血液鋅原卟啉全血質控品及其製備方法與應用的製作方法
2023-09-14 01:40:50
專利名稱：血液鋅原卟啉全血質控品及其製備方法與應用的製作方法
技術領域：
本發明屬於生物製品技術領域，具體涉及一種血液鋅原卟啉全血質控品及其製備方法與應用。
背景技術：
近年來，職業健康監護越來越受到重視，鉛中毒是職業健康監護的一大難點，職業性慢性鉛中毒診斷標準的主要依據是血鉛和血液鋅原卟啉(ZPP)等實驗室檢測指標。血鉛檢測需要的儀器設備條件比較高，不能用於大面積篩查和推廣；螢光測定技術檢測血液鋅原卟啉，具有快速、準確、價廉等優點，已被廣泛應用於缺鐵性貧血和鉛中毒診斷。研究表明，血液鋅原卟啉與血鉛和尿鉛作為職業鉛危害監測指標沒有差異，因此，血液鋅原卟啉檢測受到職業危害評價工作者的高度重視。準確精密的職業病實驗室檢測數據是職業病診斷鑑定的主要依據之一，其獲得需要經過嚴格的室內質控。室內質控是由實驗室的工作人員採用一系列統計學的方法，連續地評價本實驗室測定工作的可靠程度，判斷檢驗報告是否可發出的過程。室內質控的目的是檢測、控制本實驗室測定工作的精密度，並檢測其準確度的改變，提高常規測定工作的批間、批內標本檢測結果的一致性。質控品是專門用於室內質控的、穩定的與待測標本近似的材料，是保證質控工作的重要物質基礎。目前，血液鋅原卟啉檢測尚無商品化的室內質控品,研製一種血液鋅原卟啉室內質控品非常必要。
發明內容
本發明的目的是提供一種血液鋅原卟啉全血質控品，所述質控品是以含鋅原卟啉的抗凝全血為溶劑，其中疊氮鈉的終濃度為0.15—0.25μ g/mL，如0.15—0.20 μ g/mL或
0.20—0.25 μ g/mL。在上述質控品中，所述抗凝全血可為EDTA-2K (乙二胺四乙酸二鉀)終濃度為Img/mL的全血。在上述質控品中，所述含鋅原卟啉的抗凝全血為不添加鋅原卟啉的抗凝全血,具體可為離體的正常人(非鉛中毒)的抗凝全血或離體的鉛中毒患者的抗凝全血。本發明還提供了一種血液鋅原卟啉全血質控品的製備方法，包括將含鋅原卟啉的全血進行抗凝處理，獲得抗凝全血；再按500:1的體積比向所述抗凝全血中加入濃度為
0.075—0.125g/L (如0.075—0.lg/L或0.1—0.125g/L)的疊氮鈉水溶液，獲得所述血液鋅原卟啉全血質控品。在上述方法中，所述抗凝處理是按照IOmL:1Omg的比例將所述含鋅原卟啉的全血與EDTA-2K混合。在上述方法中，所述含鋅原卟啉的抗凝全血為不添加鋅原卟啉的抗凝全血，具體可為離體的正常人(非鉛中毒)的全血或離體的鉛中毒患者的全血。
本發明保護上述產品和方法中的任一所述血液鋅原卟啉全血質控品在製備血液鋅原卟啉定量檢測試劑盒中的應用。所述定量檢測的方法具體可為表面螢光法。所述表面螢光法定量檢測血液鋅原卟啉的原理如下:鋅原卟啉具有特徵性螢光光譜，即在425nm入射光的激發下，鋅原卟啉發射波長為594nm的螢光，且該螢光強度與待測樣品中鋅原卟啉的含量呈一定比例關係，通過測定該螢光強度，即可推算出待測樣品中鋅原卟啉的含量。本發明分別以鋅原卟啉的含量較高的鉛中毒患者全血和鋅原卟啉的含量較低的正常人的全血為主要材料，用lmg/mL的EDTA-2K進行抗凝處理後，再添加0.15-0.25 μ g/mL的疊氮鈉製備得到兩個水平的質控品，其在2—8°C下保存30天，經表面螢光法檢測鋅原卟啉的含量，變異係數均小於5%，完全能滿足實驗室精密度的通用要求，按照常用質控規則I3s和22S判斷，30日內未出現失控現象。說明全血中添加0.15-0.25μ g/mL疊氮鈉，可以有效抑制細菌對紅細胞造成的破壞。本發明所提供的質控品可同時監測儀器對正常水平和高水平樣本檢測的精密度檢。本發明所提供的質控品可排除基質效應，來源容易、製作簡便、添加物少、成本低、保存期間穩定性很好，便於短期內的實驗室製備和使用，適用於血液鋅原卟啉測定儀的準確性和精密度監控。
圖1為正常值組血液鋅原卟啉全血質控品的穩定時間觀察結果。其中，橫坐標為檢測日期，縱坐標為檢測結果(單位:μ mol/L)。圖2為高值組血液鋅原卟啉全血質控品的穩定時間觀察結果。其中，橫坐標為檢測日期，縱坐標為檢測結果(單位:μ mol/L)。
