半夏厚樸中藥製劑在治療和/或預防反流性咽喉炎中的用途的製作方法
2023-12-08 15:19:36 3
本發明屬於中藥技術領域，具體涉及一種半夏厚樸中藥製劑在治療和/或預防反流性咽喉炎中的用途。
背景技術：
半夏，本品選用天南星科植物半夏Pinelliaternata(Thunb.)Breit.的乾燥塊莖。具有燥溼化痰，降逆止嘔，消痞散結的功效。用於溼痰寒痰，咳喘痰多，痰飲眩悸，風痰眩暈，痰厥頭痛，嘔吐反胃，胸脘痞悶，梅核氣；外治癰腫痰核。
半夏的根莖洗淨，除去外皮及鬚根，曬乾，為生半夏。法半夏、姜半夏和清半夏是生半夏的炮製加工品。法半夏一般用生石灰、甘草汁炮製後使用。具體的炮製方法如下：取淨半夏，大小分開，用水浸泡至內無幹心，取出；另取甘草適量，加水煎煮二次，合併煎液，倒入用適量水製成的石灰液中，攪勻，加入上述已浸透的半夏，浸泡，每日攪拌1～2次，並保持浸液pH值12以上，至剖面黃色均勻，口嘗微有麻舌感時，取出，洗淨，陰乾或烘乾，即得。每100kg淨半夏,用甘草15kg、生石灰10kg。
清半夏的炮製方法：取淨半夏，大小分開，用8％白礬溶液浸泡至內無幹心，口嘗微有麻舌感，取出，洗淨，切厚片，乾燥。每100kg半夏，用白礬20kg。本品為橢圓形、類圓形或不規則片狀，切面淡灰色至灰白色，可見灰白色點狀或短線狀維管束跡，有的殘留栓皮處下方顯淡紫紅色斑紋。質脆，易折斷，斷面略呈角質樣。氣微，味微澀、微有麻舌感。
姜半夏的炮製方法：取淨半夏，大小分開，用水浸泡至內無幹心時；另取生薑切片煎湯，加白礬與半夏共煮透，取出，晾至半乾，切薄片，乾燥。每100kg半夏，用生薑25kg、白礬12.5kg。本品為片狀、不規則顆粒狀或類球形。表面棕色至棕褐色。質硬脆，斷面淡黃棕色，常具角質樣光澤。氣微香，味淡、微有麻舌感，嚼之略粘牙。
厚樸，本品為木蘭科植物厚樸Magnolia officinalisRehd.et Wils.或凹葉厚樸Magnolia officinalisRehd.etWils.var.bilobaRehd.et Wils.的乾燥幹皮、根皮及枝皮。具有燥溼消痰，下氣除滿的功效。用於溼滯傷中，脘痞吐瀉，食積氣滯，腹脹便秘，痰飲喘咳。
生薑，本品為姜科植物姜ZingiberofficinaleRosc.的新鮮根莖。具有解表散寒，溫中止嘔，化痰止咳，解魚蟹毒的功效。用於風寒感冒，胃寒嘔吐，寒痰咳嗽，魚蟹中毒。
蘇葉，本品為唇形科植物紫蘇Perillafrutescens(L.)Britt.的乾燥葉(或帶嫩枝)。具有解表散寒，行氣和胃的功效。用於風寒感冒，咳嗽嘔惡，妊娠嘔吐，魚蟹中毒。
反流性咽喉炎又被稱作咽喉反流(laryngopharyngeal reflux，LPR)是胃內容物反流至上食管括約肌(upper esophageal sphincter，UES)以上的咽喉部位造成的組織損傷，引起一系列症狀和體徵的總稱。咽喉反流被認為是和反流相關的慢性咽喉炎，是胃食管反流性疾病(gastroesophageal reflux disease，GERD)在消化道以外的一種症狀。
目前認為抗反流保護屏障的破壞是LPR發生的主要原因(反流理論)，由於咽喉黏膜缺乏如食管黏膜那樣的抗酸保護機制，對酸刺激敏感，因此多種反流成分可對咽喉黏膜造成直接損傷；另一方面，由於咽喉和食管存在共同的反射中樞和通路，遠端食管在胃酸刺激下可通過神經反射引起支氣管痙攣和黏液分泌，導致咳嗽和反覆的清喉動作(反射理論)。
反流性食管炎(RE)是由胃、十二指腸內容物反流入食管引起的食管炎症性病變，內鏡下表現為食管黏膜的破損，即食管糜爛和(或)食管潰瘍。其主要臨床表現為燒心、胸痛、反酸和吞咽困難。
