用於治療hiv的具有協同作用的組合物的製作方法

2023-12-05 18:20:51 1

專利名稱：：用於治療hiv的具有協同作用的組合物的製作方法用於治療HIV的具有協同作用的組合物本發明涉及具有協同作用的組合物，該組合物含有與CCR5受體結合的單克隆抗體和阻斷病毒進入CCR5表達細胞的低分子量別構拮抗劑。本發明還涉及通過共同給藥單克隆抗體和CCR5受體的低分子量別構拮抗劑來治療或預防HIV-1感染的方法。A隱M.Vandamme等人(抗病毒化學&化學療法(J/iftV/m/C/^附/W^在0le附o^mi/，力，19989:187-203)公開了人類HIV-1感染的當前HAART臨床療法，該療法包括至少三種藥物聯用。高效抗逆轉錄病毒治療(HAART)通常包括使用核苷逆轉錄酶抑制劑(NRTI)、非核苷逆轉錄酶抑制劑(NNRTI)和蛋白酶抑制劑(PI)的聯合療法。這些化合物抑制病毒複製必需的生化過程。對順應的首次藥物治療的患者來說，HAART能有效地降低死亡率以及降低HIV-1轉向AIDS的惡化。儘管HAART顯著改變HIV-1感染者的預後，但目前的治療仍遺留許多缺點，包括給藥方案非常複雜和有可能出現非常嚴重的副作用(A.Carr和D.A.Cooper,柳葉刀(丄""",)2000356(9239):1423-1430)。而且，這些多藥治療不能消除HIV-1，並且長期治療通常會導致多藥耐藥，因此限制它們在長期治療中的應用。開發更好地治療HIV-1的新藥物療法仍需要優先考慮。趨化因子是可溶免疫介質的細胞因子家族中的亞類，是通過G-蛋白-偶聯受體發揮其藥理作用的促炎症反應肽。CCR5受體是該家族中的一員。趨化因子是能夠將白細胞誘集到各種組織(這是對炎症和感染的重要反應)的白細胞趨化蛋白。"趨化因子，，是"趨化細胞因子"的縮寫。人類趨化因子包括大約50種包含50-120個胺基酸的在結構上同源的小分子蛋白質。(M.Baggiolini等人，iev./附附""</.199715:675-705)人類CCR5由352個胺基酸組成，具有含有用於與G-蛋白相聯的結構模體的細胞內C端，並配體-依賴性發信號(M.OppermannCW/"/w^grt""wg200416:1201-1210)。細胞外N端結構域促成高親和性趨化因子結合和與gpl20HIV-1蛋白的相互作用(T.Dragic普通病毒學雜誌(丄C7ew.K/ra/.)200182:1807-1814;C.Blanpain等人，生物化學雜誌f7.祝o/.C7^附.」1999274:34719-34727)。已表明天然激動劑RANTES(調節激活作用，並由正常T-細胞表達和分泌)的結合位點在N端結構域中，且也已表明HIV-1gp120最初與N端結構域相互作用，並還與ECL2相互作用(B.Lee等人，生物化學雜誌1999274:9617-26)。CCR5受體的調節劑在治療各種炎症疾病和狀況以及治療HIV-1和遺傳上相關的逆轉錄病毒引起的感染中可能是有用的。作為白細胞趨化因子，應的必需過程)中起到必不可少的作用。因為趨化因子和它們的受體對炎性、自身免疫性和感染性疾病的病理生理學是非常重要的，在調節(優選拮抗)趨化因子和它們的受體的活性方面具有活性的物質在這些疾病的治療中是有用的。CCR5受體在治療炎症和感染性疾病中是特別重要的。CCR5的天然配體是稱為MIP-la和MIP-lb的巨噬細胞炎症蛋白類(MIP)以及RANTES。HIV-1通過利用病毒包膜糖蛋白(Env)與CD4抗原的高親和作用感染單核細胞-巨噬細胞譜系和輔助T-細胞淋巴細胞。但是，CD4抗原看上去是進入細胞的必需但不充分的必要條件，為了感染細胞需要至少另一種表面蛋白(E.A.Berger等人，及ev./附附wwo/.199917:657-700)。隨後發現兩種趨化因子受體(CCR5或者CXCR4受體)是CD4的輔助受體(co-receptor)，它們是人類免疫缺陷病毒(HIV-1)感染細胞所必需的。從自然出現的無效等位基因CCR5口32強大的疾病改變作用的流行病學確認可推斷出CCR5在HIV-1發病機理中的關鍵作用。口32突變使CCR5基因中32位鹼基對缺失導致了稱為口32的截短的蛋白。相對於一般群體，n32./口32純合子在被暴露的/未感染的個體中是顯著普遍存在的，表明了CCR5在HIV-1細胞進入中的作用(R.Liu等人，細胞(CW/)199686(3):367畫377;M.Samson等人，自然(7Vam")1996382(6593):722國725)。HIV-1包膜蛋白包含兩個亞基表面亞基gpl20和跨膜亞基gp41。這兩個亞基是非共價聯合的，並組成同型三聚體(其組成HIV-1包膜)。每個gp41亞基包含兩個螺旋的七殘基重複序列區(HR1和HR2)以及一個C端的疏^K融合區。在HIV-1的gpl20上的CD4結合位點顯示與CD4分子在細胞表面相互作用，誘導gpl20的構象發生變化，產生或暴露出隱藏的CCR5(或CXCR4)結合位點，並發生構象變化，使gpl20與CCR5和/或CXCR4細胞-表面受體結合。這種二價相互作用使病毒膜與靶細胞膜接近，疏水融合區則能夠插入到靶細胞膜中。gp41的構象變化使靶細胞膜的外側小葉和病毒膜接觸，產生融合孔，含有基因組RNA的病毒核通過該孔進入細胞質。病毒融合和細胞進入是一個複雜的多步過程，每一步都為治療千預提供了可能性。這些步驟包括(/)CD40-gp120相互作用，(//)CCR5和/或CXCR-4相互作用和(沿)gp41介導的膜融合。這些步驟誘導的構象改變使化學治療幹預的其它靶點得以暴露。這些步驟中的每一步都為預防或減緩HIV-1感染的治療幹預提供了機會。設計的用來阻止gpl20/CD4相互作用的小分子(Q.Guo等人，/.K/ro/.200377:10528-63)和抗體(D.R.Kuritzkes等人，第10屆反轉錄病毒和機會致病菌感染會議(7一Om/e"""柳/"/yW屍"5^517n/e"/o/w)，2003年2月10-14日，Boston,MA.摘要13;K.A.Nagashima等人，丄/"/e".Z)/s.2001183:1121-25)已經被公開。CCR5的小分子拮抗劑和抗體在下面進行了討論。已經研發出CXCR4的小分子量拮抗劑(J,Blanco等人，Jwft附/cro6.C7^附W/iw.200046:1336-39)。恩夫韋地(enfuvirtide)(T20，ENF或FUZEON⑧)是對應於gp41的HR2結構域中的643-678殘基的36個胺基酸的肽。恩夫韋地與HR1結構域的三聚體的巻曲螺旋結合，並以顯性失活方式阻斷內源性六螺旋維管束形成，從而抑制病毒融合(J.M.Kilby等人，A^wE"g.丄19984(11):1302-1307)。恩夫韋地已被批准進入臨床使用。除了為CCR5調節劑在控制HIV-1感染方面提供可能性外，CCR5受體還是免疫功能的重要調節器，並且可以證明本發明的化合物在治療免疫系統紊亂方面是有價值的。可通過對需要這類治療的人給予有效量的本發明的CCR5拮抗劑化合物，治療實體器官移植排斥、移植物抗宿主病、關節炎、類風溼關節炎、炎性腸病、異位性皮炎、牛皮褲、哮喘、變態反應或多發性硬化症。本發明涉及用於治療HIV-1感染或者預防HIV-1感染或者治療AIDS或ARC的藥物組合物，該藥物組合物包含共同給藥的治療有效量的具有協同作用的組合，該具有協同作用的組合是分離的抗體(此抗體與CCR5受體結合，並且其中所述抗體的可變的重鏈胺基酸序列的CDR3選自SEQIDNO.9或IO)以及CCR5拮抗劑、病毒融合抑制劑或病毒吸附抑制劑的組合。圖1描述代表性的CCR5受體的低分子量拮抗劑的結構，所述拮抗劑與單克隆抗體RoAbl3和RoAbl4組合具有協同作用。圖2(A)描述利用Greco模型以響應面表示的在細胞-細胞融合中的RoAbl4和MVC之間的協同相互作用。從0到65nM連續地加入RoAbl4,從0到200nM連續地加入MVC。用這兩種抑制劑的劑量對百分協同作用(Percentsynergy)作圖。百分協同作用以10%增幅用不同色度表示。(B)在95%抑制水平上標繪的RoAbl4-MVC組合的等效線圖。圖3RoAbl3-MVC組合的劑量響應面。使用Greco(A)和Prichard(B)模型，將由每一組合劑量獲得的百分協同作用對RoAM3和MVC劑量作圖。圖4該圖闡明CCR5拮抗劑隨著時間進程與5mAb結合的作用。用50nMAK602、MVC、SCH-D或溶媒將CHO-CCR5細胞在室溫預孵育1h,然後用CCR5mAbROAbl4(A)、ROAbl3(B)、2D7(C)或45523(D)在0。C孵育不同時間，然後把細胞固定在2%多聚甲醛中，並用FACS(螢光活化細胞分選)分析。基於平均螢光強度(MFI)值繪製在不同拮抗劑存在下的每一mAb的時間進程曲線。圖5該圖闡明CCR5mAb對MVC與CHO-CCR5細胞結合的作用。用30jig/mL的CCR5mAb或PBS在室溫下將細胞(2x105/100fiL)預孵育1h,然後用26nM的SH-MVC孵育。在不同的結束時間點，洗滌細胞，用實施例2所描述的方法測定結合了3H-MVC的膜。將來自對照樣品的最大數值設定為100%結合，計算其他所有樣品的相對結合率，基於這些在每個時間點的相對結合率繪製時間進程曲線。本發明的一個實施方案提供用於治療HIV-1感染或者預防HIV-1感染或者治療AIDS或ARC的藥物組合物，該藥物組合物包含治療有效量的具有協同作用的組合，該具有協同作用的組合是分離的抗體(此抗體與CCR5受體結合，並且其中所述抗體的可變的重鏈胺基酸序列的CDR3是SEQIDNO.9或10)以及CCR5拮抗劑、病毒融合抑制劑或病毒吸附抑制劑的組合。