放射性標記的納米顆粒的製作方法

2023-10-05 00:17:04 1

專利名稱：放射性標記的納米顆粒的製作方法
技術領域：
本發明涉及具有與其非共價鍵合的放射性同位素的放射性標記的納米顆粒。所述放射性納米顆粒可用作放射性藥物。還公開了所述放射性標記的納米顆粒的試劑盒及製備方法。

背景技術：
納米顆粒(NPs)是指具有1-1000nm的直徑的固體膠狀粒子。在先的關於放射性標記的NPs文獻描述了放射性核的離子或鹽在NP形成期間、或經由放射性標記單體的聚合而被俘獲至NP基質中。這些方法的缺點是放射性標記從一開始即存在，因此所有步驟需要放射性處理技術，將操作者暴露在放射劑量下，增加了放射性浪費的量。另一問題是在製備放射性標記NP期間，發生放射性衰變，導致了成像力的損失。由於NP的製備可能需要幾個小時，因此問題是放射性核的半衰期為約數小時或數分鐘，而不是數天。
已用99mTc和125I標記了NPs，但每種情況下需要的NP的類型是非常特定的，並且放射性核的摻入不是非常高[Ghanem等，Int.J.Appl.Radiat.Isot.，44，1291-1224(1993)與Roland等，J.Pharm.Sci.，78，481-484(1989)]。納米顆粒還可以通過共價結合至雙官能螯合劑而被標記[如上Ghanem等]。由於空間排列的原因，通常在螯合劑與NP之間使用連接物，其增加了全合成的難度，並且取決於NP的類型，連接物具有有限的適應性。
WO 02/32404公開了具有核心的納米顆粒，該核心是一個半導體或連接至多個碳水化合物配體上的金屬。該核心可以被NMR活性材料如釓或銪摻雜用於體外或體內應用。可以對碳水化合物進行同位素標記以利於探測納米顆粒。
WO2005/018681公開了與體內生物靶向配體有關的納米放射性藥物。所述納米顆粒是通過在水介質中還原放射性核來製備的，使得放射性同位素從一開始即存在。
US2005/0019257A1公開了具有表面活性劑塗層的放射性銅磁性納米顆粒。脂肪酸是優選的表面活性劑。
WO2005/014051公開了水包油乳劑，其包含脂質/表面活性劑塗層的納米顆粒，由油類似物化合物結合至原子數(Z)大於36的原子上形成。
本發明 在核藥物中使用納米顆粒以釋放放射核用於成像或治療，所用的NP的性質為調節或以放射核在體內的生物分布為靶向。這可以通過調節定義NP如尺寸、表面電荷、基質、表面塗層、疏水性核與包含的靶向媒介物的參數來實現。現有技術方法中用於調節這些物理化學特性的方法和需要共價連接生物靶向部分以及放射標記提出了非常艱巨的挑戰。
本發明提供了放射標記的NPs，其中非放射性地合成NP作為第一步。以該方式，NP的特性(尺寸、表面電荷和表面塗層)可以是多樣的，不必考慮與放射性同位素存在有關的因素。作為任選的第二步，生物靶向部分可以被引入，允許相同的NP用於不同特定的體內靶向用途。在最後一步中，採用高百分比的摻入來放射標記NP，以允許選擇放射核的方式。這樣的系統提供了前所未有的靈活性，簡化了放射標記的重要性，並使非放射性試劑盒可以用於製備NP放射物質的用途。
發明詳述 在第一種實施方案中，本發明提供了一种放射標記的納米顆粒，其包含納米顆粒，該納米顆粒具有 (i)含有銅、銀、鉑或金或其組合的金屬核心； (ii)圍繞所述核心的親脂性塗層，其含有多個結合在所述核上的C2-25有機硫醇其中所述硫醇可以是相同的或不同的，並且可以呈還原(即硫醇)形式或呈氧化形式(即二硫化物)或其組合； 其用至少一種非共價結合至所述納米顆粒上的放射性同位素來標記。
術語「納米顆粒」是指近圓球狀、尺寸為1-1000nm的粒子。
術語「金屬核心」是指固體金屬膠體粒子，其形成了納米顆粒的最內層。合適的核心材料是貴金屬，尤其是銅、銀、金或鉑或其組合。優選的核心材料是金和銀，最優選的材料是金。由一種或多種銅、銀、鉑或金的混合物形成的納米顆粒核心也被設想用於本發明中。當應用這樣的混合物時，優選的實施方案是使用合金。這樣的合金包含Au/Ag、Au/Cu和Au/Ag/Cu。本發明的納米顆粒的金屬核心優選非放射性的。
核心的平均直徑優選為0.5-100nm，更優選為1-50nm，最優選為1-20nm。平均直徑可以採用本領域熟知的技術如透射電子顯微鏡進行測量。
術語「有機硫醇」是指具有共價結合至烷基或芳基或雜芳基的碳原子上的巰基(-SH)的化合物。本發明的有機硫醇可以呈還原形式(即硫醇)或氧化形式(即二硫化物)或其組合存在。優選地，有機硫醇以還原形式存在。當使用二硫化物時，預期氧化還原平衡或原位還原產生了相應的硫醇或二硫醇，其是優選的穩定納米顆粒的物種。
術語「非共價地鍵合的」是指由於在有機介質或水介質中的離子對效應、氫鍵、陰離子-π芳族或路易斯酸-鹼相互作用而產生的鍵合。這是與現有技術的涉及共價鍵合如金屬配位化合物的途徑相比較而言的。本發明納米顆粒的性質是放射性同位素是在金屬核心的外面，既可以與金屬核心的表面結合，也可以與親脂性塗層結合。
術語「生物靶向部分」是指3-100個肽或肽類似物，其可以是線性肽或環狀肽或其組合、酶底物、拮抗劑或抑制劑、合成的結合受體的化合物、蛋白質或蛋白質片段、低(聚)核苷酸、或低聚-DNA片段或低聚-RNA片段。
術語「環狀肽」是指5-15個胺基酸序列，其中兩個末端胺基酸通過共價鍵結合在一起，所述共價鍵可以是肽鍵或二硫鍵或合成的非肽鍵如硫醚、磷酸二酯、二矽氧烷或脲烷(urethane)鍵。術語「胺基酸」是指L-胺基酸或D-胺基酸、胺基酸類似物或胺基酸模擬物，其可以是光學純的，即一種對映體，因而是手性的，或對映體的混合物。優選地，本發明的胺基酸是光學純的。術語「胺基酸模擬物」是指合成的自然出現的胺基酸的類似物，其是等排物，即已被設計為模擬天然化合物的空間排列核電子結構。這樣的等排體是本領域技術人員熟知的，並包括但不限於縮肽、逆-反肽、硫代醯胺、環烷烴或1，5-二取代的四唑[參見MGoodman，Biopolymers，24，137，(185)]。
