九蒸九制熟地黃的炮製工藝方法與流程

2023-12-08 05:50:01

本發明涉及中醫藥加工
技術領域：
，尤其涉及一種優化的九蒸九制熟地黃的炮製工藝方法。
背景技術：
：地黃為玄參科植物地黃rehmanniaglutinosalibosch.的塊根。始載於《神農本草經》，列為上品。歷代本草均有記載，為常用中藥之一。地黃入藥分為：鮮地黃、幹地黃、熟地黃、生地黃炭、熟地黃炭等。地黃經過不同的炮製方法加工後，其性味、功效亦發生相應的改變。鮮地黃性寒、味甘苦，以清熱生津、涼血止血為主。鮮地黃經加工焙乾後名幹地黃或生地黃，其性寒、味甘，以清熱涼血、養陰生津為主。幹地黃經蒸製後名熟地黃，其性由寒轉溫，其味由苦轉甘，其功效由清轉補，以滋陰補血，益精填髓為主。臨床根據其不同的功效，分別用於不同的病證。地黃的炮製方法及炮製品的質量對臨床療效會直接產生影響。縱觀歷代本草，地黃的炮製方法有十餘種之多，有些方法沿用至今。但是很多炮製方法沒有找到最優化的條件，影響到臨床準確用藥。地黃採用蒸製法加工最早文獻記載見於漢代《金匱要略方論》：「咀，蒸之如鬥米飯久，以銅器盛其汁，更絞地黃汁」。在南齊《劉涓子鬼遺方》中有：「切，蒸焙」，唐《外臺秘要》有：「細切蒸之極熟」的記載。熟地黃一詞始見於唐孫思邈《備急千金要方》,其炮製方法為「採地黃，去其須、葉及細根，搗絞汁以漬肥者，著甑中，土若米無在以蓋上，蒸之一時出，暴燥，更內汁中，又蒸汁，盡出，便乾之。」孫思邈《千金翼方》曰:「斤數揀擇一準生法，浸訖，候好晴日便早蒸之，即暴於日中，夜置汁中以物蓋之，明朝又蒸，古法九遍止，今但看汁盡色黑熟，蒸三、五遍亦得」。其炮製過程要求重蒸三、五遍，質量要求色黑。由文中所述「古法九遍止」可知，炮製熟地黃蒸製多次的方法在此之前即有，但尚未見文獻記載。宋代對熟地黃的蒸製標準提出了進一步的要求,《證類本草》引圖經曰「今幹之法：取肥地黃三、二十斤，洗淨，更以揀去細根及根節瘦短者，亦得二、三十斤，搗絞取汁，投銀銅器中，下肥地黃浸漉會浹，飯上蒸三、四過，時時浸漉轉，蒸訖又暴，使汁盡其地黃光黑如漆，味甘如飴糖」。對熟地黃炮製品的質量提出了「光黑如漆，味甘如飴」的質量標準。熟地黃的這種質量標準要求一直沿用至今。歷代用酒炮製熟地黃均採用黃酒，並以紹興產黃酒為佳，認為：熟地黃質厚味濃，滋膩礙胃，酒之後則性轉溫主補血，且可借酒力行散，起到行藥勢，通血脈的作用，更有利補血，使地黃補而不膩。生地與熟地藥理作用是不同的，生地性寒，功能為涼血清熱、滋陰補腎、生津止渴，常用於治療骨蒸癆熱、咽喉燥痛、痰中帶血等症。生地製成熟地後，藥性由寒變微溫，其功能也發生變化，成為補血藥。熟地黃炮製的方法文獻記載不盡相同，有「蒸三、五遍」、「九蒸九制」等，但是大多根據經驗炮製，尚不能找到最優炮製方法，這些對熟地黃炮製品的質量要求雖都能達到「光黑如漆，味甘如飴」的標準，但是藥效上缺有所差別，直接影響到熟地黃炮製品的治病療效。古人通過臨床實踐發現，只有九蒸九制的熟地，才能充分去其寒性，變為溫藥，其補腎養血的功效才能體現出來，因此，三、五次蒸製不能夠達到藥效。在熟地黃的炮製工藝中，常規九蒸九制儘管在外觀色澤上達到要求，但由於其工藝複雜，條件繁多，成本高，且炮製工藝過程以臨床藥工的經驗為主，隨意性大，最容易出現炮製效果不佳的情況，其有效成分的增加、有毒成分的減少不能夠達到最優，因此，並不是一種主流的炮製工藝，但也正是由於這種精細的炮製方法，一旦條件適宜，炮製出的熟地黃藥效極為有效。通常對熟地黃炮製品的質量要求是一致的即「光黑如漆，味甘如飴」的標準，而每個人的色覺、味覺存在較大的差異，因此中藥飲片加工後的成品，其質量參差不齊。本發明在對九蒸九制的炮製工藝進行優化，找出最優的炮製條件，並且通過更為具體的參數指標對炮製產品進行質量驗證，獲得最優的炮製工藝。技術實現要素：本發明提供了九蒸九制熟地黃的炮製方法及質量控制標準，為臨床該藥的炮製加工提供規範依據，通過新炮製方法和工藝條件，有助於提高藥物質量，5-羥甲基糠醛（hmf）和甲基丙烯酸羥乙酯(hmfa)的含量最高，進一步提高熟地黃的藥效。基於此，本發明提供一種熟地黃的九蒸九制炮製方法，其包括：第一步，揀選；第二步，洗藥；第三步，一蒸一制；第四步，二蒸二制；第五步，三蒸三制；第六步，四蒸四制；第七步，五蒸五制；第八步，六蒸六制；第九步，七蒸七制；第十步，八蒸八制；第十一步，九蒸九制；第十二步，滅菌、包裝；其中，所述炮製方法中九蒸九制熟地黃的蒸製溫度範圍為130℃～150℃。