本發明的另一個實施方案提供藥物組合物，該藥物組合物包含分離的抗體(此抗體與CCR5受體結合，並且其中所述抗體的可變的重鏈胺基酸序列的CDR3是SEQIDNO，9或IO)和至少一種選自恩夫韋地(enfuviritide)、TNX畫355、TAK-220、TAK-779、AK602(ONO4128)、SCH-C、SCH-D、MVC的其它抗病毒劑，和其中R1、R2、W和Ar如權利要求2所定義的式Ia-Id化合物的具有協同作用的組合。本發明的另一個實施方案提供藥物組合物，該藥物組合物包含分離的抗體(此抗體與CCR5受體結合，並且其中所述抗體的可變的重鏈氨基,列的CDR3是SEQIDNO.9或10)和至少一種在WO2005075484或本發明的另一個實施方案提供藥物組合物，該藥物組合物包含分離的抗體(此抗體與CCR5受體結合，並且其中所述抗體的可變的重鏈氨基*列的CDR3是SEQIDNO.9或10)和至少一種選自表1中的1-1到1-22的其它CCR5拮抗劑的具有協同作用的組合。本發明的另一個實施方案提供包含治療有效量的具有協同作用的組合的藥物組合物，所述具有協同作用的組合包含CCR5受體的分離的抗體以及CCR5拮抗劑、病毒融合抑制劑或病毒吸附抑制劑，在所述抗體中，重鏈和輕鏈的可變結構域是(i)SEQIDNO:1和SEQIDNO:2;(,7)SEQIDNO:3和SEQIDNO:4;(7)SEQIDNO:5和SEQIDNO:6或(/v)SEQIDNO:7和SEQIDNO:8。本發明的另一個實施方案提供包含治療有效量的具有協同作用的組合的藥物組合物，所述具有協同作用的組合包含CCR5受體的分離的抗體、以及至少一種選自TAK-220、TAK國779、AK602(ONO4128)、SCH-C、SCH-D、MVC的CCR5拮抗劑、或其中Ar、R1、R2和R3如權利要求2中所定義的根據式Ia-Id的化合物，在所述抗體中，重鏈和輕鏈的可變結構域是(i)SEQIDNO:1和SEQIDNO:2;SEQIDNO:3和SEQIDNO:4;(///)SEQIDNO:5和SEQIDNO:6;或(Zv)SEQIDNO:7和SEQIDNO:8。本發明的另一個實施方案提供包含治療有效量的具有協同作用的組合的藥物組合物，所述具有協同作用的組合包含CCR5受體的分離的抗體和至少一種在WO2005075484或WO2005121145中公開的其它CCR5拮抗劑，在所述抗體中，重鏈和輕鏈的可變結構域是(i)SEQIDNO:1和SEQIDNO:2;SEQIDNO:3和SEQIDNO:4;(7)SEQIDNO:5和SEQIDNO:6;或(/v)SEQIDNO:7和SEQIDNO:8。本發明的另一個實施方案提供包含治療有效量的具有協同作用的組合的藥物組合物，所述具有協同作用的組合包含CCR5受體的分離的抗體和恩夫韋地，在所述抗體中，重鏈和輕鏈的可變結構域是(i)SEQIDNO:1和SEQIDNO:2;(,7)SEQIDNO:3和SEQIDNO:4;(7)SEQIDNO:5和SEQIDNO:6;或(,V)SEQIDNO:7和SEQIDNO:8。本發明的另一個實施方案提供包含治療有效量的具有協同作用的組合的藥物組合物，所述具有協同作用的組合包含CCR5受體的分離的抗體和CD4抗體TNX-355，在所述CCR5受體的分離的抗體中，重鏈和輕鏈的可變結構域是(i)SEQIDNO:1和SEQIDNO:2;SEQIDNO:3和SEQIDNO:4;(///)SEQIDNO:5和SEQIDNO:6;或(/v)SEQIDNO:7和SEQIDNO:8。本發明的另一個實施方案提供包含治療有效量的具有協同作用的組合的藥物組合物，所述具有協同作用的組合是由選自mPz01.F3、mPx04.F6、mPz03.1C5或mPx02.1Cll的雜交瘤細胞系產生的分離的抗體和CCR5拮抗劑、病毒融合抑制劑或病毒吸附抑制劑的組合。本發明的另一個實施方案提供治療HIV-1感染或者預防HIV-1感染或者治療AIDS或ARC的方法，該方法包括對有其需要的宿主共同給予治療有效量的具有協同作用的組合，所述具有協同作用的組合是分離的抗體(此抗體與CCR5受體結合，並且其中所迷抗體的可變的重鏈胺基酸序列的CDR3是SEQIDNO.9或IO)和CCR5拮抗劑、病毒融合抑制劑或病毒吸附抑制劑的組合。本發明的另一個實施方案提供一種方法，該方法包括對有其需要的宿主共同給予治療有效量的具有協同作用的組合，所述具有協同作用的組合是分離的抗體(此抗體與CCR5受體結合，並且其中所述抗體的可變的重鏈胺基酸序列的CDR3是SEQIDNO.9或IO)與TAK-220、TAK-779、AK602(ONO4128)、SCH畫C、SCH-D、MVC和其中Ar、R1、議2和113如權利要求2中所定義的根據式la-Id的化合物的組合。本發明的另一個實施方案提供一種方法，該方法包括對有其需要的宿主共同給予治療有效量的具有協同作用的組合，所述具有協同作用的組合是分離的抗體(此抗體與CCR5受體結合，並且其中所述抗體的可變的重鏈胺基酸序列的CDR3是SEQIDNO.9或IO)和恩夫韋地的組合。本發明的另一個實施方案提供一種方法，該方法包括對有其需要的宿主共同給予治療有效量的具有協同作用的組合，所述具有協同作用的組合是分離的抗體(此抗體與CCR5受體結合，並且其中所述抗體的可變的重鏈胺基酸序列的CDR3是SEQIDNO.9或IO)和TNX-355的組合。本發明的另一個實施方案提供治療HIV-1感染或者預防HIV-1感染或者治療AIDS或ARC的方法，該方法包括對有其需要的宿主共同給予治療有效量的具有協同作用的組合，所述具有協同作用的組合是分離的抗體和CCR5拮抗劑、病毒融合抑制劑或病毒吸附抑制劑的組合，在所述的分離的抗體中，重鏈和輕鏈的可變結構域是(i)SEQIDNO:1和SEQIDNO:2;(,Y)SEQIDNO:3和SEQIDNO:4;(7)SEQIDNO:5和SEQIDNO:6;或(/v)SEQIDNO:7和SEQIDNO:8。本發明的另一個實施方案提供治療H1V-1感染或者預防HIV-1感染或者治療AIDS或ARC的方法，該方法包括對有其需要的宿主共同給予治療有效量的具有協同作用的組合，所述具有協同作用的組合是分離的抗體和CCR5拮抗劑、病毒融合抑制劑或病毒吸附抑制劑的組合，所述抗體是由選自mPz01.F3、mPx04.F6、mPz03.1C5或mPx02.1Cll的雜交瘤細胞系產生的。本發明的另一個實施方案提供治療HIV-1感染或者預防HIV-1感染或者治療AIDS或ARC的方法，該方法包括對有其需要的宿主共同給予治療有效量的具有協同作用的組合，所述具有協同作用的組合是分離的抗體、以及選自TAK-220、TAK-779、AK602(ONO4128)、SCH-C、SCH-D、MVC的CCR5拮抗劑和其中Ar、R1、R"和W如權利要求2中所定義的根據式la-Id的化合物的組合，所述分離的抗體是由選自mPz01.F3、mPx04.F6、mPz03.1C5或mPx02.1Cll的雜交瘤細胞系產生的。本發明的另一個實施方案提供治療HIV-1感染或者預防HIV-1感染或者治療AIDS或ARC的方法，該方法包括對有其需要的宿主共同給予治療有效量的具有協同作用的組合，所述具有協同作用的組合是分離的抗體和恩夫韋地的組合，所述抗體是由選自mPz01.F3、mPx04.F6、mPz03.1C5或mPx02.1Cll的雜交瘤細胞系產生的。本發明的另一個實施方案提供治療HIV-1感染或者預防HIV-1感染或者治療AIDS或ARC的方法，該方法包括對有其需要的宿主共同給予治療有效量的具有協同作用的組合，所述具有協同作用的組合是分離的抗體和TNX-335的組合，所述抗體是由選自mPz01.F3、mPx04.F6、mPz03.1C5或mPx02.1Cll的雜交瘤細胞系產生的。本文所用的術語"CCR5"是指與C-C類趨化因子成員相結合的趨化因子受體，並且其胺基酸序列包括Genbank登記號1705896提供的序列和相關的多態性結構。術語"趨化因子"是指能刺激白細胞移動的細胞因子。因為已經將CCR5受體鑑定為HIV-1的親巨核細胞(M-tropic)林的HIV-1細胞進入的CD4的輔助受體，所以它已成為化學療法的一個靶點。抑制HIV融合的傳統的小分子方法和大分子方法都已被公開。本文所用的術語"抗體，，(Ab)包括單克隆抗體(mAb)、多克隆抗體、具有足以顯示期望的生物活性的長度的抗體片段。在本文中術語"免疫球蛋白"(Ig)與"抗體"可互換使用。術語"分離的抗體"是指已被鑑定並從它的自然環境的組分或產生它的細胞中分離和/或回收的抗體。它的自然環境中的雜質組分是指能夠幹擾抗體的治療作用的物質，可能包括酶、激素和其它的蛋白質性或非蛋白質性溶質。IgG抗體的基本的4-鏈抗體單位是包含兩條相同的輕(L)鏈和兩條相同的重(H)鏈的異四聚體糖蛋白。IgG抗體的4-鏈單位一般大約為150000道爾頓。每條L鏈與H鏈通過一個二硫鍵連接，而根據H鏈的同種型，兩條H鏈之間通過一個或多個二硫鍵連接。每條H鏈和L鏈也由鏈內二硫鍵規則地隔開。根據它們的重鏈的恆定域(CH)的胺基酸序列，可以將免疫球蛋白分為不同種類或同種型。免疫球蛋白有5類IgA、IgD、IgE、IgG和IgM,其重鏈分別被指定為a、S、s、y和n。