目前臨床上對該疾病的治療，一般以抑酸劑(質子泵抑制劑)治療為主，但是往往需要大劑量、長療程，且治療效果欠佳、且僅對部分反流性咽喉炎的患者有效；而且，國內外市場還沒有明確用於治療反流性咽喉炎的中藥組合物。
鑑此，臨床迫切需要療效明確、毒副作用小、服用方便的藥物，以滿足市場和患者之需。
技術實現要素：
本發明旨在提供一種半夏厚樸中藥製劑用於製備治療和/或預防反流性咽喉炎藥物的用途，該中藥組合物選用藥材配伍相宜，符合中醫藥及現代醫學研究理論，本發明中藥複方中藥提取物組合物具有行氣散結，降逆化痰之功效，治療反流性咽喉炎效果好且安全無毒副作用。
為了達到上述目的，本發明採用以下技術方案：
一種半夏厚樸中藥製劑用於製備治療和/或預防反流性咽喉炎藥物的用途，所述的中藥組合物包括以下重量份的原料藥：制半夏10-12份、茯苓12-15份、厚樸9-12份、生薑6-15的和蘇葉6-10份。所述制半夏為姜半夏、法半夏或清半夏。所述的中藥組合物用於製備治療和/或預防反流性咽喉炎藥物的用途，所述的中藥組合物含有重量百分比的下列活性物質：0.27-0.35％的總酸(以琥珀酸計)、2.5-3.5％的厚樸酚與和厚樸酚和0.073-0.13％的6-姜辣素。
優選的，一種半夏厚樸中藥製劑用於製備治療和/或預防反流性咽喉炎藥物的用途，所述的中藥組合物包括以下重量份的原料藥，其有效成分的原料組成按重量配比為：半夏12份、厚樸9份、茯苓12份、生薑9份、蘇葉6份。
優選的，一種半夏厚樸中藥製劑用於製備治療和/或預防反流性咽喉炎藥物的用途，所述的中藥組合物包括以下重量份的原料藥：制半夏11份、茯苓13份、厚樸10份、生薑10份和蘇葉8份。所述的中藥組合物含有重量百分比的下列活性物質：0.31～0.34％的總酸(以琥珀酸計)、2.8～3.4％的厚樸酚與和厚樸酚、0.082～0.095％的6-姜辣素。
一種半夏厚樸中藥製劑用於製備治療和/或預防反流性咽喉炎藥物的用途，所述的中藥組合物的製備方法為：
取制半夏、茯苓、厚樸、生薑、蘇葉，加水煎煮提取2次，第一次加10倍量水，提取1.5小時，第二次加8倍量水，提取1小時，合併提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.10-1.15(50℃)的清膏，即得。
一種半夏厚樸中藥製劑用於製備治療和/或預防反流性咽喉炎藥物的用途，所述的中藥組合物的製備方法還可以為：
(1)取制半夏、茯苓、厚樸、生薑、蘇葉，粉碎得粗粉；
(2)將粉末裝入超臨界CO2萃取裝置萃取釜，待製冷裝置與萃取釜和分離釜加溫裝置正常工作後，打開壓縮泵加壓到所需固定分離壓力為20～25MPa，調整CO2流量為10～13kg/h，萃取溫度為35～60℃，萃取時間為2h～4h，循環萃取2～3次，即得。
優選的，一種半夏厚樸中藥製劑用於製備治療和/或預防反流性咽喉炎藥物的用途，所述的中藥組合物的製備方法為：
(1)取制半夏、茯苓、厚樸、生薑、蘇葉，粉碎得粗粉；
(2)將粉末裝入超臨界CO2萃取裝置萃取釜，待製冷裝置與萃取釜和分離釜加溫裝置正常工作後，打開壓縮泵加壓到所需固定分離壓力為22MPa，調整CO2流量為10kg/h，萃取溫度為50℃，萃取時間為4h，循環萃取2次，即得。
一種治療和/或預防反流性咽喉炎藥物的方法，將本發明的中藥組合物給藥於有需要的患者，任選一種或多種藥學上可接受的輔料一起給藥。所述的輔料選自微晶纖維素、粉末狀纖維素、甘露糖醇、澱粉、乳糖、明膠、甲基纖維素、糊精、預膠化澱粉、微粉矽膠、羥丙甲基纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉、羧甲基澱粉鈉、聚乙二醇、木糖醇、乳糖醇、葡萄糖、蔗糖、甜菊素、山梨酸鉀、甘氨酸、甘露醇、酒石酸、二氧化矽、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂等。
