嘧啶基氨基苯甲醯胺衍生物用於治療全身性肥大細胞增多症的應用的製作方法

2023-10-24 02:55:12 4

專利名稱：嘧啶基氨基苯甲醯胺衍生物用於治療全身性肥大細胞增多症的應用的製作方法
嘧澱基氨基苯甲醯胺衍生物用於治療全身性肥大細胞增多症的應用 本發明的概述
本發明涉及嘧咬基氨基苯曱醯胺衍生物用於製備治療全身性肥大細胞 增多症的藥物的應用。本發明還涉及一種治療全身性肥大細胞增多症的方 法。
背景技術：
全身性肥大細胞增多症(SM)可以被分類為惰性SM (幾乎沒有或者沒 有器官功能受損的跡象)、侵襲性SM(存在器官功能受損)、伴有血液學非 肥大細胞疾病的SM (SM-AHNMD)和肥大細胞白血病。成人SM的臨床表 現多種多樣，包括皮膚病(通常為色素性蕁麻滲)、肥大細胞介質-釋放症狀 (頭痛、面紅、頭牽、牽厥、過敏反應等)、以及直接或間接的器官損害(由 溶解性骨損害、骨質疏鬆症或骨折引起的骨疼痛、肝脾大、由骨髓牽涉引 起的血細胞減少症)。此外，大約20。/。患有SM的患者可能表現出顯著的並 且有時是孤立的血液嗜曙紅細胞增多(Tefferi和Pardanani 2004)。
一般而言，肥大細胞白血病是存活以月計的末期疾病並且迄今為止沒 有有效的治療。無痛SM的自然史要好得多，具有以數十年計的平均存活 期並且極少發展為侵襲性SM和SM-AHNMD。 SM-AHNMD的結果是由 相關的AHNMD決定的並且其明顯比沒有AHNDM的SM更壞。對於惰 性SM和沒有AHNMD的侵襲性SM而言，骨髓肥大細胞和嗜曙紅細胞含 量增加、血清鹼性磷酸酯酶升高、貧血和肝脾大都與不良預後有關(Tefferi 和Pardanani 2004)。當用Gleevec⑧進行治療時，在伴有FIPlLl-PDGFRa 基因融合的SM患者體內獲得了完全的組織學和臨床緩解(Pardanani 2003a， Parda腿i 2003b)。
現在已經發現，嘧啶基氨基苯曱醯胺衍生物可有效對抗SM，尤其是 伴有FIPlLl-PDGFRa基因融合的SM。
本發明要解決的問題是提供可用於治療尤其是全身性肥大細胞增多 症，尤其是伴有FIPlLl-PDGFRoc基因融合的SM的嗜咬基氨基苯甲醯胺 衍生物。
本發明的4既述
本發明涉及式(I)的嘧啶基氨基苯甲醯胺化合物(下文:"嘧啶基氨基苯 甲醯胺衍生物")以及該類化合物的N-氧化物或可藥用的鹽用於製備治療全 身性肥大細胞增多症和伴有FIPlLl-PDGFRa基因融合的SM的藥物組合 物的應用
Rn表示氫、低級烷基、低級烷氧基-低級烷基、醯氧基-低級烷基、羧 基-低級烷基、低級烷氧基羰基-低級烷基或苯基-低級烷基；
R2表示氫、任選地被一個或多個相同或不同的基團R3取代的低級烷 基、環烷基、苯並環烷基、雜環基、芳基、或包含零、一、二或三個環氮 原子和零或一個氧原子和零或一個硫原子的單-或二環雜芳基，這些基團在 各種情況中未被取代或者被單-或多取代；並且
R3表示羥基、低級烷氧基、醯氧基、羧基、低級烷氧基羰基、氨基甲 醯基、N-單-或N，N-二取代的氨基曱醯基、氨基、單-或二取代的氨基、環 烷基、雜環基、芳基、或包含零、一、二或三個環氮原子和零或一個氧原 子和零或一個硫原子的單-或二環雜芳基，這些基團在各種情況中未被取代
其中
或者被單-或多取代；
或者其中Ri和R2—起表示任選地被低級烷基、環烷基、雜環基，苯 基、羥基、低級烷氧基、氨基、單-或二取代的氨基、氧代、吡咬基、吡嗪 基或嘧啶基單-或二取代的具有四、五或六個碳原子的亞烷基；具有四或五 個碳原子的苯亞烷基(benzalkylene);具有一個氧和三或四個碳原子的氧雜 亞烷基；或者具有一個氮和三或四個碳原子的氮雜亞烷基，其中的氮未被 取代或者被低級烷基、苯基-低級烷基、低級烷氧基羰基-低級烷基、羧基-低級烷基、氨基甲醯基-低級烷基、N-單-或N，N-二取代的氨基曱醯基-低級 烷基、環烷基、低級烷氧基羰基、羧基、苯基、被取代的苯基、吡。定基、 嘧咬基或吡溱基所取代；
R4表示氫、低級烷基或卣素。
本發明還涉及式I的化合物用於治療或預防全身性肥大細胞增多症的 應用。
除非另有說明，否則上下文所用的一般術語在本公開物中優選地具有 下面的含義
前綴"低級"表示一種具有高至並包括最多7個，尤其是高至並包括最 多4個碳原子的基團，所討論的基團是直鏈的或者具有一個或多個分支的 支鏈。
在化合物、鹽等使用複數的情況中，其也指單數化合物、鹽等。 任何不對稱碳原子都可以以(R)-、 (S)-或(R，S)-構型存在，優選地以(R)-或(S)-構型存在。因此，所述化合物可以以異構體混合物的形式存在或者可 以以純異構體的形式存在，優選地以對映異構體純的非對映異構體的形式 存在。
本發明還涉及式I化合物可能的互變異構體。
低級烷基優選地是具有1 (包括l)至高至7 (包括7)，優選1 (包括l)至 4 (包括4)個碳原子的直鏈或支鏈烷基；低級烷基優選地是丁基，如正-丁基、 仲-丁基、異丁基、叔-丁基、丙基，如正-丙基或異丙基、乙基或甲基。低 級烷基優選地是甲基、丙基或叔-丁基。
