處理。
在C-2位和/或C-4位具有不同取代基的漿果赤黴素III和10-DAB類似物，可按反應流程6-10製備。為簡化敘述，以10-DAB作為原料。不過，應該明白，漿果赤黴素III衍生物或類似物可用同樣的反應系列產生(除C-10位羥基保護外)，只是簡單地用漿果赤黴素III作原料而代替10-DAB。
在C-10位和至少另外一個位置，例如C-1，C-2，C-7，C-4，C-9和C-13位，具有不同取代基的漿果赤黴素III和10-DAB類似物的衍生物，可通過這裡所述的任何其它反應和本技術領域熟悉的其它任何反應來製備。
在反應流程6中，保護了的10-DAB 3用氫化鋁鋰轉化為三元醇18。三元醇18然後用Cl2CO在吡啶中然後用親核試劑(如格氏試劑或烷基鋰試劑)轉化為相應的C-4酯。
反應流程6 三元醇18用LDA脫保護，接著加入醯氯，選擇性地得到C-4位酯。例如，當用乙醯氯時，三元醇18轉化為1，2-二元醇4，如流程7所述。
三元醇18也可容易地轉化為1，2-碳酸酯19。在強力的標準條件下，如反應流程8所述，碳酸酯19乙醯化為碳酸酯21。將烷基鋰或格氏試劑加到碳酸酯19上，得到在C-4位有游離羥基的C-2位酯，如反應流程6所述。
反應流程7 反應流程8 如反應流程9所闡明的，通過碳酸酯19與醯氯和叔胺反應得到碳酸酯22，可以製備其它C-4位取代的化合物，然後與烷基鋰或格氏試劑反應，得到在C-2位有新的取代基的10-DAB衍生物。
反應流程9 漿果赤黴素III也可用作原料進行反應，如反應流程10所述。在C-7和C-3位保護後，用LAH還原漿果赤黴素III得到1，2，4，10-四元醇24。四元醇24用Cl2CO和吡啶轉化為碳酸酯25，碳酸酯25用醯氯和吡啶醯化C-10位，得到碳酸酯26(流程中所示)，用乙酸酐和吡啶醯化也可以(未示出)。碳酸酯26在強力標準條件下乙醯化，得到碳酸酯27，該碳酸酯27然後與烷基鋰反應，得到在C-2和C-10位有新取代基的漿果赤黴素III衍生物。
反應流程10

漿果赤黴素III的10-脫乙醯氧基衍生物和10-DAB的10-脫氧衍生物可通過漿果赤黴素III或10-DAB(或它們的衍生物)與二碘化釤反應製備。C-10位有離去基團的四環紫杉烷和二碘化釤之間的反應，可在溶劑如四氫呋喃中於0℃下進行。更有利地是，二碘化釤選擇性地移去C-10位離去基團；，四環核的C-13位側鏈和其它取代基不受影響。然後，如本文別外所述，C-9位酮取代基可被還原，得到相應的9-脫氧-9β-羥基-10-脫乙醯氧基或10-脫氧衍生物。
C-7二氫和其它C-7取代的紫杉烷可以如反應流程11，12和12a所述的那樣製備。
反應流程11
反應流程12
如反應流程12所示，漿果赤黴素III在THF溶液中於室溫下用FAR處理，可轉化為7-氟漿果赤黴素III。基它具有游離的C-7羥基的漿果赤黴素衍生物行為類似。7-氯漿果赤黴素III可通過在含過量三乙胺鹽酸鹽的二氯甲烷溶液中，用甲磺醯氯和三乙胺處理漿果赤黴素III來製備。
具有C-7位醯氧基取代基的紫杉烷可按反應流程12a闡述的方法製備，7，13-保護的10-氧代衍生物11可通過選擇性除去C-13位保護基並用金屬如鋰代替，轉化為其相應的C-13位醇鹽。該醇鹽然後與β-內醯胺或其它側體前體化合物反應。接著，水解C-7位保護基，引起C-7位羥基取代基遷移到C-10位，而C-10位的氧代基遷移到C-9位和C-9位的醯氧基遷移到C-7位。
天然存在多種三環紫杉烷，而通過類似本文所述的處理，一個適當的側鏈可連接到這些物質的C-13位氧上。或者，如反應流程13所示，7-o-三乙基甲矽烷基漿果赤黴素III在二氯甲烷溶液中與四氟硼酸三甲基 反應，轉化為三環紫杉烷。然後，產物二元醇與四乙酸鉛反應，得到相應的C-4酮。
反應流程13
新近，一種羥基化紫杉烷(14-羥基-10-脫乙醯基漿果赤黴素III)已在紫杉針的提取物中發現(C EN，P36-37，April 12，1993)。上述具有各種C-2位，C-4位等官能基的羥基化紫杉烷的衍生物也可用這種羥基化紫杉烷製備。另外，如C EN所述，10-DAB的C-14位羥基與C-1位羥基一起可轉化為1，2-碳酸酯，或如本文別處所述的它可就C-2，C-4，C-7，C-9，C-10和C-13取代基轉化為各種各樣的酯或，其它官能團。
下列實施例對本發明提供了更詳細的說明。
實施例1 3′-脫苯基-3′-(2-噻吩基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-10-脫乙醯氧基紫杉酚的製備向0.7ml THF中的7-O-三乙基甲矽烷基-10-脫乙醯氧基漿果赤黴素111(47.5mg，0.073mmol)的溶液中，在-45℃下滴加0.08ml 0.98M LiN(SiMe3)2的己烷溶液。-45℃下0.5小時後，問此混合物中滴加在0.7ml THF中的順-1-t-丁氧羰基-3-三乙基甲矽烷氧基-4-(2-噻吩基)-氮雜環丁烷-2-酮(70.0mg，0.182mmol)溶液。溫熱該溶液至0℃並保持此溫度1小時，然後，加在THF中的1ml10％AcOH溶液。該混合物在飽和NaHCO3水溶液和60/40乙酸乙酯/己烷之間分配。蒸發有機相所得殘留物用矽膠過濾提純，得到64.3mg含(2′R，3′S)-2′，7-雙-O-三乙基甲矽烷基-3′-脫苯基-3′-(2-噻吩基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-10-脫乙醯氧基紫杉酚和小量(2′S，3′R)異構體的混合物。
向64.3mg(0.056mmol)上述反應所得混合物與3.2ml乙腈和0.15ml吡啶的溶液中，在0℃下加0.50ml 48％HF水溶液。於0℃下攪拌此混合物3小時，然後於25℃下攪拌13小時，在飽和NaHCO3水溶液和乙酸乙酯間分配反應產物。蒸發乙酸乙酯層，得到46.3mg物質，經快速色譜提純，得到40.1mg(91％)3′-脫苯基-3′-(2-噻吩)-N-脫苯基甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-10-脫乙醯氧基紫杉酚，再經甲醇/水重結晶。
m.p.158-160℃；[α]25Na-58，4°(c 0.0028，CHCl3).