優選的，一種治療和/或預防反流性咽喉炎藥物的方法，將本發明的中藥組合物製成片劑、膠囊、顆粒劑、軟膠囊、口服液或滴丸劑給藥於有需要的患者。
其中，一種治療和/或預防反流性咽喉炎藥物的方法，將本發明中藥組合物製成軟膠囊劑的製備方法為：
(1)取原料配方的制半夏、茯苓、厚樸、生薑、蘇葉，粉碎得粗粉，然後將粉末裝入超臨界CO2萃取裝置萃取釜，待製冷裝置與萃取釜和分離釜加溫裝置正常工作後，打開壓縮泵加壓到所需固定分離壓力為20～25MPa，調整CO2流量為10～13kg/h，萃取溫度為35～60℃，萃取時間為2h～4h，循環萃取2～3次，即得本發明中藥組合物提取物油狀液體；
(2)取純化水通入化膠罐內，加熱至50℃-60℃，加入防腐劑攪拌至全溶，加入明膠、甘油溶解後啟動真空泵脫泡，加入色素，繼續攪拌至均勻，檢驗合格後出膠，在保溫桶中放置供製備軟膠囊使用；
(3)另取製得的油狀液體，加入1～1.5倍量的PEG400，混合均勻，得軟膠囊內容物備用；
(4)將上述軟膠囊內容物壓製成軟膠囊，即得。
一種治療和/或預防反流性咽喉炎藥物的方法，將本發明中藥組合物製成滴丸劑的製備方法為：
(1)取制半夏、茯苓、厚樸、生薑、蘇葉，加水煎煮提取2次，第一次加10倍量水，提取1.5小時，第二次加8倍量水，提取1小時，合併提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15-1.20(50℃)的清膏；
(2)取製得的清膏，加入乙醇使含醇量達到50～70％，攪拌均勻，靜置24小時，濾過，濾液回收乙醇並濃縮至至相對密度為1.25-1.30(50℃)的稠膏
(3)減壓乾燥，得幹浸膏，粉碎，過100目篩，備用；
(4)另取2～3倍量的聚乙二醇6000加熱熔融，攪拌下加入揮髮油和前述浸膏粉，攪拌均勻，在保溫80-85℃的條件下，控制滴速，將混懸物滴加至二甲基矽油的冷卻液中，待冷凝完全，收集滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得。
優選的，一種治療和/或預防反流性咽喉炎藥物的方法，將本發明中藥組合物製成滴丸劑的製備方法為：
(1)取制半夏、茯苓、厚樸、生薑、蘇葉，加水煎煮提取2次，第一次加10倍量水，提取1.5小時，第二次加8倍量水，提取1小時，合併提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.15-1.20(50℃)的清膏；
(2)取製得的清膏，加入乙醇使含醇量達到60％，攪拌均勻，靜置24小時，濾過，濾液回收乙醇並濃縮至至相對密度為1.25-1.30(50℃)的稠膏
(3)減壓乾燥，得幹浸膏，粉碎，過100目篩，備用；
(4)另取2倍量的聚乙二醇6000加熱熔融，攪拌下加入揮髮油和前述浸膏粉，攪拌均勻，在保溫80-85℃的條件下，控制滴速，將混懸物滴加至二甲基矽油的冷卻液中，待冷凝完全，收集滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得。
本發明具有以下優點：
(1)本發明中藥組合物標本兼治，治療返流性咽喉炎效果明顯。
(2)本發明中藥組合物選用優質中藥材製成，成本低廉且配伍相宜，符合中醫藥及現代醫學研究理論，並利用現代醫藥製藥技術製成相關劑型，安全毒副作用低。
(3)本發明中藥組合物與模型對照組相比，口服灌胃能明顯減輕咽炎動物模型大鼠咽後壁局部病損，對咽部黏膜充血、腫脹、潰瘍、壞死均有明顯的保護作用。
