C型肝炎治療用組合物的製作方法
2023-10-21 04:03:27
專利名稱：C型肝炎治療用組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及C型肝炎治療用組合物。具體涉及減少丙型慢性肝炎病毒RNA量用組合物，改善或減輕丙型慢性肝炎症狀用組合物，抑制丙型慢性肝炎的肝硬化用組合物及這些組合物的調製方法。
背景技術：
導致C型肝炎的原因為C型肝炎病毒(HCV RNA病毒)，例如通過血液等體液感染。
C型肝炎病毒(HCV)因其基因型可分類為幾種亞型。大致上可將HCV株分類為1至6型，作為亞型將它們記為a、b及c等，使用命名為1a、1b、2a、2b、3a及3b等的分類法(例如，加藤宣之編著C型肝炎病毒，IPC株式會社，東京，2000，168頁)。
如果感染HCV，雖約60％的人經過1至2個月的潛伏期會引發急性肝炎，但C型肝炎的肝功能障礙或症狀多較輕微，在急性肝炎的發病時期並不明確。丙型急性肝炎以高比率(60至70％)進展成慢性肝炎。該慢性肝炎的AST[天冬氨酸轉氨酶(也稱為GOT；穀氨酸—草醯乙酸轉氨酶)]及ALT[丙氨酸轉氨酶(也稱為GPT；穀氨酸—丙酮酸轉氨酶)]顯示異常值，在2至3年間該數值暫時接近正常值範圍或恢復至正常值範圍。此狀態因為持續數年至十年，所以有時感染HCV10年以上才被診斷為丙型慢性肝炎。在20至30年間肝細胞重複地慢性壞死及炎症反應中，由肝炎進展成肝硬化，再過10年則進展為肝癌(例如，熊谷直樹C型肝炎，參考「每日生活」2002年9月號第23頁，讀賣新聞社，2002年發行)。
丙型慢性肝炎者中，認為有自覺症狀的僅限活動期。症狀為全身倦怠感，易疲勞感、飲食不振、噁心或嘔吐等。如果進展為肝硬化，則伴隨自覺症狀的患者比率約上升至80％，附加腹部膨脹感或皮膚搔癢感等症狀。還發現有腹痛或吐血或便血等症狀。他覺症狀中最常見的是肝腫大，頻率約為6成，其它出現如肝左葉腫大、脾腫、水腫、腹水、手掌紅斑或黃疸等症狀(例如，加藤宣之編著C型肝炎病毒，IPC株式會社，東京，2000，189頁)。
C型肝炎的一般治療方法是使肝功能正常化，使肝炎停止發展及抑制病情發展。基於即使病毒在體內存在、但只要能抑制肝炎就能抑制病情發展的想法，以改善及減弱肝炎症狀為目的，廣泛進行服用烏索脫氧膽酸(熊膽所含成分)、小柴胡湯(柴胡、黃蓍、半夏、(幹)生薑、人參、大棗及甘草這7種生藥所煎製成的中藥配方)、以含甘草成分的甘草酸為主體的製劑[強力neominophagen-C(SNMC)](商品名)的療法。
然而，為阻止病情的發展，一直努力地進行以排除體內HCV為目的的[幹擾素(IFN)療法]開發。作為抗病毒劑所使用的IFN有α及β兩種，被使用的有nIFNα(天然型幹擾素α)、recombinant IFNα(基因重組型幹擾素α)、nIFNβ(天然型幹擾素β)及consensus IFNα[複合幹擾素α幹擾素αcon-1(基因重組)]。有報告使用這些IFN而完全除去病毒的有效例及改善一般肝功能的有效例，另外，也確認使用IFN降低肝癌的發病率的抑制病情發展的效果。
作為對HCV顯現抗病毒作用的IFN以外的物質，可例舉乳鐵蛋白。乳鐵蛋白是在1根聚肽鏈上結合了由半乳糖或甘露糖等形成的糖鏈的分子量約為80,000的糖蛋白質，屬於鐵結合性反式家族(trans-family)。認為乳鐵蛋白的作用機制是中和存在細胞外的病毒而使其不能感染。
