一種殺蟲劑對昆蟲毒力的測定方法及其專用裝置的製作方法
2023-06-07 01:03:46
專利名稱：一種殺蟲劑對昆蟲毒力的測定方法及其專用裝置的製作方法
技術領域：
本發明涉及殺蟲劑毒力的測定方法，尤其是涉及一種殺蟲劑對昆蟲毒力的測定方法及其專用裝置。
背景技術：
目前害蟲抗藥性產生、發展及治理策略與技術等研究均依賴於抗藥性檢測，因此， 在確定一種害蟲是否達到某一抗藥性水平時，選擇哪一種抗性監測與檢測方法尤為重要。 害蟲抗藥性的監測手段和檢測方法多種多樣，主要可分為生物檢測法、神經電生理檢測法、 生物化學檢測法、免疫學檢測法和分子生物學檢測法等方法。由於生物檢測法操作簡單，設備要求低，結果直觀，能夠很快獲得害蟲的抗性譜，因而長期被廣泛採用。根據試蟲與化學藥劑接觸方式不同，生物檢測法可分為點滴法、接觸法、飼餵法和噴霧法等。對於具有飛行能力的昆蟲，接觸法應用的較為普遍。接觸法主要的使用方式是將殺蟲劑通過易溶解且易揮發的溶劑溶解成液體，將其均勻的塗抹在容器內，待溶劑揮發完，再引入應試的昆蟲來接觸容器中的藥劑。試蟲接觸容器內壁的藥劑一段時間後而死亡，以其死亡率來判斷試蟲對藥劑的對試蟲的致死水平。在常規的觸殺法中在使用藥劑混勻塗抹後的錐形瓶中，引入害蟲成蟲，通過倒置培養一定時間後檢查瓶內試蟲的死亡率。由於每個錐形瓶需要一定藥液塗抹瓶壁，即搖勻後再倒掉，每次試蟲的處理需要耗費將近多於100 ml藥劑，藥液使用量大，且藥液在開放環境下揮發擴散，對操作者和周圍人的健康易造成危害。此外，體積較大、數量較多的錐形瓶在實驗臺上佔用的空間大，操作距離遠，在待測樣品多的情況下，來回取放顯得繁瑣。
發明內容
為克服以上技術缺陷，發明人依據多年測定實蠅抗藥性水平的實踐，認為選用較小的測試容器，再適當地改進藥劑塗抹到容器內壁的方法，可簡化抗藥性檢測。構建了一種簡易的抗藥性水平的檢測方法一膜捲筒法(Scroll film with insecticide method，簡稱 SFIM)，並以桔小實蠅為材料對這種方法的科學性、可行性進行了驗證，且與藥膜法進行了比較，旨在簡化殺蟲劑對害蟲的生物活性檢測方法，也為開展其它害蟲毒力測定和抗藥性水平評估的生物測定方法提供借鑑。由此，本發明提供了一種殺蟲劑對昆蟲毒力的測定方法及其專門的測定裝置，並進一步公開該裝置的製作方法。所述的專門測定裝置包括筒狀主體，該主體開口處設有網狀封蓋，其特徵在於在所述的筒狀主體內壁活動貼設具有吸附藥液功能的薄膜。為便於觀察瓶體內試蟲的情況，所述的筒狀主體由透明材料製成為佳。距所述主體底部l-2cm處的內壁留空，不貼設所述的薄膜。所述的網狀封蓋上設有含有蜜糖水的棉球。
所述的薄膜是由濾紙或其他具吸附液體的紙膜狀物捲成筒狀製成。所述的網狀封蓋由紗布或塑料網柔軟網狀物製成。所述的筒體或瓶體的容積以50ml_250ml為優選。本發明裝置的製作方法
以試管為筒體，所述薄膜是與試管大小相適應的濾紙，將濾紙捲成筒狀放入試管內；用紗布作為網狀封蓋封住試管口，紮緊製得所述裝置。利用本發明裝置測定殺蟲劑對昆蟲毒力的方法，包括如下步驟
A、取出所述裝置中的薄膜，用適量的藥液將薄膜均勻浸溼，吹乾備用；
B、將吹乾的薄膜捲成筒狀，沿內壁放入所述筒體或瓶體內並緊貼內壁；
C、引入試蟲，用網狀封蓋封緊筒體或瓶體開口；
D、網狀封蓋上放置含蜜糖水的棉球，垂直放置；觀測、記錄掉落管底錐形部分的試蟲。所述棉球蜜糖水的蜜糖含量為5% 20% ；可在室溫20 30°C下進行測定。相對於現有技術，本發明的測定裝置可取材於實驗室常見的試管或玻璃瓶和濾紙，具有用材易得、成本低廉、製備操作方法簡單等優點。本發明的方法則解決了常規觸殺毒力測定方法中殺蟲劑使用量相對較大，測試容器體積較大、數量多、佔用空間大，在操作距離遠、待測樣品多的情況下來回取放繁瑣等問題，可簡便、快速地獲得殺蟲劑對害蟲的毒力。在殺蟲劑篩選、抗藥性檢測等多個方面推廣應用的前景廣大。
附圖是本發明優選實施例的結構示意圖。
具體實施例方式下面結合附圖和實施例對本發明做進一步的說明。一、實施例裝置紙膜捲筒的構造