低級醯基優選地是甲醯基或低級烷基羰基，特別是乙醯基。 芳基是通過位於該基團的芳族環碳原子上的鍵被結合到所述分子上的
芳族基團。在一個優選的實施方案中，芳基是具有6至14個碳原子的芳族 基團，尤其是苯基、萘基、四氫萘基、芴基或菲基，並且未被取代或者被 一個或多個，優選高至三個，尤其是一或兩個取代基所取代，所述取代基 尤其是選自氨基、單-或二取代的氨基、卣素、低級烷基、被取代的低級烷 基、低級鏈烯基、低級炔基、苯基、羥基、被醚化或酯化的羥基、硝基、 氰基、羧基、被酯化的羧基、烷醯基、苯甲醯基、氨基甲醯基、N-單-或 N，N-二取代的氨基曱醯基、脒基、胍基、脲基、巰基、磺基、低級烷硫基、 苯硫基、苯基-低級烷硫基、低級烷基苯硫基、低級烷基亞磺醯基、苯基亞 磺醯基、苯基-低級烷基亞磺醯基、低級烷基苯基亞磺醯基、低級烷基磺醯 基、苯基磺醯基、苯基-低級烷基磺醯基、低級烷基苯基磺醯基、滷代低級 烷基巰基、閨代低級烷基磺醯基，尤其是如三氟甲磺醯基、二羥基硼烷 (-B(OH)2)、雜環基、單-或二環雜芳基和被結合到該環的毗鄰C-原子上的 低級亞烷基二氧基，如亞曱二氧基。芳基更優選地是苯基、萘基或四氫萘 基，其各自未被取代或者獨立地被一個或兩個選自卣素，尤其是氟、氯、
或溴；羥基；被低級烷基，例如被甲基、被卣代低級烷基，例如三氟甲基、
或被苯基醚化的羥基;結合到兩個毗鄰C-原子上的低級亞烷基二氧基，例 如亞甲二氧基、低級烷基，例如曱基或丙基；卣代低級烷基，例如三氟甲 基；羥基-低級烷基，例如羥基甲基或2-羥基-2-丙基；低級烷氧基-低級烷 基；例如曱氧基曱基或2-甲氧基乙基；低級烷氧基羰基-低級烷基，例如甲 氧基羰基曱基；低級炔基，如l-丙炔基；被酯化的羧基，尤其是低級烷氧 基羰基，例如甲氧基羰基、正-丙氧基羰基或異-丙氧基羰基；N-單-取代的 氨基曱醯基，特別是被低級烷基，例如甲基、正-丙基或異-丙基單取代的 氨基甲醯基；氨基；低級烷基氨基，例如甲基氨基；二-低級烷基氨基，例 如二甲基氨基或二乙基氨基；低級亞烷基-氨基，例如吡咯烷-l-基或哌啶-l-基；低級氧雜亞烷基-氨基，例如嗎啉-4-基、低級氮雜亞烷基-氨基，例如
艱，秦-l-基、醯基氨基，例如乙醯基氨基或苯曱醯基氨基；低級烷基磺醯基， 例如曱基磺醯基；氨磺醯基；或苯基磺醯基的取代基所取代。
環烷基優選地是環丙基、環戊基、環己基或環庚基，並且可以未被取 代或者被一個或多個，尤其是一個或兩個選自上面芳基取代基所定義基團 的取代基所取代，最優選地被低級烷基，如甲基、低級烷氧基，如曱氧基 或乙氧基、或羥基所取代，並且其還可以被氧代基團所取代或者與苯環稠 合，例如在苯並環戊基或苯並環己基的情況中。
被取代的烷基是如前面所定義的烷基，尤其是低級烷基，優選甲基； 在可以存在一個或多個，尤其是高至三個取代基的情況中，其取代基主要 選自卣素，尤其是氟、氨基、N-低級烷基氨基、N，N-二-低級烷基氨基、 N-低級烷醯基氨基、羥基、氰基、羧基、低級烷氧基羰基和苯基-低級烷氧 基羰基。尤其優選地是三氟甲基。
單-或二取代的氨基尤其是被一個或兩個彼此獨立地選自低級烷基，如
曱基；羥基-低級烷基，如2-羥基乙基；低級烷氧基低級烷基，如甲氧基乙 基；苯基-低級烷基，如節基或2-苯基乙基；低級烷醯基，如乙醯基；苯甲 醯基；被取代的苯甲醯基，其中的苯基尤其是被一個或多個，優選一個或 兩個選自硝基、氨基、卣素、N-低級烷基氨基、N，N-二-低級垸基氨基、羥 基、氰基、羧基、低級烷氧基羰基、低級烷醯基和氨基甲醯基的取代基所 取代；和其中的苯基未被取代或者尤其是被一個或多個，優選一個或兩個 選自硝基、氨基、卣素、N-低級烷基氨基、N,N-二-低級烷基氨基、羥基、 氰基、羧基、低級烷氧基羰基、低級烷醯基和氨基甲醯基的取代基所取代 的苯基-低級烷氧基羰基的取代基所取代的氨基；並且優選地是N-低級烷 基氨基，如N-曱基氨基、羥基-低級烷基氨基，如2-羥基乙基氨基或2-羥 基丙基、低級烷氧基低級烷基，如甲氧基乙基、苯基-低級烷基氨基，如節 基氨基、N，N-二-低級烷基氨基、N-苯基-低級烷基-N-低級烷基氨基、N,N-二-低級烷基苯基氨基、低級烷醯基氨基，如乙醯基氨基，或是選自苯曱醯 基氨基和苯基-低級烷氧基羰基氨基的取代基(其中的苯基在各種情況中未 被取代或者尤其是被硝基或氨基所取代，或者還可以被卣素、氨基、N-低
級烷基氨基、N，N-二-低級烷基氨基、羥基、氰基、羧基、低級烷氧基羰基、 低級烷醯基、氨基曱醯基或氨基羰基氨基所取代)。二取代的氨基還可以是 低級亞烷基-氨基，例如吡咯烷-l-基、2-氧代吡咯烷-l-基或哌啶-l-基；低級 氧雜亞烷基-氨基，例如嗎啉-4-基、或低級氮雜亞烷基-氨基，例如哌漆-l-基或N-取代的哌溱-l-基，如N-曱基哌嚷-l-基或N-甲氧基羰基哌溱-l-基。