此外，揭示了通過在飼料中添加一種以上的南瓜子(Cucurbita moschata)、車前草或忍冬，可特別防止寄生蟲、細菌及病毒病的自然感染，強化生體的防禦力，且改善肉質及蛋品質量的技術。另外，揭示了配有南瓜子、車前草、忍冬及紅花這4種生藥的飼料可提高產蛋雞的健康狀態、存活率及蛋品質量，以及抗白細胞蟲病效果、鵪鶉的抗新城病效果、抑制腸內球蟲及葡萄球菌數的效果(例如，參考美國專利5,882,672號公報)。
此外，揭示了來自日本南瓜等瓜科植物的幹擾素誘導劑的製造方法(例如，參考美國專利4,421,746號公報)。報告雖指出西洋南瓜(蘇丹藥用植物)的甲醇萃取物顯示抗HCV蛋白酶抑制效果，其抑制活性為47.4±0.0％，但該文獻中對於減少體內C型肝炎病毒並未揭示也無提示(PhytochemistryResearch(2000)14，510-516)。另外，雖然不知道車前草(Plantago major L.)是否對C型肝炎的治療有用，但有將其用於對抗肝炎病毒的報告例，但是對於實際上是否有效並未揭示也無提示(American Journal of ChineseMedicine，(1990)Vol.XVIII，Nos.1-2，pp.35-43)。此外，揭示了由紅花萃取的幹擾素誘導劑的抗病毒活性及抗腫瘤活性(例如，參考美國專利4,456,597號)。另外，揭示了由金銀花或車前子等萃取幹擾素誘導劑，對於預防及治療人及動物的病毒感染症有效(例如，參考美國專利4,469,685號)。還揭示了組合南瓜子與紅花這2種生藥所形成的巨噬細胞活化劑(例如，參考日本專利特開平11-116498號)。還揭示了組合南瓜子、紅花、車前草及忍冬這4種生藥所形成的嗜中性細胞活化劑(例如，參考日本專利特開2000-281584號)。然而，這些文獻中，雖然揭示了作為本發明的有效成分的各生藥的幹擾素誘發作用、巨噬細胞活化作用、嗜中性細胞活化作用或IgE抗體產生抑制作用等，但對於抗C型肝炎病毒活性既無揭示也無提示。
丙型慢性肝炎中，將1b型的C型肝炎患者的血液中的病毒量尤其高的情況(一般在100KIU/ml以上)稱為「難治性丙型慢性肝炎」，因此希望進一步開發出對於這些病例的治療方法(例如，熊谷直樹C型肝炎，每日生活9月號，讀賣新聞社，東京，2002年)。另外，即使是目前發售的根治率最高的幹擾素αcon-1，如果病毒量不在850KIU/ml以下，仍無法獲得根治，已知病毒量愈低時幹擾素療法的治療效果愈佳(參考厚生省「非甲非B型肝炎研究班」1995年報告，別冊醫學的進行「探討肝功能障礙的發病及進展機制」1999年2月5日發行，醫齒藥出版株式會社發行，肝膽胰43，(2)，pp.281-288，2001)。因此，在導入幹擾素療法前，要求病毒量處於儘量低的狀態。
發明的揭示本發明提供了以南瓜子、紅花、車前草及忍冬為有效成分的丙型慢性肝炎治療用組合物，該組合物可與傳統的C型肝炎治療法並用，且通過與這些療法的並用，利用了對以往難以治療的丙型慢性肝炎的治療有效的生藥。更具體提供了抑制丙型慢性肝炎的症狀發展或改善症狀用組合物，以及這些組合物的調製方法。
本發明者對於植物性生藥進行認真探討後發現，對於丙型慢性肝炎患者，尤其是血液中顯示丙型慢性肝炎病毒RNA量為高值的患者，給予南瓜子、紅花、車前草及忍冬所形成的組合物後，令人驚訝地確認患者的自覺症狀，具有代表性的是全身倦怠感或腹脹感得到了改善，此外，通過醫生的診斷確認他覺症狀，具有代表性的是肝腫大或手掌紅斑現象有所改善，給予本發明的組合物1個月後及3個月後，發現C型肝炎病毒RNA量有所減少。
即，本發明涉及由南瓜子、紅花、車前草及忍冬形成的減少丙型慢性肝炎病毒RNA量用組合物，由南瓜子、紅花、車前草及忍冬形成的改善或減輕丙型慢性肝炎的症狀用組合物，以及以南瓜子、紅花、車前草及忍冬為有效成分的用於抑制丙型慢性肝炎進展為肝硬化的組合物。