用於本發明的合適的肽包含 -促生長素抑制素、奧曲肽和類似物， -結合ST受體的肽，其中ST是指由E.coli和其它微生物生產的熱穩定的毒素； -層粘連蛋白片段如YIGSR、PDSGR、IKVAV、LRE和KCQAGTFALRGDPQG， -N-甲醯基肽，用於白細胞積累的靶向位點， -血小板因子4(PF4)及其片段， -含有RGD(Arg-Gly-Asp)的肽，其可以例如靶向血管生成素[R.Pasqualini等，Nat Biotechnol.1997，6月；15(6)542-6]；[E.Ruoslahti，Kidney Int.1997，5月；51(5)1413-7]。
-α2-抗血纖維蛋白酶、纖維結合素或β-酪蛋白、纖維蛋白原或血小板反應素的肽片段。α2-抗血纖維蛋白酶、纖維結合素、β-酪蛋白、纖維蛋白原和血小板反應素的胺基酸序列可以在下列文獻中找到α2-抗血纖維蛋白酶前體[M.Tone等，J.Biochem，102，1033，(1987)]；β-酪蛋白[L.Hansson等，Gene，139，193，(1994)]；纖維結合素[A.Gutman等，FEBS Lett.，207，145，(1996)]；血小板反應素-1前體[V.Dixit等，Proc.Natl.Acad.Sci.，美國，83，5449，(1986)]；R.F.Doolittle，Ann.Rev.Biochem.，53，195，(1984)； -血管緊張素底物或抑制劑的肽，例如 血管緊張素II Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe(E.C.Jorgensen等，J.Med.Chem.，1979，第22卷，9，1038-1044) [Sar，Ile]血管緊張素IISar-Arg-Val-Tyl-Ile-His-Pro-Ile(R.K.Turker等，Science，1972，177，1203). 血管緊張素IAsp-Arg-Val-Tyl-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu. 本發明優選的肽包含抗血纖維蛋白酶或血管緊張素II肽。抗血纖維蛋白酶肽包含取自N-末端的胺基酸序列 (i)α2-抗血纖維蛋白酶 即NH2-Asn-Gln-Glu-Gln-Val-Ser-Pro-Leu-Thr-Leu-Thr-Leu-Leu-Lys-OH或其變體，其中一種或胺基酸已經被交換、添加或去掉，如 NH2-Asn-Gln-Glu-Gln-Val-Ser-Pro-Leu-Thr-Leu-Thr-Leu-Leu-Lys-Gly-OH， NH2-Asn-Gln-Glu-Ala-Val-Ser-Pro-Leu-Thr-Leu-Thr-Leu-Leu-Lys-Gly-OH， NH2-Asn-Gln-Glu-Gln-Val-Gly-OH或 (ii)酪蛋白 即Ac-Leu-Gly-Pro-Gly-Gln-Ser-Lys-Val-Ile-Gly。
本發明的合成肽可以由傳統的固相系統獲得，如在P.Lloyd-Williams，F.Alericio和E.Girald，肽與蛋白質合成的化學方法(Chemical Approaches to Synthesis of Peptides and Proteins，CRC出版社，1997年中描述的那樣。
合適的酶底物、拮抗劑或抑制劑包含葡萄糖和葡萄糖類似物如氟去氧葡萄糖、脂肪酸，或彈性蛋白酶、血管緊張素II或金屬蛋白酶抑制劑。優選的非肽血管緊張素II拮抗劑是洛沙坦。
合適的合成的結合受體化合物包含雌二醇、雌激素、孕酮、黃體酮和其它類固醇激素；多巴胺D-1或D-2受體配體，或多巴胺遞質如託品烷；和5-羥色胺受體配體。
生物靶向部分優選分子量小於15,000，最優選小於10,000，理想的小於5,000。優選的生物靶向部分是肽、蛋白質或酶底物、酶拮抗劑或酶抑制劑。
本發明的有機硫醇優選地不包含碳水化合物。術語「碳水化合物」是指多糖、寡糖或單糖。
本發明的有機硫醇優選地包含一種或多種結合陰離子或結合陽離子的取代基。合適的「結合陰離子的取代基」即可以是中性的也可以帶正電荷的，並且可以作為氫鍵供體基團或以非共價鍵方式靜電結合陰離子。它們包含下列官能團取代基醯胺、脲、硫脲、銨、胍咪唑、苯並咪唑、脒、硫脲和吡咯。
某些元素，如硼錫、矽、汞也可以作為路易斯酸陰離子受體。在一些情況下，陽離子(如Na+)可以與陰離子共結合，因此短語「結合陰離子的取代基」不排除一些陽離子與陰離子一起存在。結合陰離子的取代基非共價地結合放射性同位素陰離子(如碘離子或高鎝酸根)以這樣的方式使得陰離子被穩定地結合，因此抵抗如反覆用溶劑洗滌除去或在體內或體外血漿蛋白的挑戰。
合適的「結合陽離子的取代基」即可以是中性的也可以是帶負電荷的，並且可以作為路易斯酸供體基團或以非共價鍵方式靜電結合陽離子。它們包含下列官能團取代基聚醚(冠醚大環、開鏈類似物或其組合物)、穴狀配體、杯芳烴或醌。結合陽離子的取代基非共價地結合放射性同位素陽離子(如201Tl作為Tl+或其它放射性金屬離子)，以這樣的方式使得陽離子穩定地結合，因此抵抗如反覆用溶劑洗滌除去或在體內或體外血漿蛋白的挑戰。
優選的帶正電荷的結合陰離子的取代基是式-ER13+X-的取代基，其中 E是N或P； R1是C1-10烷基，其可以是直鏈或支鏈的；C2-10烷氧基烷基；C2-12芳基或C2-12雜芳基； X是滷素、OH、PF6、H2PO4、硝酸根、C1-8羧酸根或C1-8磺酸根。
當X是C1-8羧酸根時，優選X是乙酸根或苯甲酸根。