(4)本發明中藥組合物與模型對照組相比，對胃排空、腸推進具有顯著的促進作用。
(5)本發明中藥組合物對於反流性咽喉炎有著很好的臨床治療效果，顯效率為60.3％，總有效率為87.5％。
(6)本發明中藥組合物製備工藝簡單易操作，活性物質含量高。
(7)本發明中藥組合物製劑製備簡單，穩定性好，耐儲存，易於臨床應用。
具體實施方式
以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發明的上述內容作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發明上述主題的範圍僅限於以下實施例。
實施例1本發明中藥組合物的原料配方
組合物1：姜半夏1000g，茯苓1200g，厚樸900g，生薑600g，蘇葉600g；
組合物2：法半夏1200g，茯苓1500g，厚樸1200g，生薑1500g，蘇葉1000g；
組合物3：清半夏1200g，茯苓1300g，厚樸1000g，生薑1000g，蘇葉800g；
組合物4：姜半夏1200g，茯苓1200g，厚樸900g，生薑600g，蘇葉600g；
組合物5：姜半夏1000g，茯苓1500g，厚樸1200g，生薑1500g，蘇葉1000g；
組合物6：法半夏1200g，茯苓1500g，厚樸900g，生薑1500g，蘇葉1000g；
組合物7：法半夏1000g，茯苓1200g，厚樸1200g，生薑600g，蘇葉600g；
組合物8：清半夏1200g，茯苓1500g，厚樸1200g，生薑600g，蘇葉1000g；
組合物9：清半夏1200g，茯苓1200g，厚樸900g，生薑1500g，蘇葉600g；
實施例2本發明中藥組合物提取物的製備及活性物質的含量
取原料配方的制半夏、茯苓、厚樸、生薑、蘇葉，加水煎煮提取2次，第一次加10倍量水，提取1.5小時，第二次加8倍量水，提取1小時，合併提取液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.10-1.15(50℃)的清膏，即為本發明中藥組合物提取物。
所述複方中藥組合物提取物中含有下列活性物質：總酸(以琥珀酸計)、厚樸酚與和厚樸酚、6-姜辣素(C17H26O4)，結果見表1，測定方法依照《中國藥典》(2010版)第一部的方法。
表1本發明中藥組合物活性物質含量
實施例3本發明中藥組合物提取物的製備及活性物質的含量
本試驗是對超臨界CO2萃取設備的工藝參數進行綜合研究，尋找各種萃取條件(萃取溫度、壓力、時間、次數和CO2流量)對萃取量及有效物質含量的影響，經考察萃取次數影響較小(萃取次數2～3次，2次較優)，萃取壓力、萃取溫度、萃取時間和CO2流量是主要的影響因素，因此以總酸和提取物的得率為指標用正交試驗法考察四種因素對提取效果的影響。考察因素及水平見表2。
表2本發明中藥組合物提取工藝考察因素水平表
試驗方法稱取清半夏1100g，茯苓1300g，厚樸1000g，生薑1000g，蘇葉800g，粉碎成粗粉，取原料配方的制半夏、茯苓、厚樸、生薑、蘇葉，粉碎得粗粉，然後將粉末裝入超臨界CO2萃取裝置萃取釜，待製冷裝置與萃取釜和分離釜加溫裝置正常工作後，打開壓縮泵加壓到所需固定分離壓力，調整CO2流量為，調節萃取溫度，循環萃取2次，按正交試驗表3的要求萃取，平行三份，合併提取液。
表3本發明中藥組合物提取工藝考察正交表
所述複方中藥組合物提取物中含有下列活性物質：總酸(以琥珀酸計)、厚樸酚與和厚樸酚、6-姜辣素(C17H26O4)，測定方法依照《中國藥典》(2010版)第一部的方法。
表4總酸含量方差分析表
F0.01(2，18)＝6.01F0.05(2，18)＝3.55
