Hcvns3蛋白酶抑制劑與幹擾素和利巴韋林的組合的製作方法

2023-10-07 16:18:39 1

專利名稱：Hcv ns3蛋白酶抑制劑與幹擾素和利巴韋林的組合的製作方法
技術領域：
本發明涉及治療組合，其包括如本文所述的化合物(1)、幹擾素α和利巴韋林。本發明還涉及使用此類治療組合治療患者的HCV感染或緩解其一種或多種症狀的方法。本發明還提供包括本發明治療組合的試 劑盒。
現有技術C型肝炎病毒(HCV)感染為全球性人類健康問題，僅在美國每年即有約150，000 例新報告病例。HCV為單股RNA病毒，其為在大多數非Α、非B型輸血後及移植後肝炎病例中的鑑定出的病原體，還為急性散發性肝炎的常見原因。估計超過50%感染HCV的患者變成慢性感染，且其中20%在20年內發展成肝硬化。已證實多種幹擾素(特別是α-幹擾素)可用於治療慢性HCV:例如幹擾素-α -2a ( ROFERON _A)、幹擾素-α -2b ( INTRON _A)、複合幹擾素 (INFERGEN ),以及這些和其它幹擾素的聚乙二醇化形式，如聚乙二醇化幹擾素-α -2a (PEGASYS )與聚乙二醇化幹擾素-α -2b (PEG- INTRON )。大多數患者對幹擾素_ α治療沒有反應，而在有反應者中，在中斷治療後6個月內存在高復發率(Liang 等人，J. Med. Virol. 40 :69，1993)。已在臨床試驗中顯示，利巴韋林(一種對抗多種RNA與DNA病毒的具廣譜活性的鳥嘌呤核苷類似物)當與幹擾素-α組合使用時，可有效對抗慢性HCV感染(參見例如 Poynard 等人，Lancet 352 1426-1432，1998 ；Reichard 等人，Lancet351 :83_87，1998)， 且已證實下列組合療法可用於治療HCV :REBETRON (幹擾素- α -2b加利巴韋林， Schering-Plough)、PEGASYS RBV (聚乙二醇化幹擾素_ α _2a加利巴韋林組合療法，Roche)；也參見 Manns 等人，Lancet 358 :958_965 (2001)和 Fried 等人，2002，N. Engl. J. Med. 347 :975-982。然而，即使使用該組合療法，病毒應答率仍然等於或低於50%。更進一步，通常這些療法會出現相關的明顯副作用。利巴韋林的缺點包括致畸活性(teratogenic activity)、影響精子發育、溶血、疲勞、頭痛、失眠、噁心和/或厭食。聯用或不聯用利巴韋林的幹擾素α與許多副作用相關。在治療期間，必須小心監視患者的流感樣症狀、抑鬱、皮疹及異常血細胞計數。使用幹擾素α-2b加利巴韋林治療的患者不應有嚴重肝臟功能失調的併發症，且在小心追蹤試驗時，這些受試者僅考慮接受C型肝炎治療。某些用於治療HCV感染的含幹擾素的組合療法還公開在下列美國專利申請公開中=US 2005/0112093、US 2005/0129659 和 US 2008/0138316。已知以下化合物(1)為HCV NS3絲氨酸蛋白酶的強效選擇性抑制劑，且適用於治療HCV感染
化合物(1)落入美國專利6，323，180,7, 514，557和7，585，845中所公開的非環肽系列的HCV抑制劑的範圍內。化合物(1)具體以化合物#1055公開在美國專利7，585，845 中，以及化合物#1008公開在美國專利7，514，557中。化合物(1)及藥物製劑可根據以上所引用參考文件中找到的一般操作製得，所有參考的全文在此引入作為參考。化合物(1) 的優選形式包括結晶形式，特別是結晶鈉鹽形式，其可根據本文實施例部份所述製得。化合物(1)還已知具有以下另一種化學替代性結構式，該結構式等同於上述結構
式
其中B 為< 為 MeO- ；L1 為 Br ；及 R2 為<
雖然已發現化合物(1)通常可有效降低病毒負荷量與治療HCV感染，但是已觀察到一定量的病毒抗性，結果可觀察到病毒反彈。例如，我們已觀察到作為單一療法每日一次對未曾接受過治療的患者給藥化合物(1) 14天出現強小且非常快速的抗病毒作用，隨後， 在5-6天後形成一定量的抗性。
因此，本領域仍需要一種用於治療及預防HCV感染的替代性療法。發明概述 本發明提供一種治療患者的HCV感染或緩解其一種或多種症狀的方法，其包括向患者給藥治療組合的步驟，該治療合包括如本文定義的化合物(1)或其可藥用鹽，以及如本文所定義的幹擾素α和利巴韋林。作為療程的一部份，該組合的三種活性劑可同時或分開給藥。本發明進一步提供試劑盒，其包括含化合物(1)或其可藥用鹽的第一藥物組合物、含幹擾素α的第二藥物組合物，以及含利巴韋林的第三藥物組合物。