尤其優選的有機硫醇是式R2SH的有機硫醇，當以還原形式存在時，或R2S-SR2，當以二硫化物形式存在時，其中R2為C5-24烷基、C5-24芳烷基、或C5-12芳基，並且R2可以任選地被一個或多個結合陰離子的取代基或結合陽離子的取代基取代，如上定義。優選這樣的結合陰離子的取代基或結合陽離子的取代基結合碘離子、高鎝酸根或高錸酸根。如上提及的，所述有機硫醇優選以還原形式存在，即為式R2SH的硫醇。
本發明的放射性同位素是適合用於放射藥物在哺乳動物體內成像的或適合用於放射藥物在哺乳動物體內治療的那些。這類的同位素是本領域中已知的。優選的放射性同位素是99mTc、94mTc、186Re、188Re、123I、124I、125I或131I。放射性同位素的優選化學形式是 (i)用於鎝放射性同位素的高鎝酸根； (ii)用於錸放射性同位素的高錸酸根； (iii)用於碘放射性同位素的碘離子。
其優點是這些是最容易得到的化學形式(如來自99Mo/99mTc放射性同位素發生器)。這意味著放射性同位素可以直接用於放射形標記納米顆粒，無需進行任何進一步的化學反應。這種簡化比現有技術方法具有優勢，其可能包括如使用還原劑或另外的化學加工以取得放射性標記。
本發明優選的納米顆粒被選自季銨鹽、膦鹽、咪唑、脲或其它生物相容性有機陽離子的有機陽離子摻雜。優選地，所述有機陽離子包含C5-C16烷基鏈、最優選C6-C12烷基鏈，C8-C10烷基鏈是尤其優選的。術語「摻雜」是指納米離子包含一定比例的有機陽離子，在它們的組成中合適地以[有機陽離子]∶[有機硫醇]約為1∶5-1∶20，優選1∶8-1∶12，最優選1∶10的摩爾比。當摩爾比為1∶10時，其相當於每NP約1摩爾的有機陽離子。當所述有機陽離子是季銨鹽時，這樣的鹽優選是季銨336氯化物。
本發明的非放射活性納米顆粒可以由Brust等的[JCS，Chem.Commin.，801-802(1994)；同上16550-1656(1995)]的方法獲得。Brust應用二相系統，其中在有穩定性配體，通常烷基硫醇如十二烷硫醇存在下實施AuCl4-的硼氫化鈉還原。由該方法製備的所述納米顆粒在尺寸上略有變化，但是所有的直徑都在10nm以下。摻雜的納米顆粒可以通過將預形成的納米顆粒與所需摩爾比的有機陽離子在合適的溶劑中混合來製備。進一步的細節在實施例5中給出。
本發明非放射活性納米顆粒，其還包含生物靶向部分，可以使用置換反應來製備，即置換NP親脂性塗層存在的硫醇部分。其描述於試驗部分。一些生物靶向部分具有硫醇官能團(如包含半胱氨酸)，從而不必被進一步官能化。在許多情況下，硫醇衍生的生物靶向部分將是必要的。這樣的硫醇衍生化可以通過與2-亞氨基硫雜環戊烷反應來實現，如由Mishra等[Find.Exp.Clin.Pharmacol.，24(10)653-660(2002)和McCall等[Bioconj.Chem.，1(3)222-226(1990)]描述的那樣，或通過用如在實施例中描述的硫辛酸來官能化來實現。硫辛酸方法是優選的，因為其產生了二硫化物衍生物，在金屬表面上形成了螯合的二硫醇，因此能夠更好地置換單齒硫醇。
在第二實施方案中，本發明提供了一种放射性藥物組合物，其包含第一實施方案的多個放射性標記的納米顆粒，其與生物相容性載體一起呈適於哺乳動物施用的形式。「生物相容的載體」是流體，尤其是液體，其中放射性標記的納米顆粒可以被懸浮，使得組合物在生理上是可耐受的，即可以施用於哺乳動物體而無毒性或不當的不適。生物相容性載體適合為可注射的載體液體如無菌無熱原的注射用水、水溶液如鹽水(其可以有利地被平衡，使得注射用的終產品是等滲的)、一種或多種調節張力的物質的水溶液(如具有生物相容性抗衡離子的血漿陽離子鹽)、糖類(如葡萄糖或蔗糖)、糖醇類(如山梨醇或甘露醇)、乙二醇類(如丙三醇)或其它非離子性的多元醇材料(如聚乙二醇、丙二醇等)。優選的生物相容性的載體是注射用無熱原水或等滲鹽水。
這樣的放射性藥物適當地被提供在容器中，所述容器裝配有密封，其適於用皮下注射針刺單個或多個孔(如在上面有折邊隔膜密封蓋)，而保持無菌的完整性。這樣的容器可以含有單個或多個患者的劑量。優選多個劑量容器包含單個體積小瓶(如10-30cm3體積)，其含有多個患者的劑量，由此單個患者劑量可以在製劑的有效使用期期間以不同的時間間隔被取出放入臨床級注射器中以適合臨床情況。預裝滿的注射器被設計為包含單個人劑量，或「單位劑量」，因此，優選是一次性的或其它適於臨床使用的注射器。預裝滿的注射器可以任選地裝配有注射器護罩以保護操作者免受放射性劑量。合適的這類的放射性藥物注射器護罩在本領域中是已知的，並且優選地含有鉛或鎢。
本發明的放射性藥物可以由試劑盒製備，如在下面第五實施方案中描述的那樣。可替換地，放射性藥物可以在無菌製造條件下被製備以得到所需的無菌產品。放射性藥物還可以在非無菌條件下被製備，之後使用如γ輻射法、高壓滅菌法、乾熱法或化學處理法(如用環氧乙烷)進行最終的滅菌。優選地，本發明的放射性藥物是從試劑盒製備的。
在第三實施方案中，本發明提供了一種製備第一實施方案的放射性標記的納米顆粒的方法，其包括 (i)提供非放射性的、未標記的如第一實施方案中描述的納米顆粒， (ii)任選地純化來自步驟(i)的所述納米顆粒； (iii)將來自步驟(i)或步驟(ii)的預先形成納米顆粒與放射性同位素源反應，使得所述放射性同位素非共價地結合在所述納米顆粒上。
當所述放射性標記的納米顆粒含有生物靶向部分時，通過首先製備具有包含有機硫醇的親脂性塗層的未標記的納米顆粒而最方便地引入它。然後硫醇衍生的或含有硫醇的生物靶向部分可以被用於置換原有的有機硫醇部分，得到所需的產品。在這兩種情況下，放射性標記步驟是最後一步。一種使用硫辛酸軛合用於生物靶向載體的圖解被顯示在方案1中 方案1
本發明提供了放射性標記的NPs，其中NP被非放射性地合成，作為第一步。以該方式，NP的特性(尺寸、表面電荷和表面塗層)可以變化，沒有與放射性同位素存在有關的複雜情況。作為任選的第二步，可以引入生物靶向部分，允許相同的NP用於不同特定的體內靶向用途。在最後一步中，以高百分比摻入，以一種允許選擇放射性核的方式對NP進行放射性標記。這樣的系統提供了前所未有的靈活性，顯著地簡化了放射標記，並且使得可以使用非放射性的試劑盒用於製備NP放射性藥物。