由表4總酸含量方差分析的結果可知：萃取壓力、萃取時間對提取效果影響最大為極顯著性因素，萃取溫度為顯著性因素,CO2的流量的影響因素最小，為非顯著性因素；同時參考表3萃取得率測定結果，確定最佳提取工藝為A2B2C3D1，即萃取壓力為22MPa，萃取溫度為50℃，萃取時間為4h，調整CO2流量為10kg/h。
根據上述優選工藝，製得的本發明中藥組合物的活性物質含量如下表5所示。
表5本發明中藥組合物活性物質含量
實施例4本發明中藥組合物顆粒劑的製備
根據實施例2的製備方法製得的清膏，加1.1～1.5倍重量份的糊精及甜菊素適量，混勻，製成顆粒，乾燥，即得。
實施例5本發明中藥組合物的口服液製備
取實施例2得到的清膏，加入乙醇使含醇量達50～70％，攪拌均勻，靜置24小時，濾過，濾液回收乙醇至無醇味，另加入單糖漿、吐溫80，山梨酸鉀適量，加水至2000ml，攪勻，濾過，灌裝，滅菌，即得。
實施例6本發明中藥組合物的滴丸製備
處方1：姜半夏1000g，茯苓1200g，厚樸900g，生薑600g，蘇葉600g；
取實施例2得到的清膏，加入乙醇使含醇量達到50％，攪拌均勻，靜置24小時，濾過，濾液回收乙醇並濃縮至至相對密度為1.25-1.30(50℃)的稠膏，減壓乾燥，得幹浸膏，粉碎，過100目篩，備用；另取2倍量的聚乙二醇6000加熱熔融，攪拌下加入前述浸膏粉，攪拌均勻，在保溫80-85℃的條件下，控制滴速，將混懸物滴加至二甲基矽油的冷卻液中，待冷凝完全，收集滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得。
處方2：法半夏1200g，茯苓1500g，厚樸1200g，生薑1500g，蘇葉1000g；
取實施例2得到的清膏，加入乙醇使含醇量達到70％，攪拌均勻，靜置24小時，濾過，濾液回收乙醇並濃縮至至相對密度為1.25-1.30(50℃)的稠膏，減壓乾燥，得幹浸膏，粉碎，過100目篩，備用；另取3倍量的聚乙二醇6000加熱熔融，攪拌下加入前述浸膏粉，攪拌均勻，在保溫80-85℃的條件下，控制滴速，將混懸物滴加至二甲基矽油的冷卻液中，待冷凝完全，收集滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得。
處方3：清半夏1100g，茯苓1300g，厚樸1000g，生薑1000g，蘇葉800g；
取實施例2得到的清膏，加入乙醇使含醇量達到60％，攪拌均勻，靜置24小時，濾過，濾液回收乙醇並濃縮至至相對密度為1.25-1.30(50℃)的稠膏，減壓乾燥，得幹浸膏，粉碎，過100目篩，備用；另取2倍量的聚乙二醇6000加熱熔融，攪拌下加入前述浸膏粉，攪拌均勻，在保溫80-85℃的條件下，控制滴速，將混懸物滴加至二甲基矽油的冷卻液中，待冷凝完全，收集滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得。
實施例7本發明中藥組合物的軟膠囊的製備
取純化水通入化膠罐內，加熱至50℃-60℃，加入防腐劑攪拌至全溶，加入明膠、甘油溶解後啟動真空泵脫泡，加入色素，繼續攪拌至均勻，檢驗合格後出膠，在保溫桶中放置供製備軟膠囊使用；另取實施例3製得的提取物，加入1～1.5倍量的PEG400，混合均勻，得軟膠囊內容物備用；將上述內容物壓製成軟膠囊，即得。
實施例8本發明中藥組合物厚樸酚、和厚樸酚的含量測定
測定方法：採用高效液相色譜進行測定
色譜條件：色譜柱採用DIKMA，Diamonsil(2)C18(5μm 250×4.6mm)反相色譜柱；流動相：甲醇-水進行梯度洗脫：0～10min，20％～50％甲醇；10～30min，50％～80％甲醇；30～40min，80％～100％甲醇；檢測波長：294nm；柱溫：35℃。