如附圖所示，本實施例裝置的主體1為透明的塑料或者玻璃材質的圓筒形或者方形容器如離心管、試管等，容積以50mL 250mL為宜，或根據實際測試蟲體大小調整容器容積。 容器內裝入折成捲筒狀的具有吸附液體功能的定性濾紙2。其大小依據容器大小確定，紙或者膜周圍緊貼容器內側壁，以容器底部留出1 2cm高度錐狀部分4為適當。容器口用紗布或者細密塑料網3封住，並用橡皮圈5等紮緊。紗布或者網紗上置含蜜糖水(濃度5% 20%)的棉花球6。二、具體的測試方法(下稱「膜捲筒法」)
將供試殺蟲劑的母液稀釋到所需要的濃度。取特定直徑的定性濾紙，用記號筆在濾紙上標註供試的藥劑濃度後，將濾紙平攤在面積稍大的培養皿或託盤中，使用微量移液器移取適量相應濃度藥劑均勻浸溼濾紙，以純丙酮為對照。迅速將濾紙吹乾，取出，對摺呈捲筒狀，放如離心管或者試管中，使濾紙緊貼離心管內壁。引入10頭以上健康試蟲，用紗布或者塑料網布等封住瓶口並用橡皮圈紮緊，垂直放置於室溫20 30°C下；網紗上置含5% 20% 的蜜糖水的棉花。觀測、記錄掉落管底錐形部分的試蟲，以將其翻身後30s內不能翻轉為死亡。
三、關於有效性測定和最佳的死亡率讀取時間確定。在農藥對害蟲毒力的測定中，鑑於環境改變的本身就易造成試蟲死亡，所以都需要設置無藥劑處理的試蟲作為對照。如果對照組死亡率較高，說明試蟲對測試環境的不適性也可能是導致其死亡的主要原因之一，因此，所選用的測試方法就可能不適合。本實施例以桔小實蠅為試蟲對本方法進行測試，並以對照組死亡率低於或等於 10%，判定紙膜捲筒法測試毒力的數據為有效。為確定紙膜捲筒法處理下最佳的死亡率讀取時間，試驗每隔1 觀察一次，及時挑出死亡試蟲，並在24h、4 i和72h時記錄害蟲的死亡率。每處理4次重複，每重複10頭以上。判斷死亡試蟲的標準輕輕拍打離心管柱，掉落在管底錐形部分試蟲，以將其翻身後30s內不能翻轉為死亡。在上述的測試條件下，無藥劑處理的空白對照組死亡率的情況可確切反映試蟲對測試環境生物學適應性情況。通過設置了 24h、4 !和7 調查間隔時間，各地理品系桔小實蠅的空白對照組死亡率情況如表1所示。表1不同測定時間長度時桔小實蠅各品系的對照組死亡率
權利要求
1.一種用於測定殺蟲劑對昆蟲毒力的裝置，包括筒狀主體，該主體的開口處設有網狀封蓋，其特徵在於在所述的主體內壁活動貼設具有吸附藥液功能的薄膜。
2.如權利要求1所述的裝置，其特徵在於距所述主體底部l-2cm處的內壁留空，不貼設所述的薄膜。
3.如權利要求1所述的裝置，其特徵在於所述的網狀封蓋上設有含有蜜糖水的棉球。
4.如權利要求1所述的裝置，其特徵在於所述的薄膜是由濾紙捲成筒狀製成。
5.如權利要求1所述的裝置，其特徵在於所述的主體由透明材料製成。
6.如權利要求1所述的裝置，其特徵在於所述的網狀封蓋由紗布或塑料網製成。
7.如權利要求1所述的裝置，其特徵在於所述的主體的容積是50ml-250ml。
8.—種殺蟲劑對昆蟲毒力的測定方法，其特徵在於，包括如下步驟A、取出如權利要求1到7所述的任一裝置中的薄膜，用適量的藥液將薄膜均勻浸溼，吹乾備用；B、將吹乾的薄膜捲成筒狀，沿內壁放入所述主體內並緊貼內壁；C、引入試蟲，用網狀封蓋封緊所述主體開口；D、網狀封蓋上放置含蜜糖水的棉球，垂直放置；觀測、記錄掉落管底錐形部分的試蟲。
9.如權利要求8所述的測定方法，其特徵在於，所述的棉球含5% 20%的蜜糖水。
10.如權利要求8所述的測定方法，其特徵在於，測定環境的溫度為20-30°C。
全文摘要
本發明公開了一種用於測定殺蟲劑對昆蟲毒力的裝置及其製備和使用方法。該裝置包括筒體或瓶體，筒體或瓶體的開口處設有網狀封蓋，在所述的筒體或瓶體內壁活動貼設具有吸附藥液功能的薄膜。本發明的測定方法是，用適量的藥液將薄膜均勻浸溼後取出吹乾；將吹乾的薄膜捲成筒狀，沿內壁放入所述筒體或瓶體內並緊貼內壁；引入試蟲，用網狀封蓋封緊筒體或瓶體開口；網狀封蓋上放置含5%～20%的蜜糖水的棉球，在室溫24～30℃下，垂直放置；觀測、記錄掉落管底錐形部分的試蟲。相對於現有技術本發明可簡便、快速地獲得殺蟲劑對害蟲的毒力。在殺蟲劑篩選、抗藥性檢測等多個方面推廣應用的前景廣大。且具有操作簡單，用材易得等優點。
文檔編號G01N33/50GK102313789SQ201110196629
公開日2012年1月11日 申請日期2011年7月14日 優先權日2011年7月14日
發明者曾玲, 梁廣文, 金濤, 陸永躍 申請人:華南農業大學