另外，還涉及上述的減少丙型慢性肝炎病毒RNA量用組合物、改善或減輕丙型慢性肝炎的症狀用組合物、用於抑制丙型慢性肝炎進展為肝硬化的組合物的調製方法。
另外，本發明還涉及通過與傳統的治療藥，較好為nIFNα、基因重組型IFNα、複合幹擾素IFNα、聚乙二醇幹擾素(PEG-IFN)、IFNβ及IFN/三氮唑核甙等並用，對於病毒量在500KIU/MI以上的高值的患者顯示幹擾素可根治丙型慢性肝炎時的輔藥作用的組合物，換言之，還涉及丙型慢性肝炎的治療佐劑組合物。
附圖的簡單說明
圖1表示實施例2中的各檢測時的HCV-RNA量(KIU/ml)的平均值。
實施發明的最佳方式以下，對本發明進行更詳細地說明。
首先，說明本發明中所使用的生藥。
南瓜子是指瓜科的植物南瓜(日本名日本南瓜，Cucurbita moschataDuch.)的種子，但在本發明中，只要是顯示與南瓜子相同性質的作用效果的種子，還包含其類似植物的種子。南瓜子可直接使用生的，但其乾燥品作為醫藥及健康食品適於保存，另外，也可僅使用種皮。其成分包含南瓜子氨酸、蛋白質、維生素A、B1、B2及C，還包含胡蘿蔔素等。
紅花(Carthamus tinctorius L.)是乾燥菊科植物的管狀花而獲得的產物。其成分含有紅花素、紅花黃、木酚素及固醇。
車前草(Plantago asiatica L.)是車前科的植物，使用成熟種子(車前子)或全草(車前)。其成分含有多糖類、車前烯醇酸、琥珀酸、腺嘌呤、桃葉珊瑚苷、車前甙或維生素A及B1等。
忍冬(Lonicera japonica THUNB.)可使用任一種的忍冬科的花或花蕾(金銀花)、葉、莖或全草(忍冬)。其成分含有蠟狀物質、肌醇、單寧、皂角苷及忍冬苷等。
本發明中，這些生藥可作為原料粉末或水或有機溶劑萃取物使用。也可作為原料粉末、溶劑製劑、粉劑、成型劑、浸出劑等使用。
作為有機溶劑，可使用乙醇及丙酮等，它們也可與水或2種以上的有機溶劑混合使用。萃取時可加入相對於生藥數倍量的溶劑，於常溫至加溫下進行萃取或浸出。可摻入各生藥單獨萃取得到的萃取物或者也可萃取多種生藥的原料粉末混合物而得到萃取物。另外，將生藥以原料粉末使用時，使用其新鮮、陰乾或乾燥物，細切或形成粉末後使用。
上述生藥的原料粉末或水或有機溶劑萃取物可直接或以公知方法調製成各種劑型，可作為醫藥用組合物、健康食品或機能性食品(營養補充劑)使用。
例如，醫藥用組合物或機能性食品(營養補充劑)通過通常的製劑化方法以口服片劑、散劑、細粒劑、膠囊劑、丸劑及糖漿劑的劑型提供。為了實現製劑化，可根據需要添加賦形劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、緩衝劑、矯味劑及穩定劑等。可混合至少1種以上的惰性稀釋劑，例如，乳糖、甘露糖醇、葡萄糖、羥丙基纖維素、微晶纖維素、澱粉、聚乙烯吡咯烷酮及矽鋁酸鎂。組合物中還可根據常法含有惰性稀釋劑以外的添加劑，例如，硬脂酸鎂、澱粉及滑石粉等潤滑劑，纖維素乙醇酸鈣等崩解劑，乳糖等穩定劑，穀氨酸或天冬氨酸等助溶劑。片劑或丸劑可根據需要被蔗糖、明膠、瓊脂、果膠、羥丙基纖維素及鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素等的糖衣或胃溶性或腸溶性薄膜包覆。