圖1說明四個患者劑量組中的HCV病毒負荷量的平均變化，所述患者罹患慢性基因型-1 HCV感染且未曾接受過治療，患者接受14天的作為單一療法的化合物(1)鈉鹽，以及隨後另14天的化合物(1)鈉鹽、聚乙二醇化幹擾素α-2a與利巴韋林的組合療法的治療。圖2說明三個患者劑量組中的HCV病毒負荷量的平均變化，所述患者罹患慢性基因型-1 HCV感染且曾接受過治療，患者接受28天的作為組合療法的化合物(1)鈉鹽、聚乙二醇化幹擾素α _2a與利巴韋林治療。實施方案定義「化合物(1)」如上定義。「幹擾素」是指抑制病毒複製與細胞增殖且調節免疫反應的高度同源性物種特異性蛋白家族的成員。基於人幹擾素的細胞起源與抗原性將其分成三類α-幹擾素(白細胞)、β-幹擾素(成纖維細胞)、Y-幹擾素(B細胞)。已開發出每一類的重組形式且可市售購得。每一類的亞型基於抗原/結構特徵分類。通過分離與測序編碼這些肽的DNA而鑑定出至少24種具有不同胺基酸序列的幹擾素α (分成A至H亞型)。本申請中可相互交換使用術語「 α "幹擾素」(α -interferon)、「 α -幹擾素」(alfa-interferon)、「幹擾素 α 「 (interferon alfa)，以描述該組的成員。在本發明的實踐中可使用天然產生與重組的 α-幹擾素，包括複合幹擾素。適用於本發明的幹擾素-α包括但不限於重組幹擾素α _2b (例如INTRON _Α 幹擾素與VIRAFERON )、重組幹擾素α _2a (例如ROFERON 幹擾素)、重組幹擾素 α -2c (例如BEROFOR α 2幹擾素)、幹擾素α -η1 ( 一種天然α幹擾素的純化摻合物) (例如SUMIFERON 或WELLFERON 幹擾素α-nl (INS))、或複合α幹擾素(例如美國專利4，897，471與4，695，623中所述)或幹擾素α-η3( —種天然α幹擾素的混合物)(例如ALFERON )。優選使用幹擾素α -2a或α -2b。幹擾素α -2b的製造描述於美國專利4，530,901中。術語「幹擾素α 」還指包括那些「聚乙二醇化」類似物，其是指幹擾素α經聚乙二醇修飾的共軛物，優選幹擾素α "2a和_2b。優選的聚乙二醇幹擾素α -2b共軛物為 PEG12_-幹擾素α-2b。本文所用術語「PEG12_-IFNα 」是指根據國際專利申請WO 95/13090 製得，且在幹擾素a _2a或_2b的氨基與平均分子質量為12000的聚乙二醇之間含有尿烷(urethane)連接基。 優選的PEG12ticitl-幹擾素α -2b通過使PEG聚合物與IFN α -2b分子中賴氨酸殘基的ε-氨基連接製得。單一 PEG12tl。。分子經尿烷連接基與IFN α _2b分子上游離氨基共軛連接。該共軛物的特徵為所連接PEG12_的分子量。該PEG12_-IFNa-2b共軛物配製為用於注射的凍乾粉。共軛連接IFNa與PEG的目的為通過顯著延長其血漿半衰期而改善該蛋白的遞送，且因此提供延長的IFNα活性。可用於本發明的特別優選的幹擾素α共軛物為聚乙二醇化α幹擾素，例如聚乙二醇化幹擾素α _2a、聚乙二醇化幹擾素α-2b、聚乙二醇化複合幹擾素或聚乙二醇化純化的幹擾素α產物。聚乙二醇化幹擾素α _2a描述於例如歐洲專利案EP 0593868中， 且可購得例如名為PEGASYS (Hoffmarm-LaRoche)的商品。聚乙二醇化幹擾素α-2b 描述於例如美國專利5，908, 621與WO 98/48840中，且可購得例如名為PEG- INTRON A(ScheringPlough)的商品。聚乙二醇化複合幹擾素描述於WO 96/11953中。優選的聚乙二醇化α幹擾素為聚乙二醇化幹擾素α _2a與聚乙二醇化幹擾素α _2b。還優選聚乙二醇化複合幹擾素。術語「幹擾素α 」進一步包括其它幹擾素α共軛物，其可經將幹擾素α與水溶性聚合物偶聯而製得。這些聚合物的非限制性列表包括其它聚氧化烯烴均聚物，例如聚乙二醇(PEG)、聚丙二醇、聚氧乙烯化多元醇、其共聚物及其嵌段共聚物。另一種基於聚氧化烯烴聚合物的替代物可有效使用非抗原性材料，例如葡聚糖、聚乙烯基吡咯烷酮、聚丙烯醯胺、 聚乙烯基醇、基於碳水化合物的聚合物等。這些幹擾素α-聚合物共軛物描述於美國專利 4，766，106、美國專利4，917，888、歐洲專利申請0236987、歐洲專利申請0510356,0593868 及0809996 (聚乙二醇化幹擾素α-2a)和國際公開W095/13090中。術語「幹擾素α 」進一步包括幹擾素α的融合蛋白，例如幹擾素a_2a、幹擾素a-2b、複合幹擾素或純化的幹擾素α (它們每個與另一蛋白融合)的融合蛋白。某些優選的融合蛋白包括幹擾素(例如幹擾素a_2b)與白蛋白，如美國專利6，972，322 及國際公開WO 2005/003296與WO 2005/077042所述。與人白蛋白共軛的優選幹擾素為ALBUFERON ，其為利用白蛋白融合技術產生的更長效形式幹擾素a。 