取代的2-[2-(苯基)乙氨基]烷醯胺衍生物及其作為鈉和/或鈣通道調節劑的應用的製作方法

2023-06-20 03:48:51 4

專利名稱：取代的2-[2-(苯基)乙氨基]烷醯胺衍生物及其作為鈉和/或鈣通道調節劑的應用的製作方法
專利說明取代的2-[2-(苯基)乙氨基]烷醯胺衍生物及其作為鈉和/或鈣通道調節劑的應用 本發明涉及取代的2-[2-(苯基)乙氨基]烷醯胺衍生物，其藥學上可接受的鹽，包含它們的藥物組合物及其作為鈉和/或鈣通道調節劑的應用。
作為本發明目的的衍生物具有作為鈉和/或鈣通道調節劑的活性且由此用於預防、緩解和治癒廣泛的病理情況，所述的病理情況包括，但不限於神經病學的，認知，精神病，炎性，泌尿生殖和胃腸疾病，其中上述機理已被描述為扮演病理角色。
本發明的化合物基本上不具有單胺氧化酶(MAO)抑制作用，尤其是在預防、緩解和/或治癒所述疾病中為治療有效的劑量。

背景技術：
化學背景 GB 586,645專利中描述了下述通式的胺基酸衍生物的合成
它特別描述了具有刺激子宮平滑肌特性的N-羥基烷基醯胺類的合成。
專利申請WO 90/14334中描述了下述通式的單-取代的N-苯基烷基α-氨基羧醯胺衍生物，其用作抗癲癇藥，抗帕金森病藥，神經保護劑，抗抑鬱藥，解痙藥和/或安眠劑
其中 R為(C1-C8)烷基，(C3-C8)環烷基，呋喃基，噻吩基，吡啶基或苯基環，其任選被1-4個獨立地選自滷素，(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基和三氟甲基的取代基取代；A為-(CH2)m-，-(CH2)p-X-(CH2)q-基團，其中m為1-4的整數，p和q之一為0且另一個為0或1-4的整數，X為-O-，-S-或-NR4-，其中R4為氫或(C1-C4)烷基；n為0或1；各R1和R2獨立地為氫或(C1-C4)烷基；R3為氫，任選被羥基取代的(C1-C4)烷基或任選如上所述被取代的苯基；R3′為氫或R3和R3′共同構成(C3-C6)環烷基環；R5和R6各自獨立地為氫或(C1-C6)烷基，條件是當R為(C1-C8)烷基時，A為-(CH2)p-X-(CH2)q-基團，其中p和q均為0，X為-O-，-S-或-NR4-，其中R4為氫或C1-C4烷基。
我們的專利申請中合成的衍生物無一在WO 90/14334中被披露和製備。
在其它專利申請中，請求保護屬於WO 90/14334中通式選擇的化合物在具有其它活性的組合物中的應用，特別地 WO 99/35125用作止痛藥的α-氨基醯胺衍生物 WO 03/020273包含加巴噴丁或其類似物和α-氨基醯胺和其類似物的藥物組合物及其止痛應用 WO 04/062655用作抗偏頭痛藥的α-氨基醯胺衍生物 WO 05/018627用作抗炎藥的α-氨基醯胺衍生物 WO 05/070405用於治療下泌尿道疾病的α-氨基醯胺衍生物 WO 05/102300用於治療多動腿症候群和附帶病症的α-氨基醯胺衍生物 WO 06/027052(滷素苄氧基)苄氨基-丙醯胺類在製備作為鈉和/或鈣通道選擇性調節劑有效的藥物中的應用 EP Appl.N°06012352.8用於治療認知障礙的α-氨基醯胺衍生物。
在專利申請WO 98/35957中描述了下式的醯胺衍生物
並且請求保護它們在減肥和進食障礙中的應用。
實際上我們的專利申請中合成的化合物中無一在WO 98/35957中被合成或具體列舉。
-在WO 2004/087125中描述了下式的化合物
請求保護鈉通道的阻斷機理和許多藥理學活性，特別是抗痛和抗膀胱功能失調活性。
必須強調的是當X2為亞烷基時，它不能為-CH2-CH2-，而僅為-CH2-，由此本申請中的2-[2-(苯基)乙氨基]烷醯胺衍生物中無一屬於上述報導的通式範圍。
-Eleonora Ghidini等在Bioorganic & Medicinal Chemistry2006，14，3263-3274中描述了下式的化合物
已經測試了這些化合物的抗驚厥活性。
本專利申請中披露和合成的化合物中無一屬於上述通式的範圍。
-2006年11月29日提交的懸而未決的申請PCT/EP2006/011443(WO 2007/071311)涉及下式的2-苯基乙氨基衍生物
本申請中請求保護的化合物中無一屬於PCT/EP 2006/011443(WO2007/071311)範圍內。
生物學背景 鈉通道在神經元網絡中扮演重要角色，在細胞和細胞網絡各處迅速傳遞電脈衝，由此協調從運動到認知的高級過程。這些通道是大型跨膜蛋白質，它們能夠在不同的狀態之間切換，使鈉離子能夠選擇性地滲透。就這種過程而言，需要動作電位使膜去極化，因此這些通道是電壓-門控的。過去幾年中，已經對鈉通道有更好的了解，並開發了與它們相互作用的藥物。
電壓-門控鈉通道最初基於它們對河豚毒素的敏感性加以分類，從低的納摩爾級(河豚毒素敏感性，TTXs)到高的微摩爾級(河豚毒素耐受性，TTXr)。迄今，已經鑑定了9種不同的鈉通道α亞單位，分為Nav1.1至Nav1.9。
Nav1.1至Nav1.4、Nav1.6和Nav1.7是TTXs，而Nav1.5、Nav1.8和Nav1.9是TTXr，具有不同程度的敏感性。Nav1.1至Nav1.3和Nav1.6主要在CNS中被表達，而Nav1.4和Nav1.5主要在肌肉中被表達(分別為骨骼肌和心臟)，且Nav1.7，Nav1.8和Nav1.9主要在小DRG感覺神經元中被表達。
已經清楚，一些具有未知作用機理的藥物實際上通過調節鈉通道電導發揮作用，包括局部麻醉劑、I類抗心律失常劑和抗驚厥劑。已經發現了神經元鈉通道阻斷劑在治療癲癇(苯妥英和卡馬西平)、雙相性精神障礙(拉莫三嗪)、預防神經變性和減少神經病性疼痛中的應用。各種使神經元興奮性穩定的抗癲癇藥在神經病性疼痛中是有效的(例如卡馬西平)。
另外，在若干炎性疼痛模型中已經觀察到鈉通道表達或活性的增加，提示了鈉通道在炎性疼痛中的角色。
鈣通道是跨膜性多亞單位蛋白質，控制鈣離子從細胞外液進入細胞。通常，鈣通道是電壓依賴性的，被稱為電壓門控性鈣通道(VGCC)。VGCC見於哺乳動物神經系統各處，它們調節對於細胞存活和功能而言是重要的細胞內鈣離子水平。細胞內鈣離子濃度與動物體內的許多生命過程有關，例如神經遞質釋放，肌肉收縮，起搏點活動和激素分泌。動物中所有「可興奮的」細胞、例如中樞神經系統(CNS)的神經元、外周神經細胞和肌肉細胞、包括骨骼肌、心肌和靜脈與動脈平滑肌的那些，都具有電壓依賴性鈣通道。
鈣通道是一個大型家族，具有很多在遺傳、生理學和藥理學上不同的亞型。基於從個別神經元記錄的鈣電流的生物物理性質，已經描述了兩種超家族高電壓活化(HVA)和低電壓活化(LVA)鈣通道。被稱為L-型、P-型、Q-型、N-型、R-型的鈣電流是HVA，而被稱為T-型的是LVA。通過分子鑑定已經鑑定、克隆和表達了十種不同的鈣亞型，分為三個家族Cav1家族(Cav1.1，1.2，1.3，1.4)在功能上涉及L-型Ca電流；Cav2家族(Cav2.1，2.2，2.3)在功能上涉及P/Q、N、R-型電流；且Cav3家族(Cav3.1，3.2，3.3)在功能上涉及T-型電流 據信鈣通道與某些疾病狀態有關聯。一些可用於治療哺乳動物、包括人的各種心血管疾病的化合物被認為通過調節存在於心臟和/或血管平滑肌中的電壓依賴性鈣通道的功能來發揮它們的有益效果。具有鈣通道活性的化合物也已被推斷用於治療疼痛。特別是負責神經遞質釋放調節的N-型鈣通道(Cav2.2)被認為在傷害感受傳遞中扮演突出的角色，這不僅由於它們的組織分布，也來自若干藥理研究的結果。在損傷的神經病性疼痛模型中發現N-型鈣通道在同側背側角中被增量調節了(Cizkova D.，Marsala J.，Lukacova N.，Marsala M.，JergovaS.，Orendacova J.，Yaksh T.L.Exp.Brain Res.(2002)147456-463)。Specific N-type calcium channel blockers were shownto be effective in reducing pain responses in neuropathic painmodels(Mattews E.A.，Dickenson A.H.Pain(2001)92235-246)、II期福馬林試驗(Diaz A.，Dickenson A.H.Pain(1997)6993-100)和由膝關節炎症誘發的痛覺過敏(Nebe J.，Vanegas H.，Schaible H.G.Exp.Brain Res.(1998)12061-69)中顯示有效降低疼痛反應。缺乏N-型鈣通道的突變小鼠被發現降低了對持續性疼痛反應，表現為II期福馬林試驗期間的疼痛反應降低(Kim C.，Jun K.，Lee T.，Kim S.S.，Mcenery M.W.，Chin H.，Kim H.L，Park J.M.，Kim D.K.，Jung S.J.，Kim J.，Shin H.S.Mol.Cell Neurosci.(2001)18235-245；Hatakeyama S.，Wakamori M，Ino M.，Miyamoto N.，TakahashiE.，Yoshinaga T.，Sawada K.，Imoto K.，Tanaka I.，Yoshizawa T.，Nishizawa Y.，Mori Y.，Nidome T.，Shoji S.Neuroreport(2001)122423-2427)，以及降低了神經病性疼痛反應，表現為脊神經結紮模型中的機械性異常疼痛和熱性痛覺過敏降低。有趣的是，這些小鼠也顯示比野生型更低的焦慮水平(Saegusa H.，Kurihara T.，Zong S.，Kazuno A.，Matsuda Y.Nonaka T.，Han W.，Toriyama H.，TanabeT.，EMBO J.(2001)202349-2356)。N-型鈣通道在疼痛中的牽連性已經在臨床上得到齊考諾肽的進一步驗證，這是一種從海洋小螺Conus Magnus毒液衍生的肽。這種肽在治療應用上的限制在於它只能對人類鞘內進行給藥(Bowersox S.S.和Luther R.Toxicon，(1998)361651-1658)。
所有這些發現都表明，具有鈉和/或鈣通道阻斷作用的化合物在預防、減輕和治癒廣泛的病狀中具有很高的治療潛力，包括神經病學的、精神病學的、泌尿生殖和胃腸疾病，其中上述機理已被描述為扮演病理學角色。
有很多文章和專利描述過治療或調節多種障礙的鈉通道和/或鈣通道調節劑或拮抗劑，例如它們用作局部麻醉劑、抗躁狂抗抑鬱劑、治療單極性抑鬱、尿失禁、腹瀉、炎症、癲癇、神經變性病症、神經細胞死亡、神經病性疼痛、偏頭痛、急性痛覺過敏與炎症、腎疾病、變態反應、哮喘、支氣管痙攣、痛經、食管痙攣、青光眼、尿道障礙、胃腸運動障礙的藥物。
這類描述鈉和/或鈣通道阻斷劑及其應用的文章和專利/專利申請的不完全列表包括如下所示的參考文獻 C.Alzheimer在Adv.Exp.Med.Biol.2002，513，161-181中描述了作為神經保護物質靶標的鈉和鈣通道。
Vanegas e Schaible(Pain 2000，85，9-18)討論了鈣通道拮抗劑對於疼痛、痛覺過敏和異常疼痛的脊髓機理的效應。
WO 03/057219涉及用作治療或調節中樞神經系統障礙，例如神經病性疼痛，炎性疼痛，與炎症相關的疼痛或癲癇的鈉通道阻斷劑。
WO99/14199中披露了取代的1，2，3，4，5，6-六氫-2，6-亞甲基-3-苯並吖辛因-10-oles作為用於治療幾種疾病的有效鈉通道阻斷劑，所述的疾病例如中風，神經變性疾患，阿爾茨海默病，帕金森病海心血管疾患。
WO01/74779中披露了新的氨基吡啶鈉通道阻斷劑及其作為抗驚厥藥，局部麻醉劑，抗心律失常藥在治療或預防神經變性疾患，例如肌萎縮側索硬化(ALS)，治療或預防急性或慢性痛和治療或預防糖尿病神經病變中的應用。
WO04/087125中披露了作為用於治療慢性和急性痛，耳鳴，腸紊亂，膀胱功能障礙和脫髓鞘疾病的哺乳動物鈉通道抑制劑的胺基酸衍生物。
美國專利US5,051,403涉及降低與局部缺血、例如中風有關的神經元損傷的方法，給予結合性/抑制性ω-芋螺毒素肽，其中該肽是以選擇性地特異性抑制神經元組織中電壓-門控鈣通道電流為特徵的。
美國專利US5,587,454涉及產生痛覺缺失的組合物和方法，特別是在疼痛和神經病性疼痛的治療中。
美國專利US5,863,952涉及治療缺血性中風的鈣通道拮抗劑。
美國專利US6,011,035涉及鈣通道阻斷劑，可用於治療例如中風和疼痛等病症。
美國專利US6,117,841涉及鈣通道阻斷劑和它們在中風、腦缺血、疼痛、頭部創傷或癲癇治療中的應用。
美國專利US6,362,174涉及治療治療中風、腦缺血、疼痛、癲癇和頭部創傷的N-型鈣通道阻斷劑。
美國專利US6,420,383和美國專利US6,472,530涉及新穎的鈣通道阻斷劑，可用於治療和預防許多障礙，例如高血壓、變態反應、哮喘、支氣管痙攣、痛經、食管痙攣、青光眼、早產、尿道障礙、胃腸運動障礙和心血管疾患。
美國專利US6,458,781涉及阻斷鈣通道的化合物和它們治療中風、腦缺血、疼痛、頭部創傷或癲癇的應用化合物。
美國專利US6,521,647涉及鈣通道阻斷劑在動物腎疾病治療中的應用，尤其慢性腎衰竭。
WO 97/10210涉及三環雜環衍生物和它們在療法中的應用，特別是作為鈣通道拮抗劑，例如用於治療局部缺血，特別是缺血性休克。
WO 03/018561涉及作為N-型鈣通道拮抗劑的喹啉化合物和使用這類化合物治療或預防疼痛或傷害感受的方法。
單胺氧化酶(MAO)是存在於神經元與非神經元細胞的外部線粒體膜中的酶。MAO存在兩種同工型MAO-A和MAO-B。MAO酶負責內源性與外來性胺的氧化性脫氨基作用，並具有不同的底物優先性、抑制劑特異性和組織分布。5-羥色胺，去甲腎上腺素和腎上腺素是MAO-A優先的底物，氯吉蘭是選擇性MAO-A抑制劑；而MAO-B優選β-苯基乙基胺作為底物，幾乎選擇性地被司來吉蘭所抑制。多巴胺、酪胺和色胺都被MAO-A和MAO-B所氧化，特別是在人腦中，多巴胺被MAO-B脫氨基達80％ MAO的抑制允許內源性與外源性底物蓄積下來，由此當幾乎完全被抑制時(＞90％)，可以改變規律性單胺遞質的動力學。MAO調節大多數重要神經遞質的腦中濃度，例如去甲腎上腺素、5-羥色胺和多巴胺，它們涉及情緒、焦慮和運動。因而，MAO被認為與各種精神和神經病學障礙有密切聯繫，例如抑鬱、焦慮和帕金森氏病(PD)。
MAO-A抑制劑主要在精神病學中被用於治療重症、頑固性與非典型性抑鬱，因為它們能夠增加降低的5-羥色胺和去甲腎上腺素腦中水平。最近，MAO-A抑制劑已經用於治療患有焦慮症的患者，例如社交恐怖、恐慌症、創傷後應激障礙和強迫觀念與行為障礙。
MAO-B抑制劑主要在神經病學中被用於治療PD。
最近也有證據和興趣在於MAO-B在其他病理條件中的角色，例如阿爾茨海默氏病(AD)。迄今尚未報導過MAO-B在輔助遞質代謝中的牽連性的證據，例如膽囊收縮素、P物質、促生長素抑制素和神經降壓素，它們牽涉疼痛感覺的調節。為此，MAO-B抑制劑在疼痛症候群中的應用不存在科學原理。
在臨床實踐期間已經報導過採用MAO抑制劑的不良藥物反應。第一代非選擇性和不可逆性MAO抑制劑、例如反苯環丙醯胺(tranylcypromide)和苯乙肼具有嚴重的副作用，包括肝毒性、體位性低血壓和最重要的高血壓危象，其發生在攝入含有酪胺的食物之後(Cooper AJ.-Tyramine and irreversible monoamine oxidaseinhibitors in clinical practice.-Br J Psych Suppl 198938-45)。
在使用這些非選擇性和不可逆性MAO抑制劑時，必須遵守嚴格的限酪胺飲食。在反苯環丙胺療法停止後4周和苯乙肼療法停止後11周以上，對於酪胺的增壓敏感性才會正常。
司來吉蘭是一種不可逆性MAO-B抑制劑，尤其在與左旋多巴聯合使用時能夠導致PD患者的厭食/噁心、口乾、運動障礙和體位性低血壓，後者是最成問題的(Volz H.P.和Gleiter C.H.-Monoamineoxidase inhibitors.A perspective on their use in the elderly.-Drugs Aging 13(1998)，pp.341-355)。
在單一療法中，接受司來吉蘭的患者比接受安慰劑的患者更經常發生厭食/噁心、骨骼肌損傷和心律失常。除了這些副作用以外，注意到血清AST和ALT水平升高的速率也增加了。
最頻繁報導的嗎氯貝胺的副作用是睡眠紊亂、焦慮增加、不安靜和頭痛，這是一種選擇性和可逆性MAO-A抑制劑。
選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑(SSRIs)與嗎氯貝胺的組合在頑固性抑鬱的情況下具有良好的功效，但是關於由這種組合導致的毒副作用引發了爭論，例如血清素源性症候群(Baumann P.-Pharmacokinetic-pharmacodynamic relationship of the selectiveserotonin reuptake inhibitors.Clin Pharmacokinet 31(1996)，pp 444-469)。由於心律失常和肝酶水平增加，應當定期檢查心電圖和實驗室數值。
伴隨衰老而發生的很多類型生理變化影響MAO抑制劑的藥效學和藥動學。事實上，老年人的藥動學變量明顯不同於更年輕的患者。包括吸收、分布、代謝和排洩在內的這些變量不得不加以考慮，以避免或者最小化某些不良效應和藥物-藥物相互作用。老年患者一般比年輕患者更敏感於副作用，包括不良的藥物反應。高血壓危象可能在老年人中比在年輕患者中更頻繁發生，因為老年人的心血管系統已經老化。
擬交感神經藥與MAO抑制劑組合的使用也可以升高血壓。另外，與安慰劑相比，苯乙肼與顯著更高發的下列副作用有關嗜睡、震顫、運動障礙、腹瀉、排尿困難、體位效應和不良的皮膚病學效應。有趣的是在老年人中，據報導在用嗎氯貝胺治療期間頭痛的頻率高於年輕患者(Volz H.P.和Gleiter C.H.-Monoamine oxidase inhibitors.Aperspective on their use in the elderly.Drugs Aging 13(1998)，pp.341-355)。
MAO抑制劑(優選MAO-A，但並不是無選擇的MAO-A/MAO-B)有時是用於抑鬱的處方用藥。由於潛在的自殺風險，由過量服用引起的不良藥物反應和毒性是在選擇抗抑鬱劑時考慮的重要因素。另外，在使用高劑量的MAO抑制劑時，不良的心血管效應似乎明顯增加；因為在如此高的劑量下喪失MAO選擇性，酪胺能夠誘發潛在危險的高血壓反應。急性過量服用MAO抑制劑導致激動、幻覺、高熱、反射亢進和驚厥。異常血壓也是中毒的跡象，以致可能需要灌胃和維持心肺功能。過量服用傳統的非選擇性和不可逆性MAO抑制劑是相當危險的，有時是致命的(Yamada和Richelson，1996.Pharmacology ofantidepressants in the elderly.InDavid JR，Snyder L.，editors.Handbook of pharmacology of aging.Boca RatonCRC Press 1996)。
在治療其中鈉和鈣通道機理扮演病理角色的病變中，MAO酶抑制沒有益處。此外，MAO抑制副作用可能帶來至少兩種類型的消極性限制 1)飲食進食酪胺含量高的食物可以導致嚴重的、甚至危及生命的系統血壓增加(所謂的「奶酪效應」)。
2)藥理作為例子經常用藥物組合治療疼痛，例如類阿片衍生物和三環抗抑鬱劑。這類與MAO抑制劑的組合是危險的，因為這可能導致5-羥色胺能症候群(激動、震顫、幻覺、高熱和心律失常)。
因而，消除或者顯著減少有鈉和/或鈣通道調節劑活性的藥物的MAO抑制活性可用於預防、減輕和治癒其中所述機理扮演病理角色的廣泛病狀，包括神經病學、精神病學的、炎性、泌尿生殖和胃腸疾病，這是相對於具有相似功效以及上述副作用的化合物而言的一項意外的和實質性治療改進。
考慮這些關於MAO抑制劑的發現、特別是缺乏任何關於MAO-B在病理性病變中的角色的證據，象疼痛、偏頭痛、炎性、泌尿生殖和胃腸疾病，可以想像MAO-B抑制作用不應當是用於上述病變的化合物的必要特徵，避免在慢性和/或長期治療期間的任何可能的副作用。
