可見分光光度法的測量原理（分光光度分析的定量方法）

2023-07-31 16:54:03

定性定量分析是最常用的兩種實驗方法，所謂定性是指測定某種物質確切的組成有什麼或者某種物質是什麼，不用測定物質的數值量。所謂定量就是測定某種物質確切的數值量。在進行定量分析時，一般都會用到分光光度計，今天就以測量自來水中的鐵含量為例為大家簡單介紹分光光度分析的定量方法。

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1、樣品與標準溶液

為了測量某種物質的濃度，需將濃度未知的待測樣品溶液（「樣品」）與濃度已知的樣品溶液（「標準溶液」）進行比較求出濃度。為了分析自來水中的鐵，自來水被用作樣品，鐵濃度已知的樣品溶液被稱為標準溶液。製備含鐵濃度不同的溶液作為標準溶液。只有樣品和標準溶液在相同條件下製備和測量的情況下才能得出準確的結果。例如，如果樣品是自來水，則應當用一種水溶液，而不是酒精溶液作為標準溶液；如果樣品中加入了一種酸，標準溶液中也應加入這種酸。

樣品與標準溶液

能夠溶解某種物質的液體，例如水和酒精等，被稱為「溶劑」，而溶解於某種液體中的物質則稱為「溶質」。如果溶質和溶劑在分光光度計相同波長下發生吸收，則無法獲得準確的結果。通常用水作為溶劑，因為水在可見光-紫外線波段不會吸收。有機溶劑也很常用，不過應慎重，因為它們在可見光-紫外線波段會吸收。在紫外線波段用有機計溶劑。水作為控制劑，其吸光度在1以下。

樣品與標準溶液

2、分光光度計顯色試劑

您能看到自來水中含有的鐵嗎？分光光度計比色分析是一種顏色分析方法。如果看不到顏色（在可見光波段的情況下），就無法進行化驗。那麼我們該如何做呢？使用分光光度計魔術藥劑顯示鐵的顏色。能使待測物質顯色的魔術藥劑被稱為「顯色劑」或「著色劑」。自來水中鐵的含量越高，顏色就越深（高吸收率）。自來水中鐵的含量越低，顏色就變得越淺（低吸收率）。由於每種組分都有不同的顯色劑，可根據需要分析的組分來選用。

分光光度計顯色試劑

3、分光光度計校準曲線

通過分光光度計測量標準溶液的吸光度來生成校準曲線。橫軸表示濃度，縱軸表示吸光度。通過按鐵濃度次序（由低濃度開始）測量標準溶液，並對濃度和吸光度做圖，我們得到下圖中的圖形。在標準溶液已經測量，且校準曲線已經生成後，測量樣品。通過測量可求出吸光度，儘管濃度是未知的。見校準曲線。通過縱軸的吸光度可求出濃度。在分光光度計定量分析中，樣品的濃度是通過這種方法測定的。