用作葡糖激酶(glk)激活劑的苯甲醯基氨基吡啶基羧酸衍生物的製作方法

2023-10-20 13:00:57

專利名稱：用作葡糖激酶(glk)激活劑的苯甲醯基氨基吡啶基羧酸衍生物的製作方法
技術領域：
本發明涉及一組苯甲醯基氨基吡啶基羧酸化合物，所述化合物可用於治療或預防通過葡糖激酶(GLK)介導的疾病或病症，並且導致胰島素分泌的葡萄糖閾值降低。此外，預計所述化合物通過增加肝臟葡萄糖攝取來降低血液葡萄糖。這些化合物可用於治療2型糖尿病和肥胖。本發明還涉及含有所述化合物的藥物組合物，和使用所述化合物來治療由GLK介導的疾病的方法。
在胰腺β-細胞和肝臟實質細胞中主要的血漿膜葡萄糖轉運蛋白是GLUT2。在生理葡萄糖濃度下，GLUT2轉運葡萄糖穿過膜的速率不是葡萄糖攝取進入這些細胞的總速率的限制速率。葡萄糖攝取的速率是由葡萄糖成為葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)的磷酸化作用的速率限制的，該作用經葡糖激酶(GLK)催化[1]。GLK對於葡萄糖具有高(6-10mM)的Km，且不被生理濃度的G-6-P抑制[1]。GLK表達局限在少數組織和細胞類型，最常見的是胰腺β-細胞和肝臟細胞(肝細胞)[1]。在這些細胞中GLK活性是葡萄糖利用的限速作用且由此調控葡萄糖引起的胰島素分泌的程度和肝糖原合成。這些過程在整體葡萄糖內穩態的維持中十分關鍵且兩者在糖尿病中均功能不全[2]。
在一種亞型糖尿病，青年的2型發育期發作糖尿病(MODY-2)中，該糖尿病是由功能突變的GLK損失引起的[3，4]。在MODY-2患者中，高血糖源自胰腺和肝臟兩者中的缺損性葡萄糖利用[5]。MODY-2患者的胰腺中缺損性葡萄糖利用導致葡萄糖刺激胰島素分泌的閾值升高。相反，稀有的GLK的激活突變作用降低該閾值導致家族性胰島素分泌過多[6，6a，7]。除了在MODY-2糖尿病中觀察到降低的GLK活性以外，肝臟葡糖激酶活性在2型糖尿病中也降低[8]。重要的是，GLK的全面或肝臟選擇性過度表達阻止或逆轉該疾病的飲食和遺傳模型兩者中糖尿病表型的惡化[9-12]。此外，用果糖對2型糖尿病的快速治療通過刺激肝臟葡萄糖利用來提高葡萄糖耐受性[13]。據信這種效應是通過下列機理由果糖誘發的肝細胞中胞質GLK活性增高來介導的[13]。
通過與GLK調節蛋白(GLKRP)締合可抑制肝臟GLK活性。GLK/GLKRP複合物通過果糖-6-磷酸(F6P)結合GLKRP穩定化且通過果糖-1-磷酸(F1P)置換這種糖磷酸去穩定化。在果糖激酶介導的食物果糖的磷酸化作用介導下生成F1P。所以，GLK/GLKRP複合物的完整性和肝臟GLK活性以營養依賴方式受到調節，因為F6P在吸收後狀態升高而F1P在進餐後狀態佔優勢。與肝細胞形成對照，胰腺β-細胞在GLKRP不存在的條件下表達GLK。所以，β-細胞GLK活性僅僅由其底物葡萄糖的可利用性來調節。小分子可以直接或者通過使GLK/GLKRP複合物去穩定化來激活GLK。前一種類的化合物預計可刺激肝臟和胰腺兩者中的葡萄糖利用而後者預計僅僅在肝臟中起作用。然而，具有一種性能的化合物預計具有治療2型糖尿病的治療效益，因為這種疾病特徵在於在上述兩種組織中的缺損性葡萄糖利用。
GLK和GLKRP和KATP通道在下丘腦的神經元中表達，下丘腦是調節能量平衡和控制食物攝取非常重要的腦區域[14-18]。已經證實這些神經元表達開胃和厭食神經肽[15，19，20]，且被推斷是下丘腦內的葡萄糖傳感神經元，它們通過環境葡萄糖濃度的改變來抑制或興奮[17，19，21，22]。這些神經元感覺葡萄糖水平變化的能力在多種遺傳和實驗誘導的肥胖模型中是缺損的[23-28]。葡萄糖類似物，也就是葡糖激酶的競爭性抑制劑的腦室內(icv)輸注，刺激瘦弱大鼠的食物攝取[29，30]。相反，葡萄糖的icv輸注抑制進食[31]。所以，GLK的小分子激活劑可以通過對GLK的中樞作用減少食物攝取和體重增加。所以，GLK激活劑可以治療性應用於治療除糖尿病以外的飲食性疾病，包括肥胖。下丘腦的作用將與這些化合物的作用加合或協同地在肝臟和/或胰腺中發揮使葡萄糖內穩態正常化的作用，例如治療2型糖尿病。所以GLK/GLKRP系統可以描述成為潛在「糖尿病肥胖」靶向(在糖尿病和肥胖中都有益)。
在WO0058293和WO 01/44216(Roche)中，描述了一系列作為葡糖激酶激活劑的苄基氨基甲醯基化合物。此類化合物激活GLK的機理是通過測量這些化合物在其中GLK活性與NADH生成有關的試驗中的直接作用來評估的，而NADH生成是通過光學方法測定的-參見實施例A中描述的體外試驗詳情。與已知的GLK激活劑相比，很多本發明化合物可表現出有利的選擇性。
WO9622282、WO9622293、WO9622294、WO9622295、WO9749707和WO9749708公開了多種用於製備可用作加壓素劑的化合物的中間體，這些中間體與本發明公開的化合物在結構上類似。結構上類似的化合物還公開在WO9641795和JP8143565(加壓素拮抗作用)以及JP8301760(預防皮膚損害)和EP619116(骨病)中。
WO01/12621描述了用作c-JUN N-末端激酶抑制劑的異唑基嘧啶以及相關化合物的製備，以及含有這樣的化合物的藥物組合物。
Cushman等人[Bioorg Med Chem Lett(1991)1(4)，211-14]描述了含有吡啶的均二苯代乙烯和醯胺化合物及其作為蛋白-酪氨酸激酶抑制劑的評估。Rogers等人[J Med Chem(1981)24(11)1284-7]描述了作為環-AMP磷酸二酯酶抑制劑的介離子6-羥基嘌呤類似物。
WO00/26202描述了用作抗腫瘤劑的2-氨基噻唑衍生物的製備。GB 2331748描述了具有殺蟲作用的噻唑衍生物的製備。WO 96/36619描述了用作消化道運動改善劑的氨基噻唑衍生物的製備。US 5466715和US 5258407描述了3，4-二取代的苯酚免疫刺激劑的製備。JP58069812描述了含有苯甲醯胺衍生物的降血壓藥物。US 3950351描述了2-苯甲醯氨基-5-硝基噻唑化合物，Cavier等人[Eur J Med Chem-Chim Ther(1978)13(6)，539-43]討論了這些化合物的生物益處。
未決國際申請PCT/GB02/02873描述了一組苯甲醯基氨基吡啶基羧酸化合物，所述化合物是葡糖激酶(GLK)的激活劑。我們驚奇地發現了一些從這些化合物當中選擇的一小部分化合物，這些選擇的一小部分化合物在口服給藥後具有優良的血漿藥物水平，這是由於提高的水溶解度以及降低的血漿結合水平的緣故，同時保持了對GLK酶的高效力。這使得該亞組化合物特別適於用來治療或預防通過GLK介導的疾病或病症。
因此，根據本發明的第一個方面，本發明提供了式(I)化合物或其鹽、前藥或溶劑化物
式(I)其中R1選自氫和C1-4烷基；R2選自R4-C(R5aR5b)-、R4＝C(R6)-和R7aC(R7b)＝C(R6)-；R3-X-選自甲基、甲氧基甲基和 R4選自C1-4烷基、苯基、C3-6環烷基和雜芳基，其中R4任選被1或2個獨立地選自R8的取代基取代；R5a和R5b獨立地選自氫、氟和C1-4烷基；R6選自氫和C1-4烷基；R7a和R7b獨立地選自C1-4烷基，其中R7a和R7b任選被1或2個獨立地選自R8的取代基取代；R8選自C1-3烷基、C1-3烷氧基、氟和氯；條件是(i)R5a和R5b當中至少有一個是氟；和(ii)當R2是R4＝C(R6)-時，R4是C3-6環烷基。
式(I)化合物可以形成鹽，其屬於本發明的範圍內。優選可藥用鹽，但是其他鹽可以用於例如分離或提純化合物。
在本說明書中，術語「烷基」包括直鏈和支鏈烷基。例如，「C1-4烷基」包括丙基、異丙基和叔丁基。為了避免疑問，烷基鏈可以在該烷基鏈的末端或烷基鏈的中間連接在分子的其餘部分上，即「烷基」的定義包括下列結構
其中 代表與分子的其餘部分連接的點。
術語「雜芳基」是指含有5-6個碳原子的不飽和單環基團，其中至少一個碳原子被氮、硫或氧代替，其中雜環中的硫原子可以被氧化成S(O)或S(O)2。除非另有說明，雜芳基可以是碳或氮連接的，除非經由氮的連接會導致帶電荷的季氮。
雜芳基的實例包括噻吩基、呋喃基、噻唑基、噻二唑基、三唑基、吡唑基、咪唑基、唑基、異唑基、吡啶基、吡嗪基、噠嗪基和嘧啶基。優選的雜芳基環包括噻吩基。
術語「C3-6環烷基」是指含有3-6個碳原子，優選5-6個碳原子的飽和碳環。C3-6環烷基的實例包括環己基、環戊基、環丁基或環丙基。環戊基或環己基是優選的。環戊基是最優選的。
C1-4烷基的實例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、仲丁基和叔丁基；C1-3烷氧基的實例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基和異丙氧基。
