生薑藥材的uplc指紋圖譜構建方法及其標準指紋圖譜的製作方法

2023-09-12 06:47:25

生薑藥材的uplc指紋圖譜構建方法及其標準指紋圖譜的製作方法
【專利摘要】本發明提供生薑藥材超高效液相色譜指紋圖譜的建立方法，屬於藥物分析【技術領域】其特徵在於：（1）精密稱取生薑1.25g左右，置10ml容量瓶中，加入甲醇至刻度，超聲25min，放冷，稱量，加甲醇補足失重量，搖勻，0.22μm濾膜濾過，備用。（2）指紋圖譜的製備：採用超高液相色譜系統，色譜柱為UPLCBEHC18色譜柱(2.1mm×100mm，1.7μm)；乙腈(A)-水溶液(B)為流動相，梯度洗脫，檢測波長為280nm，流速為0.35mL·min-1，柱溫為35℃。在此條件下分析得到生薑藥材的超高液相指紋圖譜。（3）標準指紋圖譜的確定：對17批不同產地生薑藥材建立了UPLC指紋圖譜，確定了16個共有特徵峰，這些共有UPLC特徵峰構成了生薑藥材的指紋特徵，作為可作為生薑藥材的標準指紋圖譜。
【專利說明】生薑藥材的UPLC指紋圖譜構建方法及其標準指紋圖譜

【技術領域】
[0001]本發明設計了中藥材指紋圖譜的構建方法，尤其是生薑藥材超高效液相色譜(UPLC)指紋圖譜的構建方法及其標準指紋圖譜，屬於藥物分析【技術領域】。

【背景技術】
[0002]中藥是多組分的複雜體系，其化學成分種類豐富，同時其質量又會受到中藥產地，品種，運輸，炮製加工等諸多方面的影響，所以對中藥及其製劑的質量控制的研究一直是中藥及其製劑現代化和走向國際的瓶頸，一直是中藥及其製劑研究的一個重中之重，同時也是一個難點。中藥指紋圖譜技術現在是國際社會公認的用來鑑別中藥品種和質量控制的最有效，最準確，最直接的方法手段。該技術主要通過不同的特徵共有峰來標示藥材的成分，可基本上反映中藥的整體化學成分分布以及含量情況。
[0003]伴隨著更多更新的儀器的出現和發展，中藥指紋圖譜技術開始向縱向快速發展，技術種類越來越多，應用範圍越來越廣。日趨完善的中藥指紋圖譜技術包括:TLC法指紋圖譜技術、GC法指紋圖譜技術、HPLC法指紋圖譜技術等。其中高效液相色譜(HPLC)具有對樣品揮發度和熱穩定性的限制小，柱效高、選擇性高、靈敏度高、重複性好等優點，適合用於中藥複雜體系的分析，在中藥指紋圖譜研究中應用的最為廣泛；而超高液相色譜技術(UPLC)較普通的HPLC而言，具有分析時間短、靈敏的高、重現性好，節省溶劑等優勢，近年來在中藥指紋圖譜研究中的應用也越來越多。
[0004]生薑為姜科植物姜(Zingiber officinale Rose.)的新鮮根莖，具有解表散寒、化痰止咳、溫中止嘔、解魚蟹毒等功效。生薑可以入藥、醃製食用，同時又是重要的調味品，是藥食同源的最佳範例。生薑在我國有悠久的藥用和食用歷史，早在春秋時期的《論語.鄉黨》一書中就有孔子「不撤姜食，不多食」的記載。生薑產地廣泛，我國大部分地區均有出產，南方以廣東、浙江栽培較為普遍，其次是江西、安徽、四川、雲南、湖南、湖北等省；在北方則以山東為主要產地，還有河南、陝西等省栽培較多。藥材的質量與產地的氣候、土壤、陽光、水分等自然條件和生長環境密切相關，這些因素不僅影響著藥材的生長發育和分布，而且影響其外部形態、內部構造和生理變異以及有效成分的形成和含量。目前生薑藥材質量控制與品質評價的方法主要側重於單一或幾種成分的含量測定，不能全面說明其質量狀況，需要能為全面評價生薑質量的技術方法。