上述問題的一種有利解決方案將在於提供如下藥物，它們是「有選擇性的鈉和/或鈣通道調節劑活性」或者可用於「選擇性治療」其中鈉和/或鈣通道機理扮演病理角色的病變、障礙或疾病。用這種措辭表示如下藥物，在對有此需要的患者給予有效治療其中上述機理扮演病理角色的上述病變的量時，不表現任何MAO抑制活性或者表現顯著降低的MAO抑制活性，從而避免由內源性與外源性單胺遞質蓄積引起的副作用。
本發明的主要目標是作為具有鈉和/或鈣通道調節劑活性的2-[2-(苯基)乙氨基]烷醯胺衍生物在製備藥物的應用，其中上述機理扮演病理角色的病狀，其為神經病學、認知、精神病學的、炎性、泌尿生殖和胃腸疾病，所述的藥物基本上沒有任何MAO抑制活性或者具有顯著降低的MAO抑制活性，因此減少了不希望的副作用的可能性。因此，本發明的主要目的在於提供2-[2-(苯基)乙氨基]烷醯胺衍生物作為治療上述病理情況的藥物的應用，其特徵在於該藥物基本上沒有任何MAO抑制活性或者提供了顯著降低的MAO抑制活性，且由此具有降低的不希望的副作用的可能性。所述的應用提供了預防，減輕和/或治癒上述病症，特別是對因MAO抑制活性導致的不希望的副作用，例如上文所述的那些特別敏感的患者的改進的選擇性來源。
本發明的另一個方面在於提供治療因壓力門通鈉和/或鈣通道功能障礙導致的紊亂造成的病症侵害的患者的方法，包括對所述的患者給予有效量的2-[2-(苯基)乙氨基]烷醯胺衍生物。
上述神經性障礙包括慢性和急性類型的疼痛，特別是神經病性和炎性痛，頭痛，痙攣；神經變性病症，例如阿爾茨海默病，帕金森病，癲癇，多動腿症候群，中風和腦缺血；認識病，例如輕度認知缺損(MCI)和精神病，包括抑鬱症，雙相性精神障礙(bipolar disorder)，躁狂，精神分裂症，精神病，焦慮和成癮。上述炎性病症包括侵害所有身體系統的炎症過程，例如骨骼肌系統的炎症過程，關節病，侵害皮膚和相關組織的病症；呼吸系統病症和免疫和內分泌系統病症。上述所有病理情況的更具體解釋在下文中給出。
本發明的描述 本申請的目的為一類新的2-[2-(苯基)乙氨基]烷醯胺衍生物，它們作為鈉和/或鈣通道調節劑具有高度活性並且基本上沒有任何MAO抑制活性或具有顯著降低的MAO抑制活性，且由此在預防、減輕和治癒廣泛病狀中具有潛在地減少了的副作用，所述病症包括但不限於神經病學的、認知、精神病學的、炎性、泌尿生殖和胃腸疾病，其中上述機理已被描述為扮演病理角色。
在本說明書和權利要求書中，措辭「鈉和/或鈣通道調節劑」表示能夠以電壓依賴性方式阻斷鈉和/或鈣電流的化合物。
因此，本發明的目的在於式(I)的化合物
其中 X為-O-，-S-或-SO2-； Y為氫，OH或O(C1-C4)烷基； Z為＝O或＝S； R為(C3-C10)烷基；ω-三氟(C3-C10)烷基； R1和R2獨立地為氫，羥基，(C1-C8)烷氧基，(C1-C8)烷硫基，滷素，三氟甲基或2，2，2-三氟乙基；或R1和R2之一位於R-X-的鄰位上，並且與同一R-X-共同表示

基團，其中R0為(C2-C9)烷基； R3和R′3獨立地為氫或(C1-C4)烷基； R4和R5獨立地為氫，(C1-C4)烷基；或R4為氫且R5為選自-CH2-OH，-CH2-O-(C1-C6)烷基，-CH(CH3)-OH，-(CH2)2-S-CH3，苄基和4-羥基苄基的基團；或R4和R5與相鄰碳原子共同構成(C3-C6)環烷基殘基； R6和R7獨立地為氫或(C1-C6)烷基；或與相鄰氮原子共同構成5-6元單環飽和雜環，其任選包含一個額外的選自-O-，-S-和-NR8-的雜原子，其中R8為氫或(C1-C6)烷基； 條件是當X為-S-或-SO2-時，Y不為OH或O(C1-C4)烷基； 如果可能，為分離形式的單一旋光異構體或其任意比例的混合物及其藥學上可接受的鹽。
儘管本申請中具體描述的某些化合物屬於WO 90/14334的通式範圍，但是它們中無一被該申請具體描述。本申請式(I)定義的化合物中無一在WO 90/14334中被具體描述或提及。事實上，僅極少2-(2-苯基-乙氨基)烷醯胺衍生物在所述在先對比文件中鑑定，然而，它們在苯基部分的4-位上帶有苄氧基，苄氨基或苄基取代基。
另外，本申請式(I)的下列選擇類型的化合物不屬於WO 90/14334的通式範圍 a)化合物，其中X為-SO2-； b)化合物，其中Y為OH或O(C1-C4)烷基； c)化合物，其中Z為＝S； d)化合物，其中R為(C9-C10)烷基或ω-三氟(C3-C10)烷基； e)化合物，其中R1和/或R2不為氫； f)化合物，其中R3和R′3均不為氫 g)化合物，其中R4和R5均不為氫，並且在與相鄰碳原子結合時也不構成(C3-C6)環烷基殘基； h)化合物，其中R6和R7與相鄰氮原子共同構成單環5-6元飽和雜環，其任選包含一個額外的選自-O-，-S-和-NR8-的雜原子，其中R8為氫或(C1-C6)烷基。
本說明書和權利要求書中所用的術語「烷基」，如果不在另外的部分中有具體說明，那麼認定為直鏈或支鏈烷基；所述基團或部分的實例包括甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，戊基，異戊基，己基，庚基，辛基，壬基，癸基及其異構體。
本說明書和權利要求書中所用的術語「烷氧基」認定直鏈或支鏈烷氧基；所述基團的實例包括甲氧基，乙氧基，丙氧基，異丙氧基，丁氧基，異丁氧基，叔-丁氧基，戊氧基，異戊氧基，己氧基，異己氧基，庚氧基，辛氧基及其異構體。
術語「(C3-C6)環烷基」認定為環脂族環；所述環的實例包括環丙基，環丁基，環戊基和環己基。
術語「滷素」表示滷原子基團，例如氟，氯，溴和碘。
任選包含一個選自-O-，-S-或-NR8-(其中R8為氫或(C1-C6)烷基)的額外的雜原子的單環5或6元飽和雜環的實例，例如為吡咯烷，吡唑烷，咪唑烷，噁唑烷，異噁唑烷，哌啶，哌嗪，N-甲基哌嗪，嗎啉和硫代嗎啉。
當本發明的化合物包含一個或多個不對稱碳原子且由此它們可以作為旋光異構體或其混合物存在時，本發明在其範圍內包括分離形式及其任意比例的混合物形式的所述化合物的所有可能的單一旋光異構體(例如對映體，非對映異構體)，包括外消旋混合物。
式(I)的化合物的藥學上可接受的鹽的實例為與有機酸和無機酸形成的鹽，所述的無機酸和有機酸例如為鹽酸，氫溴酸，氫碘酸，硝酸，硫酸，磷酸，乙酸，丙酸，酒石酸，富馬酸，檸檬酸，苯甲酸，琥珀酸、肉桂酸，扁桃酸，水楊酸，乙醇酸，乳酸，草酸，蘋果酸，馬來酸，丙二酸，富馬酸，酒石酸，對-甲苯磺酸，甲磺酸，戊二酸和其它例如可以在P.Heinrich Stahl，Camille G.Wermuth「Handbookof pharmaceutical saltsproperties，selection and use」，WILEY-VCH，2002中找到的酸. 式(I)的化合物作為鈉和/或鈣通道調節劑具有活性且由此用於預防，減輕和治癒廣泛的病理狀況，包括但不限於神經學的、認知、精神病學的、炎性、泌尿生殖和胃腸疾病，其中上述機理已被描述為扮演病理角色。
式(I)的優選化合物為化合物，其中 X為-O-，-S-； Y為氫，OH或O(C1-C3)烷基； Z為＝O或＝S； R為(C4-C7)烷基或ω-三氟(C4-C6)烷基； R1和R2獨立地為氫，(C1-C4)烷氧基，滷素，三氟甲基或2，2，2-三氟乙基；或R1和R2之一位於R-X-鄰位上，並且與同一R-X-共同表示

基團，其中R0為(C2-C5)烷基； R3和R′3獨立地為氫或(C1-C3)烷基； R4和R5獨立地為氫或(C1-C4)烷基；或R4為氫且R5為選自-CH2-CH、-CH2-O-(C1-C3)烷基、-(CH2)2-S-CH3、苄基和4-羥基苄基的基團； R6和R7獨立地為氫或(C1-C4)烷基；或與相鄰的氮原子共同構成5-6元單環飽和雜環，任選包含一個額外的選自-O-和-NR8-的雜原子，其中R8為氫或(C1-C3)烷基； 條件是當X為-S-時，Y不為OH或O(C1-C4)烷基； 如果可能，為分離形式的單一旋光異構體或其任意比例的混合物及其藥學上可接受的鹽。
式(I)的更優選的化合物為化合物，其中 X為-O-，-S-； Y為氫或O(C1-C3)烷基； Z為＝O或＝S； R為(C4-C7)烷基或ω-三氟(C4-C6)烷基； R1和R2獨立地為氫，(C1-C3)烷氧基，氟，氯，三氟甲基或2，2，2-三氟乙基；或R1和R2之一位於R-X-鄰位上並且與同一R-X-共同表示

基團，其中R0為(C3-C4)烷基； R3和R′3獨立地為氫或(C1-C3)烷基； R4和R5獨立地為氫或(C1-C4)烷基；或R4為氫且R5為選自-CH2-OH，-CH2-O-(C1-C3)烷基，苄基和4-羥基苄基的基團； R6和R7獨立地為氫或(C1-C3)烷基；或與相鄰氮原子共同構成5-6元單環飽和雜環，任選包含一個額外的選自-O-和-NR8-的雜原子，其中R8為氫或(C1-C3)烷基； 條件是當X為-S-時，Y不為O(C1-C4)烷基； 如果可能，為分離形式的單一旋光異構體或其任意比例的混合物及其藥學上可接受的鹽。
甚至更優選式(I)的化合物為那些化合物，其中 X為-O-； Y為氫； Z為＝O； R為(C4-C6)烷基； R1和R2獨立地為氫或滷素，優選氟； R3，R′3，R4和R5為氫； R6和R7獨立地為氫或(C1-C3)烷基； 如果可能，為分離形式的單一旋光異構體或其任意比例的混合物及其藥學上可接受的鹽； 最優選本發明式(I)的化合物選自 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-乙醯胺 2-[2-(3-戊氧基苯基)-乙氨基]-乙醯胺 2-[2-(3-己氧基苯基)-乙氨基]-乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N-甲基乙醯胺 2-[2-(3-戊氧基苯基)-乙氨基]-N-甲基乙醯胺 2-[2-(3-己氧基苯基)-乙氨基]-N-甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁硫基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁基磺醯基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基苯基)-(N′-羥基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基苯基)-(N′-甲氧基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基苯基)-(N′-丙氧基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基-硫代乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基苯基)-2-甲基丙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-{2-[3-(4，4，4-三氟丁氧基)苯基]-乙氨基}-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁硫基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基-2-氯苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基-2-氟苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基-4-甲氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基-4-甲基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基-2，4-二氟-4-甲基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基-2，6-二氟-4-甲基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二乙基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二丙基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二丁基乙醯胺 2-[2-(3-戊氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-己氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-1-吡咯烷-1-基-乙-1-酮 2-[2-(3-戊氧基苯基)-乙氨基]-1-吡咯烷-1-基-乙-1-酮 2-[2-(3-己氧基苯基)-乙氨基]-1-吡咯烷-1-基-乙-1-酮 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基丙醯胺 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-3-羥基-N，N-二甲基丙醯胺 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-3-甲氧基-N，N-二甲基丙醯胺 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-3-丙氧基-N，N-二甲基丙醯胺 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-2，N，N-三甲基丙醯胺 2-[2-(3-戊氧基苯基)-乙氨基]-2，N，N-三甲基丙醯胺 2-[2-(3-己氧基苯基)-乙氨基]-2，N，N-三甲基丙醯胺 (S)-2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-丙醯胺 (S)-2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N-甲基丙醯胺 (S)-2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基丙醯胺 (R)-2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-丙醯胺 (R)-2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N-甲基丙醯胺 (R)-2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基丙醯胺 2-[2-(3-丁氧基-2-三氟甲基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基-4-三氟甲基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 2-[2-(3-丁氧基-5-三氟甲基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 如果可能，為分離形式的單一旋光異構體或其任意比例的混合物及其藥學上可接受的鹽，優選其與鹽酸或甲磺酸形成的鹽。
按照更詳細描述在實驗部分中的常規操作製備本發明的化合物。
特別地，按照如下方案I中所示的合成方法製備為本發明目的的式(I)的大部分化合物，其中X為-O-且Y為氫 方案I
其中 R，R1，R2，R3，R′3，R4，R5，R6和R7具有與上述式(I)中定義的相同的含義，Ph表示苯基，boc為叔-丁氧羰基且EWG表示「吸電子基團」，例如，滷素或甲磺醯氧基或甲苯磺醯氧基或三氟甲磺酸酯基。Lawessons試劑為2，4-雙(4-甲氧基苯基)-1，3，2，4-二硫雜二磷雜環丁烷-2，4-二硫化物(The Merck Index，13th Ed.，5408，966頁)。
按照本發明的一個優選的實施方案，在有鹼存在下進行與R-EWG的烷基化反應，且更優選所述的鹼選自K2CO3，三乙胺和二異丙基乙胺。
用於製備式(I)的化合物的可替代方法，其中R，R1，R2，R3，R′3，R4，R5，R6和R7具有與式(I)中相同的含義，X為O且Y為氫，在於使下式的醛
與下式的α-氨基烷醯胺進行還原烷基化
還原劑可以選自NaBH4，NaBH3CN和氰基硼氫化(聚苯乙烯基甲基)-三甲基銨。
所得式(I)的2-[2-(苯基)乙氨基]烷醯胺化合物，其中Z為＝O，可以通過如方案I中所示用boc2O保護-NH-基團，使N-boc保護的衍生物與Lawesson試劑反應且最終用HCl脫保護被轉化成相應的化合物，其中Z為＝S。
作為這些方法的另一種可替代選擇，使式的胺
通過與下式的鏈烷酸酯反應烷基化
該反應在有鹼(例如三乙胺)存在下進行，並且使所得下式的鏈烷酸酯衍生物
與式HNR6R7的胺任選在有醯胺化催化劑(例如三甲基鋁)存在下反應而得到式(I)的化合物，其中Y為氫。
式(I)的化合物，其中R5為氫，任選可以被轉化成相應的式(I)的化合物，其中R5為(C1-C4)烷基，-CH2OH，-CH2-O-(C1-C6)烷基，-CH(CH3)-OH，-(CH2)2-S-CH3，苄基或4-羥基苄基，通過下列步驟進行用式EWGR5的烷基化試劑使上述式(I)化合物的N-保護的衍生物進行C-烷基化過程，其中EWG具有與上述相同的含義並且R5表示上述所列基團之一。在這種情況中，當式(I)的最終化合物為需要的，其中基團R5包含羥基部分時，通常使用試劑EWGR5，其中相應的羥基部分例如通過乙醯化被保護。
然後從所得C-烷基化化合物中除去所有保護基。
如果需要，當獲得游離鹼形式的式(I)的化合物時，可以通過常規操作將其轉化成其鹽(例如用鹽酸)。
按照如下方案II中所示的合成方法製備式(I)的化合物，其中X為S或SO2且Y為氫 方案II
其中 R，R1，R2，R3，R′3，R4，R5，R6和R7具有與式(I)中定義的相同的含義，boc為叔-丁氧羰基且EWG具有與上述相同的含義，「oxone」表示過氧化一硫酸鉀且Lawessons試劑為2，4-雙(4-甲氧基苯基)-1，3，2，4-二硫雜二磷雜環丁烷-2，4-二硫化物。
按照如下方案III中所示的合成方法製備式(I)的化合物，其中X為-O-且Y為OH或O(C1-C4)烷基 方案III
其中 R，R1，R2，R3，R′3，R4，R5，R6和R7具有與式(I)中定義的相同的含義，Ph表示苯基且EWG具有與上述相同的含義。Dress-Martinperiodinane參見Dess，D.B.；Martin，J.C.J.Am.Chem.Soc.，1991，113，7277。
方案I，II和III中使用的中間體為商購的或由商購化合物按照眾所周知的方法製備。
按照製備本發明化合物進行的反應評價任選保護的有用性和對合適的保護基的選擇和被保護的官能基屬於本領域技術人員的公知常識範圍。
任選的保護基的除去按照常規技術進行。
就一般涉及的保護基在有機化學中的應用而言參見Theodora W.Greene和Peter G.M.Wuts 「Protective groups in organicsynthesis」，John Wiley & Sons，Inc.，II Ed.，1991。
式(I)的化合物的鹽的製備按照公知方法進行。
為了製備式(I)的化合物的單一旋光異構體，可以通過空間受控的合成或通過使用具有適當手性的試劑或按照常規操作從其對映異構體混合物中分離所需的異構體獲得所述的化合物。
藥理學 本發明化合物可以用於製備具有鈉和/或鈣通道調節劑活性的藥物，用於由電壓門控鈉和/或鈣通道功能障礙導致的障礙。
這類化合物是鈉和/或鈣通道的電壓-依賴性阻斷劑，即使在低微摩爾範圍內也有效力，這得到鈉和/或鈣流入的阻斷(螢光測定法)和電流的電壓-依賴性阻斷(膜片箝技術)的證明。
將本發明有代表性的化合物的活性與已知來自WO 90/14334的化合物的活性進行比較，所述來自WO 90/14334的化合物已經在臨床上被研發用於治療應用，例如「ralfinamide」(S)-(+)-2-[4-(2-氟苄氧基)-苄氨基]-丙醯胺和/或「safinamide」(S)-(+)-2-[4-(3-氟苄氧基)-苄氨基]-丙醯胺。
