用於治療呼吸道疾病的2,5‑二取代的環戊烷甲酸的製作方法
2023-07-22 13:08:56 2
人巨噬細胞彈性蛋白酶（HME，EC3.4.24.65）屬於基質金屬肽酶（MMPs）家族並也被稱作人基質金屬肽酶12（hMMP-12）。在很大程度上尤其由巨噬細胞在與「刺激性」物質或粒子接觸後形成、活化和釋放該蛋白質。這樣的物質和粒子可以例如作為外來物質存在於尤其如在尤其香菸煙霧或工業粉塵中出現的懸浮粒子中。在更廣義上，這些刺激性粒子還包括如在炎性過程中有時以高濃度存在的內源性和外源性細胞成分和細胞碎片。高活性酶能夠降解大量的結締組織蛋白質，例如主要是彈性蛋白（因此得名）和其它蛋白質和蛋白多糖，如膠原、纖連蛋白、層粘連蛋白、硫酸軟骨素、硫酸肝素等。通過該酶的這種蛋白水解活性使巨噬細胞能夠穿透基底膜。彈性蛋白例如在表現出高彈性的所有類型的組織中，例如在肺和動脈中以高濃度存在。在大量病理學過程，如組織損傷中，HME在組織降解和重塑中起到重要作用。此外，HME是炎性過程中的重要調節劑。其是炎性細胞募集中的關鍵分子——通過例如釋放主要炎症介質腫瘤壞死因子α(TNF-α)和介入由轉化生長因子-β（TGF-β）介導的信號通路[HydrolysisofaBroadSpectrumofExtracellularMatrixProteinsbyHumanMacrophageElastase,Gronski等人,J.Biol.Chem.272,12189-12194(1997)]。MMP-12還在宿主防禦中發揮作用，特別是用於調節抗病毒免疫，可能由於介入幹擾素-α(IFN-α)-介導的信號通路[Anewtranscriptionalroleformatrixmetalloproteinase-12inantiviralimmunity,Marchant等人,NatureMed.20,493-502(2014)]。因此推測HME在產生和/或進程與感染性或非感染性炎性事件和/或增殖性和肥大性組織和血管重塑相關的許多疾病、損傷和病理變化中起到重要作用。這些特別是肺、腎或心血管系統的疾病和/或損傷，或它們可以是癌症或其它炎性疾病[Macrophagemetalloelastase(MMP-12)asatargetforinflammatoryrespiratorydiseases,Lagente等人,ExpertOpin.Ther.Targets13,287-295(2009)；MacrophageMetalloelastaseasamajorFactorforGlomerularInjuryinAnti-GlomerularBasementMembraneNephritis,Kaneko等人,J.Immunol.170,3377-3385(2003)；ASelectiveMatrixMetalloelastase-12InhibitorRetardsAtheroscleroticPlaqueDevelopmentinApolipoproteinEKnock-outMice,Johnson等人,Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.31,528-535(2011)；ImpairedCoronaryCollateralGrowthintheMetabolicSyndromeIsinPartMediatedbyMatrixMetalloelastase12-dependentProductionofEndostatinandAngiostatin,Dodd等人,Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.33,1339-1349(2013)；Matrixmetalloproteinasepharmacogenomicsinnon-small-celllungcarcinoma,Chetty等人,Pharmacogenomics12,535-546(2011)]。本文中提到的肺的疾病和損傷特別是慢性阻塞性肺病（COPD）、肺氣腫、間質性肺病（ILD），例如特發性肺纖維化（IPF）和肺結節病，急性肺損傷（ALI）、急性呼吸窘迫症候群（ARDS）、囊性纖維化（CF；也稱作粘稠物阻塞症）、哮喘以及感染性，特別是病毒誘導的呼吸道疾病。在此可舉例提到的其它纖維化疾病是肝纖維化和系統性硬化症。涉及HME的心血管系統的疾病和損傷是例如在動脈硬化，在此特別是頸動脈硬化，感染性心內膜炎，在此特別是病毒性心肌炎、心肌病、心功能不全、心源性休克、急性冠狀動脈症候群（ACS）、動脈瘤、急性心肌梗死（AMI）後的再灌注損傷、腎或視網膜的缺血性損傷以及它們的慢性過程，例如慢性腎病（CKD）和Alport症候群中的組織和血管變化。在此也可以提到代謝症候群和肥胖。與膿毒症相關的疾病是例如全身炎症反應症候群（SIRS）、重症膿毒症、膿毒性休克和多器官衰竭（MOF；多器官功能障礙（MODS））以及血管內凝血（彌散性血管內凝血，DIC）。癌症過程中的組織退化和重塑的實例是癌細胞侵入健康組織（形成轉移瘤）和新血管形成（血管新生）。HME發揮作用的其它炎性疾病是類風溼病，例如類風溼性關節炎以及慢性腸道炎症（炎性腸病（IBD）；克羅恩病CD；潰瘍性結腸炎UC）。通常推測，彈性蛋白酶介導的病理學過程基於游離彈性蛋白酶（HME）和內源性彈性蛋白酶抑制劑蛋白（金屬蛋白酶組織抑制劑，TIMP）之間的平衡的移動。在各種病理學，特別是炎性過程中，游離彈性蛋白酶（HME）的濃度提高，意味著蛋白酶和抗蛋白酶之間的平衡局部朝蛋白酶移動。在中性粒細胞的彈性蛋白酶（人中性粒細胞彈性蛋白酶，HNE，絲氨酸蛋白酶家族的成員）和內源性抗蛋白酶AAT（α-1抗胰蛋白酶，絲氨酸蛋白酶抑制劑的成員，SERPINs）之間存在類似的（失）平衡。這兩種平衡聯繫在一起，因為HME裂解HNE的抑制劑並使其失活，且反之亦然，HNE裂解HME抑制劑並使其失活，因此各自的蛋白酶/抗蛋白酶失衡可另外移動。此外，在局部炎症領域中，強氧化條件佔優勢（氧化爆發），因此進一步增強蛋白酶/抗蛋白酶失衡[PathogenictriadinCOPD:oxidativestress,protease-antiproteaseimbalance,andinflammation,Fischer等人,Int.J.COPD6,413-421(2011)]。目前，多於20種MMPs是已知的，它們過去根據它們的最顯著底物大致分成不同類別，例如明膠酶（MMP-2、MMP-9）、膠原酶（MMP-1、MMP-8、MMP-13）、基質溶解素（MMP-3、MMP-10、MMP-11）和基質分解素（MMP-7、MMP-26）。HME（MMP-12）是金屬彈性蛋白酶的迄今唯一代表。此外，另一些MMPs被添加到所謂的MT-MMPs類別（膜型MMPs）中，因為這些具有將該蛋白質錨固在膜中的特徵結構域（MMP-14、MMP-15、MMP-16、MMP-17、MMP-24、MMP-25）。所有MMPs的共同點是在該酶的活性中心的保存的鋅結合區，這對催化活性而言是重要的並也可存在於其它金屬蛋白（例如解聚素和金屬蛋白酶，ADAM）中。絡合的鋅被該蛋白質的N-末端前肽結構域中的巰基掩蔽，這產生該酶的無酶活性的前體形式（Pro-form）。僅由於這種前肽結構域的裂解才使該酶的活性中心中的鋅解除這種配位並因此活化該酶（所謂的通過半胱氨酸開關活化）[Matrixmetalloproteinaseinhibitorsastherapyforinflammatoryandvasculardiseases,Hu等人,NatureRev.DrugDiscov.6,480-498(2007)]。大多數已知的合成MMP抑制劑具有鋅絡合官能團，非常通常例如異羥肟酸根、羧酸根或硫醇[RecentDevelopmentsintheDesignofSpecificMatrixMetalloproteinaseInhibitorsaidedbyStructuralandComputationalStudies,B.G.Rao,Curr.Pharm.Des.11,295-322(2005)]。這些抑制劑的支架結構通常也類似於肽，此時稱為所謂的肽模擬物（通常具有差的口服生物利用度），或其沒有與肽的類似性，此時更通常稱為小分子（SMOLs）。相當一般而言，這些抑制劑的物理化學和藥代動力學性質對在何種組織中在多長時間內在多大程度上「遇到」哪種靶分子（靶）和哪種不合意的分子（反靶（anti-targets）、非靶）具有巨大影響。此處的主要挑戰是確定某一MMP在疾病發生中的特定作用。特別由於存在大量MMPs和其它類似分子（例如ADAMs）以及在每種情況下大量可能的生理底物和因此在某些情況下在多種多樣的信號轉導通路中的相關抑制或活化作用的事實，這變得困難。許多體外和臨床前體內實驗非常有助於更好地理解在各種疾病模型（例如轉基因動物、敲除動物以及來自人類研究的遺傳數據）中的MMPs。就可能的藥物療法驗證靶點最終只能在對人類或患者的臨床試驗系列中進行。在這方面，已在癌症研究中臨床研究第一代MMP抑制劑。此時，MMP蛋白質家族只有少數代表是已知的。研究的抑制劑無一能在臨床上令人信服，因為在有效劑量下，無法容忍發生的副作用。在了解其它MMPs的過程中看出，該第一代抑制劑的代表是非選擇性抑制劑，即在相同程度上抑制大量不同的MMPs（pan-MMP抑制劑、pan-MMPIs）。對一個或多個MMP靶點的所需作用很可能被對一個或多個MMP反靶的不合意作用或被對另一靶點的不合意作用掩蓋（[Validatingmatrixmetalloproteinasesasdrugtargetsandanti-targetsforcancertherapy,Overall&Kleifeld,NatureRev.Cancer6,227-239(2006)]。現在同樣已經臨床試驗了以提高的選擇性為特徵的更新的MMP抑制劑，包括明確被稱作MMP-12抑制劑的化合物，但是迄今同樣沒有令人信服的臨床成功性。在更仔細審查時，還已發現之前被描述為選擇性的抑制劑沒有那麼選擇性。例如，對於作為MMP-12抑制劑的臨床試驗化合物「MMP408」，描述了在體外對MMP-13、MMP-3、MMP-14、MMP-9、Agg-1、MMP-1、Agg-2、MMP-7和TACE的一定至顯著的選擇性[ASelectiveMatrixMetalloprotease12InhibitorforPotentialTreatmentofChronicObstructivePulmonaryDisease(COPD):Discoveryof(S)-2-(8-(Methoxycarbonylamino)dibenzo[b,d]furan-3-sulfonamido)-3-methylbutanoicacid(MMP408),Li等人,J.Med.Chem.52,1799-1802(2009)]。關於MMP-2和MMP-8的體外活性數據指出對這兩種MMP代表的較不有利的選擇性[Matrixmetalloproteinase-12isatherapeutictargetforasthmainchildrenandyoungadults,Mukhopadhyay等人,J.AllergyClin.Immunol.126,70-76(2010)]。對用於治療COPD的臨床試驗物質AZD1236，情況類似，其被描述為雙重MMP9/12抑制劑[EffectsofanoralMMP-9and-12inhibitor,AZD1236,onbiomarkersinmoderate/severeCOPD:Arandomisedcontrolledtrial,Dahl等人,Pulm.Pharmacol.Therap.25,169-177(2012)]。這種化合物的研發在2012年停止；在此也指出MMP-2和MMP-13的顯著抑制[http://www.wipo.int/research/en/details.jspid=2301]。此外，當評估MMP選擇性時，指出仔細評估動物模型的意義。例如，試驗化合物MMP408表現出顯著降低的對小鼠的直系同源MMP-12靶的親合力：IC502nM（人MMP-12）,IC50160nM（小鼠MMP-12）、IC50320nm（大鼠MMP-12）[見上文Li等人,2009；Mukhopadhyay等人,2010]。沒有公開關於對小鼠的其它MMPs的活性強度的數據。試驗物質AZD1236看起來情況類似[參見http://www.wipo.int/research/en/details.jspid=2301下給出的關於在各種動物物種中的交叉反應性的信息]。除超出物種邊界的選擇性狀況外，對靶MMP-12本身的活性強度也非常重要。在相對類似的藥代動力學狀況下，高效化合物導致相對於較低效的化合物更低的治療劑量，且較低劑量通常與降低的副作用可能性相關聯。這在包括可與所需靶和/或不合意的反靶和非靶相互作用的化合物的所謂「游離部分（Fraktion）」（未結合的部分，fu）而言特別如此（「游離部分」被定義為未結合到血漿成分上的化合物的可用量；這些主要是血蛋白成分，例如白蛋白）。除MMP選擇性外，特異性因此也至關重要。抑制巨噬細胞彈性蛋白酶的新型活性物質因此應具有高選擇性和特異性以能夠有針對性地抑制HME。在這方面，該物質的良好代謝穩定性也是必要的（低清除率）。此外，這些化合物應在氧化條件下穩定以不損失在疾病發生中的抑制效力。慢性阻塞性肺病（COPD）是以由肺氣腫和/或慢性支氣管炎造成的呼吸流量的阻塞為特徵的進展緩慢的肺病。該疾病的最初症狀通常出現在生命的第四至第五個十年期間。在生命的隨後歲月中，呼吸短促通常惡化，表現為與過多和局部膿性痰相關聯的咳嗽和狹窄呼吸至氣喘（呼吸困難）。COPD主要是吸菸者的疾病：吸菸是所有COPD病例的90%和所有COPD死亡的80-90%的成因。COPD是大的醫學問題並構成全世界第六常見的死因。在超過45歲的人群中，大約4-6%受其影響。儘管呼吸流量的阻塞可能僅是局部和暫時的，但COPD無法治癒。因此，治療目標是改善生活質量，緩解症狀，防止急性惡化和減緩肺功能的進行性損傷。在最近二十或三十年幾乎不變的現有藥物療法是使用支氣管擴張藥打開阻塞的呼吸道，並在某些情況下使用皮質類固醇限制肺的炎症[ChronicObstructivePulmonaryDisease,P.J.Barnes,N.Engl.J.Med.343,269-280(2000)]。由香菸煙霧或其它刺激物造成的肺的慢性炎症是該疾病發展的驅動力。根本的機制包含在肺的炎性反應過程中釋放各種趨化因子的免疫細胞。因此，將中性粒細胞和在進一步進程中，肺泡巨噬細胞吸引（gelockt）到肺結締組織和管腔上。中性粒細胞分泌主要含有HNE和蛋白酶3的蛋白酶混合物。活化的巨噬細胞釋放HME。因此，該蛋白酶/抗蛋白酶平衡局部朝蛋白酶移動，這尤其導致不受控的彈性蛋白酶活性並因此導致肺泡彈性蛋白的過度降解。這種組織降解造成支氣管坍塌。這與降低的肺彈性相關聯，這造成呼吸流量受阻和呼吸受損。此外，肺的頻繁和長期炎症會造成支氣管重塑並因此導致形成病變。這樣的病變有助於出現表明慢性支氣管炎的慢性咳嗽。從使用人痰樣品的實驗中獲知，HME蛋白質的量與煙霧或COPD狀態相關聯：HME的可檢測量在非吸菸者中最低，在曾吸菸者和吸菸者中略微提高，並在COPD患者中顯著提高[ElevatedMMP-12proteinlevelsininducedsputumfrompatientswithCOPD,Demedts等人,Thorax61,196-201(2006)]。用人痰樣品和支氣管肺泡衝洗液（BALF）獲得類似數據。在此，能夠檢測和量化活化的巨噬細胞上的HME：HME量COPD患者/吸菸者>COPD患者/曾吸菸者>曾吸菸者>非吸菸者[PatternsofairwayinflammationandMMP-12expressioninsmokersandex-smokerswithCOPD,Babusyte等人,Respir.Res.8,81-90(2007)]。在一定程度上類似於COPD的炎性肺病是間質性肺病（ILD），在此特別表現為特發性肺纖維化（IPF）和結節病[Commonalitiesbetweenthepro-fibroticmechanismsinCOPDandIPF,L.A.Murray,Pulm.Pharmacol.Therap.25,276-280(2012)；ThepathogenesisofCOPDandIPF:distincthornsofthesamedevil,Chilosi等人,Respir.Res.13:3(2012)]。在此也擾亂細胞外基質的內穩態。來自全基因組關聯研究的數據可以表明HME在此類纖維化疾病的發病中的特定作用[GeneExpressionProfilingIdentifiesMMP-12andADAMDEC1asPotentialPathogenicMediatorsofPulmonarySarcoidosis,Crouser等人,Am.J.Respir.Crit.CareMed.179,929-938(2009)；AssociationofaFunctionalPolymorphismintheMatrixMetalloproteinase-12PromoterRegionwithSystemicSclerosisinanItalianPopulation,Manetti等人,J.Rheumatol.37,1852-1857(2010)；Increasedserumlevelsandtissueexpressionofmatrixmetalloproteinase-12inpatientswithsystemicsclerosis:correlationwithseverityofskinandpulmonaryfibrosisandvasculardamage,Manetti等人,Ann.Rheum.Dis.71,1064-1070(2012)]。此外，有進一步的臨床前證據證明HME在缺血性炎性疾病過程中的決定性作用[MacrophageMetalloelastase(MMP-12)DeficiencyMitigatesRetinalInflammationandPathologicalAngiogenesisinIschemicRetinopathy,Li等人,PLoSONE7(12),e52699(2012)]。在缺血性腎損傷中也已知明顯更高的MMP-12表達，MMP-12還已知參與另一些炎性腎病[JNKsignallinginhumanandexperimentalrenalischaemia/reperfusioninjury,Kanellis等人,Nephrol.Dial.Transplant.25,2898-2908(2010)；MacrophageMetalloelastaseasaMajorFactorforGlomerularInjuryinAnti-GlomerularBasementMembraneNephritis,Kaneko等人,J.Immun.170,3377-3385(2003)；RoleforMacrophageMetalloelastaseinGlomerularBasementMembraneDamageAssociatedwithAlportSyndrome,Rao等人,Am.J.Pathol.169,32-46(2006)；Differentialregulationofmetzincinsinexperimentalchronicrenalallograftrejection:Potentialmarkersandnoveltherapeutictargets,Berthier等人,KidneyInt.69,358-368(2006)；MacrophageinfiltrationandrenaldamageareindependentofMatrixMetalloproteinase12(MMP-12)intheobstructedkidney,Abraham等人,Nephrology17,322-329(2012)]。本發明的目的因此是識別和提供充當人巨噬細胞彈性蛋白酶（HME/MMP-12）的強效、選擇性和特異性抑制劑並因此本身適用於治療和/或預防特別是呼吸道、肺和心血管系統的疾病的新型物質。專利申請WO96/15096-A1、WO97/43237-A1、WO97/43238-A1、WO97/43239-A1、WO97/43240-A1、WO97/43245-A1和WO97/43247-A1公開了對MMP-2、MMP-3、MMP-9和在較低程度上對MMP-1具有抑制活性的4-芳基-和4-聯芳基取代的4-氧代丁酸衍生物；由於這種活性狀況，這些化合物被認為特別適用於治療骨關節炎、類風溼性關節炎和腫瘤疾病。WO98/09940-A1和WO99/18079-A1公開了作為MMP-2、MMP-3和/或MMP-13的抑制劑的另一些聯芳基丁酸衍生物，它們適用於治療多種多樣的疾病。WO00/40539-A1提出使用4-聯芳基-4-氧代丁酸治療肺和呼吸道疾病，這基於這些化合物對MMP-2、MMP-3、MMP-8、MMP9、MMP-12和MMP-13的顯著程度不同的抑制。此外，WO2012/014114-A1描述了3-羥基丙酸衍生物且WO2012/038942-A1描述了作為雙重MMP9/12抑制劑的氧基-或磺醯基乙酸衍生物。但是，在上述目的的背景下，已經發現，來自現有技術的這些MMP抑制劑通常具有缺點，特別例如對MMP-12的抑制效力不足、與其它MMPs相比對MMP-12的選擇性不足和/或代謝穩定性有限。在WO2004/092146-A2、WO2004/099168-A2、WO2004/099170-A2、WO2004/099171-A2、WO2006/050097-A1和WO2006/055625-A2中描述了另一些芳基鏈烷羧酸衍生物作為用於治療糖尿病、癌症和神經退行性疾病的蛋白質-酪氨酸-磷酸酶1B（PTP-1B）抑制劑。