基於Ch序列和功能的相對較小變化，將y和a類進一步分為亞類，如人類表達下述亞類IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgAl和IgA2。每一條H鏈在N端有一個可交域(Vh)，對於每一a和Y鏈，其跟隨有3個恆定域(Ch)，對於p和s同種型則跟隨有4個恆定域。每條L鏈在N端有一個可變域(VO，在它的另一端有一個恆定域(CU。Vt和VH是對齊的，Ct和重鏈的第一個恆定域(CHl)是對齊的。根據它們恆定域的胺基酸序列，可將任何脊椎動物種類的L鏈分為兩種明顯不同的類型k和入。據認為特定的胺基酸殘基在輕鏈和重鏈的可變域之間形成接觸面。Vh和VL—起配對形成單獨的抗原結合位點。至於不同種類抗體的結構和性質，參見例如基礎和臨床免疫學(必^Zcflm/C7Zrt/ca//附附WMo/og力，第8版，DanielP.Stites，AbbaI.Terr和TristramG.Parslow(編者)，Appleton&Lange，Norwalk，Conn"1994年，第71頁和第6章。術語"可變的"指如下事實在抗體之間可變域的某些片斷的序列有^L大差別。V域調節抗原結合和決定特定抗體與特定抗原結合的特異性。然而可變性不是在可變域的110個胺基酸跨度間平均分布的。相反，可變區包含15-30個胺基酸的相對不變的段(stretches),稱為框架區(FRs)，其被稱為"高變區，，的更短的極度變化區分隔，每個高變區有9-12個胺基酸的長度。天然的重鏈和輕鏈的可變域各包括4個FRs，它們大部分採取p-摺疊構型，與3個高變區連接，高變區形成連接p-摺疊結構的環(loop)，在某些情況下形成P-摺疊結構的一部分。每條鏈的高變區通過FRs靠在一起，並和另一條鏈的高變區靠在一起，有助於抗體的抗原-結合位點的形成(見Kabat等人，具有免疫學重要性的蛋白序列(&《"ewc"/Vy^/"s,flgw￡6/附麵wo/.19941:365-372;M.V.PimmL^S"'.199455:PL45-PL49)。隨後研製出了部分人源化抗體，其中將鼠單克隆抗體的重鏈和輕鏈的6個CDR和有限數目的結構性胺基酸用重組技術移植到缺失CDR的人IgG框架上(P.T.Jones等人，AWwr1986321:522-525)。儘管該方法進一步降低或消除HAMA反應，然而在很多情況下，需要有重要的其它抗體設計方法，以重建原始的鼠抗體必需的特異性和親和性(J.D.Isaacs及/ie"附"to/(^v200140:724-738)。"人源化"形式的非人類(例如齧齒動物)抗體是包含衍生自非人類抗體的最小序列的嵌合抗體。通常，人源化抗體是人免疫球蛋白(受體(recipient)抗體)，其中受體的高變區的胺基酸殘基被來自非人類物種如小鼠、大鼠、兔子或非人類靈長類的高變區(供體抗體)的胺基酸殘基代替，其具有期望的抗體特異性、親和性和性能。在某些情況下，人免疫球蛋白的框架區(FR)殘基被相應的非人類殘基代替。而且，人源化抗體可以包含沒有在受體抗體或供體抗體中發現的殘基。這些修改將進一步優化抗體性能。一般來說，人源化抗體將包含基本上所有的、至少一個、通常兩個的可變域，其中所有的或基本上所有的高變環與非人類免疫球蛋白的高變環對應，並且所有的或基本上所有的FRs是人免疫球蛋白序列的FRs。人源化抗體還任選包含至少免疫球蛋白恆定區(Fc)、特別是人免疫球蛋白恆定區的一部分。更詳細的細節，見Jones等人，自然1986321:522-525;Riechmann等人，自然1988332:323-329;和Presta,C"/r.0p/".^m".祝o/.19922:593-596。當抗體旨在用於人類治療應用時，用於製造人源化抗體的人可變域(重鏈和輕鏈的)的選擇對於減少抗原性和HAMA反應是至關重要的。根據所謂的"最佳適配(best-fit)"方法，在已知人類可變域序列的全部信息庫中篩選齧齒動物抗體的可變域的序列。鑑定出與嗤齒動物的可變域序列最接近的人類V域序列，其中的人類框架區(FR)被人源化抗體接受(M.J.Sims等人，//附附wwo/.1993151:2296;Chothia等人，/,Afo/.1987196:901)。另一個方法採用特殊的框架區，該框架區衍生自特定亞類的輕鏈或重鏈的所有人類抗體的共有序列。一個替代方法是用良性的胺基酸序列代替鼠可變域的免疫原性表位，從而產生去免疫的可變域。將該去免疫的可變域以遺傳學方法連接至人IgG恆定域，產生去免疫的抗體。本文所用的術語"去免疫的抗體"是指體。去免疫的可變域通過重組技術連接至人Fc域。採用計算機化對接方法鑑定去免疫序列，以確定可結合到II類MHC複合體的抗體片斷。理想地在沒有改變對表位的特異性和親和性的情況下，進行胺基酸置換，以除去MHC;然而，可以進一步修改以優化這種結合。認為由這些沒有改變表位特異性的修改得到的去免疫抗體落在本發明的範圍內。本文所用的短語"天然效應子功能"指由免疫球蛋白介導的並由效應分子和抗體的Fc片斷結合引發的抗原消除過程。共同的效應子功能包括補體依賴性細胞毒性反應、吞噬作用和抗體依賴性細胞毒性反應。"完整的"抗體是包含抗原-結合位點和C^和至少重鏈恆定域CH1、CH2和CH3的抗體。恆定域可能是天然序列恆定域(例如人天然序列恆定域)或其胺基酸序列變體。"抗體片段"包含完整抗體的一部分，優選包含完整抗體的抗原結合區或可變區。抗體片段的實例包括Fab、Fab'、F(ab，)2和Fv片段。短語抗體的"功能片段或類似物"是具有與全長抗體相同性質的生物活性的化合物。例如，抗-IgE抗體的功能片段或類似物是以阻止或基本上減少IgE免疫球蛋白與高親和力受體FcsRI結合的能力的方式與IgE免疫球蛋白結合的功能片斷或類似物。用木瓜蛋白酶消化抗體產生兩個完全相同的抗原結合片段，稱為"Fab"片斷，和一個"Fc"殘基片段，一個反映易結晶能力的名稱。Fc片段包含由二硫鍵結合在一起的兩條重鏈的羧基端部分。抗體的效應子功能由Fc區的序列決定，Fc區也是被在某些類型細胞中發現的Fc受體(FcR)識別的片段。Fab片段包括整個輕鏈以及H鏈的可變區域(VH)，和重鏈的第一個恆定域(Ch1)。每一個Fab片段對於抗原結合是單價的，即它只有一個抗原結合位點。用胃蛋白酶處理抗體生成一個單獨的大的F(ab')2片段，其大致對應於兩個二硫鍵連接的Fab片段，具有雙價抗原結合活性，並仍能交聯抗原。Fab'片段與Fab片段不同，其在CH1域的羧基端具有另外的少量殘基，包括一個或多個來自抗體鉸鏈區的半胱氨酸。Fab'-SH在本文中是對其恆定域的半胱氨酸殘基帶有游離的巰基基團的Fab'的稱呼。F(ab，)2抗體片段最初是由在它們之間具有鉸鏈半胱氨酸的一對Fab'片段產生的。抗體片斷的其它化學偶聯也都是公知的。術語"胺基酸序列變體"是指與天然序列多肽的胺基酸序列在某種程度上不同的多肽。氨基M列變體可在天然胺基酸序列的氨基*列的某些位置發生替換、缺失和/或插入。"同源性"定義為經過序列比對和引入空位後在氨基^列變體中相同的殘基的百分比，必要時，達到最大同源百分比。用於比對的方法和電腦程式為本領域公知的。很容易以實驗測定不改變本發明的特異性或協同性質的序列變體，並且其落在本發明的範圍之內。本文所用的術語"表位"指能夠與抗體特異性結合的蛋白決定簇。表位一般包含分子的化學活性表面基團如胺基酸或糖側鏈，並且一般具有特異的三維結構特性和特異的電荷特性。構象和非構象表位區別在於前者(而不是後者)在變性溶劑存在時消失。本文所用的術語"協同作用"或"具有協同作用的"意為當化合物聯合使用時的組合效果比所述化合物單獨使用時的相加效果更好。測定協同作用存在的定量方法在下面進行描述。對CCR5和CXCR4輔助受體在HIV-1發病機理中的作用的認識為千預提供了新靶點，並且鑑別趨化因子或gp120結合抑制劑的計劃已啟動。病毒包膜蛋白與CD4及趨化因子輔助受體之間的相互作用是複雜的，並為化療幹預提供多種可能。鑑別趨化因子調節劑的成果已被綜述過(F.Shaheen和R.G.Collman，0/7/"./"/e"2004，17:7-16;W.Kazmierski等人C7ie附.200311:2663-76;L.Agrawal和G.Alkhatib，五;c/;e"T7^f.T^geto20015(3):303-326;具有4-氨基哌啶骨架的趨化因子CCR5拮抗劑(C/re/wo/r/weCC/5/wcw/^mri"g4-fl/Mi>Y>enV//wesrflj5^/fi0，￡"jc/eWO/^Vi.7Trer.Pa,cwto200313(9):1469-1473;M.A.Cascieri和M.S.Springer,Op/".C7^/m.20004:420-426，和其中的引用文獻)。小分子CCR5拮抗劑和大分子抗體二者都被研究過。代表性的低分子量CCR5拮抗劑如圖1中所述，細胞-細胞融合實驗中的ICso值列於表2中。在CCF實驗系統中所有的CCR5拮抗劑都表現出低nM或不足nM濃度的IC50(0，4-5nM)。低分子量CCR5拮抗劑武田公司(Takeda)鑑定出TAK-779為一種潛在的CCR5拮抗劑。(M.Shiraishi等人，丄C7^附.200043(10):2049-2063;M.Babba等人iVoc.爿ow/t/5J199996:5698-5703)和TAK-220(C.Tremblay等人200549(8):3483-3485)。TAK-220已表現出與TM6中的Asn252和L225，以及TM4中的G163和TM5中的1198相互作用(M.Nishikawa等人，J/iriw/mA.