ALBUFERON 產生自人白蛋白與幹擾素α的基因融合。還包括複合幹擾素，例如 INFERGEN 。術語「可藥用鹽」是指式(1)化合物的鹽，其在合理的醫學判斷範圍內，適於與人類及較低等動物的組織接觸使用，且無過度毒性、刺激性、過敏反應、等，具有合理的收益/ 風險比例，通常為水或油可溶或可分散的，且有效用於那些所需的用途。該術語包括可藥用酸加成鹽與可藥用鹼加成鹽。適宜鹽的列表可在例如 S. M-Birge 等人，J. Pharm. Sci.，1977，66，第 1-19 頁中找到。術語「可藥用酸加成鹽」是指那些保留游離鹼的生物效力與性質，且不是生物學上或其它不合需要的鹽，其利用無機酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、硝酸、磷酸等或利用有機酸例如乙酸、三氟乙酸、己二酸、抗壞血酸、天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、丁酸、樟腦酸、 樟腦磺酸、肉桂酸、檸檬酸、二葡萄糖酸、乙磺酸、穀氨酸、乙醇酸、甘油磷酸、半磺酸、己酸、 甲酸、富馬酸、2-羥基乙烷-磺酸(羥乙磺酸)、乳酸、羥基馬來酸、蘋果酸、丙二酸、苯乙醇酸、均三甲苯磺酸(mesitylenesulfonic acid)、甲磺酸、萘磺酸、菸鹼酸、2_萘磺酸、草酸、雙羥萘酸、果膠酸、苯基乙酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、丙酸、丙酮酸、水楊酸、硬脂酸、琥珀酸、磺氨酸、酒石酸、對甲苯磺酸、十一烷酸等形成。術語「可藥用鹼加成鹽」是指那些保留游離酸的生物效力與性質，且不為生物學上或其它不合需要的鹽，其利用無機鹼例如氨，或銨或金屬陽離子(例如鈉、鉀、鋰、鈣、鎂、 鐵、鋅、銅、錳、鋁等)的氫氧化物、碳酸鹽、或碳酸氫鹽形成。特別優選為銨鹽、鉀鹽、鈉鹽、 鈣鹽及鎂鹽。衍生自可藥用有機無毒鹼的鹽包括伯胺、仲胺和叔胺、季銨化合物、取代的胺 (包括天然產生的取代的胺)、環狀胺及鹼性離子交換樹脂，例如甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、二乙胺、三乙胺、異丙胺、三丙胺、三丁胺、乙醇胺、二乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、二環己基胺、賴氨酸、精氨酸、組氨酸、咖啡鹼、哈巴胺、膽鹼、甜菜鹼、乙二胺、葡萄糖胺、甲基葡萄糖胺、可可鹼、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、四甲基銨化合物、四乙基胺化合物、吡啶、N，N-二甲基苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基嗎啉、二環己基胺、二苯甲基胺、 N，N-二苯甲基苯乙胺、1-二苯羥甲胺、N，N' -二苯甲基乙二胺、聚胺樹脂等。特別優選的有機無毒鹼為異丙基胺、二乙基胺、乙醇胺、三甲胺、二環己基胺、膽鹼和咖啡鹼。「利巴韋林」指獲自 ICN Pharmaceuticals, Inc. (Costa Mesa, Calif.)的 1-3-0-呋喃核糖基-1!1-1，2，4-三唑-3-甲醯胺，且描述於第11版Merck Index，化合物第8199號。其製備和製劑描述於美國專利4，211，771中。優選的市售利巴韋林產品包括 REBETOL 與COPEGUS 。該術語進一步包括其衍生物或類似物，例如那些描述於美國專利6，063, 772、 6，403, 564和6，277，830中。例如，衍生物或類似物包括經修飾的利巴韋林,例如5'-氨基酯、ICNPharmaceutical的利巴韋林的L-對映異構體(ICN 17261)、利巴韋林的2'-脫氧衍生物與利巴韋林的3-甲脒衍生物、viramidine (過去稱為ribamidine)寸。本文所用術語「治療組合」是指一種或多種活性藥物(即具有治療用途的化合物) 的組合。本發明治療組合中的各化合物通常呈包括該化合物與可藥用載體的藥物組合物。 本發明治療組合中的化合物可作為療程的一部份，同時或分開給藥。本發明的實施方案根據一般實施方案，本發明提供一種治療患者的HCV感染或緩解其一種或多種症狀的方法，其包括向患者給藥包括如本文定義的化合物(1)或其可藥用鹽，以及幹擾素α 與利巴韋林的治療組合的步驟。在另一個實施方案中，本發明教導本文定義的化合物(1) 或其可藥用鹽、幹擾素α和利巴韋林在製備用於治療患者的C型肝炎病毒(HCV)感染或緩解其一種或多種症狀的醫藥試劑盒中的用途。儘管預期該組合療法為有效對抗所有HCV基因型，但是已證實其對治療HCV基因型-1 (包括基因亞型-Ia與lb)感染尤其有效。