滷素尤其是氟、氯、溴或碘，尤其是氟、氯或溴。
被醚化的羥基尤其是CVC2o烷氧基，如正-癸氧基；低級烷氧基(優選 的)，如甲氧基、乙氧基、異丙氧基或叔-丁氧基；苯基-低級垸氧基，如千 氧基；苯氧基；囟代低級烷氧基，如三氟甲氧基、2，2，2-三氟乙氧基或1，1，2，2-四氟乙氧基；或被包含一個或兩個氮原子的單-或二環雜芳基所取代的低級 烷氧基，優選被咪唑基，如lH-咪唑-l-基、吡咯基、苯並咪唑基，如l-苯 並咪唑基、吡咬基，尤其是2-、 3-或4-吡啶基、嘧t基，尤其是2-嘧咬基、 吡嗪基、異喹啉基，尤其是3-異喹啉基、喹啉基、吲哚基或噻唑基所取代 的低級烷氧基。
被酯化的羥基尤其是低級烷醯氧基、苯曱醯氧基、低級烷氧基羰基氧 基，如叔-丁氧基羰基氧基、或苯基-低級烷氧基羰基氧基，如千氧基羰基氧基。
被酯化的羧基尤其是低級烷氧基羰基，如叔-丁氧基羰基、異-丙氧基 羰基、曱氧基羰基或乙氧基羰基、苯基-低級烷氧基羰基或苯氧基羰基。
烷醯基主要是烷基羰基，尤其是低級烷醯基，例如乙醯基。
N-單-或N，N-二取代的氨基曱醯基尤其是被一個或兩個獨立地選自低 級烷基、苯基-低級烷基和羥基-低級烷基、或低級亞烷基、氧雜-低級亞烷 基或任選地在末端氮原子上被取代的氮雜-低級亞烷基的取代基所取代。
包含零、一、二或三個環氮原子和零或一個氧原子和零或一個硫原子 的單_或二環雜芳基(這些基團在各種情況中未被取代或者被單_或多取代)
指的是一種在將該雜芳基結合到式I分子的剩餘部分的環中是不飽和的雜 環部分並且優選地是一種其中在結合環中(但是還可任選地在任何稠合的 環中)至少有一個碳原子被選自氮、氧和硫的雜原子代替的環；其中所述結
合環優選地具有5至12個，更優選5或6個環原子；並且其可以未^皮取代 或者被一個或多個，尤其是一個或兩個選自上面芳基取代基所定義基團的 取代基所取代，最優選地被低級烷基，如甲基、低級烷氧基，如甲氧基或 乙氧基、或羥基所取代。所述單-或二環雜芳基優選地選自2H-吡咯基、吡 咯基、咪唑基、苯並咪唑基、吡唑基、吲唑基、嘌呤基、吡咬基、吡溱基、 嘧啶基、峻喚基、4H-喹漆基、異會啉基、喹啉基、酞漆基、萘澱基、喹 喔啉基、喹唑啉基、喹啉基、蝶啶基、吲嗪基、3H-吲哚基、吲哚基、異 吲味基、嚅唑基、異嚅唑基、噻唑基、異瘞唑基、三唑基、四唑基、呋咱 基、苯並問吡唑基、瘞吩基和呋喃基。所述單-或二環雜芳基更優選地選自 吡咯基、咪唑基，如lH-咪唑-l-基、苯並咪哇基，如l-苯並咪唑基、丐l唑 基，尤其是5-吲唑基、吡梵基，尤其是2-、 3-或4-吡《基、嘧咬基，尤其 是2-嘧澱基、吡嗪基、異喹啉基，尤其是3-異會啉基、會啉基，尤其是4-或8-會啉基、吲哚基，尤其是3-吲味基、噻唑基、苯並[d吡唑基、噻吩基 和呋喃基。在本發明一個優選的實施方案中，所述吡咬基在相對於其氮原子 而言的鄰位上被羥基取代並且因此至少部分以相應的互變異構體(其是吡 啶-(lH)2-酮)的形式存在。在另一個優選的實施方案中，所述嘧咬基在2位 和4位上都被羥基取代，並且因此以數種互變異構形式存在，例如以嘧吱 -(IH， 3H)2，4-二酮的形式存在。
雜環基尤其是一種具有一個或兩個選自氮、氧和^fL的雜原子的五、六 或七-員雜環系統，其可以是不飽和的或者完全或部分飽和的，並且未被取 代或者尤其是被低級烷基，如曱基、苯基-低級烷基，如千基、氧代或雜芳 基，如2-哌溱基所取代；雜環基尤其是2-或3-吡咯烷基、2-氧代-5-吡咯烷 基、哌啶基、N-節基-4-哌咬基、N-低級烷基-4-哌啶基、N-低級烷基-哌溱 基、嗎啉基，例如2-或3-嗎啉基、2-氧代-lH-氮雜革-3-基、2-四氫呋喃基 或2-甲基-l,3-二氧戊環-2-基。
鹽尤其是式I化合物的可藥用的鹽。
該鹽由具有鹼性氮原子的式I化合物與有機或無機酸以酸加成鹽的形 式形成，尤其是可藥用的鹽。適宜的無機酸有例如氫卣酸，如鹽酸、硫酸
或磷酸。適宜的有機酸有例如羧酸、膦酸、磺酸或氨基磺酸，例如乙酸、 丙酸、辛酸、癸酸、十二碳酸、羥基乙酸、乳酸、富馬酸、琥珀酸、己二 酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、胺基酸，如谷 氨酸或天門冬氨酸、馬來酸、羥基馬來酸、曱基馬來酸、環己烷甲酸、金
剛烷甲酸、苯甲酸、水楊酸、4-氨基水楊酸、鄰苯二曱酸、苯乙酸、扁桃 酸、肉桂酸、曱烷-或乙烷-磺酸、2-羥基乙磺酸、乙烷-l，2-二磺酸、M酸、 2-萘磺酸、1，5-萘-二磺酸、2-、 3-或4-甲基苯磺酸、甲基硫酸、乙基硫酸、 十二烷基硫酸、N-環己基氨基磺酸、N-曱基-、N-乙基-或N-丙基-氨基磺酸 或其它有機質子酸，如抗壞血酸。
在存在荷負電基團如羧基或磺基的情況下，還可以與鹼形成鹽，例如 金屬或銨鹽，如鹼金屬或鹼土金屬鹽，例如鈉、鉀、鎂或鈣鹽，或者可以 與氨或適宜的有機胺如叔單胺，例如三乙胺或三(2-羥基乙基)胺或雜環鹼， 例如N-乙基-哌咬或N,N'-二甲基哌，秦形成銨鹽。