々ewfC/re附C/rer.200549(11):4708-4715)。TAK-779結合到丙氨酸的突變體的分析表明位於TM1、2、3和7中的殘基L33、Y37、T82、W86、Y108和T123是與該拮抗劑相互作用的重要殘基(T.Drajic等人爿carf.f/514200097(10):5639-5644)。WO0039125(D.R.Armour等人)和WO0190106(M.Perros等人)公開了為有效的選擇性的CCR5拮抗劑的雜環化合物。輝瑞(Pfizer)的UK-427，857(MVC)已進入III期臨床試驗，並對HIV-1分離林和實驗林均表J見出活小生(P.Dorr等人，/4wri/mcTo6.C7^/wo幼er.200549(11):4721-4732;A.Wood和D.Armour,Oie附.200543:239-271;C.Watson等人，Mt/.屍/iflr附.200567(4):1268-1282;M.J.Macartney等人，第43屆關於抗微生物劑和化療的交叉科學會議(W"/wfersd.Cow//4w&Vmcro6.爿gewtoCAe/MO狄er)，2003年9月14-17日，摘要H-875)。先靈公司(Schering)已使Sch-351125(SCH-C)進入I/II期臨床研究，又報導了使更有效的後續化合物Sch-417690(SCH-D)進入I期臨床研究(S.W.McCrombie等人，WO00066559;B.M.Baroudy等人，WO00066558;A.Palani等人，/C7^附.200144(21):3339畫3342;J.R.Tagat等人，/.A/^/.C7^附.200144(21):3343陽3346;J.A.Est6，/wve"20023(3):379-383;J.M.Stmzki等人，iV",.爿c^w/200198:12718-12723)。對丙氨酸突變體和SCHC的模型研究表明活性取決於跨膜螺旋l、2、3、5和7中的殘基，特別是L33和Y37(TM1)、D76和W86(TM2)、F113(TM3)、1198(TM5)和E283(TM6)(F.Tsamis等人丄F,w/.200377(9):5201-5208)0formulaseeoriginaldocumentpage21默克(Merck)已公開對CCR5受體有糹艮好的親和性並具有有效的抗HIV-1活性的化合物(2S)-2-(3-氯苯基)-l-N-(甲基)-N-(苯磺醯基)氨基l-4-[螺(2，3-二氫苯並噻吩-3，4'-哌咬-1，-基)丁烷S-氧化物(l)和相關衍生物、三取代的吡咯烷類化合物2和取代的哌啶類化合物3的製備(P.E.Finke等人，M^/.C7^附.厶e汰，200111:265-270;P.E.Finke等人，C7ie附.le汰，200111:2469-2475;P.E.Finke等人，祝w^.C7ie附.le汰，200111:2475-2479;J.J.Hale等人，3fW.CAe附.le汰，200111:2741-22745;D.Kim等人，J,Wrg.AfW.C7ie附.k汰，200111:3099-3102)C.L.Lynch等人，Org丄e汰20035:2473詞2475;R.S.Veazey等人./.2003198:1551-1562.)。熊本大學(KumamotoUniversity)啟動的項目鑑別出ONO-4128、E醫913、AK602(K.Maeda等人./.祝o/.C7^附.2001276:35194-35200;H.Nakata等人./.Ki>o/.2卯579(4):2087-2096)在WO00/166525、WO00/187839、WO02/076948、WO02/076948、WO02/079156、WO2002070749、WO2003080574、WO2003042178、WO2004056773、WO2004018425中，阿斯利康(AstraZeneca)公開了為CCR5拮抗劑的4-氨基哌咬化合物。如本文所公開，可以在具有協同作用的組合物中與抗體一起使用的或用於治療HIV-1感染的其它代表性的CCR5拮抗劑包括根據式Ia-Id所述的化合物和其藥學上可接受的鹽,formulaseeoriginaldocumentpage22其中Ar是苯基、3-氟苯基、3-氯苯基或3,5-二氟苯基；R'選自Me、、，iN、、，i>(a)R，其中Ra是氬、-OH、-NMeCH2CONH2或OCMe2CONH2;Me(b)Rb，其中Rb是氫或氰基;MeMeO和(d)Me"N"l，其中RC是&三氟甲基峻溱-S-基、嘧啶巧-基、5一三氟甲基-吡啶-2-基；W選自環戊基、2-羧基-環戊基、3-氧代-環戊基、3-氧代-環己基、3-氧代-環丁基、3-氧雜-環戊基、2-氧雜-環戊基、4，4-二氟環己基、3，3-二氟環丁基、N-乙醯基-氮雜環丁烷-3-基、N-曱磺醯基-氮雜環丁烷-3-基和甲氧基羰基；W選自環己基曱基、四氫-吡喃-4-基甲基；4-甲氧基-環己基、4-氟-苄基、4，4-二氟環己基-曱基、2-嗎啉-4-基-乙基和N-Cw烷氧基羰基-哌啶鬥基甲基。根據式Ia和Ib所述的化合物已被S.MGabriel和D.M.Rotstein在2005年8月18日公布的WO2005075484中公開。根據式Ic和Id所述的化合物已被E.K.Lee等人在2005年12月22日公布的WO2005121145中公開。本文公開的組合物和方法可用本文公開的化合物來實施。根據式Ia-Id所述的一些具體化合物在表l中列出。通常來說，在本申請中所用的名稱是由AUTONOMv.4.0(用於產生IUPAC系統命名的Beilstein研究所的計算機化系統)來命名的。如果在所描繪的結構和該結構所給的命名之間有偏差的話，則所描繪的結構將佔有更多的確定權重。本領域的技術人員將認識到，已被製備的具有相似結構的許多其它類似物和它們在包含抗CCR5抗體的組合物中的用途在本發明的範圍之內，因此該表不是用於限制的。CCR5拮抗劑的尋找將是研究的活躍領域，新的結構必將^皮發現，其將與本文所述的mAb形成具有協同作用的組合。本領域的技術人員將理解，可不經過度的實驗即可測定協同作用水平，並且這樣的組合落在本文權利要求的範圍內。表ltableseeoriginaldocumentpage231-82-羥基-環戊烷曱酸[(S)-3-[5-(4，6-二曱基-嗜啶-5-羰基)-六氬-吡咯並[3，4-cl吡咯-2-基-l-(3-^-苯基)-丙基-醯胺；帶有三l乙酸的化合物1-9環戊烷甲酸[(S)-3-[5-(3，5-二甲基-l-嘧啶-5-基-l好-吡唑-4-羰基)-六氫-吡咯並[3，4-cl吡咯-2-基H-(3-氟-苯基)-丙基卜醯胺1-103-氧代-環丁烷甲酸[(S)-3-[5-(6-氰基-2，4-二甲基-吡啶-3-羰基)-六氫-吡咯並[3，4-c]吡咯-2-基-l-(3-氟-苯基)-丙基-醯胺I國ll5-丁基-9國[1-(4，6-二曱基-嘧啶-5-羰基)-4-曱基-哌啶-4-基]-3-[2-(四氫-吡喃-4-基)-乙基-l-氧雜-3，9-二氮雜-螺5.5十一畫2隱酮1-123，3-二氟-環丁烷甲酸{(S)-l-苯基-3-[5-(1，2，4-三甲基-6-氧代-1，6-二氫-吡啶-3-羰基)-六氫-吡咯並[3，4^吡咯-2-基-丙基}-醯胺1-13l國乙醯基-氮雜環丁烷-3-甲酸((S)-3-[5-(6-氰基-2，4-二甲基畫吡啶-3-羰基)-六氫-吡咯並[3，4-c吡咯-2-基-l-苯基-丙基}-醯胺1-141-曱磺醯基-氮雜環丁烷-3-甲酸{(8)-3-[5-(4，6-二曱基-嘧啶-5-羰基)-六氫-吡咯並[3，4<吡咯-2-基-1-苯基-丙基}-醯胺；帶有三氟乙酸的化合物1-154-丁基-8-[l-(4，6-二甲基-嘧啶-5-羰基)-4-曱基-哌啶-4-基l-3-(四氫-吡喃-4-基曱基)-l-氧雜-3，8-二氮雜-螺[4.5癸-2-酮1-165-丁基-9-[1-(4，6-二甲基-嘧啶-5-羰基)-4-甲基-哌啶-4-基-3-(2-嗎啉-4-基-乙基)-l-氧雜-3，9-二氮雜-螺[5，5j十一-2-酮1-175-丁基-9-[1-(4，6-二曱基-嘧啶-5-羰基)-4-甲基-哌啶-4-基卜3-(4-氟一節基)小氧雜-3，9-二氮雜-螺[5.5十一-2-酮118環戊烷甲酸{(S)-3-[5墨(2，6畫二曱基-苯曱醯基)-六氫-吡咯並[3，4-c]吡咯-2-基l-l-苯基-丙基卜醯胺1-191-乙醯基-哌啶-4-曱酸(3-氯-4-曱基-苯基)-{3-[5-(2，6-二曱基-苯甲醯基)-六氫-吡咯並[3，4-c吡咯-2-基-丙基卜醯胺1-20l-(8-[(S)-3-乙醯M-3-(3-氟-苯基)-丙基l-8-氮雜-二環[3.2.1I辛-3-基卜2-甲基-l，4，6，7-四氫-咪唑並[4，5-c吡啶-5-甲酸甲酯1-21N-{(S)-l-(3-氟-苯基)-3-[3-(5-異丁醯基-2-曱基-4，5，6，7-四氫-咪唑鬥[4，5-c吡啶-3-基)-8-氮雜-二環[3.2.1辛-8-基-丙基)-乙醯胺1-224-((S)-5-丁基-9-[l-(4，6-二曱基-嘧啶-5-羰基)-4-曱基-哌啶-4-基_2-氧代-1-氧雜-3，9-二氮雜-螺[5.5十一-3-基甲基}-哌啶-1-甲酸曱酯融合抑制劑恩夫韋地(FUZEON⑧，T-20)是獨特的融合抑制劑，其在病毒殼蛋白與CD4和CCR5結合後與病毒包膜蛋白gp41結合，並幹擾病毒包膜蛋白與宿主細胞膜的連接。