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.11(d，J＝6.9Hz，2H，benzoateortho)，7.61(m，1H，benzoate para)，7.50(m，2H，benzoatemeta)，7.27(dd，J＝5.5，1.2Hz，1H，thienyl)，7.06(d，J＝3.3Hz，1H，thienyl)，7.01(dd，J＝5.7，3.9Hz，1H，thienyl)，6.13(td，J＝6.3，0.9Hz，1H，H13)，5.70(d，J＝6.9Hz，1H，H2)，5.49(d，J＝9.2Hz，1H，NH)，5.34(d，J＝9.9Hz，1H，H3′)，4.62(dd，J＝5.4 2.1Hz，1H，H5)，4.30(d，J＝8.1Hz，1H，H20α)，4.29(s，1H，H2′)，4.17(d，J＝8.1Hz，1H，H20β)，4.06(d，J＝6.9Hz，1H，H7)，3.81(d，J＝15.3Hz，H10α)，3.51(d，J＝6.6Hz，1H，H3)，3.41(m，1H，2′OH)，2.61(m，1H，H6α)，2.36(s，3H，4Ac)，2.30(m，1H，H10β)，2.17(br s，1H，7 OH)，2.06(m，1H，H14α)，1.81(m，1H，H14β)，1.76(br s，3H，Me18)，1.66(s，1H，1 OH)，1.62(m，1H，H6β)，1.35(s，9H，3Me t-buthoxy)，1.25(s，3H，Me17)，1.19(s，3H，Me19)，1.17(s，3H，Me16).
實施例2 3′-脫苯基-3′-(異丁烯基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-10-脫乙醯氧基紫杉酚的製備於-45℃下，向在0.8ml THF中的7-O-三乙基甲矽烷基-10-脫乙醯氧基漿果赤黴素III(50.0mg，0.077mmol)溶液中，滴加0.09ml 0.98M LiN(SiMe3)2的己烷溶液。-45℃下0.5小時後，向此混合物中滴加在0.7ml THF中的順-1-t-丁氧羰基-3-(2-甲氧基異丙氧基)-4-(異丁烯基)氮雜環丁烷-2-酮(58.0mg，0.193mmol)的溶液。溫熱此溶液至0℃並在此溫下保持1小時，然後，加1ml 10％AcOH的THF溶液。反應混合物在飽和NaHCO3水溶液和60/40乙酸乙酯/己烷間分配。蒸發有機層得到的殘留物經矽膠過濾提純，得到62.7mg含(2′R，3′S)-2′-O-(2-甲氧基異丙基)-7-O-三乙基甲矽烷基-3′-脫苯基-3′-(異丁烯基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-10-脫乙醯氧基紫杉酚和小量(2′S，3′R)異構體的混合物。
於0℃下，向上述反應所得混合物62.7mg(0.059mmol)與3.5ml乙腈和0.16ml啶的溶液中，加0.55ml 48％HF水溶液。於0℃下攪拌此混合物3小時，然後於25℃下攪拌13小時，在飽和NaHCO3水溶液和乙酸乙酯間分配。蒸發乙酸乙酯層得到51.5mg物質，經快速色譜提純得到43.0mg(95％)3′-脫苯基-3′-(異丁烯基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-10-脫乙醯氧基紫杉酚，再經甲醇/水重結晶。
m.p.153-155℃；[α]25Na-56.3°(c 0.003，CHCl3).
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.10(d，J＝7.3Hz，2H，benzoateortho)，7.60(m，1H，benzoate para)，7.47(m，2H，benzoatemeta)，6.15(td，J＝8.5，1.8Hz，1H，H13)，5.69(d，J＝6.9Hz，1H，H2)，5.32(d，J＝9.2Hz，1H，NH)，4.93(dd，J＝9.6，1.8Hz，1H，H5)，4.82(d，J＝8.7Hz，1H，Me2C＝CH-)，4.76(td，J＝8.7，2.7Hz，1H，H3′)，4.37(d，J＝8.7Hz，1H，H20α)，4.22(d，J＝8.7Hz，1H，H20β)，4.18(d，J＝2.7Hz，1H，H2′)，4.03(d，J＝7.3Hz，1H，H7)，3.82(d，J＝15.2Hz，1H，H10α)，3.47(m，1H，2′OH)，3.41(d，J＝6.6Hz，1H，H3)，2.60(m，1H，H6α)，2.39(m，1H，H10β)，2.37(s，3H，4Ac)，2.18(s，1H，7OH)，2.08(m，1H，H14α)，1.78(m，1H，H14β)，1.76(s，3H，Me18)，1.74(s，6H，2Me from isobuthenyl)，1.63(m，1H，H6β)，1.36(s，9H，3Me t-buthoxy)1.26(s，3H，Me17)，1.18(s，3H，Me19)，1.15(s，3H，Me16).