應當理解，由於一個或多個不對稱碳原子，在某些如上所定義的式(I)化合物的範圍內可以存在旋光或外消旋形式，本發明在其定義中包括任何這樣的具有直接刺激GLK或抑制GLK/GLKRP相互作用的性質的任何這樣的旋光或外消旋形式。旋光形式的合成可以通過所屬領域眾所周知的有機化學的標準技術來進行，例如通過由旋光原料合成或通過外消旋形式的拆分來進行。還應當理解，一些化合物可以以互變異構形式存在，並且本發明還涉及能夠激活GLK的本發明化合物的任何以及所有互變異構形式。
優選的式(I)化合物是其中適用任何一個或多個以下限定的那些(1)R2是R4-C(R5aR5b)-(2)R2是R4-C(R5aR5b)-，且R4是苯基；(3)R2是R4-C(R5aR5b)-，且R4是雜芳基；(4)R2是R4-C(R5aR5b)-，且R4是C3-6環烷基；
(5)R2是R4-C(R5aR5b)-，且R5a和R5b都是氟；(6)R2是R4＝C(R6)-；(7)R2是R4＝C(R6)-，且R3-X-是甲基；(8)R2是R4＝C(R6)-，且R3-X-是甲氧基甲基；(9)R2是R4-C(R5aR5b)-，且R3-X-是甲基；(10)R2是R4-C(R5aR5b)-，且R3-X-是甲氧基甲基；(11)R4是未取代的；(12)R3-X-是甲基；(13)R3-X-是甲氧基甲基；(14)R2是R7aC(R7b)＝C(R6)-。
根據本發明的另一個特徵，本發明提供了下列優選組的本發明化合物(I)式(Ia)化合物 式(Ia)其中R1和R2如上面式(I)化合物中所定義；或其鹽、溶劑化物或前藥。
(II)式(Ib)化合物 式(Ib)
其中R1和R2如上面式(I)化合物中所定義；或其鹽、溶劑化物或前藥。
(III)式(Ic)化合物 式(Ic)其中R1和R2如上面式(I)化合物中所定義；或其鹽、溶劑化物或前藥。
(IV)式(Id)化合物 式(Id)其中R1和R2如上面式(I)化合物中所定義；或其鹽、溶劑化物或前藥。
(V)式(Ie)化合物
式(Ie)其中R1和R2、R3、R4、R5a和R5b如上面式(I)化合物中所定義；或其鹽、溶劑化物或前藥。
(VI)式(I)化合物，其中R1是氫；R2選自R4-C(R5aR5b)-和R4＝C(R6)-；R3-X-選自甲基和甲氧基甲基；R4選自苯基和C3-6環烷基，其中R4任選被1或2個獨立地選自R7的取代基取代，優選是未取代的；R5a和R5b獨立地選自氫和氟；R6是氫；R7獨立地選自C1-3烷基、C1-3烷氧基、氟和氯；條件是(i)R5a和R5b當中至少有一個是氟，R5a和R5b優選都是氟；(ii)當R2是R4＝C(R6)-時，R4是C3-6環烷基。
在另一個方面，本發明提供了任一實施例的化合物或其鹽、溶劑化物或前藥。在另一個方面，本發明提供了任何兩個或更多個實施例的化合物或其鹽、溶劑化物或前藥。
優選的本發明化合物包括任何一個、兩個或更多個以下化合物6-{[(3-[(2，2-二氟-2-苯基乙基)氧基]-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸6-[({3-[(2，2-二氟-2-苯基乙基)氧基]-5-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]吡啶-3-甲酸6-{[(3-[(2-亞環戊基乙基)氧基]-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸6-{[(3-[(2-亞環戊基乙基)氧基]-5-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]吡啶-3-甲酸或其鹽、溶劑化物或前藥。
本發明化合物可以以前藥的形式給藥。前藥是在機體內可降解以生成本發明化合物的生物前體或可藥用化合物(例如本發明化合物的酯或醯胺，特別是體內可水解的酯)。多種不同形式的前藥是本領域已知的。這樣的前藥衍生物的實例可參見a)Design of Prodrugs，H.Bundgaard編寫，(Elsevier，1985)andMethods in Enzymology，Vol.42，p.309-396，K.Widder，等人編寫(Academic Press，1985)；b)A Textbook of Drug Design and Development，Krogsgaard-Larsen編寫；c)H.Bundgaard，Chapter 5「Design and Application of Prodrugs」，H.Bundgaard p.113-191(1991)；d)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews，8，1-38(1992)；e)H.Bundgaard，等人，Journal of Pharmaceutical Sciences，77，285(1988)；和f)N.Kakeya，等人，Chem Pharm Bull，32，692(1984)。
上述文件的內容引入本文以供參考。
前藥的實例如下。含有羧基或羥基的本發明化合物的體內可水解酯，例如，在人或動物體內水解以生成母體酸或醇的可藥用酯。對於羧基，適當可藥用酯包括C1-C6烷氧基甲基酯，例如甲氧基甲基酯，C1-6烷醯氧基甲基酯，例如新戊醯氧基甲基酯，2-苯並[c]呋喃酮基酯，C3-C8環烷氧基羰基氧基C1-C6烷基酯，例如1-環己基羰氧基乙基酯；1，3-二氧雜環戊烯-2-酮基甲基酯，例如5-甲基-1，3-二氧雜環戊烯-2-酮基甲基酯；和C1-6烷氧基羰基氧基乙基酯。
含有羥基的本發明化合物的體內可水解酯包括無機酯例如磷酸酯(包括磷醯胺環酯(phosphoramidic cyclic esters))和α-醯氧基烷基醚和有關化合物，作為酯在體內水解的結果，它們斷裂以產生母體羥基。α-醯氧基烷基醚的實例包括乙醯氧基甲氧基和2，2-二甲基丙醯氧基-甲氧基。用於與羥基形成體內可水解的酯的基團的選擇包括烷醯基、苯甲醯基、苯基乙醯基和取代的苯甲醯基和苯基乙醯基、烷氧基羰基(以生成碳酸烷基酯)、二烷基氨基甲醯基和N-(二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲醯基(以生成氨基甲酸酯)、二烷基氨基乙醯基和羧基乙醯基。
本發明化合物的適當可藥用鹽是，例如，具有足夠鹼性的本發明化合物的酸加成鹽，例如，與例如無機或有機酸形成的酸加成鹽，所述酸是例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、三氟乙酸、檸檬酸或馬來酸。此外，本發明的具有足夠酸性的苯並嗪酮衍生物的適當可藥用鹽是鹼金屬鹽，例如鈉或鉀鹽，鹼土金屬鹽，例如鈣或鎂鹽，銨鹽或與提供生理可接受陽離子的有機鹼形成的鹽，例如與甲胺、二甲胺、三甲胺、哌啶、嗎啉或三-(2-羥基乙基)胺形成的鹽。
本發明的另一個特徵是包含如上所定義的式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)或(Ie)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥與可藥用稀釋劑或載體的藥物組合物。
根據本發明的另一個方面，本發明提供了用作藥物的如上所定義的式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)或(Ie)化合物。
本發明還提供了用於製備用來治療通過GLK介導的疾病，特別是2型糖尿病的藥物的式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)或(Ie)化合物。
將本發明化合物適當地配製成用於以該方式使用的藥物組合物。
根據本發明的另一個方面，本發明提供了治療GLK介導的疾病，尤其是糖尿病的方法，包括給需要這樣的治療的哺乳動物施用有效量的式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)或(Ie)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥。
可以用本發明化合物或組合物治療的具體疾病包括在沒有嚴重低血糖危險的情況下降低2型糖尿病中的血糖(並有效治療1型)；異常脂血症；肥胖；胰島素抗性；代謝症候群X；葡萄糖耐量減低。
如上所述，GLK/GLKRP系統可因此描述成為潛在的「糖尿病肥胖」靶向(在糖尿病和肥胖中都有益)。因此，根據本發明的另一個方面，本發明提供了式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)或(Ie)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥在製備用於聯合治療或預防糖尿病和肥胖的藥物中的應用。
根據本發明的另一個方面，本發明提供了式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)或(Ie)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥在製備用於治療或預防肥胖的藥物中的應用。