恩夫韋地是對應於HIV-1gpl60的殘基643-678的36個胺基酸的多肽。恩夫韋地選擇性地抑制HIV-1細胞融合，而不能抑制HIV-2或猴免疫缺陷病毒的細胞融合。恩夫韋地對耐藥病毒林仍有效，所述耐藥病毒林對其它抗逆轉錄病毒藥物耐藥(T.Matthews等人.7VatZev.Z)nigi)/sam20043:215-225)。吸附抑制劑TNX-355是人源化的IgG4單克隆抗體，它與CD4的結構域2上的構象表位結合(L.C.Burkly等人，/./附附朋o/.1992149:1779-87)。在由gpl20/CD4結合誘導的構象變化後，TNX-355表位變得易於接近，因此與沒有HIV-1的免疫細胞不發生相互作用。TNX-355可以抑制CCR5-、CXCR4-和雙重/混合嗜性的HIV-1抹的病毒吸附(E.Godofsky等人，人源化的抗CD4單克隆抗體TNX-355對CCR5、CXCR4和雙重嗜性的分離林的體外活性以及與恩夫韋地的協同作用(/"F/"oActivityoftheHumanizedAnti-CD4MonoclonalAntibody,TNX-355,againstCCR5,CXCR4，andDual-TropicIsolatesandSynergywithEnfuvirtide),第45屆關於抗微生物劑和化療的交叉科學年會(45^^ww"fl///^/wZew"CW"/emiceoJw,/附/m6Zfl/々ewte朋cfC^ewo幼em/^，ICAAC)，2005年12月16-19日，WashingtonDC.摘要#3844;D.Norris等人，TNX-355與最佳的背景方案(OBR)聯合在有HIV-治療經歷的患者中表現出比單獨應用OBR更好的抗病毒活性(TNX-355inCombinationwithOptimizedBackgroundRegime(OBR)ExhibitsGreaterAntiviralActivitythanOBRAloneinHIV-TreatmentExperiencedPatients),第45屆關於抗微生物劑和化療的交叉科學年會(ICAAC),2005年12月16-19日，WashingtonDC.摘要#4020)。抗-CCR5抗體包括抗體、可溶性受體和其生物活性片段的大分子療法已經成為常規低分子量藥物的日益重要的補充(O.H.Brekke和I.SandlieA^w"/ev/ewZ)rwgZ)/腳v.20032:52-62;A.M.Reichert胸訓腸tecA.200119:819-821)。具有高度特異性和親和性的抗體能夠靶向於病毒細胞融合必需的細胞外蛋白。CD4、CCR5和CXCR4已成為抑制病毒融合的抗體的靼點。V.Roschke等人(特異性拮抗CCR5和阻斷HIV-1進入的一組新的人源化抗體的鑑定(CharacterizationofaPanelofNovelHumanMonoclonalAntibodiesthatSpecificallyAntagonizeCCR5andBlockHIV畫lEntry),第44屆關於抗微生物劑和化療的交叉科學年會(ICAAC)，2004年10月29日，WashingtonDC.摘要#2871)已經公開了與CCR5受體結合併抑制HIV進入表達CCR5受體的細胞的單克隆抗體。L.Wu和C.RMacKay在2001年5月30日提交的11.8.序列號09/870，932中公開了單克隆抗體5€7和207，它們以能夠抑制細胞的HIV感染的方式與CCR5受體結合。W.C.Olsen等人(丄F/m/.199973(5):4145-4155)公開了能夠抑制(i)HIV-l細胞進入、(ii)HIV-l包膜-介導的膜融合、(iii)gpl20與CCR5結合以及(iv)CC-趨化因子活性的單克隆抗體。在抗CCR5抗體Pro140和低分子量CCR5拮抗劑之間的協同作用已被Murga等人公開(第三屆IAS關於發病機理和治療會議(3rdIASConferenceonHIVPathogenesisandTreatment),摘要TuOa.02.06.2005年7月24-27日，RiodeJaneiro,Brazil)。已分離的抑制HIV-1細胞進入的抗-CCR5抗體包括在2005年4月1日提交的EP05007138.0中公開的RoAbl3(Pz01.F3)、RoAbl4(Px02.1Cll)、RoAbl5(Pz03.1C5)、RoAbl6(F3.1H12.2E5),將該文獻以其全部內容在此引入作為參考。所迷細胞系已於2004年8月18曰保藏在DeutscheSammlung徹MikroorganismenundZellkulturenGmbH(DMSZ;德國微生物和細胞培養物保藏中心(GermanCollectionofMicroorganismsandCellCultures)),保藏號為mPx01.F3(DSMACC2681)、mPz02.1Cll(DSMACC2682)、mPz03.1C5(DDSMACC2683)和mPz04.1F6(DSMACC2684)。保藏是根據為專利申請程序的微生物保藏取得國際承認的布達佩斯條約(BudapestTreatyontheInternationalRecognitionoftheDepositofMicroorganismsforthePurposeofPatentProcedure)(布達佩斯條約)的條款和其規定進行的。這確保自保藏之日起活的培養物可保存30年。一旦相關的美國專利授權或一旦任何美國或外國專利申請向公眾披露後，不論哪種情況先發生，所述有機體對公眾而言將是可獲得的。鼠抗人CCR5單克隆抗體(mAb)的產生多克隆抗體優選在動物中通過多次皮下(sc)或腹膜內(ip)注射相關抗原和佐劑獲取。免疫學上的佐劑是能夠提高對抗原的特異性免疫應答的物質。佐劑有不同的作用機理，應根據給藥途徑和具體疫苗所需的免疫應答的類型(抗體、細胞介導的或黏膜免疫)來選擇使用。抗-CCR5抗體通過用具有高水平CCR5表達的CHO或L1.2細胞以及弗氏完全佐劑(FCA)使小鼠免疫而引出。最初使用1(TCCR5表達細胞和FCA對動物免疫接種。隨後，以4-6周間隔用CCR5表達細胞和弗氏不完全佐劑加強免疫。單克隆抗體可以用Kohler等人首次描述的雜交瘤方法(自然19"256:495)製得，或也可以用重組DNA方法製得。抗體的重組生產是本領域公知的，並描述在例如下列綜述文章中S.C.Makrides屍卬te/w199917:183-202;S.Geisse等人，/VW"Ti19968:271-282;R.J.Kaufman,Afo/.200016:151-161;R.G.Werner,Z)mgJ"199848:870-880。從免疫小鼠中獲得脾臟，用適當的融合劑如聚乙二醇使其與骨髓瘤細胞系融合，形成雜交瘤細胞(J.W.Goding.單克隆抗體原理與實踐(InMonoclonalAntibodies:PrinciplesandPractice),第二版；學術出版社(AcademicPress):紐約，1986，第59-103頁)。這樣製備的雜交瘤細胞被接種在適當的培養基中並生長，所述培養基優選含有一種或多種抑制未融合的、親代骨髓瘤細胞(也稱為融合夥伴(fusionpartner))的生長或存活的物質。本發明的抗體可以用重組DNA技術很方便地製備。用常規方法(如使用能夠特異性地與鼠抗體的編碼重鏈和輕鏈的基因結合的寡核苷酸探針)可很容易地將DNA編碼的單克隆抗體分離和測序。雜交瘤細胞可作為這樣的DNA的優選來源。一旦分離出來，可將DNA置於表達載體中，然後轉染到不另外產生抗體蛋白質的宿主細胞如大腸桿菌(五.co/0細胞、猴(simian)COS細胞、中國倉鼠卵巢(CHO)細胞或骨髓瘤細胞中，從而在重組宿主細胞中合成單克隆抗體。關於編碼抗體的DNA細菌中的重組表達的綜述文章包括A.Skerra，Cwr./附附wwo/.19935:256-262和Pluckthun，/顯,/.版1992130:151-188。可以修飾編碼抗體的DNA以產生嵌合或融合抗體多肽，這是如下實現的例如，將人的重鏈和輕鏈恆定域(CH和Cl)序列(即人源化抗體或去免疫抗體)取代同源的鼠序列(美國專利號4816567;和Morrison爿cm/.Sd.CAS^，198481:6851)，或使免疫球蛋白編碼序列與非免疫球蛋白多肽(異源性多肽)的全部或部分編碼序列融合。非免疫球蛋白多肽序列可代替抗體的恆定域。抗體的特異性存在於互補定義區(即抗體F化部分的高變區)。可以在不改變表位的選擇性的情況下改變抗體分子的其他部分，經常需要通過修改抗體分子的其他部分來改變或消除它的藥效學性質。已經發現了很多可減少來自包括嵌合抗體、人源化抗體和去免疫抗體的抗體分子的非抗原結合部分的副作用的技術。非人類衍生的抗體的抗原性的減少將允許多次給藥和使延長血清半衰期的技術得以實現。可以在不脫離本發明的精神的情況下，應用前面提到的提高抗-CCR5抗體的安全性的方法。具有RoAbl3-RoAb16的CDR、但經修飾以消除不良反應的抗體在本發明的範圍之內。本領域的技術人員將理解，包含全長抗體的部分的抗體片斷也可具有本文所描述的性質。該抗體片斷將包含其可變區或至少其抗原結合部分，並保留抑制病毒細胞融合的足夠的大小和功能位點，其與全長抗體以相同的方式作用。識別CCR5受體的胞外片斷的單克隆抗體和低分子量別構的CCR5拮抗劑兩者在不同的評價病毒進入實驗中已被證明能抑制病毒的細胞融合。