實施例3 N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-10-脫乙醯氧基紫杉酚的製備於45℃下，向在0.8ml THF中的7-O-三乙基甲矽烷基-10-脫乙醯氧基漿果赤黴素III(50.0mg，0.077mmol)溶液，滴加0.09ml 0.98MLiN(SiMe3)2的己烷溶液。-45℃下0.5小時後，向此混合物中滴加在0.8ml THF中的順-1-t-丁氧羰基-3-三乙基甲矽烷氧基-4-苯基氮雜環丁烷-2-酮(67.5mg，0.193mmol)溶液。溫熱該溶液至0℃並在此溫下保持1小時，然後，加1ml 10％ AcOH的THF溶液。此混合物在飽和NaHCO3水溶液和60/40乙酸乙酯/己烷間分配。蒸發有機層所得的殘留物經矽膠過濾提純，得到72.0mg含(2′R，3′S)-2′7-雙-O-三乙基甲矽烷基-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-10-脫乙醯氧基紫杉酚和小量(2′S，3′R)異構體的混合物。
在0℃下，向在3.8ml乙腈和0.17ml吡啶中的上述反應所得混合物(72.0mg，0.071mmol)的溶液中，加0.60ml 48％HF水溶液。於0℃下攪拌此混合物3小時，然後，於25℃下攪拌13小時，在飽和NaHCO3水溶液和乙酸乙酯間分配。蒸發乙酸乙酯溶液得57.4mg物質，經快速色譜提純得39.4mg(71％)N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-10-脫乙醯氧基紫杉酚，再經甲醇/水重結晶。
m.p.145-147℃；[α]25Na-54.4°(c 0.0027，CHCl3).
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.11(d，J＝7.1Hz，2H，benzoateortho)，7.61-7.23(m，8H，benzoate，phenyl)，6.13(td，J＝6.3，0.9Hz，1H，H13)，5.68(d，J＝6.9Hz，1H，H2)，5.43(d，J＝9.2Hz，1H，NH)，5.26(d，J＝9.9Hz，1H，H3′)，4.96(dd，J＝5.4 2.1Hz，1H，H5)，4.31(d，J＝8.1Hz，1H，H20α)，4.22(s，1H，H2′)，4.18(d，J＝8.1Hz，1H，H20β)，4.03(d，J＝6.9Hz，1H，H7)，3.81(d，J＝15.1Hz，H10α)，3.43(m，1H，2′OH)，3.40(d，J＝6.6Hz，1H，H3)，2.60(m，1H，H6α)，2.38(s，3H，4Ac)，2.32(m，1H，H10β)，2.15(br s，1H，7 OH)，2.09(m，1H，H14α)，1.83(m，1H，H14β)，1.78(br s，3H，Me18)，1.66(s，1H，1 OH)，1.63(m，1H，H6β)，1.36(s，9H，3Me t-butoxy)，1.25(s，3H，Me17)，1.18(s，3H，Me19)，1.16(s，3H，Me16).
實施例4 3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-10-脫乙醯氧基紫杉酚的製備於-45℃下，向在0.8ml THF中的7-O-三乙基甲矽烷基-10-脫乙醯氧基漿果赤黴素III(50.0mg，0.077mmol)溶液中，滴加0.09ml 0.98M LiN(SiMe3)2的己烷溶液。-45℃，0.5小時後，向此混合物中滴加，在0.8ml THF中的順-1-t-丁氧羰基-3-三乙基甲矽烷氧基-4-(2-呋喃基)氮雜環丁烷-2-酮(72.8mg，0.195mmol)溶液，溫熱此溶液至0℃並保持此溫度1小時，然後，加1ml 10％AcOH的THF溶液。在飽和NaHCO3水溶液和60/40乙酸乙酯/己烷間分配此混合物。蒸發有機層所得殘留物經矽膠過濾提純，得到69.4mg含(2′R，3′S)-2′，7-雙-O-三乙基甲矽烷基-3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-10-脫乙醯氧基紫杉酚和小量(2′S，3′R)異構體的混合物。
在0℃下，向在3.8ml乙腈和0.17ml吡啶中的(69.4mg，0.068mmol)上述反應所得混合物的溶液中，加0.60ml 48％ HF水溶液。於0℃下攪拌此混合物3小時，然後，於25℃下攪拌13小時，在飽和NaHCO3水溶液和乙酸乙酯間分配。蒸發乙酸乙酯溶液得59.0mg物質經快速色譜提純得41.0mg(76％)3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-10-脫乙醯氧基紫杉酚，再經甲醇/水重結晶。
m.p.151-153℃；[α]25Na-56.5°(c 0.0025，CHCl3).