根據本發明的另一個方面，本發明提供了用於肥胖和糖尿病的聯合治療的方法，包括給需要這樣的治療的哺乳動物施用有效量的式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)或(Ie)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥。
根據本發明的另一個方面，本發明提供了用於治療肥胖的方法，包括給需要這樣的治療的哺乳動物施用有效量的式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)或(Ie)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥。
本發明的組合物可以是適合口服使用的形式(例如片劑、錠劑、硬或軟膠囊、水或油懸浮液、乳劑、可分散散劑或顆粒劑、糖漿劑或酏劑)，局部使用的形式(例如霜劑、膏劑、凝膠劑或水或油溶液或懸浮液)，吸入給藥的形式(例如微粉散劑或液體氣霧劑)，通過吹入給藥的形式(例如微粉散劑)或非腸道給藥的形式(例如用於靜脈內、皮下、肌內或肌肉內給藥的滅菌水或油溶液或用於直腸給藥的栓劑)。
本發明的組合物可以通過常規方法利用該領域眾所周知的常規藥物賦形劑來獲得。所以，用於口服使用的組合物可以含有，例如，一種或多種著色劑、甜味劑、矯味劑和/或防腐劑。
用於片劑製劑的合適的可藥用賦形劑包括，例如，惰性稀釋劑例如乳糖、碳酸鈉、磷酸鈣或碳酸鈣，制粒劑和崩解劑例如玉米澱粉或藻酸；粘合劑例如澱粉；潤滑劑例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石粉；防腐劑例如對羥基苯甲酸乙酯或丙酯，和抗氧劑例如抗壞血酸。片劑製劑可以無包衣或有包衣來改變其崩解作用和隨後活性成分在胃腸道內的吸收作用，或改進其穩定性和/或表觀，在任意情況中，使用該領域眾所周知的常規包衣劑和方法。
口服使用的組合物可以是硬明膠膠囊的形式，其中活性成分與惰性固體稀釋劑例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合，或成為軟明膠膠囊，其中活性成分與水或油例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。
水懸浮液一般含有微粉形式的活性成分和一種或多種懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃芪膠和阿拉伯膠；分散劑或溼潤劑例如卵磷脂或氧化烯與脂肪酸的縮合產物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)，或環氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產物，例如十七氧化乙烯鯨蠟醇(heptadecaethyleneoxycetanol)，或環氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產物，例如聚氧化乙烯山梨糖醇一油酸酯，或環氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產物，例如十七氧化乙烯鯨蠟醇(heptadecaethyleneoxycetanol)，或環氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的縮合產物，例如聚氧化乙烯山梨糖醇一油酸酯，或環氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產物，例如聚乙烯脫水山梨糖醇一油酸酯。水懸浮液還可以含有一種或多種防腐劑(例如對羥基苯甲酸乙酯或丙酯)、抗氧化劑(例如抗壞血酸)、著色劑、矯味劑和/或甜味劑(例如蔗糖、糖精或天冬甜素)。
油懸浮液可以通過將活性成分懸浮在植物油(例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(例如液體石蠟)中來配製。油懸浮液也可以含有增稠劑例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。可以加入甜味劑例如上述那些，和矯味劑來提供可口的口服製劑。這些組合物可以通過加入抗氧劑例如抗壞血酸來防腐。
適合通過加入水製成水懸浮液的可分散散劑和顆粒劑一般含有活性成分和分散劑或溼潤劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑。適當的分散劑或溼潤劑和懸浮劑例如上述那些。附加的賦形劑例如甜味劑、矯味劑和著色劑，也可以存在。
本發明的藥物組合物也可以以水包油乳劑的形式存在。油相可以是植物油，例如橄欖油或花生油，或礦物油，例如液體石蠟或任何這些的混合物。適當的乳化劑可以是，例如，天然樹膠例如阿拉伯膠或黃芪膠，天然磷脂例如大豆卵磷脂，和衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯(例如脫水山梨糖醇一油酸酯)和所述偏酯與環氧乙烷的縮合產物例如聚氧化乙烯脫水山梨糖醇一油酸酯。乳劑也可以含有甜味劑、矯味劑和防腐劑。
糖漿劑和酏劑可以與甜味劑例如甘油、丙二醇、山梨糖醇、天冬甜素或蔗糖配製，並且也可以含有緩和劑、防腐劑、矯味劑和/或著色劑。
所述的藥物組合物還可以是滅菌可注射水或油懸浮液的形式，其可以按照已知方法利用一種或多種適當的分散或溼潤劑和懸浮劑來配製，這些物質如上所述。滅菌可注射製劑也可以是存在於無毒胃腸外可接受稀釋劑或溶劑中的滅菌可注射溶液或懸浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。
用於吸入給藥的組合物可以是設計為分配活性成分的常規加壓氣霧劑，其是含有微粉固體或液滴的氣霧劑的形式。可以使用常規氣霧劑推進劑例如揮發性氟化烴或烴，且氣霧劑裝置通常裝配為分配計量量的活性成分。
有關製劑的其他信息可參見Comprehensive Medicinal Chemistry的第5卷，25.2章(Corwin Hanschl；Chairman of Editorial Board)，Pergamon Press 1990。
與一種或多種賦形劑合併以製備為單一劑型的活性成分的量必須根據被治療宿主和具體給藥途徑來變化。例如，用於對人口服給藥的製劑一般含有，例如，0.5mg-2g的與適當和常規量的賦形劑混合的活性劑，其可以佔該組合物總重量的約5-約98％。單位劑型一般含有約1mg-約500mg活性成分。有關給藥途徑和給藥方案的進一步信息可參見Comprehensive Medicinal Chemistry的第5卷，25.3章(Corwin Hanschl；Chairman of Editorial Board)，Pergamon Press1990。
式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)或(Ie)化合物出於治療或預防目的的給藥劑量自然應根據病症的性質和嚴重性、動物或患者的年齡和性別以及給藥途徑、按照藥物的眾所周知原則來改變。
在出於治療或預防目的而使用式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)或(Ie)化合物時一般是以日劑量在例如0.5mg-75mg/kg體重的範圍內給藥，如果需要可以分次給藥。通常當採用非腸道途徑時採用較低劑量。所以，例如，對於靜脈內給藥，一般採用例如0.5mg-30mg/kg體重範圍內的劑量。同樣地，對於吸入給藥，採用例如0.5mg-25mg/kg體重範圍內的劑量。然而優選口服給藥。
本發明所述GLK活性的升高可以用作單獨療法施用，或者處理本發明的主題以外，可以與一種或多種其它物質和/或治療聯合使用。這樣的聯合治療可以通過各個治療組分的同時、順序或分開施用的方式來達到。同時治療可以在單一片劑或在分開的片劑中。例如在糖尿病的治療中，化療可以包括下列主要類型的治療
1)胰島素和胰島素類似物；2)胰島素促分泌劑，包括磺醯脲類(例如格列本脲，格列吡嗪)，飲食葡萄糖調節劑(例如瑞格列奈、那格列奈)；3)改善腸降血糖素作用的活性劑(例如二肽基肽酶IV抑制劑和GLP-1激動劑)；4)胰島素敏化劑，包括PPARγ激動劑(例如吡格列酮和羅格列酮)，和具有組合的PPARα和γ活性的活性劑；5)調節肝臟葡萄糖平衡的活性劑(例如二甲雙胍、果糖-1，6-二磷酸酶抑制劑、糖原磷酸化酶抑制劑、糖原合成酶激酶抑制劑)；6)減少從腸內吸收葡萄糖的活性劑(例如阿卡波糖)；7)阻止腎對葡萄糖的再吸收的活性劑(SGLT抑制劑)；8)治療長期高血糖的併發症的活性劑(例如醛糖還原酶抑制劑)；9)抗肥胖劑(例如西布茶明和奧利司他)；10)抗異常脂血症劑，例如HMG-CoA還原酶抑制劑(例如他汀類(statins))；PPARα激動劑(貝特類(fibrates)，例如吉非貝齊)；膽酸螯合劑(考來烯胺)；膽固醇吸收抑制劑(植物谷甾醇(stanol)，合成抑制劑)；膽酸吸收抑制劑(IBATi)和煙酸以及類似物(煙酸和緩釋製劑)；11)抗高血壓劑，例如β阻滯劑(例如阿替洛爾，普萘洛爾)；ACE抑制劑(例如賴諾普利)；鈣拮抗劑(例如尼非地平)；血管緊張素受體拮抗劑(例如坎地沙坦)，α拮抗劑和利尿劑(例如呋塞米、苄噻嗪)；12)止血調節劑，例如抗血栓形成劑，纖維蛋白溶解的激活劑和抗血小板劑；凝血酶拮抗劑；Xa因子抑制劑；VIIa因子抑制劑)；抗血小板劑(例如阿司匹林、氯吡格雷)；抗凝血劑(肝素和低分子量類似物，水蛭素)和華法令；13)拮抗胰高血糖素的作用的活性劑；和14)抗炎劑，例如非甾族抗炎藥(例如阿司匹林)和甾族抗炎藥(例如可的松)。
