用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法

2023-09-17 06:25:00 2

專利名稱：用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法
技術領域：
本發明主要涉及靈芝液體深層發酵製備菌絲體液的方法，尤其涉及利用生產澱粉或啤酒產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法。
背景技術：
傳統的靈芝液體發酵製備菌絲體液的方法，所用原料是葡萄糖、蛋白腖、酵母膏、 豆粉、玉米粉、維生素、無機鹽和蒸餾水配製成的液體培養基，從試管瓊脂斜面菌種挑取菌絲塊接種在液體培養基中，經好氧發酵製備靈芝菌絲體液，其缺點是所用液體發酵培養基原料成分多、成本高、生產工藝複雜、不能節省能源和人力。

發明內容
本發明的目的在於避免現有技術的不足提供一種用生產澱粉或啤酒產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法。使用的靈芝菌種在馬鈴薯澱粉、玉米澱粉、豆類澱粉或啤酒產生的渣糟水配製的培養基中培養和反覆馴化的優良菌株，以新鮮的薯類澱粉或玉米澱粉、 豆類澱粉、或啤酒產生的糟渣水、添加少量的糖和無機鹽，培養料不滅菌，接種一定量的菌種後，進行好氧發酵培養製備靈芝菌絲體液。該方法利用澱粉、啤酒生產企業產生的廢水為原料，生產過程無「三廢」汙染，生產工藝簡單、操作方便、節省能源和人力。其產物既可用於有機廢水淨化劑，又可提取多種生物活性物質，用於製備輔助治療腫瘤、愛滋病和老年性疾病藥物的原料，而且還可作為酶製劑和絮凝劑用於石油開採、食品工業、醫療和精細化工等行業。為實現上述目的，本發明採取的技術方案為一種用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，其主要特點是製備步驟為
(1)靈芝菌斜面菌種的製備將母種試管斜面中的靈芝菌絲塊接種於生產澱粉產生的渣糟水瓊脂斜面培養基上，經M-26°C靜置培養4-6d活化，然後再轉種於生產澱粉產生的渣糟水木屑瓊脂斜面培養基上，經M_26°C靜置培養4-6d進行第二次活化，為一級菌種；
(2)搖瓶發酵培養將一級菌種挑取0.5cm大小的2-6個菌絲塊，接種於三角燒瓶生產澱粉產生的渣糟水搖瓶發酵培養基中，將氣生菌絲一面向上懸浮，置於培養箱內，2416°C 靜置培養18-24h，然後經M_26°C的旋轉式恆溫搖床上培養2-3d，再轉種於生產澱粉產生的渣糟水液體搖瓶擴大培養，種子接種量5-8%，經M-26°C搖床培養2-3d，其菌絲體液為二級菌種；
(3)一級種子罐發酵培養將二級菌種在無菌條件下以5-8%的菌種量接種於100-120 立升的種子發酵罐中，罐中盛有70-84立升的生產澱粉產生的渣糟水發酵培養基，經通氣、 攪拌和沈一觀！恆溫發酵培養2-3d即可成熟，為三級菌種；
(4)二級種子罐發酵培養將三級菌種在無菌條件下，以5-8%的菌種量接種於 1000-1200立升的種子發酵罐中，罐中盛有700—840立升的生產澱粉產生的渣糟水種子罐發酵培養基，經通氣、攪拌和沈一觀！恆溫發酵培養2-3d即可成熟，為四級菌種(5)液體發酵罐擴大培養將四級菌種在無菌條件下，以10 —15%的菌種量接種於 10000立升液體發酵罐擴大培養基中，罐中盛有5000—7000立升的生產澱粉產生的渣糟水液體發酵罐擴大培養基，經通氣、攪拌和恆溫發酵培養2—3d即為成熟菌絲體液。所述的用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，所述的生產澱粉產生的渣糟水瓊脂斜面培養基按體積重量份，其製備步驟為在生產澱粉產生的渣糟水 80-120ml中加葡萄糖1. 8—2. 2g，瓊脂1. 8—2. 2 g，PH值自然，加溫溶解後經110—114°C、 28-32分鐘高溫蒸汽滅菌，然後在無菌條件下分裝於15 X 1. 5cm的乾燥滅菌的試管中擺成斜面待凝固後備用。