Safinamide(NW-1015，FCE-26743A，PNU-151774E)為鈉通道阻斷劑，鈣通道調節劑，單胺氧化酶B(MAO-B)抑制劑，穀氨酸鹽釋放抑制劑和多巴胺代謝調節劑。
Safinamide用於治療CNS障礙，特別是癲癇，帕金森病，阿爾茨海默病，多動腿症候群(WO 90/14334，WO 04/089353，WO 05/102300)和認知障礙(EP Appl.N°06/012352.8)。
Ralfinamide(NW-1029，FCE-26742A，PNU-0154339E)為鈉和鈣通道抑制劑和NMDA受體調節劑用於治療通性疾患，包括急性和慢性類型的神經病性和炎性痛，偏頭痛，抑鬱症，心血管、炎性、泌尿生殖、代謝和胃腸道病症(WO 99/35125，WO 03/020273，WO 04/062655，WO05/018627，WO 05/070405，WO 06/02705)。
通過基於螢光的鈉流入測定法分別在ND7/23細胞系中(表1)和通過在大鼠皮質神經元中的電生理膜片鉗技術(表3)和在ND7/23細胞系(表4)中測定2-[2-(苯基)乙氨基]烷醯胺衍生物的鈉通道調節活性。
通過基於螢光的鈣流入測定法(表2)在AtT20細胞系中測定2-[2-(苯基)乙氨基]烷醯胺衍生物的鈣通道調節活性。
使用放射性酶測定法(表5)測定上述化合物在大鼠腦線粒體中的MAO-B活性。
在小鼠「福馬林試驗」中(表6)並且在大鼠「神經病性疼痛的脊神經結紮模型(SNL)」(

圖1)中評價上述化合物的體內止痛活性。使用大鼠「完全弗氏佐劑模型(CFA)」測定抗炎性疼痛活性。
使用小鼠「乙酸-誘發的內臟痛」模型測定抗內臟痛活性(圖2)。
使用小鼠「最大電休克試驗」測定抗驚厥活性(表7和表8)。
使用「苯丙胺和氯氮卓誘發的小鼠運動過多」模型(圖3)和「反常睡眠紊亂」大鼠模型測定抗躁狂活性。
使用「Morris水迷宮試驗」評價抗遺忘活性，其中用東莨菪鹼在大鼠中並且在大鼠「新目標認知試驗」中誘發健忘症。
為了研究化合物的抗抑鬱症活性，使用小鼠「尾部懸掛試驗」模型。
使用小鼠和大鼠「精神分裂症中的認知缺損試驗」和「驚恐前衝動抑制(PPI)」評價抗精神分裂症活性(圖4)。
使用大鼠「古柯鹼-誘發的行為敏感試驗」評價化合物的抗成癮活性。
將「大鼠的乙酸急性膀胱刺激」和「大鼠的環磷醯胺中等膀胱刺激」用作泌尿疾病的模型。
使用大鼠「偏頭痛試驗」測定抗偏頭痛活性。
在電生理膜片鉗研究中，這類物質也表現「使用與頻率-依賴性」，也就是當存在失活狀態通道的大量蓄積時在高頻刺激期間的阻斷的強化，例如在神經元病理條件中。在功能上，使用-依賴性阻斷導致神經元活動在高頻放電下的抑制，在正常放電速率下的阻斷能力降低，提示了本發明化合物可能選擇性地抑制鈉和/或鈣通道的異常活動，不影響生理活動，從而限制CNS抑制效應(W.A.Catterall，TrendsPharmacol.Sci.(1987)857-65)。
本發明有代表性的化合物之一為2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽(NW-3509)，發現他在幾乎所有體外和體內模型中均具有非常活性。
本發明的化合物在以0.1-100mg/kg在本文如下描述的不同動物模型中口服，腹膜內或靜脈內給藥時具有活性。
鑑於上述作用機理，本發明化合物可用於預防或治療神經病性疼痛。神經病性疼痛症候群包括但不限於糖尿病性神經病；坐骨神經痛；非特異性下背部疼痛；多發性硬化疼痛；纖維肌痛；HIV-相關性神經病；神經痛，例如皰疹後神經痛與三叉神經痛、Morton氏神經痛、灼痛；和由物理創傷、截肢、幻肢、癌症、中毒或慢性炎性病症導致的疼痛；中樞性疼痛，例如見於丘腦症候群，疼痛的混合中樞與外周形式，例如複合局部疼痛症候群(CRPS)，也稱反射交感神經營養不良。
本發明化合物也可用於治療慢性疼痛。慢性疼痛包括但不限於由炎症或炎性-相關病症、骨關節炎、類風溼性關節炎、急性損傷或創傷導致的慢性疼痛、上背部疼痛或下背部疼痛(由全身、局部或原發性脊柱疾病所致，例如神經根病)、骨疼痛(由骨關節炎、骨質疏鬆、骨代謝或未知原因引起)、骨盆疼痛、與脊髓損傷有關的疼痛、心胸疼痛、非心胸疼痛、中樞性中風後疼痛、肌筋膜疼痛、鐮狀細胞疼痛、癌症疼痛、法布裡氏病、AIDS疼痛、老年病性疼痛或者由頭痛、顳下頜關節症候群、痛風、纖維化或胸出口症候群導致的疼痛，特別是類風溼性關節炎和骨關節炎。
本發明化合物也可用於治療急性疼痛(由急性損傷、疾病、運動醫學損傷、腕管症候群、灼傷、肌與骨骼扭傷與勞損、肌腱勞損、頸臂疼痛症候群、消化不良、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、痛經、子宮內膜異位或手術(例如開心或旁路手術)導致、手術後疼痛、腎結石疼痛、膽囊疼痛、膽結石疼痛、分娩疼痛或牙痛。
本發明化合物也可用於治療頭痛、偏頭痛、緊張型頭痛、轉化性偏頭痛或進化性頭痛、簇性頭痛，以及繼發性頭痛症，例如從感染、代謝障礙或其他全身疾病衍生，和其他急性頭痛、發作性偏頭痛等，由上述原發性與繼發性頭痛的惡化所致。
本發明化合物也可用於治療神經病症，例如癲癇，包括單純性部分癲癇發作、複合性部分癲癇發作、繼發性泛化性癲癇發作，進一步包括失神性癲癇發作、肌痙攣性癲癇發作、陣攣性癲癇發作、緊張性癲癇發作、緊張性陣攣性癲癇發作和弛緩性癲癇發作。本發明化合物也可用於治療各種起源的神經變性障礙，包括阿爾茨海默病，帕金森病其他痴呆病症，例如利維小體、額-顳性痴呆和τ蛋白病；肌萎縮側索硬化和其他帕金森症候群；其他脊髓小腦變性和Charcot-Marie-Toot神經病，外傷性腦損傷，中風和腦缺血。
本發明化合物也可用於治療認知障礙和精神病學障礙。認知障礙的實例為輕度認知缺損(MCI)和與孤獨症，誦讀困難，注意力缺陷多動症，精神分裂症，強迫症，精神病，雙相性精神障礙，抑鬱症，圖雷特症候群和兒童、青少年和成人中的學習障礙相關的那些，與年齡相關的記憶缺陷，與年齡相關的認知下降，阿爾茨海默病，帕金森病，唐氏症候群，外傷性腦損傷，亨廷頓舞蹈病，進行性核上麻痺(PSP)，HIV，中風，血管疾病，皮克病或克-雅病，多發性硬化(MS)和其它白質病症和藥物-誘發的認知惡化。精神病學障礙包括但不限於重症抑鬱、情感淡漠、心境惡劣、躁狂、雙相性精神障礙(例如I型雙相性精神障礙、II型雙相性精神障礙)、循環性精神障礙、快速循環、極端循環、躁狂、輕症躁狂、精神分裂症、精神分裂症樣精神障礙、分裂情感性精神障礙、人格障礙、伴有或沒有多動行為的注意力障礙、妄想症、短暫性精神病、分享性精神病、由一般醫學病症引起的精神病、物質-誘發的精神病或者沒有其它指定的精神病，焦慮症，例如泛化性焦慮症，恐慌症、創傷後緊張症、衝動控制障礙、恐怖症、分離狀態，尤其在吸菸、藥物成癮和酒精中毒。特別是雙相性精神障礙、精神分裂症、精神病、焦慮和成癮。
本發明化合物抑制影響所有機體系統的炎性過程。因此可用於治療肌肉-骨骼系統的炎性過程，下面是所有靶障礙實例的列表而非全部關節炎症，例如強直性脊椎炎、宮頸關節炎、纖維肌痛、痛風、青少年類風溼性關節炎、腰骶關節炎、骨關節炎、骨質疏鬆、牛皮癬性關節炎、風溼病；影響皮膚和相關組織的障礙溼疹、牛皮癬、皮炎和炎性病症，例如曬傷；呼吸系統的障礙哮喘、變應性鼻炎和呼吸窘迫症候群，其中牽涉有炎症的肺障礙，例如哮喘和支氣管炎；慢性阻塞性肺疾病；免疫和內分泌系統的障礙結節性關節周炎、甲狀腺炎、再生障礙性貧血、硬化病、重症肌無力、多發性硬化和其他脫髓鞘障礙、腦脊髓炎、肉樣瘤病、腎炎症候群、貝切特症候群、多肌炎、齒齦炎。
本發明化合物也可用於治療胃腸(GI)道障礙，例如炎性腸障礙，包括但不限於潰瘍性結腸炎、克羅恩氏病、迴腸炎、直腸炎、腹腔疾病、腸病、微觀或膠原性結腸炎、嗜曙紅細胞性胃腸炎、或者直腸結腸切除術後和迴腸吻合術後導致的盲腸炎，和腸易激症候群，包括任何與腹部疼痛和/或腹部不適有關的障礙，例如幽門痙攣、神經性不消化、痙攣性結腸、痙攣性結腸炎、痙攣性腸、小腸神經機能病、功能性結腸炎、粘液性結腸炎、輕瀉性結腸炎和功能性消化不良；也用於治療萎縮性胃炎、變形性胃炎、潰瘍性結腸炎、消化性潰瘍、胃熱(pyresis)和其他GI道損傷，例如幽門螺桿菌、胃食管反流疾病、胃輕癱，例如糖尿病性胃輕癱；和其他功能性腸障礙，例如非潰瘍性消化不良(NUD)；嘔吐、腹瀉和內臟炎症。
發明化合物也可用於治療生殖-泌尿道的障礙，例如活動過度性膀胱、前列腺炎(慢性細菌性和慢性非細菌性前列腺炎)、前列腺痛、間質性膀胱炎、尿失禁與良性前列腺增生、子宮附件炎、骨盆炎症、前庭大腺炎和陰道炎。特別是活動過度性膀胱和尿失禁。
將被領會的是，本發明化合物可以有利地與一種或以上其他治療劑結合使用。適合於附屬療法的藥物實例包括5-羥色胺受體調節劑，包括5HT1B/1D激動劑，例如曲坦類(例如舒馬普坦或那拉曲坦)；腺苷A1激動劑；腺苷A2拮抗劑；嘌呤能P2X拮抗劑；EP配體；NMDA調節劑，例如甘氨酸拮抗劑；AMPA調節劑；P物質拮抗劑(例如NK1拮抗劑)；大麻素；菸鹼受體激動劑；α-1或2腎上腺素能激動劑；對乙醯氨基酚或非那西汀；5-脂氧合酶抑制劑；白三烯受體拮抗劑；DMARD(例如甲氨蝶呤)；加巴噴丁、普瑞巴林和相關化合物；L-多巴和/或多巴胺激動劑；兒茶酚-O-甲基轉移酶抑制劑；三環抗抑鬱劑(例如阿米替林)；神經元穩定性抗癲癇藥；單胺能攝取抑制劑(例如文拉法辛)；基質金屬蛋白酶抑制劑；一氧化氮合成酶(NOS)抑制劑，例如iNOS或nNOS抑制劑；自由基清除劑；α-突觸核蛋白聚集抑制劑；膽鹼酯酶抑制劑、膽固醇降低劑；α-分泌酶調節劑；β-分泌酶調節劑；β-澱粉樣蛋白聚集抑制劑；腫瘤壞死因子α釋放或作用抑制劑；抗體療法，例如單克隆抗體療法；抗病毒劑，例如核苷抑制劑(例如拉米夫定)或免疫系統調節劑(例如幹擾素)；阿片類止痛劑，例如嗎啡；類香草醛受體激動劑和拮抗劑；止痛劑，例如環加氧酶-1和/或環加氧酶-2抑制劑；局部麻醉劑，例如利多卡因和衍生物；興奮劑，包括咖啡因；H2-拮抗劑(例如雷尼替丁)；質子泵抑制劑(例如奧美拉唑)；抗酸劑(例如鋁或鎂的氫氧化物)；抗胃腸氣脹藥(例如semethicone)；減充血劑(例如苯福林、苯丙醇胺、偽麻黃鹼、羥甲唑啉、腎上腺素、萘唑啉、賽洛唑啉、丙己君或左脫氧麻黃鹼)；鎮咳劑(例如可待因、氫可酮、carmiphen、噴託維林或右美沙芬)；利尿劑；或鎮靜性或非鎮靜性抗組胺劑；抗精神病藥，包括典型和非典型抗精神病藥物(例如氟哌啶醇，利培酮，氯氮平)；抗抑鬱藥，例如選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑，5-羥色胺和去甲腎上腺素再攝取抑制劑，MAO抑制劑和三環抗抑鬱藥；情緒穩定劑(例如鋰，拉莫三嗪，丙戊酸鹽)；抗焦慮藥(例如苯二氮卓類，丁螺環酮，β腎上腺素能受體拮抗劑)；嗎啡或嗎啡衍生物；其他鈣或鈉通道阻斷劑。
可以理解的是，本發明涵蓋式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽與一種或多種治療劑組合的應用， 本發明化合物可用於人和獸醫藥物。可以理解的是，本文所用的術語「治療」無論是否具體定義，包括病理病變的預防、減輕和治癒，確切而言，它們包括既定症狀的治療和預防性治療。治療性或預防性用在上述病變中的本發明化合物將被優選地用作藥物組合物中的活性成分。
因此，本發明的進一步目標是藥物組合物，含有治療有效量的本發明化合物或其鹽，混合有藥學上可接受的載體。
因此，措辭「治療有效的」在表示本發明化合物的「量」或「劑量」時，表示任何所述化合物足以用於既定症狀治療和上述病理病變的預防性治療的「量」或「劑量」。
本發明的藥物組合物客體可以在多種即時與改性釋放的劑型中給藥，例如口服方式，劑型為片劑、錠劑、膠囊劑、糖衣或膜衣片劑、液體溶液、乳液或懸浮液；直腸方式，劑型為栓劑；非腸道方式，例如肌內和/或儲庫製劑；靜脈內注射或輸注；局部和透皮方式，劑型為貼劑和凝膠和霜劑。
適合於製備這類組合物的藥學上可接受的、治療惰性的有機和/或無機載體材料例如包括水、明膠、阿拉伯膠、乳糖、澱粉、纖維素、硬脂酸鎂、滑石粉、植物油、環糊精、聚亞烷基二醇等。
包含如上定義的式(I)苯基乙基氨基衍生物的組合物可以被滅菌，並且可以含有其他熟知的組分，例如防腐劑、穩定劑、溼潤或乳化劑，例如石蠟油、二縮甘露醇單油酸酯、調節滲透壓的鹽、緩衝劑等。
例如，除了活性成分以外，固體口服劑型還可以含有稀釋劑，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、纖維素、玉米澱粉或馬鈴薯澱粉；潤滑劑，例如二氧化矽、滑石粉、硬脂酸、鎂或鈣的硬脂酸鹽，和/或聚乙二醇；粘合劑，例如澱粉、阿拉伯膠、明膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素或聚乙烯吡咯烷酮；崩解劑，例如澱粉、藻酸、藻酸鹽或澱粉乙醇酸鈉；泡騰混合物；染料；甜味劑；溼潤劑，例如卵磷脂、聚山梨醇酯、月桂基硫酸鹽；和一般用在藥物製劑中的無毒的與無藥理活性的物質。所述藥物製劑可以按已知方式製備，例如藉助混合、造粒、壓片、糖包衣或膜包衣過程。
本發明的藥物組合物目標的製備可以按照普通技術進行。
口服製劑包含持續釋放製劑，這可以按常規方式製備，例如向片劑和顆粒劑塗以腸溶衣。
口服給藥用液體分散體例如可以是糖漿、乳液和懸浮液。
糖漿可以含有作為載體的例如蔗糖或蔗糖與甘油和/或甘露糖醇和/或山梨醇。
懸浮液和乳液可以含有作為載體的例如天然樹膠、瓊脂、藻酸鈉、果膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素或聚乙烯醇。除了活性化合物以外，肌內注射用懸浮液或溶液還可以含有藥學上可接受的載體，例如無菌水、橄欖油、油酸乙酯、二醇類，例如丙二醇，和如果需要的話適量鹽酸利多卡因。靜脈內注射或輸注溶液可以含有作為載體的例如無菌水，或者優選地它們可以是無菌、水性、等滲鹽水溶液的形式。
除了活性成分以外，栓劑還可以含有藥學上可接受的載體，例如可可脂、聚乙二醇、聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯表面活性劑或卵磷脂。
包含如上定義的式I苯基乙基氨基衍生物的組合物將在每劑量單元中、例如膠囊劑、片劑、乾粉注射劑、茶匙、栓劑等，含有0.1mg至約500mg的一種或多種活性成分，最優選1至10mg。
所要給予的最佳治療有效劑量可以由本領域技術人員來決定，並且基本上將因製劑濃度、給藥的方式和所治療的病症或障礙的進展而異。另外，與特定受治療者有關的因素、包括受治療者的年齡、體重、飲食和給藥時間，也將需要調節劑量至適當的治療有效水平。
可以理解的是，儘管結合其優選的實施方式描述了發明，不過本領域技術人員知曉能夠實現其他實施方式，而不背離發明的精神。
實驗部分 利用Varian Gemini 200MHz光譜計，在CDCl3或DMSO-d6溶液中測定1H-NMR光譜。化學位移用CDCl3或DMSO-d6定義為δ，以D2O為內標。
利用與UV檢測器(220nm)偶聯的X-Terra RP18柱(5μm，4.6x50mm)和Finnigan Aqa質譜計(電噴射，陽性電離模式)，在Gilson儀器中測定HPLC/MS分析。用於分析的條件流速1.2ml/min；柱溫50℃；A/B洗脫梯度(洗脫劑A0.1％甲酸水溶液，洗脫劑B0.1％甲酸乙腈溶液)0至8.0分鐘為5-95％B，8.0至9.5分鐘為95％B。
為了更好地闡述發明，現在給出下列實施例。
實施例1 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 按照方案I合成該化合物。
步驟12-(3-羥基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙胺 方法A 向2-(3-苄氧基苯基)-乙胺鹽酸鹽(12.6g，47.7mmol)在H2O(120ml)和1M NaOH(95ml)中的混懸液中滴加boc2O(15.6g，71.5mmol)在THF(120ml)中的溶液並且在室溫下攪拌該混合物。16小時後，在減壓下除去有機溶劑並且用CH2Cl2(2×100ml)萃取該混合物。用Na2SO4乾燥收集的有機相，過濾該溶液並且在減壓下蒸發溶劑而得到粗油，將其不經進一步純化使用。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.47-7.28(m，5H)，7.22(m，1H)，6.87-6.77(m，3H)，5.05(s，2H)，4.52(bs，1H)，3.38(dt，J＝6.5Hz，J＝6.5Hz，2H)，2.77(t，J＝7.1Hz，2H)，1.44(s，9H)。ESI+MS對C20H25NO3的計算值327.43；測定值328.1(MH+)。
在35psi下和Parr儀中將步驟1中獲得的2-(3-苄氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙胺和在MeOH(240ml)中的10％Pd/C(1.3g)氫化16小時。通過用C鹽(Celite)墊過濾除去催化劑並且在減壓下蒸發溶劑。將粗油不經進一步純化使用。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.19(dd，J＝7.8Hz，J＝7.8Hz，1H)，6.82-6.66(m，3H)，4.56(b s，1H)，3.39(dt，J＝7.0Hz，J＝6.3Hz，2H)，2.76(t，J＝7.0Hz，2H)，1.46(s，9H)。ESI+MS對C13H19NO3的計算值237.30；測定值238.2(MH+)。
方法B 將33％HBr在乙酸中的溶液(150ml)冷卻至0℃並且逐步加入3-甲氧基苯乙胺(10.0g，66.0mmol)。將該混合物加熱至80℃並且攪拌16小時。在減壓下蒸發溶劑並且將殘餘物溶於水(160ml)。加入4M NaOH(15ml)，隨後加入2M NaOH(130ml)。滴加boc2O(15.8g，72.6mmol)在THF(160ml)中的溶液並且將該混合物在室溫下攪拌16小時。分離所得混合物上部的有機層並且用CH2Cl2(3×100ml)萃取水層。用Na2SO4乾燥合併的有機溶液，過濾並且在減壓下蒸發溶劑。得到粗的標題化合物(16.8g)，為棕色樹膠，將其不經進一步純化用於隨後的步驟。
ESI+MS對C13H19NO3的計算值237.3；測定值182.1(MH+-叔-丁基，主要碎片)。
步驟22-(3-丁氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙胺 向步驟1中獲得的2-(3-羥基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙胺在丙酮中的溶液(240ml)中加入K2CO3(19.8g)和1-溴丁烷(15ml)。將該混懸液回流3天並且在減壓下蒸發溶劑。將殘餘物溶於H2O(200ml)並且用CH2Cl2(2×200ml)萃取。在減壓下除去溶劑並且通過快速色譜法純化殘餘物(石油醚/EtOAc 85∶15)而得到1(11.3g，3步內81％)標題化合物，為無色的油。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.22(dd，J＝7.6Hz，J＝7.6Hz，1H)，6.81-6.72(m，3H)，4.55(bs，1H)，3.97(t，J＝6.3Hz，2H)，3.39(dt，J＝6.5Hz，J＝6.5Hz，2H)，2.78(t，J＝7.1Hz，2H)，1.78(m，2H)，1.51(m，2H)，1.45(s，9H)，0.99(t，J＝7.3Hz，3H)。
ESI+MS對C17H27NO3的計算值293.41；測定值294.1(MH+)。