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.11(d，J＝7.3Hz，2H，benzoateortho)，7.60(m，1H，benzoate para)，7.49(m，2H，benzoatemeta)，7.41(m，1H，furyl)，6.37(m，1H，furyl)，6.34(m，1H，furyl)，6.13(dd，J＝6.3，0.9Hz，1H，H13)，5.69(d，J＝6.6Hz，1H，H2)，5.49(d，J＝9.2Hz，1H，NH)，5.34(d，J＝9.9Hz，1H，H3′)，4.62(dd，J＝5.4，2.1Hz，1H，H5)，4.30(d，J＝8.1Hz，1H，H20α)，4.29(s，1H，H2′)，4.17(d，J＝8.1Hz，1H，H20β)，4.06(d，J＝6.9，1H，H7)，3.81(d，J＝15.3Hz，1H，H10α)，3.51(d，J＝6.6Hz，1H，H3)，3.41(m，1H，2′OH)，2.61(m，1H，H6α)，2.36(s，3H，4Ac)，2.32(m，2H，H14α)，2.28(m，1H，H10β)，2.17(br s，1H，7OH)，2.14(m，1H，H14α)，1.82(m，1H，H14β)，1.76(br s，3H，Me18)，1.66(s，1H，1 OH)，1.62(m，1H，H6β)，1.35(s，9H，3Me t-butoxy)，1.25(s，3H，Me17)，1.19(s，3H，Me19)，1.16(s，3H，Me16).
實施例5 3′-脫苯基-3′-(2-噻吩基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-9-脫氧-10-脫乙醯氧基-10-酮紫杉酚的製備於-45℃下，向在0.5ml THF中的7-O-三乙基甲矽烷基-9-脫氧-10-脫乙醯氧基-10-酮漿果赤黴素III(25.0mg，0.039mmol)溶液中，滴加0.05ml 0.98M LiN(SiMe3)2的己烷溶液。-45℃，0.5小時後，向此混合物中滴加在0.5ml THF中的順-1-t-丁氧羰基-3-三乙基甲矽烷氧基-4-(2-噻吩基)氮雜環丁烷-2-酮(45.0mg，0.117mmol)溶液，溫熱此溶液至0℃並保持此溫度1小時，然後，加1ml 10％AcOH的THF溶液。此混合物在飽和NaHCO3和60/40乙酸乙酯/己烷間分配。蒸發有機層所得殘留物經矽膠過濾提純，得到36.2mg含(2′R，3′S)-2′，7-雙-O-三乙基甲矽烷基-3′-脫苯基-3′-(2-噻吩基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-9-脫氧-10-脫乙醯氧基-10-酮紫杉酚和小量(2′S，3′R)異構體的混合物。
在0℃下，向在3.0ml乙腈和0.15ml吡啶中的36.2mg(0.035mmol)上述反應所得混合物的溶液中，加0.45ml 48％HF水溶液。於0℃下攪拌此混合物3小時，然後，於25℃下攪拌13小時，在飽和NaHCO3水溶液和乙酸乙酯間分配。蒸發乙酸乙酯溶液得29.4mg物質，經快速色譜提純，得24.3mg(87％)3′-脫苯基-3′-(2-噻吩基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-9-脫氧-10-脫乙醯氧基-10-酮紫杉酚，再經甲醇/水重結晶。
m.p.163-169℃；[α]25Na-54.2°(c 0.0023，CHCl3).
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.12(d，J＝7.3Hz，2H，benzoateortho)，7.64(m，1H，benzoate para)，7.51(m，2H，benzoatemeta)，7.26(m，1H，thienyl)，7.10(d，J＝3.4Hz，1H，thienyl)，6.99(dd，J＝5.1，3.4Hz，1H，thienyl)，6.12(td，J＝6.1，1.0Hz，1H，H13)，5.95(d，J＝5.9Hz，1H，H2)，5.50(d，J＝4.4Hz，1H，NH)，5.42(d，J＝9.8Hz，1H，H3′)，4.94(d，J＝8.3Hz，1H，H5)，4.64(dd，J＝4.2，2.0Hz，1H，2′)，4.33(d，J＝7.8Hz，1H，H20α)，4.18(d，J＝7.8Hz，1H，H20β)，3.90(br s，1H，2′OH)，3.73(m，1H，H7)，3.11(d，J＝15.8Hz，H9α)，3.09(d，J＝5.1Hz，1H，H3)，2.90(d，J＝15.6Hz，1H，H9β)，2.54(m，1H，H6α)，2.45(m，1H，H14β)，2.31(s，3H，4Ac)，2.28(m，1H，H14α)，，2.01(br s，1H，7OH)，1.88(s，1H，1 OH)，1.83(m，1H，H6β)，1.69(s，3H，Me18)，1.56(s，3H，Me16)，1.46(s，3H，Me19)，1.40(s，9H，3Me t-buthoxy)，1.29(s，3H，Me17).
實施例6 3′-脫苯基-3′-(異丁烯基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-9-脫氧-10-脫乙醯氧基-10-酮紫杉酚的製備於-45℃下，向在0.5ml THF中的7-O-三乙基甲矽烷基-9-脫氧-10-脫乙醯氧基-10-酮漿果赤黴素III(30.0mg，0.047mmol)溶液中，滴加0.5ml 0.98M LiN(SiMe3)2的己烷溶液。-45℃，0.5小時後，將在0.5ml THF中的順-1-t-丁氧羰基-3-(-2甲氧基異丙氧基)-4-(異丁烯基)氮雜環丁烷-2-酮(44.1mg，0.141mmol)溶液，滴加入該混合物。溫熱此溶液至0℃並保持此溫度1小時，然後，加1ml 10％AcOH的THF溶液。此混合物在飽和NaHCO3和60/40乙酸乙酯/己烷間分配。蒸發有機層所得殘留物經矽膠過濾提純，得到40.8mg含(2′R，3′S)-O-(2-甲氧基異丙基)-7-O-三乙基甲矽烷基-3′-脫苯基-3′-(異丁烯基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-9-脫氧-10-脫乙醯氧基-10-酮紫杉酚和小量(2′S，3′R)異構體的混合物。
在0℃下，向在4ml乙腈和0.2ml吡啶中的40.8mg(0.043mmol)上述反應所得混合物的溶液中，加0.5ml 48％HF水溶液。於0℃下攪拌此混合物3小時，然後，於25℃下攪拌13小時，在飽和NaHCO3水溶液和乙酸乙酯間分配。蒸發乙酸乙酯溶液得34.4mg物質，經快速色譜提純，得23.0mg(70％)3′-脫苯基-3′-(異丁烯基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-9-脫氧-10-脫乙醯氧基-10-酮紫杉酚，再經甲醇/水重結晶。
m.p.149-153℃；[α]25Na-56.3°(c 0.0025，CHCl3).