其中，所述炮製方法中九蒸九制熟地黃的壓力範圍為0.2mpa～0.4mpa。其中，所述炮製方法中九蒸九制熟地黃所使用的待炮製的生地黃和黃酒的質量比例為3：1～2：1。其中，所述第三步進一步具體為：第a步，浸酒，將淨制後的生地黃置於周轉筐內，加黃酒，黃酒量為總黃酒添加量的20%～25%為宜，浸潤2～4小時至酒被吸盡，半小時翻動一次；第b步，蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，通入壓力為0.2～0.4mpa的蒸汽約8小時停蒸汽悶潤一夜，蒸製溫度範圍為130℃～150℃，蒸至內外呈滋潤黑色，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；第c步，熟地黃乾燥，溫度為55～60℃，乾燥約36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；第d步，拌潤，將第一次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤約2～4小時，半小時翻動一次，獲得中間品。其中，所述第四步進一步具體為：第a步，蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，補充黃酒，通入壓力為0.2～0.4mpa的蒸汽約6小時，蒸製溫度範圍為130℃～150℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；第b步，熟地黃乾燥，溫度為55～60℃，乾燥約36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；第c步，拌潤，將第二次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤約2～4小時，半小時翻動一次。其中，所述第五步進一步具體為：第a步，蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，補充黃酒，通入壓力為0.2～0.4mpa的蒸汽約4小時，蒸製溫度範圍為130℃～150℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；第b步，熟地黃乾燥，溫度為55～60℃，乾燥約36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；第c步，拌潤，將第三次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤約2～4小時，半小時翻動一次。所述第十一步進一步具體為：第a步，蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，補充黃酒，通入壓力為0.2～0.4mpa的蒸汽約4小時，蒸製溫度範圍為130℃～150℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；第b步，熟地黃乾燥，溫度為55～60℃，乾燥約36小時至六、七成幹或攤於制場自然晾制至六、七成幹；第c步，乾燥，執行《乾燥崗位標準操作規程》,《熱風循環烘箱標準操作規程》或《敞口式烘箱標準操作規程》，設定溫度55～60℃，厚度：25～30mm，時間約36小時，乾燥後的水分控制在15.0﹪以內。本發明還提供採用上述方法製備的熟地黃。所述熟地黃中hmf經hplc檢測峰面積優選3500000～3700000，hmfa經hplc檢測峰面積優選280000～300000。有益的技術效果本發明通過試驗獲取九蒸九制熟地黃的最優炮製條件，有助於提高藥物質量及藥效成分，5-羥甲基糠醛（hmf）和甲基丙烯酸羥乙酯(hmfa)的含量最高，進一步提高熟地黃的藥效。具體實施方式炮製熟地黃的製備工藝中，溫度、壓力、黃酒的用量是三個最主要的條件因素，通過本發明大量的正交試驗得出，溫度是影響炮製熟地黃藥效品質的最重要的因素，要獲得九蒸九制熟地黃最優溫度範圍為130℃～150℃，最優的溫度為140℃，壓力0.2mpa～0.4mpa合適，最優壓力為0.3mpa，生地黃和黃酒用量比例3：1～2：1合適，我們選用2：1為最優比例。