根據本發明的另一個方面，本發明提供了在下面的實施例中作為終產物製得的各種化合物及其鹽/溶劑化物和前藥。
本發明化合物或其鹽可以通過任何用於製備此類化合物或結構上相關化合物的已知方法來製備。官能團可以利用常規方法保護和脫保護。例如，保護基例如氨基和羧酸保護基(以及形成的方式和最後的脫保護)可參見T.W.Greene和P.G.M.Wuts，「有機合成中的保護基」，第2版，John Wiley Sons，New York，1991。
合成式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)或(Ie)化合物的方法作為本發明另外的特徵而提供。因此，根據本發明的另一個方面，本發明提供了製備式(I)、(Ia)、(Ib)、(Ic)、(Id)或(Ie)化合物的方法，所述方法包括(a)將式(IIIa)的酸或其活化衍生物與式(IIIb)化合物反應 式(IIIa) 式(IIIb)；其中P1是氫或保護基例如C1-4烷基(優選甲基或乙基)；或者(b)將式(IIIc)化合物脫保護， 式(IIIc)其中P2是保護基；或者(c)將式(IIId)化合物與式(IIIe)化合物反應，
式(IIId)式(IIIe)其中X1是離去基團，且X2是羥基，或者X1是羥基，且X2是離去基團，並且P1是氫或保護基；或者(d)將式(IIIf)化合物與式(IIIg)化合物反應 式(IIIf) 式(IIIg)其中X3是離去基團，並且X4是羥基，或者X3是羥基，並且X4是離去基團，並且其中P1是氫或保護基；或者(e)將式(IIIh)化合物與式(IIIi)化合物反應， 式(IIIh) 式(IIIi)；
其中X5是離去基團，並且其中P1是氫或保護基；並且之後如果需要的話i)將一種式(I)化合物轉化成另一種式(I)化合物；ii)除去任何保護基；iii)形成其鹽、前藥或溶劑化物。
對於方法a)-e)，合適的離去基團是本領域技術人員眾所周知的，並且包括例如活化的羥基離去基團(例如甲磺酸酯和甲苯磺酸酯基團)，以及滷素離去基團例如氟、氯或溴。
式(IIIa)-(IIIi)化合物可商購獲得，或者可以通過本領域已知的任何方便方法製得和/或如本發明實施例所述而製得。通常應該理解，任何芳基-O或烷基-O鍵可以任選在合適的鹼存在下通過親核取代或金屬催化的方法來形成。
對於上述反應，具體的反應條件如下，其中當P1是保護基時，P1優選為C1-4烷基例如甲基或乙基方法a)-氨基與羧酸的偶聯反應以形成醯胺是本領域眾所周知的。例如，(i)使用合適的偶聯反應，例如，於室溫，在合適的溶劑例如DCM、氯仿或DMF中，在DMAP存在下，使用EDAC進行的碳二亞胺偶聯反應；或者(ii)其中通過與草醯氯在合適的溶劑例如二氯甲烷存在下反應而將羧基活化成醯氯的反應。之後可於0℃-室溫的溫度下，在合適的溶劑例如氯仿或DCNM中，在鹼例如三乙胺或吡啶存在下，將醯氯與式IIIb化合物反應。
方法b)-脫保護反應是本領域眾所周知的。P1的實例包括C1-6烷基和苄基。當P1是C1-6烷基時，該反應可在合適的溶劑例如THF/水中，在氫氧化鈉存在下進行。
方法c)-可將式(IIId)和(IIIe)化合物一起在合適的溶劑例如DMF或THF中，使用鹼例如氫化鈉或叔丁醇鉀，於0-100℃溫度下，任選使用金屬催化劑例如乙酸鈀(II)、披鈀碳、乙酸銅(II)或碘化銅(I)來進行反應；或者，可將式(IIId)和(IIIe)化合物一起在合適的溶劑例如THF或DCM中，使用合適的膦例如三苯基膦和偶氮二甲酸酯例如偶氮二甲酸二乙酯來進行反應。
方法d)-可將式(IIId)和(IIIe)化合物一起在合適的溶劑例如DMF或THF中，使用鹼例如氫化鈉或叔丁醇鉀，於0-100℃溫度下，任選使用金屬催化劑例如乙酸鈀(II)、披鈀碳、乙酸銅(II)或碘化銅(I)來進行反應；或者，可將式(IIId)和(IIIe)化合物一起在合適的溶劑例如THF或DCM中，使用合適的膦例如三苯基膦和偶氮二甲酸酯例如偶氮二甲酸二乙酯來進行反應。
方法e)-式(IIIh)化合物與式(IIIi)化合物的反應可以在極性溶劑例如DMF或非極性溶劑例如THF中，使用強鹼例如氫化鈉例如氫化鈉或叔丁醇鉀，於0-100℃溫度下，任選使用金屬催化劑例如乙酸鈀(II)、披鈀碳、乙酸銅(II)或碘化銅(I)來進行。
在製備方法期間，使用用於分子內的官能團的保護基可能是有利的。保護基可以通過文獻中描述的或化學領域技術人員已知的適於除去所關注的保護基的任何適宜方法來除去，方法的選擇應實現保護基的除去並最小限度地幹擾分子這的其他基團。
方便起見，下面給出保護基的具體實例，其中「低級」表示該基團優選具有1-4個碳原子。應理解這些實例不是窮舉的。雖然下面給出除去保護基的方法的具體實例，但這些方法同樣也不是窮舉的。沒有具體提及的保護基的使用和脫保護的方法顯然屬於本發明的範圍內。
羧基保護基可以是成酯脂族或芳脂族醇的殘基或成酯甲矽烷醇的殘基(所述醇或甲矽烷基優選含有1-20個碳原子)。羧基保護基的實例包括直鏈和支鏈(C1-12)烷基(例如異丙基、叔丁基)；低級烷氧基低級烷基(例如甲氧基甲基、乙氧基甲基、異丁氧基甲基；低級脂族醯氧基低級烷基(例如乙醯氧基甲基、丙醯氧基甲基、丁醯氧基甲基、新戊醯氧基甲基)；低級烷氧基羰基氧基低級烷基(例如1-甲氧基羰基氧基乙基、1-乙氧基羰基氧基乙基)；芳基低級烷基(例如對甲氧基苄基、鄰硝基苄基、對硝基苄基、二苯甲基和2-苯並[c]呋喃酮基)；三(低級烷基)甲矽烷基(例如三甲基甲矽烷基和叔丁基二甲基甲矽烷基)；三(低級烷基)甲矽烷基低級烷基(例如三甲基甲矽烷基乙基)；和(2-6C)鏈烯基(例如烯丙基和乙烯基乙基)。
特別適合除去羧基保護基的方法包括例如酸-、金屬-或酶促-催化的水解。
羥基保護基的實例包括低級鏈烯基(例如烯丙基)；低級烷醯基(例如乙醯基)；低級烷氧基羰基(例如叔丁氧基羰基)；低級鏈烯基氧基羰基(例如烯丙基氧基羰基)；芳基低級烷氧基羰基(例如苯甲醯基氧基羰基、對甲氧基苄基氧基羰基、鄰硝基苄基氧基羰基、對硝基苄基氧基羰基)；三低級烷基/芳基甲矽烷基(例如三甲基甲矽烷基、叔丁基二甲基甲矽烷基、叔丁基二苯基甲矽烷基)；芳基低級烷基(例如苄基)；和三芳基低級烷基(例如三苯基甲基)。
氨基保護基的實例包括甲醯基、芳烷基(例如苄基和取代的苄基，例如對甲氧基苄基、硝基苄基和2，4-二甲氧基苄基，和三苯基甲基)；二對茴香基甲基和呋喃基甲基；低級烷氧基羰基(例如叔丁氧基羰基)；低級鏈烯基氧基羰基(例如烯丙基氧基羰基)；芳基低級烷氧基羰基(例如苄基氧基羰基、對甲氧基苄基氧基羰基、鄰硝基苄基氧基羰基、對硝基苄基氧基羰基；三烷基甲矽烷基(例如三甲基甲矽烷基和叔丁基二甲基甲矽烷基)；亞烷基(例如亞甲基)；亞苄基和取代的亞苄基。
適合除去羥基和氨基保護基的方法包括例如酸-、鹼、金屬-或酶促-催化的水解，或對於基團例如鄰硝基苄基氧基羰基，使用光解，或對於甲矽烷基，使用氟離子。
醯胺基的保護基的實例包括芳烷氧基甲基(例如苄基氧基甲基和取代的苄氧基甲基)；烷氧基甲基(例如甲氧基甲基和三甲基甲矽烷基乙氧基甲基)；三烷基/芳基甲矽烷基(例如三甲基甲矽烷基、叔丁基二甲基甲矽烷基、叔丁基二苯基甲矽烷基)；三烷基/芳基甲矽烷基氧基甲基(例如叔丁基二甲基甲矽烷基氧基甲基、叔丁基二苯基甲矽烷基氧基甲基)；4-烷氧基苯基(例如4-甲氧基苯基)；2，4-二(烷氧基)苯基(例如2，4-二甲氧基苯基)；4-烷氧基苄基(例如4-甲氧基苄基)；2，4-二(烷氧基)苄基(例如2，4-二(甲氧基)苄基)；和鏈烯基(例如烯丙基、丁-1-烯基和取代的乙烯基，例如2-苯基乙烯基)。
芳烷氧基甲基，可以通過後者與適當芳烷氧基甲基氯反應引入到醯胺基上，並且通過催化氫化除去。烷氧基甲基、三烷基/芳基甲矽烷基和三烷基/甲矽烷基氧基甲基可以通過將醯胺與適當氯化物反應來引入並用酸除去；或在含有甲矽烷基基團的情況中，使用氟離子。所述烷氧基苯基和烷氧基苄基通過用適當滷化物芳基化或烷基化引入並通過用硝酸鈰銨氧化來除去。最後，烷-1-烯基可以通過將醯胺與適當醛反應來引入並用酸除去。