所述的用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，所述的生產澱粉產生的渣糟水木屑瓊脂斜面培養基按體積重量份，其製備步驟為在生產澱粉產生的渣糟水 80-120ml中加木屑4一6g、葡萄糖1. 8—2. 2g，瓊脂1. 8—2. 2g，PH值自然，加熱溶解後經 110—114°C,28—32分鐘高溫蒸汽滅菌，然後在無菌條件下分裝於15X 1. 5CM的乾燥滅菌的試管中擺成斜面待凝固後備用。所述的用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，所述的生產澱粉產生的渣糟水搖瓶發酵培養基及生產澱粉產生的渣糟水種子罐發酵培養基按體積重量份，其製備步驟為在1升新鮮的生產澱粉產生的渣糟水中加入白糖8 — 12g，磷酸二氫鉀0.8— 1.28，硫酸鎂0.6—1.(^，維生素附 0. 08—0. 12g，PH值自然，分裝於500ML三角瓶中，分裝量為瓶子容量的1/4，然後經110—114°C，30—35分鐘高溫蒸汽滅菌，冷卻後備用。所述的用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，所述的生產澱粉產生的渣糟水液體發酵罐擴大培養基按體積重量份，其製備步驟為在每噸新鮮生產澱粉產生的渣糟水中加入白糖8 — 12kg，磷酸二氫鉀0. 8—1. ^cg,硫酸鎂0. 6—1. 0kg，維生素Bl 0. 08—0. Ukg，PH值自然，溶解後備用。所述的用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，所述的用生產澱粉產生的渣糟水為馬鈴薯澱粉、玉米澱粉、豆類澱粉或啤酒生產時產生的糟渣水。所述的靈芝菌種，在使用馬鈴薯澱粉、玉米澱粉、豆類澱粉或啤酒生產產生的糟渣水配製的五種不同發酵培養基上生長情況及產生胞外粗多糖的比較，其結果見表1。在五種不同的每立升的渣糟水配製的發酵培養基中各加白糖8-lOg和磷酸二氫鉀0. 8-1. 2g、硫酸鎂0. 8-1. 2g、維生素Bl 0. 06_lg，搖瓶發酵，測定菌絲體液的菌體乾重和胞外粗多糖含量，見表1
表1在五種不同培養基上產生菌絲體乾重和胞外粗多糖的比較
權利要求
1.一種用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，其特徵是製備步驟為(1)靈芝菌斜面菌種的製備將母種試管斜面中的靈芝菌絲塊接種於生產澱粉產生的渣糟水瓊脂斜面培養基上，經M-26°C靜置培養4-6d活化，然後再轉種於生產澱粉產生的渣糟水木屑瓊脂斜面培養基上，經M_26°C靜置培養4-6d進行第二次活化，為一級菌種；(2)搖瓶發酵培養將一級菌種挑取0.5cm大小的2-6個菌絲塊，接種於三角燒瓶生產澱粉產生的渣糟水搖瓶發酵培養基中，將氣生菌絲一面向上懸浮，置於培養箱內，2416°C 靜置培養18-24h，然後經M-26°C的旋轉式恆溫搖床上培養2-3d，再轉種於生產澱粉產生的渣糟水液體搖瓶擴大培養，種子接種量5-8%，經M-26°C搖床培養2-3d，其菌絲體液為二級菌種。
2.如權利要求1所述的用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，其特徵是，還包括有步驟(3)一級種子罐發酵培養將二級菌種在無菌條件下以5-8%的菌種量接種於100-120 立升的種子發酵罐中，罐中盛有70-84立升的生產澱粉產生的渣糟水發酵培養基，經通氣、 攪拌和沈一觀！恆溫發酵培養2-3d即可成熟，為三級菌種。
3.如權利要求2所述的用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，其特徵是，還包括有步驟(4)二級種子罐發酵培養將三級菌種在無菌條件下，以5-8%的菌種量接種於 1000-1200立升的種子發酵罐中，罐中盛有700—840立升的生產澱粉產生的渣糟水種子罐發酵培養基，經通氣、攪拌和沈一觀！恆溫發酵培養2-3d即可成熟，為四級菌種。