我們分析這個最優的製備條件，溫度若低於130℃，則熟地不容易被蒸透，蒸製的時間會延長，此外微生物控制較差，溫度若高於150℃，則熟地容易在蒸製過程中外焦裡生，影響有效成分；壓力若小於0.2mpa，黃酒不容易蒸製進熟地，壓力若大於0.4mpa，對設備要求較高和能源消耗過多，不夠經濟實惠；若地黃與黃酒的比例大於3：1，則黃酒的量不足，無法完全蒸透地黃，若地黃與黃酒的比例小於2：1，則黃酒的量過多，蒸製的時間過長，黃酒的消耗過多，不夠經濟實惠，且一蒸一制時，所使用黃酒量較多，才能浸泡透，優選佔據整個黃酒用量的20%～25%，便於第一次蒸製獲得儘可能多的有效成分，最後一次蒸製所使用的黃酒量也較多，佔據整個黃酒用量的20%～25%。黃酒宜選用5年以上的老黃酒，其發散之性減弱，而溫補之性增強，故選取陳年黃酒蒸製地黃，使熟地黃的溫補藥效更強，在本發明中選擇紹興產的5年以上的老黃酒，而如果黃酒選用新出廠的酒品，則無法達到這種功效，熟地黃的溫補性能很弱。本發明提供的熟地黃的炮製工藝方法具體包括：第一步，揀選，執行《淨選崗位標準操作規程》，從生地黃中揀出雜質，放潔淨周轉容器中，稱量，切片，厚度在25～30mm；第二步，洗藥，執行《洗藥崗位標準操作規程》及《洗藥機標準操作規程》，洗藥崗位操作工將熟地黃放入機中，用符合飲用水標準的水洗滌3遍至潔淨、無泥沙，裝入潔淨塑料周轉容器；第三步，一蒸一制；第四步，二蒸二制；第五步，三蒸三制；第六步，四蒸四制；第七步，五蒸五制；第八步，六蒸六制；第九步，七蒸七制；第十步，八蒸八制；第十一步，九蒸九制；第十二步，滅菌，憑包裝指令包裝，執行《包裝崗位標準操作規程》，要求稱量準確，封口嚴密，無夾藥、漏藥現象，每包裝貼有合格證，合格證內容清晰完整。所述第三步進一步具體為：第a步，浸酒，將淨制後的生地黃置於周轉筐內，加黃酒，黃酒量為總黃酒添加量的20%～25%為宜，浸潤2～4小時至酒被吸盡，半小時翻動一次；第b步，蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，通入壓力為0.2～0.4mpa的蒸汽約8小時停蒸汽悶潤一夜，蒸製溫度範圍為130℃～150℃，蒸至內外呈滋潤黑色，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；第c步，熟地黃乾燥：溫度為55～60℃，乾燥約36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；第d步，拌潤，將第一次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤約2～4小時，半小時翻動一次，獲得中間品。所述第四步進一步具體為：第a步，蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，補充黃酒，通入壓力為0.2～0.4mpa的蒸汽約6小時，蒸製溫度範圍為130℃～150℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；第b步，熟地黃乾燥，溫度為55～60℃，乾燥約36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；第c步，拌潤，將第二次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤約2～4小時，半小時翻動一次。所述第五步進一步具體為：第a步，蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，補充黃酒，通入壓力為0.2～0.4mpa的蒸汽約4小時，蒸製溫度範圍為130℃～150℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；第b步，熟地黃乾燥，溫度為55～60℃，乾燥約36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；拌潤：將第三次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤約2～4小時，半小時翻動一次。所述第六步進一步具體為：第a步，蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，補充黃酒，通入壓力為0.2～0.4mpa的蒸汽約4小時，蒸製溫度範圍為130℃～150℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；第b步，熟地黃乾燥，溫度為55～60℃，乾燥約36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；第c步，拌潤，將第四次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤約2～4小時，半小時翻動一次。