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.12(d，J＝7.2Hz，2H，benzoateortho)，7.64(m，1H，benzoate para)，7.51(m，2H，benzoatemeta)，6.12(t，J＝7.5Hz，1H，H13)，5.95(d，J＝6.2Hz，1H，H2)，5.30(d，J＝8.9Hz，1H，NH)，4.94(d，J＝8.2Hz，1H，H5)，4.88(d，J＝8.9Hz，1H，Me2C＝CH-)，4.79(td，J＝8.9，2.4Hz，1H，H3′)，4.34(d，J＝8.2Hz，1H，H20α)，4.27(dd，J＝5.5，2.7Hz，1H，H2′)，4.19(d，J＝8.2Hz，1H，H20β)，，3.73(m，1H，H7)，3.67(br s，1H，2′OH)，3.13(d，J＝5.1Hz，1H，H3)，3.12(d，J＝15.7Hz，1H，H9α)，2.90(d，J＝15.7Hz，1H，H9β)，2.55(m，1H，H6α)，2.47(m，1H，H14β)，2.32(s，3H，4Ac)，2.28(m，1H，H14α)，2.04(br s，1H，7 OH)，1.88(s，1H，1 OH)，1.82(m，1H，H6β)，1.79(s，3H，Me18)，1.76(s，6H，2Me from isobuthenyl)，1.57(s，3H，Me16)，1.47(s，3H，Me19)，1.40(s，9H，3Me t-buthoxy)1.30(s，3H，Me17).
實施例7 N-(脫苯甲醯基)-N-(t-丁氧羰基)-9-脫氧-10-脫乙醯氧基-10-酮紫杉酚的製備於-45℃下，向在0.5ml THF中的7-O-三乙基甲矽烷基-10-脫乙醯氧基-10-酮漿果赤黴素III(30.0mg，0.047mmol)溶液中，滴加0.05ml 0.98M LiN(SiMe3)2的己烷溶液。-45℃，0.5小時後，向此混合物中滴加在0.5ml THF中的順-1-t-丁氧羰基-3-三乙基甲矽烷氧基-4-苯基氮雜環丁烷-2-酮(53.1mg，0.14mmol)溶液。溫熱此溶液至0℃並保持此溫度1小時，然後，加1ml 10％AcOH的THF溶液。在飽和NaHCO3水溶液和60/40乙酸乙酯/己烷間分配此混合物。蒸發有機層所得殘留物經矽膠過濾提純，得到43.7mg含(2′R，3′S)-2′7-雙-O-三乙基甲矽烷基-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-9-脫氧-10-脫乙醯氧基-10-酮紫杉酚和小量(2′S，3′R)異構體的混合物。
在0℃下，向下4.0ml乙腈和0.20ml吡啶中的43.7mg(0.042mmol)上述反應所得混合物的溶液中，加0.5ml 48％HF水溶液。於0℃下攪拌此混合物3小時，然後，於25℃下攪拌13小時，在飽和NaHCO3水溶液和乙酸乙酯間分配。蒸發乙酸乙酯溶液得33.2mg物質經快速色譜提純，得24.1mg(73％)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-9-脫氧-10-脫乙醯氧基-10-酮紫杉酚，再經甲醇/水重結晶。
m.p.162-165℃；[α]25Na-58.7°(c 0.0025，CHCl3).
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.11(d，J＝7.1Hz，2H，benzoateortho)，7.63(m，1H，benzoate para)，7.50(m，2H，benzoatemeta)，7.40-7.29(m，5H，benzoate，phenyl)，6.11(td，J＝7.8，1.0Hz，1H，H13)，5.94(d，J＝6.4Hz，1H，H2)，5.52(d，J＝9.8Hz，1H，H3′)，5.27(d，J＝9.3Hz，1H，NH)，4.93(dd，J＝8.8Hz，1H，H5)，4.64(br s，1H，H2′)，4.32(d，J＝8.3Hz，1H，H20α)，4.18(d，J＝8.3Hz，1H，H20β)，3.88(brs，1H，2′OH)，3.71(m，1H，H7)，3.11(d，J＝5.1Hz，1H，H3)，3.10(d，J＝15.7Hz，H9α)，2.88(d，J＝16.1，1H，H9β)，2.54(m，1H，H6α)，2.44(m，1H，H14β)，2.29(s，3H，4Ac)，2.26(m，1H，H14α)，2.02(br s，1H，7 OH)，1.88(s，1H，1 OH)，1.80(m，1H，H6β)，1.65(s，3H，Me18)，1.55(s，3H，Me16)，1.46(s，3H，Me19)，1.35(s，9H，3Me t-butoxy)，1.29(s，3H，Me17).
