荻的新用途及一種抗腫瘤藥物的製作方法

2023-12-11 22:38:17 1

本發明涉及中藥
技術領域：
，具體涉及荻的新用途及一種抗腫瘤藥物，尤其涉及荻在製備抗腫瘤藥物中的用途。
背景技術：
：腫瘤是機體在各種致瘤因素作用下，局部組織的細胞在基因水平上失去對其生長的調控，導致單克隆性異常增生而形成的新生物。隨著我國城市人口比例的逐年增加，鄉鎮工業生產的迅速發展，環境汙染日益嚴重，吸菸、飲食等方面不良生活方式與行為的普遍存在，腫瘤的發病率日益增高，已經成為嚴重危害人類生命和健康的常見病。目前，國際上臨床常見的抗腫瘤藥物約80餘種，大致可分為以下6類：細胞毒類藥物，如卡鉑、吉西他濱等；激素類藥物，如戈舍瑞林、阿那曲唑等；生物反應調節劑，包括白細胞介素-2、生物肽類等；單克隆抗體藥物，如：利妥昔單抗注射液、注射用曲妥珠單抗、貝伐珠單抗等；其他類藥物；輔助藥，如升血藥、止嘔藥、鎮痛藥等。但是西藥類抗腫瘤藥物毒副作用大，對於造血系統、消化系統、免疫系統的損害難以避免，且易產生耐藥性。而我國運用中藥防禦腫瘤具有悠久的歷史，隨著現代技術的發展，對大量中藥複方、中藥的抗腫瘤作用，進行了研究和評價，發現和鑑定了一些具有成藥性和開發前景的中藥物質，例如黃連、青蒿、鴉膽子、靈芝、龍葵、蒲公英、鳳尾草、冬凌草、黃芪、人參、凌霄花等。在臨床上，鴉膽子油被廣泛應用於食管癌、胃癌、肝癌等多種腫瘤的治療，國家二類新藥欖香烯注射液用於輔助治療腫瘤，一些中藥提取物靈芝多糖、黃芪多糖等，用於改善化療毒副作用。然而抗腫瘤中藥研究開發的主要瓶頸在於藥物有效成分、活性部位不清，作用機制不明或研究不夠透徹。技術實現要素：有鑑於此，本發明要解決的技術問題在於提供一種荻的抗腫瘤新用途，開發一種具有較高療效的中藥類抗腫瘤藥物。本發明提供了荻在製備具有抗腫瘤作用的藥物中的應用。其中，所述抗腫瘤作用包括抑制腫瘤細胞增殖、調控腫瘤相關基因表達、輔助腫瘤治療和改善化療副作用中的任意一種或多種。本發明對所述腫瘤的種類並無特殊限定，受nfkb2、egfr或wnt7b基因過表達影響的腫瘤皆可，如乳腺癌、腎癌、肝癌、胃癌、食管癌、結直腸癌、肺癌、前列腺癌和胰腺癌中的任意一種或多種，在本發明的某些具體實施例中，所述腫瘤為乳腺癌。荻為禾本科，荻屬多年生草本水陸兩生植物。荻可作為飼料，荻草根莖含澱粉，含糖量高，嫩芽可以直接食用、做菜或罐頭，類似小筍。還可作為生物質能源。目前，荻在抗腫瘤方面的作用未見報導。本發明中，所述荻包括荻及其同屬植物，如剎柴，君山荻，茅荻，細荻，平節荻，南荻，突節荻，一丈青，胭脂紅，垂葉青和鐵稈柴等。本發明利用實時定量基因擴增螢光檢測技術發現荻可以上調nfkb2，下調egfr和wnt7b基因的表達，並通過cck8實驗，驗證了荻具有抗腫瘤活性。本發明具體的，所述荻為荻的提取物。所述荻的提取物為荻全草經醇提得到的提取物。在本發明的一些具體實施例中，所述荻的提取方法如下：將荻全草在乙醇中進行醇提，所述醇提的溫度優選為60～95℃，醇提的時間優選為1～5h。醇提後，濃縮得到提取物浸膏，即為荻的提取物。本發明還提供了一種抗腫瘤藥物，包括荻的提取物。在本發明的一些實施例中，所述藥物還包括：藥物上可接受的載體。本領域技術人員可將所述荻提取物直接或間接加入製備不同劑型時所需的藥學上可接受的各種常用輔料，如填充劑、崩解劑、潤滑劑、粘合劑等，以常規藥物製劑方法，製成任意一種臨床可接受的口服給藥劑型或注射給藥劑型。如片劑、膠囊劑、顆粒劑、溶液劑、散劑、丸劑、注射劑等。其中，本發明對所述輔料並無特殊限定，可以為本領域技術人員熟知的適用輔料，填充劑如澱粉，乳糖，蔗糖，葡萄糖，甘露醇和矽酸；崩解劑如瓊脂，碳酸鈣，土豆澱粉或木薯澱粉，海藻酸，某些矽酸鹽和碳酸鈉，低取代羥丙基纖維素；潤滑劑如滑石粉，硬脂酸鈣，硬脂酸鎂，固體聚乙二醇，月桂硫酸鈉；粘合劑如羧甲基纖維素，藻酸鹽，明膠，聚乙烯吡咯酮，蔗糖和阿拉伯膠。在本發明的另外一些實施例中，所述藥物還包括：其他具有抗腫瘤作用的化合物和/或中藥。