所述第七步進一步具體為：第a步，蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，補充黃酒，通入壓力為0.2～0.4mpa的蒸汽約4小時，蒸製溫度範圍為130℃～150℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；第b步，熟地黃乾燥，溫度為55～60℃，乾燥約36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；第c步，拌潤，將第五次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤約2～4小時，半小時翻動一次。所述第八步進一步具體為：第a步，蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，補充黃酒，通入壓力為0.2～0.4mpa的蒸汽約4小時，蒸製溫度範圍為130℃～150℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；第b步，熟地黃乾燥，溫度為55～60℃，乾燥約36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；第c步，拌潤，將第六次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤約2～4小時，半小時翻動一次。所述第九步進一步具體為：第a步，蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，補充黃酒，通入壓力為0.2～0.4mpa的蒸汽約4小時，蒸製溫度範圍為130℃～150℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；第b步，熟地黃乾燥，溫度為55～60℃，乾燥約36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；第c步，拌潤，將第七次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤約2～4小時，半小時翻動一次。所述第十步進一步具體為：第a步，蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，補充黃酒，通入壓力為0.2～0.4mpa的蒸汽約4小時，蒸製溫度範圍為130℃～150℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；第b步，熟地黃乾燥，溫度為55～60℃，乾燥約36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；第c步，拌潤，將第七次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤約2～4小時，半小時翻動一次。所述第十一步進一步具體為：第a步，蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，補充黃酒，黃酒補充量為總黃酒添加量的20%～25%為宜，通入壓力為0.2～0.4mpa的蒸汽約4小時，蒸製溫度範圍為130℃～150℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃拌勻；第b步，熟地黃乾燥，溫度為55～60℃，乾燥約36小時至六、七成幹或攤於制場自然晾制至六、七成幹；第c步，乾燥，執行《乾燥崗位標準操作規程》,《熱風循環烘箱標準操作規程》或《敞口式烘箱標準操作規程》，設定溫度55～60℃，產品熟地黃厚度25～30mm，時間約36小時，乾燥後的水分控制在15.0﹪以內。以下採用實施例來詳細說明本發明的實施方式，藉此對本發明如何應用技術手段來解決技術問題，並達成技術效果的實現過程能充分理解並據以實施。