接受本發明組合療法的患者群體可進一步分為「未曾接受過治療 (treatment-naive)」患者(即過去未曾接受過任何針對HCV感染的治療的那些患者)與 「曾接受過治療(treatment experienced)，，患者(即過去曾接受過針對HCV的治療的那些患者)。這兩類患者均可接受本發明的組合療法。優選的曾接受過治療的特定患者為那些過去曾經接受過幹擾素加利巴韋林的療法，但對該療法沒有反應的患者(本文稱為 「沒有反應者(non-responders)」)。這些沒有反應者包括三個不同的患者群(1)在幹擾素加利巴韋林治療期間的HCV RNA水平的最大降低程度< Ix Iogltl的患者(「無反應者 (nullresponders)"), (2)在幹擾素加利巴韋林治療期間的HCV RNA水平的最大降低程度彡Ix Iogltl，但從未達到HCV RNA水平低於檢測的水平的患者(「部份反應者(partial responders)」)，及(3)在幹擾素加利巴韋林療法期間獲得病毒學響應，但在治療期間(不適應的患者除外)或在治療完成後，病毒負荷量反彈的患者(「復發者(relapser)」)。如將於下文詳述，利用本發明組合療法的療程治療某些沒有反應患者，已獲得令人特別吃驚的結果。 根據另一個實施方案，本發明提供一種在有此需要的患者中降低HCV-RNA水平的方法，其包括向該患者給藥本發明的治療組合的步驟。本發明方法優選使患者的HCV-RNA 水平降低至小於可檢測水平。本文術語「小於可檢測水平」及「低於檢測的水平」可交換使用，且具有與低於HCV RNA的可檢測濃度的相同含義。如本發明中使用的HCV RNA的可檢測水平是指每毫升患者血清至少50個國際單位(UI)，根據WHO國際標準的定量、多循環逆轉錄酶 PCR 方法所測定(Saladanha J, Lelie N 與 Heath A, Establishment ofthe first international standard for nucleicacid amplification technology(NAT)assays for HCV RNA. WHO Collaborative Study Group. Vox Sang 76:149-158,1999)。此類方法於本領域中公知的。在優選的實施方案中，本發明方法將患者的HCV-RNA水平降低至低於每毫升血清25 IU，更優選降低至低於每毫升血清10IU。幹擾素加利巴韋林的標準療法的常用治療持續時期為針對HCV基因型-1感染的至少48周，針對HCV基因型-2及3的至少24周。然而，再加上化合物(1)或其可藥用鹽的本發明三重組合療法，可以大大縮短治療持續時間。利用本發明的三重組合療法，計劃的治療持續時間包括至少4周，優選為至少12周，例如約12周至約24周，儘管還有可能治療長達且甚至超過48周。因此，其它的實施方案包括治療至少24周與至少48周。預期針對不同HCV基因型(例如HCV基因型_2、3或4)的時期是相似的。還包括以本發明三重組合療法為初始療程，隨後繼續僅含幹擾素與利巴韋林的二重組合療法。因此，初始三重且隨後兩重的組合療法的可能情況包括例如(1)4周的三重組合療法，隨後為20至44周的僅含幹擾素加利巴韋林的療法；(2) 12周的三重組合療法，隨後為12至36周的僅含幹擾素加利巴韋林的療法；及(3) 24周的三重組合療法，隨後為12至24周的僅含幹擾素加利巴韋林的療法。治療組合的第一種組分(即化合物(1)或其可藥用鹽)包含於組合物中。此類組合物包含化合物(1)或其可藥用鹽，以及可藥用助劑或載體。針對化合物(1)或其可藥用鹽可使用的常用藥物組合物描述於美國專利7，585，845。通常化合物⑴或其可藥用鹽可以以至少40mg/日的劑量(單劑或分成小劑量) 給藥。關於劑量與範圍的其他實施方案可包括(單劑或分成小劑量)(a)至少 48mg/ 日(b)至少 1OOmg/ 日(c)至少 120mg/ 日(d)至少 200mg/ 日(e)至少 240mg/ 日(f)至少 360mg/ 日(g)至少 480mg/ 日(h)自約 40mg/ 日至約 480mg/ 日
(i)自約 48mg/ 日至約 240mg/ 日(j)自約 IOOmg/ 日至約 300mg/ 日