本發明所述抗腫瘤藥物可單獨給藥或與其他藥物聯合給藥。即和其他具有抗腫瘤作用的化合物和/或中藥組合製成藥物組合物。所述其他具有抗腫瘤作用的化合物和/或中藥可以為本領域技術人員已知的任意一種具有抗腫瘤作用的化合物、西藥和/或中藥。本發明中，所述藥物為任意一種臨床可接受的口服給藥劑型或注射給藥劑型。在本發明的一些實施例中，所述藥物為片劑、膠囊劑、顆粒劑、溶液劑、散劑、丸劑或注射劑。與現有技術相比，本發明提供了荻在製備具有抗腫瘤作用的藥物中的新應用。本發明採用qpcr實驗，從基因水平闡明了其作用機制，試驗表明，荻的提取物可以顯著上調nfkb2基因，顯著性下調egfr和wnt7b基因的表達，通過細胞增殖檢測實驗，發現提取物濃度與腫瘤細胞增殖具有濃度依賴性，在50～400μg/ml範圍均能抑制腫瘤細胞活性。表明荻具有抗腫瘤活性。本發明開發了一種療效高、作用機制明確，無毒副作用的中藥類抗腫瘤藥物，具有優異的臨床應用前景。附圖說明圖1為荻的qpcr結果圖；圖2為荻對mda-mb-231細胞增殖影響的曲線圖；圖3為荻對mcf7細胞增殖影響的曲線圖。具體實施方式為了進一步說明本發明，下面結合實施例對本發明提供的荻的新用途及抗腫瘤藥物進行詳細描述。實施例1利用實時定量基因擴增螢光檢測系統，即qpcr方法驗證荻提取物對nfkb2、egfr、wnt7b基因的表達影響，具體實驗過程為：1、稱取10g荻全草，加150ml90％乙醇加熱到85℃，提取3h，濃縮乾燥，得到荻提取物浸膏。將荻提取物溶於dmso中，處理細胞24h；2、利用試劑盒提取rna並反轉為cdna；3、rt-qpcr反應，程序：95℃，3min；(95℃，3s；60℃，30s)40個循環。其中，引物序列為：nfkb2：上遊引物agaggcttccgatttcgatatgg下遊引物ggataggtctttcggcccttcegfr：上遊引物aggcacgagtaacaagctcac下遊引物atgaggacataaccagccaccwnt7b：上遊引物gaagcagggctactacaacca下遊引物cggcctcattgttatgcaggt4、數據處理：以空白對照組的基因表達量為1，藥物處理組基因表達量大於1為基因表達上調，小於1為下調。qpcr3次實驗結果見表1和圖1。表1荻(全草)的qpcr結果荻(全草)nfkb2egfrwint7b均值(n＝3)1.360.590.79sd0.080.010.07ttest0.03220.00030.0025qpcr結果顯示荻(全草)提取物可以顯著上調nfkb2基因，顯著性下調egfr和wnt7b基因。p<0.05認為具有統計學意義。實施例2利用cck8實驗，檢測荻(全草)提取物對細胞增殖的影響，具體實驗過程為：1、利用荻(全草)提取物，分別處理乳腺癌mda-mb-231細胞、乳腺癌mcf7細胞24小時；2、利用cck8試劑盒測定細胞活性；3、計算細胞存活率、抑制率、ic30、ic50。cck8結果見表2、表3和圖2、圖3。表2荻(全草)對mda-mb-231細胞增殖結果表3荻(全草)對mcf7細胞增殖結果cck8結果顯示，荻(全草)提取物濃度在50～400μg/ml範圍均能抑制腫瘤細胞活性，根據細胞抑制率結果，利用spss軟體計算，荻(全草)對mda-mb-231細胞的ic30值為160μg/ml，ic50值約為250μg/ml；對mcf7細胞的ic30值為98μg/ml，ic50值約為170μg/ml。由上述實施例可知，本發明發現了藥物荻(全草)的抗腫瘤新功效，提取其有效成分，並從基因水平闡明其作用機制，開發出一種具有抗腫瘤功能的新抗腫瘤類藥物，可應用於腫瘤的治療或輔助治療。以上實施例的說明只是用於幫助理解本發明的方法及其核心思想。應當指出，對於本
技術領域：
的普通技術人員來說，在不脫離本發明原理的前提下，還可以對本發明進行若干改進和修飾，這些改進和修飾也落入本發明權利要求的保護範圍內。當前第1頁12