實施例九蒸九制熟地黃炮製藥物：生地黃飲片黃酒宜選用5年以上的老黃酒，其發散之性減弱，而溫補之性增強，故選取陳年黃酒蒸製地黃，使熟地黃的溫補藥效更強，在本發明中選擇紹興產的5年以上的老黃酒，而如果黃酒選用新出廠的酒品，則無法達到這種功效，熟地黃的溫補性能很弱。揀選600g生地黃，執行《淨選崗位標準操作規程》，從生地黃中揀出雜質，放潔淨周轉容器中，稱量，切片，厚度在25～30mm之間。執行《洗藥崗位標準操作規程》及《洗藥機標準操作規程》，洗藥崗位操作工將熟地黃放入機中，用符合飲用水標準的水洗滌3遍至潔淨、無泥沙，裝入潔淨塑料周轉容器。一蒸一制：將60kg生地黃浸酒，將淨制後的生地黃置於周轉筐內，加黃酒，黃酒量為8kg，浸潤4小時至酒被吸盡，半小時翻動一次；蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，通入壓力為0.4mpa的蒸汽8小時停蒸汽悶潤一夜，蒸製溫度範圍為140℃，蒸至內外呈滋潤黑色，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；在溫度為60℃條件下，乾燥熟地黃約36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹，將第一次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤4小時，半小時翻動一次，獲得中間品。二蒸二制：蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將一蒸一制獲得的中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，加黃酒2kg，通入壓力為0.3mpa的蒸汽6小時，蒸製溫度範圍為140℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；熟地黃乾燥，溫度為60℃，乾燥36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；將第二次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤4小時，半小時翻動一次。三蒸三制：蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，加黃酒2kg，通入壓力為0.3mpa的蒸汽4小時，蒸製溫度範圍為140℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；熟地黃乾燥，溫度為60℃，乾燥36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；將第三次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤4小時，半小時翻動一次。四蒸四制：蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，加黃酒2kg，通入壓力為0.3mpa的蒸汽4小時，蒸製溫度範圍為140℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；熟地黃乾燥，溫度為60℃，乾燥36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；將第四次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤4小時，半小時翻動一次。五蒸五制：蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，加黃酒2kg，通入壓力為0.3mpa的蒸汽4小時，蒸製溫度範圍為140℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；熟地黃乾燥，溫度為60℃，乾燥36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；將第五次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤4小時，半小時翻動一次。