現在已經令人驚訝地發現，特定的2,5-二取代的環戊烷甲酸衍生物與現有技術中已知的化合物相比在它們對人巨噬細胞彈性蛋白酶（HME/hMMP-12）的活性強度和選擇性方面具有顯著改進的狀況。此外，本發明的化合物表現出在含水體系中的良好溶解度和與血漿成分如白蛋白的低非特異性結合。本發明的化合物另外具有低體外清除率和良好的代謝穩定性。這種性質狀況總體上使得對本發明的化合物而言可預期低的可給藥性（Dosierbarkeit）和–由於更有針對性的作用模式–在治療過程中出現不合意副作用的風險降低。本發明的化合物還以對齧齒動物的直系同源的MMP-12肽酶，如小鼠MMP-12（也稱作小鼠巨噬細胞彈性蛋白酶，MME）和大鼠MMP-12的顯著抑制活性和選擇性為特徵。這實現在上述疾病的各種公認動物模型中更全面地臨床前評價該物質。本發明提供通式(I)的化合物及其鹽、溶劑合物和鹽的溶劑合物其中A是-O-或-S-，n是數值1或2，且R1是氫、甲基、氟甲基、二氟甲基或三氟甲基。如果式(I)包括的並在下文中提到的化合物尚未是鹽、溶劑合物和鹽的溶劑合物，本發明的化合物是式(I)的化合物及其鹽、溶劑合物和鹽的溶劑合物、式(I)包括的並具有下文中提到的式的化合物及其鹽、溶劑合物和鹽的溶劑合物、以及式(I)包括的並在下文中作為實施例提到的化合物及其鹽、溶劑合物和鹽的溶劑合物。在本發明中，鹽優選是本發明的化合物的生理可接受鹽。還包括本身不適合藥物用途但可例如用於本發明的化合物的分離、提純或儲存的鹽。本發明的化合物的生理可接受鹽特別包括衍生自常規鹼的鹽，例如和優選鹼金屬鹽（例如鈉和鉀鹽）、鹼土金屬鹽（例如鈣和鎂鹽）、鋅鹽和衍生自氨或具有1至16個碳原子的有機胺，例如和優選乙胺、二乙胺、三乙胺、N,N-二異丙基乙基胺、單乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、二甲基氨基乙醇、二乙基氨基乙醇、膽鹼、普魯卡因、二環己基胺、二苄胺、N-甲基嗎啉、N-甲基哌啶、精氨酸、賴氨酸和1,2-乙二胺的銨鹽。溶劑合物在本發明中被描述為以固態或液態通過與溶劑分子配位而形成絡合物的本發明的化合物的那些形式。水合物是溶劑合物的一種特定形式，其中與水發生配位。本發明中優選的溶劑合物是水合物。根據它們的結構，本發明的化合物可以以不同的立體異構形式，即以構型異構體或任選地以構象異構體（對映體和/或非對映體，包括阻轉異構體的情況中的那些）的形式存在。本發明因此包括對映體和非對映體和它們各自的混合物。可以以已知方式從對映體和/或非對映體的此類混合物中分離出立體異構一致的成分；為此優選使用色譜法，尤其是在非手性或手性相上的HPLC色譜法。在本發明中，術語「對映體純」被理解為如下：就手性中心的絕對構型而言所涉化合物以大於95%，優選大於98%的對映體過量存在。在此通過使用下列公式評估手性相上的HPLC分析色譜圖來計算對映體過量ee：。如果本發明的化合物可以以互變異構形式存在，則本發明包含所有互變異構形式。本發明還包括本發明的化合物的所有合適的同位素變體。本發明的化合物的同位素變體在此被理解為是指本發明的化合物內的至少一個原子已被具有相同原子序數但原子質量不同於自然界中通常或主要存在的原子質量的另一原子替換的化合物。可併入本發明的化合物中的同位素的實例是氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴和碘的同位素，如2H（氘）、3H（氚）、13C、14C、15N、17O、18O、32P、33P、33S、34S、35S、36S、18F、36Cl、82Br、123I、124I、129I和131I。本發明的化合物的特定同位素變體，尤其是其中已併入一種或多种放射性同位素的那些，可能有益於例如檢查作用機制或體內的活性物質分布；由於可相對容易製備和檢測，用3H或14C同位素標記的化合物尤其適用於此用途。此外，同位素，例如氘的併入可由於該化合物的更大代謝穩定性而帶來特定治療益處，例如體內半衰期的延長或所需活性劑量的降低；本發明的化合物的此類改性因此也可任選地構成本發明的優選實施方案。可通過本領域技術人員已知的通常常規的方法，例如根據以下進一步描述的方法和實施例中報導的規程、通過使用各種試劑和/或起始化合物的相應同位素改性製備本發明的化合物的同位素變體。此外，本發明還包括本發明的化合物的前藥。術語「前藥」在此是指本身在生物學上可能有活性或無活性但在例如通過代謝或水解途徑存在於體內的過程中轉化成本發明的化合物的化合物。本發明特別包括根據本發明的式(I)的羧酸的可水解酯衍生物作為前藥。這些被理解為是指在生理介質中在下述生物試驗的條件下，特別是在體內通過酶或化學途徑可水解成游離羧酸（作為主要生物活性化合物）的酯。(C1-C4)-烷基酯優選作為這樣的酯，其中烷基可以是直鏈或支化的。特別優選的是甲基、乙基或叔丁基酯。在本發明中，所有多次出現的基團彼此獨立地定義。當本發明的化合物中的基團被取代時，除非另行規定，該基團可以被單-或多取代。優選被一個取代基或兩個相同或不同的取代基取代。特別優選被一個取代基取代。在本發明中優選的是式(I)的化合物及其鹽、溶劑合物和鹽的溶劑合物，其中A是-O-，n是數值1或2，且R1是氫、甲基或三氟甲基。在本發明中，特別優選的是式(I)的化合物及其鹽、溶劑合物和鹽的溶劑合物，其中A是-O-，n是數值2，且R1是氫、甲基或三氟甲基。在本發明中特別重要的是式(I-A)和(I-B)的化合物和這些化合物的鹽、溶劑合物和鹽的溶劑合物以及它們的混合物其中A、n和R1具有上文給出的定義，且鍵合到中心環戊烷環上的基團具有彼此反式的布置，以及這些化合物的混合物，其中在(I-A)和(I-B)的此類混合物中A、n和/或R1各自相同。在本發明中，優選的是對映體純形式的式(I-A)的化合物和這些化合物的鹽、溶劑合物和鹽的溶劑合物其中A、n和R1具有上文給出的定義，如所示在中心環戊烷環上具有(1S,2R,5S)構型。與基團的各所示組合無關，基團的各組合或優選組合中給出的各基團定義也任意被其它組合的基團定義替代。非常特別優選的是兩個或更多個上述優選範圍的組合。本發明還提供製備本發明的化合物的方法，其特徵在於使式(II)的化合物其中A和R1具有上文給出的定義，在鹼存在下用式(III)的化合物烷基化其中n具有上文給出的定義，且X是離去基，例如氯、溴、碘、甲磺酸酯基、三氟甲磺酸酯基或甲苯磺酸酯基，以產生式(IV)的化合物其中n、A和R1具有上文給出的定義，然後藉助酸或氟化物試劑裂解2-(三甲基甲矽烷基)乙基酯基團以產生式(I)的羧酸其中n、A和R1具有上文給出的定義，任選地將由此獲得的式(I)的化合物分離成它們的對映體和/或非對映體和/或用相應的(i)溶劑和/或(ii)鹼轉化成它們的溶劑合物、鹽和/或鹽的溶劑合物。尤其適用於烷基化反應(II)+(III)→(IV)的鹼是鹼金屬碳酸鹽，如碳酸鋰、碳酸鈉、碳酸鉀或碳酸銫，鹼金屬醇鹽，如甲醇鈉或甲醇鉀、乙醇鈉或乙醇鉀或叔丁醇鈉或叔丁醇鉀，鹼金屬氫化物，如氫化鈉或氫化鉀，氨基化物鹼，如二異丙基氨基化鋰或雙(三甲基甲矽烷基)氨基化鋰、雙(三甲基甲矽烷基)氨基化鈉或雙(三甲基甲矽烷基)氨基化鉀，或常規的有機金屬鹼，如苯基鋰或正-、仲-或叔丁基鋰。優選使用碳酸鉀或叔丁醇鉀。適用於這一反應的惰性溶劑是例如醚，如二乙醚、二異丙基醚、甲基叔丁基醚、四氫呋喃、1,4-二氧雜環己烷、1,2-二甲氧基乙烷或雙(2-甲氧基乙基)醚，烴，如苯、甲苯、二甲苯、戊烷、己烷或環己烷，或偶極非質子溶劑，如乙腈、丁腈、N,N-二甲基甲醯胺（DMF）、N,N-二甲基乙醯胺（DMA）、N,N'-二甲基丙烯脲（DMPU）、N-甲基吡咯烷酮（NMP）或二甲亞碸（DMSO）。也可以使用此類溶劑的混合物。優選使用乙腈或N,N-二甲基甲醯胺（DMF）。反應(II)+(III)→(IV)通常根據參與的組分的反應性在0℃至+120℃的溫度範圍內進行。工藝步驟(IV)→(I)中的2-(三甲基甲矽烷基)乙基酯基團的裂解通過常規方法在惰性溶劑如二氯甲烷中藉助強酸，特別例如三氟乙酸或在醚類溶劑如四氫呋喃中藉助氟化物，特別例如氟化四丁基銨（TBAF）進行。該酯裂解通常在-20℃至+30℃的溫度範圍內進行。在A是-O-的情況下，式(II)的化合物可以如下製備：使式(V)的化合物其中PG是臨時保護基，例如苄基，在烷基-或芳基磷烷和偶氮二羧酸酯存在下與式(VI)的三嗪-4(3H)-酮衍生物反應其中R1具有上文給出的定義以產生式(VII)的化合物其中PG和R1具有上文給出的定義，然後裂解保護基PG以獲得式(II-A)的化合物其中R1具有上文給出的定義。反應(V)+(VI)→(VII)在「Mitsunobu反應」的常規條件下在膦和偶氮二羧酸酯存在下進行[參見例如D.L.Hughes,Org.Reactions42,335(1992)；D.L.Hughes,Org.Prep.Proced.Int.28(2),127(1996)]。合適的膦組分的實例是三苯基膦、三正丁基膦、1,2-雙(二苯基膦基)乙烷（DPPE）、二苯基(2-吡啶基)膦、(4-二甲基氨基苯基)二苯基膦或三(4-二甲基氨基苯基)膦。可用的偶氮二羧酸酯可以是例如偶氮二甲酸二乙酯（DEAD）、偶氮二甲酸二異丙酯（DIAD）、偶氮二甲酸二-叔丁酯、N,N,N'N'-四甲基偶氮二甲醯胺（TMAD）、1,1'-(偶氮二羰基)二哌啶（ADDP）或4,7-二甲基-3,5,7-六氫-1,2,4,7-四氮雜環辛烷-3,8-二酮（DHTD）。在此優選與偶氮二甲酸二乙酯（DEAD）聯合使用三正丁基膦。用於這一反應的惰性溶劑是例如醚，如二乙醚、二異丙基醚、甲基叔丁基醚、四氫呋喃、1,4-二氧雜環己烷、1,2-二甲氧基乙烷或雙(2-甲氧基乙基)醚，烴，如苯、甲苯、二甲苯、戊烷、己烷或環己烷，或極性非質子溶劑，如乙腈、丁腈、二甲亞碸（DMSO）、N,N-二甲基甲醯胺（DMF）、N,N-二甲基乙醯胺（DMA）、N,N'-二甲基丙烯脲（DMPU）或N-甲基吡咯烷酮（NMP）。也可以使用此類溶劑的混合物。優選使用四氫呋喃、甲苯或兩者的混合物。反應(V)+(VI)→(VII)通常在-20℃至+60℃，優選0℃至+40℃的溫度範圍內進行。任選地，在這一反應中使用微波裝置可能是有利的。工藝步驟(VII)→(II-A)中的作為臨時保護基PG的苄基的裂解以常規方式通過用氣態氫氣氫化或在轉移氫化的情況下藉助氫供體，如甲酸銨、環己烯或環己二烯實現，在每種情況下在合適的氫化催化劑，特別例如載鈀活性炭存在下。該反應優選在醇類溶劑，如甲醇或乙醇、在乙酸乙酯或四氫呋喃中或在此類溶劑的混合物中，任選在添加水的情況下，在+20℃至+80℃的溫度範圍內進行[關於可能的替代性保護基和關於此類保護基的引入和脫除，也參見：T.W.Greene和P.G.M.Wuts,ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,Wiley,NewYork,1999]。其中A是-S-的式(II)的化合物可如下製備：將上述的式(II-A)的化合物轉化成式(VIII)的相應的三氟甲磺酸酯其中R1具有上文給出的定義，然後使其在合適的鈀催化劑存在下與三烷基矽烷硫醇，例如三異丙基矽烷硫醇反應以產生式(II-B)的化合物其中R1具有上文給出的定義。由酚(II-A)以常規方式通過在胺鹼，例如N,N-二異丙基乙基胺或吡啶存在下與三氟甲磺酸酐反應製備三氟甲磺酸酯(VIII)。所用惰性溶劑通常是氯代烴，如二氯甲烷或氯仿，且該反應通常在-20℃至+25℃的溫度範圍內進行。通過鈀催化的與三烷基矽烷硫醇，例如三異丙基矽烷硫醇的反應實現三氟甲磺酸酯(VIII)進一步轉化成苯硫酚(II-B)。合適的催化劑的實例是乙酸鈀(II)、氯化鈀(II)、雙(三苯基膦)氯化鈀(II)、雙(乙腈)氯化鈀(II)、四(三苯基膦)鈀(0)、雙(二亞苄基丙酮)鈀(0)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)或[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]氯化鈀(II)，其各自與膦配體，例如2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯（X-Phos）、2-二環己基膦基-2',6'-二甲氧基聯苯（S-Phos）、1,2,3,4,5-五苯基-1'-(二-叔丁基膦基)二茂鐵（Q-Phos）、4,5-雙(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫噸（Xantphos）、2,2'-雙(二苯基膦基)-1,1'-聯萘（BINAP）、2-二環己基膦基-2'-(N,N-二甲基氨基)聯苯或2-二-叔丁基膦基-2'-(N,N-二甲基氨基)聯苯組合。該反應通常在鹼存在下進行。合適的鹼是鹼金屬碳酸鹽，如碳酸鈉、碳酸鉀或碳酸銫，鹼金屬磷酸鹽，如磷酸鈉或磷酸鉀，鹼金屬氟化物，如氟化鉀或氟化銫，鹼金屬叔丁醇鹽，如叔丁醇鈉或叔丁醇鉀，叔胺鹼，如三乙胺、N-甲基嗎啉、N-甲基哌啶、N,N-二異丙基乙胺、吡啶或4-N,N-二甲基氨基吡啶，或氨基化物鹼，如雙(三甲基甲矽烷基)氨基化鋰、雙(三甲基甲矽烷基)氨基化鈉或雙(三甲基甲矽烷基)氨基化鉀。該反應在惰性溶劑，例如甲苯、二甲苯、1,2-二甲氧基乙烷、四氫呋喃、1,4-二氧雜環己烷、乙腈、二甲亞碸（DMSO）、N,N-二甲基甲醯胺（DMF）或N,N-二甲基乙醯胺（DMA）或其混合物中在+50℃至+150℃的溫度範圍內進行；其中使用微波裝置可能是有利的。對於轉化(VIII)→(II-B)，優選使用由三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)、4,5-雙(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫噸（Xantphos）和N,N-二異丙基乙基胺構成的催化劑/配體/鹼體系以及使用1,4-二氧雜環己烷作為溶劑。在這一反應中首先形成的三烷基甲矽烷基硫化物在此處所用的含水反應後處理和色譜法產物提純的條件下再裂解，以直接獲得游離苯硫酚(II-B)[也參見M.Kreis和S.Bräse,Adv.Synth.Catal.347(2-3),313-319(2005)；M.S.Chambers等人,Int.Pat.Appl.WO2006/059149-A1，第9頁；C.-K.Pei和M.Shi,Tetrahedron:Asymmetry22(11),1239-1248(2011)]。上述各個工藝步驟可以在標準、升高或降低的壓力（例如0.5至5巴）下進行；在每種情況下通常使用標準壓力操作。式(V)的化合物本身可基於公開的合成方法由式(IX)或(X)的化合物通過各種途徑獲得其中PG具有上文給出的定義且Hal是滷素原子[參見例如WO96/15096-A1，第26-44頁中描述的通用製備方法，尤其是方法A、G、H和K]。具有鍵合到中心環戊烷環上的基團的彼此反式的布置的式(V)的化合物，即式(V-A)和(V-B)的化合物其中PG具有上文給出的定義，可以與公開的合成方法類似地製備，例如通過使式(XI)的2-氧代雙環[2.2.1]庚烷-7-甲酸外-2-(三甲基甲矽烷基)乙酯與式(III)的苯基格利雅化合物反應其中PG和Hal具有上文給出的定義以產生式(XIII)的加合物其中PG具有上文給出的定義，隨後經由相應的甲磺酸酯消除叔羥基以產生式(XIV)的烯烴其中PG具有上文給出的定義，其然後用N-甲基嗎啉-N-氧化物與作為催化劑的四氧化鋨一起氧化以產生式(XV)的1,2-二醇其中PG具有上文給出的定義,然後藉助四乙酸鉛或高碘酸鈉裂解這種雙環二醇以產生式(XVI)的2-甲醯基-5-酮基環戊烷甲酸酯其中PG具有上文給出的定義，最後用硼氫化鈉還原以產生式(V-A)的羥甲基化合物其中PG具有上文給出的定義，[參見WO96/15096-A1，製備方法K（第42-44頁）]。在上述合成次序(XI)+(XII)→(XIII)→(XIV)→(XV)→(XVI)→(V-A)中，為了簡化表示手性中心的相對構型，僅給出各對映體的結構式，即使當所涉化合物以外消旋形式使用或獲得；以外消旋形式進行的製備方法的實際最終產物是化合物(V-A)和(V-B)的外消旋混合物。式(VI)的1,2,3-三嗪-4(3H)-酮衍生物可以以簡單方式通過在鹽酸水溶液中用亞硝酸鈉處理式(XVII)的鄰-氨基苯甲醯胺獲得其中R1具有上文給出的定義[參見例如D.Fernandez-Forner等人,Tetrahedron47(42),8917-8930(1991)]。本發明的式(I)的化合物的立體異構體（對映體和/或非對映體）的分離可以通過本領域技術人員熟悉的常規方法實現。為此優選使用在非手性或手性分離相上的色譜法。或者，也可以經由式(I)的羧酸與手性胺鹼的非對映體鹽實現分離。任選地，本發明的化合物也可以根據目的而在中間體(II)、(IV)、(V)、(VII)、(II-A)、(II-B)或(V-A)/(V-B)的階段時就分離成相應的對映體和/或非對映體，這些中間體隨後以分離的形式根據上述反應次序進一步反應。對於中間體的立體異構體的這種分離，同樣優選使用在非手性或手性分離相上的色譜法。式(III)、(IX)、(X)、(XI)、(XII)和(XVII)的化合物可購得或本身描述在文獻中，或它們可以由其它市售化合物通過本領域技術人員熟悉的文獻方法製備。許多詳細規程和其它參考文獻也可見於在關於起始化合物和中間體製備的章節中的實驗部分。可以例如通過下列反應圖式舉例說明本發明的化合物的製備：圖式1圖式2圖式3本發明的化合物具有有價值的藥理性質並可用於預防和治療人類和動物的疾病。本發明的化合物是人巨噬細胞彈性蛋白酶（HME/hMMP-12）的強效、非反應性和選擇性抑制劑，其與現有技術中已知的化合物相比，在效力和選擇性的方面具有顯著改進的狀況。此外，本發明的化合物表現出在含水體系中的良好溶解度和與血漿成分如白蛋白的低非特異性結合。本發明的化合物另外具有低體外清除率和良好的代謝穩定性。這種性質狀況總體上使得對本發明的化合物而言可預期低的可給藥性和–由於更有針對性的作用模式–在治療中出現不合意副作用的風險降低。本發明的化合物因此在特定程度上適用於治療和/或預防疾病和病理學過程，特別是在感染性或非感染性炎性事件和/或組織或血管重塑過程中涉及巨噬細胞彈性蛋白酶（HME/hMMP-12）的那些。在本發明中，這些特別包括呼吸道和肺的疾病，如慢性阻塞性肺病（COPD）、哮喘和間質性肺病組（ILD）以及心血管系統疾病，如動脈硬化和動脈瘤。慢性阻塞性肺病（COPD）的表現特別包括肺氣腫，例如由香菸煙霧誘發的肺氣腫、慢性支氣管炎（CB）、COPD中的肺高壓（PH-COPD）、支氣管擴張（BE）及其組合，特別是在該疾病的急性加重期（AE-COPD）中。哮喘的表現包括具有間歇或持續過程的嚴重程度不同的喘息性疾病，如難治性哮喘、支氣管哮喘、變應性哮喘、內因性哮喘、外因性哮喘和由藥物或粉塵誘發的哮喘。間質性肺病組（ILD）包括特發性肺纖維化（IPF）、肺結節病和急性間質性肺炎、非特異性間質性肺炎、淋巴間質性肺炎、伴發間質性肺病的呼吸性細支氣管炎、隱源性機化性肺炎、脫屑性間質性肺炎和不可分類的特發性間質性肺炎以及肉芽腫性間質性肺病、已知來源的間質性肺病和未知來源的其它間質性肺病。本發明的化合物也可用於治療和/或預防呼吸道和肺的其它疾病，例如肺動脈高壓（PAH）和其它形式的肺高壓（PH）、閉塞性細支氣管炎症候群（BOS）、急性呼吸道症候群（ARDS）、急性肺損傷（ALI）、α-1-抗胰蛋白酶缺乏（AATD）和囊性纖維化（CF）、各種形式的支氣管炎（慢性支氣管炎、傳染性支氣管炎、嗜酸粒細胞性支氣管炎）、支氣管擴張、肺炎、農民肺和相關疾病、感染性和非感染性咳嗽和寒病（慢性炎性咳嗽、醫源性咳嗽）、鼻黏膜炎症（包括藥物性鼻炎、血管舒縮性鼻炎和季節性變應性鼻炎，例如花粉病）和息肉。心血管系統的疾病組在本發明中特別包括動脈硬化及其繼發性疾病，例如在頸動脈的動脈硬化（頸動脈硬化）情況下的中風、在冠狀動脈的動脈硬化情況下的心肌梗死、作為腿部動脈的動脈硬化的後果的周圍動脈閉塞性疾病（pAVD）以及動脈瘤，特別是主動脈的動脈瘤，例如作為動脈硬化、高血壓、損傷和炎症，感染（例如在風溼熱、梅毒、萊姆病的情況下）、遺傳性結締組織薄弱（例如在馬凡氏症候群和Ehlers-Danlos症候群的情況下）的後果或在具有右向左分流的遺傳性心臟缺陷或肺的分流依賴性灌注的情況下作為主動脈上的容量負荷的後果，以及在來自川崎症候群的疾病的過程中在冠狀動脈處和在具有主動脈瓣遺傳缺陷的患者的腦部區域中的動脈瘤。此外，本發明的化合物可用於治療和/或預防其它心血管疾病，例如高血壓（血壓過高）、心力衰竭、冠心病、穩定和不穩定心絞痛、腎性高血壓、周圍和心臟血管疾病、心律失常、房性和室性心律失常和傳導受損，例如I-III度房室傳導阻滯、室上性快速性心律失常、心房顫動、心房撲動、心室顫動、心室撲動、室性快速性心律失常、尖端扭轉型心動過速（Torsadedepointes-Tachykardie）、房性和室性期前收縮、房室結性期前收縮（AV-junktionaleExtrasystolen）、病竇症候群、暈厥、房室結折返性心動過速、Wolff-Parkinson-White症候群、急性冠狀動脈症候群（ACS）、自身免疫性心臟病（心包炎、心內膜炎、心臟瓣膜炎、主動脈炎、心肌病）、拳師犬心肌病、休克，如心源性休克、膿毒性休克和過敏性休克，還用於治療和/或預防血栓栓塞疾病和缺血，如心肌缺血、心肌肥厚、短暫性和缺血性發作、先兆子癇、炎性心血管疾病、冠狀動脈和外周動脈痙攣、水腫形成，例如肺水腫、腦水腫、腎水腫或由心功能不全造成的水腫、外周血液循環障礙、再灌注損傷、動脈和靜脈血栓形成、微量白蛋白尿、心肌機能不全、內皮功能障礙、微血管和大血管損傷（血管炎），以及預防再狹窄，例如在溶栓療法、經皮腔內血管成形術（PTA）、經皮腔內冠狀動脈成形術（PTCA）、心臟移植和搭橋手術後。