單克隆抗體RoAbl3和RoAbl4的表位位於氨基端和ECL2,二者皆為有效的病毒進入抑制劑。兩種商業上可得的其它抗體2D7和45523分別表現出有效的(ICso=4.3nM)和弱的(ICs=23nM)活性。化合物4-6為羅氏(RochePaloAlto)鑑定的CCR5拮抗劑。SCH-D、MVC和AK-602是作為病毒融合抑制劑開發的其他CCR5拮抗劑。(見圖1)表2tableseeoriginaldocumentpage29CCR5和CXCR4作為CD4的對於HIV-1細胞融合而言的輔助受體的闡明為抗HIV-1化學療法提供了新靶點，所述化學療法可以包括在抗HIV-1組合中。抗體和CCR5拮抗劑之間的協同作用能增強它們的效用。令人驚訝地是，目前已發現當與CCR5拮抗劑、病毒進入抑制劑或病毒吸附抑制劑一起給藥時，抗體RoAbl3-RoAbl6表現出對HIV-l細胞融合的有效的協同抑制作用。對所有被測定的各種別構CCR5拮抗劑都觀察到這種協同作用。在單克隆抗體和融合抑制劑恩夫韋地(enfuvitide，T-20)之間也發現了協同作用。本領域的技術人員將理解，本文所解決的問題是鑑別抗體以及允許所述抗體和CCR5拮抗劑、病毒進入抑制劑或病毒吸附抑制劑共存結合的表位。協同作用已證明抗逆轉錄病毒藥物的聯合用藥是控制HIV-1複製的一種有效的策略。隨著AZT在HIV-1化療中的應用被關注後，很明顯對單一療法的耐受將4艮快出現。人們發現HIV-1逆轉錄病毒抑制劑的聯用是有優勢的，並且隨著蛋白酶抑制劑的出現，兩種或三種藥物的組合已被常規使用。聯用抗逆轉錄病毒藥物的理論包括數種潛在的益處，包括同時靶向於幾個不同靼點，這能夠阻礙耐藥林的形成，並可能開發出具有增強的效用和降低的毒性的具有協同作用的組合，因此可以減少每種必須給藥的藥物的量。但是，簡單的藥物組合不必然產生協同作用。能影響藥物相互作用的幾種因素包括藥代動力學原因、結合親和性和對特定靶點的潛在竟爭。藥物相互作用分析對於體外細胞-細胞融合研究而言，需考慮CCR5抗體與CCR5拮抗劑組合的增強效力(協同作用)或降低效力(拮抗作用)的可能性。體外藥物相互作用評估的模型和方法已被描述和綜述(M.C.Berenbaum/77^^.5^/.1985114:413-431，屍/ianMfl"/./^v.198941:93-141;W.R.Greco等人屍A"/7wao/.Wev.199547:331-385;M,NPritchard和C.ShipmanJr.紐199014:181-205;J.Suhnel顛流T仏199013:23-39.)。協同作用和拮抗作用定義為與兩種藥物之間沒有相互作用的假設的偏差。Lowe相加模型(LA)理論和Bliss獨立模型(BI)理論是用於參照模型的兩個主要理論，它們遵循兩種不同加和性的藥物相互作用理論。基於LA理論的藥物相互作用模型假定藥物與其自身不能相互作用。將組合中的藥物濃度與產生相同的效應的單獨使用的藥物的濃度相比較(S.Loewe，爿/^""'wFwsc^.19533:285-2卯)。該關係由方程式1=dA/DA+dB/DB來描述，其中dA和dB是引起一定效應(如50。/。抑制)的組合中的藥物A和B的濃度，Da和DB是單獨使用的每種藥物的等效濃度(如ICSD)。用Greco等人描述的濃度響應面方法(Gm"f/仏19卯50:5318-5327)來分析數據。用七參數非線性模型(/)擬合所有的實驗數據，所述實驗數據包括從2個384-孔板中的單獨的和組合中的兩種藥物的所有濃度的複製(replicate)計算出來的抑制百分比。formulaseeoriginaldocumentpage31其中E最大是藥物游離對照的最大響應；ICsoa和IC50B分別是產生50%En的藥物A和B的中值抑制濃度；mA和niB分別是藥物A和B的濃度響應曲線的斜率；Da和Db分別是葯物A和B的藥物濃度，作為上述方程式的輸入量；E是在藥物濃度DA和DB下測定的響應值，作為輸出量；且a是描述相互作用性質的藥物相互作用參數。採用SAS程序(SAS用戶指南統計(SASUser'sGuide:Statistics).1999,第8版，SASInstitute,Cay,NorthCarolina.),利用未加權最小二乘法非線性回歸和試驗獲得的全部數據集擬合上述方程式。得到七個參數和它們相關的漸進標準誤差和95%可信區間的評價，以解釋結果。此外，R2、相關係數(correlation)和協方差陣，和殘差圖用來檢驗模型的擬合優度。當參數a為正的且它的95%可信區間不包括0時，表明為協同作用。當a為負的且它的95%可信區間不包括0時，表明為拮抗作用。當a的95%可信區間包括0時，表明為Loewe相加或無相互作用。此外，除了固定為0的a外，用Greco模型的所有評估參數來計算聯用藥物的預測加和性。如果在預測響應面和預測相加面之間的偏差為正的(即如果響應面在相加面之上)，則將這種偏差解釋為百分協同作用，如果偏差為負(即響應面在相加面之下)，則將這種偏差解釋為百分拮抗作用。為了測定協同作用的大小以及確定產生協同作用的藥物濃度的範圍，繪製三維圖和等值線圖。對於基於BI理論(C.I.BlissJ/^/.所o/.193926:585畫615)的藥物相互作用模型而言，將根據單獨使用的藥物的效果得到的組合藥物的效果估計值與實驗中觀察到的數據進行比較。該關係由方程式I組合=IA+IB-IZIb來描述，其中I組合是無相互作用的組合中的藥物A和B的預測的百分抑制作用。Ia和lB是每種藥物單獨使用時觀察到的百分抑制作用。用M.NPrichard和C.ShipmanJr.發明的三維方法04w"v/r.Wd19卯14:181-205)來評估藥物相互作用。由基於Bliss獨立模型方程式的單個藥物的劑量響應曲線來計算理論相加性相互作用。對於每塊板上的兩種藥物的每個組合而言，從理論相加百分抑制作用中減去觀察到的百分抑制作用，以顯示大於預期的活性。如果相互作用僅僅是相加，則得到的面則顯示為在預測相加面以上的0。/。抑制處的水平面。這個面以上的任何峰都表示協同作用。類似地，在這個面上的任何凹陷都表示拮抗作用。用關於試驗劑量響應面的95%可信區間在統計學上評價數據。計算觀察到的百分抑制作用與預測的相加百分比的95%可信區間的上限之間的差值總和，作為統計學上顯著的協同量(synergyvolume)ZSYN。計算觀察到的百分抑制作用與預測的相加百分比的95。/。可信區間的下限之間的差值總和，作為統計學上顯著的拮抗量(antagonismvolume)￡ANT。一般來說，當相互作用量少於100%時認為藥物相互作用是弱的。當相互作用量在100%和200%之間時認為藥物相互作用是中等的。當相互作用量大於200%時認為藥物相互作用是強的。在CCR5-介導的細胞-細胞融合(CCF)實驗中測試鼠抗人CCR5mAbROAbl3和ROAbl4，以及兩種其它的CCR5mAb2D7和45523。在CCF實驗中還測試了六種拮抗劑的IC5。值(表2)。如表2所示，在CCF實驗中ROAM3和ROAbl4都表現出強抑制作用，其ICso值分別為14nM和1.3nM。抗體2D7也表現出強效的抗病毒作用(1(:5。=4.3nM),然而，mAb45523則表現出相對較弱的細胞-細胞融合抑制作用(IC5o=23nM)。在CCF實驗中測定單獨的或在各種組合中的七點半對數稀釋的CCR5ROAbl4和十點半對數稀釋的CCR5拮抗劑4。計算每個劑量點的抑制作用，並用抑制百分比表示。ROAbl4和MVC對細胞-細胞融合的強協同作用是很明顯的。例如，當MVC和ROAbl4都以0.27nM單獨加入時，分別得到13%和12%的抑制作用。然而當這兩種藥物以相同的濃度一起加入時，觀察到42%的抑制作用，這比基於Bliss獨立模型方程式計算出的預測的相加的23%抑制作用高出19%。而且，在使用該劑量組合情況下計算出具有95%可信度的16%協同作用。類似地，計算所有的方格盤劑量點(checkerboarddosingpoints)的具有95%可信度的百分協同作用，製得3D圖，其表明在寬劑量範圍內藥物ROAbl4和MVC的顯著協同作用(圖2)。全參數Greco模型的相互作用參數a為正的(24.88±2.8)，並且95%可信區間不與0重疊，表明統計學上顯著的協同作用。當用Prichard模型基於Bliss獨立模型理論測定相互作用時，測得385。/。協同量(95V。ZSYN)，這也表明強的協同作用(表3)。沒有觀察到拮抗作用。RoAbl4A和MVC的數據還在圖2中標繪為等效線圖，該等效線圖提供了在特定抑制水平上的協同作用水平的2-維圖解表示。用Greco等人(Om"r及仏199050:5318-5327)提出的七參數非線性模型(ii)擬合所有實驗數據，來計算等效線圖，所述實驗數據包括從2個384-孔板中的單獨的和組合中的兩種藥物的所有濃度的複製計算出來的抑制百分比。以下列形式計算等效線圖formulaseeoriginaldocumentpage34其中Dx，A和Dx，B分別為產生X。/o抑制作用(如10。/0、50%、卯％抑制作用)的藥物A和B的估計濃度；iiiA和niB分別為藥物A和B的濃度響應曲線的斜率；DA和I)B分別為藥物A和B的藥物濃度；以及a為藥物相互作用參數。用SAS程序(SAS用戶指南統計，1999，第8版，SASInstitute,Cay，NorthCarolina)計算和標繪等效線圖。等效線圖方程式是一個雙曲線。