在最後一步中，採用高百分比摻入，以一種允許選擇放射性核的方式對NP進行放射標記。一個重要的特徵是非放射活性的NP可以適應放射性同位素(如放射性碘化物或高鎝酸鹽)的最便利的化學形式。這意味著放射性標記可以在非常溫和的條件下、需要最小量的另外的試劑如還原劑或氧化劑下被實施。這最大程度地方便了操作者，也將任何在放射性標記期間潛在敏感的生物靶向部分的不經意的化學降解的風險減至最低。
一旦已實施放射性標記，則放射性標記的NP的純化如除去一些未結合的放射性同位素可以作為任選另外的步驟被實施。合適的純化方法是利用在納米顆粒和「游離的」放射性同位素之間尺寸的很大差別以在水相中進行分離，而不破壞納米顆粒。優選的這樣的方法是葡聚糖凝膠色譜法，使用葡聚糖柱子，並描述於實施例9中。ITLC也提供分離，但其更適合用於分析法，而不適合用於製備色譜法。
在第四實施方案中，本發明提供了製備第二實施方案的放射性藥物組合物的試劑盒，其包含第一實施方案和第三實施方案的未標記的納米顆粒。這類試劑盒包含未標記的納米顆粒，優選以無菌的無熱原的形式，使得與無菌的放射性同位素源進行反應而得到所需的放射性藥物，採用最少數目的處理。這樣的考慮對於放射性藥物是特別重要的，其放射性同位素具有較短的半衰期，並且易於處理，從而降低了放射性藥劑師的放射劑量。因而，重建此類試劑盒的反應介質優選如上定義的「生物相容性的載體」，最優選是水性的。
合適的試劑盒容器包含密封的容器，其允許保持無菌的完整性和/或放射性的安全性，以及任選的惰性的頂部空間氣體(如氮氣或氬氣)，同時允許由注射器加入或取出溶液。優選這類的容器是隔膜密封的小瓶，其中不透氣體的蓋子是具有包縫(典型地為鋁)的上折邊的。這類的容器具有另外的優點，所述蓋子可以耐受真空，如果需要的話，如改變頂部空間氣體或脫氣溶液。
非放射性試劑盒任選地可進一步包含另外的成分如放射性保護劑、抗微生物防腐劑、pH調節劑或填料。
術語「放射性保護劑」是指抑制降解反應，如氧化還原過程的化合物，其通過俘獲高活性的自由基如源於水的輻解的含氧自由基來進行的。本發明的放射性保護劑合適地選自抗壞血酸、對-氨基苯甲酸(即4-氨基苯甲酸)、龍膽酸(即2，5-二羥基苯甲酸)及其具有生物相容性陽離子的鹽。術語「生物相容性陽離子」是指正電抗衡離子，其與離子化的帶負電荷的基團形成鹽，其中所述正電抗衡離子也是非毒性的，從而適於哺乳動物體，尤其是人體施用。合適的生物相容性陽離子的實例包含鹼金屬鈉或鉀、鹼土金屬鈣或鎂和銨離子。優選的生物相容性陽離子是鈉和鉀，最優選鈉。
術語「抗微生物的防腐劑」是指抑制潛在有害的微生物如細菌、酵母菌或黴菌生長的試劑。所述抗微生物防腐劑還可以呈現一些殺菌特性，取決於劑量。本發明抗微生物防腐劑的主要作用是抑制任何在放射性藥物組合物重建後，即在放射性診斷產品本身中的此類微生物的生長。然而，抗微生物防腐劑還可以任選地用於抑制本發明的非放射性活性試劑盒在重建之前的一種或多種成分中的潛在有害的微生物的生長。合適的抗微生物防腐劑包含對羥基苯甲酸酯類，即對羥基苯甲酸甲基、乙基、丙基或丁基酯或其混合物；苄基醇；苯酚；甲酚；溴棕三甲銨和硫汞林(thiomersal)。優選抗微生物防腐劑是對羥基苯甲酸酯類。
術語「pH調節劑」是指用於確保重建試劑盒的pH在用於人或哺乳動物施用的可接受的範圍內(約pH4.0-10.5)的化合物或化合物的混合物。合適的此類pH調節劑包含藥用可接受的緩衝劑，如兩性離子緩衝劑、磷酸鹽或TRIS(即三(羥基甲基)氨基甲烷)，以及藥用可接受的鹼如碳酸鈉、碳酸氫鈉或其混合物。當所述軛合物是以酸式鹽形式被應用時，所述pH調節劑可以任選地被提供在分離的小瓶或容器中，使得該試劑盒的使用者可以調節pH作為多步工序的一部分。
術語「填料「是指藥用可接受的增量劑，其可以使得在製備和凍幹期間處理材料更容易。合適的填料包含無機鹽如氯化鈉和水溶性糖或糖醇如蔗糖、麥芽糖、甘露糖或海藻糖。
在試劑盒中使用的NP可以在無菌製造條件下被應用以得到所需的無菌無熱原的材料。NPs還可以在非無菌條件下被應用，之後使用如γ輻射法、高壓滅菌法、乾熱法或化學處理法(如用環氧烷)進行最終的滅菌。最優選地，無菌無熱原的NPs被應用在如上描述的密封的容器中。
在第五實施方案中，本發明提供了第一實施方案的放射性標記的納米顆粒在製備用於體內放射性藥物成像的藥物中的用途。這樣的放射性藥物成像特別用於哺乳動物體疾病狀態的體內的診斷成像，其中所述的哺乳動物之前被施用了第二實施方案的放射性藥物組合物。因為本發明的NPs具有靈活性可以適於體內的生物靶位的範圍，因此可以用於大量的成像用途。
術語「之前施用的」是指涉及臨床醫師的步驟，其中將成像劑給予了患者，如已實施了靜脈內注射。該實施方案包括第一實施方案的成像劑在製造哺乳動物體疾病狀態體內診斷成像的診斷劑的用途。
在第六實施方案中，本發明提供了第一實施方案的放射性標記的納米顆粒在製備用於體內放射性藥物治療的藥物中的用途。這樣的放射性藥物治療特別用於哺乳動物體疾病狀態的體內的治療，其中所述的哺乳動物之前被施用了第二實施方案的放射性藥物組合物。術語「之前施用的」如上所定義。
通過下面祥述的非限制性實施例舉例說明本發明。實施例1提供了製備具有四種不同有機硫醇塗層的金納米顆粒。實施例2提供了合成具有結合陰離子的醯胺取代基的硫醇，通過硫辛酸與胺的反應來進行。化合物2是作為對照進行合成的，而化合物3-5被設計成用來增強陰離子結合位點的疏水性，既可以通過提供較長的脂族鏈，也可以通過提供在醯胺部分附近的芳環來進行。化合物6被設計成用來提供增強的預組織化，當與較簡單的單足配體相比時，從而加強了陰離子的結合。化合物7和8被設計成用來在接近醯胺部分加入電荷，其可以通過靜電相互作用而加強陰離子結合，在化合物7的情況下經由質子化作用，在化合物8的情況下通過Na+離子絡合。
