一種人血白蛋白的生產方法
2023-09-14 08:58:30 2
一種人血白蛋白的生產方法
【專利摘要】本發明提供了一種人血白蛋白的生產方法，其特點在於包括以下步驟：1、四步法蛋白質分離工藝，即第一步分離Cohn組分I、組分Ⅱ、組分Ⅲ。第二步分離Cohn組分Ⅳ-1，第三步分離Cohn組分Ⅳ-4，第四步分離Cohn組分V，組分V沉澱經純化過濾即得人血白蛋白；2超濾生產；3、配製與巴氏病毒滅活；4、灌裝與後加溫；5、包裝檢驗。
【專利說明】一種人血白蛋白的生產方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種血液製品生產的工藝，具體是一種人血白蛋白的生產方法。
【背景技術】
[0002]國內血液製品生產的主要工藝是Cohn低溫乙醇分步分離工藝。該工藝自初創以來，已經有70多年的歷史了。70多年間，在生產和研究中有著不同的改進，雖然都是通過控制乙醇濃度、分離的溫度、pH、蛋白質濃度、離子強度等五大要素進行血漿蛋白質的分離，但現有專利技術存在白蛋白得率低、原料利用率較低的局限。
【發明內容】
[0003]為克服上述缺陷，本發明提出一種4步法分離生產人血白蛋白的方法，增加了Cohn組分IV -UCohn組分IV _4的分離，為提高原料的利用率提供了工業化生產的條件。
[0004]該方法的基本原理為血漿蛋白Cohn低溫乙醇分步分離。本發明所述的人血白蛋白的生產包括一下步驟:
1、四步法蛋白質分離工藝:
本步驟為以下4步，分別為:第一步分離Cohn組分1、組分I1、組分III ;第二步分離Cohn組分IV-1 ;第三步分離Cohn組分IV-4 ;第四步分離Cohn組分V，組分V沉澱經純化過濾即得人血白蛋白。
[0005]2、超濾生產:
超濾的目的在於濃縮製品，通過超濾透析去除小分子物質，也包括組分分離過程中高達40%以上的乙醇，超濾選擇的超濾膜的截留量為大於10KD，超濾的工藝為:等體積的無菌生理鹽水透析2至6次，等體積的注射用水透析2至5次，超濾透析的溫度為O至10°C。
[0006]3、配製與巴氏病毒滅活:
按照既定的白蛋白成分配方配製完成後，進行58°C至62°C恆溫10小時(600分鐘)的巴氏病毒滅活。
[0007]4、灌裝與後加溫:
在產品灌裝-軋蓋操作完成後，對所有產品進行55至62°C，90至300分鐘的後加溫處理。
[0008]5、包裝檢驗:
經包裝檢驗即為人血白蛋白成品，檢驗標準為中國藥典最新的人血白蛋白標準，也可以參考歐洲藥典、美國藥典等進行成品檢驗。
[0009]所述的四步法蛋白質分離工藝的特點在於。
[0010](I)、第一步分離(分離Cohn組分1、組分I1、組分III)的工藝參數為印11為6.5至7.8、乙醇含量為15%至24%、溫度控制為-6.(TC至-2.5°C，蛋白質濃度範圍為:4.0%至
7.8%。
[0011](2)、第二步分離(分離Cohn組分IV -1)的工藝參數為:pH為3.5至6.8、乙醇含量為12%至24%、溫度控制為-5.(TC至-2.5°C，蛋白質濃度範圍為:2.0%至5.8%。
[0012](3)、第三步分離(分離Cohn組分IV-4)的工藝參數為:pH為4.5至6.8、乙醇含量為35%至54%、溫度控制為-6.(TC至-2.5°C，蛋白質濃度範圍為:1.0%至4.8%。
[0013](4)、第四步分離(分離Cohn組分V)的工藝參數為:pH為3.5至5.8、乙醇含量為35%至54%、溫度控制為-10.(TC至-4.5°C，蛋白質濃度範圍為:0.6%至4.8%。
[0014]所述的超濾生產的特點在於:人血白蛋白生產工藝中採用超濾工序來濃縮人血白蛋白，超濾膜的截留量為大於10KD，超濾的工藝為:等體積的無菌生理鹽水透析3至6次，等體積的注射用水透析3至6次，超濾透析的溫度為O至10°C。
[0015]所述的配製與巴氏病毒滅活的特點在於:採用兩步病毒處理措施，其中第一步為配製完成後採用10小時(600分鐘)的巴氏病毒滅活處理,第二步滅活為在灌裝軋蓋後進行55至62°C，90至300分鐘後加溫處理。
[0016]該法生產的人血白蛋白產品符合中國藥典的質量要求。
【具體實施方式】
[0017]下面結合【具體實施方式】，對本發明作進一步描述。通過實施實例I說明本發明的技術方案及操作過程。
[0018]實施實例1:
1、四步法蛋白質分離工藝:
步驟為以下4步，分別為:第一步分離Cohn組分1、組分I1、組分III ;第二步分離Cohn組分IV-1 ;第三步分離Cohn組分IV-4 ;第四步分離Cohn組分V，組分V沉澱經純化過濾即得人血白蛋白。`
[0019](1A)、分離 Cohn 組分 I+ II + III:
工藝參數為:pH為7.0、乙醇含量為23%、溫度控制為-2.5°C，蛋白質濃度範圍為6.8%。
[0020]組分沉澱製作完畢，按照5克/L加入硅藻土，壓濾分離組分沉澱。壓濾液用於分離Cohn組分V1-1。
[0021](1B)、分離 Cohn 組分V1-1:
工藝參數為印11為5.8、乙醇含量為18%、溫度控制為-3.2°C，蛋白質濃度範圍為:
3.8%,
組分沉澱製作完畢，按照6克/L加入硅藻土，壓濾分離組分沉澱。壓濾液用於分離Cohn組分VI _4。
[0022](IC)、分離 Cohn 組分VI _4:
工藝參數為:pH為5.5、乙醇含量為48%、溫度控制為-4.(TC，蛋白質濃度範圍為:
2.8%，組分沉澱製作完畢，按照4克/L加入硅藻土，壓濾分離組分沉澱。壓濾液用於分離Cohn組分V。
[0023](ID)、分離 Cohn 組分 V:
工藝參數為:pH為4.2、乙醇含量為44%、溫度控制為-9.8°C，蛋白質濃度範圍為:1.6%。
[0024]組分沉澱製作完畢，按照6克/L加入硅藻土，壓濾分離組分沉澱。壓濾所得的沉澱即為組分V，純化過濾後用於生產人血白蛋白。[0025]2、超濾生產:
超濾的目的在於濃縮製品，通過超濾透析去除小分子物質，也包括組分分離過程中高達40%以上的乙醇，超濾選擇的超濾膜的截留量為大於10KD，超濾的工藝為:等體積的無菌生理鹽水透析6次，等體積的注射用水透析5次，超濾透析的溫度為9°C。
[0026]3、配製與巴氏病毒滅活:
按照既定的白蛋白成分配方配製完成後，進行58°C至62°C恆溫10小時的巴氏病毒滅活。
[0027]4、灌裝與後加溫:
在產品灌裝-軋蓋操作完成後，對所有產品進行55至62°C，300分鐘的後加溫處理。
[0028]5、包裝檢驗:
經包裝檢驗即為人血白蛋白成品，檢驗標準為中國藥典最新的人血白蛋白標準，也可以參考歐洲藥典、美國藥典 等進行成品檢驗。
【權利要求】
1.一種人血白蛋白生產方法，該生產方法的原理是血漿蛋白Cohn低溫乙醇分步分離，其特點在於包含以下幾個步驟:1、四步法蛋白質分離工藝；2、超濾生產；3、配製與巴氏病毒滅活；4、灌裝與後加溫；5、包裝檢驗。
2.根據權利要求1，所述的人血白蛋白生產方法的特徵在於蛋白質分離的步驟為4步，即第一步分離Cohn組分1、組分I1、組分III ;第二步分離Cohn組分IV -1，第三步分離Cohn組分IV _4，第四步分離Cohn組分V，組分V沉澱經純化過濾即得人血白蛋白。
3.根據權利要求1，所述的人血白蛋白生產方法的特徵在於超濾生產步驟中，超濾膜的截留量為大於10KD，超濾的工藝為:等體積的無菌生理鹽水透析3至6次，等體積的注射用水透析3至6次，超濾透析的溫度為O至10°C。
4.根據權利要求1，所述的人血白蛋白生產方法的特徵在於配製與巴氏病毒滅活步驟中採用兩步病毒處理措施，其中第一步為配製完成後採用600分鐘的巴氏病毒滅活處理，第二步滅活為在灌裝軋蓋後進行55至62°C，90至300分鐘後加溫處理。
5.根據權利要求1、2，所述的人血白蛋白生產方法的特徵在於在蛋白質的分離中，第一步分離(分離Cohn組分1、組分I1、組分III)的工藝參數為:pH為6.5至7.8、乙醇含量為15%至24%、溫度控制為-6.(TC至-2.5°C，蛋白質濃度範圍為:4.0%至7.8%。
6.根據權利要求1、2，所述的人血白蛋白生產方法的特徵在於在蛋白質的分離中，第二步分離(分離Cohn組分IV -1)的工藝參數為:pH為3.5至6.8、乙醇含量為12%至24%、溫度控制為-5.(TC至-2.50C，蛋白質濃度範圍為:2.0%至5.8%。
7.根據權利要求1、2，所述的人血白蛋白生產方法的特徵在於在蛋白質的分離中，第三步分離(分離Cohn組分IV -4)的工藝參數為:pH為4.5至6.8、乙醇含量為35%至54%、溫度控制為-6.(TC至-2.5°C，蛋白質濃度範圍為:1.0%至4.8%。`
8.根據權利要求1、2，所述的人血白蛋白生產方法的特徵在於在蛋白質的分離中，第四步分離(分離Cohn組分V)的工藝參數為:pH為3.5至5.8、乙醇含量為35%至54%、溫度控制為-10.(TC至-4.5°C，蛋白質濃度範圍為:0.6%至4.8%。
【文檔編號】C07K1/34GK103833844SQ201410078075
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2014年3月5日 優先權日:2014年3月5日
【發明者】孔維權, 張庭喜, 王連群, 石正國, 朱瑞芳, 張帆, 侯彩霞, 呂紹玉 申請人:貴州中泰生物科技有限公司