六蒸六制：蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，加黃酒2kg，通入壓力為0.3mpa的蒸汽4小時，蒸製溫度範圍為140℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；熟地黃乾燥，溫度為60℃，乾燥36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；將第六次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤4小時，半小時翻動一次。七蒸七制：蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，加黃酒2kg，通入壓力為0.3mpa的蒸汽4小時，蒸製溫度範圍為140℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；熟地黃乾燥，溫度為60℃，乾燥36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；將第七次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤4小時，半小時翻動一次。八蒸八制：蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，加黃酒2kg，通入壓力為0.3mpa的蒸汽4小時，蒸製溫度範圍為140℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃；熟地黃乾燥，溫度為60℃，乾燥約36小時至八成幹或攤於制場自然制至近幹；將第七次蒸出液與乾燥後的熟地黃拌勻浸潤4小時，半小時翻動一次。九蒸九制：蒸製，執行《蒸製崗位標準操作規程》及《蒸煮鍋標準操作規程》或《蒸籠標準操作規程》，將中間品投入可傾式蒸煮鍋內或均勻置入蒸籠內，補充黃酒8kg，通入壓力為0.4mpa的蒸汽4小時，蒸製溫度範圍為140℃，停蒸汽悶潤2小時，倒出裡面蒸出的液體和熟地黃拌勻；熟地黃乾燥，溫度為60℃，乾燥36小時至六、七成幹或攤於制場自然晾制至六、七成幹；熟地黃再次乾燥，執行《乾燥崗位標準操作規程》,《熱風循環烘箱標準操作規程》或《敞口式烘箱標準操作規程》，設定溫度60℃，厚度：25～30mm，時間約36小時，乾燥後的水分控制在15.0﹪以內。實驗一九蒸九制熟地與市售生地黃、三蒸三制熟地有效成分的比較藥材：本發明中藥炮製方法炮製的九蒸九制熟地實施例1，編號為1。從市場上購置市售生地黃、熟地黃（三蒸三制）以及九蒸九制熟地黃(條件未知)，分別編號為2：生地黃、3：熟地黃、4：九蒸九制熟地黃，購自合肥市某大型藥店，每種藥材購置3批次，所有藥材經安國市中藥行專家鑑定，為正品。實驗儀器：ｐ3000高效液相色譜儀；welchromc18色譜柱（4.6mm×250mm，5μｍ）；ag204電子分析天平；re～52a旋轉蒸發儀（上海亞榮生化儀器廠）；ｔg16～ｗ微量高速離心機；hh～601超級恆溫水浴。實驗試劑：5-羥甲基糠醛（hmf）和5-羥甲基糠酸(hmfa)對照品（兩種物質為熟地黃的鑑定物質，以標準品繪製標準曲線）為安徽中醫藥大學基礎醫學院提供，經hplc測定無雜峰，符合定性要求。樣品製備方法：將乾燥後的各類地黃分別用打粉機製備成粗粉，粒度能全部通過粒徑為24目二號篩，精密稱取各藥材粉末1.0g，置圓底燒瓶中，精密加入甲醇50ｍl，稱定重量，加熱回流提取1.5h，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液25ｍl，旋蒸濃縮至近幹，殘渣用體積分數15％甲醇溶解，轉移至5ｍl量瓶中，定容，搖勻，經0.45μｍ濾膜過濾，備用。色譜條件：welchromc18色譜柱（4.6mm×250mm，5μｍ），流速1.0ｍl／min，檢測波長為284nm，柱溫35℃，進樣量20μl。二元梯度洗脫，流動相ａ為乙腈，ｂ為體積分數0.1％磷酸水溶液（洗脫程序：0~5min，1％ａ；5~10min，1％~4％ａ；10~22min，4％~6％ａ；22~30min，6％~18％ａ；30~60min，18％~25％ａ；60~80min，25％~35％ａ）。精密度：實驗對同一樣品溶液，按前述色譜條件進行hplc分析，連續進樣5次，記錄保留時間及各峰峰面積。重複性實驗：取同一藥材5份，按前述製備方法操作，製備樣品溶液，按前述色譜條件進行hplc分析，記錄保留時間及各峰峰面積。