另外，在對作為本發明的有效成分的生藥的活性無不良影響的前提下，還可摻入水溶性維生素(咖啡因、維生素B1、B2、維生素B6、維生素B12、維生素C、生物素、肉毒鹼、泛酸及煙酸及其衍生物等)、脂溶性維生素(維生素A、維生素E及其衍生物等)、胺基酸(牛磺酸及精氨酸等)、東洋香草(紫蘇、甘草、銀杏、蒲公英、菊花、人參及桂皮等)或西洋香草(鋸棕櫚、貫葉連翹、紫錐花、茴香子、洋甘菊、迷迭香、薄荷、尤加利、燻衣草、玫瑰、黃槿及蘆薈等)。另外，依據與使用方法等的關係，還可摻入乳果糖等低聚糖或市售的乳酸菌(比菲德氏菌，bifidus)等作為其它的有效成分。
口服用液體組合物包括製藥學中允許的乳濁劑、溶液劑、懸濁劑、糖漿劑及酏劑等，包含常用的惰性稀釋劑，例如精製水及乙醇等。該組合物除了惰性稀釋劑以外，也可含有溼潤劑、懸濁劑等補劑、甜味劑、矯味劑、芳香劑及防腐劑。
另外，作為健康食品，可以飲料或果凍、餅乾、家常小甜餅及糖果等點心的形式提供。
本發明的組合物含有南瓜子及紅花，還有車前草、忍冬或紫蘇等生藥為有效成分，它們的含量範圍以南瓜子20～60質量％、紅花10～40質量％、其它生藥各5～70質量％為宜。
本發明的有效成分的給予方法可考慮給予對象的年齡及性別等根據不同情況而適當地決定，通常成人60kg體重的每日生藥總量，口服為0.5～5g，較好為1～3g。健康食品、營養補充劑等也以此為準。
本發明中的丙型慢性肝炎的治療佐劑組合物是指通過與前述的C型肝炎的一般治療方針中使用的幹擾素或烏索脫氧膽酸等藥物並用而顯示出相加或相乘的效果的組合物。本發明的組合物與上述其它一般的C型肝炎治療藥並用時，對其給藥順序並無特別的限制，可同時並用，也可在服用本發明的組合物數個月後再開始利用上述其它的一般C型肝炎治療藥的治療，相反地也可進行數個月的上述一般的C型肝炎治療藥的治療後，以維持療法服用本發明的組合物。
另外，本發明不僅可改善及減輕人的C型肝炎病毒性疾病的症狀，也可作為狗或貓等伴侶動物的肝炎病毒的治療藥、改善及減輕症狀用健康食品使用。
實施例以下，基於實施例及試驗例更詳細地說明本發明，但本發明並不限於這些實施例。
實施例1(1)丙型慢性肝炎患者的C型肝炎病毒RNA量的測定試驗入院試驗開始時，以RNA量為高值的丙型慢性肝炎患者26名(男性13名，女性13名。28～80歲(平均為59.0歲)為對象)。將本發明的組合物之一的商品名為InterPunch(註冊商標；Sanwell株式會社制)的藥物1天2包(1.5g/包)給藥3個月。測定給藥前、給藥1個月及3個月後的到院時的自覺症狀、他覺症狀、一般生化學現象及HCV-RNA量。
(2)試驗結果作為自覺症狀的全身倦怠感的6例中的4例以及腹脹感的1例中的1例的症狀在給藥1個月後消失。作為他覺症狀的肝腫大的13例中的2例以及手掌紅斑的6例中的1例的症狀在給藥1個月後消失。另外，沒有出現自覺症狀及他覺症狀比試驗開始前更惡化的患者。一般臨床檢查(血液學檢查(白血球數、紅血球數、血紅蛋白量、血細胞比容值、血小板數及白血球像)、血液生化學檢查(總蛋白、白蛋白、A/G、總膽紅素、AST、ALT、ZTT、LDH、鹼性磷酸酯酶、γ-GTP、總膽固醇、TG、尿素氮、肌酸酐、Na、K及Cl)也未有惡化的傾向(例如，日本肝臟學會監修慢性肝炎診療手冊，醫學書院，東京，2001，ISBN426011977X)。將給藥前的RNA量在500-849KIU/ml及850KIU/ml以上的情況分別進行探討，850KIU/ml以上的患者(13例)的平均值為1447.7KIU/ml，給藥1個月後及3個月後有意義地分別減少為993.6KIU/ml及961.8KIU/ml(p＝0.032及P＝0.015)。5001-849KIU/ml的患者(13例)的平均值為649.4KIU/ml，在給藥3個月後減少為527.5KIU/ml，確認有減少的傾向(p＝0.108)。