(k)自約 120mg/ 日至約 300mg/ 日(1)自約 120mg/ 日至約 240mg/ 日(m)自約 240mg/ 日至約 480mg/ 日(η)約 48mg/ 日(ο)約 120mg/ 日(ρ)約 240mg/ 日(q)約 360mg/ 日(r)約 480mg/ 日雖然化合物(1)或其可藥用鹽可以每日給藥一次或分成小劑量給藥，然而優選以每日給藥一次日劑量。如本領域技術人員所了解，可能需要低於或高於上述劑量。任一具體患者的具體劑量及治療療程將取決於多種因素，包括年齡、體重、一般健康狀況、性別、飲食、給藥時間、排洩率、藥物組合、感染的嚴重度及進程、患者對感染的處置與治療醫生的判斷。通常，該藥物最需要以通常可提供抗病毒性效力結果，但不引起任何有害或不良的副作用的水平給藥。該治療組合的第二種組分(即幹擾素α )包含於藥物組合物中。該組合物通常為可注射製劑，其包含幹擾素α與可藥用助劑或載體，且為本領域中是公知的，包括許多市售幹擾素α製劑。參見例如多種市售幹擾素-α產品，及多種專利，及其它關於上文所引用的幹擾素α的文獻。可用於組合的幹擾素-α類型已在上文定義部份中列出。在一個優選實施方案中，幹擾素α為聚乙二醇化幹擾素a。在另一個實施方案中，幹擾素α為聚乙二醇化幹擾素a-2a或聚乙二醇化幹擾素a_2b。在一個特別優選的實施方案中，幹擾素α為 PEGAS YS 或 PEG- INTRON 。當使用已知的市售幹擾素α產品時，這些產品可呈用於治療HCV感染的幹擾素加利巴韋林的組合療法所制定的指示劑量給藥。當然，採用本發明的三重組合療法時，可能使用較低劑量的幹擾素α，例如顯著低於現行標準幹擾素加利巴韋林的療法所使用者，卻可達到與現行標準療法相同或更佳的效力而且通常與該療法相關的副作用較少。在一個實施方案中，每周一至三次(優選每周一次或兩次)腸胃外給藥幹擾素α。 對於聚乙二醇化幹擾素α，通常每周給藥一次，且周總劑量範圍為例如，若為聚乙二醇化幹擾素0-2比則約0.5 48/1^/周至約2 48/1^/周；而對於聚乙二醇化幹擾素a-2a，劑量取決於受試者的體重，且通常為約90至200 μ g/周，更優選為約160至約200 μ g/周。在與利巴韋林的組合中，與約600-1200mg/日，特別與800-1200mg/日口服給藥的利巴韋林一起給藥的聚乙二醇化幹擾素a -2b的標準劑量為約1. 5μ g/kg/周，聚乙二醇化幹擾素a -2a 的標準劑量為約ISOyg/周。根據另一個實施方案，聚乙二醇化幹擾素α -2b的給藥量如下(a)約 0. 5 μ g/kg/ 周至約 2 μ g/kg/ 周；(b)約 1 μ g/kg/ 周至約 2 μ g/kg/ 周；(c)約 1. 5 μ g/kg/ 周至約 2 μ g/kg/ 周；
(d)約 1· 5μ g/kg/周。根據另一個實施方案，聚乙二醇化幹擾素α -2a的給藥量如下(a)約 90 至約 200 μ g/ 周；(b)約 160 至約 200 μ g/ 周;(b)約 180 μ g/周。本治療組合的第三種組分(即利巴韋林)包含於藥物組合物中。此類組合物通常包含利巴韋林及可藥用助劑或載體，且為本領域中公知的，其包括許多市售利巴韋林製劑。 包括利巴韋林的製劑還公開在例如美國專利4，211，771中。可用於該組合的利巴韋林類型已於上文定義部份中列出。在一個優選實施方案中，利巴韋林為REBETOL 或COPEGUS ，且其為以用於治療HCV感染的幹擾素加利巴韋林的組合療法所指出的指示劑量給藥。當然，採用本發明為三重組合療法時，可能使用較低劑量的利巴韋林，例如低於現行標準幹擾素加利巴韋林的療法所使用，卻可達到與現行標準療法相同或更佳的效力而且通常與該療法相關的副作用更少。根據多個實施方案，利巴韋林的給藥量如下(單劑或分成小劑量)(a) 400mg/ 日至約 1200mg/ 日；(b)約 800mg/ 日至約 1200mg/ 日；(c)約 IOOOmg/ 日至約 1200mg/ 日；(d)約 IOOOmg/ 日(e)約 1200mg/ 日(f)約 300mg/ 日至約 800mg/ 日(g)約 300mg/ 日至約 700mg/ 日(h) 500mg/ 日至約 700mg/ 日(i)400mg/ 日至約 600mg/ 日(j)約 400mg/ 日(k)約 600mg/ 日(1)約 800mg/ 日 根據一個實施方案，利巴韋林組合物包括呈製劑的利巴韋林，其適於每日一次、每日兩次、每日三次、每日四次、每日五次、或每日六次給藥。例如，若治療組合包括約IOOOmg/ 日劑量的利巴韋林，且需要每日給藥五次，則治療組合將包括呈製劑的利巴韋林，例如含有例如約200mg利巴韋林的片劑。對於本發明的化合物(1)或其可藥用鹽加幹擾素α加利巴韋林的三重組合療法， 本發明包括涵蓋且包括上文所述的多種優選實施方案及亞實施方案的所有組合。例如，在一個實施方案中，本發明包括一種治療患者的C型肝炎病毒(HCV)感染或緩解其一種或多種症狀的方法，其包括向患者給藥治療組合的步驟，該治療組合包括(a)每日約48mg至約480mg劑量的化合物⑴或其可藥用鹽；(b)約160至約200 μ g/周劑量的聚乙二醇化幹擾素α -2a,或約0.5 μ g/kg/周至約2 μ g/kg/周劑量的聚乙二醇化幹擾素α -2b ；及(c)約400mg/日至約1200mg/日劑量的利巴韋林。在另一個實施方案中，本發明包括一種治療患者的C型肝炎病毒(HCV)感染或緩解其一種或多種症狀的方法，其包括向患者給藥治療組合的步驟，該治療組合包括(a)每日約48mg至約480mg劑量的化合物⑴或其可藥用鹽；(b)約180 μ g/周劑量的聚乙二醇化幹擾素α -2a ；及(c)約IOOOmg/日至約1200mg/日劑量的利巴韋林。在另一個實施方案中，本發明包括一種治療患者的C型肝炎病毒(HCV)感染或緩解其一種或多種症狀的方法，其包括對患者給藥治療組合的步驟，該治療組合包括(a)每日約48mg至約480mg劑量的化合物⑴或其可藥用鹽；(b)約1. 5 μ g/kg/周劑量的聚乙二醇化幹擾素α -2b ；及(c)約800mg/日劑量的利巴韋林。