實施例8 3′-脫苯基-3′-(異丙烯基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-7-脫羥基紫杉酚的製備於-45℃下，向在0.7ml THF中的7-脫羥基-10-脫乙醯氧基漿果赤黴素III(28.7mg，0.051mmol)溶液中，滴加0.09ml0.98M LiN(SiMe3)2的己烷溶液。-45℃，0.5小時後，向此混合物中滴加在0.7ml THF中的順-1-t-丁氧羰基-3-(2-甲氧基異丙氧基)-4-(異丁烯基)氮雜環丁烷-2-酮(47.3mg，0.15mmol)溶液，溫熱此溶液至0℃並保持此溫度1小時，然後，加1ml10％AcOH的THF溶液。此混合物在飽和NaHCO3和60/40乙酸乙酯/己烷間分配。蒸發有機層所得殘留物經矽膠過濾提純，得到40.3mg含(2′R，3′S)-2′-O-(2-甲氧異丙基)基-3′-(異丁烯基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-7-脫羥基-10-脫乙醯氧基紫杉酚和小量(2′S，3′R)異構體的混合物。
在0℃下，向在3.2ml乙腈和0.15ml吡啶中的40.3mg(0.046mmol)上述反應所得混合物的溶液中，加0.47ml 48％HF水溶液。於0℃下攪拌此混合物3小時，然後，於25℃下攪拌13小時，在飽和NaHCO3水溶液和乙酸乙酯間分配。蒸發乙酸乙酯溶液得35.2mg物質，經快速色譜提純，得24.0mg(70％)3′-脫苯基-3′-(異丁烯基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-7-脫羥基-10-脫乙醯氧基紫杉酚，再經甲醇/水重結晶。
m.p.122-125℃；[α]25Na-64.3°(c 0.0025，CHCl3).
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.12(d，J＝7.1Hz，2H，benzoateortho)，7.60(m，1H，benzoate para)，7.48(m，2H，benzoatemeta)，6.11(td，J＝8.1，1.8Hz，1H，H13)，5.68(d，J＝6.9Hz，1H，H2)，5.23(d，J＝9.9Hz，1H，NH)，5.12(d，J＝9.9Hz，1H，H3′)，4.96(dd，J＝9.1，2.7Hz，1H，H5)，4.80(d，J＝8.7Hz，1H，Me2C＝CH-)，4.58(dd，J＝5.7，2.1Hz，1H，H2′)，4.30(d，J＝8.1，1H，H20α)，4.19(d，J＝8.1Hz，1H，H20β)，3.97(d，J＝6.9Hz，H3)，3.83(d，J＝16.5，1H，H10α)，3.33(m，1H，H10β)，3.30(m，1H，2′OH)，2.39(m，1H，H14α)，2.35(s，3H，4Ac)，2.26(m，1H，H14β)，2.19(m，1H，H6α)，2.10(m，1H，H7α)，1.95(m，1H，H6β)，1.73(s，3H，Me18)，1.69(s，6H，2Me from isobuthenyl)，1.63(s，3H，Me19)，1.44(m，1H，H7β)，1.39(br.s，1H，1 OH)，1.35(s，9H，3Me t-buthoxy)，1.25(s，3H，Me16)，1.15(s，3H，Me17).
實施例9 3′-脫苯基-3′-(2-噻吩基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-7-脫羥基-10-脫乙醯氧基紫杉酚的製備於-45℃下，向在0.7ml THF中的7-脫羥基-10-脫乙醯氧基漿果赤黴素III(25.0mg，0.044mmol)溶液中，滴加0.05ml0.98M LiN(SiMe3)2的己烷溶液。-45℃，0.5小時後，向此混合物中滴加，在0.7ml THF中的順-1-t-丁氧羰基-3-三乙氧基用矽烷氧基-4-(2-噻吩基)氮雜環丁烷-2-酮(50.0mg，0.13mmol)溶液。溫熱此溶液至0℃並保持此溫度1小時，然後，加1ml10％AcOH的THF溶液。此混合物在飽和NaHCO3和60/40乙酸乙酯/己烷間分配。蒸發有機層所得殘留物經矽膠過濾提純，得到35.4mg含(2′R，3′S)-2′-O-三乙基甲矽烷基-3′-脫苯基-3′-(2-噻吩基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-7-脫羥基-10-脫乙醯氧基紫杉酚和小量(2′S，3′R)異構體的混合物。
在0℃下，向在3.2ml乙腈和0.15ml吡啶中的35.4mg(0.037mmol)上述反應所得混合物的溶液中，加0.47ml 48％HF水溶液。於0℃下攪拌此混合物3小時，然後，於25℃下攪拌13小時，在飽和NaHCO3水溶液和乙酸乙酯間分配。蒸發乙酸乙酯溶液得32.4mg物質，經快速色譜提純，得20.5mg(71％)3′-脫苯基-3′-(2-噻吩基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-7-脫羥基-10-脫乙醯氧基紫杉酚，再經甲醇/水重結晶。
m.p.132-134℃；[α]25Na-61.3°(c 0.0025，CHCl3).
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.14(d，J＝7.1Hz，2H，benzoateortho)，7.61(m，1H，benzoate para)，7.51(m，2H，benzoatemeta)，7.29(dd，J＝5.4，1.2Hz，1H，thienyl)，7.09(d，J＝3.3Hz，1H，thienyl)，7.01(dd，J＝5.4，3.3Hz，1H，thienyl)，6.14(td，J＝8.4，1.8Hz，1H，H13)，5.69(d，J＝6.9Hz，1H，H2)，5.24(d，J＝9.9Hz，1H，NH)，5.19(d，J＝9.9Hz，1H，H3′)，4.93(dd，J＝9.3，2.7Hz，1H，H5)，4.62(dd，J＝5.7，2.1Hz，1H，H2′)，4.31(d，J＝8.1，1H，H20α)，4.21(d，J＝8.1Hz，1H，H20β)，3.98(d，J＝6.9Hz，H3)，3.84(d，J＝16.5，1H，H10α)，3.38(m，1H，H10β)，3.33(m，1H，2′OH)，2.40(m，1H，H14α)，2.37(s，3H，4Ac)，2.27(m，1H，H14β)，2.20(m，1H，H6α)，2.11(m，1H，H7α)，1.95(m，1H，H6β)，1.74(s，3H，Me18)，1.71(s，3H，Me19)，1.46(m，1H，H7β)，1.40(br.s，1H，1 OH)，1.34(s，9H，3Me t-buthoxy)，1.24(s，3H，Me16)，1.13(s，3H，Me17).