下列實施例舉例說明且不限定本申請的範圍。各個例舉的化合物代表本發明的具體和獨立方面。在下列非限定實施例中，除非另外說明(i)蒸發是通過旋轉蒸發在真空下進行且後處理是在除去殘留固體例如通過過濾除去乾燥劑之後進行的；(ii)操作是在室溫下進行的，也就是在18-25℃的範圍內並在惰性氣體如氬氣或氮氣的氣氛下進行；(iii)收率僅是舉例說明且無需是最大收率；(iv)式(I)的終產物的結構是通過核(一般是質子)磁共振(NMR)和質譜技術來確定；質子磁共振化學位移值是在δ刻度上測量且峰的多重態顯示如下s，單峰；d，二重峰；t，三重峰；m，多重峰；br，寬封；q，四重峰；quin，五重峰；(v)中間體一般沒有完全定性，且純度是通過薄層層析(TLC)、高效液相色譜(HPLC)、紅外(IR)或NMR分析來評估的；(vi)Isolute矽膠筒是指預填充的矽膠筒(1g up-70g)，得自IST(International Sorbent Technology)，Hengoed，Mid Glamorgan，Wales UK，CF82 7RJ，使用Flashmaster 2系統洗脫；ArgonautTechnologies，Inc.，Hengoed，Mid Glamorgan，Wales UK CF82 8AU；(vii)Biotage筒是指預填充的矽膠筒(40g-400g)，用biotage泵和級份收集器系統洗脫；Biotage UK Ltd，Hertford，Herts，UK。
(viii)Celite是指硅藻土。
縮寫DCM 二氯甲烷；DEAD 偶氮二甲酸二乙酯；DIAD 偶氮二甲酸二異丙酯；DIPEA 二異丙基乙基胺；DMSO 二甲亞碸；DMF 二甲基甲醯胺；EDAC 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽；
LCMS 液相色譜/質譜；RT 室溫；和THF 四氫呋喃。
實施例16-{[(3-[(2，2-二氟-2-苯基乙基)氧基]-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸 向6-{[(3-[(2，2-二氟-2-苯基乙基)氧基]-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸甲酯(375mg，0.75mmol)在THF(5ml)內的溶液中加入蒸餾水(1.9ml)和氫氧化鈉溶液(1.9ml 1M，1.9mmol，～2.5當量)。加入甲醇(2滴)以幫助溶解，將該混合物在室溫攪拌2小時。將該反應混合物用鹽酸(1.9ml 1M)中和，在真空下除去一部分THF；再加入水，過濾出所得固體，再用蒸餾水洗滌。部分乾燥之後，把固體懸浮在乙腈(4ml)中，輕微攪拌約1小時；過濾出固體，再用乙腈洗滌，乾燥，獲得了6-{[(3-[(2，2-二氟-2-苯基乙基)氧基]-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸，為無色固體。
1H NMRδ(d6-DMSO)1.2(d，3H)，3.25(s，3H)，3.4-3.55(m，2H)，4.6-4.8(m，3H)，6.75(m，1H)，7.25(d，2H)，7.55(m，3H)，7.65(m，2H)，8.3(s，2H)，8.85(s，1H)，11.05(br s，1H)；m/z 487(M+H)+，485(M-H)-用於實施例1的製備的中間體是根據下列反應方案，如下所述製得的
6-{[(3-[(2，2-二氟-2-苯基乙基)氧基]-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸甲酯 將6-{[(3-羥基-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸甲酯(360mg，1mmol)在丙酮(7ml)和DMF(2ml)中的溶液依次用碳酸鉀(414mg，3mmol，3當量)和三氟甲磺酸2，2-二氟-2-苯基乙基酯(432mg，1.5mmol，1.5當量)處理。將所得懸浮液在室溫攪拌3天，再加入磺酸酯試劑(在連續幾天內2×250mg批量)。
然後將該反應混合物用乙酸乙酯稀釋，依次用水(兩次)和鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)並蒸發，獲得了粗產物(1g)，為棕色油狀物。將該油狀物通過色譜法純化(10g Isolute矽膠筒，用含有乙酸乙酯的己烷，15％增至20％洗脫)，獲得了6-{[(3-[(2，2-二氟-2-苯基乙基)氧基]-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸甲酯(390mg)，為無色樹膠狀物。
1H NMRδ(d6-DMSO)1.2(d，3H)，3.25(s，3H)，3.4-3.55(m，2H)，3.85(s，3H)，4.6-4.8(m，3H)，6.8(s，1H)，7.25(d，2H)，7.55(m，3H)，7.65(m，2H)，8.35(s，2H)，8.9(s，1H)，11.1(br s，1H)；m/z 499(M+H)+，501(M-H)-6-{[(3-羥基-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸甲酯 向6-[({3-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}-5-[(苯基甲基)氧基]苯基}羰基)氨基]吡啶-3-甲酸甲酯(0.038mol)在THF(85mL)內的攪拌著的溶液中加入甲醇(85mL)。在氬氣氛下加入披鈀碳催化劑(1.7g 10％w/w)，將所得懸浮液在氫氣氛下於室溫攪拌過夜。經由硅藻土過濾出催化劑，用THF洗滌，將濾液蒸發，獲得了淺棕色固體。用乙醚研製該固體，獲得了所需的化合物(產率為72％)。
1H NMRδ(d6-DMSO)1.25(d，3H)，3.3(s，3H)，3.45(m，2H)，3.85(s，3H)，4.65(m，1H)，6.55(m，1H)，6.95(m，1H)，7.1(m，1H)，8.3(m，2H)，8.9(m，1H)，11.0，(s，1H).
m/z 361(M+H)+，359(M-H)-6-[({3-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}-5[(苯基甲基)氧基]苯基}羰基)氨基]吡啶-3-甲酸甲酯
在氬氣氛下，向3-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}-5-[(苯基甲基)氧基]苯甲酸(75.9mmol)在含有DMF(1mL)的DCM(250mL)內的攪拌著的溶液中滴加草醯氯(151.7mmol)，將所得溶液攪拌4小時。然後將該溶液真空蒸發，再與DCM(3×100mL)共沸，將殘餘物在高度真空下乾燥，獲得了醯氯，其不用定性而直接使用。
在氬氣氛下，將溶解在THF(100mL)中的上述醯氯(約75.9mmol)加到6-氨基煙酸甲酯(91.1mmol)在THF(100mL)和吡啶(100mL)的混合物內的攪拌著的溶液中。將該反應混合物攪拌過夜，然後真空除去大部分溶劑。把殘餘物置於乙酸乙酯(250mL)中，將該懸浮液依次用1M檸檬酸(2部分，直至洗滌液呈酸性)和鹽水洗滌；將所得溶液乾燥(MgSO4)並蒸發，獲得了粗產物，為棕色樹膠狀物。通過色譜法純化殘餘物(400g Biotage矽膠筒，用含有乙酸乙酯，20％v/v的己烷進行洗脫)，獲得了所需的化合物(產率為50％)。
1H NMRδ(d6-DMSO)1.21(d，3H)，3.47(m，2H)，3.86(s，3H)，3.72(m，1H)，5.16(s，2H)，6.78(t，1H)，7.23(s，1H)，7.29(s，1H)，7.31-7.49(m，5H)，8.32(s，2H)，8.90(app t，1H)，11.15(s，1H).
m/z 451.5(M+H)+，449.5(M-H)-3-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}-5-[(苯基甲基)氧基]苯甲酸
將3-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}-5-[(苯基甲基)氧基]苯甲酸甲酯(77.4mmol)在THF(232mL)和甲醇(232mL)的混合物中的溶液用氫氧化鈉溶液(2N)(232mmol)處理，將該反應混合物在室溫攪拌4小時。將所得溶液用水(250mL)稀釋，真空除去大部分有機溶劑。將所得懸浮液用乙醚(3×200mL)洗滌，棄去洗滌液。將所得水溶液用鹽酸(2M)酸化至pH 4，用乙酸乙酯(2×200mL)萃取；將萃取液合併，用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)並蒸發，獲得了所需的化合物(產率為99％)。
1H NMRδ(d6-DMSO)1.20(d，3H)，3.46(m，2H)，4.64(m，1H)，5.15(s，2H)，6.83(app t，1H)，7.06(s，1H)，7.13(s，1H)，7.30-7.49(m，5H)，12.67(brs，1H).