(3)考察結果全身倦怠感消失而恢復生活活力，腹脹感等腹部不適感消失，生理上或精神上壓迫感消失等，提升了丙型慢性肝炎患者的生活品質(以下稱為QOL)。丙型慢性肝炎患者中的肝腫大是醫生判斷丙型慢性肝炎的他覺症狀時最經常觀察到的明顯的針狀(參考丙型慢性肝炎的臨床及經過，Medicina，30(3)，pp.474-477，1993年)，上述2例病例中所確認的肝腫大的消失對於治療丙型慢性肝炎具有非常大的意義。
另外，本發明的組合物可減少HCV-RNA量。在上述病例中無任何的副作用。本發明的組合物在用幹擾素療法對丙型慢性肝炎患者進行治療前服用，至少可提高干擾素的治療效果，另外，提示其作為丙型慢性肝炎的治療佐劑組合物有效。
實施例2(1)試驗者將包含實施例1的26名患者的丙型慢性肝炎的入院患者50例(男性26例，女性24例，年齡28～80歲，59.0±10.6歲(平均±SD))為總記錄病例，實施公開標示(open-label)的試驗。編組基準由主治醫生選定，經本人同意。HCV的血清型是第1組有40例，第2組有9例，無法判定有1例。具有IFN治療經歷的患者有24例。
本試驗中，將服用狀況不良的4例、缺乏測定數據的4例、服用前6個月以內的給予IFN的3例、由自己判斷而中止服藥的2例、服用中開始給予IFN的1例、給藥前認為並發肝腫瘤判斷其不適合作為試驗對象的1例的合計15例除外，將剩餘的35例(男性17例，女性18例，年齡28～80歲，60.5±10.4歲，(平均±SD))作為有效分析對象。有效分析對象中的血清型是第1組有27例，第2組有7例，無法判定有1例，試驗開始前具有IFN治療經歷的患者有15例。
給藥期間使用肝臟用並用藥的患者為22例。在試驗開始前有13例使用了烏索脫氧膽酸，在給藥期間又新增加5例。並用甘草製劑與烏索脫氧膽酸製劑的有2例，並用Kantec片(商品名)與Proheparum片(商品名)的有1例。並用Taurine散劑(商品名)與烏索脫氧膽酸的有1例。剩餘3例分別單獨服用Aminoleban(商品名)、小柴胡湯或Proheparum片。
(2)試驗物質作為試驗物質，與實施例1相同使用InterPunch(Sanwell株式會社制，東京，日本)。給各試驗者服用此InterPunch，1天量為2包1.5g(含有4種植物乾燥原料粉末，合計為1g份的萃取物)。
(3)檢查項目評估作為自覺症狀的噁心及嘔吐、腹痛、腹脹感、吐血及便血、皮膚搔癢感及全身倦怠感這6項，作為他覺症狀的肝腫大、水腫、腹水、手掌紅斑及黃疸這5項。自覺症狀與他覺症狀都在患者到院時由主治醫生通過問診或觸診等確認並記錄於病歷。血液檢查項目包括白血球數、紅血球數、血紅蛋白量、血細胞比容值、血小板數及白血球百分比，生化學檢查項目包括AST、ALT、ALP、γ-GTP、ZTT、LDH、UN、肌酸酐、Na、K、Cl、總膽紅素、總蛋白、白蛋白、總膽固醇及TG，尿檢項目包括蛋白、糖及潛血。另外，以Amplicor法定量HCV-RNA量。通常的測定上限為850KIU/ml，若為該值以上的值，則以稀釋法實施再測試。分別在服用前、服用1個月後及服用3個月後測定上述的檢查項目。
(4)統計學方法對於血液檢查、生化學檢查、HCV-RNA定量及HCV抗體價的變化使用Student’s t-test。對於並用藥的影響，以x2檢定進行判定。
(5)考察結果(i)自覺症狀與他覺症狀本試驗中，服用前有6例自覺全身倦怠感的自覺症狀，服用1個月後有4例(66.7％)得到改善，3個月後也有4例得到改善。自覺腹脹感有2例，服用1個月後認為有1例(50％)得到改善，3個月後2例(100％)均得到改善。自覺噁心及嘔吐有2例，服用3個月後有1例(50％)得到改善。