當在相同的分子中存在鹼性基團和酸性基團時，式I的化合物也可以 形成內鹽。
對於分離或純化而言，還可以使用不可藥用的鹽，例如苦味酸鹽或高 氯酸鹽。對於治療應用而言，僅使用可藥用的鹽或游離化合物(當以藥物制 劑的形式應用時)，並且因此優選這些物質。
由於游離形式的新型化合物和其鹽形式(包括可用作中間體，例如在所 述新型化合物的純化或鑑定中作為中間體的鹽)之間的密切聯繫，因此在上 下文中任何時候涉及游離化合物時，應當清楚的是，在適宜和方便時，其 也指相應的鹽。
在於2004年1月15日公開的WO 04/005281中公開了一些式I範圍 中的化合物以及其製備方法，該文獻引入到本申請中作為參考。 一種優選 的化合物是式(II)的4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基氨基I-7V-[5-(4-甲基 -lH-咪唑-l-基)-3-(三氟甲基)苯基l苯曱醯胺以及其可藥用的鹽 對於該嘧!^氨基苯甲醯胺衍生物化合物而言，在特定地給出引用專 利申請或科技出版物的各種情況中，這些公開物的終產物、藥物製劑以及 其權利要求書的主題物質都被引入到本申請中作為參考。
用代號、通用名或商品名確定的活性劑的結構可以得自標準綱要"默克
索引(The Merck Index)"的現行版本或者得自資料庫，例如Patents International (例如IMS World Publications)。其相應內容在這裡被引入作 為參考。
現在已經令人吃驚地發現， 一些嘧咬基氨基苯甲醯胺衍生物具有治療 性質，該性質特別是可使其用作PDGFRa (血小板衍生生長因子a，也被 縮寫為PDGRA)的抑制劑，並且尤其是使其可用於治療和預防 FIPlLl-PDGFRa-誘導的疾病如全身性肥大細胞增多症。
上下文所用的FIPlLl-PDGFRa是基因FIP1L1 (FIP1樣l)與 PDGFRa的融合產物的命名。
因此，本發明涉及嘧啶基氨基苯曱醯胺衍生物用於製備治療 FIPlLl-PDGFRa-誘導的全身性肥大細胞增多症、或者與FIPLl-PDGFRa 或活化PDGFRa的相似突變有關的其它疾病的藥物的應用。
全身性肥大細胞增多症(SM)包括惰性SM、侵襲性SM、伴有血液學 非肥大細胞疾病的SM和肥大細胞白血病。
在另 一個實施方案中，本發明涉及嘧啶基氨基苯甲醯胺衍生物用於制 備治療過敏性鼻炎、變應性皮炎、藥物過敏或食物過敏、血管性水腫、蕁 麻滲、嬰兒猝死症候群、支氣管肺麴黴病、多發性硬化或肥大細胞增多症，
尤其是用於治療過敏性鼻炎、變應性皮炎、藥物過敏或食物過敏、血管性 水腫、蕁麻疹、嬰兒猝死症候群、支氣管肺麴黴病、多發性硬化或對伊馬
替尼(imatinib)具有耐藥性的肥大細胞增多症的藥物組合物的應用。
這裡所用的術語"過敏性鼻炎"指的是鼻黏膜的任何過敏反應。該類過 敏反應例如可以常年發生，例如春季結膜炎，或者可以季節性發生，例如 花粉熱。
這裡所用的術語"變應性皮炎，，尤其是指特應性皮炎、過敏性接觸性皮 炎和溼滲性皮炎，但是也包括例如脂溢性皮炎、扁平莒蘚、蕁麻瘮和痤痴。 這裡所定義的特應性皮炎是一種在具有對瘙氧的皮膚閾值降低的遺傳因素 個體中觀察到的慢性炎性皮膚病。其特徵主要在於十分癢，從而導致了抓 和摩擦，其接下來又產生了典型的溼瘮損害。這裡所定義的過敏性接觸性 皮炎是一種由於對各種物質產生變應性致敏的皮炎形式，所述物質是在由 於之前與其接觸而對變應原具有獲得性超敏反應的患者的皮膚中產生炎性 反應的物質。
這裡所用的術語"藥物過敏或食物過敏"指的是由藥物或攝取的抗原， 如，例如，草莓、牛奶或蛋類引起的過敏反應。
術語"支氣管肺麴黴病"指的是肺的麴黴感染。
這裡所用的術語"肥大細胞增多症，，指的是全身性肥大細胞增多症，例 如肥大細胞瘤，並且還指犬肥大細胞贅生物。肥大細胞增多症是一種具有 有限的治療選擇並且通常預後差的骨髓組織增生病症。已經將肥大細胞增 多症的發病機理歸因於受體酪氨酸激酶KIT的組成活化。對於大部分肥大 細胞增多症患者而言，KIT的這種失控的酪氨酸激酶活性是由於帶來體外 和體內伊馬替尼或曱磺酸伊馬替尼耐藥性的蛋白(D^6V)的816密碼子中 的突變產生的，甲磺酸伊馬替尼以Gleevec⑧的名稱在美國進行銷售或者以 Glivec⑧的名稱在其它地方進行銷售。
肥大細胞在這裡所述的變應性病症中以原發性效應器細胞的形式起著 重要作用。抗原-特異性IgE-介導的肥大細胞脫粒導致了隨後化學介質和許
多細胞因子的釋放和白三烯合成。此外，在多發性硬化的發病機理中也涉 及肥大細胞。
肥大細胞贅生物既發生於人又發生於動物。對於狗而言，肥大細胞贅