得到的兩種醯胺都具有兩個陰離子結合位點，但每一個還有另一個重要特徵。化合物9含有金剛烷基單元，其另外在自身中提供了疏水環境，該金剛烷基單元先前已經顯示出在β-環糊精的空穴內很強的結合。化合物10被設計成允許通過螢光測定法檢查陰離子結合情況，因為蒽部分是熟知的螢光團。此外，蒽部分應當作為醯胺結合位點的疏水環境。
實施例3提供了具有連接有官能化硫醇的NPs的製備。實施例4提供了具有陰離子結合位點(季銨取代基)的合成。實施例5顯示了如何得到具有非共價地結合的離子性的陰離子結合位點的NPs。實施例6提供了納米顆粒放射性標記的工藝。實施例7研究了放射性標記的NPs的穩定性。它們與圖2-4一起顯示(對於高鎝酸鹽) ·醯胺配體的存在似乎不顯著地增強高鎝酸鹽的萃取或保留； ·用季銨氯化物摻雜納米顆粒實質性地改善了高鎝酸鹽陰離子的萃取和保留； ·氯化物作為高鎝酸鹽的有效競爭劑，儘管在所有情況下是過量的，但是對金納米顆粒的高鎝酸鹽的親和力在有高濃度的含水氯化物存在下被顯著地降低了；該降低在NP13的情況下最不明顯，其中摻雜季銨氯化物導致高鎝酸鹽更大的親和力。此外，過量碘化鈉的存在完全排除了高鎝酸鹽的提取，其表明碘離子與高鎝酸鹽競爭納米顆粒的結合位點比氯離子更有效。
實施例7和圖2-4表明(對於放射性碘化物) ·碘化物的萃取因醯胺配體的存在而得到加強； ·氯仿-納米顆粒溶液的保留基本上是定量的，並且不依賴於配體系統-因而萃取/締合基本上是不可逆的。
·摻雜帶電的季銨氯化物的存在基本上加強了萃取。
實施例8顯示出可以成功地用123I-碘化物放射標記NP 14，但用標記99mTc-高鎝酸鹽不行。實施例9顯示出可以通過色譜法將放射性標記的納米顆粒從游離的放射性同位素中分離出來。可以很容易地將該標記的納米顆粒與未結合的標記分離開來，並且在10-15分鐘內(包括柱子的調節)。然後可以將得到的餾分稀釋或濃縮到所需的放射性濃度。
實驗 使用了下列縮寫 Boc＝叔丁氧基羰基 DIPEA＝二異丙基乙胺 DMF＝N，N』-二甲基甲醯胺 HATU＝O-(7-氮雜苯並三唑-1-基)-N，N，N』，N』-四甲基脲六氟磷酸鹽 ITLC＝瞬時薄層色譜 PEG＝聚乙二醇 RAC＝放射性濃度 RCP＝放射化學純度 TFA＝三氟乙酸 總括 所有金納米顆粒體系是通過使用NMR和UV可見光譜以及元素分析表徵的。任何未接枝至納米顆粒表面的配體的存在能夠從質子NMR譜的尖峰推斷出。證明UV可見光譜含有表面等離子體振子帶，其為金納米顆粒體系的特性，由於它們的小尺寸[Kriebig等，「Optical Propertiesof Metal Clusters」，Springer柏林，1995]。使用簡單的C/H/N元素分析計算取代度，因為簡單的硫醇保護的納米顆粒不含有氮，而被取代的系統含有氮。
實施例1製備具有硫醇塗層的金納米顆粒 利用Brust方法[JCS，Chem.Commun，801-802(1994)]來形成所述的硫醇塗層的金納米顆粒。廣泛的有機硫醇是可商購的。在本發明中製備的金保護的納米顆粒如下 表1 注釋化合物2和5被描述在實施例2中 發現對於NP2、NP9和NP14而言，首先製備NP1，然後用新硫醇代替十二烷硫醇最方便，如實施例3所描述的那樣。
最大UV吸收(nm)，對應於每個納米顆粒的表面等離子體振子共振帶，為497.6(NP2)、501.0(NP4)、498.4(NP9)和518.0(NP14)。
實施例2製備醯胺官能化的硫醇 使用的胺是大體上可商購的-步驟(b)提供了不能得到的那些的合成 步驟(a)胺與硫辛酸的反應 一系列含有醯胺氫鍵合基團的不同二硫化物官能化的配體的合成是經由將外消旋硫辛酸(Aldrich)與合適的胺在EDCI[1-(3-二甲基氨基丙基)-3-以及羧基二醯亞胺]的存在下偶聯以高產率(70-90％)進行的-參見方案2和表2。用考慮到的許多因素設計硫辛醯胺(化合物2-10)，如下所討論的，並研究了與NP1的取代反應。

方案2-硫辛醯胺的形成 表2-用於納米顆粒官能化的醯胺

步驟(b)合成胺 化合物9a和10a的胺前體是經由部分-Boc保護策略製備的(方案3)
9a，R＝金剛烷基 10a，R＝9-蒽基 方案3-胺9a與10a的形成 如從前報導的[Fader等，J.Org.Chem.，66，3372-3379(2001)]那樣製備單-BOC保護的乙二胺。1-金剛烷羰基氯是可商購的。蒽-9-羰基氯是根據文獻工藝[Nakatsuji等J.Org.Chem.，67，916-921(2002)]製備的、化合物11a是可商購的(Sigma-Aldrich)。
化合物2 1HNMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)5.42(br，1H，NH)，3.51(m，1H，SCH)，3.01-3.24(m，4H，NHCH2和SCH2)，2.40(m，1H，SCH2CH2CH)，2.11(t，3J＝6.74，2H，COCH2)，1.85(m，1H，SCH2CH2CH)，1.62(m，4H，SCHCH2和NHCH2CH2)，1.42(bm，4H，COCH2CH2和SCHCH2CH2)，1.22(br，6H，CH3(CH2)3)，0.82(br，6H，CH3)。
化合物3 1HNMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)5.36(br，1H，NH)，3.50(m，1H，SCH)，3.01-3.20(m，4H，NHCH2和SCH2)，2.38(m，1H，SCH2CH2CH)，2.11(t，3J＝6.74，2H，COCH2)，1.84(m，1H，SCH2CH2CH)，1.61(m，4H，SCHCH2和NHCH2CH2)，1.40(bm，4H，COCH2CH2和SCHCH2CH2)，1.22(br，22H，CH3(CH2)11)，0.80(br，6H，CH3)。