對照品溶液的製備：取厚樸酚對照品、和厚樸酚對照品適量，精密稱定，加甲醇分別製成每lmL含厚樸酚30μg、和厚樸酚30μg的溶液，即得。
供試品溶液的製備:取本發明中藥組合物顆粒劑研碎，過篩(過藥典三號篩，50目)，得粉末。精密稱取約0.1g粉末，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加甲醇10mL，稱定重量，超聲60分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
測定法：分別精密吸取上述兩種對照品溶液各與供試品溶液注入液相色譜儀測定，按照外標法計算含量，即得。
實施例9本發明中藥組合物對氨水噴霧法致大鼠咽炎模型的影響
試驗目的：
通過大鼠氨水噴霧致咽炎試驗，觀察本發明中藥組合物對模型動物咽炎症狀、組織學改變的作用。
試驗動物、試劑及儀器：
動物Wistar大鼠，雄性，190～200g；受試藥物為按照實施例2所得的相對密度為1.20(50℃)的浸膏；試劑包括：氨水(濃度25％-28％)，甲醛溶液等。
實驗儀器包括：喉頭噴霧器(型號：L56--03，上海市嘉定區醫療設備廠生產)；精密分析天平；血球計數器(型號：MEK-6318K)以及病理相關儀器(包括：全自動脫水機、石蠟包埋機、輪轉式切片機、全自動染色機、顯微鏡及圖像分析系統，等)。
本發明中藥組合物和劑量設置：以實施例2方法製備的組合物1浸膏、組合物2浸膏、組合物3浸膏為處理藥物，劑量為0.5g浸膏/Kg體重(約相當於臨床人用量的8倍)。
給藥途徑及體積：均為口服灌胃給藥，10mL/Kg體重，空白對照、模型對照組給同體積蒸餾水。
分組給藥：將50隻Wista大鼠隨機分為空白對照組、模型對照組、組合物1組、組合物2組、組合物3組共5組，各組均為10隻動物。造模當天開始給藥，大、小劑量組採用灌胃給藥，一次/日，共給藥7天，空白對照和模型對照組給予相同體積蒸餾水。
造模：除空白對照組外，其餘各組動物用4.2％氨水噴其咽部1次，每次用喉頭噴霧器噴3下，連續噴霧3日，空白對照組採用蒸餾水噴其咽部。
第8d各組動物處死，取下咽部黏膜(用大頭針固定在薄紙板上)作病理切片觀察。
數據統計：
病理變化程度採用評分方法：①潰瘍深層化；②咽後壁深層出現局灶性壞死；③淋巴濾泡腫大，突出咽壁；④黏液腺囊腫形成；⑤一些共性的病理損傷情況，以上項目各組動物中有一個動物出現一項變化得1分，分項累計得分為該組動物該項的得分(結果見表2)。
病理學觀察結果：
空白對照組大鼠：咽後壁結構顯示無任何損害性變化。咽後壁三段鼻咽部、口咽部、喉咽部均顯示正常結構。鼻咽部和喉咽部被覆假復層纖毛柱狀上皮，口咽部被覆未角化復層扁層上皮。固有層內分布有一定數量黏液腺，黏膜下層較薄、與固有層界限不清。
模型組大鼠：咽後壁結構顯示明顯損害性變化。一般共性的病理損傷情況如下：所有大鼠均發現咽後壁黏膜上皮有多處淺層潰瘍(上皮1/3壞死、脫落)，潰瘍周圍組織腫脹，固有層和黏膜下層血管擴張充血、炎細胞浸潤，上皮和肌層之間距離增大；所有大鼠均發現咽後壁上皮口咽部比例增大、出現一定程度的角化現象；所有大鼠均發現咽後壁上皮下黏液腺增生，增生的黏液腺可擴展至肌層。其他病理變化詳見表2。
組合物1組大鼠：咽後壁結構顯示某些損害性變化，但與模型組大鼠比較，損害性變化明顯減輕；咽後壁三段鼻咽部、口咽部、喉咽部均未見明顯病理改變；鼻咽部和喉咽部被覆假復層纖毛柱狀上皮，有3隻動物出現一處黏膜上皮淺層潰瘍；多數動物口咽部被覆角化復層扁層上皮。固有層內黏液腺多處擴展至肌層。有3隻動物出現潰瘍深層化，未見咽後壁深層局灶性壞死、淋巴濾泡腫大突出咽壁、黏液腺囊腫形成等病理改變。