生物即所謂的肥大細胞瘤，並且這種疾病^L常見，佔犬胂瘤的7%-21%。 必需注意人肥大細胞增多症和犬肥大細胞贅生物之間的區別，前者通常是 短暫的或惰性的，而後者的行為不可預知並且常常是侵襲性的和轉移性的。 例如，人孤立性肥大細胞瘤常常不轉移；相反，Hottendorf & Nielsen (1969) 在對用938條狗進行的46份公開的腫瘤報導進行評估後發現，有50 %的犬 肥大細胞瘤為惡性的。
寵物群體中的癌症是一種自發性疾病。寵物主人為了延長其動物生命 的質量，常常在私人連鎖(referral)獸醫醫院和鄉下的獸醫教學醫院尋求獸 醫腫瘤學專家的特別護理和治療。動物癌症患者的治療方式與人相似，包 括手術、化療、；故療和生物療法。估計在美國有四千二百萬條狗和大約兩 千萬隻貓。對癌症發生率進行粗略估計，對於狗而言，每年可以新診斷出 大約4百萬例癌症，並且在貓中確診的數字相似。
狗的皮膚肥大細胞腫瘤是一種常見的問題。大多數肥大細胞腫瘤是良 性的並且可以用簡單的切除來治癒；但是，如果其復發或者轉移至較遠部 位，則治療選擇4艮有限。對復發損害而言，治療選擇可包括外部光束輻射 治療。對於遠端的轉移瘤或散播性疾病而言，已經證明使用包含 Lomustine⑧和長春鹼的化療方案具有一些益處。肥大細胞腫瘤轉移瘤的部 位包括皮膚、局部淋巴結、脾、肝和骨髓。
在許多肥大細胞系中探測到 一些導致KIT組成活化的觀察結果表明在 肥大細胞增多症的發病機理中涉及KIT受體。例如，在長期人肥大細胞白 血病系(HMC-1)和兩種齧齒動物肥大細胞系的相應密碼子中出現了 一種造 成Val取代磷酸轉移酶結構域中的Asp816和受體自活化的人c-KIT中的 點突變。此外，在一些人肥大細胞增多症病例中已經在原位鑑定出了這種 活化突變。在KIT的細胞內近膜(juxtamembrane)區域中已經發現了兩種
其它活化突變，即人HMC-1肥大細胞系中的Val560Gly取代，和被成為 FMA3的齧齒動物肥大細胞系中的七個胺基酸缺失(Thr573-His579)。
本發明更特定地涉及嘧^&氨基苯曱醯胺衍生物用於製備治療全身性 肥大細胞增多症的藥物的應用。
在另 一個實施方案中，本發明提供了 一種治療全身性肥大細胞增多症 的方法，其包括給需要該類治療的哺乳動物施用治療有效量的嘧^氨基 苯甲醯胺^f生物或其可藥用的鹽或前體藥物。
本發明優選地提供了 一種對患有全身性肥大細胞增多症的哺乳動物， 尤其是人進行治療的方法，其包括給需要該類治療的哺乳動物施用 FIPlLl-PDGFRa抑制量的4-曱基-3-[4-(3-吡啶基)-2-嗜基氨 基_]\-[5-(4-曱基-lH-咪唑-l-基)-3-(三氟甲基)苯基]苯甲醯胺(化合物(II))或 其可藥用的鹽。
在本說明書中，術語"治療"包括預防性或防止性處理以及治癒性或疾 病的抑制性處理，包括對有患病風險或者懷疑已經患病的患者進行的處理 以及對患病患者進行的處理。這種術語還包括進行延緩疾病進程的處理。
這裡所用的術語"治癒，，指的是能夠有效治療正在進行的涉及全身性肥 大細胞增多症的疾病事件。
術語"預防性，，指的是防止涉及全身性肥大細胞增多症的疾病的發作或 復發。
這裡所用的術語"延緩進程"指的是在待治療疾病發作之前或發作的早 期給予患者活性化合物，其中，在所述患者中診斷出了例如相應疾病的前 期形式，或者所述患者正在進行一種醫學治療或者正在經歷一種由意外事 件導致的情況，在這種情況下其可能形成相應的疾病。
這種無法預見的性質意味著嘧咬基氨基苯曱醯胺衍生物特別適用於制 造治療全身性肥大細胞增多症的藥物。
對於患有全身性肥大細胞增多症的患者而言，這種作用在臨床上特別 相關。
為了證明所述嘧咬基氨基苯甲醯胺衍生物特別適用於治療全身性肥大 細胞增多症並具有良好的治療窗和其它優點，用本領域技術人員已知的方 式進行一些臨床試驗。
量取決於多種因素，包括所治療的主體、所治療病症的性質和嚴重程度、 給藥方式。式I的化合物可以通過任何途徑來進行給藥，包括口服給藥、 胃腸外給藥，例如腹膜內、靜脈內、肌內、皮下、瘤內或直腸給藥、或腸
內給藥。式I的化合物優選地被口服給藥，優選地以1-300 mg/kg體重的 日劑量進行給藥，或者對於大多數較大的靈長目動物而言，使用50-5000， 優選500-3000 mg的日劑量。優選的口服日劑量為1-75 mg/kg體重，或者， 對於大多數較大的靈長目動物而言，使用10-2000 mg的日劑量，其可以 以單劑量的形式進行給藥或者可以被分割成多個劑量，例如可以每天給藥 兩次。
開始通常給予小劑量，然後逐漸增加劑量直至達到所確定的對於進行 治療的主體而言最佳的劑量。劑量的上限受副作用的限制並且可以通過對 進行治療的主體進行試驗來確定。
式I的化合物可以與一種或多種可藥用的載體和任選的一種或多種其 它常規藥用助劑進行聯合，並且可以以片劑、膠嚢、嚢片(caplets)等形式 被腸內給藥，例如口服給藥，或者可以以可注射的無菌溶液或混懸液形式 被胃腸外給藥，例如腹膜內或靜脈內給藥。所述腸內和胃腸外組合物可以 用常規方法來進行製備。