步驟32-[2-(3-丁氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 向在0℃下冷卻的NaH(60％，2.0g，51mmol)在幹DMF(125ml)中的混懸液中滴加2-(3-丁氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙胺(7.5g，25.5mmol)在幹DMF(125ml)中的溶液。在室溫下1小時後，加入2-氯-N，N-二甲基乙醯胺(5.2ml，51mmol)並且將該混合物在室溫下攪拌16小時。加入H2O(10ml)並且在減壓下蒸發溶劑。將殘餘物溶於H2O(150ml)並且用CH2Cl2(2×150ml)萃取。用Na2SO4乾燥收集的有機相，過濾並且蒸發。通過快速色譜法純化粗產物(石油醚/EtOAc 4∶6)而得到標題化合物(7.2g，75％)，為淡黃色油狀物。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ7.1(m，1H)，6.79-6.71(m，3H)，3.97(t，J＝6.0Hz，2H)，3.96(s，2H)，3.40(dd，J＝8.7Hz，J＝7.2Hz，2H)，2.88(s，6H)，2.76(dd，J＝7.9Hz，J＝6.4Hz，2H)，1.76(m，2H)，1.46(m，2H)，1.37(s，9H)，0.95(t，J＝7.3Hz，3H)。
ESI+MS對C21H34N2O4的計算值378.52；測定值379.0(MH+)。
步驟42-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 將2-[2-(3-丁氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺(9.6g，25.3mmol)在HCl/Et2O(127ml)中的溶液在室溫下攪拌16小時。在減壓下蒸發溶劑，將殘餘物與Et2O/iPr2O 50/50的混合物一起研磨，過濾並且用Et2O/iPr2O洗滌而得到標題化合物，為白色固體(1，71g，產率95％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.63(br.s.，1H)，7.23(dd，1H)，6.83-6.91(m，2H)，6.80(ddd，1H)，3.96(s，2H)，3.96(t，2H)，3.32-3.44(m，2H)，3.22-3.32(m，2H)，2.97(s，6H)，1.70-1.83(m，2H)，1.41-1.58(m，2H)，0.99(t，3H)。
ESI+MS對C16H26N2O2的計算值278.40；測定值279.3(MH+)。
類似地，以適當的中間體開始製備下列化合物 2-{2-[3-(4，4，4-三氟丁氧基)苯基]-乙氨基}-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.00(br.s.，2H)，7.17-7.32(m，1H)，6.78-6.94(m，3H)，4.04(br.s.，2H)，3.91-4.20(m，2H)，3.08-3.22(m，2H)，2.93-3.00(m，2H)，2.94(s，3H)，2.90(s，3H)，2.30-2.48(m，2H)，1.78-2.05(m，2H)。
ESI+MS對C16H23F3N2O2(游離鹼)的計算值332.27；測定值333.25(MH+)。
2-[2-(3-戊氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.03(brs，2H)，7.14-7.29(m，1H)，6.70-6.88(m，3H)，4.03(s，2H)，3.95(t，2H)，3.06-3.21(m，2H)，2.94(s，3H)，2.90(s，3H)，2.81-3.02(m，2H)，1.62-1.80(m，2H)，1.23-1.48(m，4H)，0.90(t，3H)。
ESI+MS對C17H28N2O2(游離鹼)的計算值292.42；測定值293.25(MH+)。
2-[2-(3-己氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.01(brs，2H)，7.23(dd，1H)，6.65-6.93(m，3H)，4.03(s，2H)，3.95(t，2H)，3.05-3.24(m，2H)，2.94(s，3H)，2.91-3.01(m，2H)，2.90(s，3H)，1.57-1.84(m，2H)，1.35-1.51(m，2H)，1.22-1.36(m，4H)，0.70-1.01(m，3H)。
ESI+MS對C18H30N2O2(游離鹼)的計算值306.45；測定值307.32(MH+)。
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二丙基乙醯胺鹽酸鹽 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.88(br.s.，2H)，7.15-7.30(m，1H)，6.68-6.88(m，3H)，4.02(s，2H)，3.96(t，2H)，3.23-3.28(m，2H)，3.09-3.22(m，4H)，2.87-2.98(m，2H)，1.62-1.75(m，2H)，1.35-1.62(m，6H)，0.94(t，3H)，0.85(dt，6H)。
ESI+MS對C20H34N2O2(游離鹼)的計算值334.50；測定值335.34(MH+)。
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二丁基乙醯胺鹽酸鹽 1H NMR(300MHz，DMSO-d6+TFA)δ8.85(br.s.，2H)，7.19-7.28(m，1H)，6.62-6.88(m，3H)，4.01(t，2H)，3.96(t，2H)，3.30(t，2H)，3.06-3.24(m，4H)，2.85-3.00(m，2H)，1.61-1.82(m，2H)，1.40-1.55(m，6H)，1.20-1.38(m，4H)，0.94(t，6H)，0.89(t，3H)。ESI+MS對C20H38N2O2(游離鹼)的計算值362.55；測定值363.35(MH+)。
2-[2-(3-戊氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二丙基乙醯胺鹽酸鹽 1H NMR(300MHz，DMSO-d6+Na2CO3)δ7.50(br.s.，1H)7.07-7.24(m，1H)6.62-6.83(m，3H)3.93(t，2H)3.06-3.22(m，5H)2.58-2.81(m，5H)1.62-1.78(m，2H)1.28-1.56(m，8H)0.68-0.99(m，9H)。
ESI+MS對C21H36N2O2(游離鹼)的計算值348.53；測定值349.28(MH+)。
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-乙醯胺鹽酸鹽 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.96(brs，2H)，7.87(brs，1H)，7.54(brs，1H)，7.23(dd，1H)，6.58-6.83(m，3H)，3.96(t，2H)，3.70(s，2H)，3.04-3.18(m，2H)，2.82-3.01(m，2H)，1.57-1.80(m，2H)，1.32-1.54(m，2H)，0.81-1.04(m，3H)。
ESI+MS對C14H22N2O2的計算值250.34；測定值251.1(MH+)。
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N-甲基乙醯胺鹽酸鹽 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.99(brs，2H)，8.39(q，1H)，7.08-7.37(m，1H)，6.65-6.95(m，3H)，3.96(t，2H)，3.70(s，2H)，3.04-3.25(m，2H)，2.79-3.04(m，2H)，2.67(d，3H)，1.57-1.82(m，2H)，1.44(sxt，2H)，0.94(t，3H)。
BSI+MS對C15H24N2O2的計算值264.37；測定值265.2(MH+)。1H 2-[2-(3-異丙氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.04(brs，2H)，7.12-7.32(m，1H)，6.70-6.81(m，3H)，4.60(spt，1H)，4.03(s，2H)，3.04-3.21(m，2H)，2.94(s，3H)，2.91-3.01(m，2H)，2.90(s，3H)，1.26(d，6H)。
ESI+MS對C15H24N2O2的計算值264.37；測定值265.2(MH+)。
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二乙基乙醯胺鹽酸鹽 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.89 8.98(brs，2H)，7.24(dd，1H)，6.72-6.88(m，3H)，4.03(s，2H)，3.96(t，2H)，3.34(q，2H)，3.26(q，2H)，3.08-3.21(m，2H)，2.86-3.03(m，2H)，1.59-1.78(m，2H)，1.33-1.54(m，2H)，1.13(t，3H)，1.07(t，3H)，0.94(t，3H)。
ESI+MS對C18H30N2O2的計算值306.45；測定值307.2(MH+)。
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-1-吡咯烷-1-基-乙酮 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.94(s，2H)，7.14-7.33(m，1H)，6.64-6.93(m，3H)，4.00(t，2H)，3.88(s，2H)，3.33-3.45(m，4H)，3.19-3.29(m，2H)，2.96-3.05(m，2H)，1.78-2.00(m，4H)，1.65-1.78(m，2H)，1.37-1.56(m，2H)，0.96(t，3H)。
ESI+MS對C18H28N2O2的計算值304.44；測定值305.2(MH+)。
2-[2-(3-丁氧基-4-氟苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.91(brs，2H)7.15(dd，1H)7.05(dd，1H)6.79(ddd，1H)3.97-4.12(m，4H)3.09-3.21(m，2H)2.94(s，3H)2.92-2.99(m，2H)2.90(s，3H)1.65-1.82(m，2H)1.36-1.54(m，2H)0.87-1.01(m，3H)。
ESI+MS對C16H25FN2O2(游離鹼)的計算值296.38；測定值297.22(MH+)。
2-[2-(3-丁氧基-4-甲氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.97(brs，2H)，6.90(d，1H)，6.84(d，1H)，6.74(dd，1H)，4.02(br s，2H)，3.94(t，2H)，3.73(s，3H)，3.04-3.22(m，2H)，2.94(s，3H)，2.90(s，3H)，2.84-2.92(m，2H)，1.57-1.84(m，2H)，1.44(sxt，2H)，0.94(t，3H)。
ESI+MS對C17H28N2O3(游離鹼)的計算值308.42；測定值309.21(MH+)。
實施例2 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-2，N，N-三甲基丙醯胺鹽酸鹽 步驟12-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-2-甲基丙酸乙酯 向2-(3-丁氧基苯基)-乙胺鹽酸鹽(0.27g，1.42mmol；按照實施例1步驟4中所述的標準操作獲自實施例1步驟2的化合物)在乙腈(8ml)中的溶液中加入2-溴-2-甲基丙酸乙酯(0.27ml，1.85mmol)和三乙胺(0.52ml，3.70mmol)。將該溶液在100℃下在微波照射中加熱3h。將該混合物冷卻至室溫並且使其分配在水與CH2Cl2之間。分離有機層，用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，過濾並且在減壓下蒸發溶劑。通過快速色譜法純化殘餘物(二氧化矽，CH2Cl2∶MeOH從100∶0到95∶5)而得到標題化合物(0.17g，39％產率)，為無色的油。
ESI+MS對C18H29NO3的計算值307.44；測定值308.2(MH+)。
步驟22-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-2，N，N-三甲基丙醯胺鹽酸鹽 向甲苯(3ml)的THF(0.6ml，1.1mmol)中的2M二甲胺溶液中加入在己烷中的2M三甲基鋁(1.4ml，2.77mmol)並且將該混合物在室溫下攪拌15分鐘。加入在幹甲苯(8ml)中的2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-2-甲基-丙酸乙酯(0.17g，0.55mmol)並且將該溶液加熱至90℃並且攪拌24h。將該混合物冷卻至室溫並且在減壓下除去溶劑。使殘餘物分配在水與乙醚之間。分離有機層，用鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，過濾並且在減壓下蒸發溶劑。通過快速色譜法純化殘餘物(第一次純化二氧化矽，CH2Cl2∶MeOH從100∶0至97∶3；第二次純化二氧化矽，EtOAc)而得到標題化合物，將其溶於HCl/Et2O並且攪拌20分鐘。過濾所得鹽酸鹽，用iPr2O洗滌並且在40℃下和真空中乾燥。得到純的標題化合物(18.5mg，20％產率)，為白色固體。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ9.39(bs，2H)，7.24(t，1H)，6.71-6.97(m，3H)，3.97(t，2H)，3.13-3.36(m，4H)，3.09(s，6H)，1.90(s，6H)，1.69-1.86(m，2H)，1.51(sxt，2H)，0.99(t，3H)。
ESI+MS對C18H30N2O2的計算值306.45；測定值307.32(MH+)。
實施例3 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基丙醯胺鹽酸鹽 步驟12-[2-(3-丁氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-N，N-二甲基丙醯胺 將2-[2-(3-丁氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺(0.410g，1.1mmol；按照實施例1步驟3製備)在幹THF(5ml)中的溶液冷卻至-78℃並且滴加在THF中的1M LiHMDS(六甲基二矽氮化鋰(lithium hexamethyl disilazide))(1.43ml，1.4mmol)。將該混合物攪拌30min，然後滴加甲基碘(0.187g，1.3mmol)在幹THF(1ml)中的溶液。將該混合物攪拌2小時，允許中斷冷卻浴。在減壓下蒸發溶劑並且將殘餘物溶於EtOAc(15ml)並且用水(2×15ml)洗滌。用Na2SO4乾燥有機相，過濾並且在減壓下蒸發溶劑。通過快速色譜法純化殘餘物(二氧化矽，石油醚∶EtOAc從8∶2至6∶4)而得到標題化合物(0.22g，52％產率)，為無色的油。
ESI+MS對C22H36N2O4的計算值392.54；測定值393.3(MH+)。
步驟22-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基丙醯胺鹽酸鹽 按照實施例1步驟4中所述的標準操作由2-[2-(3-丁氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-N，N-二甲基-丙醯胺製備標題化合物。白色固體(47％產率)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.16(brs，1H)，8.82(brs，1H)，7.14-7.31(m，1H)，6.64-6.93(m，3H)，4.39(q，1H)，3.96(t，2H)，3.08-3.22(m，1H)，3.00(s，3H)，2.96-3.06(m，1H)，2.87-2.96(m，2H)，2.90(s，3H)，1.59-1.82(m，2H)，1.37-1.53(m，2H)，1.38(d，3H)，0.94(t，3H)。
ESI+MS對C17H28N2O2(游離鹼)的計算值292.42；測定值293.25(MH+)。
實施例4 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-3-羥基-N，N-二甲基丙醯胺鹽酸鹽 步驟12-[2-(3-丁氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-3-乙醯氧基-N，N-二甲基-丙醯胺 按照施例3步驟1由[2-[2-(3-丁氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺和乙酸溴甲酯製備標題化合物。無色的油(38％產率)。
ESI+MS對C24H38N2O6(游離鹼)的計算值450.58；測定值451.2(MH+)。
步驟22-[2-(3-丁氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-3-羥基-N，N-二甲基-丙醯胺 將2-[2-(3-丁氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-3-乙醯氧基-N，N-二甲基丙醯胺(0.19g，0.42mmol)溶於3％NH4OH/MeOH(15ml)並且在室溫下攪拌5小時。在減壓下蒸發溶劑並且通過快速色譜法純化殘餘物(二氧化矽，石油醚∶EtOAc從7∶3到3∶7)而得到標題化合物(0.13g，66％產率)，為無色的油。
ESI+MS對C22H36N2O5的計算值408.54；測定值409.2(MH+)。
步驟32-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-3-羥基-N，N-二甲基丙醯胺鹽酸鹽 按照施例1步驟4由2-[2-(3-丁氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-3-乙醯氧基-N，N-二甲基丙醯胺製備標題化合物。作為白色固體獲得(76％產率)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.46-9.44(m，2H)7.10-7.33(m，1H)6.65-6.92(m，3H)5.54(t，1H)4.44(t，1H)3.95(t，2H)3.65-3.88(m，2H)3.11-3.22(m，1H)3.03-3.09(m，1H)3.02(s，3H)2.91-2.99(m，2H)2.90(s，3H)1.61-1.79(m，2H)1.35-1.53(m，2H)0.86-1.00(m，3H)。
ESI+MS對C17H28N2O3(游離鹼)的計算值308.42；測定值309.21(MH+)。