其它實施方案包括上述實施方案中任一例，且其中(a)HCV感染為基因型-1，且患者為未曾接受過治療的患者；或(b)HCV感染為基因型-1，且患者為曾接受過治療，但對幹擾素加利巴韋林的組合療法沒有反應的患者。其它實施方案包括上述實施方案中任一例，且其中化合物(1)或其可藥用鹽為每日給藥一次，且幹擾素α為每周給藥一次及利巴韋林為每日給藥兩次。根據本發明的另一個實施方案，本發明的治療療程包括對患者給藥至少約4周， 更優選至少約12周或至少約24周(i)每日一次的治療有效量的化合物(1)或其可藥用鹽；(ii)每周一次的治療有效量的幹擾素α ；及(iii)每日兩次的治療上有效量的利巴韋林。根據另一個實施方案，本發明提供一種用於治療患者HCV感染的試劑盒。本發明試劑盒可包括本發明任一種治療組合。該試劑盒進一步包括指示該治療組合用法的說明書。可按各種類別或種類的患者的需要或按其它臨床相關因素(例如年齡、體重、並發疾病 /病症、HCV感染的嚴重性及階段、對先前治療有反應或沒有反應、副作用傾向等)而調整試劑盒。根據另一個實施方案，本發明提供試劑盒，其包括(a)第一藥物組合物，其包含化合物(1)或其可藥用鹽(b)第二藥物組合物，其包含幹擾素α ；(c)第三藥物組合物，其包含利巴韋林；及(d)指示使用上述組合物用法的說明書。另外，在以本發明涵蓋的組合療法治療期間，在抑制HCV病毒抗性上觀察到令人驚奇的結果。在未曾接受過治療的所有劑量組中觀察到病毒負荷量降低的大多數患者中， 作為單一療法給藥的化合物(1)(鈉鹽)在治療頭14天期間即導致快速的病毒負荷量反彈。不同的是，曾接受過治療的19名患者中，在接受28天與聚乙二醇化幹擾素a-2a及利巴韋林(PeglFN/RBV)組合的每日一次(qd)48mg(n = 6)、120mg(n = 7)、或 240mg(n = 6) 劑量的化合物(1)(鈉鹽)時，在28天治療期間，僅在48mg劑量組的2/6患者，及120mg劑量組的1/7患者中觀察到病毒量反彈。值得注意的是，在頭28天內，在曾接受過治療的劑量組中，接受每日一次與PeglFN/RBV組合的240mg化合物(1)(鈉鹽)治療時，未觀察到反彈。
因此，在其它的 實施方案中，在本發明組合療法期間出現有限的或不出現病毒抗性(viral resistance) 0在更具體的實施方案中，在本發明組合療法期間，可編碼在R155 和/或D168和/或A156的一或多處出現的胺基酸取代的HCV NS3蛋白酶的HCV變異株的出現受到限制或不出現。其它的實施方案包括上述實施方案中的任一例，且其中(a)HCV感染為基因型-la，且患者為未曾接受過治療的患者；或(b)HCV感染為基因型-la，且患者為曾接受過治療且對幹擾素加利巴韋林的組合療法沒有反應的患者；且其中在本發明組合療法期間，出現有限的或不出現可編碼在NS3蛋白酶Rl55處胺基酸取代的變異株。其它實施方案包括上述實施方案中的任一例，且其中(a)HCV感染為基因型-lb，且患者為未曾接受過治療的患者；或(b)HCV感染為基因型_lb，且患者為曾接受過治療且對幹擾素加利巴韋林的組合療法沒有反應的患者；且其中在本發明組合療法期間，出現有限的或不出現可編碼在NS3蛋白酶D168處胺基酸取代的變異株。
實施例I.製備化合物(1)的方法製備無定形化合物(1)的方法可於US 6，323，180、7，514，557和7，585，845中，將其整個在此引入作為參考。下列實施例1至5提供製備可用於本發明的其它形式的化合物 (1)的方法。實施例I-A型結晶形式的化合物⑴的製備將無定形化合物(1)(批次7，13. 80g)添加至IOOOml三頸燒瓶中。添加無水乙醇 (248. 9g)至該燒瓶中。在攪拌下，以每小時攝氏60度加熱燒瓶的內容物至約攝氏74度。 (固體在攝氏74度下不溶解)。隨後在攪拌且保持攝氏74度的溫度，連續4小時，以線性方式連續添加水(257. 4g)至所得漿液中。在完成添加水後，以每小時攝氏8度，使溫度以線性方式連續降至環境溫度，且隨後在攪拌和室溫下放置6小時。通過過濾，收集所得固體，並以50ml的1/1 (w/w) EtOH/水洗滌。