組合物2組大鼠：咽後壁結構顯示某些損害性變化，但與模型組大鼠比較，損害性變化明顯減輕；咽後壁三段鼻咽部、口咽部、喉咽部均未見明顯病理改變；鼻咽部和喉咽部被覆假復層纖毛柱狀上皮，有3隻動物出現一處黏膜上皮淺層潰瘍；多數動物口咽部被覆角化復層扁層上皮。固有層內黏液腺多處擴展至肌層。有2隻動物出現潰瘍深層化，未見咽後壁深層局灶性壞死、淋巴濾泡腫大突出咽壁、黏液腺囊腫形成等病理改變。詳見表2。
組合物3組大鼠：咽後壁結構顯示某些損害性變化，但與模型組大鼠比較，損害性變化明顯減輕；咽後壁三段鼻咽部、口咽部、喉咽部均未見明顯病理改變；鼻咽部和喉咽部被覆假復層纖毛柱狀上皮，有1隻動物出現一處黏膜上皮淺層潰瘍；多數動物口咽部被覆角化復層扁層上皮。固有層內黏液腺多處擴展至肌層。有1隻動物出現潰瘍深層化，未見咽後壁深層局灶性壞死、淋巴濾泡腫大突出咽壁、黏液腺囊腫形成等病理改變。詳見表6。
表6本發明中藥組合物對模型動物咽後壁病理變化評分表
結果表明：分別從共同性變化，潰瘍深層化，局灶性壞死，淋巴濾泡腫大，黏液腺囊腫方面對咽後壁組織損傷程度進行評分。結果表明與空白組相比，模型大鼠咽後壁組織嚴重損傷；與模型組相比，組合物1、組合物2、組合物3咽後壁損傷明顯減輕，能明顯減輕咽炎動物模型咽後壁局部病損，對咽部黏膜充血、腫脹、潰瘍、壞死均有明顯的保護作用。其中組合物3效果最優。
實施例10本發明中藥組合物對正常小鼠胃排空、腸推進的影響
本發明中藥組合物和劑量設置：以實施例2方法製備的組合物1浸膏、組合物2浸膏、組合物3浸膏為處理藥物，劑量為0.5g浸膏/Kg體重(約相當於臨床人用量的8倍)。生理鹽水組灌服生理鹽水0.3mL上述各組小鼠每天灌胃1次,連續6天。
動物分組：取昆明小鼠60隻(體重20-25g)，隨機分成對照組(生理鹽水組)，組合物1組，組合物2組，組合物3組，每組15隻。
動物處理：第7天給藥前禁食12小時，給藥90分鐘後，每隻小鼠以20g/L藍色葡聚糖-2000溶液0.2ml灌胃，20分鐘後頸椎脫臼處死小鼠，剖腹取胃腸，上端在賁門處結紮，下端在幽門處結紮，沿胃大彎側將胃剖開，將胃內色素殘留物充分洗於4ml去離子水中，3500轉/min離心，取上清液，用分光光度計在620nm測吸光度，其值作為胃內色素殘留量，20g/L藍色葡聚糖-2000溶液0.2ml，稀釋至4ml去離子水中，在620nm測吸光度，其值作為基數值，以樣本的吸光度與基數的百分比作為胃內色素殘留率，同時量取幽門括約肌至色素最前段及至盲腸的距離，以二者之比作為小腸推進率。
統計學處理：將不合理數據捨去後用SPSS 12.0統計軟體進行方差法分析，比較組間差異。實驗結果以均數±標準(s)差表示，結果見下表7。
表7本發明中藥組合物對正常小鼠胃排空、腸推進的影響
##：對照組比較，P<0.01；#：與對照組比較P<0.05
結論：從上表分析可以看出,本發明中藥組合物對胃排空、腸推進率均有增強作用。
與對照組(生理鹽水組)比較，組合物1、組合物2、組合物3其胃殘留率及腸推進率均有顯著性差異(P<0.01)，說明本發明中藥組合物對胃排空、腸推進具有促進作用。
實施例11本發明中藥組合物對多巴胺抑制小鼠胃排空、腸推進的影響
本發明中藥組合物和劑量設置：以實施例2方法製備的組合物1浸膏、組合物2浸膏、組合物3浸膏為處理藥物，劑量為0.5g浸膏/Kg體重(約相當於臨床人用量的8倍)。生理鹽水組灌服生理鹽水0.3mL上述各組小鼠每天灌胃1次,連續6天。
動物分組：取上述小鼠隨機分成5組，即生理鹽水組，模型組(多巴胺組)，組合物1、組合物2、組合物3加多巴胺組，每組15隻。