在95%抑制水平製得的等效線圖如圖2所述。如果只觀察到相加作用，則預期為對角直線，朝向低劑量的向內曲線則表示協同作用，而向外曲線則表示拮抗作用。曲線越靠近低劑量，協同作用越高，達到給定抑制作用所需要的組合中的藥物劑量越小。協同作用使組合的抗體和拮抗劑的劑量可以比單獨使用每種化合物達到相同效力所需要的劑量小。比方說，要達到95%抑制作用，分別需要65nM的ROAbl4和22.2nM的MVC;然而，如果兩種藥物一起加入時，只需要0.8nM的ROAbl4加上2.47nM的MVC即可達到95%抑制作用。在這種情況下可看到ROAbl4劑量減少了81倍或MVC劑量減少了9.8倍。當與相同的CCR5拮抗劑MVC組合時，與CCR5的N-末端結合的ROAbl3表現出比ROAbl4大約高60。/。的協同作用(圖3)。用Greco模型計算ROAbl3-MVC組合的a參數，為662±99(表3),其比ROAbl4-MVC組合的a參數(24.8±2，8)高得多。類似地，由Prichard模型得出的1314%協同量(95%ZSYN)比ROAbl4-MVC組合的協同量(i;SYN=385%)高得多。而且，這種協同作用在ROAbl3和MVC兩者都較寬的劑量範圍內發生，表明真正有效的協同作用。在CCF實驗系統中也測定了其它CCR5拮抗劑包括SCH-D、AK602和新的拮抗劑4、5和6與各種抗體之間的相互作用。這些拮抗劑具有不同的結構但都表現出有效的抗病毒活性。用Greco模型和Prichard模型分析這些不同組合的藥物相互作用，並將結果總結在表3中。在測試的所有CCR5拮抗劑中，當與ROAbl4或ROAbl3組合時，AK602表現出最高的協同作用。表3藥物1藥物2Greco模型Prichard模型a士SEZSYNH層AK602126.9±58.8769-2MVC24.8±2.8385畫17RoAbl4SCH-D20.6±1.7308-11420,7±2.6398-17516.7±3.1286-769.8±1.8165-5戶值-OAK6023296.3±1113.216120MVC662.3±99.51314-lSCH-D555.2±87.01164-3RoAbl34183.6±24.6995-852214.2±568.92034-56215.3±61.611440維/縱S-3MVC13.2±1.5298-l2D7AK6022.1±0.6113-l60.3±0.245-36*值5.2/52-/6.745532MVC-0.03±0.0083-102AK602-0.03±0.0072-114#值-,2.5在所有的抗-CCR5抗體之間沒有觀察到強的協同作用，並且RoAbl3和RoAvl4之間的有效協同作用也是意料之外的。據報導鼠CCR5mAb2D7與CCR5的胞外環(ECL2)的N端一側結合，其在與CCR5拮抗劑MVC和AK602的組合時表現出弱到中等的協同作用。用Greco模型測得2D7-MVC和2D7-AK602組合的a參數分別為13.2和2.1。這些數值比ROAbl3-MVC或ROAbl4-MVC組合的數值小得多(表3)。先前也已表明另一種商業上可得的抗CCR5mAb45523與CCR的多個外結構域(exodomain)結合，也在細胞-細胞融合實驗中研究了其與CCR5拮抗劑的相互作用。如表3所示，45523-MVC組合的a參數和^SYN分別為-0.03和3，表明45523和MVC之間沒有協同作用。CCR5拮抗劑AK602完全阻斷mAb45523的結合(K.Maeda等人/P7w/.200478:8654-62)。當抗體和低分子量拮抗劑(或融合抑制劑或吸附抑制劑)可以獨立地與CCR5受體結合時，應當會使協同作用的潛力達到最大化。表位的精確位置和別構地誘導構象改變的可能性使得預測獨立結合很困難。令人驚訝地是RoAbl3和RoAbl4結合不受用CCR5拮抗劑MVC、AK602或SCH-D預孵育和所述拮抗劑的繼續存在影響(圖4A和4B)。相反地，mAb2D7的總結合被CHO-CCR5細胞與拮抗劑AK602、MVC和SCH-D的預孵育部分抑制(圖4C)。45523的總結合幾乎完全被上面所述的三種拮抗劑阻斷，它的結合速度(on-rate)顯著減小(圖4D)。用mAb預孵育CHO-CCR5細胞，並隨後進行竟爭性結合試驗，證明RoAM3對MVC結合無影響，而RoAbl4和2D7則表現出38%和67%的結合抑制(圖5)。用AK602、MVC和SCH-D預孵育CCR5受體，強烈抑制45523結合達75-85%(圖4D)，與不表現協同作用相一致。在ENF和ROAbl3之間也觀察到有效的協同作用(9^15.8±2.5)，在ENF和ROAM4之間甚至觀察到更強的協同作用(91=32.3±5.4)(表4)。這個結果與mAb-拮抗劑相互作用相反，觀察到ROAbl3-拮抗劑組合比ROAb14-拮抗劑組合具有高得多的協同作用。表4tableseeoriginaldocumentpage36藥物製劑和給藥本發明涉及藥物組合物，該藥物組合物包含抗CCR5抗體和低分子量別構CCR5拮抗劑以及一種或多種藥物載體。各組分可分別配製在單獨的藥物組合物中或配製在包含兩種組分的整體藥物組合物中。本發明還涉及用使用具有協同作用的藥物組合的聯合療法治療或預防HIV-1的方法。聯合療法可通過共同或相繼地給藥來完成。本文所用的"共同給藥"包括在相同時間或不同時間給予物質。兩種或多種物質的同時給藥可通過包含兩種或多種活性成分的單一製劑完成，或通過含有單一活性物質的兩種或多種劑型基本上同時給藥來完成。化合物還可以以不同途徑獨立給藥，並且每種藥物製劑可獨立地優化以提供最佳的藥物水平。因此，抗體可以以胃腸外(parental)製劑經靜脈給藥，而低分子量化合物則可以以口服的液體或固體製劑給藥。為了製備根據本發明所述用途的藥物組合物，將有效量的鹼或酸加成鹽形式的作為活性成分的特定化合物與藥學上可接受的載體緊密混合，該栽體根據給藥所需的製劑形式而以不同形式存在。本文所用的"藥學上可接受的載體"包括任何和所有的生理學相容的溶劑、分散劑、包衣劑、抗菌劑或抗真菌劑、等滲和吸收延遲劑等。這些藥物組合物預期優選以適於口服給藥、直腸給藥、經皮給藥或胃腸外注射給藥的整體劑型存在。例如，在製備口服劑型的組合物時，可以使用任何常用的藥物介質，例如在口服液體製劑例如懸浮劑、糖漿劑、酏劑和溶液劑的情況下，可以使用水、二醇類、油類和醇類等；或在散劑、丸劑、膠囊劑和片劑的情況下可以使用固體載體，例如澱粉、糖、白陶土、潤滑劑、粘合劑和崩解劑等。因為片劑和膠嚢劑易於給藥，它們代表了低分子量拮抗劑的常規口服劑量單位形式，在該情況下顯然可使用固體藥物載體。低分子量拮抗劑還可以在胃腸外製劑中與抗體聯用。對於胃腸外組合物來說，栽體通常包括至少佔大部分的無菌水，但也可包括其他任選的成分以增加溶解性，所述成分包括藥學上接受的載體、賦形劑或穩定劑。例如可以製備注射用溶液，其中載體包括鹽溶液、葡萄糖溶液或者鹽水和葡萄糖溶液的混合物。還可以製備注射用混懸液，在該情況時可以使用適當的液體載體、助懸劑等。用於胃腸外給藥的製劑必須為無菌溶液，這可以通過將溶液通過滅菌濾膜過濾實現。可接受的載體、賦形劑或穩定劑在所用的劑量和濃度下對接受者無毒，並且其包括緩沖劑如醋酸鹽、TRIS、磷酸鹽、檸蒙酸鹽和其它有機酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸和甲硫氨酸；防腐劑(例如十八烷基二甲基千基氯化銨；六甲氯銨(hexamethoniumchloride);苯扎氯銨、千索氯銨；苯酚、丁醇或苄醇；對羥苯曱酸烷基酯類，例如對羥苯甲酸甲酯或對羥苯甲酸丙酯；鄰苯二酚；間苯二酚；環己醇；3-戊醇；和間甲苯酚)；低分子量(少於約IO個殘基)多肽類；蛋白質類，例如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白類；親水聚合物，例如聚乙烯吡咯烷酮；胺基酸，例如甘氨酸、穀氨醯胺、天冬醯胺、組氨酸、精氨酸或賴氨酸；單糖、二糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精類；螯合劑，例如EDTA;張力調節劑(tonicifiers)，例如海藻糖和氯化鈉；糖類，例如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；表面活性劑，例如聚山梨醇酯；成鹽的抗衡離子，例如鈉離子；金屬絡合物(例如Zn-蛋白絡合物)；和/或非離子表面活性劑，例如TWEENTM、PLURONICSTM或聚乙二醇(PEG)。抗體優選包括濃度在5-200mg/mL的抗體。本發明的藥物組合物或治療方案中的各活性成分的實際劑量水平可單獨地改變以得到每個有效成分的量，該量對特定患者、組合物和給藥方式而言可達到所需的治療響應而對患者無毒性。選取的劑量範圍取決於各種藥代動力學因素包括本發明使用的具體組分或其酯、鹽或醯胺的活性、給藥途徑、給藥時間、所用具體化合物的排洩速率(reate)、接受治療的患者的年齡、性別、體重、狀況、一般健康情況和以前的醫療史以及醫療領域共知的其他因素。實施例1單克隆抗體的製備抗體通過用帶有完全弗氏佐劑的107CCR5-表達細胞(CHO-CCR5或L1.2-CCR5)對雌性Balb/c小鼠進行初次腹膜內免疫接種來製備。除了對細胞使用不完全弗氏佐劑外，4-6周後類似地進行第二次免疫接種。然後以4-6周的時間間隔對小鼠用不帶佐劑的107CHO-CCR5或L1.2-CCR5細胞加強免疫。