通過使N2抽吸經過濾餅，使溼固體在漏鬥上乾燥。(該樣本的XRPD分析說明其圖譜與EtOH溶劑合物類似)。隨後在真空(P = 25，以Hg表示) 及攝氏65-70度下及氮氣氣流中，乾燥固體1. 5小時。通過XRPD，確定所得固體(12. 6g， 95. 5%準確產率)為A型化合物(1)。實施例2-化合物⑴的鈉鹽的製備_方法1將2. Ig無定形化合物(1)的鈉鹽與8. 9g丙酮添加至小玻璃瓶中，並在室溫下攪拌3小時。漿液經濾除母液，所得固體在20分鐘的氮氣氣流中乾燥20分鐘。得到1. 51g 的化合物(1)鈉鹽結晶。實施例3-化合物⑴的鈉鹽的製備_方法2在250ml反應器中，添加15. 6g A型化合物(1)與175ml丙酮及3. 6ml水，並加熱至攝氏53度，溶解固體。添加900 μ 1的10. ON NaOH至反應器，並在該溶液中接種A型晶種。在攝氏53度下攪拌已接晶種的溶液10分鐘。添加第二份90(^1的10.(^ NaOH，並在攝氏53度下攪拌該系統30分鐘，經過該步驟形成漿液。以每小時攝氏15度的冷卻速率使漿液冷卻至攝氏19度，並在攝氏19度下放置過夜。過濾最終所得漿液，並以15ml丙酮洗滌溼固體。在攝氏52度及真空下，在氮氣氣流中乾燥固體1小時，且隨後使固體暴露於實驗室空氣一小時。得到12. Ig化合物(1)鈉鹽結晶固體。實施例4-化合物⑴的鈉鹽的製備_方法3在反應器中添加25.4Kg無定形化合物(1)、228L THF及11. IKg 10重量％ NaOH(水溶液)。在攝氏25度下混合這些組分，溶解所有固體。過濾所得溶液，並以23L THF洗滌反應器與濾器。採用常壓蒸餾，在攝氏65度下移除180L溶劑。添加195L MIBK， 並通過真空蒸餾，在約攝氏44度下移除166L溶劑。再次添加161L MIBK與0. 41Kg水至反應器，且加熱該內容物至攝氏70度。在攝氏70度下，添加255g化合物(1)鈉鹽晶種，並以 1. 5小時時間添加1. 42L水。在添加水後，漿液置於攝氏70度下45分鐘，且在隨後1小時， 使其冷卻至攝氏45度。過濾所得漿液，並以64L含約0.8重量％水的MIBK洗滌。溼濾餅在攝氏55度下乾燥，產生約25Kg的化合物(1)鈉鹽結晶。

實施例5-化合物⑴的鈉鹽的製備_方法4在反應器中添加2. OOg無定形化合物(1)、9. 96g THF及0. Ilg水，並在環境溫度下攪拌，直至固體溶解。伴隨攪拌該溶液，逐滴添加0. 820ml的21重量％ NaOEt的乙醇溶液，得到A溶液。在第二反應器中添加15. 9g的n-BuAc與160 μ 1水，並加熱至攝氏65度 (B溶液)。在攝氏65度下添加2. 56gA溶液至B溶液，且在所得混合物中接種40mg化合物 (1)鈉鹽晶種。在攝氏65度下，靜置經接晶種的混合物45分鐘。分四次添加2. 56g的B溶液至A溶液，且每次隨後靜置45分鐘。在最後一次添加並靜置後，在1小時內，使漿液冷卻至攝氏50度並過濾。以6ml含0.5重量％水的n-BuAc洗滌溼濾餅。利用氮氣衝刷，在真空與攝氏50度下乾燥所得固體。收得化合物(1)晶型鈉鹽固體。II.臨床結果下文所述的臨床試驗中，給藥的藥物產品為化合物(1)鈉鹽的口服液。化合物(1) 鈉鹽以粉末提供給一個或多個臨床中心，以利用一起提供的溶劑製成口服液。該溶劑還作為安慰劑。實施例6-未曾接受過治療的患者的臨床試驗以單一療法，以及與聚乙二醇化幹擾素α -2a(P)與利巴韋林(R)組合給藥的化合物(1)鈉鹽(一種新的HCV NS3蛋白酶抑制劑)，對罹患慢性基因型-1C型肝炎病毒感染的未曾接受過治療的患者的安全性及抗病毒活性。背景化合物(1)鈉鹽為HCV NS3蛋白酶抑制劑(EC50為3_6nM)。由多組劑量漸增測試(a multiple rising dose study)評估對罹患慢性基因型-1HCV感染且未曾接受過治療的患者(Pts)的安全性與抗病毒活性，其作為單一療法給藥14天，隨後以與P+R的三重組合療法再給藥14天。方法將34名(法國、德國、西班牙、美國)Metavir纖維化評分(Metavirfibrosis score)為0至3且未經任何幹擾素或R療法治療的患者隨機分組(2位安慰劑6或7位活性成份)為四個每日一次(qd)化合物(1)鈉鹽的劑量組20mg(n = 8)、48mg(n = 9)、 120mg(n = 9)、或240mg(n = 8)。化合物(1)鈉鹽作為單一療法給藥14天。對第10天的病毒負荷量(VL)降幅 21og1(1的VL降幅。對於20mg、48mg、120mg、及240mg組，14天單一療法期間的VL最大降幅中值(範圍)分別為3. O (1. 5-3. 9)、3. 6 (3. 1-3. 8)、3. 7 (3. 3-4. 1)、 ^4.2(3. 6-4. 