【發明內容】

[0005]本發明的目的是提供一種生薑的UPLC指紋圖譜的建立方法，以及由此方法所得到的生薑藥材標準指紋圖譜。為達到此目的，本發明通過對生薑的超高液相指紋圖譜的研究，提出了一種生薑藥材的質量控制方法，彌補了現有質量控制技術的不足，使生薑藥材的質量控制更加全面和科學。
[0006]本發明的生薑UPLC指紋圖譜建立方法，包括如下步驟:
供試品溶液製備:精密稱取生薑1.25g左右(按《2010版(附錄VID項下水分測定法，以甲苯法測定含水率)，置1ml容量瓶中，加入甲醇至刻度，超聲(150W, 40Hz)25min,放冷，稱量，加甲醇補足失重量，搖勻，0.22 μ m濾膜濾過，取續濾液，即得。
[0007]指紋圖譜的製備:採用超高液相色譜系統，色譜分離柱為UPLC色譜柱，填料為BEHC18柱(2.1 mmX10 mm, 1.7 μ m);乙腈(A)-水溶液⑶為流動相，梯度洗脫(程序為A-B:O ?10min，3:97 ；10 ?15min，85:15 ；15 ?18min，100:0 ；18 ?20min，97:3)，檢測波長為280nm，流速為0.35mL.mirT1，柱溫為35°C。在此條件下分析供試品溶液，得到生薑藥材的超高液相指紋圖譜。
[0008]標準指紋圖譜的確定:確定了 16個共有特徵峰，其保留時間分別為:2.7 mi n、7.3min、8.9min、9.2min、9.6min、10.2 min、10.4 min、IL 4 min、12.1 min、12.4min、12.7 min、13.2mi n、13.7 min、13.9 min、16.2min、17.9min，這些共有UPLC特徵峰構成了生薑藥材的指紋特徵，作為可作為生薑藥材的標準指紋圖譜。
[0009]本發明有以下優點和用途:
(I)將生薑藥材作為整體對待，通過比較其共有峰，可以找出不同產地、批次和不同炮製品藥材之間的細微差異。
[0010](2)供試品溶液製備方法簡單，色譜條件容易實現。
[0011](3)方法的穩定性，重現性較好，採樣時間短。
[0012](4)適用於生薑藥材真偽，質量、產地等鑑別和控制。
[0013]【專利附圖】

【附圖說明】:
圖1是本發明提供的生薑藥材的標準指紋圖譜，從左到右分別標示出其16個共有色譜峰。
[0014]【具體實施方式】:
(I)儀器和藥品:採用Waters超高液相色譜儀；生薑藥材共17批，採於全國不同產地，所用試劑均為色譜純或分析純。
[0015](2)供試品溶液製備:精密稱取生薑1.25g左右(按《2010版(附錄VDD項下水分測定法，以甲苯法測定含水率)，置1ml容量瓶中，加入甲醇至刻度，超聲(150W，40Hz)25min，放冷，稱量，加甲醇補足失重量，搖勻，0.22 μ m濾膜濾過，取續濾液，即得。
[0016](3)超高液相色譜分析:色譜分離柱為UPLC色譜柱，填料為BEHC18柱(2.1mmX10 mm, 1.7 μ m);乙腈(A)-水溶液(B)為流動相，梯度洗脫(程序為A_B: O?1min,3:97 ; 10 ?15min，85:15 ；15 ?18min, 100:0 ；18 ?20min，97:3)，檢測波長為 280nm，流速為0.35mL.mirT1，柱溫為35°C。在此條件下分析供試品溶液，得到生薑藥材的超高液相指紋圖譜。
[0017](4)按照本發明方法，對17批不同產地生薑藥材建立了 UPLC指紋圖譜，確定了16 個共有特徵峰，其保留時間分別為:2.7 mi η、7.3 min、8.9min、9.2min、9.6min、10.2min、10.4 min、lL4 min、12.1 min、12.4min、12.7 min、13.2mi n、13.7 min、13.9 min、16.2min、17.9min，這些共有UPLC特徵峰構成了生薑藥材的指紋特徵，作為可作為生薑藥材的標準指紋圖譜。
【權利要求】
1.供試品溶液製備:精密稱取生薑1.25g左右(按《2010版(附錄VID項下水分測定法，以甲苯法測定含水率)，置1ml容量瓶中，加入甲醇至刻度，超聲(150W, 40Hz)25min,放冷，稱量，加甲醇補足失重量，搖勻，0.22 μ m濾膜濾過，取續濾液，即得。
2.指紋圖譜的製備:採用超高液相色譜系統，色譜分離柱為UPLC色譜柱，填料為BEHC18柱(2.1 mmX10 mm, 1.7 μ m);乙腈(A)-水溶液⑶為流動相，梯度洗脫(程序為A-B:O ?10min，3:97 ；10 ?15min，85:15 ；15 ?18min，100:0 ；18 ?20min，97:3)，檢測波長為280nm，流速為0.35mL.min—1，柱溫為35°C ;在此條件下分析供試品溶液，得到生薑及其炮製品藥材的超高液相指紋圖譜。
3.標準指紋圖譜的確定:確定了16個共有特徵峰，其保留時間分別為:2.7 mi n、7.3min、8.9min、9.2min、9.6min、10.2 min>10.4 min>11.4 min>12.1 min、12.4min、12.7 min、.13.2mi n、13.7 min、13.9 min、16.2min、17.9min,這些共有UPLC特徵峰構成了生薑藥材的指紋特徵，作為可作為生薑藥材的標準指紋圖譜。
【文檔編號】G01N30/02GK104165933SQ201310182244
【公開日】2014年11月26日 申請日期:2013年5月17日 優先權日:2013年5月17日
【發明者】韓燕全, 夏倫祝, 汪永忠 申請人:韓燕全