實施例5 2-[2-(3-丁氧基-4-甲基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 步驟1(3-羥基-4-甲基苯基)-乙腈 向冷卻至-78℃的3-甲氧基-4-甲基苯基乙腈(2.0g，12.4mmol)在幹CH2Cl2(50ml)中的溶液中滴加在CH2Cl2中的BBr3 1M(27ml，27mmol)。將該混合物攪拌過夜，允許切斷冷卻浴。將該混合物在攪拌下緩慢傾入冰/水。當冰熔化時，用EtOAc萃取水相併且用Na2SO4乾燥有機相，過濾並且在減壓下蒸發溶劑。將粗的標題化合物(1.7g，93％產率)不經進一步純化用於下一步。
步驟2(3-丁氧基-4-甲基苯基)-乙腈 向(3-羥基-4-甲基苯基)-乙腈(1.7g，11.5mmol)在丙酮(100ml)中的溶液中加入K2CO3(7.9g，57.5mmol)和1-溴丁烷(6.1ml，57.5mmol)。將該混懸液回流24小時並且在減壓下蒸發溶劑。將殘餘物溶於CH2Cl2並且用水和鹽水洗滌。用Na2SO4乾燥有機層，過濾並且在減壓下蒸發溶劑。通過快速色譜法純化粗產物(石油醚∶EtOAc 9.5∶0.5)而得到標題化合物(1.43g，61％產率)，為無色的油。
ESI+MS對C13H17NO的計算值203.29；測定值204.1(MH+)。
步驟3N-[2-(3-丁氧基-4-甲基苯基)-乙基]-氨基甲酸叔-丁酯 向3-(3-丁氧基苯基)-丙腈(0.94g，5.0mmol)在甲醇(38ml)中的溶液中加入氯化鎳六水合物(0.12g，0.5mmol)和boc2O(2.18g，10.0mmol)。將該溶液冷卻至0℃並且在30分鐘內逐步加入硼氫化鈉(1.32g，35.0mmol)。將該混合物攪拌過夜，允許中斷冷卻浴。通過添加二亞乙基三胺(0.54ml，5mmol)使反應停止並且攪拌30分鐘。在減壓下除去溶劑並且將殘餘物再溶於EtOAc，用水洗滌，用Na2SO4乾燥，過濾並且在減壓下蒸發溶劑。通過快速色譜法純化粗產物(二氧化矽，石油醚∶EtOAc 90∶10)而得到標題化合物。無色的油(80％產率)。ESI+MS對C18H29NO3的計算值307.44；測定值308.1(MH+)。
步驟42-[2-(3-丁氧基-4-甲基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 按照實施例1步驟3和4中所述的標準操作由[2-(3-丁氧基-4-甲基苯基)-乙基]-氨基甲酸叔-丁酯製備標題化合物。作為白色固體獲得。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.93(brs，2H)，7.08(dd，1H)，6.79(d，1H)，6.69(dd，1H)，4.03(s，2H)，3.97(t，2H)，3.08-3.19(m，2H)，2.93(s，3H)，2.91-2.97(m，2H)，2.90(s，3H)，2.11(s，3H)，1.65-1.79(m，2H)，1.39-1.54(m，2H)，0.95(t，3H)。
ESI+MS對C17H28N2O2(游離鹼)的計算值292.42；測定值293.25(MH+)。
類似地，以(2，6-二氟-3-甲氧基苯基)-乙腈開始製備下列化合物 2-[2-(3-丁氧基-2，6-二氟苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.16(brs，2H)，7.07-7.18(m，1H)，6.96-7.07(m，1H)，4.07(s，2H)，4.02(t，2H)，3.08(s，4H)，2.93(s，3H)，2.90(s，3H)，1.63-1.76(m，2H)，1.36-1.51(m，2H)，0.93(t，3H)。
ESI+MS對C16H24F2N2O2(游離鹼)的計算值314.37；測定值315.20(MH+)。
實施例6 2-[2-(3-丁氧基苯基)-2-甲基丙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 步驟12-(3-甲氧基苯基)-2-甲基丙腈 向冷卻至0℃的(3-甲氧基苯基)-乙腈(8.0g，0.054mol)在DMF(25ml)中的溶液中加入NaH(1.3g，0.054mol)。將該反應體系攪拌30min並且加入MeI(3.3mL，0.054mol)。將該反應體系在室溫下攪拌1小時。在該期間後，再次將該反應混合物冷卻至0℃，加入NaH(1.3g，0.054mol)，隨後在30分鐘後加入MeI(3.3ml，0.054mol)。將該反應體系在室溫下攪拌過夜。蒸發DMF並且用鹽水稀釋粗產物且用Et2O萃取。用水洗滌有機相，用Na2SO4乾燥，在減壓下蒸發溶劑並且通過快速色譜法純化殘餘物(石油醚∶AcOEt 95∶5)而得到標題化合物(4g，42％產率)，為無色的油。ESI+MS對C11H13NO的計算值175.23；測定值176.1(MH+)。
步驟22-[2-(3-丁氧基苯基)-2-甲基丙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 按照實施例5中所述的操作由2-(3-甲氧基苯基)-2-甲基丙腈製備標題化合物。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.44(br.s.，2H)，7.28(t，1H)，6.90-7.04(m，2H)，6.77-6.90(m，1H)，3.99(t，2H)，3.88(s，2H)，3.16(s，2H)，2.88(s，6H)，1.64-1.78(m，2H)，1.42-1.55(m，2H)，1.36-1.42(m，6H)，0.90-1.04(m，3H)。
ESI+MS對C18H30N2O2(游離鹼)的計算值306.45；測定值307.26(MH+)。
實施例7 2-[2-(3-丁硫基苯基(butylthiophenyl))-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 步驟1(3-丁硫基苯基)-乙腈 向(3-碘苯基)-乙腈(2.0g，8.2mmol)和乙酸S-丁酯(2.4ml，24.6mmol)在正丁醇(5ml)中的溶液中加入CuI(0.156g，0.8mmol)，乙二醇(0.96ml，1.7mmol)和K2CO3(2.4g，17.3mmol)並且將該混合物在微波照射下加熱至110℃1小時。用AcOEt稀釋該反應混合物並且用C鹽墊過濾。用水和鹽水洗滌有機相，用Na2SO4乾燥並且在減壓下蒸發溶劑。通過快速色譜法純化粗產物(石油醚∶AcOEt從10∶0到9∶1)而得到純的標題化合物，為淡黃色油狀物(1.0g，64％產率)，不經進一步純化用於下一步。
ESI+MS對C12H15NS的計算值205.32，質量不可檢測。
步驟22-[2-(3-丁硫基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 按照實施例5中所述的操作由(3-丁硫基苯基)-乙腈製備標題化合。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ9.08(br.s.，2H)，7.23-7.36(m，1H)，7.15-7.23(m，2H)，6.95-7.11(m，1H)，4.03(s，2H)，3.08-3.21(m，2H)，2.92-3.02(m，4H)，2.94(s，3H)，2.90(s，3H)，1.49-1.67(m，2H)，1.30-1.49(m，2H)，0.89(t，3H)。
ESI+MS對C16H26N2OS(游離鹼)的計算值294.46；測定值295.20(MH+)。
實施例8 2-[2-(3-丁基磺醯基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 步驟12-[2-(3-丁基磺醯基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 在5分鐘內向2-[2-(3-丁硫基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽(0.25g，0.62mmol；通過按照實施例1步驟1第一部分中所述的操作與boc2O反應由實施例7步驟2的化合物製備)在乙腈(20ml)/水(10ml)中的溶液中逐步加入oxone(0.92g，1.5mmol)和NaHCO3(0.2g，2.3mmol)的混合物。將該混合物在室溫下攪拌2小時。使該混合物分配在水與CH2Cl2之間，用水和鹽水洗滌有機層，用Na2SO4乾燥並且在減壓下蒸發溶劑。通過快速色譜法純化粗產物(石油醚∶AcOEt 3∶7)而得到純的標題化合物，為無色的油(0.20g，75％產率)。
ESI+MS對C21H34N2O5S的計算值426.58；測定值427.1(MH+)。
步驟22-[2-(3-丁基磺醯基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽 按照實施例1步驟4中所述的標準操作由2-[2-(3-丁基磺醯基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺製備標題化合物。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6+TFA)δ8.84-9.10(m，2H)，7.74-7.86(m，2H)，7.57-7.71(m，2H)，4.06(t，2H)，3.03-3.34(m，6H)，2.95(s，3H)，2.91(s，3H)，1.45-1.63(m，2H)，1.24-1.42(m，2H)，0.84(s，3H)。
ESI+MS對C16H26N2OS(游離鹼)的計算值294.46；測定值295.20(MH+)。
實施例9 2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基硫代乙醯胺鹽酸鹽 步驟12-[2-(3-丁氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-N，N-二甲基硫代乙醯胺 向2-[2-(3-丁氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺(0.38g，1.0mmol)在幹甲苯(20ml)中的溶液中一鍋加入Lawesson試劑(0.58g，1.2mmol)並且將該混合物加熱至回流並且攪拌2小時。在減壓下蒸發溶劑並且通過快速色譜法純化殘餘物(石油醚∶AcOEt從9∶1到8∶2)而得到純的標題化合物，為無色的油(0.11g，28％產率)。
ESI+MS對C21H34N2O3S的計算值394.58；測定值395.1(MH+)。
步驟22-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基硫代乙醯胺鹽酸鹽 按照實施例1步驟4中所述的標準操作由2-[2-(3-丁氧基苯基)-(叔-丁氧羰基)乙氨基]-N，N-二甲基硫代乙醯胺製備標題化合物。作為白色固體獲得。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.88(s，2H)，7.16-7.34(m，1H)，6.73-6.88(m，3H)，4.17(s，2H)，3.96(dd，2H)，3.43(s，3H)，3.31(s，3H)，3.16-3.26(m，2H)，2.92-3.04(m，2H)，1.62-1.76(m，2H)，1.36-1.50(m，2H)，0.94(t，3H)。
ESI+MS對C16H26N2OS(游離鹼)的計算值294.46；測定值295.22(MH+)。
實施例10 2-[2-(3-丁氧基苯基)]-(N′-甲氧基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 步驟12-(3-丁氧基苯基)-乙醛 向2-(3-丁氧基苯基)-乙醇(3.00g，15.4mmol；由按照實施例1步驟2中所述的操作從2-(3-羥基苯基)-乙醇製備)在CH2Cl2(100ml)中的溶液中加入Dess-Martin periodinane試劑(8.5g，20.1mmol)並且將該反應體系保持在室溫下過夜。將該溶液傾入包含Na2S2O3(35g)的NaHCO3飽和溶液，並且將該混合物攪拌30min。分離有機層，用Na2SO4乾燥，過濾並且在減壓下蒸發。
將包含標題化合物的殘餘物(2.9g，99％產率)不經進一步純化用於下一步。
步驟22-(3-丁氧基苯基)-(N-甲氧基)乙胺 在0℃下和攪拌中向2-(3-丁氧基苯基)-乙醛(2.00g，10.4mmol)和O-甲氧基胺鹽酸鹽(1.12g，13.4mmol)在水(13ml)中的混懸液中滴加Na2CO3(0.66g，6.2mmol)在水(20ml)中的溶液。將該反應體系保持在室溫下過夜且然後用乙醚萃取。用Na2SO4乾燥有機層，過濾並且在減壓下蒸發。
將包含所需肟中間體的殘餘物(2.24g，10.2mmol)溶於甲醇(60ml)並且加入乙酸(8.8ml，153.0mmol)。將該溶液冷卻至0℃並且逐步加入NaCNBH3。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜，然後在減壓下除去溶劑並且使殘餘物分配在5％NaHCO3溶液與乙酸乙酯之間。用Na2SO4乾燥有機相，過濾並且在真空中濃縮至幹。通過柱色譜法純化粗殘餘物(石油醚∶乙酸乙酯9∶1)而得到0.88g(38％產率)標題化合物。
步驟32-[2-(3-丁氧基苯基)]-(N′-甲氧基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺 將如步驟2中所述獲得的2-(3-丁氧基苯基)-(N-甲氧基)乙胺(0.5g，2.25mmol)溶於乙腈(15ml)並且加入乙基二異丙基胺(1.95ml，11.25mmol)，隨後加入2-氯-N，N-二甲基乙醯胺(1.15ml，11.25mmol)。將該溶液在130℃下和微波照射中加熱6小時。將該混合物冷卻至室溫，在減壓下除去溶劑並且使殘餘物分配在5％NaHCO3與乙酸乙酯之間。用Na2SO4乾燥有機相，過濾並且在真空中濃縮至幹。通過柱色譜法純化粗殘餘物(石油醚∶乙酸乙酯1∶1)而得到0.25g(36％產率)標題化合物。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6+TFA)7.17(t，1H)，6.61-6.89(m，3H)，3.94(t，2H)，3.56(s，2H)，3.47(s，3H)，2.98(s，3H)，2.89-2.97(m，2H)，2.80(s，3H)，2.72-2.86(m，2H)，1.58-1.77(m，2H)，1.34-1.53(m，2H)，0.93(t，3H)。
ESI+MS對C17H28N2O3(游離鹼)的計算值308.42；測定值309.18(MH+)。
實施例11TTXs-鈉通道流入測定法 ND7/23大鼠脊根神經節-衍生細胞系內源性地表達TTXs鈉通道的混合種群。這些細胞缺乏TTXr鈉通道，正如所示不存在它們各自的轉錄物。
使ND7/23細胞生長在含有10％FBS和1mM丙酮酸鈉的DMEM中。將細胞按50,000細胞/孔接種在96孔聚-L-賴氨酸-塗覆的平板上，進一步溫育18-24h，備用。
使用Membrane Potential Kit Assay(Molecular Devices)進行測定，它基於帶負電的螢光染劑，能夠監測由通道開放引起鈉流入所導致的膜電位變化。
將細胞與染料加載在25℃下溫育30分鐘，然後單獨加入或者在TTX(作為參照標準)或供試化合物存在下加入100nM毒素Anemoniasulcata(用作通道開放反應的強化劑)，進一步溫育15分鐘。
在鈉通道開放劑藜蘆定(100μM)的自動注射之前和之後(40-45sec)，利用Victor平板讀數器(Perkin Elmer)測量螢光(激發530nm，發射565nm波長)。
從5種濃度計算抑制曲線，各為一式三份，並利用線性回歸分析確定IC50。
本發明化合物抑制TTXs鈉通道，具有藥理學上顯著的IC50值。
使用本發明全部類型中有代表性的某些化合物獲得與標準品ralfinamide和safinamide比較的所得結果報導在表1中。
表1 *為與甲磺酸形成的鹽 實施例12鈣通道流入測定法 AtT20/D16v-F2小鼠垂體腫瘤細胞系優先表達L-型鈣通道。
使AtT20細胞生長在含有10％FBS、4mM穀氨醯胺的DMEM中。將細胞按200,000細胞/孔接種在96孔聚-L-賴氨酸-塗覆的平板上，進一步溫育18-24小時，備用。
使用Ca++ Kit Assay(Molecular Devices)進行測定，它基於螢光鈣指示劑，並且能夠檢測取決於去極化條件的鈣流入。
將細胞與鈣染料加載在37℃下溫育30分鐘，然後單獨加入或者在尼非地平(作為參照標準)或供試化合物存在下加入ω-芋螺毒素(1μM)，進一步溫育15分鐘。
在100mM KCl去極化溶液的自動注射之前和之後(30-40秒)，利用Victor平板讀數器(Perkin Elmer)測量螢光(激發485nm-發射535nm波長)。
從5種濃度計算抑制曲線，各為一式三份，並利用線性回歸分析確定IC50。
某些化合物是全部本發明化合物種類的代表，比較它們與ralfinamide和safinamide的所得結果，報告在表2中。
表2 *為與甲磺酸形成的鹽 實施例13大鼠皮質神經元Na+鈉電流阻斷的膜片鉗評價 細胞製備和培養 在與遵從國家(D.L.n.116，G.U.，suppl.40，Feb.18，1992)和國際法律和政策(EEC Council directive 86/609，OJL358.1，Dec.121987；Guide for the Care and Use of Laboratory Animals，U.S.National Research Council，1996)的公共指導原則一致的情況下進行涉及動物及其護理的操作。
由胚胎Wistar大鼠(E17-E19)製備皮質神經元。麻醉並且處死妊娠17-19日的雌性大鼠。取出胎兒(n＝4-5)並且放入冰冷的Hank′s溶液(Hank′s溶液(Life tech.14170-088)+30％葡萄糖+Pen-Strep100x(Life Tech.15140-122)100U-100μg/ml和Hepes-NaOH 5mM)。取出子宮和胎盤，將胎兒斷頭並且將頭放入冰冷的Hank′s溶液。
使用撥釘鉗取下頭部皮膚，從背部側面至眼部切開頭皮並且使用彎曲的撥釘鉗取出腦。
將腦切成兩半，使用撥釘鉗取下外部結締組織膜，並且保持腦倒置朝下，使用彎曲拔釘鉗取出小腦、腦幹和間腦，試圖儘可能將皮質內部清潔。
使用剪刀將每一皮質切成較小部分，使用5ml移液管將各片轉入15ml離心管並且用Hank′s溶液洗滌兩次。
取出溶液，但留下1-2ml並且首先用5ml移液管然後用熱拋光Pasteur移液管(分別為中等和小開口)分離組織。
在機械分離後，加入5ml完全DMEM(Dulbecco改進的Eagle培養基)(Gibco 41966-029)+FBS(Hyclone)10％+穀氨醯胺(Life Tech.25030-024)2mM+Pen-Strep 100U-100μg/ml並且以1000rpm將細胞混懸液離心5min。除去上清液並且加入5ml完全Neurobasal培養基(NB培養基(Life tech.21103-049)+B27(Life tech.17504-044)2％+2mM穀氨醯胺+Pen-Strep 100U-100μg/ml)。
計數細胞並且用Neurobasal培養基稀釋至400000個細胞/聚-D-賴氨酸5μg/ml處理的培養皿的濃度。
從鋪板後第6天開始到第11天使用皮質神經元並且每周一次改變Neurobasal培養基。
全細胞膜片鉗記錄 使用標準全細胞膜片鉗法對皮質神經元進行實驗(Hamill等，1981)。記錄膜電流並且使用Axon Axopatch 200B放大器在5kHz下濾過，且使用Axon Digidata 1322A(Axon Instruments，CA，USA)進行數據數位化。使用Axon pClamp8軟體在線控制方案實施和數據採集。測定和參比電極為AgCl-Ag電極。Sutter Instrument P-87Puller(CA，USA)用於由Harward硼矽玻璃試管拉出具有2-3MΩ電阻的膜片鉗移液管。應用溶液轉換器Biologic RSC-200連續使用胞外溶液流過細胞。