關於他覺症狀，試驗開始前經醫生觸診認為有16例肝腫大，服用1個月後有1例(6.3％)得到改善，3個月後有2例(12.5％)得到改善。對於其它症狀雖未認為有改善，但認為無服用前既有的自覺症狀與他覺症狀在服用後有所惡化的患者。這些結果總結示於下述的表1。
(ii)血液學檢查、生化學檢查及尿檢血液學檢查項目無變化。白血球百分比也未因服藥而有所影響。血液學檢查的結果示於以下的表2。
生化學檢查中，ZTT在服用前為17.5±7.6IU/L，服用3個月後有意義地增加為18.4±7.8IU/L(p＜0.05)。Na在服用前為141.5±2.2mEq/L，服用1個月後有意義地增加為142.7±20mEq/L(p＜0.01)，服用3個月後與服用前沒有差異(141.1±2.2mEq/L)。其它的肝功能及腎功能等的生化學檢查項目無變化。此結果示於下述的表3。
尿檢項目無特別變化。
(iii)HCV-RNA定量及HCV抗體價HCV-RNA定量以全部35例為對象，在服用前、服用1個月後及3個月後測定，在測定期間進行比較，平均±SD分別為734.4±716.1KIU/ml、605.1±471.1KIU/ml及578.7±437.9KIU/ml，該值在服用後經時減少，但其減少比率在統計學上無有意差。但是，就未滿100KIU/ml、100-499KIU/ml、500-849KIU/ml及850KIU/ml以上這4種病毒量的分層分析，如圖1所示，850KIU/ml以上的組(n＝12)在服用後1個月及3個月有意義地減少(分別為p＝0.044及p＝0.024)。500-849KIU/ml組的患者(n＝12)在服用後3個月有意義地減少(p＝0.021)。另外，服用前病毒量為1.4KIU/ml的1個病例，在服用1個月後其病毒量降至檢測靈敏度以下。
HCV抗體價以25例的平均值進行統計分析，在服用前、服用1個月後及3個月後分別為66.44±7.78HCV-Ab Index、67.17±7.00HCV-Ab Index及66.83±8.23HCV-Ab Index，並無改變，利用上述病毒量進行分層分析認為無有意義地改變。
另外，HCV-RNA量的減少與AST及ALT的改變之間無有意義的相關性。有無並用含有烏索脫氧膽酸的製劑與HCV-RNA量的增減無有意差。認為自覺或他覺症狀的改善例與病毒量之間也無一定的傾向。
(iv)有害現象71歲女性在服用第1個月時有輕度的腹瀉，但未中斷服用，後來腹瀉消失。60歲男性在服用第3個月雖有腹脹感，但為輕度。其它則認為無有害現象。
(v)考察結果本試驗應特別記述的變化是未滿100KIU/ml、100-499KIU/ml、500-849KIU/ml及850KIU/ml以上這4種病毒量的分層分析，850KIU/ml以上的患者在服用後1個月及3個月有意義地減少(p＜0.05)，500-849KIU/ml的患者在服用後3個月有意義地減少(p＜0.05)。
另外，此次的500KIU/ml以下的低病毒量患者組中雖未有優勢的降低，但對於自然治癒準確率極低的丙型慢性肝炎(參考《丙型慢性肝炎的臨床及經過》，Medicina，30(3)，pp.474-477，1993)，即使有一例因服用本發明的組合物而使病毒量降至檢測靈敏度以下也是令人驚訝，這就顯示該組合物對於低病毒量的患者也有效果。
此次探討中發現，在HCV-RNA量減少的例子中，AST及ALT的降低並不明顯，未能確認病毒量的減少與肝功能指標的相關性。對於肝病患的預後，認為AST及ALT的下降非常重要的報告有14例，但病毒的減少對臨床的有用性在現階段尚不明朗。然而，因為IFN的有效率依賴於病毒量，因此提示本發明的組合物與含有幹擾素的其它藥劑並用對於丙型慢性肝炎的治療有效。