實施例10 3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-7-脫羥基-10-脫乙醯氧基紫杉酚的製備於-45℃下，向在0.8ml THF中的7-脫羥基-10-脫乙醯氧基漿果赤黴素III(35.0mg，0.061mmol)溶液中，滴加0.07ml0.98M LiN(SiMe3)2的己烷溶液。-45℃，0.5小時後，向此混合物中滴加在0.7ml THF中的順-1-t-丁氧羰基-3-三乙基甲矽氧基-4-(2-呋喃基)氮雜環丁烷-2-酮(68.0mg，0.18mmol)溶液。溫熱此溶液至0℃並保持此溫度1小時，然後，加1ml10％AcOH的THF溶液。此混合物在飽和NaHCO3和60/40乙酸乙酯/己烷間分配。蒸發有機層所得殘留物經矽膠過濾提純，得到56.3mg含(2′R，3′S)-2′-O-三乙基甲矽烷基-3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-7-脫氧羥基-10-脫醯氧基紫杉酚和小量(2′S，3′R)異構體的混合物。
在0℃下，向在4.6ml乙腈和0.22ml吡啶中的56.3mg(0.06mmol)上述反應所得混合物的溶液中，加0.68ml 48％HF水溶液。於0℃下攪拌此混合物3小時，然後，於25℃下攪拌13小時，在飽和NaHCO3水溶液和乙酸乙酯間分配。蒸發乙酸乙酯溶液得48.3mg物質經快速色譜提純，得31.7mg(69％)3′-脫苯基-3′-(2-呋喃基)-N-苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-7-脫羥基-10-脫乙醯氧基紫杉酚，再經甲醇/水重結晶。
m.p.128-131℃；[α]25Na-66.9°(c 0.0028，CHCl3).
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.13(d，J＝6.9Hz，2H，benzoateortho)，7.60(m，1H，benzoate para)，7.48(m，2H，benzoatemeta)，7.40(m，1H，furyl)，6.38(m，1H，furyl)，6.32(m，1H，furyl)，6.12(td，J＝8.1，1.8Hz，1H，H13)，5.67(d，J＝6.9Hz，1H，H2)，5.22(d，J＝9.9Hz，1H，NH)，5.17(d，J＝9.9Hz，1H，H3′)，4.91(dd，J＝9.1，2.7Hz，1H，H5)，4.60(dd，J＝5.7，2.1Hz，1H，H2′)，4.28(d，J＝8.1，1H，H20α)，4.21(d，J＝8.1Hz，1H，H20β)，3.95(d，J＝6.9Hz，H3)，3.82(d，J＝16.5，1H，H10α)，3.33(m，1H，H10β)，3.31(m，1H，2′OH)，2.38(m，1H，H14α)，2.35(s，3H，4Ac)，2.2 3(m，1H，H14β)，2.20(m，1H，H6α)，2.11(m，1H，H7α)，1.94(m，1H，H6β)，1.73(s，3H，Me18)，1.71(s，3H，Me19)，1.43(m，1H，H7β)，1.38(br.s，1H，1 OH)，1.32(s，9H，3Me t-buthoxy)，1.23(s，3H，Me16)，1.12(s，3H，Me17).
實施例11 (72-4)N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-7-脫羥基-10-脫乙醯氧基紫杉酚的製備於-45℃下，向在0.7ml THF中的7-脫羥基-10-脫乙醯氧基漿果赤黴素III(28.0mg，0.049mmol)溶液中，滴加0.06ml0.98M LiN(SiMe3)2的己烷溶液。-45℃，0.5小時後，向此混合物中滴加，在0.7ml THF中的順-1-t-丁氧羰基-3-三乙基甲矽烷氧基-4-(苯基)氮雜環丁烷-2-酮(56mg，0.15mmol)溶液，溫熱此溶液至0℃並保持此溫度1小時，然後，加1ml 10％AcOH的THF溶液。在飽和NaHCO3水溶液和60/40乙酸乙酯/己烷間分酚此混合物。蒸發有機層所得殘留物經矽膠過濾提純，得到38.4mg含(2′R，3′S)-2′-O-三乙基甲矽烷基-N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-7-脫羥基-10-脫乙醯氧基紫杉酚和小量(2′S，3′R)異構體的混合物。
在0℃下，向在3.2ml乙腈和0.15ml吡啶中的(38.4mg，0.041mmol)上述反應所得混合物的溶液中，加0.46ml 48％HF水溶液。於0℃下攪拌此混合物3小時，然後，於25℃下攪拌13小時，在飽和NaHCO3水溶液和乙酸乙酯間分配。蒸發乙酸乙酯溶液得33.8mg物質經快速色譜提純得27.4mg(71％)N-脫苯甲醯基-N-(t-丁氧羰基)-7-脫羥基-10-脫乙醯氧基紫杉酚，再經甲醇/水重結晶。
m.p.135-138℃；[α]25Na-65.2°(c 0.0025，CHCl3).