4.如權利要求3所述的用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，其特徵是，還包括有步驟(5)液體發酵罐擴大培養將四級菌種在無菌條件下，以10—15%的菌種量接種於 10000立升液體發酵罐擴大培養基中，罐中盛有5000—7000立升的生產澱粉產生的渣糟水液體發酵罐擴大培養基，經通氣、攪拌和恆溫發酵培養2—3d即為成熟菌絲體液。
5.如權利要求1所述的用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，其特徵是所述的生產澱粉產生的渣糟水瓊脂斜面培養基按體積重量份，其製備步驟為在生產澱粉產生的渣糟水80-120ml中加葡萄糖1. 8—2. 2g，瓊脂1. 8—2. 2 g，PH值自然，加溫溶解後經110—114°C、28—32分鐘高溫蒸汽滅菌，然後在無菌條件下分裝於15X1. 5cm的乾燥滅菌的試管中擺成斜面待凝固後備用。
6.如權利要求1所述的用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，其特徵是所述的生產澱粉產生的渣糟水木屑瓊脂斜面培養基按體積重量份，其製備步驟為在生產澱粉產生的渣糟水80-120ml中加木屑4一6g、葡萄糖1. 8—2. 2g，瓊脂1. 8—2. 2g，PH 值自然，加熱溶解後經110—114°C、28—32分鐘高溫蒸汽滅菌，然後在無菌條件下分裝於 15X 1. 5CM的乾燥滅菌的試管中擺成斜面待凝固後備用。
7.如權利要求1所述的用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，其特徵是所述的生產澱粉產生的渣糟水搖瓶發酵培養基及生產澱粉產生的渣糟水種子罐發酵培養基按體積重量份，其製備步驟為在1升新鮮的生產澱粉產生的渣糟水中加入白糖8—12g， 磷酸二氫鉀0.8 — 1. 2g，硫酸鎂0.6 — l.Og，維生素Bl 0. 08—0. 12g，PH值自然，分裝於 500ML三角瓶中，分裝量為瓶子容量的1/4，然後經110—114°C，30—35分鐘高溫蒸汽滅菌，冷卻後備用。
8.如權利要求1所述的用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，其特徵是所述的生產澱粉產生的渣糟水液體發酵罐擴大培養基按體積重量份，其製備步驟為在每噸新鮮生產澱粉產生的渣糟水中加入白糖8—Ukg，磷酸二氫鉀0. 8—1. ^cg,硫酸鎂0. 6— 1.0kg，維生素Bl 0. 08—0. Ukg，PH值自然，溶解後備用。
9.如權利要求1至8所述的用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，其特徵是所述的用生產澱粉產生的渣糟水為馬鈴薯澱粉、玉米澱粉、豆類澱粉或啤酒生產時產生的糟渣水。
全文摘要
本發明主要涉及靈芝液體深層發酵製備菌絲體液的方法。一種用生產澱粉產生的渣糟水製備靈芝菌絲體液的方法，使用靈芝菌種在馬鈴薯澱粉、玉米澱粉、豆類澱粉或啤酒產生的渣糟水配製的培養基中培養和反覆馴化的優良菌株，以新鮮的薯類澱粉或玉米澱粉、豆類澱粉、或啤酒產生的糟渣水、添加少量的糖和無機鹽，培養料不滅菌，接種一定量的菌種後，進行好氧發酵培養製備靈芝菌絲體液。該方法利用澱粉、啤酒生產企業產生的廢水為原料，生產過程無「三廢」汙染，生產工藝簡單、操作方便、節省能源和人力。其產物既可用於有機廢水淨化劑，又可提取多種生物活性物質，用於製備輔助治療腫瘤、愛滋病和老年性疾病藥物的原料，而且還可作為酶製劑和絮凝劑用於石油開採、食品工業、醫療和精細化工等行業。
文檔編號C05G3/00GK102369837SQ20101058315
公開日2012年3月14日 申請日期2010年12月12日 優先權日2010年12月12日
發明者孫宇, 孫濤, 孫榮高, 王永帥 申請人:孫宇