自覺症狀的病例數較少，服用3個月後全身倦怠感在6例中有4例得到改善，腹脹感的2例中的2例及噁心及嘔吐的2例中的1例得到改善。另外，他覺症狀中通過觸診認為肝腫大的有16例，服用3個月後有2例消失。沒有服用前具有自覺症狀及他覺症狀而在服用後出現惡化的患者。確認全身倦怠感消失的患者的QOL有所提升。
本試驗中觀察到有害現象2例，1例是服用第1個月時有輕度的腹瀉。然而，繼續服用時腹瀉症狀消失，因此為臨時性反應。本試驗所使用的健康食品中摻入了比菲德氏菌，對其影響也有所考慮。另一例是60歲男性在服用第3個月時有腹脹感，但為輕度。其它患者無有害現象出現。另外，可確認包含有效性分析除外例的50例均無服用本發明組合物所引起的嚴重的有害現象。
此外，採用廣泛地用於C型肝炎的IFN時，除了如流行性感冒般的發燒、關節疼痛及肌肉疼痛等症狀之外，還觀察到脫髮、憂鬱症狀、眼睛異常、食慾降低及體重減少等副作用，但通過此次服用本發明組合物，可期待出現無嚴重的有害現象的C型肝炎治療劑。
血液及生化學檢查中，ZTT於3個月後有意義地增加。ZTT值是反映免疫球蛋白(IgG)、成為觀察慢性肝炎症狀發展的過程中的間質系反應的指標，但並不直接表示肝細胞的受損情況。另一方面，作為肝障礙指標的AST及ALT未增加，HCV抗體也無變化，白蛋白等蛋白分布也未有明顯變化。由這些而綜合地判斷，ZTT的增加並未引起患者的自身免疫性現象或肝硬變等某些嚴重的變化。另外，認為Na在服用1個月後有意義地增加(p＜0.01)，但仍在基準值範圍內變化，3個月後回復至服用前的值，認為無有意義的副作用。
由上述結果可認為，給丙型慢性肝炎患者服用了本發明組合物的情況下，即使是高病毒量患者，最快在服用1個月後病毒量有所減少。另外，全身倦怠感等自覺症狀或肝腫大等他覺症狀也在部分病例中得到改善。未出現血液及生化學的檢查項目的惡化，也無因服用所引起的嚴重有害現象，治療丙型慢性肝炎時，並用本發明的組合物進行治療顯示出協同作用。
表1 自覺症狀及他覺症狀
表2 血液檢查的結果
注數據為平均值±SD(34例)，全部項目無統計學有意差。
表3 生化學檢查的結果
注*p＜0.05；**p＜0.01(與服用前比較)平均值±SDZTT的服用前與服用3個月後的數據具有統計學有意差的增加。
鈉的服用前與服用1個月後的數據具有統計學有意差的增加。
實施例3將5.0g的南瓜子、3.0g的紅花、1.0g的車前草、3.0g的忍冬及67g的乳糖以及16g的澱粉以固體混合機混合均勻，預先將2g的羥丙基纖維素及5g的癸酸三甘油酯溶解於40g的85％乙醇形成混合溶劑，混合後以籃型制粒機(網徑為1mm)造粒後，以14網目的篩子過篩，乾燥後成圓柱狀顆粒。將上述成分與甘露糖醇、羥丙基纖維素、矽鋁酸鎂、糖精及香料混合均勻，得到12包顆粒劑(參考日本專利特開2000-231584號)。
以下與實施例4同樣，調製各種配比(重量％)的組合物。
表4 組合物的調製例
實施例4本發明組合物之一的InterPunch(註冊商標；Sanwell株式會社制)的調製例。
混合南瓜子、紅花、車前草及忍冬的生藥原料粉末，以10倍量的水於95±5℃萃取30分鐘，過濾萃取液後濃縮，添加還原麥芽糖、乳糖及澱粉等賦形劑以及香料，施以造粒步驟，製成細粒。
表5 每2包InterPunch中的營養成分的分析例
實施例5安全性本發明組合物配方A成分(乾燥粉末的配比)南瓜子(50％)、紅花(20％)、車前草(15％)及忍冬(15％)。