所述嘧啶基氨基苯甲醯胺衍生物可以單獨使用或者與至少一種用於這 些病狀的其它藥用活性化合物聯合使用。這些活性化合物可以在相同的藥 物製劑中進行聯合或者可以以聯合製劑的"套裝藥盒"的形式進行聯合，在 該意義上，所述組合伴侶可以被獨立給藥或者可以通過使用具有不同數量 組合伴侶的不同固定組合來進行給藥，即可以被同時給藥或者在不同的時 間點進行給藥。然後，所述套裝藥盒的各部分例如可以被同時給藥或按時 間順序交錯給藥，即可以在不同的時間點並以相等或不同的時間間隔將套
裝藥盒的任何一部分進行給藥。所列舉的用於與嘧咬基氨基苯曱醯胺4汙生 物聯合使用的化合物的非限制性實例有細胞毒性的化療藥物，如阿糖胞苷、
柔紅黴素、多柔比星、環磷醯胺、VP-16或伊馬替尼等。此外，還可以將 嘧啶基氨基苯甲醯胺衍生物與預期將產生顯著協同作用的其它信號轉導抑 製劑或其它靶向於致癌基因的藥物聯合。
本發明還涉及用於治療上文所述疾病和病症的上文所述的嘧"^氨基 苯甲醯胺衍生物與伊馬替尼的組合。該類組合的給藥可以同時進行，例如 可以以固定的聯合藥物組合物或製劑的形式進行，或者可以相繼進行或者 按時間順序交錯進行。目前，嘧咬基氨基苯甲醯胺衍生物優選以上文所述 的劑型形式進4亍給藥，伊馬替尼優選以其GLEEVEC (在US)/GLIVEC (在歐洲)的市售形式進行給藥，並且其劑量為這些劑型所建議的劑量。
用上述聯合進行的全身性肥大細胞增多症的治療可以是所謂的 一線治 療，即在事先不進行任何化療等的情況下對新確診的疾病進行治療，或者 其也可以是所謂的二線治療，即根據疾病的嚴重程度或階段以及患者的整 體情況等，在事先用伊馬替尼或嘧啶基氨基苯曱醯胺衍生物進行治療後對 所述疾病進4於治療。
用下面實施例的結果來說明用於治療全身性肥大細胞增多症的嘧咬基 氨基苯曱醯胺衍生物的效力。這些實施例說明了本發明，但並不以任何方 式限制本發明的範圍
IL-3非依賴性細胞增殖試驗
用得自Perkin Elmer Life Sciences (目錄號6016947)的發光ATP檢測 分析試劑盒ATPLite 根據供應商的指導來測定化合物對細胞活力和增殖 的影響。這種試驗系統是以ATP與加入的螢光素酶和D-螢光素的反應所 產生的光(螢光)為基礎的。
將在RPMI 1640 (Invitromex，登記號L0501) 、 10%肽牛血清 (Amimed，登記號2-01F86-I)、 2 mM L-谷醯胺(Gibco)混懸液中生長的 Ba/F3 FIP畫PDGFRou Ba/F3 kit D-816-V、 Ba/F3 kit D-816-Y、 Ba/F3 kit
delVV、 Ba/F3 kit R-634-W細胞系以10000個細胞/孔的密度接種到黑色 96-孔組織培養板(Packard)中，每孔加入50 完全培養基，然後立即向 其中以50 nL/孔的數量加入2倍濃度的化合物的兩倍系列稀釋物(一式兩 份)。用沒有化合物的細胞作為對照並且用沒有細胞的培養基來測定該試驗 的背景信號。在將其培養70小時(37。C，5。/。C02)後，通過以每孔50pL的
其在軌道平板震蕩器中在700rpm下振搖5分鐘。隨後，向其中加入50pL 底物溶液(螢光素酶和D-螢光素)並且在振搖5分鐘和將該板在黑暗中適應 10分鐘後，用Packard TopCount來測量光發射。
以細胞培養物的總生長抑制(TGI)的形式來測定所述化合物的活性並 且其計算如下:在減去背景信號後，將所得對照細胞的信號作為100%。將 化合物的作用表示為對照信號的降低百分比形式。通過圖形外推法來由其 劑量響應曲線確定其TGI50值。
GIST882是一種表達活化KIT突變(外顯子13， K-642-E)的人胃腸道間 質瘤(GIST)細胞系(Tuveson DA， Willis NA， Jacks T， Griffin JD， Singer S， Fletcher CD， Fletcher JA， Demetri GD，胃腸道間質瘤c-KIT癌蛋白的 STI571滅活生物學和臨床含義(STI571 inactivation of the gastrointestinal stromal tumor c-KIT oncoprotein: biological and clinical implications), Oncogene, 2001 Aug 16; 20(36): 5054-8)。將這些GIST882細胞在補加了 15% FCS和2 mM谷醯胺(Gibco)的RPMI 1640 (Invitromex，目錄號 L0501)中進行培養。在對這些細胞進行接種前，將細胞培養燒瓶和96孔組 織培養板用位於超純水中的1.5 %明膠溶液在37 °C下處理30-60分鐘以改 善粘附和細胞生長。在使用前，通過加熱(高壓滅菌器)對該明膠(BIORAD， EIA純度試劑，# 170-6537)進行滅菌。