在本發明中，術語「心功能不全」包括心功能不全的急性和慢性形式，及其特定或相關的疾病類型，如急性失代償性心功能不全、右心功能不全、左心功能不全、全心功能不全、缺血性心肌病、擴張性心肌病、肥厚性心肌病、特發性心肌病、先天性心臟缺損、心臟瓣膜缺損、與心臟瓣膜缺損相關的心力功能不全、二尖瓣狹窄、二尖瓣功能不全、主動脈瓣狹窄、主動脈瓣功能不全、三尖瓣狹窄、三尖瓣功能不全、肺動脈狹窄、肺動脈瓣功能不全、聯合心臟瓣膜缺損、心肌炎症（心肌炎）、慢性心肌炎、急性心肌炎、病毒性心肌炎、糖尿病心功能不全、酒精性心肌病、心臟貯積症（kardialeSpeichererkrankung）和舒張性和收縮性心功能不全。本發明的化合物還適用於治療和/或預防腎病，特別是腎機能不全和腎衰竭。在本發明中，術語「腎機能不全」和「腎衰竭」包括其急性和慢性表現以及基礎的或相關的腎病，如腎灌注不足、透析中低血壓、阻塞性尿路病、腎小球病、腎小球腎炎、急性腎小球腎炎、腎小球硬化症、腎小管間質性疾病、腎疾病，如原發性和先天性腎病、腎炎、免疫性腎病，如腎移植排斥和Alport症候群、免疫複合物誘發的腎病、由毒性物質誘發的腎病、造影劑誘發的腎病、糖尿病和非糖尿病性腎病、腎盂腎炎、腎囊腫、腎硬化、高血壓腎硬化和腎病症候群，它們在診斷上的特徵可例如在於異常降低的肌酐和/或水排洩、異常升高的尿素、氮、鉀和/或肌酐的血濃度、腎酶，例如穀氨醯合成酶的活性改變、改變的尿滲透壓或尿量、升高的微量白蛋白尿、大量白蛋白尿、腎小球和小動脈病變、腎小管擴張、高磷血症和/或需要透析。本發明還包括本發明的化合物用於治療和/或預防腎機能不全的後遺症，例如高血壓、肺水腫、心功能不全、尿毒症、貧血、電解質紊亂（例如高鉀血症、低鈉血症）和骨和碳水化合物代謝紊亂的用途。此外，本發明的化合物適用於治療和/或預防泌尿生殖系統的疾病，例如良性前列腺症候群（BPS）、良性前列腺增生（BPH）、良性前列腺增大（BPE）、膀胱出口梗阻（BOO）、下尿路症候群（LUTS）、神經源性膀胱過度活動症（OAB），失禁，例如混合性尿失禁、急迫性尿失禁、壓力性尿失禁或充溢性尿失禁（MUI、UUI、SUI、OUI）、骨盆痛以及勃起功能障礙和女性性功能障礙。此外，本發明的化合物具有抗炎作用並因此可用作治療和/或預防敗血症（SIRS）、多器官功能衰竭（MODS、MOF）、炎性腎病、慢性腸炎（IBD、克羅恩病、潰瘍性結腸炎）、胰腺炎、腹膜炎、膀胱炎、尿道炎、前列腺炎、附睪炎（Epidimytitis）、卵巢炎、輸卵管炎、外陰陰道炎、類風溼病、中樞神經系統的炎性疾病、多發性硬化、炎性皮膚病和炎性眼病的抗炎劑。此外，本發明的化合物適用於治療和/或預防內臟器官，例如肺、心、腎、骨髓，特別是肝的纖維化疾病，以及皮膚纖維化和眼部纖維化疾病。在本發明中，術語「纖維化疾病」特別包括如肝纖維化、肝硬化、肺纖維化、心內膜心肌纖維化、腎病、腎小球腎炎、腎間質纖維化、由糖尿病造成的纖維化損傷、骨髓纖維化、腹膜纖維化和類似的纖維化疾病、硬皮病、硬斑病、瘢痕疙瘩、增生性瘢痕、痣、糖尿病視網膜病變、增殖性玻璃體視網膜病變和結締組織病（例如結節病）之類的疾病。本發明的化合物同樣可用於促進傷口癒合、用於控制術後瘢痕形成（例如在青光眼手術後）和對於老化或角質化的皮膚用於化妝用途。本發明的化合物還可用於治療和/或預防貧血，如溶血性貧血，特別是血紅蛋白病，如鐮狀細胞貧血和地中海貧血、巨幼紅細胞性貧血、缺鐵性貧血、歸因於急性失血的貧血、骨髓病性貧血和再生障礙性貧血。此外，本發明的化合物適用於治療癌症，例如皮膚癌、腦腫瘤、乳腺癌、骨髓腫瘤、白血病、脂肪肉瘤、胃腸道癌、肝癌、胰腺癌、肺癌、腎癌、輸尿管癌、前列腺癌和生殖道癌以及淋巴增殖系統的惡性腫瘤，例如霍奇金和非霍奇金淋巴瘤。此外，本發明的化合物可用於治療和/或預防脂肪代謝受損和血脂異常（低脂蛋白血症、高甘油三酯血症、高脂血症、混合型高脂血症、高膽固醇血症、無β脂蛋白血症、谷固醇血症）、黃瘤病、丹吉爾病、脂肪過多、肥胖、代謝疾病（代謝症候群、高血糖、胰島素依賴性糖尿病、非胰島素依賴性糖尿病、妊娠糖尿病、高胰島素血症、胰島素抵抗、葡萄糖耐受不良和糖尿病後遺症，如視網膜病、腎病和神經病）、胃腸道和腹部疾病（舌炎、牙齦炎、牙周炎、食管炎、嗜酸細胞性胃腸炎、肥大細胞增多症、克羅恩氏病、結腸炎、直腸炎、肛門瘙癢、腹瀉、乳糜瀉、肝炎、肝纖維化、肝硬變、胰腺炎和膽囊炎）、中樞神經系統疾病和神經退行性紊亂（中風、阿爾茨海默氏症、帕金森氏病、痴呆、癲癇、抑鬱、多發性硬化）、免疫紊亂、甲狀腺疾病（甲狀腺機能亢進）、皮膚病（牛皮癬、痤瘡、溼疹、神經性皮炎、各種形式的皮炎，例如Dermatitisabacribus、光化性皮炎、變應性皮炎、氨皮炎、facticialdermatitis、自發性皮炎、異位性皮炎、熱激性皮炎、dermatitiscombustionis、凍傷性皮炎、化妝性皮炎、焦痂性皮炎、剝脫性皮炎、灼傷性皮炎、瘀滯性皮炎、皰疹樣皮炎、苔癬樣皮炎、線狀皮炎、雀斑痣皮炎、藥疹型皮炎、掌肌和蹠肌皮炎、寄生物性皮炎、光變應性接觸性皮炎、光毒性皮炎、膿皰性皮炎、脂溢性皮炎、曬傷、毒性皮炎、潰瘍性皮炎、毒物性皮炎（Dermatitisveneata）、傳染性皮炎、膿性皮炎和酒渣鼻樣皮炎以及角膜炎、大皰病、血管炎、蜂窩組織炎、脂膜炎、紅斑狼瘡、紅斑、淋巴瘤、皮膚癌、Sweet症候群、Weber-Christian症候群、瘢痕形成、疣形成、凍瘡）、炎性眼病（結節病、瞼炎、結膜炎、虹膜炎、葡萄膜炎、脈絡膜炎、眼炎）、病毒性疾病（由流感病毒、腺病毒和冠狀病毒造成，例如HPV、HCMV、HIV、SARS）、骨骼和關節以及骨骼肌的疾病（各種形式的關節炎，例如黑尿病性關節炎、強直性關節炎、痢疾性關節炎、滲出性關節炎、黴菌性關節炎、淋病性關節炎、殘毀性關節炎、銀屑病關節炎、化膿性關節炎、風溼性關節炎、絨毛膜關節炎（Arthritisserosa）、梅毒性關節炎、結核性關節炎、尿酸性關節炎、色素沉著絨毛結節性關節炎（Arthritisvillonodularispigmentosa）、非典型性關節炎、血友病性關節炎、幼年慢性關節炎、類風溼性關節炎和轉移性關節炎，以及Still症候群、Felty症候群、Sjörgen症候群、Clutton症候群、Poncet症候群、Pott症候群和Reiter症候群、各種形式的關節病，例如變形性關節病、神經病性關節病、絕經期關節病、牛皮癬性關節病和脊髓癆性關節炎（Arthropathiatabica）、系統性硬化症，各種形式的炎性肌病，例如流行性肌病、纖維性肌病、Myopathiemyoglobinurica、骨化性肌病、神經性骨化性肌病（Myopathieossificansneurotica）、進行性骨化性肌病（Myopathieossificansprogressivamultiplex）、化膿性肌病、風溼性肌病、旋毛蟲肌病（Myopathietrichinosa）、熱帶性肌病（Myopathietropica）和傷寒性肌病以及Günther症候群和Münchmeyer症候群）、動脈的炎性變化（各種形式的動脈炎，例如動脈內膜炎、動脈中層炎、動脈周圍炎、全身動脈炎、風溼性動脈炎、變形性動脈炎、顳肌動脈炎、顱動脈炎、巨細胞性動脈炎和肉芽腫性動脈炎以及Horton症候群、Churg-Strauss症候群和高安氏動脈炎）、Muckle-Well症候群、菊池病、多軟骨炎、硬皮病以及具有炎性或免疫組成的其它疾病，例如白內障、惡病質、骨質疏鬆、痛風、失禁、麻風、Sezary症候群和副腫瘤症候群、用於器官移植後的排斥反應和用於傷口癒合和血管生成，特別是在慢性創傷的情況下。由於它們的性質狀況，本發明的化合物特別適用於治療和/或預防呼吸道和肺的疾病，主要是慢性阻塞性肺病（COPD），在此特別是肺氣腫、慢性支氣管炎（CB）、COPD中的肺高壓（PH-COPD）和支氣管擴張（BE）以及這些類型的疾病的組合，特別是在COPD疾病的急性加重期（AECOPD）中，以及哮喘和間質性肺病，在此特別是特發性肺纖維化（IPF）和肺結節病，心血管系統的疾病，特別是動脈硬化，尤其是頸動脈硬化，以及病毒性心肌炎、心肌病和動脈瘤，包括它們的後遺症，如中風、心肌梗死和周圍動脈閉塞性疾病（pAVK），以及慢性腎病和Alport症候群。人類中的上述充分表徵的疾病也可以類似的病因學出現在其它哺乳動物中，並在其中同樣可用本發明的化合物治療。在本發明中，術語「治療」包括抑制、延遲、阻止、緩解、減弱、限制、降低、遏止、擊退或治癒疾病、病症、疾病、損傷或健康問題、或此類狀態和/或此類狀態的症狀的發展、過程或進行。術語「療法」在此被理解為與術語「治療」同義。術語「防止」、「預防」或「預防措施」在本發明中同義使用並且是指避免或降低感染、發生、受困於或患上疾病、病症、障礙、損傷或健康問題或此類狀態和/或此類狀態的症狀的發展或進行的危險。疾病、病症、障礙、損傷或健康問題的治療或預防可以是部分或完全的。本發明還提供本發明的化合物用於治療和/或預防疾病，尤其是上述疾病的用途。本發明還提供本發明的化合物用於製造治療和/或預防疾病，特別是上述疾病的藥劑的用途。本發明還提供用於治療和/或預防疾病，特別是上述疾病的包含至少一種本發明的化合物的藥劑。本發明還提供本發明的化合物在治療和/或預防疾病，特別是上述疾病的方法中的用途。本發明還提供使用有效量的至少一種本發明的化合物治療和/或預防疾病，特別是上述疾病的方法。本發明的化合物可以獨自使用或如果需要，與一種或多種其它藥理活性物質聯合使用，只要這種組合不造成不合意和不可接受的副作用。本發明因此還提供含有至少一種本發明的化合物和一種或多種附加活性物質的藥劑，其特別用於治療和/或預防上述疾病。適合在此聯用的活性物質的優選實例包括：·例如用於治療慢性阻塞性肺病（COPD）或支氣管哮喘的抗阻塞/支氣管擴張劑，例如和優選選自吸入或全身給藥的β-腎上腺素能受體激動劑（β-模擬物）、吸入給藥的抗毒蕈鹼物質和PDE4抑制劑；·有機硝酸酯和NO供體，例如硝普鈉、硝酸甘油、單硝酸異山梨酯、硝酸異山梨酯、嗎多明或SIN-1和吸入性NO；·抑制環狀單磷酸鳥苷（cGMP）和/或環狀單磷酸腺苷（cAMP）降解的化合物，例如磷酸二酯酶（PDE）1、2、3、4和/或5的抑制劑，尤其是PDE4抑制劑，如羅氟司特和PDE5抑制劑，如西地那非、伐地那非、他達拉非、烏地那非、達生他非、阿伐那非、米羅那非或lodenafil；·NO-和血紅素-獨立性的可溶性鳥苷酸環化酶（sGC）活化劑，特別例如WO01/19355、WO01/19776、WO01/19778、WO01/19780、WO02/070462和WO02/070510中描述的化合物；·NO-獨立性但血紅素依賴性的可溶性鳥苷酸環化酶（sGC）刺激劑，特別例如利奧西呱和WO00/06568、WO00/06569、WO02/42301、WO03/095451、WO2011/147809、WO2012/004258、WO2012/028647和WO2012/059549中描述的化合物；·抑制人中性粒細胞彈性蛋白酶（HNE）的化合物，特別例如西維來司他、DX890（Reltran）以及WO2004/020410、WO2004/020412、WO2004/024700、WO2004/024701、WO2005/080372、WO2005/082863、WO2005/082864、WO2009/080199、WO2009/135599、WO2010/078953和WO2010/115548中描述的化合物；·前列環素類似物和IP受體激動劑，例如和優選伊洛前列素、貝前列素、曲前列環素、依前列醇或NS-304；·內皮素受體拮抗劑，例如和優選波生坦、達盧生坦、安倍生坦或西他生坦；·抗炎、免疫調節、免疫抑制和/或細胞毒性劑，例如和優選選自全身或吸入給藥的皮質類固醇以及乙醯基半胱氨酸、孟魯司特、硫唑嘌呤、環磷醯胺、羥基脲、阿奇黴素、IFN-γ、吡非尼酮或依那西普；·抗纖維化劑，例如和優選溶血磷脂酸受體1（LPA-1）拮抗劑、賴氨醯氧化酶（LOX）抑制劑、賴氨醯氧化酶樣-2抑制劑、血管活性腸肽（VIP）、VIP類似物、αvβ6-整合素拮抗劑、秋水仙鹼（Cholchicine）、IFN-β、D-青黴胺、WNT信號通道抑制劑或CCR2拮抗劑；·改變脂肪代謝的活性化合物，例如和優選選自甲狀腺受體激動劑、膽固醇合成抑制劑，例如和優選HMG-CoA還原酶抑制劑或角鯊烯合成抑制劑、ACAT抑制劑、CETP抑制劑、MTP抑制劑、PPAR-α、PPAR-γ和/或PPAR-δ激動劑、膽固醇吸收抑制劑、脂肪酶抑制劑、聚合膽汁酸吸附劑、膽汁酸再吸收抑制劑和脂蛋白(a)拮抗劑；·降血壓活性物質，例如和優選選自鈣拮抗劑、血管緊張素AII拮抗劑、ACE抑制劑、血管肽酶抑制劑、內皮素拮抗劑、腎素抑制劑、α受體阻滯劑、β受體阻滯劑、鹽皮質激素受體拮抗劑以及利尿劑；·抑制信號轉導級聯的化合物，例如和優選選自激酶抑制劑，特別選自酪氨酸激酶和/或絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑，例如和優選尼達尼布、達沙替尼、尼洛替尼、博舒替尼、瑞格非尼、索拉非尼、舒尼替尼、西地尼布、阿西替尼、替拉替尼、伊馬替尼、布立尼布、帕唑帕尼、瓦他拉尼、吉非替尼、埃羅替尼、拉帕替尼、卡奈替尼、來他替尼、培利替尼、Semaxanib或坦度替尼；·阻斷5-羥色胺結合到其受體上的化合物，例如和優選5-HT2B受體的拮抗劑，如PRX-08066；·生長因子、細胞因子和趨化因子的拮抗劑，例如和優選TGF-β、CTGF、IL-1、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-13和整合素的拮抗劑；·Rho激酶抑制化合物，例如和優選法舒地爾、Y-27632、SLx-2119、BF-66851、BF-66852、BF-66853、KI-23095或BA-1049；·抑制可溶性環氧化物水解酶（sEH）的化合物，例如N,N'-二環己基脲、12-(3-金剛烷-1-基脲基)十二烷酸或1-金剛烷-1-基-3-{5-[2-(2-乙氧基乙氧基)乙氧基]戊基}脲；·影響心臟能量代謝的化合物，例如和優選依託莫司、二氯乙酸鹽、雷諾嗪或曲美他嗪；·抗血栓形成劑，例如和優選選自血小板聚集抑制劑、抗凝血劑和纖溶酶原（profibrinolytisch）物質；·化療劑，如例如用於治療肺或其它器官中的新瘤形成的那些；和/或·抗生素，特別選自氟喹諾酮羧酸，例如和優選環丙沙星或莫西沙星。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與β-腎上腺素能受體激動劑，例如和優選舒喘靈、異丙腎上腺素、奧西那林、特布他林、非諾特羅、福莫特羅、瑞普特羅、沙丁胺醇或沙美特羅聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與抗毒蕈鹼物質，例如和優選異丙託溴銨、噻託溴銨或氧託溴銨聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與皮質類固醇，例如和優選強的松、潑尼松龍、甲基潑尼松龍、去炎松、地塞米松、倍氯米松、倍他米松、氟尼縮松、布地奈德或氟替卡松聯合給藥。抗血栓形成劑優選被理解為是指選自血小板聚集抑制劑、抗凝血劑和纖溶酶原物質的化合物。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與血小板聚集抑制劑，例如和優選阿司匹林、氯吡格雷、噻氯匹定或雙嘧達莫聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與凝血酶抑制劑，例如和優選希美加群、美拉加群、達比加群、比伐盧定或克賽聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與GPIIb/IIIa拮抗劑，例如和優選替羅非班或阿昔單抗聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與因子Xa抑制劑，例如和優選利伐沙班、阿哌沙班、非地沙班（Fidexaban）、雷扎沙班、磺達肝素、艾卓肝素、DU-176b、PMD-3112、YM-150、KFA-1982、EMD-503982、MCM-17、MLN-1021、DX9065a、DPC906、JTV803、SSR-126512或SSR-128428聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與肝素或與低分子量（LMW）肝素衍生物聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與維生素K拮抗劑，例如和優選香豆素聯合給藥。降血壓劑優選被理解為是指選自鈣拮抗劑、血管緊張素AII拮抗劑、ACE抑制劑、內皮素拮抗劑、腎素抑制劑、α-受體阻滯劑、β-受體阻滯劑、鹽皮質激素受體拮抗劑和利尿劑的化合物。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與鈣拮抗劑，例如和優選硝苯地平、氨氯地平、維拉帕米或地爾硫卓聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與α-1-受體阻滯劑，例如和優選哌唑嗪聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與β-受體阻滯劑，例如和優選普萘洛爾、阿替洛爾、噻嗎洛爾、吲哚洛爾、阿普洛爾、氧烯洛爾、噴布洛爾、布拉洛爾、美替洛爾、納多洛爾、甲吲洛爾、卡拉洛爾、索他洛爾、美託洛爾、倍他洛爾、塞利洛爾、比索洛爾、卡替洛爾、艾司洛爾、拉貝洛爾、卡維地洛、阿達洛爾、蘭替洛爾、奈必洛爾、依泮洛爾或布新洛爾聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與血管緊張素AII拮抗劑，例如和優選氯沙坦、坎地沙坦、纈沙坦、替米沙坦或恩布沙坦聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與ACE抑制劑，例如和優選依那普利、卡託普利、賴諾普利、雷米普利、地拉普利、福辛普利、奎諾普利、培哚普利或群多普利聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與內皮素拮抗劑，例如和優選波生坦、達盧生坦、安倍生坦或西他生坦聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與腎素抑制劑，例如和優選阿利吉侖、SPP-600或SPP-800聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與鹽皮質激素受體拮抗劑，例如和優選安體舒通、依普利酮或Finerenon聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與利尿劑，例如和優選速尿、布美他尼、託拉塞米、苄氟噻嗪、氯噻嗪、氫氯噻嗪、氫氟噻嗪、甲氯噻嗪、泊利噻嗪、三氯甲噻嗪、氯噻酮、吲達帕胺、美託拉宗、喹乙宗、乙醯唑胺、二氯磺胺、醋甲唑胺、甘油、異山梨醇、甘露醇、阿米洛利或氨苯蝶啶聯合給藥。脂肪代謝調節劑優選被理解為是指選自CETP抑制劑、甲狀腺受體激動劑、膽固醇合成抑制劑，如HMG-CoA還原酶抑制劑或角鯊烯合成抑制劑，ACAT抑制劑、MTP抑制劑、PPAR-α、PPAR-γ和/或PPAR-δ激動劑、膽固醇吸收抑制劑、聚合膽汁酸吸附劑、膽汁酸再吸收抑制劑、脂肪酶抑制劑和脂蛋白(a)拮抗劑的化合物。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與CETP抑制劑，例如和優選託徹普（CP-529414）、JJT-705或CETP疫苗（Avant）聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與甲狀腺受體激動劑，例如和優選D-甲狀腺素、3,5,3'-三碘甲腺原氨酸（T3）、CGS23425或阿昔替羅（CGS26214）聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與選自他汀類的HMG-CoA還原酶抑制劑，例如和優選洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿託伐他汀、瑞舒伐他汀或匹伐他汀聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與角鯊烯合成抑制劑，例如和優選BMS-188494或TAK-475聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與ACAT抑制劑，例如和優選阿伐麥布、甲亞油醯胺、帕替麥布、依魯麥布或SMP-797聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與MTP抑制劑，例如和優選英普他派、BMS-201038、R-103757或JTT-130聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與PPAR-γ激動劑，例如和優選吡格列酮或羅格列酮聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與PPAR-δ激動劑，例如和優選GW501516或BAY68-5042聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與膽固醇吸收抑制劑，例如和優選依澤替米貝、替奎安或帕馬苷聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與脂肪酶抑制劑，例如和優選奧利司他聯合給藥。