在融合前的第三天或第四天通過用107CCR5-表達細胞腹膜內或2x106CCR5-表達細胞靜脈內進行最後一次免疫接種。根據Galf"方法(Galfre，G.和C.Milstdn，單克隆抗體的製備策略和程序(Preparationofmonoclonalantibodies:strategiesandprocedures),酶學方法(MethodsEnzymol.)。198173(PtB):3-46.)，將免疫小鼠的脾細胞與骨髓瘤細胞融合。簡單來講，將大約1xio8免疫小鼠的脾細胞與相同數目的骨髓瘤細胞P3X63曙Ag8-653(ATCC，Manassas,VA)混合，在HAZ培養基(包含10%FCS、100mM次黃嘌呤和1pg/ml重氮絲氨酸的RPMI1640)中融合和培育。融合後十天，就特異性抗體的產生檢測上清液。然後通過有限稀釋克隆雜交瘤，所述雜交瘤是產生在抑制CCR5-介導的細胞-細胞融合方面最有效的上清液的雜交瘤。實施例2CCR5-介導的CCF實驗CCF實驗按之前所述進行(C.Ji，J.Zhang,N.Cammack和S.Sankuratri,丄i&附o/.Sc/re".2006ll(6):652-663)。採用Multimek(貝克曼(Beckman)，Fullerton，CA),將Hela-R5細胞(表達來自R5-嗜性的病毒和HIV-1Tat的gpl60)平鋪於384孔白色培養板(BD生物科學(BDBioscience),PaloAlto，CA)中，每孔7.5xl3個細胞，在補加有10%FBS、lx青黴素-鏈黴素、300fig/mLG418、100jig/mL潮黴素和1jig/mL多西環素(Dox)的無酚紅的Dulbecco改良的Eagle培養基(DMEM)(BD生物科學，PaloAlto,CA)中，在37。C孵育過夜，以誘導gpl60的表達。將10nL在含有5%DMSO的培養基中的稀釋的化合物加至細胞中，然後以1.5x104細胞/15jiL/孔的濃度加入CEM-NKr-CCR5-Luc(從NIHAIDS研究&參考試劑項目(NIHAIDSResearch&ReferenceReagentsProgram)中獲得的)，其表達CD4和CCR5並攜帶HIV-2長末端重複序列(LTR)-驅動的螢光素酶報告基因，孵育24小時。在共同孵育末期，向每孔中加入15nLSteady-Glo螢光素酶底物，將培養物密封，輕輕振搖451^11。通過使用16-通道TopCountNXT儀(銷金埃爾默(PerkinElmer)，Shelton，CT)，進行10min暗適應，通過測定每孔10秒發光來測定螢光素酶的活性，讀數為每秒計數(CPS)。對於藥物相互作用試驗來說，將小分子化合物或抗體連續稀釋在含有5%二甲基亞碸(DMSO)(CalBiochem，LaJolla，CA)和1x青黴素-鏈黴素的無血清和無酚紅的RPMI中。在加入靶細胞之前，立即將5^L的兩種用於藥物-藥物相互作用的待測的稀釋化合物或mAb的每一種加入Hda-R5細胞中。各種濃度的方格盤(checkerboard)藥物組合如圖1A所示進行實驗。為了清楚和易於理解的目的，通過舉例說明和實施例詳細地描述了上迷發明。可以在附隨的權利要求的範圍內進行改變和修改，這對本領域的技術人員來說是很明顯的。因此，可以理解，上面的說明書旨在用於說明而不是用於限制。因此，本發明的範圍不應參考上述說明書來確定，而應當參照下面所附權利要求以及這些權利要求所享有的等同原則所確定的全部範圍確定。對於所有目的來說，將本申請引用的所有專利、專利申請和出版物的全部內容在此引入本說明書作為參考，好像每項專利、專利申請或出版物在此單獨公開一樣。權利要求1.藥物組合物，該藥物組合物含有治療有效量的具有協同作用的組合，所述具有協同作用的組合包含分離的抗體和CCR5拮抗劑、病毒融合抑制劑或病毒吸附抑制劑，所述分離的抗體與CCR5受體結合，並且其中所述抗體的可變的重鏈序列的CDR3是SEQIDNO.9或10。2.根據權利要求1的藥物組合物，其中所述病毒融合抑制劑為恩夫韋地，所述的病毒吸附劑為TNX-355,或所述的CCR5拮抗劑選自TAK-220;TAK畫779;AK602(ONO4128);SCH-C;SCH-D;MVC;Ia、Ib、Ic和Id或其藥學上可接受的鹽，formulaseeoriginaldocumentpage2其中Ar為苯基、R1選自3-氟苯基、3-氯苯基或3，5-二氟苯基；(a)formulaseeoriginaldocumentpage2其中Ra是氫、-OH、-NMeCH2CONH2或Me(b)formulaseeoriginaldocumentpage2，其中Rb是氫或氰基；(c)formulaseeoriginaldocumentpage2和(d)formulaseeoriginaldocumentpage3，其中rc是6-三氟甲基噠嗪-3-基、嘧啶-5-基或5-三氟甲基-吡咬-2-基；W選自環戊基、2-羧基-環戊基、3-氧代-環戊基、3-氧代-環己基、3-氧代-環丁基、3-氧雜-環戊基、2-氧雜-環戊基、4，4-二氟環己基、3，3-二氟環丁基、N-乙醯基-氮雜環丁烷-3-基、N-甲磺醯基-氮雜環丁烷-3-基和甲氧基羰基；W選自環己基曱基、四氫-吡喃-4-基曱基、4-甲氧基-環己基、4-氟苄基、4,4-二氟環己基-甲基、2-嗎啉-4-基-乙基和N-Cw烷氧基羰基-哌啶-4-基甲基。3.根據權利要求的藥物組合物，其中所述的CCR5拮抗劑選白1-1、12、1-3、1-4、1-5、1-6、1-7、1-8、1-9、I畫IO、1-11、112、1-13、1-14、1-15、1-16、1-17、1-18、1-19、1-20、1-21和1-22。4.根據權利要求1的藥物組合物，其中所述的分離的抗體具有選自下列的可變重鏈序列和可變輕鏈序列(a)所述的可變重鏈序列為SEQIDNO:1,且所述的可變輕鏈序列為SEQIDNO:2;(b)所述的可變重鏈序列為SEQIDNO:3，且所述的可變輕鏈序列為SEQIDNO:4;(c)所述的可變重鏈序列為SEQIDNO:5,且所述的可變輕鏈序列為SEQIDNO:6;和(d)所述的可變重鏈序列為SEQIDNO:7，且所述的可變輕鏈序列為SEQIDNO:8。5.根據權利要求4的藥物組合物，其中所述的CCR5拮抗劑選自TAK-220、TAK-779、AK602(ONO4128)、SCH-C、SCH陽D、Ia、Ib、Ic和Id，其中Ar、R1、112和113如先前所定義。6.根據權利要求4的藥物組合物，其中所述的病毒融合抑制劑為恩夫韋地。7.根據權利要求4的藥物組合物，其中所述的病毒吸附抑制劑為TNX-355。8.根據權利要求1的組合物，其中所述的抗體由選自mPz01.F3、mPx04.F6、mPz03.1C5和mPx02.1Cll的雜交瘤細胞系產生。9.包含治療有效量的具有協同作用的組合的藥物組合物在製備治療HIV-l感染或者預防HIV-l感染或者治療AIDS或ARC的藥物中的用途，所述具有協同作用的組合包含分離的抗體和CCR5拮抗劑、病毒融合抑制劑或病毒吸附抑制劑，所述的分離的抗體與CCR5受體結合，並且其中所述抗體的可變的重鏈胺基酸序列的CDR3選自SEQIDNO.9或10。10.根據權利要求9所述的用途，其中所述的CCR5拮抗劑選自TAK-220、TAK-779、AK602(ONO4128)、SCH-C、SCH-D、Ia、Ib、Ic和Id，其中Ar、R1、R2和R3如先前所定義。11.根據權利要求9所述的用途，其中所述的病毒融合抑制劑為恩夫韋地。12.根據權利要求9所述的用途，其中所述的病毒吸附抑制劑為TNX-355。13.根據權利要求9所述的用途，其中所述的分離的抗體具有選自下列的可變重鏈序列和可變輕鏈序列(a)所述的可變重鏈序列為SEQIDNO:1，且所述的可變輕鏈序列為SEQIDNO:2;(b)所述的可變重鏈序列為SEQIDNO:3，且所述的可變輕鏈序列為SEQIDNO:4;(c)所述的可變重鏈序列為SEQIDNO:5，且所述的可變輕鏈序列為SEQIDNO:6;和(d)所述的可變重鏈序列為SEQIDNO:7，且所述的可變輕鏈序列為SEQIDNO:8。14.根據權利要求13所述的用途，其中所述的抗體由選自mPz01.F3、mPx04.F6、mPz03.1C5和mPx02.1Cll的雜交瘤細胞系產生。15.根據權利要求14所述的用途，其中所述的CCR5拮抗劑選自TAK-220、TAK-779、AK602(ONO4128)、SCH-C、SCH-D、MVC、Ia、Ib、Ic和Id,其中Ar、R1、R2和R3如先前所定義。16.根據權利要求14所述的用途，其中所述的病毒融合抑制劑為恩夫韋地。17.根據權利要求14所述的用途，其中所述的病毒吸附抑制劑為TNX-355。18.如上文所述的本發明。全文摘要本發明公開了用於治療或預防HIV-1感染的具有協同作用的藥物組合物，該藥物組合物含有抗-CCR5單克隆抗體和CCR5拮抗劑、病毒融合抑制劑或病毒吸附抑制劑。所述組合物表現出比由單獨使用任一成分的活性所預期的活性顯著更好的活性。還提供了使用上述藥物組合物治療或預防HIV-1的方法。文檔編號A61P31/18GK101410414SQ200780010614公開日2009年4月15日申請日期2007年1月19日優先權日2006年1月30日發明者C·季,S·桑庫拉特裡申請人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司