將GIST882細胞以10000個細胞/孔的密度接種到黑色96-孔組織培養 板(Packard)中的50 jtL完全培養基中並將其培養一天以使這些細胞附著。 一式兩份地向其中加入2倍濃度的化合物的兩倍系列稀釋物(終體積: lOO^L/孔)。用沒有化合物的細胞作為對照並且用沒有細胞的培養基來測定
該試驗的背景信號。在將其培養70小時(37。C， 5。/。C02)後，通過以每孔 50jaL的數量加入哺乳動物細胞溶解溶液(試劑盒中提供的)來使這些細胞溶 解並將其在軌道平板震蕩器中在700 rpm下振搖5分鐘。隨後，向其中加 入50pL底物溶液(螢光素酶和D-螢光素)並且在振搖5分鐘和將該板在黑 暗中適應IO分鐘後，用Packard TopCoimt來測量光發射。
以細胞培養物的總生長抑制(TGI)的形式來測定所述化合物的活性並 且其計算如下:在減去背景信號後，將所得對照細胞的信號作為100%。將 化合物的作用表示為對照信號的降低百分比形式。通過圖形外推法來由其 劑量響應曲線確定其TGI50值。
化合物(II)抑制GIST882細胞增殖的平均IC50值<200 nM。
用於測定對細胞中Kit自磷酸化作用的影響的試驗
用捕獲ELISA來測定得自細胞——未進行處理或用化合物進行了處 理的細胞——的溶胞產物中細胞耙點的磷酸化狀態。使粘附細胞在96-孔平 底組織培養板中進行生長至接近融合。將在混懸液中進行生長的細胞以每 孔100000-150000個細胞的密度進行接種。在用化合物系列稀釋液進行處 理後，將這些細l包用PBS洗滌一次，然後用100至150 溶解緩沖液 (50mM Tris/HCl， pH 7.4, 150 mM氯化鈉，5 mM EDTA， 1 mM EGTA， 1 % NP-40， 2 mM原釩酸鈉，1 mM PMSF， 50 pg/mL抑酶肽和80 jig/mL 亮肽素)使細胞溶解。立即使用該細胞溶解產物或者將其儲存在-20。C下。 將50 pL該溶胞產物轉移到之前用得自Diaclone (# 854.510.000)的單克隆 抗畫CD117抗體塗布的黑色ELISA板(NUNC-Maxisorp,目錄號Nr.437111) 中。為了進行塗布，將該抗體用PBS稀釋並將其與所述板一起在4。C下培 養一夜(50 jiL/孔)。使用用鹼性磷酸酯酶(AP)(得自Zymed的PY20 AP)標 記的商業化抗-P-Tyr Ab，以1:3000至1:10000 (0.1至0.33照/ml)的終濃度 來探測所捕獲Kit的磷酸化。在取出所述細胞溶解產物後，向其中加入次 級Ab。最後，向其中加入卯^L/孔的化學發光AP底物(得自Applied Biosystems的具有Emerald II的CDPStar RTU (目錄號T2388C))並將其
在室溫下在黑暗中培養45分鐘。將這些板用Packard TopSealTM-A板密 封器(目錄號600S1SS)進行密封並通過用Packard Top Count微量培養板 閃爍計數器(Top Count)測量每秒的計數(CPS)來對器螢光進行定量。
計算用未進行處理的細胞的溶胞產物獲得的ELISA-讀數(CPS)和試驗 -背景(全部組分，但是沒有細胞溶解產物)讀數之間的差異並且將其作為反 映存在於這些細胞中的組成磷酸化的Kit蛋白的100%形式。將這些化合 物對該Kit激酶活性的活性表示為Kit磷酸化降低百分比的形式。由其劑 量響應曲線通過圖形外推法來測定其IC50和IC卯值。
實施例I
i殳計一種II期開放標記的研究來對以400 mg的劑量每天口服兩次給 藥的化合物(II)的安全性和效力進行評估。對符合特定疾病標準並具有進行 治療的臨床跡象的SM患者進行登記。這些結果是以這項研究中前23名患 者的初步數據為基礎的。結果:其平均年齡為49 (範圍為33-78)歲並且SM 確診的平均時間為27 (範圍為1至292)個月。對於具有有效數據的患者而 言，17名患者中有13名在骨髓細胞中具有一種c-kitD816V突變。與化合 物(II)的平均接觸時間為144天。18名患者(78%)不間斷地進行了治療；5 名患者(22%)終止了治療，其中3名患者(13%)因為不利事件而終止治療， 2名患者(9%)贊成撤出。以血清類胰蛋白酶、骨髓肥大細胞計數和臨床症 狀的改善為基礎，三名患者(13%)才艮告具有響應(2名不完全的減輕和1名 微小響應)。3名響應患者中的2名獲得了基礎突變數據並且顯示了 c-kit D8WV突變。這些數據表明化合物(II)具有臨床活性並且對於SM患者而 言具有可接受的安全性和耐受性。
權利要求