穩定性：實驗同一樣品溶液，室溫存放，分別於0、4、8、12、24、48h，按前述色譜條件進行hplc分析，記錄保留時間及各峰峰面積。產品熟地黃性狀鑑定標準：不規則的厚片或塊，表面烏黑色，有光澤，黏性大，質柔軟而帶韌性，不易折斷，斷面烏黑色，有光澤，氣微，味甜。結果本發明質控標準炮製地黃與市售地黃性狀對比本發明質控標準炮製地黃與市售生地黃相比，在性狀上均存在較大差異，本發明炮製地黃「色黑如漆、味甘如飴」，質地柔軟，同時帶有任性，切開後表裡顏色一致，為烏黑色。市售生地黃呈深棕色，質地較硬，韌性相對較強，切開後，呈表深裡淺。三蒸三制熟地黃顏色深棕色，質地較柔軟，韌性較好，切開後表裡顏色均較深，為黑色，但是光澤度不均勻。市售九蒸九制熟地黃外表顏色烏黑，光澤度較好，切開後表裡顏色較為一致，粘度與本發明炮製熟地比較，相對較差，有待於進一步鑑定與本發明炮製地黃差異。色譜條件的建立及優化284nm是hmf和hmfa的檢測波長，它是地黃炮製前後變化最顯著的成分之一。因此，本實驗參考2015年版《中國藥典》生、熟地黃的含量測定色譜條件，並對流動相梯度程序進行優化，以獲得儘量多的共有峰信息，最終確定的色譜條件。採用多個波長進行分析，樣品間可識別的共有峰增加，能更準確地反映藥材間的差異。方法學驗證在精密度、重複性和穩定性實驗中，測得其共有峰相對保留時間及相對峰面積的rsd均在1.1％和4.7％以內，表明儀器的精密度和方法重複性良好，樣品在室溫下48h內穩定。表1hmf對照品標準曲線的製備結果序號1234567進樣量μg0.05060.15180.30360.60721.21441.82162.4288峰面積35454811549752305415461548392498451391844518564842表2hmfa對照品標準曲線的製備結果序號1234567進樣量μg0.01130.03390.10170.15260.20340.30510.4068峰面積35454811549752305415461548392498451391844518564842熟地黃樣品測定取熟地黃樣品溶液，按前述色譜條件進行hplc分析，以hmf和hmfa標準品hplc所繪製的標準曲線為參考。表3不同樣品hmf、hmfa吸收峰面積結果樣品hmf峰面積/105hmfa峰面積/105生地黃679554*364841*市售熟地黃（三蒸三制）1135484*334541*市售熟地黃（九蒸九制）2648479*304879本發明炮製熟地黃3654814289747與本發明炮製熟地黃比較，*p<0.05。所有數據均以同種樣品，三個批次所得數據均值為準。hmf和hmfa生成量的高低直接影響方劑主體作用的發揮。有研究報導，hmf和hmfa雖然藥材本身含有，但相對含量較低，其主要積累量均是在地黃炮製過程中大量生成，故地黃炮製方法直接影響兩個成分的含量積累，熟地黃中的hmf主要來自於炮製加熱過程中單糖的脫水轉化，加熱時間和溫度對其產生量有重要影響，在較短的時間內單糖不斷脫水轉化，表現為hmf隨加熱時間的延長而增加。研究發現hmf存在一定的藥理活性，如降血糖、改善學習記憶、抗心肌缺血等作用，熟地黃功效的藥理活性成分。而hmfa是由hmf氧化而來，控制hmf氧化程度，對於保留有效成分具有十分重要的作用。因此，相對較高的hmf的產生和相對較低的hmfa的產生，是熟地黃較為中藥的質量控制要求。綜上所述，研究表明，市場上熟地黃商品的hmf及hmfa的含量不能達到熟地黃的品質標準。本實驗在利用hplc方法對本發明炮製熟地黃所含hmf和hmfa進行定量分析的基礎上，闡明了其在不同炮製過程中的量變規律，揭示出地黃炮製的現實科學意義。通過前述實驗可以看出，雖然同為九蒸九制，但是獲得的熟地黃的hmf和hmfa含量並不相同，因此，要達到最優的熟地黃品質，有必要對九蒸九制的製備條件進行摸索，本申請經過大量的正交實驗，發現溫度是影響炮製的熟地黃hmf、hmfa量的最重要的因素，為獲得最優的炮製條件，下面進行最優條件的實驗驗證。實驗二九蒸九制熟地不同製備條件有效成分的比較藥材：本發明中藥炮製方法炮製的九蒸九制熟地，以溫度為入手研究的主要因素，以整個炮製過程溫度為100℃炮製的九蒸九制熟地、整個炮製過程溫度為140℃炮製的九蒸九制熟地、整個炮製過程溫度為180℃炮製的九蒸九制熟地為研究材料，分別編號為1、2、3。實驗儀器：ｐ3000高效液相色譜儀；welchromc18色譜柱（4.6mm×250mm，5μｍ）；ag204電子分析天平；re～52a旋轉蒸發儀（上海亞榮生化儀器廠）；ｔg16～ｗ微量高速離心機；hh～601超級恆溫水浴。