3-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}-5-[(苯基甲基)氧基]苯甲酸甲酯 向3-羥基-5-[(苯基甲基)氧基]苯甲酸甲酯(77.4mmol)在THF內的溶液中加入聚合物負載的三苯基膦(51.7g 3mmol/g負載量，155mmol)和(R)-(-)-1-甲氧基-2-丙醇(102mmol)。將該攪拌著的溶液用氬氣覆蓋，在冰浴中冷卻；通過注射器用10分鐘滴加偶氮二甲酸二異丙酯(116mmol)。加入完成後，將該溶液攪拌20分鐘，然後過濾，將殘餘物用THF(500mL)洗滌；將濾液和洗滌液合併，蒸發，獲得了所需的化合物，其不用進一步純化直接用於下一步驟。
1H NMRδ(d6-DMSO)3.26(s，3H)，3.44(m，2H)，3.82(s，3H)，4.63(m，1H)，5.14(s，2H)，6.85(s，1H)，7.05(s，1H)，7.11(s，1H)，7.30-7.47(m，5H)；光譜還含有與少量二(1-甲基乙基)肼-1，2-二甲酸酯相一致的信號。
3-羥基-5-[(苯基甲基)氧基]苯甲酸甲酯 向3，5-二羥基苯甲酸甲酯(5.95mol)在DMF(6L)內的攪拌著的溶液中加入碳酸鉀(9mol)，將該懸浮液在室溫於氬氣下攪拌。用1小時向該懸浮液中緩慢地加入苄基溴(8.42mol)，發生輕微的放熱，將該反應混合物在室溫攪拌過夜。將其小心地用氯化銨溶液(5L)處理，然後用水(35L)處理。將該水懸浮液用DCM(1×3L和2×5L)萃取。將合併的萃取液用水(10L)洗滌，乾燥(MgSO4)過夜。將該溶液真空蒸發，把粗產物分三批進行色譜純化(快速柱，3×2kg矽膠，用含有10％DCM的己烷，至純DCM，至含有50％乙酸乙酯的DCM進行梯度洗脫)以除去原料；然後將所得粗的洗脫液以175g批量進行色譜純化(Amicon HPLC，5kg正相矽膠，用含有20％v/v乙酸乙酯的異己烷進行洗脫)，獲得了所需的化合物(產率為21％)。
1H NMRδ(d6-DMSO)3.8(s，3H)，5.1(s，2H)，6.65(m，1H)，7.0(m，1H)，7.05(m，1H)，7.3-7.5(m，5H)，9.85(brs，1H).
必需的三氟甲磺酸2，2-二氟-2-苯基乙基酯原料是依據下列實施方案如下所述製得的
三氟甲磺酸2，2-二氟-2-苯基乙基酯 向2，2-二氟-2-苯基乙醇(1.6g，10mmol)和二異丙基乙基胺(DIPEA，2.1ml，12mmol，1.2當量)在DCM(50ml)內的冷卻、攪拌著的溶液中加入三氟甲磺酸酐(2.0ml，12mmol，1.2當量)，將該溶液攪拌2小時。再加入DIPEA(0.5ml，3mmol)和三氟甲磺酸酐(0.5ml，3mmol)，將該反應混合物再攪拌2小時。將該反應混合物依次用水(2次)和鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)並蒸發，獲得了粗產物，為棕色油狀物；通過色譜法純化(20g Isolute矽膠筒，用含有5％v/v乙酸乙酯的己烷洗脫)，獲得了三氟甲磺酸2，2-二氟-2-苯基乙基酯，為淺棕色油狀物，其不用定性而立即使用。
必須的2，2-二氟-2-苯基乙醇是根據WO 98/20878中描述的方法，由α，α-二氟苯基乙酸(WJ Middleton等人，J.Org.Chem.(1980)，45，2883-2887)製得的。
使用類似於上述的方法，還製得了實施例1.1 除非另有說明，使用類似於製備用於實施例1的製備的中間體的方法，製得了用於實施例1.1的製備的合適的中間體6-[({3-[(2，2-二氟-2-苯基乙基)氧基]-5-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]吡啶-3-甲酸甲酯
1H NMRδ(d6-DMSO)1.25(d，6H)，3.85(s，3H)，4.6-4.8(m，3H)，6.75(m，1H)，7.2(m，1H)，7.25(m，1H)，7.45-7.55(m，3H)，7.65(m，2H)，8.35(m，2H)，8.9(s，1H)，11.1(br s，1H)；m/z 471(M+H)+6-[({3-羥基-5-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]吡啶-3-甲酸甲酯 1H NMRδ(d6-DMSO)1.25(d，6H)，3.85(s，3H)，4.65(m，1H)，6.55(m，1H)，6.95(m，1H)，7.1(m，1H)，8.3(s，2H)，8.9(s，1H)，9.7(s，1H)，11.0，(s，1H).
m/z 331(M+H)+，329(M-H)-6-[({3-苄基氧基-5-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]吡啶-3-甲酸甲酯
1H NMRδ(d6-DMSO)1.25(d，6H)，3.85(s，3H)，4.7(m，1H)，5.2(s，2H)，6.75(m，1H)，7.2(m，1H)，7.3-7.5(m，6H)，8.35(s，2H)，8.90(s，1H)，11.15(br s，1H)3-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[(苯基甲基)氧基]苯甲酸 1H NMRδ(d6-DMSO)1.25(d，6H)，4.65(m，1H)，5.15(s，2H)，6.8(m，1H)，7.05(m，1H)，7.15(m，1H)，7.30-7.5(m，5H)，12.95(s br，1H)3-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[(苯基甲基)氧基]苯甲酸甲酯 將3-異丙氧基-5-羥基-苯甲酸甲酯(25.0g，119mm0l)在DMF(250ml)中的溶液用碳酸鉀(41.1g，297mmol，2.5當量)和苄基溴(17ml，143mmol，1.2當量)處理，將所得懸浮液在60℃加熱5小時。真空除去溶劑，把殘餘物懸浮在水(200ml)中；將其用乙酸乙酯(2×250ml)萃取。將合併的萃取液依次用水(4×150ml)和鹽水(2×100ml)洗滌，乾燥(MgSO4)並蒸發，獲得了3-異丙氧基-5-苄基氧基苯甲酸甲酯(37.5g)，其為黃色油狀物，含有微量乙酸乙酯、苯甲醇和苄溴，1H NMRδ(d6-DMSO)1.2(d，6H)，3.85(s，3H)，4.65(m，1H)，5.15(s，2H)，6.85(m，1H)，7.05(m，1H)，7.15(m，1H)，7.3-7.5(m，5H).
3-[(1-甲基乙基)氧基]-5-羥基苯甲酸甲酯 1H NMRδ(d6-DMSO)1.2(d，6H)，3.8(s，3H)，4.55(m，1H)，6.55(m，1H)，6.9(m，1H)，6.95(m，1H).