電壓方案和數據分析 為了測試化合物對皮質神經元中鈉電流的效應，在-90mV下固定細胞，然後將兩步方案用於測定阻滯的電壓依賴性。通過從2000ms的-110mV預處理電勢(靜止條件)和～-50mV電勢(半最大穩態條件)30ms階躍脈衝至-10mV(測試脈衝)來活化鈉電流。將在指定藥物濃度下靜止和去極化電流的增強阻滯計算為對照外浴溶液中的峰值Na+電流與使用測試物質的峰值電流之差除以對照峰值。
通過繪製靜止和去極化條件下增強阻滯與藥物濃度之間關係的圖獲得藥物濃度-抑制曲線。按照對數方程使劑量-響應曲線與增強阻滯數據擬合y＝A2+(A1-A2)/[1+(x/IC50)p]。A1和A2為0和相當於0的1的固定值和100％電流抑制率，x為藥物濃度，IC50為導致50％電流抑制的藥物濃度且p為相應的坡度因子。
根據方程1/Kdep＝h/Kr+(1-h)/Ki計算對失活狀態的藥物表觀親和力(Ki)，其中Kr為藥物對靜止/關閉狀態的親和力；Kdep為去極化條件下的IC50，h和(1-h)分別為靜止和去極化電勢下存在的通道分數。
溶液和藥物 對照浴溶液包含(mM)NaCl 60，膽鹼Cl 60，CaCl2 1.3，MgCl22，KCl 2，CdCl2 0.4，NiCl2 0.3，TEACl 20，Hepes 10，葡萄糖10。
內部移液管溶液由如下成分組成(mM)CsF 65，CsCl 65，NaCl 10，CaCl2 1.3，MgCl2 2，Hepes 10，EGTA 10，MgATP1。
將化合物溶於DMSO作為儲備溶液(20mM)。將它們稀釋至在外溶液中的終濃度。
結果 本發明的化合物能夠阻斷大鼠皮質神經元中的Na+電流。將使用本發明化學類型中有代表性的化合物2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽(NW-3509)與我們的標準品safinamide和ralfinamide比較獲得的結果報導在表3中。
表3 *為與甲磺酸形成的鹽 表示為在μM濃度下的IC50值的數據以及對失活狀態的親和力(Ki)證實本發明化合物極為有效並且為電壓依賴的鈉通道阻斷劑。
實施例14ND7/23細胞系中Na+電流阻斷的膜片鉗評價 細胞系維持 ND7/23(來自SIGMA的ECACC No 92090903)為來源於融合了小鼠神經母細胞瘤N18Tg2的新生大鼠DRG的雜交細胞系(Wood等，1990)。ND7/23細胞表現出感覺神經元樣特性並且表達河豚毒素-敏感性(TTX-S)，但不表達河豚毒素-抗性(TTX-R)電流(Zhou等；2003；John等，2004)。TTX-R電流缺乏與這些細胞中不存在TTX-R通道轉錄物一致。
負責TTX-S電導的通道的分子鑑定為未知的，但推斷能夠因鈉通道的混合的群體活性產生。
通常細胞維持在含有10％FBS，4mM穀氨醯胺，1mM丙酮酸鈉的DMEM中。在膜片鉗實驗前的那天分離細胞並且以100,000個細胞/聚賴氨酸包被的35mm培養皿中接種。
全細胞膜片鉗記錄 使用如上所述部分中所述的標準全細胞膜片鉗法對ND7/23細胞進行實驗(Hamill等，1981)。
電壓方案和數據分析 為了測試化合物對ND7/23細胞中鈉電流的效應，將保持膜電勢維持在-90mV，然後將兩步方案用於測定阻滯的電壓依賴性。通過從2000ms的-110mV預處理電勢(靜止條件)和～-70mV電勢(半最大穩態條件)30ms階躍脈衝至0mV(測試脈衝)來活化鈉電流。
將在指定藥物濃度下靜止和去極化電流的增強阻滯計算為對照外浴溶液中的峰值Na+電流與使用測試物質的峰值電流之差除以對照峰值。
通過繪製靜止和去極化條件下增強阻滯與藥物濃度之間關係的圖獲得藥物濃度-抑制曲線。按照對數方程y＝A2+(A1-A2)/[1+(x/IC50)p]使劑量-響應曲線與增強阻滯數據擬合。A1和A2為0和相當於0的1的固定值和100％電流抑制率，x為藥物濃度，IC50為導致50％電流抑制的藥物濃度且p為相應的坡度因子。
根據方程1/Kdep＝h/Kr+(1-h)/Ki計算對失活狀態的藥物表觀親和力(Ki)，其中Kr為藥物對靜止/關閉狀態的親和力；Kdep為去極化條件下的IC50，h和(1-h)分別為靜止和去極化電勢下存在的通道分數。
溶液和藥物 對照浴溶液包含(mM)NaCl 80，HCl膽鹼40，CaCl2 1.3，MgCl22，KCl 2，CdCl2 0.4，NiCl2 0.3，TEACl 20，Hepes 10，葡萄糖10。
內部移液管溶液由如下成分組成(mM)CsF 65，CsCl 65，NaCl 10，CaCl2 1.3，MgCl2 2，Hepes 10，EGTA 10，MgATP 1。
將化合物溶於DMSO作為儲備溶液(20mM)。將它們稀釋至在外溶液中的終濃度。
結果 本發明的化合物能夠阻斷ND7/23細胞中的Na+電流。將使用本發明化學類型中有代表性的化合物2-[2-(3-戊氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽NW-3525與我們的標準ralfinamide比較獲得的結果報導在表4中。
表4 *為與甲磺酸形成的鹽 表示為在μM濃度下的IC50值的數據以及對失活狀態的親和力(Ki)證實本發明化合物極為有效並且為電壓依賴的鈉通道阻斷劑。
實施例15體外MAO-B酶活性測定法 膜製備物(粗線粒體級分) 在輕微麻醉下處死雄性Wistar大鼠(Harlan，Italy-175-200g)，迅速取出腦，在8體積冰冷的0.32M蔗糖緩衝液中勻化，所述緩衝液含有0.1M EDTA，pH7.4。將粗的勻化產物在2220rpm下離心10分鐘，回收上清液。將沉澱再次勻化和離心。匯集兩份上清液，於+4℃下在9250rpm下離心10分鐘。將沉澱重新懸浮在新鮮的緩衝液中，在11250rpm下離心10分鐘，溫度+4℃。將所得沉澱貯存在-80℃下。
體外酶活性測定 利用放射性酶測定法，應用對MAO-B具有特異性的底物14C-苯基乙胺(PEA)評估酶活性。
將線粒體沉澱(500μg蛋白質)重新懸浮於0.1M磷酸鹽緩衝液(pH 7.4)中。將200μl混懸液加入到50μl供試化合物溶液或緩衝液中，在37℃下溫育30min(預溫育)，然後加入底物(50μl)。在37℃下進行溫育，時間為10分鐘(14C-PEA，0.5μM)。
加入0.2ml高氯酸終止反應。離心後，將脫氨基的代謝產物用3ml甲苯萃取，藉助液體閃爍光譜法測量包含作為MAO-B活性結果形成的中性和/或酸性代謝物的放射性有機相，效率為90％。
將MAO-B活性表示為nmoles轉化的底物/mg蛋白質/min。
本發明全部化學類型中有代表性的化合物在相關濃度下未表現出MAO-B抑制作用，正如表5中作為IC50值報導的(化合物能夠將MAO-B酶活性抑制50％的濃度)。
當IC50值在亞-微摩爾範圍中時，例如我們的標準品safinamide和ralfinamide，實際上認為MAO-B顯著抑制。
表5 *為與甲磺酸形成的鹽 實施例16福馬林試驗 按照來自Rosland等的改進的方案(Rosland J.H.，Tjolsen A.，Maehle B.，Hole K.Pain(1990)42235-242)，經皮下(s.c.)將20μl 2.7％福馬林溶液注入小鼠左後爪蹠面並且即刻放入澄明的PVC觀察室(23×12×13cm)。通過對注射爪的累積舔爪次數進行計數對疼痛行為進行定量。在福馬林注射後早期(0-5min)和晚期(20-40min)過程中取測量值(Tjolsen A.，Berge O.G.，Hunskaar S.，RoslandJ.H.，Hole K.Pain(1992)515-17)。
在以10ml/kg體重的體積進行福馬林注射前5-45分鐘通過p.o.或s.c.對10隻小鼠的足給予每次劑量的供試化合物。對照組用載體處理。
可以發現通過口服和皮下給予的本發明化合物在本實驗模型中具有活性。
以0.6-20mg/kg p.o.和s.c.給予的一種化合物(即本發明全部類型化合物中有代表性的化合物)所獲得的表示為ED50值的結果報導在表6中，其證實該化合物具有良好的止痛活性。
表6 *為與甲磺酸形成的鹽 實施例17神經性疼痛的脊神經結紮模型 在脊神經結紮模型(SNL)中測試對神經性疼痛的效果(Kim S.H.和Chung J.M.(Pain(1992)50355-363)。
動物使用稱重為175-200g的成年雄性Wistar大鼠。使所有動物以8/10的組寄居在溫度(22±0.5℃)和相對溼度(60-70％)受控室內，給予12小時光照/黑暗周期(光照在6a.m.-6p.m.)並且允許自由飲水和取齧齒動物標準膳食。
藥物在測定基礎異常性疼痛閾值後，將溶於蒸餾水的供試化合物以在2ml/kg體積中的0.5-100mg/kg的劑量通過口服給予。對照組大鼠用載體處理。
脊神經結紮按照Kim S.H.和Chung J.M.所述的改進方法製作神經病變(Pain(1992)50355-363)。簡言之，用硫噴妥鈉35mg/kgi.p.(如果需要加上額外劑量)麻醉動物並且在暴露從L4到S2的背側脊椎後，用4-0號絲縫線緊固結紮暴露的L5和L6脊神經，並且封閉切口。允許大鼠在手術後測試前恢復約5-14天。
機械性異常性疼痛按照Chaplan等的方法測定機械性異常性疼痛閾值(Chaplan S.R.，Bach F.W.，Pogrel J.W.，Chung J.M.和Yaksh T.L.J.Neurosc.Method.(1994)5355-63)。將大鼠放入各自24×10×15cm的塑料盒的網狀金屬底部上並且允許它們在測試前適應約30min分鐘。測定對使用具有對數遞增硬度0.41-15g(4-150mN)的8個標刻度的von Frey絲(Stoelting，Wood Dale，IL)探測的反應的大鼠後爪的爪撤回閾值。將每種絲垂直施加在大鼠結紮爪的足面上。使用15g的最大截止值。通過依次增加和減少刺激強度(「上-下」法)測定撤回閾值，通過使用Dixon非參數檢驗來分析並且表示為平均撤回閾值(Dixon W.J.Am.Stat.Assoc.(1965)60967-978)。在p.o.處理前(給藥前)和之後的15，30，60，90，120，180，240，300，360和420min時測定假擬手術和手術動物中機械性異常性疼痛閾值。還在兩種處理方案中測定了24小時閾值。在9a.m.-6p.m.之間進行試驗。觀察者不了解實驗和處理條件。
熱痛覺過敏使用足底試驗評價熱痛覺過敏(Ugo Basile，Varese，Italy)。將大鼠放入樹脂玻璃盒的澄明玻璃板上。在大鼠仍然相對穩定的情況下，玻璃底部下的的輻射熱源定向於後爪蹠面，並且測定撤回潛伏期。在評價熱痛覺過敏前，調整輻射熱的強度以便產生來自具有自動設定在30秒的截止值的首次用於實驗的大鼠約20秒的基線潛伏期，以避免組織損害。
發現口服給藥的本發明有代表性的化合物在本實驗模型中具有活性。
(圖1在SNL大鼠熱痛覺過敏中口服給予的2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽(NW-3509)的效果。ED50＝10.58mg/kg(6.7-16.6)。數值代表每組10隻動物的平均值±SEM)。
實施例18慢性炎性疼痛的完全Freund氏佐劑模型 向左後爪蹠肌內注射100μl完全Freund氏佐劑(CFA，Sigma)，在大鼠(200g重)中誘發單關節炎，所述佐劑在石蠟油與乳化劑二縮甘露醇單油酸酯的混合物中含有加熱滅活的和乾燥的結核分枝桿菌(Mycobacterium tubercolosis)。首次用於實驗的大鼠組用作對照組。CFA注射產生局部化的水腫和炎症區域，開始於注射後幾個小時，伴有機械性撤回閾值的進行性降低。
在試驗之前允許每隻動物歷經8-9天形成關節炎。
機械性異常疼痛按照Chaplan等的方法測定機械性異常疼痛閾值(Chaplan S.R.，Bach F.W.，Pogrel J.W.，Chung J.M.和YakshT.L.J.Neurosc.Method.(1994)5355-63)。將大鼠置於底部為金屬網的單個塑料盒24×10×15cm中，在試驗之前允許適應約30分鐘。測定作為對向爪子施用8次校準的von Frey毛髮(Stoelting，WoodDale，IL)的反應的大鼠後爪的撤回閾值，其硬度增量的對數值為0.41-15g(4-150mN)。垂直於結紮大鼠足面施加每根毛髮。使用15g最大截止值。通過依次增加和減小刺激強度(「上-下」法)測定撤回閾值，通過Dixon非參數檢驗來分析並且表示為平均撤回閾值(Dixon W.J.Am.Stat.Assoc.(1965)60967-978)。在p.o.治療前(給藥前)和之後15，30，60，90，120，180，240，300，360和420min測定模擬和手術動物中的機械性異常疼痛閾值。還在兩個治療方案中測定了24小時閾值。本試驗在9a.m.-6p.m.進行。觀察人員不了解實驗和治療條件。
發現口服給予的本發明有代表性的化合物在本實驗模型中具有活性。
實施例19乙酸-誘發的小鼠內臟痛模型 內臟痛仍然為最常見形式的尋求醫療處理的疼痛之一。儘管可以將內臟痛概括為軀體痛的變化形式，但是它在神經學機理和傳遞途徑方面不同。內臟痛的特徵在於涉及痛覺過敏並且還在於它並不總是與組織損傷有關。
乙酸誘發的內臟痛模型廣泛應用於產生腹部收縮的實驗研究(Korster R等.Fed.Pro.(1959)18412；Friese N等，LifeSci.(1997)60625-634)。該模型由腹膜內(i.p.)注射誘發稱作『扭體』的症候群的刺激物組成，所述稱作的『扭體』的症候群由腹部收縮，扭動和軀幹轉動，後背弓形和後肢伸展組成。
動物和操作使用稱重為25-33g的雄性CD1小鼠。允許每個處理組30min習慣於各自聚丙烯透明盒內的實驗室環境。通過對在i.p.注射0.6％乙酸(10ml/kg體重)後扭體10min的次數計數對內臟痛進行評分。評價乙酸給藥後的扭體次數。對完全身體拉長(完全扭體)或具有明顯腹部收縮的部分拉長(部分扭體)進行計數。在乙酸注射前5min通過口服對單獨各組的10隻小鼠各自給予載體(10ml/kg)或不同劑量的溶於所述載體的供試化合物(10ml/kg)。將數據表示為10min觀察期過程中的平均扭體次數。
發現口服給予的本發明有代表性的化合物在本實驗模型中具有減少乙酸誘發的扭體次數的活性。
(圖2口服給予20mg/Kg p.o.的2-[2-(3-丁氧基苯基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽(NW-3509)在乙酸誘發的內臟痛試驗中的效果。***p＜0.01與載體相比的t-檢驗。數值代表n＝10隻動物/組的平均值±SEM。***p＜0.01 Dunnet檢驗)。
實施例20小鼠最大電擊試驗(MES) 在齧齒動物模型中篩選抗癲癇藥時普遍採用最大電擊試驗(MES)。
動物和儀器使用體重25g的雄性CD1小鼠。遵循White等所述工藝(White H.S.，Woodhead J.H.，Franklin M.R.，Swinyard E.A.，和Wolf H.H.Antiepileptic Drugs(1995)4th ed99-110，RavenPress，Ltd.，New York)。利用Ugo Basile電驚厥生成器(Model ECTUNIT 7801)遞送足以在至少97％對照動物中產生後肢強直性伸展反應的電刺激。在小鼠中通過夾式電極耳內遞送刺激(0.7s的40mA電擊，脈衝列為80Hz，脈衝持續時間為0.4ms)。檢查在MES誘導之前5-120分鐘腹膜內(i.p.)、皮下(s.c.)、靜脈內(i.v.)或口服給予的化合物的急性效果，與載體對照組比較。每組研究十隻小鼠。癲癇發作的後肢強直性伸展組分的完全抑制被視為抗驚厥活性的證據。
在0.1-100mg/kg的劑量下p.o或i.v.內給予本發明化合物。
將表示為使用本發明全部類型中有代表性的某些化合物獲得的ED50值報導在表7和表8中，表明這些化合物具有作為抗驚厥藥的活性。
表7 表8 *為與甲磺酸形成的鹽。
實施例21苯丙胺和氯氮卓-誘導的小鼠運動過多 在這種模型中，將小鼠用d-苯丙胺加抗焦慮劑量的苯並二氮雜卓類氯氮卓處理(Rushton R，Steinberg H.Combined effects ofchlordiazepoxide and d-amphetamine on activity of rats in anunfamiliar environment.Nature 1966；2111312-3；.R.Arban，G.Maraia，K.Brackenborough，L.Winyard，A.Wilson，P.Gerrard，C.Large，.Evaluation of the effects of lamotrigine，valproateand carbamazepine in a rodent model of mania Behavioural BrainResearch，158123-132)。該模型已被要求模擬雙相性精神障礙中的一些躁狂方面。重要的是，由d-苯丙胺與氯氮卓混合物誘導的活動過多能夠被在先給藥的既定情感穩定劑鋰以及其他情感穩定藥(例如丙戊酸鎂和卡馬西平)所預防。因此，這種模型作為雙相性精神障礙的模型可以呈現和預測有效性，並代表了確定供試化合物是否能夠成為有潛力的情感穩定藥候選的有價值的工具。
向雄性Albino Swiss小鼠(25-32g)以體積為10ml/kg給予苯丙胺(AMP)(2.5mg/kg)加鹽酸氯氮卓(CDZ)(3mg/kg/ip)。利用Opto-M3System(Columbus Instruments)記錄運動活動，這是一種多通道活動監測器。Opto-M3系統具有10個紅外發射器和各自數量的接收器(光束間距(beam spacing)0.5」)，與PC計算機連接，並計算移動活動和總計數。因而，該系統區分向前運動(移動)與刻板樣運動(總計數)。將小鼠用供試化合物(0.5-20mg/kg)預處理，10min後用AMP(2.5mg/kg)或者AMP連同CDZ(3mg/kg)處理。連續30min後，將小鼠再次用相同劑量的供試化合物處理，分別置於運動活動籠中。評價30min的運動活動(移動和總活動計數)。每組由8-10隻小鼠組成。
統計學分析藉助方差分析(ANOVA)評價數據，酌情再分別利用Dunnett氏檢驗與對照組進行個別比較。
結果表明苯丙胺和苯丙胺-氯氮卓(CDZ)給藥誘導顯著的運動活動增加。
口服給予的本發明有代表性的化合物在減少苯丙胺和苯丙胺-氯氮卓誘導的活動過度的本實驗模型中具有活性。
(圖3移動超過30min。
a)氯氮卓(3.0mg/Kg ip)；b)2-[2-(3-丁氧基苯基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽(NW-3509)(20.0mg/Kg po)；c)苯丙胺(2.5mg/kgi.p.)。
單獨的苯丙胺和苯丙胺+氯氮卓混合物顯著增加了運動行為**p＜0.001與載體比較的Dunnet′s檢驗。
2-[2-(3-丁氧基苯基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽(NW-3509)減少了由單獨的苯丙胺和苯丙胺與氯氮卓混合物誘導的活動過度，以統計學顯著性方式##p＜0.001與苯丙胺或苯丙胺+氯氮卓比較的Dunnet′s檢驗。數據表示n＝10隻小鼠/組的平均值±SEM)。
實施例22Morris水迷宮試驗(東莨菪鹼在大鼠中誘發的健忘症) 檢測抗健忘症活性的方法遵循Morris所述的方法(Learn.Motiv.，12，239-260，1981)。Morris迷宮由充滿了水並且維持在26-28℃下的具有距離邊界18cm並且始終處於水面下1.5cm相同位置的逃逸平臺(直徑＝15cm)的環形水槽(直徑＝150cm)組成。通過添加無毒性著色劑(例如奶粉)使水變不透明，使得平臺不可見。