實驗試劑：5-羥甲基糠醛（hmf）和5-羥甲基糠酸(hmfa)對照品（兩種物質為熟地黃的鑑定物質，以標準品繪製標準曲線）為安徽中醫藥大學基礎醫學院提供，經hplc測定無雜峰，符合定性要求。樣品製備方法：將乾燥後的各類地黃分別用打粉機製備成粗粉，粒度能全部通過粒徑24目的二號篩，精密稱取各藥材粉末1.0g，置圓底燒瓶中，精密加入甲醇50ｍl，稱定重量，加熱回流提取1.5h，放冷，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液25ｍl，旋蒸濃縮至近幹，殘渣用體積分數15％甲醇溶解，轉移至5ｍl量瓶中，定容，搖勻，經0.45μｍ濾膜過濾，備用。色譜條件：welchromc18色譜柱（4.6mm×250mm，5μｍ），流速1.0ｍl／min，檢測波長為284nm，柱溫35℃，進樣量20μl。二元梯度洗脫，流動相ａ為乙腈，ｂ為體積分數0.1％磷酸水溶液（洗脫程序：0~5min，1％ａ；5~10min，1％~4％ａ；10~22min，4％~6％ａ；22~30min，6％~18％ａ；30~60min，18％~25％ａ；60~80min，25％~35％ａ）。精密度：實驗對同一樣品溶液，按前述色譜條件進行hplc分析，連續進樣5次，記錄保留時間及各峰峰面積。重複性實驗：取同一藥材5份，按前述製備方法操作，製備樣品溶液，按前述色譜條件進行hplc分析，記錄保留時間及各峰峰面積。穩定性：實驗同一樣品溶液，室溫存放，分別於0、4、8、12、24、48h，按前述色譜條件進行hplc分析，記錄保留時間及各峰峰面積。結果三組製備工藝所得熟地黃性狀對比1、2組熟地滿足「色黑如漆、味甘如飴」，質地柔軟，同時帶有任性，切開後表裡顏色一致，為烏黑色，而3組熟地儘管外觀上也較符合標準，但是有焦糊氣味，可能部分貼壁熟地因加熱溫度過高，出現炮製過度的情況，其效果如何，有待於進一步鑑定。色譜條件的建立及優化284nm是hmf的檢測波長，它是地黃炮製前後變化最顯著的成分之一。因此，本實驗參考2015年版《中國藥典》生、熟地黃的含量測定色譜條件，並對流動相梯度程序進行優化，以獲得儘量多的共有峰信息，最終確定的色譜條件。採用多個波長進行分析，樣品間可識別的共有峰增加，能更準確地反映藥材間的差異。方法學驗證在精密度、重複性和穩定性實驗中，測得其共有峰相對保留時間及相對峰面積的rsd均在1.1％和4.7％以內，表明儀器的精密度和方法重複性良好，樣品在室溫下48h內穩定。熟地黃樣品測定取熟地黃樣品溶液，按前述色譜條件進行hplc分析，以hmf和hmfa標準品hplc所繪製的標準曲線為參考，hmf和hmfa的標準曲線見表1和表2。表4不同樣品hmf、hmfa吸收峰面積結果樣品hmf峰面積/105hmfa峰面積/105①100℃3015148*332448*②140℃（最優）3648461290154③180℃1578116*395487*與140℃炮製熟地黃比較，*p<0.05所有數據均以同種樣品，三個批次所得數據均值為準。表5兩次最優工藝熟地樣品hmf、hmfa吸收峰面積結果樣品hmf峰面積/105hmfa峰面積/105實驗一熟地黃3654814289747實驗二熟地黃3648461290154所有數據均以同種樣品，三個批次所得數據均值為準。通過上述數據得出，兩次最優製備工藝所製備的熟地黃含量穩定，具有可重複性，說明實驗條件客觀，可以作為重複性試驗結果。通過實驗二數據可以得出，若炮製溫度不夠，其有效成分含量生成不足；若炮製溫度過高，其有效成分迅速下降，可能有效成分被高溫迅速破壞，若出現焦糊，整批次藥物都要銷毀，否則不僅無藥效，甚至有有害成分產生。綜上所述，本發明的提出，對於建立熟地黃的最佳炮製方法具有十分重要的意義。具體量化，建立標準操作規程（sop）以確保熟地黃的優良品質，為其主體藥效的發揮奠定好基礎。提高地黃的產量和質量，更好地合理利用地黃資源，使它能發揮更大的療效，大大地提高企業經濟效益。以上所述，僅是本發明的較佳實施例而已，並非是對本發明作其它形式的限制，任何熟悉本專業的技術人員可能利用上述揭示的技術內容加以變更或改型為等同變化的等效實施例。但是凡是未脫離本發明技術方案內容，依據本發明的技術實質對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化與改型，仍屬於本發明技術方案的保護範圍。當前第1頁12