實施例26-{[(3-[(2-亞環戊基乙基)氧基]-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸 實施例2是使用類似於製備實施例1的方法，由相應的酯6-{[(3-[(2-亞環戊基乙基)氧基]-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸甲酯製得的。
1H NMRδ(d6-DMSO)1.24(s，3H)，1.55-1.72(m，4H)，2.30(appq，4H)，3.30(s，3H被溶劑峰遮蔽)，3.49(qd，2H)，4.57(d，2H)，4.75(m，1H)，5.55(m，1H)，6.70(s，1H)，7.18(s，1H)，7.22(s，1H)，8.31(s，2H)，8.90(s，1H)，11.09(s，1H)，13.17(s br，1H)m/z 441.5(M+H)+，439.5(M-H)-用於實施例2的製備的中間體是依據下列反應方案如下所述製得的
6-{[(3-[(2-亞環戊基乙基)氧基]-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸甲酯 在氬氣下，向6-{[(3-羥基-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸甲酯(900mg，2.5mmol)、2-亞環戊基乙醇(382mg，3.4mmol，1.4當量)和聚合物負載的三苯基膦(約3mmol/g，1.5g，約3當量)在DCM(30ml)內的攪拌著的懸浮液中加入偶氮二甲酸二叔丁酯(DTAD，1.29g，5.6mmol，2.2當量)，將該反應混合物在室溫攪拌過夜。通過過濾除去樹脂，用乙酸乙酯和THF洗滌；合併濾液和洗滌液，並真空蒸發，研製殘餘物(乙醚/異己烷1∶1)，獲得了6-{[(3-[(2-亞環戊基乙基)氧基]-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸甲酯1H NMRδ(d6-DMSO)1.22(d，3H)，1.60(m，4H)，2.29(d，4H)，3.3(s，3H)，3.47(m，2H)，3.45(d，2H)，3.88(s，3H)，4.71(m，1H)，5.53(m，1H)，6.68(m，1H)，7.18(s，1H)，7.20(s，1H)，8.33(s，2H)，8.90(s，1H)，11.12(br s，1H)m/z 455.5(M+H)+6-{[(3-羥基-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸甲酯 該化合物是按照上述製備實施例1所用中間體的方法製備的。
2-亞環戊基乙醇 該化合物是按照國際專利申請WO 01/68603第63頁中描述的方法製得的。
使用類似於上述的方法，還製得了實施例2.1 使用類似於製備用於實施例2的製備的中間體的方法，製得了用於實施例2.1的製備的合適的中間體6-{[(3-[(2-亞環戊基乙基)氧基]-5-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]吡啶-3-甲酸甲酯
1H NMRδ(d6-DMSO)1.27(d，6H)，1.60(m，4H)，2.28(m，4H)，3.86(s，3H)，4.54(d，2H)，4.70(七重峰，1H)，5.52(m，1H)，6.63(t，1H)，7.15(m，2H)，8.32(s，2H)，8.88(s，1H)，11.10(br s，1H)m/z 425(M+H)+6-[({3-羥基-5-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]吡啶-3-甲酸甲酯 該化合物是按照上述製備實施例1.1所用中間體的方法製備的。
生物學試驗本發明化合物的生物作用可以在下列試驗中測試(1)GLK的酶活性可以通過培養GLK、ATP和葡萄糖來測定。產物生成的速率可以通過將該試驗與G-6-P脫氫酶、NADP/NADPH體系偶聯並測定340nm下光密度的增加來測定(Matschinsky等人1993)。化合物對GLK的激活可以使用該試驗，在或不在GLKRP存在下來評估，如Brocklehurst等人所述(Diabetes 2004，53，535-541)。
(2)GLK/GLKRP結合試驗用於測定GLK和GLKRP(RP＝調控蛋白)之間的結合作用。該方法可以用來鑑定通過調節GLK和GLKRP之間的相互作用來調節GLK的化合物。將GLKRP和GLK與抑制濃度的F-6-P、任選在試驗化合物存在的條件下培養，並且測定GLK和GLKRP之間的相互作用程度。置換F-6-P或以某些其他方式減弱GLK/GLKRP相互作用的化合物將通過GLK/GLKRP複合物生成量的減少來檢測。促進F-6-P結合或以某些其他方式提高GLK/GLKRP相互作用的化合物將通過GLK/GLKRP複合物生成量的增加來測定。此類結合試驗的具體實例描述如下。
GLK/GLKRP閃爍計數近接試驗如WO01/20327所述(其內容引入本文以供參考)，重組人GLK和GLKRP用來顯色(develop)″混合和測定″96孔SPA(閃爍計數近接試驗(scintillation proximity assay))。GLK(生物素化的)和GLKRP與鏈黴抗生物素蛋白連接的SPA珠(Amersham)在抑制濃度的放射性標記的[3H]F-6-P(Amersham Custom SynthesisTRQ8689)的存在下培養，得到信號。置換F-6-P或以某些其他方式打破GLK/GLKRP結合相互作用的化合物使該信號消失。
結合試驗在室溫下進行2小時。含有50mM Tris-HCl(pH＝7.5)、2mM ATP、5mM MgCl2、0.5mM DTT、重組生物素化的GLK(0.1mg)、重組GLKRP(0.1mg)、0.05mCi [3H]F-6-P(Amersham)的反應混合物給出100ml的終體積。隨後培養，通過加入0.1mg/孔鏈黴抗生物素蛋白結合的SPA珠(Amersham)並在Packard TopCount NXT上閃爍計數來測定GLK/GLKRP複合物形成的程度。
(3)F-6-P/GLKRP結合試驗用於測定GLKRP和F-6-P之間的相互作用。這種方法可以用來提供有關所述化合物的作用機理的信息。在GLK/GLKRP結合試驗中鑑定的化合物可以通過置換F-6-P或通過以某些其他方式改變GLK/GLKRP相互作用來調節GLK和GLKRP的相互作用。例如，蛋白-蛋白的相互作用一般被認為是通過多個結合位點間的相互作用而發生。所以可能是改變GLK和GLKRP間相互作用的化合物可通過結合一個或多個若干不同結合位點發揮作用。
F-6-P/GLKRP結合試驗鑑定出只有那些通過從GLKRP上其結合位點置換F-6-P來調節GLK和GLKRP間相互作用的化合物。
GLKRP與試驗化合物和抑制濃度的F-6-P、在GLK不存在的條件下培養，並且測定F-6-P和GLKRP之間相互作用的程度。置換F-6-P結合GLKRP的化合物可以通過GLKRP/F-6-P複合物生成量的改變來測定。該結合試驗的具體實例如下所述。
F-6-P/GLKRP閃爍計數近接試驗如WO01/20327所述(其內容引入本文以供參考)，重組人GLKRP用來顯色「混合和測定」96孔閃爍計數近接試驗。FLAG-標記的GLKRP與蛋白A塗層的SPA珠(Amersham)和抗FLAG抗體在抑制濃度的放射性標記的[3H]F-6-P的存在下培養。產生信號。置換F-6-P的化合物將使這個信號消失。本試驗和所述GLK/GLKRP結合試驗的聯用將使觀察者能夠鑑定出通過置換F-6-P來打破GLK/GLKRP結合作用的化合物。
結合試驗是在室溫下進行2小時。含有50mM Tris-HCl(pH＝7.5)、2mM ATP、5mM MgCl2、0.5mM DTT、重組FLAG標記的GLKRP(0.1mg)，抗Flag M2抗體(0.2mg)(IBI Kodak)、0.05mCi[3H]F-6-P(Amersham)的反應混合物給出100ml的終體積。培養後，通過加入0.1mg/孔蛋白A結合的SPA珠(Amersham)並在PackardTopCount NXT上閃爍計數來測定F-6-P/GLKRP複合物形成的程度。
重組GLK和GLKRP的製備mRNA的製備人肝臟全mRNA是通過在4M異硫氰酸胍、2.5mM檸檬酸鹽、0.5％Sarkosyl、100mMβ-巰基乙醇中polytron均化、隨後經5.7M CsCl、25mM乙酸鈉在135,000g(最大)離心、按照Sambrook J，Fritsch EF Maniatis T，1989所述來製備。
Poly A+mRNA直接利用FastTrackTMmRNA分離試劑盒(Invitrogen)來製備。
GLK和GLKRP cDNA序列的PCR擴增人GLK和GLKRP cDNA通過PCR、由人肝臟mRNA、利用Sambrook，Fritsch Maniatis，1989中所述的建立的技術來獲得。按照Tanizawa等1991和Bonthron，D.T.等1994(後者在Warner，J.P.1995修正)中所述的GLK和GLKRP cDNA序列設計PCR引物。
在Bluescript II載體中克隆使用pBluescript II(Short等人1998)將GLK和GLKRP cDNA克隆在大腸桿菌中，pBluescript II是類似於Yanisch-Perron C等(1985)所用的重組克隆載體體系，包含帶有含多個獨特限制位點的多連接體DNA片段的colEI-基複製子，側面具有噬菌體T3和T7啟動子序列；複製的絲狀噬菌體源和氨苄青黴素耐藥性標記基因。轉化大腸桿菌轉化一般通過電穿孔來進行。菌株DH5a或BL21(DE3)的400ml培養物在L-肉湯中生長至OD 600為0.5且通過在2,000g下離心來收穫。細胞用冰冷的去離子水洗滌2次，再次懸浮在1ml 10％甘油中並以等份試樣保存在-70℃。連接混合物用Millipore V seriesTM膜(0.0025mm)孔徑)脫鹽。40ml的細胞與1ml的連接混合物或質粒DNA在冰上在0.2cm電穿孔比色杯中培養10分鐘，並且隨後利用Gene PulserTM儀(BioRad)在0.5kVcm-1，250mF下加脈衝。在補充有10mg/ml四環素或100mg/ml氨苄青黴素的L-瓊脂上選擇轉化體。
表達GLK由載體pTB375NBSE在大腸桿菌BL21細胞中表達，產生重組蛋白，該重組蛋白含有與N-末端蛋氨酸緊鄰的6-His標記。或者，另一種適當的載體是pET21(+)DNA，Novagen，登記號697703。該6-His標記用於重組蛋白在填充有購自Qiagen(cat no 30250)的鎳-次氮基三乙酸瓊脂糖的柱上純化。
GLKRP由載體pFLAG CTC(IBI Kodak)在大腸桿菌BL21細胞中表達，生成重組蛋白，該重組蛋白含有C-末端FLAG標記。該蛋白首先通過DEAE瓊脂糖離子交換純化，隨後利用FLAG標記在購自Sigma-Aldrich(登記號A1205)的M2抗-FLAG免疫親和性柱上進行最後純化。