化合物4 1HNMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)7.36(m，2H，ArH)，7.31(m，3H，ArH)，5.80(br，1H，NH)，4.44(d，3J＝5.61，2H，NHCH2)，3.51(dd，3J1＝8.39Hz，3J2＝6.25Hz，1H，SCH)，3.10-3.19(m，2H，SCH2)，2.44(td，2J＝12.46Hz，3J＝6.62Hz，1H，SCH2CH2CH)，2.22((t，3J＝7.52，2H，COCH2)，1.89((td，td，2J＝12.87Hz，3J＝6.83Hz，1H，SCH2CH2CH)，1.68((m，4H，SCHCH2和COCH2CH2)，1.47(m，2H，SCHCH2CH2)。
化合物5 1HNMR(500MHz，CDCl3)δ(ppm)7.45(d，3J＝8.54，2H，ArH)，7.37(d，3J＝8.54，2H，ArH)，7.24(br，1H，NH)，3.58(m，1H，SCH)，3.06-3.23(m，2H，SCH2)，2.45(m，1H，SCH2CH2CH)，2.35(t，3J＝7.24，2H，COCH2)，1.90(td，2J＝13.03Hz，3J＝6.68Hz，1H，SCH2CH2CH)，1.70(m，4H，SCHCH2和COCH2CH2)，1.52(m，2H，SCHCH2CH2)，1.29(s，9H，CH3)。
化合物6 1HNMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)7.34(m，2H，ArH)，7.23(m，2H，ArH)，5.86(br，2H，NH)，4.46(d，3J＝5.42Hz，NHCH2)，3.60(m，2H，SCH)，3.18(m，4H，SCH2)，2.48(m，2H，SCH2CH2CH)，2.27(t，3J＝7.26Hz，4H，COCH2)，1.95(m，2H，SCH2CH2CH)，1.73(m，8H，SCHCH2和COCH2CH2)，1.51(m，4H，SCHCH2CH2)。
化合物7 1HNMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)6.03(br，1H，CONH)，3.65(m，1H，SCH)，3.26(m，2H，NHCH2)，3.04-3.18(m，2H，SCH2)，2.40(m，3H，SCH2CH2CH和(CH3)2NCH2)，2.21(s，6H，NCH3)，2.17(t，3J＝7.93Hz，2H，COCH2)，1.84(m，2H，SCH2CH2CH)，1.61(m，4H，SCHCH2，COCH2CH2)，1.42(m，2H，SCHCH2CH2)。
化合物8 1HNMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)7.40(m，1H，ArH)，715(br，2H，NH)，6.85(m，2H，ArH)，4.16(m，4H，ArOCH2)，3.93(m，4H，ArOCH2CH2)，3.80(br，8H，OCH2)，3.62(m，1H，SCH)，3.11-3.26(m，2H，SCH2)，2.49(m，1H，SCH2CH2CH)，2.38(t，3J＝7.63Hz，2H，COCH2)，1.96(m，1H，SCH2CH2CH)，1.78(m，4H，SCHCH2和COCH2CH2)，1.55(m，2H，SCHCH2CH2)。
化合物9 1HNMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)6.61(br，1H，CONH)，6.48(br，1H，CONH)，3.62(m，1H，SCH)，3.40(bm，4H，2x NHCH2)，3.09-3.24(m，2H，SCH2)，2.47(m，1H，SCH2CH2CH)，2.29(t，3J＝7.61Hz，2H，COCH2)，2.03(br，3H，金剛烷基的CH)，1.90(m，7H，SCH2CH2CH和COC(CH2)3)，1.74(m，10H，SCHCH2，COCH2CH2和金剛烷基的CH2)，1.51(m，2H，SCHCH2CH2)。
化合物10 1HNMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)8.58(s，1H，(ArC)2CH)，8.02(m，4H，ArCCHCH)，8.57(m，4H，ArCCHCH)，6.78(br，1H，CONH)，6.60(br，1H，CONH)，3.95(m，2H，CH2NH)，3.63(m，2H，CH2NH)，3.49(m，1H，SCH)，3.04-3.22(m，2H，SCH2)，2.42(m，1H，SCH2CH2CH)，2.23(t，3J＝7.10，2H，COCH2)，1.87(m，1H，SCH2CH2NH)，1.65(m，4H，SCHCH2和COCH2CH2)，1.47(m，2H，SCHCH2CH2)， 化合物11 1HNMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)6.27(br，1H，NH)，3.40-3.80(m，24H，OCH2，OCH2SCH)，3.27(m，2H，NHCH2)，3.00-3.16(m，2H，SCH2)，2.49(m，1H，SCH2CH2CH)，2.13(t，3J＝7.33Hz，2H，COCH2)，1.85(m，1H，SCH2CH2CH)，1.61(m，4H，SCHCH2和COCH2CH2)，1.40(m，2H，SCHCH2CH2)， 