本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與聚合膽汁酸吸附劑，例如和優選消膽胺、考來替泊、Colesolvam、考來膠（CholestaGel）或考來替蘭（Colestimid）聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與膽汁酸再吸收抑制劑，例如和優選ASBT（=IBAT）抑制劑，例如AZD-7806、S-8921、AK-105、BARI-1741、SC-435或SC-635聯合給藥。在本發明的一個優選實施方案中，本發明的化合物與脂蛋白(a)拮抗劑，例如和優選Gemcabene鈣（CI-1027）或煙酸聯合給藥。特別優選的是本發明的化合物與選自皮質類固醇、β-腎上腺素能受體激動劑、抗毒蕈鹼物質、PDE4抑制劑、PDE5抑制劑、sGC活化劑、sGC刺激劑、HNE抑制劑、前列環素類似物、內皮素拮抗劑、他汀類、抗纖維化劑、抗炎劑、免疫調節劑、免疫抑制劑和細胞毒性劑的一種或多種附加活性物質的組合。本發明還提供包含至少一種本發明的化合物與通常一種或多種惰性、無毒、適合藥用的輔助劑的藥劑，及其用於上述應用的用途。本發明的化合物可以全身和/或局部作用。為此，它們可以以合適方式給藥，例如通過口服、腸道外、肺、鼻、舌下、舌、口腔、直腸、皮膚、透皮、結膜、經耳或作為植入物或支架。本發明的化合物可以以適合這些給藥途徑的給藥形式給藥。適合口服給藥的給藥形式是根據現有技術工作並快速和/或以調控方式釋放本發明的化合物並含有結晶和/或非晶和/或溶解形式的本發明的化合物的那些，例如片劑（未包衣或包衣片劑，例如帶有控制本發明的化合物的釋放的抗胃酸或延遲溶出或不可溶包衣）、在口腔中快速崩解的片劑或薄膜劑/圓片、薄膜劑/凍乾產物、膠囊（例如硬或軟明膠膠囊）、糖衣片劑、顆粒劑、丸劑、粉劑、乳劑、混懸劑、氣霧劑或溶液劑。腸道外給藥可以避開再吸收步驟（例如靜脈內、動脈內、心臟內、脊柱內或腰內）或包括再吸收（例如吸入、肌肉內、皮下、皮內、經皮或腹膜內）。適合腸道外給藥的給藥形式包括溶液劑、混懸劑、乳劑、凍乾產物或無菌粉末形式的注射和輸液製劑。對於其它給藥途徑，合適的實例是可吸入劑型（包括粉末吸入器、噴霧器、計量氣霧劑）、滴鼻劑、鼻用溶液劑或噴霧劑、舌、舌下或口腔給藥的片劑、薄膜劑/圓片或膠囊、栓劑、耳或眼製劑、陰道膠囊、含水混懸劑（洗劑、振蕩混合物）、親脂混懸劑、軟膏劑、乳膏劑、透皮治療系統（例如貼劑）、乳劑、糊劑、泡沫劑、撲粉劑、植入物或支架。優選的是口服、肺內（吸入）和靜脈給藥。本發明的化合物可轉化成所提到的給藥形式。這可以以本身已知的方式通過與惰性、無毒、適合藥用的輔助劑混合實現。這些輔助劑包括載體（例如微晶纖維素、乳糖、甘露醇）、溶劑（例如液體聚乙二醇）、乳化劑和分散劑或潤溼劑（例如十二烷基硫酸鈉、聚氧山梨糖醇酐油酸酯（Polyoxysorbitanoleat））、粘合劑（例如聚乙烯基吡咯烷酮）、合成和天然聚合物（例如白蛋白）、穩定劑（例如抗氧化劑，例如抗壞血酸）、著色劑（例如無機顏料，例如氧化鐵）和味道和/或氣味矯正劑。通常發現在腸道外給藥的情況下有利的是給予大約0.001至1mg/kg，優選大約0.01至0.5mg/kg體重的量以實現有效結果。在口服給藥的情況下，該劑量為大約0.01至100mg/kg，優選大約0.01至20mg/kg，最優選0.1至10mg/kg體重。在肺內給藥的情況下，該量通常為每次吸入大約0.1至50毫克。然而，可能任選必須酌情偏離所示量，尤其取決於體重、給藥途徑、個體對活性物質的響應、製劑性質和給藥時間或時間間隔。因此，在一些情況下少於上述最低量可能是足夠的，而在另一些情況下必須超過所提到的上限。在給予更大量的情況下，可能建議的是將它們在一天內分成幾個單劑。下列實施例例示本發明。本發明不限於這些實施例。A.實施例縮寫和首字母縮略詞:abs.純Ac乙醯基aq.含水，水溶液br.寬（在NMR信號中）Bsp.實施例Bu丁基c濃度ca.約，大約cat.催化CI化學電離（在MS中）d雙重鋒（在NMR中）d天(dba)3Pd2三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)DC薄層色譜法DCI直接化學電離（在MS中）dd雙重雙峰（在NMR中）DEAD偶氮二甲酸二乙酯DMFN,N-二甲基甲醯胺DMSO二甲亞碸dt雙重三峰（在NMR中）d.Th.理論的（在化學收率中）ee對映體過量EI電子碰撞電離（在MS中）ent對映體純，對映體eq.當量ESI電噴霧電離（在MS中）Et乙基h小時HPLC高壓高效液相色譜法iPr異丙基konz濃縮（在溶液的情況下）LC液相色譜法LC/MS液相色譜法-質譜法聯用Lit.文獻（參考）m多重峰（在NMR中）Me甲基min分鐘MPLC中壓液相色譜法（在矽膠上；也被稱作快速色譜法）Ms甲磺醯基（Mesyl）MS質譜法NMON-甲基嗎啉-N-氧化物NMR核磁共振譜法Pd/C載鈀活性炭Pr丙基q(orquart)四重峰（在NMR中）qd四重雙峰（在NMR中）quant.定量（在化學收率中）quint五重峰（在NMR中）rac外消旋，外消旋物Rf保留指數（在DC中）RP反相（在HPLC中）RT室溫Rt保留時間（在HPLC、LC/MS中）s單重峰（在NMR中）sept七重峰（在NMR中）SFC超臨界液相色譜法t三重峰（在NMR中）tBu叔丁基td三重雙峰（在NMR中）TFA三氟乙酸THF四氫呋喃UV紫外光譜法v/v（溶液的）體積/體積比Xantphos4,5-雙(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫噸zus.一起。HPLC-和LC/MS方法:方法1(LC/MS):儀器:WatersACQUITYSQDUPLCSystem；柱:WatersAcquityUPLCHSST31.8µ50x1mm；洗脫劑A:1升水+0.25毫升99%甲酸，洗脫劑B:1升乙腈+0.25毫升99%甲酸；梯度:0.0min90%A→1.2min5%A→2.0min5%A；爐:50℃；流速:0.40ml/min；UV檢測:208-400nm。方法2(LC/MS):儀器:MicromassQuattroPremier與WatersUPLCAcquity；柱:ThermoHypersilGOLD1.9µ50x1mm；洗脫劑A:1升水+0.5毫升50%甲酸，洗脫劑B:1升乙腈+0.5毫升50%甲酸；梯度:0.0min97%A→0.5min97%A→3.2min5%A→4.0min5%A；爐:50℃；流速:0.3ml/min；UV檢測:210nm。方法3(LC/MS):MS儀器:WatersMicromassQM；HPLC儀器:Agilent1100系列；柱:AgilentZORBAXExtend-C183.5µ,3.0x50mm；洗脫劑A:1升水+0.01摩爾碳酸銨，洗脫劑B:1升乙腈；梯度:0.0min98%A→0.2min98%A→3.0min5%A→4.5min5%A；爐:40℃；流速:1.75ml/min；UV檢測:210nm。方法4(製備型HPLC):柱:ReprosilC18,10µm,250x30mm；洗脫劑:乙腈/含0.1%TFA的水；梯度:0-5.00min10:90,在3.00min注入樣品；5.00-23.00min至95:5；23.00-30.00min95:5；30.00-30.50min至10:90；30.50-31.20min10:90。方法5(製備型HPLC):柱:ReprosilC18,10µm,250x30mm；洗脫劑:乙腈/含0.1%TFA的水；梯度:0-5.00min10:90,在3.00min注入樣品；5.00-20.00min至95:5；20.00-30.00min95:5；30.00-30.50min至10:90；30.50-31.20min10:90。方法6(製備型HPLC):柱:ReprosilC18,10µm,125x30mm；洗脫劑:乙腈/含0.1%TFA的水；梯度:0-6.00min35:65,在3.00min注入樣品；6.00-27.00min至80:20；27.00-30.00min95:5；30.00-33.00min至35:65。方法7(製備型HPLC):柱:Reprosil-PurC18,10µm；洗脫劑:水/甲醇；梯度:70:30→50:50(至6min)→20:80(至22min),至75min20:80。方法8(製備型HPLC):柱:Reprosil-PurC18,10µm；洗脫劑:水/甲醇；梯度:70:30→50:50(至6min)→20:80(至20min),至115min20:80。方法9(製備型HPLC):柱:Reprosil-PurC18,10µm；洗脫劑:水/甲醇；梯度:70:30→50:50(至6min)→20:80(至21min),至75min20:80。方法10(製備型HPLC):柱:Reprosil-PurC18,10µm；洗脫劑:水/甲醇；梯度:70:30→50:50(至6min)→20:80(至25min),至75min20:80。方法11(製備型HPLC):柱:Reprosil-PurC18,10µm；洗脫劑:水/甲醇；梯度:70:30→50:50(至6min)→20:80(至20min),至75min20:80。進一步說明:除非另行指明，下列實施例和試驗描述中的百分比數據為重量百分比；份數為重量份。溶劑比、稀釋比和液體/液體溶液的濃度數據各自基於體積。純度數據通常基於LC/MS色譜圖中的相應峰積分，但它們也可以另外藉助1H-NMR譜測定。如果沒有指出純度，該純度通常根據LC/MS色譜圖中的自動化峰積分為100%，或尚未明確測定純度。如果指出100%"；在這些情況下不針對溶劑或純度校正收率。下文的1H-NMR信號的耦合模式的有些描述直接取自ACDSpecManager（ACD/LabsRelease12.00,產品版本12.5）的建議並且不必已嚴格檢查。在一些情況下，手動調節SpecManager的建議。手動調節或指派的描述通常基於所涉信號的光學外觀並且不一定對應於嚴格的、物理上正確的解釋。一般而言，化學位移的數據參照所涉信號的中心。在寬多重峰的情況下，給出區間。被溶劑或水掩蓋的信號被試驗性（tentativ）賦值或尚未列出。如果給出熔點和熔點範圍，它們是未校正的。下文未明確描述其製備的所有反應物或試劑購自一般可獲取的來源。對於下文同樣未描述其製備並且不可購得或獲自通常不可獲取的來源的所有其它反應物或試劑，參考描述了它們的製備的公開文獻。在下述中間體和實施例中，所涉實施例的IUPAC名稱中與陳述「外消旋物」一起列出的"1RS,2RS,5SR"標識是指這是1R,2R,5S-對映體（→在每種情況下是"1RS,2RS,5SR"中的位置數後的第一個字母）與相應的1S,2S,5R-對映體（→在每種情況下是位置數後的第二個字母）的外消旋混合物。與陳述「對映體1」和「對映體2」一起的"1RS,2RS,5SR"標識是指這些是單獨的分離形式的這兩種對映體，但沒有指定這些對映體的絕對構型（1R,2R,5S或1S,2S,5R）。由於IUPAC命名規則，由名稱成分的優先性和/或順序改變產生的類似標識，如"1RS,2SR,5RS"應該根據這些指示以類似的方式解釋。為了簡化表示手性中心的相對立體化學構型，下述外消旋實施例化合物的結構式僅顯示所涉對映體之一的結構式；如由相關IUPAC名中的陳述「外消旋物」顯而易見，在這些情況下始終包括具有各自的相反絕對構型的第二對映體。起始化合物和中間體:實施例1A6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-4(3H)-酮在0℃下向24.4克（119.51毫摩爾）2-氨基-5-(三氟甲基)苯甲醯胺在174毫升2:1水/濃鹽酸混合物中的懸浮液中緩慢加入9.08克（131.47毫摩爾）亞硝酸鈉在74毫升水中的溶液，在此過程中使內部溫度保持在低於5℃。在浴溫度0℃下攪拌30分鐘後，在用冰浴繼續冷卻的同時，緩慢加入74毫升（0.74摩爾）10M氫氧化鈉溶液，在此過程中內部溫度升至大約20℃。首先形成溶液，然後由其生成懸浮液，其用100毫升水稀釋以獲得更好的可攪拌性。在室溫下攪拌1.5小時後，該混合物用濃鹽酸小心酸化（pH=2）。濾出形成的沉澱物並用水後洗滌三次。在空氣下，然後在減壓下乾燥後，獲得24.74克（理論值的96%）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=15.31(br.s,1H),8.46(s,1H),8.40(d,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=0.78分鐘，m/z=216[M+H]+。實施例2A6-甲基-1,2,3-苯並三嗪-4(3H)-酮在0℃下向32.0克（213.08毫摩爾）2-氨基-5-甲基苯甲醯胺在300毫升2:1水/濃鹽酸混合物中的懸浮液中緩慢加入16.17克（234.38毫摩爾）亞硝酸鈉在120毫升水中的溶液，在此過程中使內部溫度保持在低於5℃。在浴溫度0℃下攪拌30分鐘後，在用冰浴繼續冷卻的同時，緩慢加入120毫升（1.2摩爾）10M氫氧化鈉溶液，在此過程中內部溫度升至大約20℃且存在的固體開始溶解。在室溫下攪拌1小時後，該混合物用濃鹽酸小心酸化（pH=2）。濾出形成的沉澱物並用水後洗滌三次。在空氣下和在減壓下乾燥後，獲得33.80克（理論值的98%）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=14.85(br.s,1H),8.08(d,1H),8.02(s,1H),7.90(d,1H).LC/MS(Method3,ESIpos):Rt=1.40分鐘，m/z=162[M+H]+。實施例3A(1RS,2RS,5SR)-2-[4-(苄氧基)苯甲醯基]-5-[(4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）步驟1:2-[4-(苄氧基)苯基]-2-羥基雙環[2.2.1]庚烷-7-甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯在大約-5℃的內部溫度下在氬氣下向24.30克（95.52毫摩爾）2-氧代雙環[2.2.1]庚烷-7-甲酸外-2-(三甲基甲矽烷基)乙酯[WO96/15096，實施例360/階段1]在60毫升THF中的溶液中緩慢加入114.62毫升（114.62毫摩爾）4-(苄氧基)苯基溴化鎂在THF中的1M溶液，在此過程中內部溫度升至最大0℃。然後移除冷浴並將該混合物攪拌另外1小時。然後向該混合物中加入200毫升5%檸檬酸溶液並用二氯甲烷萃取兩次。合併的有機相經硫酸鎂乾燥並濃縮。殘留物通過在1千克矽膠上的快速色譜法提純（洗脫劑：環己烷/乙酸乙酯9:1）。獲得28.70克（理論值的66%；97%純度）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=7.49-7.27(m,7H),6.95(d,2H),5.09(s,2H),5.05(s,1H),4.10-4.00(m,2H),2.44-2.37(m,1H),2.33-2.24(m,1H),2.23-2.11(m,1H),1.78-1.60(m,1H),1.52-1.26(m,4H),0.95-0.80(m,2H),0.00(s,9H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=3.15分鐘，m/z=421[M+H-H2O]+。步驟2:2-[4-(苄氧基)苯基]雙環[2.2.1]庚-2-烯-7-甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯在氬氣下在大約0℃下向28.70克（63.466毫摩爾）來自實施例3A/步驟1的化合物在150毫升二氯甲烷中的溶液中首先加入26.50毫升（190.40毫摩爾）三乙胺，然後緩慢加入9.82毫升（126.93毫摩爾）甲磺醯氯，在此過程中內部溫度不超過5℃。此後在0℃下攪拌另外1.5小時。此後，該混合物用二氯甲烷稀釋並用水萃取。有機相經硫酸鎂乾燥並濃縮，殘留物通過在1千克矽膠上的快速色譜法提純（洗脫劑：環己烷/乙酸乙酯95:5）。獲得20.06克（理論值的75%）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=7.48-7.28(m,7H),6.97(d,2H),6.30(d,1H),5.11(s,2H),4.15-4.06(m,2H),3.43(br.s,1H),3.06(br.s,1H),1.85-1.71(m,2H),1.17-1.06(m,1H),1.04-0.87(m,3H),0.04(s,9H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.61分鐘，m/z=421[M+H]+。步驟3:2-[4-(苄氧基)苯基]-2,3-二羥基雙環[2.2.1]庚烷-7-甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯在0℃下向在氬氣下的25.37克（60.314毫摩爾，未校正純度）來自來自實施例3A/步驟2的化合物在150毫升THF中的脫氣溶液中加入在氬氣下的15.90克（135.71毫摩爾）N-甲基嗎啉-N-氧化物（NMO）在42毫升水中的脫氣溶液。然後在攪拌的同時向這種混合物中緩慢加入116毫升（9.05毫摩爾）2.5%四氧化鋨/叔丁醇溶液。此後在0℃下攪拌另外1小時。在室溫下攪拌另外16小時後，該混合物用150毫升乙酸乙酯稀釋並用每次250毫升10%檸檬酸溶液萃取兩次，用每次300毫升飽和碳酸氫鈉溶液萃取兩次並用每次300毫升飽和氯化鈉溶液萃取兩次。有機相隨後經硫酸鈉乾燥並濃縮。獲得27.51克（理論值的75%；純度75%）標題化合物。LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.40分鐘，m/z=437[M+H-H2O]+。步驟4:(1RS,2RS,5SR)-2-[4-(苄氧基)苯甲醯基]-5-甲醯基環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）方法A:在氬氣下在-15℃的浴溫度下，向27.42克（60.31毫摩爾，未校正純度）來自實施例3A/步驟3的化合物在170毫升甲醇中的溶液中緩慢加入30.96克（66.34毫摩爾，純度95%）四乙酸鉛。該混合物在-15℃下攪拌1小時。在加熱至室溫後，該混合物經C鹽過濾，過濾殘留物用每次50毫升甲醇後洗滌三次。將濾液濃縮並將殘留物置於500毫升二氯甲烷和500毫升水中，不發生相分離。此後，該混合物經矽膠過濾並用二氯甲烷後洗滌矽膠。在相分離後，水相再次用150毫升二氯甲烷萃取。合併的有機相經硫酸鈉乾燥並濃縮。獲得27.1克（理論值的86%；純度87%）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=9.72(d,1H),8.02(d,2H),7.53-7.34(m,5H),7.18(d,2H),5.25(s,2H),4.17(q,1H),4.09(dd,2H),3.74(t,1H),3.23-3.14(m,1H),2.24-2.13(m,1H),2.08-1.88(m,2H),1.61-1.49(m,1H),0.87-0.79(m,2H),0.00(s,9H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.45分鐘，m/z=425[M+H-28]+。方法B:在0℃下在氬氣下向69.0克（131毫摩爾，大約80%純度）來自實施例3A/步驟2的化合物在丙酮/水/THF（3:1:1）混合物中的溶液中首先加入76.87克（656毫摩爾）N-甲基嗎啉-N-氧化物（NMO），然後2.09克（8.20毫摩爾）4%四氧化鋨水溶液。將該混合物在室溫下攪拌3天。然後加入105.26克（492毫摩爾）高碘酸鈉並將該混合物在室溫下繼續攪拌整夜。在加入乙酸乙酯和10%檸檬酸水溶液後，分離水相併用乙酸乙酯萃取一次。合併的有機相用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌一次，然後加入矽酸鎂（Fluorisil）。在過濾後，過濾殘留物用乙酸乙酯後洗滌。在濃縮濾液後，將由此獲得的殘留物與來自兩個類似進行的在先實驗的殘留物[來自實施例3A/步驟2的化合物的用量:3.0克（7.13毫摩爾）和3.2克（7.61毫摩爾）]合併，並一起藉助快速色譜法提純（矽膠，洗脫劑：石油醚/乙酸乙酯8:2）。由此獲得53克（理論值的58%，將在先實驗計入考慮，89%純度）標題化合物。步驟5:(1RS,2RS,5SR)-2-[4-(苄氧基)苯甲醯基]-5-(羥甲基)環戊烷-甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）在室溫下向27.0克（59.65毫摩爾，未校正純度）來自實施例3A/步驟4的化合物在135毫升乙醇中的溶液中緩慢加入677毫克（17.895毫摩爾）硼氫化鈉，並將該混合物在室溫下攪拌30分鐘。隨後向該混合物中加入各400毫升氯化銨溶液和水，並用每次300毫升乙酸乙酯萃取兩次。合併的有機相經硫酸鈉乾燥並濃縮。獲得21.90毫克（理論值的70%；87%純度）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=7.95(d,2H),7.48-7.31(m,5H),7.12(d,2H),5.20(s,2H),4.64(t,1H),4.07-3.98(m,3H),3.53-3.45(m,1H),3.40-3.34(m,1H),2.94(t,1H),2.34-2.23(m,1H),2.12-2.01(m,1H),1.90-1.78(m,1H),1.67-1.47(m,2H),0.82-0.75(m,2H),0.00(s,9H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.34分鐘，m/z=455[M+H]+。