GLK的生物素化GLK通過與購自Sigma-Aldrich(登記號B2643)的生物素醯氨基己酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(生物素-NHS)反應來生物素化。簡單來說，靶向蛋白(GLK)的游離氨基與生物素-NHS以指定摩爾比反應形成穩定的醯胺鍵，得到含有共價結合的生物素的產物。通過透析除去產物中的過量未偶聯的生物素-NHS。具體而言，將7.5mg的GLK加到存在於4mL 25mM HEPES pH＝7.3，0.15M KCl，1mM二硫蘇糖醇，1mM EDTA，1mM MgCl2(緩衝液A)中的0.31mg生物素-NHS中。將該反應混合物相對於100mL的含有22mg生物素-NHS的緩衝液A透析。4小時後通過對緩衝液A的充分透析除去過量的生物素-NHS。
對大鼠口服給藥後測定血漿水平和血漿蛋白結合化合物對大鼠給藥以及取血樣將行星式研磨的化合物[15分鐘，500rpm，5 Zirconium Balls，在Puluerisette 7 Mill(Glen Creston Ltd，Stanmore，Middlesex，UK)中]懸浮在0.5％HPMC Tween中，以5ml/kg的速度和0.3-10mg/kg的劑量通過口服管飼法對高脂肪飲食(Research Diets，D12451，隨意進食14天)雌性Alderley Park Zucker或Alderley Park Wistar大鼠進行給藥。
如下所述通過意識清醒狀態下的取血樣或最終的取血樣來獲得血樣意識清醒狀態下的取血樣(用於化合物水平或血液化學)-靜脈內血樣是使用600μl Starstedt Multivette(EDTA)和22G針頭在所需時間點從尾巴抽取的。在取血樣後的15-30分鐘內，將血樣在冰上保持，並且以3000rpm離心10分鐘。抽吸出血漿，在-20℃貯存。
用於化合物水平或血液化學的最終的取血樣-在試驗結束時，通過暴露於CO2/O2而將動物安樂死。通過心臟穿刺來提取血樣。在取血樣後的15-30分鐘內，將血樣在冰上保持，並且以3000rpm離心10分鐘。抽吸出血漿，在-20℃貯存。
測定大鼠血漿中的化合物水平將25μl大鼠血漿加到96孔蛋白沉澱板(Varian inc.Palo Alto，California，USA)的孔中。向每個孔中加到含有1ug/ml作為內標物的(3-異丙氧基-5-苄基氧基-苯甲醯基)氨基吡啶-3-甲酸的500μl乙腈中以沉澱出血漿蛋白。然後將血漿/溶劑混合物在真空下從沉澱板中洗脫出來，收集洗脫液。使用離心蒸發器將洗脫液蒸發至幹，在200μl甲醇∶水∶甲酸(60∶40∶0.1)中重新構成。
然後使用高效液相色譜法分析重新構成的樣本，該色譜具有串連的質譜檢測(HPLC-MS-MS)″。該HPLC使用Phenomenex ProdigyC8，50×4.6，5μm.柱(Phenomenex，Macclesfield，UK)以1ml/分鐘的流速，使用10μl的注射體積以及下列梯度洗脫來進行流動相A 0.1％甲酸水溶液流動相B 0.1％甲酸在甲醇中的溶液流動相梯度0分鐘50％A0.5分鐘5％A2.5分鐘5％A2.6分鐘50％A3.0分鐘50％A。
質譜是用Applied Biosystems API3000質譜儀(AppliedBiosystems，Foster City，California，USA)進行的。在運轉樣本之前，將質譜儀進行關於試驗化合物結構的優化。
試驗樣本的濃度是由試驗樣本的峰高度與內標物的峰高度的比例確定的。從關於濃度比例的標準曲線計算試驗樣本的濃度，所述標準曲線是用如上所述進行處理的加到大鼠血漿樣本中的已知濃度的試驗樣本，使用(3-異丙氧基-5-苄基氧基-苯甲醯基)氨基吡啶-3-甲酸作為內標物而製得的。
測定化合物與血漿蛋白的結合化合物與血漿蛋白的結合是用平衡透析技術(W.Lindner等人，J.Chromatography，1996，677，1-28)測定的。在37℃，使用血漿和等滲磷酸鹽緩衝液pH 7.4(在每個透析室中分別為1ml)將化合物以20μM的濃度透析18小時。使用Spectrum20-室平衡透析儀以及Teflon半微透析室和Spectra/Por2膜盤，其分子量截止為12-14000道爾頓，47mm(由PerBio Science UK Ltd，Tattenhall，Cheshire提供)。透析之後，取出血漿和緩衝液樣本，使用HPLCUV/MS(具有UV和質譜檢測的高效液相色譜)進行分析，獲得了在血漿中的％游離水平。
本發明化合物激活葡糖激酶，並且EC50小於約200nM，在血漿中的百分比游離濃度為約0.05％-約1％，對於1mg化合物/kg大鼠體重的標準化劑量，峰值血液水平(包括結合和游離的)為約0.5μM-約10μM。
例如，實施例2的化合物具有下列值
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權利要求
1.式(I)化合物或其鹽、前藥或溶劑化物 其中R1選自氫和C1-4烷基；R2選自R4-C(R5aR5b)-、R4＝C(R6)-和R7aC(R7b)＝C(R6)-；R3-X-選自甲基、甲氧基甲基和 R4選自C1-4烷基、苯基、C3-6環烷基和雜芳基，其中R4任選被1或2個獨立地選自R8的取代基取代；R5a和R5b獨立地選自氫、氟和C1-4烷基；R6選自氫和C1-4烷基；R7a和R7b獨立地選自C1-4烷基，其中R7a和R7b任選被1或2個獨立地選自R8的取代基取代；R8獨立地選自C1-3烷基、C1-3烷氧基、氟和氯；條件是(i)R5a和R5b當中至少有一個是氟；和(ii)當R2是R4＝C(R6)-時，R4是C3-6環烷基。
2.權利要求1的式(I)化合物，其中所述化合物是式(Ia)化合物 其中R1和R2如權利要求1中所定義；或其鹽、溶劑化物或前藥。
3.權利要求1的式(I)化合物，其中所述化合物是式(Ic)化合物 其中R1和R2如權利要求1中所定義；或其鹽、溶劑化物或前藥。
4.權利要求1-3任一項的化合物或其鹽、溶劑化物或前藥，其中R2是R4-C(R5aR5b)-。
5.權利要求1-3任一項的化合物或其鹽、溶劑化物或前藥，其中R2是R4＝C(R6)-。
6.權利要求1的式(I)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥，其中R1是氫；R2選自R4-C(R5aR5b)-和R4＝C(R6)-；R3-X-選自甲基和甲氧基甲基；R4選自苯基和C3-6環烷基，其中R4任選被1或2個獨立地選自R7的取代基取代；R5a和R5b獨立地選自氫和氟；R6是氫；R7獨立地選自C1-3烷基、C1-3烷氧基、氟和氯；條件是(iii)R5a和R5b當中至少有一個是氟；(iv)當R2是R4＝C(R6)-時，R4是C3-6環烷基。
7.權利要求6的式(I)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥，其中R7是未取代的。
8.權利要求6的式(I)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥，其中R5a和R5b都是氟。
9.權利要求1的式(I)化合物，其中所述化合物選自6-{[(3-[(2，2-二氟-2-苯基乙基)氧基]-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸；6-[({3-[(2，2-二氟-2-苯基乙基)氧基]-5-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]吡啶-3-甲酸；6-{[(3-[(2-亞環戊基乙基)氧基]-5-{[(1S)-1-甲基-2-(甲基氧基)乙基]氧基}苯基)羰基]氨基}吡啶-3-甲酸；和6-{[(3-[(2-亞環戊基乙基)氧基]-5-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}羰基)氨基]吡啶-3-甲酸；或其鹽、溶劑化物或前藥。
10.藥物組合物，所述組合物包含權利要求1-9任一項的式(I)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥與可藥用稀釋劑或載體。
11.用作藥物的權利要求1-9任一項的式(I)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥。
12.用於製備用來治療通過GLK介導的疾病，特別是2型糖尿病的藥物的權利要求1-9任一項的式(I)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥。
13.治療GLK介導的疾病，尤其是糖尿病的方法，包括給需要這樣的治療的哺乳動物施用有效量的權利要求1-9任一項的式(I)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥。
14.權利要求1-9任一項的式(I)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥在製備用於糖尿病和肥胖的聯合治療或預防的藥物中的應用。
15.權利要求1-9任一項的式(I)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥在製備用於治療或預防肥胖的藥物中的應用。
16.用於肥胖和糖尿病的聯合治療的方法，包括給需要這樣的治療的哺乳動物施用有效量的權利要求1-9任一項的式(I)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥。
17.用於治療肥胖的方法，包括給需要這樣的治療的哺乳動物施用有效量的權利要求1-9任一項的式(I)化合物或其鹽、溶劑化物或前藥。
18.製備權利要求1的式(I)化合物或其鹽、前藥或溶劑化物的方法，所述方法包括(a)將式(IIIa)的酸或其活化衍生物與式(IIIb)化合物反應 其中P1是氫或保護基；或者(b)將式(IIIc)化合物脫保護， 其中P2是保護基；或者(c)將式(IIId)化合物與式(IIIe)化合物反應， 其中X1是離去基團，且X2是羥基，或者X1是羥基，且X2是離去基團，並且其中P1是氫或保護基；或者(d)將式(IIIf)化合物與式(IIIg)化合物反應 其中X3是離去基團，並且X4是羥基，或者X3是羥基，並且X4是離去基團，並且其中P1是氫或保護基；或者(e)將式(IIIh)化合物與式(IIIi)化合物反應， 其中X5是離去基團，並且其中P1是氫或保護基；並且之後如果需要的話i)將一種式(I)化合物轉化成另一種式(I)化合物；ii)除去任何保護基；iii)形成其鹽、前藥或溶劑化物。
全文摘要
本發明涉及式(I)化合物或其鹽、前藥或溶劑化物其中R
文檔編號A61P3/04GK1890219SQ200480036236
公開日2007年1月3日 申請日期2004年12月2日 優先權日2003年12月5日
發明者P·W·R·考爾克特, C·約翰斯通, D·麥克雷徹爾, K·G·派克 申請人:阿斯利康(瑞典)有限公司