在4個連續天內給予動物4個訓練期(第1天到第4天)。每個訓練期由在Morris迷宮中的4次試驗組成，每次間隔1分鐘。就每次試驗而言，將動物放入迷宮內相等分布在迷宮周圍的4個起點之一上並且允許找到逃逸平臺。將動物放置在逃逸平臺上60秒，此後放回其寄居的籠中。如果動物在120秒內未發現平臺，那麼實驗者從水中將其取出並且將其放置在平臺上60秒，此後將其放回到寄居的籠中。在4次試驗過程中，動物以每隻動物隨機確定的次序開始從各自的起點迷失一次。
視頻跟蹤記錄試驗並且使用視頻跟蹤系統(PanlabSMART)分析動物行為。取的主要測量值是每次試驗時的逃逸潛伏期。額外的測量值為遊泳速度和遊行的距離。
東莨菪鹼-處理的動物(0.5mg/kg i.p.，在每一期限前30分鐘給予)表現出如無法減小從試驗到試驗和從期限到期限的逃逸潛伏期所示的在該任務中的健忘症。在第5天時進行探頭試驗。從迷宮中取出平臺並且使動物在迷宮中自由遊泳60秒。所取的主要測量值為花費在目標四分體(即預先包含平臺的)上的時間，將其與花費在其它四分體上的時間和隨機預測的值(即25％的探頭試驗期限)比較。每組研究12隻東莨菪鹼-處理的大鼠。本實驗還包括接受鹽水而非東莨菪鹼的正常對照組。以3種劑量評價供試物質，p.o.給予5-60分鐘，此後進行每一訓練期限和探頭試驗，即東莨菪鹼前30分鐘，並且與載體對照組比較。本實驗由此包括5組。
通過比較處理組與東莨菪鹼對照組，使用未配對斯氏t檢驗分析數據。
發現口服給予的本發明有代表性的化合物在本實驗模型中具有活性。
實施例23認知模型-新物體識別試驗 物體識別試驗由樣品試驗和試驗間間隔(ITI)分開的選擇試驗組成。在樣品試驗時，提供兩個相同的物體。在選擇試驗時，用新物體替代樣品試驗中提供的物體之一(稱作熟悉物體)。在ITI為1小時或1小時以下時，大鼠能夠辨別熟悉物體與新物體，但24小時ITI時不能(Deschaux O等，1997，Neurosci.Lett.222，159-162；Ennaceur A等，1989.，Behav.Brain Res.33，197-207；Puma C，Bizot JC，1998，Neurosci.Lett.248，183-186)。因此，使用1小時ITI的物體識別任務能夠檢測藥物的遺忘效應，且是否這種遺忘效應被另一種藥物減輕。使用24小時ITI的物體識別試驗能夠檢測藥物誘發的記憶力增強。已經進行了大量研究以便評價藥物的記憶效果。例如，過去的研究證實菸鹼改善了24-小時ITI條件中的記憶力並且減輕了1-小時ITI條件中東莨菪鹼誘發的健忘症。
方法如Bizot JC等，2005 Prog Neuropsychopharmacol BiolPsychiatry.29928-935中所述進行物體識別任務。
受試者使用首次用於實驗的8周齡雄性Wistar大鼠 儀器物體識別任務的儀器為灰色不透明樹脂玻璃構成的開放盒子(40cm L，40cm W，40cm H)。辨別的物體(3.5cm L，6cm H)在顏色和形狀上不同。它們為白色門按鈕圓形和灰色門按鈕星形。顯然，它們對大鼠而言不具有天然的顯著性差別並且它們始終與強化無關。為了排除遺留在物體上的氣味痕量的可能性和由此大鼠對在嗅覺線索上的識別能力的依賴性，用澄清水洗滌物體和盒子的底部並且在每次試驗之間進行乾燥。將電視攝像機固定在盒子上方的天花板上以便監測動物活動。
實驗在2天(東莨菪鹼誘發的健忘症)或3天(自然忘記)內進行。本試驗由15-min習慣試驗(第1天)，3-min樣品試驗(第2天)和3-min選擇試驗(第2或第3天)組成。
東莨菪鹼誘發的健忘症實驗。本實驗對隨機再分成不同組(n＝12/組)的大鼠進行，它們接受 -對照組本試驗前30min 1次腹膜內(IP)注射鹽水(樣品試驗)，本試驗前15min 1次經口(PO)注射鹽水。
-東莨菪鹼組本試驗前30min 1次IP注射東莨菪鹼(0.1mg/kg)，本試驗前15min 1次PO注射鹽水(樣品試驗) -東莨菪鹼+菸鹼組本試驗前30min 1次IP注射東莨菪鹼(0.1mg/kg)和本試驗前20min 1次IP注射菸鹼(0.4mg/kg)(樣品試驗) -東莨菪鹼+有代表性的供試化合物組本試驗前30min 1次IP注射東莨菪鹼(0.1mg/kg)(樣品試驗)和本試驗前15min 1次PO注射不同劑量的供試化合物(樣品試驗)。
在第1天允許大鼠探查儀器15min(習慣試驗)。在第2天將大鼠放入在盒子的兩個角落上提供兩個相同物體的儀器3min(樣品試驗)。1hr後，將大鼠放入帶有兩個物體的儀器；用新的物體替代樣品試驗中提供的物體之一(稱作熟悉物體)(選擇試驗)。
自然忘記實驗本實驗對隨機再分成不同組(n＝12/組)的大鼠進行，它們接受 -對照組本試驗前20min 1次腹膜內(IP)注射鹽水和本試驗前15min 1次經口(PO)注射鹽水。
-菸鹼組本試驗前20min 1次I P注射菸鹼(0.2mg/kg)和本試驗前15min 1次PO注射鹽水。
-有代表性的供試化合物組本試驗前20min 1次IP注射鹽水和本試驗前15min 1次PO注射不同劑量的供試化合物。
在第1天允許大鼠探查儀器15min(習慣試驗)。在第2天將大鼠放入在盒子的兩個角落上提供兩個相同物體的儀器3min(樣品試驗)。24小時後(第3天)，將大鼠放入帶有兩個物體的儀器；用新的物體替代樣品試驗中提供的物體之一(稱作熟悉物體)。
數據基礎測量值為大鼠在樣品試驗和選擇試驗過程中探查物體所花費的時間。物體識別任務指數包括下列參數 -樣品試驗中的總探查時間。
-選擇試驗中的總探查時間。
-選擇試驗中的新物體與熟悉物體之間探查時間之差(N-F)。
-辨別指數，其為100×(N-F)除以選擇試驗中的總探查時間。
用ANOVA和斯氏t檢驗分析數據。
發現口服給予的本發明有代表性的化合物在本實驗模型中具有減輕東莨菪鹼在1-小時試驗間間隔(1hr ITI)的物體識別任務中誘發的健忘症中和改善自然忘記情況中的記憶力、即在具有24小時試驗間間隔(24hr ITI)的物體識別任務中具有活性。
實施例24抑鬱試驗小鼠的尾部懸掛試驗 尾部懸掛試驗為所謂的「行為絕望」模型之一併且應用於篩選抗抑鬱藥。它們基於常見的現象接觸在激動與穩定之間的不相容厭惡情況選擇的正常動物。激動的原因正在研究，其為高度耗能的，而穩定的目的在於節能。抗抑鬱藥處理後的動物甚至在絕望的情況下也更為抗爭，並且它們幾乎不會花費時間穩定。可以藉助於這些模型研究神經官能性抑鬱症的某些方面。
本方法檢測抗抑鬱藥和抗焦慮藥活性並且遵循Stéru等所述(Psychopharmacology，85，367-370，1985)。尾部懸掛的齧齒動物快速變不動。抗抑鬱藥減少了穩定期限，而安定劑增加了穩定期限。使用Stéru等(Prog.Neuropsychopharmacol.Exp.Psychiatry，11，659-671，1987)研發的計算機化裝置(Itematic-TST)在6分鐘過程中自動記錄動物行為。同時研究6隻小鼠。記錄兩種參數 -穩定期限本參數與用於″行為絕望″試驗的參數類似(Arch.Int.Pharmacodyn.Ther.，229，327-336，1977)。
-運動能力本參數基於動物消耗的能量，不依賴於活動期限。
每組研究10隻小鼠。不進行盲性試驗，但由Itematic-TST產生的隨機化方案確保了每隻動物在儀器中的位置和時間方面的處理的均勻分布。評價3種劑量下的供試物質，試驗前5-60分鐘p.o.給予並且與載體對照組比較。在相同實驗條件下給予的丙咪嗪(128mg/kgp.o.)和地西泮(8mg/kg p.o.)用作參比物。
本實驗由此包括6組。通過使用未配對斯氏t檢驗比較處理組與載體對照組分析數據。
發現口服給予的本發明有代表性的化合物在本實驗模型中具有活性。
實施例25精神分裂症方法中的認知缺損 認知缺損經常與精神分裂症有關，其已被認知是該障礙的核心要素，影響患者的恢復和重新融入社會。
最近關注的焦點在於精神分裂症中認知功能障礙的藥理模型，它基於穀氨酸鹽NMDA受體拮抗劑的效應，所述受體拮抗劑例如苯環利定(PCP)和氯胺酮(Javitt等，1991)，它們在進行複雜任務的小鼠中削弱注意力，增加「衝動性」和「強迫性」持續動作(Greco等，2005)。
材料和方法 動物使用雄性DBA/2N小鼠(Charles River，Italy)。小鼠在實驗開始時體重25-30g，在控溫條件(21℃)和12小時光照12小時黑暗循環(光照7:00am-7:00pm)下餵養。可以隨意進食(Rieper，Italy)。動物在每天試驗結束時有兩小時的飲水時間。
五選項系列反應時間任務儀器試驗儀器由四個21.6x17.8x12.7cm箱組成(Med Associates Inc.USA)，如前面所述[Greco，2005#26]。由SmartCtrlTM Package 8 In/16 Out(MedAssociates Inc.USA)控制刺激和反應記錄，附帶MED-PC for Windows界面(Med AssociatesInc.USA)。5-CSRT任務的運行程序是根據客戶定製的。
行為操作習慣於液體增強劑和向小孔中伸鼻子對小鼠操作一周，記錄它們的體重。然後通過允許它們在傍晚飲水2h直至它們的體重已經穩定來禁止飲水(8天)。然後在後面的兩天裡，使小鼠在它們的籠子中習慣於在手術操作中後來使用的增強劑(10％蔗糖溶液)。在後面的兩天裡，使小鼠習慣於手術盒子。在此階段，將一小碗10％蔗糖溶液放置在盒子接受孔下方。首先，小鼠不得不學習每5秒鐘在接受孔的小杯中有液體獎賞。在此階段記錄頭部進入次數。在下一階段，訓練小鼠向有照明的小孔中伸鼻子。在向水接受器中伸鼻子之後立即打開小孔之一後方的LED。在光照小孔中伸鼻子抵消光刺激，滴液器在接受孔中提供0.01mL的液體獎賞。其他四個小孔之一中的任何反應都沒有結果，沒有記錄。以隨機順序在全部五個小孔中呈遞光刺激。在一個30min期間中已經完成至少50次獲得獎賞的伸鼻子試驗的小鼠轉向5-CSRT任務。
五選項系列反應時間任務該時期的開始以開燈照明和0.01mL液體獎賞為標誌。在接受孔中伸鼻子開始第一次試驗。固定的延遲(試驗間間隔，ITI)後，小孔之一後方的LED短時間打開。在完整的時期期間在每個小孔中呈遞相同次數的LED刺激，呈遞的順序由計算機隨機安排。在開燈的同時，以及隨後短時間內(有限的保持)，在照明小孔中的反應(正確反應)導致液體獎賞。在無照明小孔中的反應(不正確反應)或者在有限的保持內沒能反應(忽略)導致照明光短時間關閉(暫停時間(time out))。在照明光關閉的同時在小孔中的反應重新開始暫停時間。在液體獎賞的遞送之後或者在暫停時間結束時，小鼠開始下一試驗，鼻子伸入接受孔。在正確反應後，或者在暫停時間結束後鼻子伸入接受孔之前在小孔中所進行的反應(持續反應)，導致暫停時間階段。在ITT(先行反應)期間在小孔中的反應也導致暫停時間期間。先行反應之後，鼻子伸入接受孔重新開始當前的試驗。每天的試驗期由100次試驗或者30min試驗組成，無論是否更快地完成，然後關閉全部光源，進一步的反應沒有效應。在試驗安排的前一時期，刺激和有限的保持各自持續1min，依賴於個體的表現，逐漸減少至1sec。刺激持續時間以如下順序減少60、30、10、5、2.5、2、1.5和1秒(基線)。ITI和暫停時間在第一時期都持續2秒，ITI在隨後的時期升至5秒；暫停時間沒有變化。在全部訓練和實驗階段，每隻小鼠每天有一個5-CSRT任務期間。
藥物和處置安排將供試化合物溶於水，腹膜內(IP)給藥，劑量為10mg/kg。處置後5分鐘，向小鼠注射載體(鹽水)或PCP(1.5mg/kg)，10min後它們開始試驗期間。在每次實驗中，按照拉丁方設計給予供試化合物與載體或PCP的各種組合。在藥物試驗日之間留出至少48h。在這些中間日期期間，試驗小鼠的5-CSRT任務，以重新建立基線表現和檢查任何殘留的藥物效應。
統計學分析選擇用於分析的主要依賴性變量為(a)正確反應的百分比(總正確反應/總正確+總不正確反應x100)；(b)忽略的百分比(總忽略/總正確反應+總不正確反應+總忽略x100)；(c)在ITI期間小孔中先行反應的次數；(d)在正確反應後小孔中持續反應的次數。按照ANOVA模型，按照下式轉化正確反應和忽略的百分比2arcsin(SQRT(％X/100))，以標準化分布(Winer，1971)。
利用因子藥物(供試化合物)和PCP，在主體2×2 ANOVA內獨立地分析供試化合物(n＝12)對PCP誘導的5-CSRT任務缺陷的效應。隨後，利用post-hoc Tukey-Kramer檢驗比較處理組平均值。在MicroVAX3500計算機(Digital，USA)上運行統計軟體(SAS Institute Inc.，USA)。
PCP對DBA/2N小鼠的注意力表現導致突出的效應，表現為先行和持續反應增加。本發明有代表性的化合物以10mg/kg i.p.給藥，能夠逆轉PCP-誘導的先行 實施例26小鼠和大鼠中驚恐的前衝動抑制 前衝動抑制(PPI)為跨種現象(即它存在於小鼠與人範圍的哺乳動物)，而它在精神分裂症患者中相對不存在。無關聽覺刺激中過濾出的能力下降為特徵，認為該特徵促成了這些情況中的某些表現，包括注意力不集中，注意渙散和認知短缺。PPI操作應用於評價受試者「門控」或過濾環境信息的能力。在感覺運動門控聽覺(驚恐模型)中，弱聽覺刺激(前置脈衝)減少了二次更強烈刺激(脈衝)產生的反射性畏縮反應(驚恐)。藥物，如地佐環平(MK-801)或苯丙胺破壞PPI並且代表精神分裂症的動物模型。抗精神病藥能夠預防PPI缺乏。本試驗對篩選潛在的抗精神病藥非常有用。
類似地，小鼠的某些品系，例如DBA/J展示出可以用抗精神病藥物逆轉的PPI的自發性損害並且還可以用作精神分裂症動物模型。
大鼠中的PPI使用Wistar或Sprague-Dawley大鼠(稱重為200-300g)或3周齡DBA/2J小鼠。驚恐儀器(San Diego Instruments，CA)由12個塑料透明籠子組成，它們各自放置在隔音的柜子中，其安裝了與記錄平臺垂直運動的傳感器連接的可移動的平臺底部。通過懸掛在籠子上方並且連接發聲器的揚聲器傳遞的聽覺刺激引起驚恐反應。使用PC計算機在距聽覺刺激啟動200ms記錄窗測定的過程中記錄因驚恐反應引起的平臺運動產生的短暫力，數位化並且儲存在計算機中以便進一步評價。在整個記錄窗(200ms)過程中測定驚恐反應的振幅並且取振幅的平均值用於進一步評價。將對照組和處理組放入各自的測試籠子。習慣5min後(背景白色噪聲，65dB)，以隨機的次序使用兩種類型的聽覺刺激在刺激前將單獨的聽覺刺激[120dB，40ms，(P)]或被前置脈衝操控的刺激[75dB，20ms(PP)]施加100ms。在每次實驗期限過程中以20s的刺激間期提供每種類型的20次試驗。對每一單獨動物分別求兩種類型試驗的振幅的平均值(單獨的刺激或被前置脈衝操控的刺激)。使用下列公式計算PPI百分比100-[(前置脈衝的平均驚恐振幅+脈衝試驗/單獨脈衝試驗的平均驚恐振幅)x100]，即100-(PP/P)x100。計算的％PPI較高值表示前置脈衝抑制了對脈衝刺激的反應，而較低值表示前置脈衝的較弱抑制。在試驗前5min ip給予的MK-801(0.2mg/kg)或在試驗前10min sc給予的苯丙胺(2.5mg/kg)誘導感覺運動門控缺乏。發現口服給予的本發明有代表性的化合物在本實驗模型中具有活性，逆轉了MK-801(圖4)或苯丙胺誘導的PPI缺乏。
DBA小鼠中的PPI使用雄性3周齡DBA/2J和C57BL/6J小鼠。
如Bortolato等在Psychopharmacology，2007，Oct；194(3)361-9中所述對聽覺驚恐反應和PPI進行檢測。
在每次實驗中，指定小鼠接受本發明的化合物或載體並且使用受試者之間的設計在PPI期限中測試。
使用下列公式計算PPI百分比100-[(前置脈衝的平均驚恐振幅+脈衝試驗/單獨脈衝試驗的平均驚恐振幅)x100]，即100-(PP/P)x100。將聽覺驚恐反應的振幅計算為對所有單獨的脈衝試驗的反應平均值，從而排除了提供的5次單獨的脈衝試驗中第一次或最後一次的阻滯。
發現口服給予的本發明有代表性的化合物在本實驗模型中具有減少BDA/2J小鼠PPI缺乏的活性。
(圖42-[2-(3-丁氧基苯基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽(NW-3509)在大鼠MK-801 PPI破壞中的效果。將數據表示為n＝10隻動物的平均值+SEM。p＜0.01表示載體與MK-801之間統計學上的顯著性差異。*p＜0.05**p＜0.01表示載體+MK-801處理的動物和使用2-[2-(3-丁氧基苯基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺鹽酸鹽(NW-3509)處理的動物之間具有統計學上的顯著性差異。
Dunnet檢驗後為變異分析) 實施例27大鼠的反常睡眠紊亂 已經使用大量典型臨床觀察結果和心理學報告驗證了睡眠與神經病現象之間的精神病理學和神經生物學相關性。精神分裂症患者表現出嚴重的失眠症與大量睡眠體系結構的結構改變，例如REM入睡前的等待時間和期間減少和SWS(慢波睡眠)時間減少。大量研究已經證實睡眠剝奪延長事實上有利於大量暫時性的心理紊亂，包括言詞結構受損，分裂的思維，人格解體和從最小的紊亂和異常體覺到複雜的聽覺和幻覺的知覺改變。一般而言，這些紊亂無法與神經病現象區分，但通常在恢復性睡眠延長後消除。幾項研究記錄了在強迫性睡眠剝奪期後，大鼠表現出有限時間的奇異的一組行為改變，例如刻板行為和活動過度。另外，大鼠睡眠剝奪強化了驚恐反應並且破壞了PPI，這種效應為時間依賴性的並且可通過抗精神病藥物逆轉(Gessa，GL等(1995)European Neuropsychopharmacology 5，89-93)。這類現象通常被解釋為與精神病相關，因為它們一般由擬精神病劑在大鼠中產生。大鼠睡眠剝奪模型可以被視為躁狂模型。
動物使用Sprague-Dawley大鼠(稱重200-300g)。
方法在大鼠中誘發反常睡眠紊亂(SD)的操作基於平臺法(從Jouvet等(1964)。Journal of Physiology(Paris)，56，381中的改進)。將大鼠保持在充滿水的深槽內的小的樹脂玻璃平臺上(7cm直徑)。每個平臺周圍環繞距表面下達1cm的水。使食物顆粒和水瓶位於槽上部的柵格上。在整個SD研究過程中，將槽內部的試驗室和水的溫度維持在23±1℃。將對照組大鼠放入其寄居籠子或相當於用於SD的那些的水槽上的實驗室，但平臺直徑為12cm，允許它們達到REM睡眠，但不落入水中。在SD期結束時(72hr)，即刻使大鼠離開水乾燥並且放入驚恐室(用於PPI測定)或活動籠子(活動過度)以便進行行為測試。在整個SD期過程中每日改變槽中的水。將對照組大鼠維持在與睡眠剝奪大鼠相同的室內其SD的持續期間。在PPI或行為測試前給予供試化合物。
數據分析對每隻動物而言，使用兩種方式或三種方式方差分析(ANOVA)來分析該期限第二期中的第一次和第二次平分期限的平均值驚恐振幅(阻滯，6次各自單獨的脈衝試驗)，其中預處理(如果存在)和處理作為受試者之間的因素且阻滯作為反覆的措施。使用下列公式計算PPI百分比100-[(前置脈衝的平均驚恐振幅+脈衝試驗/單獨脈衝試驗的平均驚恐振幅)x100]，即100-(PP/P)x100並且使用多因素ANOVAs分析(使用對每次實驗而言特定的設計和如下所述的比較)，其中預處理與處理的注射的不同組合作為受試者之間的因素並且試驗類型作為反覆措施。使用Tukey檢驗進行Post hoc分析。使用一種方式或兩種方式方差分析(ANOVA)來分析運動行為數據，如果合適，可以使用反覆措施，隨後進行作為post-hoc檢驗的Tukey檢驗。
發現口服或腹膜內或皮下給予的本發明有代表性的化合物在本實驗模型中具有減少PPI缺乏和被睡眠剝奪誘發的活動過度的活性。
實施例28古柯鹼-誘導的行為敏化試驗 藥物成癮是以強迫性藥物尋找和攝入為特徵的病理行為。這些行為改變的一種動物模型是長時間的運動活動增加，由反覆向齧齒動物給予精神刺激藥所誘導(Robinson T.E.and Berridge K.C.Brain Res.Brain Res.Rev.(1993)18，247-91)，被稱為藥物-誘導的行為敏化。在古柯鹼誘導的大鼠行為敏化模型中評價供試化合物的效應。