步驟6:(1RS,2RS,5SR)-2-[4-(苄氧基)苯甲醯基]-5-[(4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）在氬氣下向500毫克（1.10毫摩爾，未校正純度）來自實施例3A/步驟5的化合物在6毫升THF中的溶液中加入243毫克（1.65毫摩爾）1,2,3-苯並三嗪-4(3H)-酮和1.11克（5.50毫摩爾）三丁基膦。隨後，在0℃下逐滴加入1.50毫升（3.30毫摩爾）40%偶氮二甲酸二乙酯（DEAD）/甲苯溶液。將該混合物在室溫下攪拌大約1小時，然後用乙酸乙酯稀釋並用每次5毫升水萃取兩次和用飽和氯化鈉溶液萃取兩次。有機相經硫酸鎂乾燥並濃縮。殘留物通過製備型HPLC（方法6）提純。獲得334毫克（理論值的52%）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=8.44(dd,1H),8.38(d,1H),8.27(td,1H),8.15-8.08(m,3H),7.65-7.48(m,5H),7.29(d,2H),5.37(s,2H),4.74-4.62(m,2H),4.26(q,1H),3.40(t,1H),3.13-3.01(m,1H),2.36-2.25(m,1H),2.21-2.10(m,1H),1.96-1.84(m,1H),1.77-1.65(m,1H),0.53-0.46(m,2H),0.17(s,9H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.51分鐘，m/z=584[M+H]+。實施例4A(1RS,2RS,5SR)-2-(4-羥基苯甲醯基)-5-[(4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）在氬氣下向270毫克（0.46毫摩爾）來自實施例3A的化合物在12毫升乙酸乙酯中的溶液中加入25毫克（0.024毫摩爾）載鈀活性炭（10%Pd）。此後使用標準壓力氫化42小時。該混合物隨後經硅藻土過濾，過濾殘留物用乙酸乙酯後洗滌並濃縮濾液。將由此獲得的殘留物置於少量二氯甲烷中並通過柱色譜法提純（25克矽膠，洗脫劑：環己烷/乙酸乙酯7:3）。獲得165毫克（理論值的72%，100%純度）標題化合物。1H-NMR(400MHz,CDCl3):δ[ppm]=8.37(d,1H),8.16(d,1H),7.98-7.88(m,3H),7.84-7.77(m,1H),6.89(d,2H),6.67(br.s,1H),4.77-4.70(m,1H),4.68-4.60(m,1H),4.20-4.10(m,1H),3.88-3.81(m,2H),3.46(t,1H),3.08-2.94(m,1H),2.19-2.04(m,1H),2.01-1.86(m,2H),1.72-1.64(m,部分隱藏,1H),0.63-0.55(m,2H),-0.09(s,9H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.23分鐘，m/z=494[M+H]+。實施例5A(1RS,2SR,5RS)-2-[(4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-[4-(四氫-2H-吡喃-4-基甲氧基)苯甲醯基]環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）在氬氣下向164毫克（0.33毫摩爾）來自實施例4A的化合物在3.7毫升乙腈中的溶液中加入92毫克（0.66毫摩爾）碳酸鉀和71毫克（0.40毫摩爾）4-(溴甲基)四氫吡喃，並將該混合物在回流下攪拌20小時。隨後加入另外36毫克（0.20毫摩爾）4-(溴甲基)四氫吡喃並將該混合物在回流下攪拌另外7小時。此後，加入另外71毫克（0.40毫摩爾）4-(溴甲基)四氫吡喃和46毫克（0.33毫摩爾）碳酸鉀並將該混合物在回流下攪拌另外17小時。在冷卻至室溫後，該混合物用30毫升水和30毫升乙酸乙酯稀釋，並在相分離後，水相用30毫升乙酸乙酯萃取一次。合併的有機相經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。殘留物藉助製備型HPLC（方法4）提純。合併的含產物的級分用飽和碳酸氫鈉水溶液調節至pH7-8，然後濃縮至水相殘留物，其用乙酸乙酯萃取兩次。合併的有機相經硫酸鈉乾燥並濃縮，殘留物在真空中乾燥。獲得85毫克（理論值的42%，97%純度）標題化合物。1H-NMR(400MHz,CDCl3):δ[ppm]=8.37(dd,1H),8.15(d,1H),7.99-7.91(m,3H),7.83-7.76(m,1H),6.91(d,2H),4.77-4.68(m,1H),4.67-4.59(m,1H),4.23-4.13(m,1H),4.03(dd,2H),3.89-3.80(m,4H),3.50-3.39(m,部分隱藏,3H),3.09-2.93(m,1H),2.19-2.03(m,2H),2.01-1.86(m,2H),1.76(dd,2H),1.71-1.62(m,部分隱藏,1H),1.47(qd,2H),0.65-0.53(m,2H),-0.09(s,9H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.43分鐘，m/z=592[M+H]+。實施例6A(1RS,2SR,5RS)-2-[(4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-{4-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲醯基}環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）在氬氣下向3.88克（7.47毫摩爾，95%純度）來自實施例4A的化合物在41毫升DMF中的溶液中加入1.01克（8.96毫摩爾）叔丁醇鉀。在室溫下攪拌5分鐘後，加入1.73克（8.96毫摩爾）4-(2-溴乙基)四氫-2H-吡喃並將該混合物在浴溫度100℃下攪拌2小時。在冷卻至室溫後，將水和乙酸乙酯添加到該混合物中。在相分離後，水相用乙酸乙酯萃取一次。合併的有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌一次，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘留物藉助柱色譜法提純（300克矽膠，洗脫劑：環己烷/乙酸乙酯7:3）。獲得2.91克（理論值的64%，99%純度）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=8.27(d,1H),8.20(d,1H),8.10(t,1H),7.97-7.89(m,3H),7.03(d,2H),4.57-4.44(m,2H),4.14-4.03(m,3H),3.82(dd,2H),3.63-3.46(m,2H),3.31-3.17(m,部分隱藏,3H),2.97-2.84(m,1H),2.18-2.05(m,1H),2.04-1.92(m,1H),1.80-1.48(m,6H),1.29-1.13(m,3H),0.37-0.26(m,2H),-0.17(s,9H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.46分鐘，m/z=606[M+H]+。實施例7A(1RS,2RS,5SR)-2-[4-(苄氧基)苯甲醯基]-5-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）在氬氣下向13.88克（30.53毫摩爾，未校正純度）來自實施例3A/步驟5的化合物在200毫升甲苯中的溶液中加入7.88克（36.64毫摩爾）來自實施例1A的化合物和9.88克（48.85毫摩爾）三丁基磷烷。隨後，在0℃下逐滴加入13.90毫升（30.53毫摩爾）40%偶氮二甲酸二乙酯/甲苯溶液。將該混合物在室溫下攪拌1天，然後濃縮。殘留物藉助快速色譜法提純（1千克矽膠，洗脫劑：環己烷/乙酸乙酯9:1）。獲得9.06克（理論值的44%，98%純度）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=8.52(s,1H),8.47-8.43(m,2H),7.95(d,2H),7.48-7.30(m,5H),7.12(d,2H),5.20(s,2H),4.60-4.50(m,2H),4.10(q,1H),3.65-3.49(m,2H),3.25(t,1H),2.96-2.83(m,1H),2.19-2.07(m,1H),2.07-1.95(m,1H),1.80-1.68(m,1H),1.63-1.50(m,1H),0.39-0.22(m,2H),-0.18(s,9H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.57分鐘，m/z=652[M+H]+。實施例8A(1RS,2RS,5SR)-2-(4-羥基苯甲醯基)-5-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）在氬氣下向9.05克（13.89毫摩爾）來自實施例7A的化合物在100毫升乙酸乙酯和100毫升乙醇的混合物中的溶液中加入1.05克（16.66毫摩爾）甲酸銨和369毫克（0.35毫摩爾）載鈀活性炭（10%Pd）。然後將該混合物在75℃下攪拌1小時。此後，加入另外105毫克（1.67毫摩爾）甲酸銨，該混合物再次在75℃下攪拌30分鐘。在冷卻至室溫後，經硅藻土過濾該混合物，過濾殘留物用乙酸乙酯洗滌和乙醇後洗滌並濃縮濾液。獲得7.86克（理論值的100%）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=10.40(br.s,1H),8.52(s,1H),8.47-8.42(m,2H),7.85(d,2H),6.84(d,2H),4.60-4.51(m,2H),4.05(q,1H),3.64-3.48(m,2H),3.23(t,1H),2.96-2.82(m,1H),2.17-2.05(m,1H),2.05-1.94(m,1H),1.79-1.67(m,1H),1.62-1.49(m,1H),0.38-0.22(m,2H),-0.18(s,9H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.31分鐘，m/z=562[M+H]+。實施例9A(1RS,2SR,5RS)-2-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}-5-[4-(四氫-2H-吡喃-4-基甲氧基)苯甲醯基]環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）在氬氣下向1.07克（1.90毫摩爾）來自實施例8A的化合物在20毫升DMF中的溶液中加入256毫克（2.28毫摩爾）叔丁醇鉀。在室溫下攪拌5分鐘後，加入408毫克（2.28毫摩爾）4-(溴甲基)四氫吡喃，並將該混合物在浴溫度100℃下攪拌2小時。隨後，加入另外136毫克（0.76毫摩爾）4-(溴甲基)-四氫吡喃並將該混合物在浴溫度100℃下攪拌另外2小時。在冷卻至室溫後，將該混合物與來自兩個類似進行的在先實驗的反應混合物（每種情況下的批次（Absatz）大小為47毫克（0.08毫摩爾）來自實施例8A的化合物）合併。在除去DMF後，將60毫升水和60毫升乙酸乙酯添加到這種合併的混合物中。在相分離後，水相用30毫升乙酸乙酯萃取一次。合併的有機相經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘留物置於環己烷和乙酸乙酯（9:1）的混合物中並藉助柱色譜法提純（120克矽膠，洗脫劑：環己烷/乙酸乙酯9:1）。獲得590毫克（理論值的47%，純度100%）標題化合物。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ[ppm]=8.66(s,1H),8.28(d,1H),8.14(dd,1H),7.95(d,2H),6.92(d,2H),4.78-4.62(m,2H),4.21-4.13(m,1H),4.03(dd,2H),3.89-3.81(m,4H),3.50-3.40(m,3H),3.07-2.93(m,1H),2.19-2.03(m,2H),2.03-1.87(m,2H),1.76(dd,2H),1.72-1.61(m,1H),1.47(qd,2H),0.63-0.53(m,2H),-0.09(s,9H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.51分鐘，m/z=560[M+H]+。實施例10A(1RS,2SR,5RS)-2-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}-5-{4-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲醯基}環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）在氬氣下向250毫克（0.45毫摩爾）來自實施例8A的化合物在4.5毫升DMF中的溶液中加入60毫克（0.53毫摩爾）叔丁醇鉀。在室溫下攪拌5分鐘後，加入103毫克（0.53毫摩爾）4-(2-溴乙基)四氫-2H-吡喃，並將該混合物在浴溫度100℃下攪拌1小時。在冷卻至室溫後，將60毫升水和60毫升叔丁基甲基醚添加到反應混合物中。在相分離後，水相用30毫升叔丁基甲基醚萃取一次並用每次50毫升乙酸乙酯萃取兩次。合併的有機相經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將殘留物置於二氯甲烷並藉助柱色譜法提純（25克矽膠，洗脫劑：環己烷/乙酸乙酯7:3）。獲得138毫克（理論值的46%，純度100%）標題化合物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=8.52(s,1H),8.45(s,2H),7.93(d,2H),7.04(d,2H),4.60-4.50(m,2H),4.15-4.07(m,3H),3.82(dd,2H),3.64-3.47(m,2H),3.31-3.18(m,3H),2.97-2.83(m,1H),2.19-2.06(m,1H),2.06-1.94(m,1H),1.81-1.49(m,6H),1.29-1.14(m,3H),0.36-0.22(m,2H),-0.18(s,9H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.53分鐘，m/z=674[M+H]+。實施例11A(1RS,2SR,5RS)-2-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}-5-(4-{[(三氟甲基)磺醯基]氧基}苯甲醯基)環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）在氬氣下在0℃下向1.00克（1.78毫摩爾）來自實施例8A的化合物在5.0毫升二氯甲烷中的溶液中首先加入0.25毫升（3.12毫摩爾）吡啶，然後緩慢加入0.45毫升（2.67毫摩爾）三氟甲磺酸酐。該混合物在0℃下攪拌1小時，然後加入二氯甲烷，用水和飽和碳酸氫鈉溶液各洗滌一次。有機相經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。獲得1.21克（理論值的98%，100%純度）標題化合物。LC/MS(方法2,ESIpos):Rt=3.41分鐘，m/z=694[M+H]+。實施例12A(1RS,2SR,5RS)-2-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}-5-(4-硫烷基苯甲醯基)環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）向800毫克（1.15毫摩爾）來自實施例11A的化合物在10毫升二氧雜環己烷中的溶液中相繼加入264毫克（1.38毫摩爾）三異丙基矽烷硫醇、298毫克（2.31毫摩爾）N,N-二異丙基乙基胺、26毫克（0.03毫摩爾）三(二亞苄基丙酮)二鈀和33毫克（0.06毫摩爾）4,5-雙(二苯基膦)-9,9-二甲基呫噸（Xantphos）。隨後，將該混合物脫氣，用氬氣吹掃並在回流下攪拌2.5小時。在冷卻至室溫後，向該混合物中加入乙酸乙酯並用水洗滌一次。在水相用乙酸乙酯萃取一次後，合併的有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌一次，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘留物藉助製備型HPLC（方法4）提純。合併含產物的級分，用飽和碳酸氫鈉水溶液中和並濃縮至小殘留水體積。在這種水相用二氯甲烷萃取兩次後，合併的有機相經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮，殘留物在真空中乾燥。獲得350毫克（理論值的35%，67%純度）標題化合物。根據LC/MS，其中含有25%的相應的二硫化物（二聚產物，2,2'-[二硫烷二基雙(苯-4,1-二基羰基)]雙(5-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}環戊烷甲酸(+/-)-雙[2-(三甲基甲矽烷基)乙基]酯)。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=8.52(s,1H),8.44(s,2H),7.83(d,2H),7.42(d,2H),6.03(br.s,1H),4.60-4.48(m,2H),4.08(q,1H),3.64-3.48(m,2H),3.23(t,1H),2.97-2.81(m,1H),2.19-2.06(m,1H),2.06-1.94(m,1H),1.79-1.67(m,1H),1.62-1.48(m,1H),0.37-0.22(m,2H),-0.18(s,9H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.44分鐘，m/z=578[M+H]+。實施例13A(1RS,2SR,5RS)-2-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}-5-{4-[(四氫-2H-吡喃-4-基甲基)硫烷基]苯甲醯基}環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）向200毫克來自實施例12A的化合物（0.35毫摩爾，未校正純度，包含大約25%相應的二硫化物）在14毫升DMF中的溶液中加入96毫克（0.69毫摩爾）碳酸鉀並將該混合物在室溫下攪拌2分鐘。隨後，加入136毫克（0.76毫摩爾）4-(溴甲基)四氫吡喃和123毫克（1.04毫摩爾）羥基甲亞磺酸鈉並將該混合物在室溫下攪拌另外30分鐘。然後將該混合物濃縮，向殘留物中加入水並用乙酸乙酯萃取兩次。合併的有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌一次，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。獲得248毫克（理論值的100%，純度95%）標題化合物。LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.50分鐘，m/z=676[M+H]+。實施例14A(1RS,2RS,5SR)-2-[4-(苄氧基)苯甲醯基]-5-[(6-甲基-4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）在氬氣下向9.60克（20.06毫摩爾，95%純度）來自實施例3A/步驟5的化合物在110毫升甲苯中的懸浮液中加入3.88克（24.07毫摩爾）來自實施例2A的化合物。隨後，在0℃下逐滴加入25.1毫升（100.30毫摩爾）三丁基磷烷和27.4毫升（60.18毫摩爾）40%偶氮二甲酸二乙酯/甲苯溶液。在室溫下攪拌2小時後，該混合物用乙酸乙酯稀釋並用水洗滌一次。水相用乙酸乙酯再萃取（rückextrahiert）一次。合併的有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌一次，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘留物藉助快速色譜法提純（矽膠，洗脫劑：環己烷/乙酸乙酯85:15→80:20）。獲得6.28克（理論值的51%，98%純度）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=8.12-8.05(m,2H),7.97-7.88(m,3H),7.48-7.27(m,5H),7.12(d,2H),5.20(s,2H),4.56-4.42(m,2H),4.08(q,1H),3.61-3.46(m,2H),3.22(t,1H),2.96-2.83(m,1H),2.55(s,3H),2.17-2.05(m,1H),2.03-1.92(m,1H),1.78-1.67(m,1H),1.59-1.47(m,1H),0.38-0.23(m,2H),-0.17(s,9H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.49分鐘，m/z=598[M+H]+。