使健康成人男性7名在2周內攝取上述組合物，1日2次(每次以原料生藥換算為1.0g)。在開始攝取前、開始後第1及第2周抽血，實施一般的臨床檢查(血液學檢查(白血球數、紅血球數、血紅蛋白量、血細胞比容值、MCV、MCH、MCHC、血小板數及白血球像)、血液生化學檢查(總蛋白、白蛋白、A/G、總膽紅素、MCV、MCH、MCHC、AST、ALT、鹼性磷酸酯酶、γ-GTP、總膽固醇、中性脂肪、尿素氮、尿酸、肌酸酐)及免疫生化學檢查(非特異性的IgE、非特異性的IgG及鐵傳遞蛋白)，以及醫生的問診及聽打診，理學檢查(體溫、脈博及血壓)，探討攝食本發明組合物配方A的安全性。另外，通過測定細胞機能(單核球(血液中巨噬細胞)吞噬能力、嗜中性細胞吞噬能力及NK細胞活性)以及細胞素(IL2、4、6、8、10、12、IFN-β、TNF-α)，探討本健康食品的安全性。
其結果是，攝食2周的試驗實施期間，自覺症狀、他覺症狀及包含免疫生化學檢查的臨床檢查值顯示，未因攝取試驗食品而出現有害現象，確認無安全性上的問題。細胞機能以及細胞素也無顯著的變化，明確健康成人男性在上述給藥量及服用期間未出現可測的變化。
實施例6安全性使健康成人男性攝取本發明組合物之一的InterPunch，歷時8年(開始攝取時為31歲)。最初的2年是每日攝取平均1g的配方A的生藥原料混合粉末，之後每日攝取以原料粉末換算平均為1g的實施例配方A的健康食品。其結果是，在攝取期間對一般的血液性狀、健康狀態等均無不良影響。
產業上利用的可能性如上述實施例所示，本發明的由南瓜子、紅花、車前草及忍冬所形成的組合物，使C型肝炎患者的自覺症狀，例如全身倦怠感及腹脹感消失，還可使醫生診斷的他覺症狀，例如肝腫大恢復為正常肝狀態以及使手掌紅斑消失。另外，投予上述組合物1個月後至3個月後，因為C型肝炎病毒RNA量有所減少，因此至少作為丙型慢性肝炎治療用組合物有效，具體來講，在導入幹擾素治療前服用本組合物可以提高干擾素的治療效果。丙型慢性肝炎患者的肝腫大是醫生診斷肝炎症狀發展狀況的1個指標。肝腫大若有所改善，則對於丙型慢性肝炎的治療非常有意義，因此本發明作為用於抑制C型肝炎發展為肝硬化或肝硬化再發展為肝癌的組合物有效。
本發明對於C型肝炎患者中的丙型慢性肝炎病毒RNA量為高值的患者特別有效。除此之外，本發明組合物可作為減少C型肝炎病毒RNA量用組合物或改善及減輕丙型慢性肝炎症狀用組合物使用。另外，其副作用產生的可能性較小，可長期使用，或者可與傳統的丙型慢性肝炎治療劑，尤其是可與丙型慢性肝炎治療劑並用。
權利要求
1.丙型慢性肝炎病毒RNA量減少用組合物，其特徵在於，由南瓜子、紅花、車前草及忍冬形成。
2.丙型慢性肝炎的症狀改善或減輕用組合物，其特徵在於，由南瓜子、紅花、車前草及忍冬形成。
3.用於抑制丙型慢性肝炎發展為肝硬化的組合物，其特徵在於，以南瓜子、紅花、車前草及忍冬為有效成分。
全文摘要
本發明通過給予由南瓜子、紅花、車前草及忍冬形成的組合物，不僅使丙型慢性肝炎患者的自覺症狀，例如全身倦怠感及腹脹感消失，還可使醫生診斷的他覺症狀，例如肝腫大及手掌紅斑等現象減輕或消失。另外，投予上述組合物1個月後至3個月後，因為C型肝炎病毒RNA量逐漸明顯減少，因此本發明的組合物至少作為丙型慢性肝炎治療用組合物有效。對丙型慢性肝炎患者中的丙型慢性肝炎病毒RNA量為高值的患者特別有用。
文檔編號A61P1/16GK1767845SQ200480005758
公開日2006年5月3日 申請日期2004年3月4日 優先權日2003年3月5日
發明者吉田哲, 金子周一 申請人:創新免疫調節材料株式會社