給藥方法：模型組(多巴胺組)給藥同生理鹽水組，動物處理第7天給藥前禁食12小時，給藥75min後，除生理鹽水組外，其餘組均腹腔注射多巴胺0.02mg，15min後每組以20g/L藍色葡聚糖-2000溶液0.2ml灌胃，20分鐘後頸椎脫臼處死小鼠，剖腹取胃腸，上端在賁門處結紮，下端在幽門處結紮，沿胃大彎側將胃剖開，將胃內色素殘留物充分洗於4ml去離子水中，3500轉/min離心，取上清液，用分光光度計在620nm測吸光度，其值作為胃內色素殘留量，20g/L藍色葡聚糖-2000溶液0.2ml，稀釋至4ml去離子水中，在620nm測吸光度，其值作為基數值，以樣本的吸光度與基數的百分比作為胃內色素殘留率，同時量取幽門括約肌至色素最前段及至盲腸的距離，以二者之比作為小腸推進率。
統計學處理：將不合理數據捨去後用SPSS 12.0統計軟體進行方差法分析，比較組間差異。實驗結果以均數±標準(s)差表示，結果見下表8。
表8本發明中藥組合物對多巴胺抑制小鼠胃排空模型的影響(±s)
**：與模型組比較p<0.01，*：與模型組比較P<0.05；##:對照組比較,P<0.01；#：與對照組比較，P<0.05
結論：從上表分析可以看出，模型組(多巴胺組)與生理鹽水組比較，胃殘留率及腸推進率相比較有非常顯著性差異(P<0.01)，多巴胺能使胃排空，腸推進明顯降低；本發明中藥組合物能對抗多巴胺對小鼠胃排空、腸推進的抑制作用，由此可見，本發明中藥組合物可能是通過抑制多巴胺受體而發揮促胃腸動力作用的。
實施例12本發明中藥組合物的臨床應用
選擇確診為LPR患者。診斷與入選標準為：經耳鼻喉科常規體檢和喉鏡、胃鏡檢查符合胃食管反流，確診LPR且幽門螺旋桿菌陰性者，一般具有以下症狀或部分症狀①泛酸、燒心、反胃等症狀；②咽喉部主觀症狀表現為咽喉堵塞感或咽部異物感、咽幹、咽癢、微痛、乾咳等；檢查:咽部黏膜充血，或咽側索肥厚、咽後壁淋巴濾泡增生，有少量黏性分泌物附著，或咽黏膜乾燥、萎縮等。③病程超過2個月。④至少2周內未服用其他抑制胃酸和影響胃腸道功能的中西藥物。排除標準：癌症、妊娠、藥物、過敏
治療方案：服用本發明中藥組合物3(製成湯劑)，早晚各1次，每次5g，30天為1個療程，連續服用2個療程。服藥期間患者均遵醫囑改變生活方式，如：禁菸、減少飲酒、刺激辛辣飲食，避免餐後立即臥床和睡前進食，保證充足睡眠，合理膳食營養等。
療效評定標準：
顯效:治療後患者咽痛、幹、癢、燒灼感、聲嘶等咽部症狀消失，反酸、喛氣、燒心等消化道症狀完全或明顯緩解，喉鏡下見黏膜充血、組織，水腫消失，潰瘍癒合；
有效:患者咽喉部症狀明顯改善，鏡下可見黏膜充血及水腫症狀明顯減輕、潰瘍面積縮小，消化道症狀部分緩解；
無效:患者咽部、消化道症狀及鏡下病理檢查均未見明顯改善甚至惡化。總有效率＝(顯效+有效)/總例數×100％
結果：本研究中，臨床實驗組共收集40例患者，顯效為60.3％，總有效率為87.5％，由此可見，本發明中藥組合物對於反流性咽喉炎有著很好的臨床治療效。
李某，男，56歲，近兩月逐漸出現咽痛、幹、癢、燒灼感、聲嘶等咽部症狀，喉鏡下見黏膜充血，並伴有反酸、喛氣、燒心等消化道症狀，經診斷為反流性咽喉炎，指導其服用本發明中藥組合物3，口服，每日2次，早晚各1次，每次5克，連續服用21天後，症狀及體徵明顯減輕，患者咽喉部症狀明顯改善，鏡下可見黏膜充血及水腫症狀明顯減輕，喛氣、燒心等消化道症狀明顯緩解。
張某，女，36歲，患者自述多年來存在慢性咳嗽、聲音嘶啞、咽異物感、咽癢、頻繁清嗓、咽黏液增多等症狀，服用多種藥物均未根除，喉鏡下見黏膜充血現象，經診斷為反流性咽喉炎。指導其服用本發明中藥組合物3，口服，每日2次，早晚各1次，每次5克，連續服用2個月後，症狀及體徵明顯減輕，患者咽喉部症狀明顯改善，鏡下可見黏膜充血明顯減輕。