運動活動儀器使用雄性Wistar大鼠，到達時體重200-250g。在十六隻相同的金屬絲懸掛籠中測量運動活動，尺寸為36cm(L)x25cm(W)x20cm(H)。每籠含有兩套紅外發射器-檢測器光電池，位于格柵底部上方長軸1cm、前方8cm和籠子後部。由白噪音生成器提供背景噪音。在籠子內的運動產生光電池中斷，由I BM兼容計算機自動記錄之。
敏化操作和處置在實驗之前，使動物習慣於運動活動箱達連續2-3天。大鼠接受5天的i.p.注射古柯鹼(15mg/kg)或鹽水和供試化合物(0.1-100mg/kg)或其載體，記錄3h的運動活動。最後一次古柯鹼或鹽水注射後十天(第15天)，在沒有供試化合物的存在下用15mg/kg古柯鹼攻擊動物，再次監測3h的運動活動。
用古柯鹼處置的第五天，用載體i.p.預處理的動物顯示運動反應增加(比第一天高20％，p＜0.05)。最後一次注射古柯鹼或鹽水後十天，在沒有供試化合物的存在下用15mg/kg古柯鹼攻擊動物，再次監測3h的運動活動。預先用古柯鹼處置並且沒有接受供試化合物的大鼠被預期顯示對古柯鹼的運動活動反應增加(比第一天高30％，p＜0.05)。如果在5天古柯鹼處置期間用供試化合物預處理的大鼠沒有顯示運動活動增加，那麼該供試化合物被認為具有預防精神刺激藥成癮的效應(Koob G.F.，Sanna P.P.，Bloom F.E.Neuron(1998)21467-476；Robinson T.E.，Berridge K.C.Brain Res Brain Res Rev(1993)18247-291)。
統計學分析利用雙道ANOVA分析數據(3小時內光束中斷的總數)，反覆測量一種因子，包括四個實驗組(也就是鹽水/載體、鹽水/供試化合物、古柯鹼/載體和古柯鹼/供試化合物)和兩個時間點(第1天和第5天)，繼之以單純效應分析。利用第二種反覆測量一種因子的雙道ANOVA對比第1天和攻擊當天，繼之以Newman-Keuls post hoc檢驗。
發現口服給予的本發明有代表性的化合物在本實驗模型中具有活性。
實施例29乙酸對大鼠的急性膀胱刺激 使用成年麻醉雌性Sprague Dawley大鼠(170-200g)進行實驗。通過膀胱穹頂向膀胱內經由中線腹部切口插入導管(PE-50)，然後測量膀胱內壓力，以監測連續輸注0.15％乙酸期間的膀胱活動。乙酸的連續膀胱內輸注在麻醉大鼠中刺激膀胱，減少收縮間間隔(ICI)。在向用本發明化合物處理過的大鼠膀胱內輸注乙酸之前和之後，測量ICIs、最大收縮壓力和誘導反射性膀胱收縮的壓力閾值。
發現腹膜內或靜脈內給予有代表性的本發明化合物在本實驗模型中具有活性。
實施例30環磷醯胺(CYP)對大鼠的中等膀胱刺激 使用成年清醒和麻醉雌性Sprague Dawley大鼠(170-200g)進行實驗。由CYP誘發化學性膀胱炎，CYP被代謝為丙烯醛，是一種在尿中消除的刺激物。在實驗前一天給予CYP(150mg/kg/i.p.)。用CYP預處理導致膀胱刺激和非常頻繁的排洩，排洩之間的ICI為約150-200秒。
腹膜內或靜脈內給予有代表性的本發明化合物增加用於這種實驗模型中的清醒和麻醉大鼠的ICI。
實施例31大鼠偏頭痛試驗 動物和手術將雄性Wistar大鼠(250-350g)用戊巴比妥鈉的鹽水溶液麻醉(50mg/kg i.p.)。
向氣管和左股動脈插套管，分別用於人工換氣(55衝程(stroke)/min)和測量平均血壓(MBP)。向股靜脈插套管，用於供試活性劑的靜脈內給藥。
通過自動控釋加熱墊，維持體溫在37-38℃。將動物置於趨實體框架中，在頭皮中進行縱向切開。在顱骨中鑽孔，向三叉神經節的左眼分支(背側至前囟3.8mm，中線側面2.5mm，硬腦膜表面下方9.5mm)插入不鏽鋼雙極性電極(Plastic One MS 306)，用牙科膠粘劑固定。藉助簡單的電刺激確認電極放置正確，這導致由三叉神經纖維活化引起的頜運動。除去腦後，在每次實驗結束時肉眼檢查電極在纖維內的正確位置。
在電極的同側鑽第二個孔(嘴側至前囟1.5mm，矢狀縫側面1.5mm)，固定雷射都卜勒流量計的探針(尖端直徑0.8mm)，使其尖端指向中腦動脈(MCA)的分支，藉助PeriFlux 4001雷射都卜勒系統在線記錄腦血流(CBF)變化。
由於肌肉運動，在三叉神經節的電刺激期間讀取的雷射都卜勒人 為現象被神經肌肉阻斷劑泮庫溴銨的一次性i.v.推注(0.6mg/kgi.v.)所阻止。
利用戊巴比妥鈉和泮庫銨輸注(分別為12.5mg/kg/h+2.4mg/kg/h)維持全部實驗期間的麻醉和神經肌肉阻斷。
實驗方案在手術結束時，暫停三十分鐘，目的是使所測量的參數穩定。
電刺激增加了靜止CBF，矩形脈衝為0.5ms長，1-10Hz，0.5-1mA，時間30s。兩次平均化的預藥物刺激後，給予載體或藥物。
靜脈內給予的本發明有代表性的化合物降低由三叉神經刺激誘導的血流增加。
權利要求
1)式(I)的化合物
其中
X為-O-，-S-或-SO2-；
Y為氫，OH或O(C1-C4)烷基；
Z為＝O或＝S；
R為(C3-C10)烷基；ω-三氟(C3-C10)烷基；
R1和R2 獨立地為氫，羥基，(C1-C8)烷氧基，(C1-C8)烷硫基，滷素，三氟甲基或2，2，2-三氟乙基；或R1和R2之一位於R-X-鄰位上，並且與同一R-X-共同表示
基團，其中R0為(C2-C9)烷基；
R3和R′3 獨立地為氫或(C1-C4)烷基；
R4和R5獨立地為氫，(C1-C4)烷基；或R4為氫且R5為選自-CH2-OH，-CH2-O-(C1-C6)烷基，-CH(CH3)-OH，-(CH2)2-S-CH3，苄基和4-羥基苄基的基團；或R4和R5與相鄰的碳原子共同構成(C3-C6)環烷基殘基；
R6和R7獨立地為氫或(C1-C6)烷基；或與相鄰的氮原子共同構成5-6元單環飽和雜環，其任選包含一個額外選自-O-，-S-和-NR8-的雜原子，所述R8為氫或(C1-C6)烷基；
條件是當X為-S-或-SO2-時，Y不為OH或O(C1-C4)烷基；
如果可能，為分離形式的單一旋光異構體或其任意比例的混合物及其藥學上可接受的鹽。
2)權利要求1的化合物，其中
X為-O-，-S-；
Y為氫，OH或O(C1-C3)烷基；
Z為＝O或＝S；
R為(C4-C7)烷基或ω-三氟(C4-C6)烷基；
R1和R2 獨立地為氫，(C1-C4)烷氧基，滷素，三氟甲基或2，2，2-三氟乙基；或R1和R2之一位於R-X-鄰位上，並且與同一R-X-共同表示
基團，所述R0為(C2-C5)烷基；
R3和R′3 獨立地為氫或(C1-C3)烷基；
R4和R5獨立地為氫或(C1-C4)烷基；或R4為氫且R5為選自-CH2-OH，-CH2-O-(C1-C5)烷基，-(CH2)2-S-CH5，苄基和4-羥基苄基的基團；
R6和R7獨立地為氫或(C1-C4)烷基；或與相鄰的氮原子共同構成5-6元單環飽和雜環，其任選包含一個額外的選自-O-和-NR8-的雜原子，所述R8為氫或(C1-C6)烷基；
條件是當X為-S-時，Y不為OH或O(C1-C4)烷基；
如果可能，為分離形式的單一旋光異構體或其任意比例的混合物及其藥學上可接受的鹽。
3)權利要求1的化合物，其中
X為-O-，-S-；
Y為氫或O(C1-C3)烷基；
Z為＝O或＝S；
R為(C4-C7)烷基或ω-三氟(C4-C6)烷基；
R1和R2 獨立地為氫，(C1-C3)烷氧基，氟，氯，三氟甲基或2，2，2-三氟乙基；或R1和R2之一位於R-X-鄰位上，並且與同一R-X-共同表示
基團，所述R0為(C3-C4)烷基；
R3和R′3 獨立地為氫或(C1-C3)烷基；
R4和R5獨立地為氫或(C1-C4)烷基；或R4為氫且R5為選自-CH2-OH，-CH2-O-(C1-C3)烷基，苄基和4-羥基苄基的基團；
R6和R7獨立地為氫或(C1-C3)烷基；或與相鄰的氮原子共同構成5-6元單環飽和雜環，任選包含一個額外選自-O-和-NR8-的雜原子，所述R8為氫或(C1-C6)烷基；
條件是當X為-S-時，Y不為O(C1-C4)烷基；
如果可能，為分離形式的單一旋光異構體或其任意比例的混合物及其藥學上可接受的鹽。
4)權利要求1的化合物，其中
X為-O-；
Y為氫；
Z為＝O；
R為(C4-C6)烷基；
R1和R2 獨立地為氫或滷素，優選氟；
R3，R′3，R4和R5為氫；
R6和R7 獨立地為氫或(C1-C3)烷基；
如果可能，為分離形式的單一旋光異構體或其任意比例的混合物及其藥學上可接受的鹽。
5)權利要求1的化合物，其選自
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-乙醯胺
2-[2-(3-戊氧基苯基)-乙氨基]-乙醯胺
2-[2-(3-己氧基苯基)-乙氨基]-乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N-甲基乙醯胺
2-[2-(3-戊氧基苯基)-乙氨基]-N-甲基乙醯胺
2-[2-(3-己氧基苯基)-乙氨基]-N-甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁硫基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁基磺醯基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基苯基)-(N′-羥基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基苯基)-(N′-甲氧基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基苯基)-(N′-丙氧基)乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基-硫代乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基苯基)-2-甲基丙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-{2-[3-(4，4，4-三氟丁氧基)苯基]-乙氨基}-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁硫基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基-2-氯苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基-2-氟苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基-4-甲氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基-4-甲基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基-2，4-二氟-4-甲基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基-2，6-二氟-4-甲基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二乙基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二丙基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二丁基乙醯胺
2-[2-(3-戊氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-己氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-1-吡咯烷-1-基-乙-1-酮
2-[2-(3-戊氧基苯基)-乙氨基]-1-吡咯烷-1-基-乙-1-酮
2-[2-(3-己氧基苯基)-乙氨基]-1-吡咯烷-1-基-乙-1-酮
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基丙醯胺
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-3-羥基-N，N-二甲基丙醯胺
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-3-甲氧基-N，N-二甲基丙醯胺
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-3-丙氧基-N，N-二甲基丙醯胺
2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-2，N，N-三甲基丙醯胺
2-[2-(3-戊氧基苯基)-乙氨基]-2，N，N-三甲基丙醯胺
2-[2-(3-己氧基苯基)-乙氨基]-2，N，N-三甲基丙醯胺
(S)-2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-丙醯胺
(S)-2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N-甲基丙醯胺
(S)-2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基丙醯胺
(R)-2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-丙醯胺
(R)-2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N-甲基丙醯胺
(R)-2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基丙醯胺
2-[2-(3-丁氧基-2-三氟甲基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基-4-三氟甲基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
2-[2-(3-丁氧基-5-三氟甲基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺
如果可能，為分離形式的單一旋光異構體或其任意比例的混合物及其藥學上可接受的鹽，優選與鹽酸或甲磺酸形成的鹽。
6)權利要求5的化合物，其為2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺，2-[2-(3-丁氧基-2，6-二氟苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺，2-[2-(3-戊氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺，或2-[2-(3-己氧基苯基)-乙氨基]-N，N二甲基乙醯胺，
及其藥學上可接受的鹽，優選與鹽酸或甲磺酸形成的鹽。
7)權利要求6的化合物，其為2-[2-(3-丁氧基苯基)-乙氨基]-N，N-二甲基乙醯胺或其藥學上可接受的鹽，優選鹽酸鹽或甲磺酸鹽。
8)權利要求1的化合物，其中
X為-SO2-；或
Y為OH或O(C1-C4)烷基；或
Z為＝S；或
R為(C9-C10)烷基或ω-三氟(C3-C10)烷基；或
R1和/或R2 不為氫；或
R3和R′3 都不為氫；或
R4和R5 都不為氫，但在與相鄰碳原子結合時也不構成(C3-C6)環烷基殘基；或
R6和R7 與相鄰的氮原子共同構成單環5-6元飽和雜環，任選包含一個額外的選自-O-，-S-和-NR8-的雜原子，所述R8為氫或(C1-C6)烷基，
如果可能，為分離形式的單一旋光異構體或其任意比例的混合物及其藥學上可接受的鹽。
9)權利要求1-8中任意項的化合物，其用作藥物。
10)權利要求1的化合物，作為具有治療其中上述機制起病理作用的病理情況的鈉和/或鈣通道調節劑的活性的藥物的用途，所述的病理作用為神經性，認知，精神病，炎性，泌尿生殖或胃腸疾病，所述的藥物基本上沒有任何MAO抑制活性或具有明顯降低的MAO抑制活性。
11)權利要求2，3和4中任意項的化合物在權利要求10中的應用。
12)權利要求5的化合物在權利要求10中的應用。
13)權利要求6的化合物在權利要求10中的應用。
14)權利要求7的化合物在權利要求10中的應用。
15)權利要求1-8中任意項的化合物在權利要求10中的應用，其中所述的病症為選自疼痛和偏頭痛的神經障礙。
16)權利要求1-8中任意項的化合物在權利要求15中的應用，其中所述的疼痛為神經性疼痛症候群或炎性痛症候群。
17)權利要求1-8中任意項的化合物在權利要求15中的應用，其中疼痛為為急性或慢性疼痛。
18)權利要求1-8中任意項的化合物在權利要求10中的應用，其中所述的病症為選自阿爾茨海默病，帕金森病，癲癇症，多動腿症候群，中風或腦缺血的神經障礙。
19)權利要求1-8中任意項的化合物在權利要求10中的應用，其中所述的病症為侵害所有身體系統的炎症過程，所述所有身體系統諸如骨骼肌系統，關節炎症，侵害皮膚和相關組織的病症，呼吸系統病症或免疫和內分泌系統病症。
20)權利要求1-8中任意項的化合物在權利要求10中的應用，其中所述的病症為選自輕度認知缺損，抑鬱症，雙相性精神障礙，躁狂，精神分裂症，精神病，焦慮和成癮的認知病和/或精神病。
21)權利要求1-8中任意項的化合物在權利要求10中的應用，其中所述的病症為泌尿生殖器病症。
22)權利要求1-8中任意項的化合物在權利要求10中的應用，其中所述的病症為胃腸道病症。
23)權利要求1-8中任意項的化合物在權利要求10和15-22任意項中的應用，其中所述化合物與一種或多種其它治療劑結合使用。
24)權利要求1-8中任意項的化合物在製備治療病理情況的作為鈉和/或鈣通道調節劑具有活性的藥物中的應用，其中上述機理扮演病理角色，所述的病理情況為神經病學，認知，精神病學，炎性，泌尿生殖或胃腸疾病，所述的藥物基本上沒有任何MAO抑制活性或具有顯著降低的MAO抑制活性。
25)權利要求24的應用，其中所述的病症如權利要求15-22中任意項中所述。
26)藥物組合物，包含權利要求1-8中任意項的化合物作為活性組分與藥學上可接受的治療惰性有機或無機載體物質。
27)治療因電壓-門控的鈉和/或鈣通道功能障礙導致的病症所侵害的患者的方法，該方法包括對所述患者給予有效量的權利要求1-8中任意項的化合物。
28)權利要求27的方法，其中所述的病症為神經病學，認知，精神病學，炎性，泌尿生殖或胃腸疾病。
29)權利要求27和28中任意項的方法，其中所述的病症為選自疼痛和偏頭痛的病症。
30)權利要求27和28中任意項的方法，其中所述的病症為選自阿爾茨海默病，帕金森病，癲癇，多動腿症候群，中風和腦缺血的神經障礙。
31)權利要求27和28中任意項的方法，其中所述的病症為選自輕度認知缺損，抑鬱症，雙相性精神障礙，躁狂，精神分裂症，精神病，焦慮和成癮的認知病和/或精神病。
32)權利要求27-31中任意項的方法，其中對有此需要的患者給予的化合物的有效量不會表現出任何MAO-抑制活性或表現出顯著降低的MAO-抑制活性。
33)權利要求27-32中任意項的方法，其中所述的患者對因MAO抑制活性導致的不期望的副作用特別敏感。
34)如權利要求27-33中任意項中所述的方法，其中對有此需要的患者給予有效量的權利要求1-8中任意項的化合物聯合一種或多種其它的治療劑。
全文摘要
式(I)的取代的2-[2-(苯基)乙氨基]烷醯胺衍生物及其藥學上可接受的鹽如右式其中X，Y，Z，R，R1，R2，R3，R′3，R4，R5，R6，R7具有本說明書中定義的含義，包含它們作為活性組分的藥物組合物及其作為用於預防，緩解和治癒廣泛病理情況的鈉和/或鈣通道調節劑的應用，所述的病理情況包括，但不限於神經病學，認知，精神病學，炎性，泌尿生殖和胃腸疾病，其中上述機理已被描述為扮演病理角色。
文檔編號C07D295/182GK101687773SQ200880020386
公開日2010年3月31日 申請日期2008年5月14日 優先權日2007年6月15日
發明者P·梅洛尼, A·雷斯蒂沃, E·伊佐, S·弗朗西斯科尼, E·科隆布, C·薩比多-大衛 申請人:紐朗製藥有限公司