實施例15A(1RS,2RS,5SR)-2-(4-羥基苯甲醯基)-5-[(6-甲基-4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）在氬氣下向6.25克（10.25毫摩爾，98%純度）來自實施例14A的化合物在50毫升乙酸乙酯和50毫升乙醇的混合物中的溶液中加入273毫克（0.26毫摩爾）載鈀活性炭（10%Pd）和969毫克（15.37毫摩爾）甲酸銨。該混合物隨後在70℃下攪拌2小時。在冷卻至室溫後，經硅藻土過濾該混合物，過濾殘留物用乙酸乙酯後洗滌，濃縮濾液，殘留物在真空中乾燥。獲得5.20克（理論值的97%，97%純度）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=10.40(br.s,1H),8.12-8.05(m,2H),7.92(dd,1H),7.84(d,2H),6.84(d,2H),4.57-4.42(m,2H),4.03(q,1H),3.62-3.46(m,2H),3.21(t,1H),2.96-2.83(m,1H),2.55(s,3H),2.17-2.04(m,1H),2.03-1.91(m,1H),1.78-1.66(m,1H),1.60-1.48(m,1H),0.39-0.25(m,2H),-0.17(s,9H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.28分鐘，m/z=508[M+H]+。實施例16A(1RS,2SR,5RS)-2-[(6-甲基-4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-[4-(四氫-2H-吡喃-4-基甲氧基)苯甲醯基]環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）在氬氣下向500毫克（0.96毫摩爾，97%純度）來自實施例15A的化合物在5.3毫升DMF中的溶液中加入129毫克（1.15毫摩爾）叔丁醇鉀。在室溫下攪拌5分鐘後，加入205毫克（1.15毫摩爾）4-(溴甲基)四氫-2H-吡喃，並將該混合物在浴溫度100℃下攪拌1小時。在冷卻並在室溫下靜置整夜後，向該混合物中加入60毫升水和60毫升乙酸乙酯。在相分離後，水相用30毫升乙酸乙酯萃取一次。合併的有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌一次，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘留物藉助柱色譜法提純（90克矽膠，洗脫劑：環己烷/乙酸乙酯7:3）。獲得290毫克（理論值的41%，純度82%）標題化合物。LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.43分鐘，m/z=606[M+H]+。實施例17A(1RS,2SR,5RS)-2-[(6-甲基-4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-{4-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲醯基}環戊烷甲酸2-(三甲基甲矽烷基)乙酯（外消旋物）在氬氣下向200毫克（0.38毫摩爾，97%純度）來自實施例15A的化合物在2.1毫升DMF中的溶液中加入51毫克（0.46毫摩爾）叔丁醇鉀。在室溫下攪拌5分鐘後，加入89毫克（0.46毫摩爾）4-(2-溴乙基)四氫-2H-吡喃，並將該混合物在浴溫度100℃下攪拌2小時。在冷卻至室溫後，將60毫升水和60毫升乙酸乙酯添加到該混合物中。在相分離後，水相用30毫升乙酸乙酯萃取一次。合併的有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌一次，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘留物藉助柱色譜法提純（40克矽膠，洗脫劑：環己烷/乙酸乙酯7:3）。獲得142毫克（理論值的60%，純度100%）標題化合物。LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.46分鐘，m/z=620[M+H]+。實施例:實施例1(+/-)-(1RS,2SR,5RS)-2-[(4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-[4-(四氫-2H-吡喃-4-基甲氧基)苯甲醯基]環戊烷甲酸（外消旋物）在0℃下向83毫克（0.14毫摩爾）來自實施例5A的化合物在0.5毫升二氯甲烷中的溶液中加入0.25毫升（3.24毫摩爾）三氟乙酸。該混合物在0℃下攪拌2.5小時，然後濃縮。將殘留物置於乙腈中並藉助製備型HPLC（方法4）提純。獲得60毫克（理論值的85%，98%純度）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.12(s,1H),8.26(dd,1H),8.20(d,1H),8.08(td,1H),7.99-7.90(m,3H),7.04(d,2H),4.59-4.46(m,2H),4.14-4.05(m,1H),3.93(d,2H),3.87(dd,2H),3.38-3.32(部分隱藏,2H),3.23(t,1H),2.94-2.81(m,1H),2.17-1.95(m,2H),1.95-1.83(m,1H),1.72-1.61(m,3H),1.57-1.45(m,1H),1.33(qd,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.06分鐘，m/z=492[M+H]+。對映體的分離:將30毫克來自實施例1的外消旋化合物在熱作用下溶解在12毫升甲醇/乙腈中並藉助在手性相上的製備型SFC分離成對映體（參見實施例2和3）[柱:DaicelChiralpakAZ-H,5µm,250mmx20mm；流速:80ml/min；檢測:210nm；注射體積:1.0ml；溫度:40℃；洗脫劑:60%二氧化碳/40%乙醇]。實施例2(+)-(1RS,2SR,5RS)-2-[(4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-[4-(四氫-2H-吡喃-4-基甲氧基)苯甲醯基]環戊烷甲酸（對映體1）收率:14毫克；化學純度=100%；ee值=99%[α]D20=+66.9°,589nm,c=0.27g/100ml,氯仿1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.10(br.s,1H),8.26(d,1H),8.20(d,1H),8.11-8.05(m,1H),7.99-7.89(m,3H),7.04(d,2H),4.59-4.46(m,2H),4.14-4.05(m,1H),3.93(d,2H),3.87(dd,2H),3.32-3.19(m,部分隱藏,3H),2.94-2.80(m,1H),2.18-1.96(m,2H),1.95-1.84(m,1H),1.72-1.61(m,3H),1.58-1.44(m,1H),1.33(qd,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.04分鐘，m/z=492[M+H]+。實施例3(-)-(1RS,2SR,5RS)-2-[(4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-[4-(四氫-2H-吡喃-4-基甲氧基)苯甲醯基]環戊烷甲酸（對映體2）收率:17毫克；化學純度=100%；ee值=99%[α]D20=-56.4°,589nm,c=0.28g/100ml,氯仿1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.07(br.s,1H),8.26(dd,1H),8.20(d,1H),8.08(td,1H),7.99-7.89(m,3H),7.04(d,2H),4.53(dd,2H),4.14-4.05(m,1H),3.93(d,2H),3.87(dd,2H),3.34-3.28(m,部分隱藏,2H),3.24(t,1H),2.98-2.81(m,1H),2.17-1.96(m,2H),1.95-1.83(m,1H),1.73-1.60(m,3H),1.57-1.45(m,1H),1.33(qd,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.04分鐘，m/z=492[M+H]+。實施例4(+/-)-(1RS,2SR,5RS)-2-[(4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-{4-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲醯基}環戊烷甲酸（外消旋物）在0℃下向2.91克（4.75毫摩爾，純度99%）來自實施例6A的化合物在16毫升二氯甲烷中的溶液中加入8.0毫升（104毫摩爾）三氟乙酸並在0℃下攪拌2小時。隨後，將該混合物濃縮，殘留物在減壓下乾燥。在添加少量乙酸乙酯後，獲得固體，將其濾出，用少量乙酸乙酯和戊烷後洗滌一次，並在真空中乾燥。由此獲得2.11克（理論值的88%，100%純度）第一批標題化合物。濃縮剩餘母液，殘留物藉助製備型HPLC提純[柱:KinetixC18,5µm,100mmx21.2mm；流速:25ml/min；檢測:210nm；注射體積:0.5ml；溫度:40℃；洗脫劑:44%水/45%乙腈/11%甲酸水溶液，經8分鐘等度]。由此獲得52毫克（理論值的2%，100%純度）第二批標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.14(br.s,1H),8.26(d,1H),8.20(d,1H),8.11-8.05(m,1H),7.99-7.90(m,3H),7.04(d,2H),4.58-4.47(m,2H),4.15-4.05(m,3H),3.83(dd,2H),3.34-3.19(m,3H),2.94-2.81(m,1H),2.16-2.04(m,1H),1.95-1.83(m,1H),1.75-1.58(m,6H),1.57-1.45(m,1H),1.29-1.14(m,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.05分鐘，m/z=506[M+H]+。對映體的分離:將2.00克來自實施例4的外消旋化合物部分溶解在20毫升二氧雜環己烷中，加入180毫升甲醇/乙腈混合物並在熱作用下將該混合物轉化成溶液，然後藉助在手性相上的製備型SFC分離成對映體（參見實施例5和6）[柱:DaicelChiralpakAY-H,5µm,250mmx20mm；流速:80ml/min；檢測:210nm；注射體積:1.2ml；溫度:40℃；洗脫劑:70%二氧化碳/30%乙醇，運行時間16min]。實施例5(+)-(1RS,2SR,5RS)-2-[(4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-{4-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲醯基}環戊烷甲酸（對映體1）獲得910毫克（化學純度=97%,ee值=100%）標題化合物，將其置於20毫升乙腈中並再次通過色譜法後提純[柱:KinetixC18,5µm,100mmx30mm；流速:60ml/min；檢測:210nm；注射體積:1.0ml；溫度:30℃；洗脫劑:45%水/50%乙腈/5%甲酸水溶液，經4分鐘等度]。由此以100%化學純度獲得850毫克標題化合物。[α]D20=+71.0°,589nm,c=0.37g/100ml,氯仿1H-NMR(500MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.13(br.s,1H),8.26(dd,1H),8.20(d,1H),8.08(td,1H),7.98-7.90(m,3H),7.04(d,2H),4.58-4.47(m,2H),4.14-4.05(m,3H),3.83(dd,2H),3.32-3.20(m,部分隱藏,3H),2.88(sext,1H),2.15-2.05(m,1H),1.93-1.84(m,1H),1.76-1.58(m,6H),1.56-1.47(m,1H),1.27-1.16(m,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.07分鐘，m/z=506[M+H]+。實施例6(-)-(1RS,2SR,5RS)-2-[(4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-{4-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲醯基}環戊烷甲酸（對映體2）收率:903毫克；化學純度=100%；ee值=100%[α]D20=-70.1°,589nm,c=0.35g/100ml,氯仿1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=8.26(d,1H),8.20(d,1H),8.11-8.05(m,1H),7.99-7.90(m,3H),7.04(d,2H),4.59-4.47(m,2H),4.14-4.06(m,3H),3.83(dd,2H),3.32-3.20(m,3H),2.87(sext,1H),2.17-2.04(m,1H),1.95-1.83(m,1H),1.75-1.58(m,6H),1.57-1.45(m,1H),1.29-1.15(m,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.05分鐘，m/z=506[M+H]+。實施例7(+/-)-(1RS,2SR,5RS)-2-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}-5-[4-(四氫-2H-吡喃-4-基甲氧基)苯甲醯基]環戊烷甲酸（外消旋物）在0℃下向585毫克（0.89毫摩爾）來自實施例9A的化合物在3毫升二氯甲烷中的溶液中加入1.5毫升（19.47毫摩爾）三氟乙酸。將該混合物在0℃下攪拌5.5小時，然後濃縮。將殘留物置於5毫升乙腈中。沉澱出固體，將其濾出並在真空中乾燥。獲得468毫克（理論值的95%，純度100%）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.13(s,1H),8.51(s,1H),8.46-8.38(m,2H),7.96(d,2H),7.04(d,2H),4.57(d,2H),4.15-4.05(m,1H),3.93(d,2H),3.87(dd,2H),3.38-3.28(隱藏,2H),3.24(t,1H),2.94-2.79(m,1H),2.18-1.87(m,3H),1.73-1.61(m,3H),1.59-1.46(m,1H),1.33(qd,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.17分鐘，m/z=660[M+H]+。對映體的分離:將465毫克來自實施例7的外消旋化合物溶解在15毫升DMSO和30毫升乙醇中並藉助在手性相上的製備型SFC分離成對映體（參見實施例8和9）[柱:DaicelChiralpakAY,20µm,250mmx30mm；流速:175ml/min；檢測:210nm；注射體積:1.3ml；溫度:38℃；洗脫劑:75%二氧化碳/25%乙醇，運行時間16.5min]。實施例8(+)-(1RS,2SR,5RS)-2-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}-5-[4-(四氫-2H-吡喃-4-基甲氧基)苯甲醯基]環戊烷甲酸（對映體1）收率:239毫克；化學純度=100%；ee值=100%[α]D20=+80.2°,589nm,c=0.31g/100ml,氯仿1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.13(br.s,1H),8.51(s,1H),8.46-8.38(m,2H),7.96(d,2H),7.04(d,2H),4.57(d,2H),4.15-4.05(m,1H),3.93(d,2H),3.87(dd,2H),3.37-3.28(隱藏,2H),3.24(t,1H),2.94-2.80(m,1H),2.17-1.88(m,3H),1.72-1.61(m,3H),1.58-1.46(m,1H),1.33(qd,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.17分鐘，m/z=660[M+H]+。實施例9(-)-(1RS,2SR,5RS)-2-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}-5-[4-(四氫-2H-吡喃-4-基甲氧基)苯甲醯基]環戊烷甲酸（對映體2）收率:228毫克；ee值=100%[α]D20=-88.9°,589nm,c=0.31g/100ml,氯仿1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.13(br.s,1H),8.51(s,1H),8.46-8.37(m,2H),7.96(d,2H),7.04(d,2H),4.57(d,2H),4.14-4.05(m,1H),3.93(d,2H),3.87(dd,2H),3.37-3.28(隱藏,2H),3.23(t,1H),2.94-2.80(m,1H),2.17-1.87(m,3H),1.73-1.61(m,3H),1.58-1.46(m,1H),1.33(qd,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.17分鐘，m/z=660[M+H]+。實施例10(+/-)-(1RS,2SR,5RS)-2-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}-5-{4-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲醯基}環戊烷甲酸（外消旋物）在0℃下向135毫克（0.20毫摩爾）來自實施例10A的化合物在0.7毫升二氯甲烷中的溶液中加入0.35毫升（4.54毫摩爾）三氟乙酸。將該混合物在0℃下攪拌2.5小時，然後濃縮。將殘留物置於2毫升乙腈中並藉助製備型HPLC（方法5）提純。獲得91毫克（理論值的80%，純度100%）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.13(s,1H),8.51(s,1H),8.46-8.38(m,2H),7.96(d,2H),7.04(d,2H),4.57(d,2H),4.14-4.05(m,3H),3.83(dd,2H),3.32-3.20(m,3H),2.93-2.81(m,1H),2.17-2.03(m,1H),2.00-1.88(m,1H),1.76-1.45(m,7H),1.29-1.14(m,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.21分鐘，m/z=574[M+H]+。對映體的分離:將83毫克來自實施例10的外消旋化合物溶解在2毫升乙醇中並藉助在手性相上的製備型HPLC分離成對映體（參見實施例11和12）[柱:DaicelChiralpakAY-H,5µm,250mmx20mm；流速:15ml/min；檢測:220nm；注射體積:1ml；溫度:45℃；洗脫劑:t=0-15min25%異己烷/75%乙醇+0.2%乙酸]。實施例11(+)-(1RS,2SR,5RS)-2-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}-5-{4-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲醯基}環戊烷甲酸（對映體1）收率:38毫克；ee值=100%[α]D20=+70.7°,589nm,c=0.10g/100ml,氯仿1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.13(s,1H),8.51(s,1H),8.46-8.38(m,2H),7.96(d,2H),7.04(d,2H),4.57(d,2H),4.14-4.06(m,3H),3.83(dd,2H),3.32-3.20(m,3H),2.91-2.83(m,1H),2.16-2.04(m,1H),1.99-1.88(m,1H),1.75-1.58(m,6H),1.57-1.47(m,1H),1.29-1.15(m,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.22分鐘，m/z=574[M+H]+。