8) Iog10 IU/ml。安慰劑的VL無顯著變化。在單一療法的頭14天，所有劑量組的大多數患者均在治療期間觀察到VL反彈。結論作為單一療法給藥14天且隨後與P+R組合再給藥14天的化合物(1)鈉鹽的耐受性良好，且在未曾接受過治療的患者中誘發強力且快速的抗病毒響應。圖1說明本研究中四個患者劑量組的HCV病毒負荷量的平均變化，即由罹患慢性基因型-1 HCV感染且未曾接受過治療的患者接受以化合物(1)鈉鹽作為單一療法給藥14 天，隨後以化合物(1)鈉鹽、聚乙二醇化幹擾素α _2a及利巴韋林的組合療法再給藥14天治療。在該圖中，病毒負荷量的變化以IU/ml Iogltl單位表示，且四個患者劑量組標示如下「20 naiv aV」 = 20mg劑量組的平均病毒負荷量變化「48 naiv aV」 = 48mg劑量組的平均病毒負荷量變化「120 naiv aV」 = 120mg劑量組的平均病毒負荷量變化「240 naiv aV」 = 240mg劑量組的平均病毒負荷量變化在未曾接受過治療患者治療期間的變異株的出現在基線及治療期間反彈時的NS3/4A蛋白酶群的測序揭示出導致體外化合物(1) 鈉鹽耐藥的變異株部分。在多個劑量組的治療期間，觀察到相對於亞型參考物(亞基因型-la :AF009606或亞基因型-Ib :AJ238799)，在NS3蛋白酶域內關鍵殘基上有顯著變化。 詳細內容請參見下表1至4。在所有表格中，Gt表示HCV亞基因型，及第一天表示基線序列，所指出的胺基酸取代出現在天然出現的NS3多態現象的關鍵殘基上。可在治療期間的不同天觀察到可能編碼耐藥性或與耐藥性相關的其它變化。表1 未曾接受過治療的20mg劑量組患者的基於族群的胺基酸序列中，關鍵殘基上的主要變異(相對於亞型參考物)
權利要求
1.以下組合在製備用於治療C型肝炎病毒(HCV)感染或緩解其一種或多種症狀的藥物中的用途，所述組合為(a)下式(1)化合物或其可藥用鹽
2.權利要求1的用途，其中所述藥物包括(a)第一藥物組合物，其包含下式(1)化合物或其可藥用鹽
3.權利要求1或2的用途，其中所述組分(a)、(b)和(c)以治療有效量存在於藥物中。
4.權利要求1或2的用途，其中該HCV感染為基因型-1。
5.權利要求1或2的用途，其中所述藥物用於治療未曾接受過治療的患者的C型肝炎病毒(HCV)感染或緩解其一種或多種症狀。
6.權利要求1或2的用途，其中所述藥物用於治療對使用利巴韋林和幹擾素α的組合療法沒有反應的患者的C型肝炎病毒(HCV)感染或緩解其一種或多種症狀。
7.權利要求1或2的用途，其中所述藥物用於治療因接受治療而使HCV-RNA水平降至低於可檢測水平的患者的C型肝炎病毒(HCV)感染或緩解其一種或多種症狀。
8.權利要求1或2的用途，其中所述藥物給藥至少4周。
9.權利要求1或2的用途，其中化合物(1)或其可藥用鹽的給藥量為至少每日40mg。
10.權利要求1或2的用途，其中利巴韋林的給藥量為400mg/日、600mg/日、800mg/ 日、IOOOmg/ 日，或 1200mg/ 日。
11.權利要求1或2的用途，其中幹擾素α每周給藥一次。
12.權利要求1或2的用途，其中所述幹擾素α為聚乙二醇化幹擾素α。
13.權利要求12的用途，其中所述聚乙二醇化幹擾素α為以約90至約200μ g/周的劑量給藥的聚乙二醇化幹擾素α _2a，或為以約0. 5μ g/kg/周至約2μ g/kg/周的劑量給藥的聚乙二醇化幹擾素α-2b。
14.權利要求1或2的用途，其中所述治療用於對使用利巴韋林與幹擾素的組合療法沒有反應的患者的基因型-1的HCV感染，化合物(1)或其可藥用鹽以每日約48mg至每日約 240mg的量給藥，且所述幹擾素α為聚乙二醇化幹擾素α-2a或聚乙二醇化幹擾素α _2b。
15.權利要求1或2的用途，其中所述化合物(1)或其可藥用鹽每日給藥一次；利巴韋林每日給藥兩次；以及幹擾素α每周給藥一次。
16.權利要求1或2的用途，其中出現有限的或不出現HCV變異株，所述HCV變異株編碼在R155、D168或Α156中一處或多處位點的胺基酸取代的HCV NS3蛋白酶。
17.試劑盒，其包括(a)第一藥物組合物，其包含下式(1)化合物或其可藥用鹽
全文摘要
本發明涉及治療組合，其包括(a)如本文所述的化合物(1)或其可藥用鹽、(b)幹擾素α和(c)利巴韋林。所述化合物(1)為HCV NS3絲氨酸蛋白酶的強效選擇性抑制劑。本發明還涉及使用此類治療組合用於治療患者的HCV感染或緩解其一種或多種症狀的方法。
文檔編號A61K45/06GK102159245SQ200980136292
公開日2011年8月17日 申請日期2009年9月14日 優先權日2008年9月17日
發明者戴維·黃, 傑裡·O·斯特恩, 格哈德·G·斯坦曼 申請人:貝林格爾.英格海姆國際有限公司