具體實施例方式下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。下述實施例中的鋅原卟啉含量測定所使用的儀器為廣東省康達發展公司的ZPP3800型血液鋅原卟啉測定儀，其測定方法為表面螢光法。下述實施例中經2 — 8°C保存的質控品在進行鋅原卟啉含量測定前，先放置30分鐘平衡至室溫並充分混勻。下述實施例中所涉及的實驗用血液為血常規檢驗後剩餘血液並經過深圳市職業病防治院倫理學委員會批准。實施例1、血液鋅原卟啉全血質控品的製備及穩定性評價一、血液鋅原卟啉全血質控品的製備1、高值組血液鋅原卟啉全血質控品的製備採集臨床無溶血、無脂濁、無黃疸、無細菌汙染及其它傳染性指標的慢性鉛中毒患者(經血鉛檢測的結果為5.67 μ mol/L)的全血10ml，用含有10.0mg EDTA-2K的試管收集，充分混勻後，加入20 μ L的濃度為0.lg/L的疊氮鈉水溶液，分裝後2 — 8°C保存，得到高值組血液鋅原卟啉全血質控品。
2、正常值組血液鋅原卟啉全血質控品的製備採集臨床無溶血、無脂濁、無黃疸、無細菌汙染及其它傳染性指標的正常人(經血鉛檢測的結果為0.32 μ mol/L)的全血10ml，用含有10.0mg的EDTA-2K試管收集，充分混勻後，加入20 μ L的濃度為0.lg/L的疊氮鈉水溶液，分裝後2 — 8°C保存，得到正常值組血液鋅原卟啉全血質控品。3、對照全血質控品的製備採集臨床無溶血、無脂濁、無黃疸、無細菌汙染及其它傳染性指標的正常人(經血鉛檢測的結果為0.32 μ mol/L,與步驟2為同一人)的全血10ml，用含有10.0mg的EDTA-2K試管收集，充分混勻後，不分裝、直接2 — 8°C保存，得到對照全血質控品。 二、檢測疊氮鈉對質控品中血液鋅原卟啉含量的影響將步驟一同時製備的、2 — 8°C保存I天的正常值組血液鋅原卟啉全血質控品(L)和對照全血質控品(CK)各取出I支，每支質控品連續取樣10次，分別測定樣品中的鋅原卟啉含量，結果如表I所示。分析表I中CK和L兩組數據的相關性，得出相關係數r=0.955。結果表明，血液鋅原卟啉全血質控品中添加的0.lg/L疊氮鈉對全血中的血液鋅原卟啉含
量無影響。表1、CK和L的血液鋅原卟啉含量檢測結果(單位:μ mol/L)
權利要求
1.一種血液鋅原卟啉全血質控品，其特徵在於:所述質控品是以含鋅原卟啉的抗凝全血為溶劑，其中疊氮鈉的終濃度為0.15—0.25μ g/mL。
2.根據權利要求1所述的質控品，其特徵在於:所述抗凝全血為EDTA-2K終濃度為lmg/mL的全血。
3.根據權利要求1或2所述的質控品，其特徵在於:所述含鋅原卟啉的抗凝全血為不添加鋅原卟啉的抗凝全血。
4.根據權利要求1一3中任一所述的質控品，其特徵在於:所述含鋅原卟啉的抗凝全血為離體的正常人的抗凝全血或離體的鉛中毒患者的抗凝全血。
5.一種血液鋅原卟啉全血質控品的製備方法，包括將離體的含鋅原卟啉的全血進行抗凝處理，獲得抗凝全血；再按500:1的體積比向所述抗凝全血中加入濃度為0.075—0.125g/L的疊氮鈉水溶液，獲得所述血液鋅原卟啉全血質控品。
6.根據權利要求5所述的方法，其特徵在於:所述抗凝處理是按照IOmL:1Omg的比例將所述離體的含鋅原卟啉的全血與EDTA-2K混合。
7.根據權利要求5或6所述的方法，其特徵在於:所述含鋅原卟啉的全血為不添加鋅原卟啉的全血。
8.根據權利要求4一7中任一所述的方法，其特徵在於:所述含鋅原卟啉的全血為離體的正常人的全血或離體的鉛中毒患者的全血。
9.權利要求1一4或5—8中的任一所述血液鋅原卟啉全血質控品在製備血液鋅原卟啉定量檢測試劑盒中的應用。
10.根據權利要求9所述的應用，其特徵在於:所述定量檢測的方法為表面螢光法。
全文摘要
本發明公開了一種血液鋅原卟啉全血質控品及其製備方法與應用。本發明所提供的質控品是以離體的非鉛中毒的正常人或鉛中毒患者的抗凝全血為溶劑，其中疊氮鈉的終濃度為0.15—0.25μg/mL。所述抗凝全血為EDTA-2K(乙二胺四乙酸二鉀)終濃度為1mg/mL的全血。本發明所提供的質控品可同時監測儀器對正常水平和高水平樣本檢測的精密度檢。本發明所提供的血液鋅原卟啉全血質控品可排除基質效應，來源容易、製作簡便、添加物少、成本低、保存期間穩定性很好，便於短期內的實驗室製備和使用，適用於血液鋅原卟啉測定儀的準確性和精密度監控。
文檔編號G01N21/64GK103196727SQ20131012065
公開日2013年7月10日 申請日期2013年4月9日 優先權日2013年4月9日
發明者王佃鵬, 湯海燕, 高燕華, 羅斌, 張豔芳, 李培茂, 王金林, 楊祥麗, 高朝賢 申請人:深圳市職業病防治院