實施例12(-)-(1RS,2SR,5RS)-2-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}-5-{4-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲醯基}環戊烷甲酸（對映體2）收率:45毫克；ee值=100%[α]D20=-77.1°,589nm,c=0.37g/100ml,氯仿1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.13(s,1H),8.51(s,1H),8.46-8.38(m,2H),7.96(d,2H),7.04(d,2H),4.57(d,2H),4.15-4.05(m,3H),3.83(dd,2H),3.32-3.20(m,3H),2.93-2.81(m,1H),2.17-2.04(m,1H),1.99-1.87(m,1H),1.74-1.58(m,6H),1.58-1.47(m,1H),1.29-1.15(m,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.22分鐘，m/z=574[M+H]+。實施例13(+/-)-(1RS,2SR,5RS)-2-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}-5-{4-[(四氫-2H-吡喃-4-基甲基)硫烷基]苯甲醯基}環戊烷甲酸（外消旋物）在0℃下向249毫克（0.35毫摩爾，純度95%）來自實施例13A的化合物在3.5毫升二氯甲烷中的溶液中加入1.75毫升三氟乙酸。該混合物首先在0℃下攪拌15分鐘，然後在室溫下攪拌1小時，然後濃縮。殘留物藉助製備型HPLC（方法4）提純。獲得163毫克（理論值的81%，純度100%）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.16(br.s,1H),8.51(s,1H),8.46-8.37(m,2H),7.90(d,2H),7.41(d,2H),4.62-4.52(m,2H),4.15-4.06(m,1H),3.83(dd,2H),3.30-3.19(m,3H),3.02(d,2H),2.94-2.81(m,1H),2.20-2.04(m,1H),2.01-1.87(m,1H),1.84-1.61(m,4H),1.60-1.45(m,1H),1.35-1.17(m,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.20分鐘，m/z=576[M+H]+。對映體的分離:將150毫克來自實施例13的外消旋化合物溶解在3毫升乙腈/乙醇中並藉助在手性相上的製備型HPLC分離成對映體（參見實施例14和15）[柱:DaicelChiralpakAS-H,5µm,250mmx4.6mm；流速:20ml/min；檢測:230nm；注射體積:0.06ml；溫度:25℃；洗脫劑:t=0-16min20%乙醇/76%乙腈/4%5%乙酸/乙腈溶液]。實施例14(-)-(1RS,2SR,5RS)-2-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}-5-{4-[(四氫-2H-吡喃-4-基甲基)硫烷基]苯甲醯基}環戊烷甲酸（對映體1）收率:59毫克；化學純度=100%；ee值=100%[α]D20=-85.6°,589nm,c=0.39g/100ml,氯仿1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.15(br.s,1H),8.51(s,1H),8.46-8.37(m,2H),7.90(d,2H),7.41(d,2H),4.63-4.51(m,2H),4.16-4.03(m,1H),3.83(dd,2H),3.29-3.19(m,3H),3.02(d,2H),2.94-2.81(m,1H),2.18-2.05(m,1H),2.02-1.86(m,1H),1.83-1.61(m,3H),1.59-1.44(m,1H),1.36-1.19(m,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.21分鐘，m/z=576[M+H]+。實施例15(+)-(1RS,2SR,5RS)-2-{[4-氧代-6-(三氟甲基)-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基]甲基}-5-{4-[(四氫-2H-吡喃-4-基甲基)硫烷基]苯甲醯基}環戊烷甲酸（對映體2）收率:61毫克；化學純度=100%；ee值=99%[α]D20=+53.1°,589nm,c=0.16g/100ml,氯仿1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.14(br.s,1H),8.51(s,1H),8.46-8.37(m,2H),7.90(d,2H),7.41(d,2H),4.63-4.50(m,2H),4.16-4.05(m,1H),3.83(dd,2H),3.29-3.17(m,3H),3.02(d,2H),2.94-2.77(m,1H),2.18-2.04(m,1H),2.02-1.86(m,1H),1.83-1.62(m,3H),1.60-1.45(m,1H),1.35-1.20(m,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.21分鐘，m/z=576[M+H]+。實施例16(+/-)-(1RS,2SR,5RS)-2-[(6-甲基-4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-[4-(四氫-2H-吡喃-4-基甲氧基)苯甲醯基]環戊烷甲酸（外消旋物）在0℃下向290毫克（0.39毫摩爾，純度82%）來自實施例16A的化合物在1.3毫升二氯甲烷中的溶液中加入0.7毫升（8.65毫摩爾）三氟乙酸。將該混合物在室溫下攪拌1小時，然後濃縮。殘留物藉助製備型HPLC（方法4）提純。獲得153毫克（理論值的77%，純度100%）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.12(br.s,1H),8.12-8.04(m,2H),7.96(d,2H),7.90(dd,1H),7.04(d,2H),4.51(d,2H),4.13-4.04(m,1H),3.93(d,2H),3.88(dd,2H),3.37-3.28(m,2H),3.23(t,1H),2.93-2.80(m,1H),2.55(s,3H),2.16-1.95(m,2H),1.93-1.82(m,1H),1.71-1.61(m,3H),1.50(dd,1H),1.33(qd,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.06分鐘，m/z=506[M+H]+。對映體的分離:將144毫克來自實施例16的外消旋化合物溶解在11毫升乙醇中並藉助在手性相上的製備型SFC分離成對映體（參見實施例17和18）[柱:PhenomenexAmyloseII,5µm,250mmx20mm；流速:100ml/min；檢測:210nm；注射體積:0.40ml；溫度:40℃；洗脫劑:65%二氧化碳/35%乙醇，運行時間15min]。實施例17(+)-(1RS,2SR,5RS)-2-[(6-甲基-4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-[4-(四氫-2H-吡喃-4-基甲氧基)苯甲醯基]環戊烷甲酸（對映體1）收率:63毫克；化學純度=94%；ee值=100%[α]D20=+68.4°,589nm,c=0.39g/100ml,氯仿1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.12(br.s,1H),8.11-8.04(m,2H),7.96(d,2H),7.90(dd,1H),7.04(d,2H),4.51(d,2H),4.14-4.04(m,1H),3.93(d,2H),3.87(dd,2H),3.37-3.28(部分隱藏,2H),3.23(t,1H),2.92-2.80(m,1H),2.55(s,3H),2.16-1.94(m,2H),1.93-1.82(m,1H),1.67(d,3H),1.56-1.44(m,1H),1.33(qd,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.07分鐘，m/z=506[M+H]+。實施例18(-)-(1RS,2SR,5RS)-2-[(6-甲基-4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-[4-(四氫-2H-吡喃-4-基甲氧基)苯甲醯基]環戊烷甲酸（對映體2）收率:63毫克；化學純度=100%；ee值=100%[α]D20=-63.7°,589nm,c=0.37g/100ml,氯仿1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.12(br.s,1H),8.12-8.04(m,2H),7.96(d,2H),7.90(dd,1H),7.04(d,2H),4.51(d,2H),4.14-4.04(m,1H),3.93(d,2H),3.87(dd,2H),3.37-3.28(部分隱藏,2H),3.22(t,1H),2.93-2.79(m,1H),2.55(s,3H),2.16-1.96(m,2H),1.94-1.81(m,1H),1.72-1.60(m,3H),1.56-1.43(m,1H),1.33(qd,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.07分鐘，m/z=506[M+H]+。實施例19(+/-)-(1RS,2SR,5RS)-2-[(6-甲基-4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-{4-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲醯基}環戊烷甲酸（外消旋物）在0℃下向142毫克（0.23毫摩爾）來自實施例17A的化合物在0.8毫升二氯甲烷中的溶液中加入0.4毫升（5.03毫摩爾）三氟乙酸。將該混合物在室溫下攪拌1小時，然後濃縮。殘留物藉助製備型HPLC（方法6）提純。獲得84毫克（理論值的71%，純度100%）標題化合物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.12(br.s,1H),8.11-8.04(m,2H),7.96(d,2H),7.90(dd,1H),7.04(d,2H),4.51(d,2H),4.15-4.05(m,3H),3.83(dd,2H),3.32-3.20(m,3H),2.93-2.80(m,1H),2.55(s,3H),2.16-2.04(m,1H),1.93-1.82(m,1H),1.76-1.57(m,6H),1.57-1.44(m,1H),1.30-1.12(m,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.14分鐘，m/z=520[M+H]+。對映體的分離:將69毫克來自實施例19的外消旋化合物溶解在10毫升乙醇/乙腈中並藉助在手性相上的製備型SFC分離成對映體（參見實施例20和21）[柱:PhenomenexAmyloseII,5µm,250mmx20mm；流速:100ml/min；檢測:210nm；注射體積:0.40ml；溫度:40℃；洗脫劑:70%二氧化碳/30%乙醇，運行時間18min]。實施例20(+)-(1RS,2SR,5RS)-2-[(6-甲基-4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-{4-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲醯基}環戊烷甲酸（對映體1）收率:22毫克；化學純度=100%；ee值=100%[α]D20=+50.6°,589nm,c=0.32g/100ml,氯仿1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.10(br.s,1H),8.12-8.04(m,2H),7.96(d,2H),7.90(d,1H),7.04(d,2H),4.51(d,2H),4.16-4.04(m,3H),3.83(dd,2H),3.32-3.19(m,部分隱藏,3H),2.93-2.79(m,1H),2.55(s,3H),2.17-2.04(m,1H),1.94-1.82(m,1H),1.76-1.58(m,6H),1.56-1.44(m,1H),1.29-1.11(m,2H).LC/MS(方法1,ESIpos):Rt=1.10分鐘，m/z=520[M+H]+。實施例21(-)-(1RS,2SR,5RS)-2-[(6-甲基-4-氧代-1,2,3-苯並三嗪-3(4H)-基)甲基]-5-{4-[2-(四氫-2H-吡喃-4-基)乙氧基]苯甲醯基}環戊烷甲酸（對映體2）收率:20毫克；化學純度=95%；ee值=100%[α]D20=-50.6°,589nm,c=0.31g/100ml,氯仿1H-NMR(400MHz,DMSO-d6):δ[ppm]=12.10(br.s,1H),8.11-8.04(m,2H),7.96(d,2H),7.90(dd,1H),7.04(d,2H),4.51(d,2H),4.15-4.04(m,3H),3.83(dd,2H),3.32-3.19(m,部分隱藏,3H),2.93-2.79(m,1H),2.55(s,3H),2.16-2.04(m,1H),1.94-1.81(m,1H),1.74-1.57(m,6H),1.56-1.44(m,1H),1.29-1.14(m,2H)。B.藥理效力的評估可以通過如本領域技術人員已知的體外和體內研究證實本發明的化合物的藥理活性。下列應用實施例描述了本發明的化合物的生物作用，但不將本發明限於這些實施例。縮寫和首字母縮略詞:APMA4-氨基苯基乙酸汞Brij®-35聚氧乙烯十二烷基醚BSA牛血清白蛋白CYP細胞色素P450Dap(或Dpa)l-2,3-二氨基丙酸（β-氨基-l-丙氨酸）DMSO二甲亞碸Dnp2,4-二硝基苯基EDTA乙二胺四乙酸HEPES2-[4-(2-羥乙基)哌嗪-1-基]乙磺酸HME人巨噬細胞彈性蛋白酶IC抑制濃度Mca(7-甲氧基香豆素-4-基)乙醯基MMP基質金屬肽酶MTP微量滴定板NADP+煙醯胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（氧化形式）NADPH煙醯胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（還原形式）Nval正纈氨酸PBS磷酸鹽緩衝的鹽溶液PEG聚乙二醇Tris三(羥甲基)氨基甲烷v/v（溶液的）體積/體積比w/w（溶液的）重量/重量比。B-1.體外HME抑制試驗在體外抑制試驗中確定本發明的化合物對HME（MMP-12）的活性強度。合適肽底物的HME介導的醯胺分解裂解在此導致螢光增強。螢光的信號強度與酶活性成正比。作為IC50值給出抑制一半的酶（50%螢光信號強度）時受試化合物的活性濃度。標準體外HME抑制試驗:在384孔微量滴定板中，在總共41微升試驗體積的試驗緩衝液（0.1MHEPESpH7.4,0.15MNaCl,0.03MCaCl2,0.004mMZnCl2,0.02MEDTA,0.005%Brij®）中，酶（0.5nMHME；R&DSystems,917-MP，根據製造商指示的自催化活化）和分子內猝滅的底物[5µMMca-Pro-Leu-Gly-Leu-Glu-Glu-Ala-Dap(Dnp)-NH2；Bachem,M-2670]在存在和不存在受試物質（作為在DMSO中的溶液）的情況下在37℃下培養2小時。測量試驗批次的螢光強度（激發323nm，發射393nm）。通過對照活性物質濃度繪製螢光強度來確定IC50值。高靈敏度體外HME抑制試驗:如果在上述標準HME抑制試驗中在強效受試物質的情況下產生亞納摩爾的IC值，使用改良試驗進行它們的更精確測定。在此，使用低十倍的酶濃度（最終濃度例如0.05nM），以實現該試驗的提高的靈敏度。相應地選擇更長的試驗培養時間（例如16小時）。在反應緩衝液中在血清白蛋白存在下的體外HME抑制試驗:這一試驗相當於上述標準HME抑制試驗，但使用改良反應緩衝液。這種反應緩衝液另外包含2%最終濃度(w/w)的牛血清白蛋白（BSA，無脂肪酸，A6003,Sigma-Aldrich），這相當於生理血清白蛋白含量的大約一半。這一改良試驗中的酶濃度略微提高（例如0.75nM），培養時間也略微提高（例如3小時）。下表1A對於本發明的各個實施例顯示來自標準或高靈敏度HME抑制試驗的IC50值（在一些情況下作為來自多個獨立的單個測定的平均值並四捨五入至兩個有效位數）：表1A:人巨噬細胞彈性蛋白酶（HME/hMMP-12）的抑制在下表1B中，對於本發明的代表性實施例，比較在不存在（參見表1A中的數據）和存在血清白蛋白的情況下來自HME抑制試驗的IC50值（在一些情況下作為來自多個獨立的單個測量的平均值，四捨五入至兩個有效位數）：表1B:在不存在(-)或存在(+)血清白蛋白(BSA)下的人巨噬細胞彈性蛋白酶（HME/hMMP-12）的抑制在比較表1B中所示的數據時發現，本發明的化合物甚至在血清白蛋白存在下也仍具有對HME的高抑制效力（通常在納摩爾範圍內）。這表明本發明的化合物與血漿成分的非特異性相互作用較不顯著，由此可預計到這些化合物在血液中的升高的「游離部分」，這對體內效力應具有有利作用。B-2.體外MMP抑制試驗同樣在體外抑制試驗中確定本發明的化合物對其它MMPs的活性強度（和因此它們的選擇性）。合適肽底物的MMP介導的醯胺分解裂解在此也導致螢光增強。螢光的信號強度與酶活性成正比。作為IC50值給出抑制一半的酶（50%螢光信號強度）時受試化合物的活性濃度。a)人MMPs:體外MMP-1抑制試驗:重組MMP-1(R&DSystems,901-MP)根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如2nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如10µM；R&DSystems,ES-001）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-1反應的進程。體外MMP-2抑制試驗:重組MMP-2(R&DSystems,902-MP)根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如2nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如10µM；R&DSystems,ES-001）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-2反應的進程。體外MMP-3抑制試驗:重組MMP-3(R&DSystems,513-MP)根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如2nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Arg-Pro-Lys-Pro-Val-Glu-Nval-Trp-Arg-Lys(Dnp)-NH2（最終濃度例如10µM；R&DSystems,ES-002）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-3反應的進程。體外MMP-7抑制試驗:重組MMP-7(R&DSystems,907-MP)根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如0.5nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如10µM；R&DSystems,ES-001）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-7反應的進程。體外MMP-8抑制試驗:重組MMP-8(R&DSystems,908-MP)根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如0.5nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如10µM；R&DSystems,ES-001）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-8反應的進程。體外MMP-9抑制試驗:重組MMP-9(R&DSystems,911-MP)根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如0.1nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如10µM；R&DSystems,ES-001）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-9反應的進程。