化合物9a 1HNMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)6.24(br，CONH)，3.35(bm，2H，NHCH2)，2.89(t，3J＝5.27Hz)，2.07(br，5H，CH2NH2，和金剛烷基的CH)，1.89(COC(CH2)3)，1.75(金剛烷基的CH2)， 化合物10a 1HNMR(300MHz，CDCl3)δ(ppm)8.36(s，1H，(ArC)2CH)，7.91(m，4H，ArCCHCH)，7.40(m，4H，ArCCHCH)，6.56(br，1H，CONH)，3.58(q，3J＝5.86Hz，2H，CONHCH2)，2.91(t，3J＝5.94Hz，2H，NH2CH2)，1.24(br，2H，CH2NH2)，1.75(金剛烷基的CH2)。
實施例3製備具有官能化硫醇的納米顆粒 基於官能化硫醇納米顆粒是通過NP1與合適的硫辛酸(來源於二硫化物配體)採用Beer等[JCS J.Chem.Commin.，414-415(2004)]的方法進行取代反應而製備的。其需要在氯仿下攪拌納米顆粒和官能化硫醇一個星期，然後用丙酮(或其它任何合適的溶劑)徹底洗滌得到的沉澱物以除去過量的未反應的配體(參見

圖1)。當開始觀察到未發生取代時，將過量的NaBH4加入以通過還原二硫鍵而促進反應。
嘗試用十二烷硫醇保護的納米顆粒NP1對實施例2的醯胺被進行的取代反應的結果被總結在下面的表3中。大多數系統，如所示的那樣，證明可以使用取代方法。在冠狀系統化合物8的情況下，僅在硼氫化物還原劑存在下觀察到發生了反應。然而，得到的納米顆粒產物是可溶於甲醇的，其表明冠醚與鈉陽離子配位的可能性。另一方面，由化合物7的取代反應製備的納米顆粒證明在所有調查的可能的溶劑系統中是高度不易溶的，因而不能被合適地純化。
表3 實施例4被季銨鹽官能化的硫醇 採用文獻的工藝經由二硫化物40(方案4)[Ekambarm等，J.Org.Chem.，32，2985-2987(1967)]來製備三甲基銨硫醇41
方案4 實施例5用季銨鹽摻雜的納米顆粒 用Aliquat 336氯化物(Aldrich)摻雜的納米顆粒NPI是通過將不同質量比的NP1納米顆粒和Aliquat 336氯化物在氯仿溶液中混合來製備的。Aliquat與納米顆粒的締合是可逆的，因為將得到的系統用甲醇與丙酮徹底洗滌可以將Aliquat陽離子從納米顆粒中除去，如由1HNMR光譜顯示的那樣。Aliquat 質子NMR共振的略微加寬提示它們確實與納米顆粒表面締合。

Aliquat 336氯化物 將具有摩爾比為每NP約1個Aliquat 336氯化物分子的納米顆粒稱為NP13(這對應於摩爾比約為1∶10的Aliquat∶有機硫醇)。
實施例6納米顆粒放射性標記工藝 將100μL的納米顆粒NPI的1mg/cm3 CHCl3溶液用氯仿稀釋至2cm2，得到50μg/mL

的納米顆粒的濃度。然後向該溶液中加入1.95cm3的水(分析純水)或鹽水(0.9％或0.023％w/v)，取決於實驗*。向得到的混合物加入50μL合適的放射性陰離子溶液。將得到的混合物「渦旋混合」20分鐘，然後離心30分鐘，以幫助相分離。然後將該相通過移液管分開，並採用Wallac發射探測器對水相以及氯仿層的1cm3試樣的放射核內容物進行分析。從得到的計數，可以得到相關放射性同位素的百分比分布，並通過內推得到總離子分布。所有的實驗都重複進行。


在一些實驗中濃度是變化的。
*對於0.023％w/v溶液，將50μL 0.9％鹽溶液(NaCl或NaI)用水稀釋至合適的1.95mL。
使用的高鎝酸根＝99mTcO4-.碘離子＝123I-。在兩種情況下Na+是抗衡離子。摩爾濃度由放射性信息計算。由於50μL 4MBq/mL放射性同位素的溶液，活性增加了。溶劑對於99mTc來說是0.9％w/v NaOH，對於123I來說是1M NaOH。
實施例7放射性標記的納米顆粒的穩定性 其經由反萃取工藝建立 向500μL由實施例6得到的有機層的溶液中加入相同體積的水或鹽水溶液(0.9％w/v)。將得到的混合物渦旋混合20秒，然後離心30分鐘以幫助相分離。然後將得到相的100μL份的放射核內容物以與前面詳述類似的方式進行分析。值得一提的是作為同位素衰減和試樣的尺寸的結果，記錄在這些實驗中總計數是較低的，因而固有的誤差較大。所有實驗都重複進行。
結果顯示於圖2-4中。
實施例8放射性標記的納米顆粒14(NP14) 將NP14溶解在水中稀釋至0.5mg/mL。根據需要進一步稀釋，通過將水加入至這些溶液中進行。對於所有放射標記的實驗，將200μL納米顆粒水溶液用20μL活性放射性同位素在Eppendorf試管中處理。活性為每20μL加入的同位素溶液約30MBq。用移液管將得到的溶液混合，在離子室中測量試樣的活性。這樣可以計算存在的放射性同位素的量。典型的製備如下所述。
(a)99mTc-高鎝酸鹽 將50μL在0.9w/v鹽水溶液中的源於發生器的Na99mTcO4溶液(活性131MBq)用50μL水稀釋。然後將4×20μL份該溶液加入至200μL份的NP14水溶液中。通過移液管將試樣混合，10分鐘後測量活性。其為27.6MBq。將該試樣再平衡10分鐘，然後通過ITLC和HPLC分析(參見後面部分)。全部220μL溶液含有0.041％w/v鹽水。
(b)123I-碘化物 將7μL的Na123I的0.05M NaOH(水)溶液(活性150MBq)用0.01MNaOH(水)稀釋至100μL。然後將5×20μL份該溶液加入至200μL份的納米顆粒水溶液中。一份「空白」200μL水溶液作為對照。通過移液管將試樣混合，5分鐘後測量活性。其為27.2MBq，空白為23.6MBq。將該試樣再平衡10分鐘，然後通過ITLC分析(參見下面)。全部220μL溶液為0.233mM NaOH(水)。