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.12(d，J＝7.1Hz，2H，benzoateortho)，7.60(m，1H，benzoate para)，7.51(m，2H，benzoatemeta)，7.42-7.29(m，5H，phenyl)，6.12(td，J＝8.1，1.8Hz，1H，H13)，5.66(d，J＝6.9Hz，1H，H2)，5.21(d，J＝9.9Hz，1H，NH)，5.16(d，J＝9.9Hz，1H，H3′)，4.92(dd，J＝9.1，2.7Hz，1H，H5)，4.58(dd，J＝5.7，2.1Hz，1H，H2′)，4.30(d，J＝8.1，1H，H20α)，4.21(d，J＝8.1Hz，1H，H20β)，3.97(d，J＝6.9Hz，H3)，3.82(d，J＝16.5，1H，H10α)，3.41(m，1H，H10β)，3.36(m，1H，2′OH)，2.40(m，1H，H14α)，2.38(s，3H，4Ac)，2.26(m，1H，H14β)，2.20(m，1H，H6α)，2.13(m，1H，H7α)，1.93(m，1H，H6β)，1.73(s，3H，Me18)，1.70(s，3H，Me19)，1.43(m，1H，H7β)，1.38(br.s，1H，1 OH)，1.32(s，9H，3Me t-buthoxy)，1.25(s，3H，Me16)，1.15(s，3H，Me17).
實施例12在試管中評價實施例1-11的紫杉烷68-3，68-4，69-1，69-2，75-1，74-4，74-3，72-1，72-2，72-3和72-4對人結腸癌細胞HCT-116的細胞毒性活性。對HCT-116細胞的細胞毒性以XTT(2，3-雙(2-甲氧基-4-硝基-5-磺苯基)-5-[(苯氨基)羰基]-2H-四唑鎓氫氧化物)檢驗(Scudiero等人「Evaluationof a soluble tetrazolium/formazan assay for cell growth and drugsensitivity in culture using human and other tumor cell lines」，Cancer Res.48；4827-4833，1988)。以4000細胞/孔將細胞塗於96孔微滴板中，24小時後加藥劑並連續稀釋。於37℃下培養細胞72小時，並在此期間加四唑鎓染料，XTT。活細胞中的脫氫酶還原XTT為在450nm處吸收光的形式，並可以分光光度法測定。吸收值越大活細胞數越大。IC50表示的結果是抑制細胞增殖(即在450nm處的吸收)到未處理對照細胞的50％所需的藥劑濃度。
所有化合物的IC50小於0.1表明它們都具有細胞毒性活性。
權利要求
1.通式如下的紫杉烷， 式中X1是-OX6，-SX7或-NX8X9；X2是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基；X3和X4獨立地是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基；X5是-COX10，-COOX10，-COSX10，-CONX8X10或-SO2X11；X6是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基或羥基保護基；X7是烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基或巰基保護基；X8是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基；X9是氨基保護基；X10是烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基；X11是烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基，-OX10或-NX8X14；X14是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基；R1是氫，羥基，保護了的羥基或與R14一起形成碳酸酯；R2是氫，羥基，-OCOR31或與R2a一起形成氧代基；R2a是氫或與R2一起形成氧代基；R4與R5a和連接它們的碳原子一起形成氧雜環丁烷環；R4a是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基，雜芳基，氰基，羥基或-OCOR30；R5是氫；R5a與R4和連接它們的碳原子一起形成氧雜環丁烷環；R6是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基，羥基，保護了的羥基或與R6a一起形成氧代基；R6a是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基，羥基，保護了的羥基或與R6一起形成氧代基；R7是氫或與R7a一起形成氧代基；R7a是氫，滷素，-OR28或與R7一起形成氧代基；R9是氫或與R9a一起形成氧代基；R9a是氫，羥基，保護了的羥基，醯氧基，或與R9一起形成氧代基；R10是氫；R10a是氫；R14是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基，羥基，保護了的羥基或與R1一起形成碳酸酯；R14a是氫，烷基，鏈烯基，炔基，芳基或雜芳基；R28是氫，醯基或羥基保護基；和R30和R31獨立地是氫，烷基，鏈烯基，炔基，單環芳基或單環雜芳基；條件是紫杉烷衍生物在C10取代基和至少一種其他取代基上具有與紫杉酚或taxotere不同的結構。
2.權利要求1的紫杉烷，條件是(a)R14不是氫，(b)R9和R9a不是氧代基，(c)R7a是氫，(d)R4a不是乙醯氧基，(e)R2不是苯甲醯氧基，(f)R1不是羥基，(g)X3或X4是環烷基、鏈烯基或雜芳基，(h)X5是-CONX8X10，或(i)X5是-COX10或-COOX10，X10是雜芳基。
3.權利要求1或2的紫杉烷，其中X3是異丁烯基、異丙基、環丙基、正丁基、叔丁基、環丁基、環己基、呋喃基、噻吩基或吡啶基。
4.權利要求1或2的紫杉烷，其中X5是叔丁氧羰基或苯甲醯基。
5.權利要求3的紫杉烷，其中X5是叔丁氧羰基或苯甲醯基。
6.一種用作抗腫瘤藥劑的藥物組合物，它含有權利要求1-5中任一權項的紫杉烷和一種或多種藥學上可接受的或惰性的稀釋劑或佐劑。
全文摘要
具有可變換的C－10位取代基的紫杉烷衍生物。
文檔編號C07D407/12GK1495177SQ0315790
公開日2004年5月12日 申請日期1994年1月15日 優先權日1993年1月15日
發明者R·A·霍爾頓, K·B·蔡, R A 霍爾頓, 蔡 申請人:佛羅裡達州立大學