1.式(I)的嘧啶基氨基苯甲醯胺衍生物以及該類化合物的N-氧化物或可藥用的鹽用於製備治療或預防全身性肥大細胞增多症的藥物的應用其中R1表示氫、低級烷基、低級烷氧基-低級烷基、醯氧基-低級烷基、羧基-低級烷基、低級烷氧基羰基-低級烷基或苯基-低級烷基；R2表示氫、任選地被一個或多個相同或不同的基團R3取代的低級烷基、環烷基、苯並環烷基、雜環基、芳基、或包含零、一、二或三個環氮原子和零或一個氧原子和零或一個硫原子的單-或二環雜芳基，這些基團在各種情況中未被取代或者被單-或多取代；並且R3表示羥基、低級烷氧基、醯氧基、羧基、低級烷氧基羰基、氨基甲醯基、N-單-或N，N-二取代的氨基甲醯基、氨基、單-或二取代的氨基、環烷基、雜環基、芳基、或包含零、一、二或三個環氮原子和零或一個氧原子和零或一個硫原子的單-或二環雜芳基，這些基團在各種情況中未被取代或者被單-或多取代；或者其中R1和R2一起表示任選地被低級烷基、環烷基、雜環基、苯基、羥基、低級烷氧基、氨基、單-或二取代的氨基、氧代、吡啶基、吡嗪基或嘧啶基單-或二取代的具有四、五或六個碳原子的亞烷基；具有四或五個碳原子的苯亞烷基；具有一個氧和三或四個碳原子的氧雜亞烷基；或者具有一個氮和三或四個碳原子的氮雜亞烷基，其中的氮未被取代或者被低級烷基、苯基-低級烷基、低級烷氧基羰基-低級烷基、羧基-低級烷基、氨基甲醯基-低級烷基、N-單-或N，N-二取代的氨基甲醯基-低級烷基、環烷基、低級烷氧基羰基、羧基、苯基、被取代的苯基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基所取代；R4表示氫、低級烷基或滷素。
2. 如權利要求l所述的應用，其中所述的全身性肥大細胞增多症對伊馬替 尼具有耐藥性。
3. 如權利要求1或2中任意一項所述的應用，其中所述的式(I)的化合物是 式(II)的4-曱基-3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基氨基卜7V-[5-(4-曱基-lH-咪唑-l-基)-3-(三氟甲基)苯基I苯甲醯胺以及其N-氧化物或可藥用的鹽。
4. 如權利要求1-3中任意一項所述的應用，其中所述的全身性肥大細胞增多 症與FIPlLl-PDGFRa有關。
5. 選自式(I)化合物以及該類化合物的N-氧化物或可藥用的鹽的嘧咬基氨 基苯甲醯胺衍生物用於治療或預防全身性肥大細胞增多症的應用 formula see original document page 4其中&表示氫、低級烷基、低級烷氧基-低級烷基、醯氧基-低級烷基、羧 基-低級烷基、低級烷氧基羰基-低級烷基或苯基-低級烷基；R2表示氫、任選地被一個或多個相同或不同的基團R3取代的低級烷 基、環烷基、苯並環烷基、雜環基、芳基、或包含零、一、二或三個環氮 原子和零或一個氧原子和零或一個硫原子的單-或二環雜芳基，這些基團在 各種情況中未被取代或者被單-或多取代；並且Rs表示羥基、低級烷氧基、醯氧基、羧基、低級烷氧基羰基、氨基曱 醯基、N-單-或N，N-二取代的氨基曱醯基、氨基、單-或二取代的氨基、環 烷基、雜環基、芳基、或包含零、一、二或三個環氮原子和零或一個氧原 子和零或一個硫原子的單-或二環雜芳基，這些基團在各種情況中未被取代 或者被單-或多取代；或者其中&和R2—起表示任選地被低級烷基、環烷基、雜環基、苯 基、羥基、低級烷氧基、氨基、單-或二取代的氨基、氧代、吡咬基、吡溱 基或嘧啶基單-或二取代的具有四、五或六個碳原子的亞烷基；具有四或五 個碳原子的苯亞烷基；具有一個氧和三或四個碳原子的氧雜亞烷基；或者 具有一個氮和三或四個碳原子的氮雜亞烷基，其中的氮未被取代或者被低 級烷基、苯基-低級烷基、低級烷氧基羰基-低級烷基、羧基-低級烷基、氨 基曱醯基-低級烷基、N-單-或N，N-二取代的氨基甲醯基-低級烷基、環烷基、 低級烷氧基羰基、羧基、苯基、被取代的苯基、吡咬基、嘧咬基或吡溱基 所取代；R4表示氫、4氐級烷基或面素。
6.如權利要求4所述的應用，其中所述的嘧^^氨基苯甲醯胺衍生物是式 (II)的化合物或其N-氧化物或可藥用的鹽。
7. 用於治療伴有FIPlLl-PDGFRa-基因融合的全身性肥大細胞增多症的如 權利要求5或6中任意一項所述的應用。
8. —種對患有全身性肥大細胞增多症的哺乳動物進行治療的方法，其包括 給需要該類治療的哺乳動物施用FIPlLl-PDGFRa-誘導抑制量的式(II)的 化合物或其N-氧化物或可藥用的鹽。
9.一種用於治療FIPlLl-PDGFRa-誘導的全身性肥大細胞增多症的藥物制 劑，其包含式(II)的化合物
10.—種對患有全身性肥大細胞增多症的包括人在內的哺乳動物進行治療 的方法，其包括給需要該類治療的哺乳動物施用式(II)的化合物或其N-氧化物或可藥用的鹽。
全文摘要
本發明涉及嘧啶基氨基苯甲醯胺衍生物用於製備治療全身性肥大細胞增多症的藥物的應用。
文檔編號A61K31/506GK101171013SQ200680014943
公開日2008年4月30日 申請日期2006年5月1日 優先權日2005年5月2日
發明者D·法布羅, J·梅斯坦, L·埃蘭德, P·W·曼雷 申請人:諾瓦提斯公司