體外MMP-10抑制試驗:重組MMP-10(R&DSystems,910-MP)根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如2nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Arg-Pro-Lys-Pro-Val-Glu-Nval-Trp-Arg-Lys(Dnp)-NH2（最終濃度例如10µM；R&DSystems,ES-002）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-10反應的進程。體外MMP-13抑制試驗:重組MMP-13(R&DSystems,511-MP)根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如0.1nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如10µM；R&DSystems,ES-001）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-13反應的進程。體外MMP-14抑制試驗:重組MMP-14(R&DSystems,918-MP)根據製造商的指示使用通過重組弗林蛋白酶(R&DSystems,1503-SE)而酶法活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如0.5nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如5µM；R&DSystems,ES-010）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-14反應的進程。體外MMP-16抑制試驗:重組MMP-16(R&DSystems,1785-MP)根據製造商的指示通過使用重組弗林蛋白酶(R&DSystems,1503-SE)而酶法活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如1nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如5µM；R&DSystems,ES-010）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-16反應的進程。下表2A和2B對於本發明的代表性實施例顯示來自這些試驗的關於人MMPs抑制的IC50值（在一些情況下作為來自多個獨立的單個測定的平均值並四捨五入至兩個有效位數）：表2A:人MMPs的抑制表2B:人MMPs的抑制在比較表1A和2A/2B中所示的抑制數據時發現，一般而言本發明的化合物，特別是其較活性的立體異構體具有對HME的極高抑制效力（通常在亞納摩爾範圍內）和同時對相關的人MMPs的高至極高的選擇性（通常1至3個量級或更高）。b)齧齒動物的MMPs:小鼠的體外MMP-2抑制試驗:小鼠的重組MMP-2（R&DSystems,924-MP）根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如0.1nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如10µM；R&DSystems,ES-001）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-2反應的進程。小鼠的體外MMP-3抑制試驗:小鼠的重組MMP-3（R&DSystems,548-MP）根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如0.5nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Arg-Pro-Lys-Pro-Val-Glu-Nval-Trp-Arg-Lys(Dnp)-NH2（最終濃度例如5µM；R&DSystems,ES-002）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-3反應的進程。小鼠的體外MMP-7抑制試驗:小鼠的重組MMP-7（R&DSystems,2967-MP）根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如0.5nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如5µM；R&DSystems,ES-010）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-7反應的進程。小鼠的體外MMP-8抑制試驗:小鼠的重組MMP-8（R&DSystems,2904-MP）根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如2nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如5µM；R&DSystems,ES-010）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-8反應的進程。小鼠的體外MMP-9抑制試驗:小鼠的重組MMP-9（R&DSystems,909-MP）根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如0.1nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如5µM；R&DSystems,ES-001）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-9反應的進程。小鼠的體外MMP-12抑制試驗:小鼠的重組MMP-12（R&DSystems,3467-MP）根據製造商的指示而自催化活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如1nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如5µM；R&DSystems,ES-010）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-12反應的進程。小鼠的高靈敏度體外MMP-12抑制試驗:如果在上述小鼠MMP-12抑制試驗中在強效受試物質的情況下產生亞納摩爾的IC值，使用改良試驗進行它們的更精確測定。在此，使用低十倍的酶濃度（最終濃度例如0.1nM），以實現該試驗的提高的靈敏度。相應地選擇更長的試驗培養時間（例如16小時）。大鼠的體外MMP-2抑制試驗:大鼠的重組MMP-2（R&DSystems,924-MP）根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如0.1nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如10µM；R&DSystems,ES-001）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-2反應的進程。大鼠的體外MMP-8抑制試驗:大鼠的重組MMP-8（R&DSystems,3245-MP）根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如2nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如5µM；R&DSystems,ES-010）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-8反應的進程。大鼠的體外MMP-9抑制試驗:小鼠的重組MMP-9（R&DSystems,5427-MM）根據製造商的指示通過使用APMA而化學活化。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升活化的酶（最終濃度例如0.1nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如5µM；R&DSystems,ES-001）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-9反應的進程。大鼠的體外MMP-12抑制試驗:大鼠的MMP-12（UniprotNP_446415.1；構成L96-V277）藉助大腸桿菌（BL21）中的pDEco7載體用附加的N-末端His-標籤和連續TEV裂解序列表達。由此重組表達的蛋白質形成細胞內不可溶的蛋白室（所謂的包涵體）。這在分離和在變性條件下劇烈洗滌後溶解（solubilisiert）。為此，將來自250毫升大腸桿菌培養物的包涵體顆粒成分置於120毫升體積的緩衝液A（50mMTrispH7.4,100mMNaCl,0.03mMZnCl2,10mMCaCl2,8M脲）中。通過在4-8℃下對著緩衝液B（50mMTrispH7.4,100mMNaCl,0.03mMZnCl2,10mMCaCl2）滲析各60毫升樣品數次，使該可溶蛋白質復性。在滲析後，將樣品離心（25000xg）。在上清液中以每250毫升大腸桿菌培養物3.7毫克的收率獲得摺疊蛋白質。由此獲得的蛋白質不經進一步提純操作或蛋白酶介導的裂解過程就具有酶活性。將1微升待分析的受試化合物（作為在DMSO中的溶液，合適濃度例如1nM至30µM）吸移到在白色384孔微量滴定板（MTP）中在反應緩衝液（50mMTris/HClpH7.5,10mMCaCl2,150mMNaCl,0.05%Brij®-35）中的24微升MMP-12蛋白質（最終濃度例如1nM）中。通過添加分子內猝滅的底物Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2（最終濃度例如5µM；R&DSystems,ES-001）啟動該酶促反應，以產生50微升的總試驗體積。通過經合適的時期（例如在32℃的溫度下經120分鐘）測量螢光強度（激發320nm，發射410nm）而測量MMP-12反應的進程。下表3對於本發明的代表性實施例顯示來自這些試驗的關於小鼠MMPs抑制的IC50值（在一些情況下作為來自多個獨立的單個測定的平均值並四捨五入至兩個有效位數）：表3:小鼠MMPs抑制在比較表3中所示的抑制數據時發現，一般而言本發明的化合物，特別是其較活性的立體異構體具有對小鼠MMP-12的極高抑制效力（通常在納摩爾或甚至亞納摩爾範圍內）和同時對相關的鼠MMPs的高選擇性（通常1至2個量級）。B-3.肺氣腫的動物模型小鼠、大鼠或侖鼠中的彈性蛋白酶誘發的肺氣腫是肺氣腫的普遍動物模型[TheFas/Fas-ligandpathwaydoesnotmediatetheapoptosisinelastase-inducedemphysemainmice,Sawada等人,Exp.LungRes.33,277-288(2007)]。動物接受豬胰彈性蛋白酶的經口氣管滴注。在滴注豬胰彈性蛋白酶當天開始用受試物質治療動物並持續3周的時間。在研究結束時，測定肺順應性並進行肺泡形態測量學。B-4.二氧化矽誘發的肺部炎症的動物模型在小鼠、大鼠或倉鼠中經口氣管給予二氧化矽造成肺部炎症[Involvementofleukotrienesinthepathogenesisofsilica-inducedpulmonaryfibrosisinmice,Shimbori等人,Exp.LungRes.36,292-301(2010)]。在滴注二氧化矽當天用受試物質治療動物。在24小時後，進行支氣管肺泡灌洗以測定細胞含量和生物標記。B-5.二氧化矽誘發的肺纖維化的動物模型小鼠、大鼠或倉鼠中的二氧化矽誘發的肺纖維化是肺纖維化的普遍動物模型[Involvementofleukotrienesinthepathogenesisofsilica-inducedpulmonaryfibrosisinmice,Shimbori等人,Exp.LungRes.36,292-301(2010)]。動物接受二氧化矽的經口氣管滴注。在滴注二氧化矽當天或治療性地在一周後開始用受試物質治療動物並持續6周的時間。在研究結束時，進行支氣管肺泡灌洗以測定細胞含量和生物標記，並進行肺纖維化的組織學評估。B-6.ATP誘發的肺部炎症的動物模型在小鼠的氣管內給予ATP（三磷酸腺苷）造成肺部炎症[Acutelunginflammationandventilator-inducedlunginjurycausedbyATPviatheP2Yreceptors:Anexperimentalstudy,Matsuyama等人,Respir.Res.9:79(2008)]。在滴注ATP當天用受試物質治療動物24小時的時間（通過強飼、通過添加到飼料或飲用水中、使用微量滲透泵、通過皮下或腹膜內注射或通過吸入）。在實驗結束時，進行支氣管肺泡灌洗以測定細胞含量和促炎標記。B-7.CYP抑制試驗在形成CYP特異性代謝產物的標準底物（見下文）存在下使用匯集的人肝微粒體作為酶來源，研究物質抑制人體中的CYP酶CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6和CYP3A4的能力。在受試化合物的六種不同濃度[2.8、5.6、8.3、16.7、20（或25）和50µM]下研究抑制作用，與不存在受試化合物的情況下標準底物的CYP特異性代謝產物形成的程度相比較，並計算相應的IC50值。始終共同培養特異性抑制單一的CYP同工型的標準抑制劑，以使不同系列之間的結果可比較。在工作站（Tecan,Genesis,Crailsheim,德國）上在受試化合物（作為潛在抑制劑）的各六種不同濃度存在下用人肝微粒體培養非那西丁、雙氯芬酸、甲苯磺丁脲、右美沙芬或咪達唑侖。標準培養混合物包含200微升總體積的1.3mMNADP+、3.3mMMgCl2x6H2O、3.3mM葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（0.4U/ml）和100mM磷酸鹽緩衝液（pH7.4）。優選將受試化合物溶解在乙腈中。96孔板在37℃下用匯集的人肝微粒體培養特定時間。通過添加100微升包含合適內標的乙腈終止該反應。通過離心除去沉澱的蛋白質，合併上清液並通過LC-MS/MS分析。B-8.用於測定代謝穩定性的肝細胞檢測通過在低濃度（優選低於或大約1µM）和在低細胞計數（優選1*106個細胞/毫升）下培養化合物以確保實驗中儘可能最大的線性動力學條件，測定受試化合物對肝細胞的代謝穩定性。在規定時間框架內取出來自培養溶液的七個樣品進行LC-MS分析，以測定各化合物的半衰期（即降解）。由這種半衰期計算不同的「清除率」參數（CL）和「Fmax」值（見下文）。CL和Fmax值是該化合物在肝細胞中的1期和2期代謝的量度。為了使有機溶劑對該培養混合物（Ansatz）中的酶的影響保持儘可能低，通常將其濃度限制為1%（乙腈）或0.1%（DMSO）。對於所有物種和種族，預計1.1*108個細胞/克肝的肝中的肝細胞計數。CL參數僅被視為粗略指導值，其計算基於顯著延伸到培養時間外（通常90分鐘）的半衰期。計算的參數和它們的含義是：Fmax充分攪拌[%]口服後的最大可能的生物利用度計算:(1-CL血液充分攪拌/QH)*100CL血液充分攪拌[L/(h*kg)]計算出的血液清除率(充分攪拌模型)計算:(QH*CL'固有)/(QH+CL'固有)CL'固有[ml/(min*kg)]肝（肝細胞）代謝化合物的最大能力（假設肝血流量不限速）計算:CL'固有,表觀*物種特異性肝細胞計數[1.1*108/克肝]*物種特異性肝重量[g/kg]CL'固有,表觀[ml/(min*mg)]標準化該消除常數，這是通過將其除以所用肝細胞的細胞計數x(x*106/ml)計算:kel[1/min]/(細胞計數[x*106]/培養體積[ml])(QH=物種特異性肝血流量)。下表4顯示，對於本發明的代表性實施例，在用大鼠肝細胞培養該化合物後來自這一檢測的CL和Fmax值（一些作為來自兩個或更多個獨立的單個測定的平均值）:表4:用大鼠肝細胞培養後計算出的血液清除率和生物利用度實施例編號CL血液[L/(h*kg)]Fmax[%]11.0275.720.4489.550.8779.280.2993.1110.392.9150.1696.1200.7781.8B-9.代謝研究為了測定本發明的化合物的代謝狀況，用各種動物物種（例如大鼠、犬）以及人類來源的肝微粒體或原發性新鮮肝細胞培養它們，以獲得和比較關於儘可能完整的肝I期和II期代謝和關於參與該代謝的酶的信息。以大約1-10µM的濃度培養本發明的化合物。為此，製備具有0.1-1mM濃度的該化合物在乙腈中的儲液，然後以1:100稀釋度吸移到培養混合物中。肝微粒體在37℃下在由1mMNADP+、10mM葡萄糖-6-磷酸和1單位葡萄糖-6-磷酸脫氫酶構成的含和不含NADPH生成體系的50mM磷酸鉀緩衝液pH7.4中培養。原發性肝細胞同樣在37℃下在William'sE培養基中的懸浮液中培養。在0-4小時培養時間後，用乙腈（最終濃度大約30%）終止該培養混合物，並在大約15000xg下離心出蛋白質。由此終止的樣品直接分析或儲存在-20℃直至分析。通過在紫外線和質譜檢測下的高效液相色譜法（HPLC-UV-MS/MS）進行分析。為此，培養樣品的上清液用合適C18反相柱和由乙腈和10mM甲酸銨水溶液或0.05%甲酸水溶液構成的可變洗脫劑混合物進行色譜分離。與質譜數據聯合的UV色譜圖用於代謝產物的識別、結構解析和定量估測以及用於本發明的化合物在培養混合物中的代謝降低的定量測定。B-10.體內藥代動力學研究將待檢查的物質以溶液形式（例如在少量添加DMSO的相應血漿中或在PEG/乙醇/水混合物中）靜脈給藥於大鼠、小鼠，並以溶液（例如在Solutol/乙醇/水或PEG/乙醇/水混合物中）或混懸劑（例如在纖基乙酸鈉中）形式在每種情況下經管飼口服給藥。在物質給藥後，在固定時間點從動物中採血。將其肝素化，然後通過離心從中獲得血漿。通過LC/MS-MS分析量化血漿中的該受試物質。從由此測定的血漿濃度/時間曲線上，使用內標和藉助核准的電腦程式計算藥代動力學參數，如AUC（該濃度/時間曲線下的面積）、Cmax（最大血漿濃度）、t1/2（半衰期）、VSS（分布體積）和CL（清除率），以及絕對和相對生物利用度F和Frel（i.v./p.o.比較或混懸劑與溶液劑在p.o.給藥後的比較）。B-11.溶解度的測定試驗程序:將受試物質溶解在DMSO中。從這種溶液中獲取等分試樣並引入PBS緩衝液pH6.5（DMSO含量:1%）中。將這種溶液/懸浮液在室溫下振搖24小時。在以114000g超離心30分鐘後，取出上清液，用乙腈/水8:2稀釋並通過LC-MSMS分析。藉助受試化合物在DMSO中的五點校準曲線實施量化。用於LC-MSMS量化的儀器:ABSciexTRIPLEQUAD4500；Agilent1260，具有主泵（G1312BInfinity）、脫氣器（G4225AInfinity）、柱恆溫器（G1316CInfinity）；CTCAnalyticsPAL注射系統THC-xt。HPLC方法:洗脫劑A:0.5毫升甲酸/升水，洗脫劑B:0.5毫升甲酸/升乙腈；梯度:0min90%A→0.5min5%A→0.84min5%A→0.85min90%A→1.22min90%A；流速:2.5ml/min；注射體積:15µl；柱:WatersOASISHLB,2.1x20mm,25µ；柱溫度:30℃；分流器（在MS之前）:1:20。MS方法:用於優化的流動注射分析(FIA)，用於量化的多反應監測(MRM)；洗脫劑A:0.5毫升甲酸/升水，洗脫劑B:0.5毫升甲酸/升乙腈；流速:0.25ml/min；注射體積:15µl；柱:不鏽鋼毛細管；毛細管溫度:25℃。下表5顯示由此在PBS緩衝液pH6.5中對代表性實施例測定的溶解度值:表5:在PBS緩衝液pH6.5中的溶解度實施例編號溶解度[毫克/升]152.2451.45338.16354.984.51033.411210122401480151001725018330191720425.2C.藥物組合物的實施例本發明的化合物可以如下轉化成藥物製品：片劑:組成:100毫克本發明的化合物、50毫克乳糖（一水合物）、50毫克玉米澱粉（天然）、10毫克聚乙烯基吡咯烷酮（PVP25）（BASF,Ludwigshafen,德國）和2毫克硬脂酸鎂。片劑重量212毫克，直徑8毫米，曲率半徑12毫米。製造:本發明的化合物、乳糖和澱粉的混合物用5%PVP水溶液（質量/質量）造粒。將顆粒在乾燥後與硬脂酸鎂混合5分鐘。在常規壓片機中壓制這種混合物（關於片劑樣式，見上文）。用於壓制的指導值是15kN的壓縮力。可口服的混懸劑:組成:1000毫克本發明的化合物、1000毫克乙醇（96%）、400毫克Rhodigel®（來自FMC,Pennsylvania,USA的黃原膠）和99克水。10毫升口服混懸劑相當於單劑100毫克本發明的化合物。製造:將Rhodigel懸浮在乙醇中；將本發明的化合物添加到該懸浮液中。在攪拌的同時加入水。攪拌大約6小時，直至Rhodigel溶脹完成。可口服的溶液劑:組成:500毫克本發明的化合物、2.5克聚山梨酯和97克聚乙二醇400。20克口服溶液劑相當於單劑100毫克本發明的化合物。製造:將本發明的化合物在攪拌下懸浮在聚乙二醇和聚山梨酯的混合物中。繼續攪拌操作直至本發明的化合物完全溶解。i.v.溶液劑:將本發明的化合物以低於飽和溶解度的濃度溶解在生理可接受的溶劑（例如等滲食鹽水溶液、5%葡萄糖溶液和/或30%PEG400溶液）中。無菌過濾該溶液並裝入無菌和無熱原的注射容器中。當前第1頁1 2 3