(c)分析方法 (i)ITLC 將5μL放射標記的試樣放置在ITLC條上(浸漬了矽膠的玻璃纖維片)。該條約20cm長。然後將其用0.9％w/v鹽水稀釋，直到該洗脫液幾乎到達TLC條的頂端。使試樣乾燥，然後放到成像板上，在Perkin-Elmer即時成像掃描儀上掃描。在這些條件下金納米顆粒保留在基線上(rf＝0)，而游離的NaTcO4和NaI被溶劑洗脫(rf～1)。
(ii)葡聚糖G-25 將NAP-5柱用10mL的10mM磷酸鈉緩衝液在0.9％w/v鹽水溶液中平衡。向其中加入200μL放射標記的溶液，一起加入300μL洗脫液(在0.9％w/v鹽水溶液中10mM磷酸鈉緩衝液)。使其進入葡聚糖，然後將該柱用1mL緩衝液洗脫。收集第一個洗脫的1mL，未得到其它餾分。然後用離子室測量洗脫的量的活性，並與粗樣的原活性比較。在對照實驗中，Na123I並未可觀地被從柱上洗脫下來。
(d)結果 未觀察到高鎝酸鹽被NP14吸收。但是觀察到123I-碘化物被吸收 表4NP14吸收碘化物作為時間和濃度的函數


時間取自納米顆粒與放射性標記的混合。
實施例9123I-標記的納米顆粒14(NP14)的純化 將已允許用碘化物放射性標記平衡1小時的123I-標記的NP14(實施例8)的含水試樣進行如實施例8的葡聚糖G-25色譜，得到5.1％的產率。
權利要求
1.一种放射性標記的納米顆粒，其包含納米顆粒，該納米顆粒具有
(iii)含有銅、銀、鉑或金或其組合的金屬核心；
(iv)圍繞所述核心的親脂性塗層，其含有多個結合在所述核上的C2-25有機硫醇，其中所述硫醇可以是相同的或不同的，並且可以呈還原(即硫醇)形式或呈氧化形式(即二硫化物)或其組合；
該納米顆粒被至少一種非共價結合在所述納米顆粒上的放射性同位素標記。
2.權利要求1的所述納米顆粒，其中所述有機硫醇呈還原形式(即硫醇)。
3.權利要求1或2的所述納米顆粒，其中所述金屬核心含有金。
4.權利要求1-3中任一項所述的納米顆粒，其進一步含有生物靶向部分。
5.權利要求4所述的納米顆粒，其中所述生物靶向部分含有肽、蛋白質、酶底物、酶拮抗劑或酶抑制劑。
6.權利要求4或5所述的納米顆粒，其中所述生物靶向部分含有結合在所述金屬核心上的硫醇官能團。
7.權利要求1-6中任一項所述的納米顆粒，其中所述親脂性塗層含有一定比例的硫醇，所述硫醇還含有一種或多種結合陰離子的取代基。
8.權利要求7所述的納米顆粒，其中所述結合陰離子的取代基是帶正電荷的，並且是式-ER13+X-的取代基，其中
E是N或P；
R1是C1-10烷基，該烷基可以是直鏈或支鏈的；C2-10烷氧基烷基；C2-12芳基或C2-12雜芳基；
X是滷素、OH、PF6、H2PO4、硝酸根、C1-8羧酸根或C1-8磺酸根。
9.權利要求1-6中任一項所述的納米顆粒，其中所述親脂性塗層含有一定比例的硫醇，所述硫醇還含有一種或多種結合陽離子的取代基。
10.權利要求1-9中任一項所述的納米顆粒，其中所述硫醇是式R2SH或R2S-SR2的硫醇，其中R2為C5-24烷基、C5-24芳烷基或C5-12芳基，並且R2可以任選地被一個或多個結合陰離子的取代基或結合陽離子的取代基取代。
11.權利要求1-10中任一項所述的納米顆粒，其還含有摩爾比例約為1∶5-1∶20的[有機陽離子]∶[有機硫醇]的選自季銨鹽、鹽、咪唑和脲的有機陽離子或其它生物相容性的有機陽離子。
12.權利要求1-11中任一項所述的納米顆粒，其中所述放射性同位素適用於放射性藥物在哺乳動物活體內的成像。
13.權利要求1-11中任一項所述的納米顆粒，其中所述放射性同位素適用於放射性藥物在哺乳動物活體內的治療。
14.權利要求12或13所述的納米顆粒，其中所述放射性同位素包含99mTc、94mTc、186Re、188Re、123I、124I、125I或131I。
15.權利要求14的所述納米顆粒，其中所述放射性同位素的化學形式為
(i)鎝放射性同位素的高鎝酸根；
(ii)錸放射性同位素的高錸酸根；
(iii)碘放射性同位素的碘離子。
16.一种放射性藥物組合物，其含有多個權利要求1-15的放射性標記的納米顆粒和生物相容性載體，呈適於哺乳動物施用的形式。
17.權利要求16所述的放射性藥物組合物，其具有適用於單個患者的放射性劑量，並被提供在合適的注射器或容器中。
18.一種製備權利要求1-15的放射性標記的納米顆粒的方法，其包括
(i)提供非放射性的、未標記的如權利要求1-11中定義的納米顆粒；
(ii)任選地純化來自步驟(i)的所述納米顆粒；
(iii)將來自步驟(i)或步驟(ii)的預先形成的納米顆粒與放射性同位素源反應，使得所述放射性同位素非共價地結合在所述納米顆粒上。
19.一種用於製備權利要求16或17的放射性藥物組合物的試劑盒，其含有非放射性、未標記的如權利要求1-10中定義的納米顆粒。
20.權利要求19所述的試劑盒，其中所述未標記的納米顆粒呈無菌的、無熱原的形式。
21.權利要求1-15所述的放射性標記的納米顆粒在製備用於體內放射性成像的藥物中的用途。
22.權利要求1-15所述的放射性標記的納米顆粒在製備用於體內放射性治療的藥物中的用途。
全文摘要
本發明涉及具有與其非共價鍵合的放射性同位素的放射性標記的納米顆粒。所述放射性標記的納米顆粒可用作放射性藥物。還公開了放射性標記的納米顆粒的試劑盒與製備方法。
文檔編號A61K51/12GK101222943SQ200680025822
公開日2008年7月16日 申請日期2006年7月14日 優先權日2005年7月15日
發明者P·D·比爾, M·蘭克希爾, H·達塔尼, A·傑克遜, M·阿沃裡 申請人:通用電氣健康護理有限公司, 牛津大學